СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ ГИПОКСИИ У БЕРЕМЕННЫХ В ТРЕТЬЕМ ТРИМЕСТРЕ ГЕСТАЦИИ, ПЕРЕНЕСШИХ ВСПЫШКУ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ Российский патент 2011 года по МПК G01N33/72 G01N33/52 

Цель исследования - изучить характер нарушения оксигениции гемоглобина в эритроцитах периферической крови беременных после вспышки герпес-вирусной инфекции на третьем триместре гестации, приводящей к избыточному включению в гемоглобин 2,3ДФГ, снижающему формирование HbO₂.

Установлено, что сродство Hb к О₂ будет меняться, если лиганд по-разному взаимодействует с 2 формами гемоглобина. Лиганд, который уменьшает сродство Hb к О₂, должен присоединяться к деокси-Hb (Wyman I., 1948; Федоров Н.А., 1976). Специфический эффект на сродство Hb к О₂ связан, как показали исследования, с присоединением к Hb в диоксиформе 2·3 ДФГ. Константы равновесия для присоединения первых 3 молекул О₂ уменьшаются в присутствии 2,3ДФГ (Rorth M., 1972; Rorth M., Astrup P., 1972).

Считают, что 2,3ДФГ увеличивает константу скорости отщепления O₂ и уменьшает константу скорости его присоединения к Hb (Baner Ch., 1969).

Неспецифический эффект 2,3ДФГ на сродство Hb к О₂ в случае увеличения 2,3ДФГ выше физиологического уровня (5 мл моль/л) в интактных эритроцитах приводит к уменьшению присоединения Hb к О₂ и увеличивает константу скорости отщепления О₂, связанного с Hb.

На эти процессы могут повлиять многие факторы: уменьшение внутриэритроцитарного рН, накопление большого количества электроотрицательных ионов или продуктов метаболизма, изменяющих электростатическое равновесие в гемоглобиновой системе (Rorth M., Astrup Р., 1972; Perutz M., Mazzarella L., 1963).

Таким образом, если коэффициент включения 2,3ДФГ будет увеличен при вспышке герпес-вирусной инфекции, когда вирусный антиген интенсивно увеличивается, то гемоглобин не будет принимать кислород и концентрация HbO₂ в эритроцитах начнет понижаться.

В качестве прототипа использованы данные, полученные И.А.Андриевской (2008), в которых отмечается, что при нарастании титра антител к вирусу герпеса во время гестации снижается содержание в крови HbO₂. Однако автор не указывает причину, приводящую к снижению процентного содержания HbO₂ при нарастании в крови беременной титра антител к вирусу герпеса.

В настоящем исследовании приводятся данные, указывающие, что причиной гипоксии является увеличение в крови 2,3ДФГ, который блокирует гемоглобин для связи с кислородом.

Изучая литературу, авторы не могли найти сведений, показывающих, что присутствие антигена вируса герпеса в крови беременных воздействует на эритроциты периферической крови, в результате чего происходит избыточное присоединение 2,3ДФГ к молекулам Hb, что приводит к снижению в крови концентрации HbO₂.

Заявленный способ имеет следующие приемы.

1. Исследовали периферическую кровь беременных, перенесших в третьем триместре вспышку герпес-вирусной инфекции, и 20 беременных, не болевших в течение всего периода гестации (контроль). Исследования проводились на базе стационара акушерского отделения клиники Дальневосточного научного центра физиологии и патологии дыхания СО РАМН. Все исследования были проведены с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной ассоциации "Этические принципы проведения научных медицинских исследований с учетом человека" с поправками 2000 г. и "Правилами клинической практики в Российской Федерации", утвержденными Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. №266.

2. Содержание Hb₂ в эритроцитах периферической крови беременных определяли на спектрофотометре "Stat-Fax-2100x" (USA) по М.С.Кушаковскому (1968).

3. Титр антитител к вирусу герпеса определяли иммуноферментным методом на спектрофотометре "Stat-Fax-2100х" (USA).

4. Содержание 2,3ДФГ (2,3 дифосфоглицерат-фосфатазы) в эритроцитах периферической крови беременных определяли на спектрофотометре "Stat-Fax-1900+" по методу И.Л.Виноградовой, С.Ю.Багрянцевой и Г.В.Дервиз (1980).

5. Анализ содержания 2,3ДФГ и HbO₂ при титре антител к вирусу герпеса в крови беременных обрабатывался статистическим методом дискриминантного анализа.

Исследования показали, что при вспышке герпес-вирусной инфекции у беременных в третьем триместре в эритроцитах периферической крови увеличивается концентрация 2,3ДФГ. При титре антител к вирусу герпеса 1:12800 концентрация 2,3ДФГ увеличивается до 6,81±0,15 ммоль/л (контроль - 4,9±0,02 ммоль/л). Одновременно в эритроцитах периферической крови у этих же беременных снижалось содержание HbO₂ до 95,87±2,6% (контроль - 99,5±2,0%).

Дискриминантный анализ показывает:

Д=+17,072·2,3ДФГ+(-0,041·HbO₂)

Д=+17,072·6,81+(-0,041·95,87)

Д=+116,30+(-3,93)=112,37

В пределах дискриминантной функции 112,37 и граничного значения 97,09 появляется угроза формирования гипоксии у беременных.

Пример 1

Беременная К. поступила на 30 неделе беременности с обострением герпес-вирусной инфекции с титром антител к возбудителю 1:12800.

В периферической крови содержалось 6,5 ммоль/л 2,3ДФГ. Количество оксигемоглобина составляло - 95,1%.

Составляя дискриминантное уравнение, получаем:

Д=17,072·6,5+(-0,041·95,1)=107,07

Дискриминантная функция выше граничного значения:

Д(107,07)>97,09 (граничное значение)

У беременной прогнозируется развитие гипоксии.

Пример 2

Беременная А. поступила на 33 неделе беременности. В течение всего периода гестации признаков герпес-вирусной инфекции не отмечалось.

В периферической крови содержалось 99,6% HbO₂ и 5,2 мкмоль/л 2,3ДФГ.

Составляя дискриминантное уравнение с этим показателем, находим, что дискриминантная функция при таких показателях составляет:

Д=17,072·5,2+(-0,041·99,6)=84,69

Д=88,77+(-4,08)=84,69

Дискриминантная функция (84,69) у беременной А., не болевшей герпесом, меньше граничного значения (97,09).

Следовательно, угрозы развития гипоксии у нее не прогнозируется.

Литература

1. Андриевская И.А. Дыхательная функция крови у беременных с герпес-вирусной инфекцией / Бюллетень СО РАМН. - 2008. - №3. - с.56-65.

2. Виноградова И.А., Багрянцева С.Ю., Девиз Г.В. Метод одновременного определения 2,3ДФГ И АТФ в эритроцитах / Лабораторное дело. - 1980. - №7. - с.424-426.

3. Кушаковский М.С. Клинические формы повреждения гемоглобина // Лен. Отделение: Медицина, 1968. - 324 с.

4. Федоров Н.А. Нормальное кроветворение и его регуляция. - М.: Медицина, 1976. - 543 с.

5. Baner Ch. Antogonistic influence of CO₂ and 2,3-α-diphosphoglicerate on the Bohr effect of human haemoglobin // «Life Shi.», 1969, v.8, p.1041.

6. Perutz М., Mazzerella L. Preliminary X-ray analysis of haemoglobin H. - «Nature», 1963, v.199, p.639.

7. Rorth М. Haemoglobin inteactions and red cell metabolism // «Ser. Haematol», 1972, v. p.1.

8. Rorth М., Astrup P. Oxygen affinity of haemoglobin and red cell acidbase status // Copenhagen, 1972, 371 с.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторным методам диагностики. Для прогнозирования развития гипоксии у беременной в третьем триместре гестации определяют содержание оксигемоглобина (НbO₂) и содержание 2,3 дифосфоглицерат-фофсфатазы (2,3ДФГ) в периферической крови. Вычисляют дискриминантную функцию (Д) по формуле Д=+17,072·2,3ДФГ+(-0,041·HbO₂), 2,3ДФГ - концентрация, в моль/л, НbO₂ - количество, в %. При значении Д 97,09-112,37 прогнозируют угрозу гипоксии у беременной, перенесшей обострение герпес-вирусной инфекции. Использование способа позволяет своевременно выявить группу риска и точно спрогнозировать развитие гипоксии.

Способ прогнозирования развития гипоксии у беременной в третьем триместре гестации, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции, включающий определение содержания оксигемоглобина в периферической крови, отличающийся тем, что дополнительно определяют содержание 2,3 ДФГ (2,3 дифосфоглицерат-фосфатазы), вычисляют дискриминантную функцию (Д) по формуле Д=+17,072·2,3ДФГ+(-0,041·НbО₂), где 2,3ДФГ - концентрация, моль/л, НbО₂ - количество, %, и при значении Д 97,09-112,37 прогнозируют угрозу гипоксии у беременной, перенесшей обострение герпес-вирусной инфекции.