СПОСОБ РАЗДЕЛЬНОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВИТАМИНОВ В И В В ВОДНОМ РАСТВОРЕ Российский патент 2011 года по МПК C07H23/00 G01N21/78 

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к органическому анализу, и может быть использовано при разработке процессов выделения, разделения и определения витаминов в водном растворе.

Техническая задача изобретения заключается в разработке экспрессного способа экстракционного разделения смеси витамина B₁ (тиамин гидрохлорид) и витамина B₁₂ (цианокобаламин), УФ-спектрофотометрическом анализе водного концентрата и вычислении содержания витаминов в смеси методом Фирордта.

Для решения технической задачи изобретения разработан способ раздельного определения витаминов В₁ и B₁₂, характеризующийся тем, что готовят водно-солевую смесь витаминов B₁ и B₁₂, для чего анализируемые растворы витаминов фармакопейной чистоты помещают в мерную колбу, при перемешивании доводят до метки насыщенным раствором высаливателя, в качестве которого применяют сульфат аммония, витамины экстрагируют изопропиловым спиртом квалификации х.ч., для этого к полученной водно-солевой смеси витаминов добавляют изопропиловый спирт при соотношении объемов водно-солевой смеси витаминов и изопропилового спирта 20:1, экстрагируют в течение 5-7 мин, после расслаивания системы водную фазу отделяют от органической, на УФ-спектрофотометре измеряют оптическую плотность водно-солевой смеси при длинах волн 246 нм и 360 нм (толщина светопоглощающего слоя 1 см), молярную концентрацию витаминов B₁ (C_B1) и B₁₂ (C_B12) вычисляют по уравнениям:

C_B1=6,17·10^-5·A₂₄₆-4,21·10^-5·A₃₆₀

C_B12=3,36·10^-5·A₃₆₀,

где А₂₄₆ и А₃₆₀ - оптические плотности раствора смеси витаминов B₁ и В₁₂ при 246 нм и 360 нм соответственно.

Технический результат заключается в экстракционном разделении смеси витаминов B₁ и B₁₂, УФ-спектрофотометрическом анализе водного концентрата, вычислении концентраций витаминов в смеси методом Фирордта, практически полном однократном извлечении витамина B₁₂ из водного раствора без применения больших объемов вреднодействующих органических растворителей.

Предлагаемый способ раздельного определения витаминов B₁ и В₁₂ в водном растворе осуществляют по следующей методике.

Готовят водно-солевую смесь витаминов B₁ и B₁₂, для чего анализируемые растворы витаминов фармакопейной чистоты помещают в мерную колбу, при перемешивании доводят до метки насыщенным раствором высаливателя, в качестве которого применяют сульфат аммония. Витамины экстрагируют изопропиловым спиртом квалификации х.ч., для этого к полученной водно-солевой смеси витаминов добавляют изопропиловый спирт при соотношении объемов водно-солевой смеси витаминов и изопропилового спирта 20:1, экстрагируют в течение 5-7 мин. После расслаивания системы водную фазу отделяют от органической, на УФ-спектрофотометре измеряют оптическую плотность водно-солевой смеси при длинах волн 246 нм и 360 нм (толщина светопоглощающего слоя 1 см), молярную концентрацию витаминов B₁ (C_B1) и B₁₂ (C_B12) вычисляют по уравнениям:

C_B1=6,17·10^-5·A₂₄₆-4,21·10^-5·A₃₆₀

C_B12=3,36·10^-5·A₃₆₀,

где A₂₄₆ и А₃₆₀ - оптические плотности раствора смеси витаминов B₁ и B₁₂ при λ=246 нм и λ=360 нм соответственно.

Коэффициенты распределения (D_B1 и _DB12), степень извлечения (R_B1 и R_B12) и фактор разделения (β) витаминов вычисляют по следующим уравнениям:

где С_{В1, В12(о)} и С_{В1, В12(в)} - концентрации витамина в органической и водной фазах, мг/см³; f - соотношение объемов равновесных водной и органической фаз.

Осуществление способа иллюстрируется следующим примером.

Готовят водно-солевую смесь витаминов B₁ и B₁₂ фармакопейной чистоты, для чего 4 см³ тиамин гидрохлорида и 4 см³ цианокобаламина с концентрациями 0,5 мг/см³ помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, при перемешивании доводят до метки насыщенным раствором высаливателя, в качестве которого применяют сульфат аммония. К 20 см³ полученной водно-солевой смеси витаминов добавляют 1 см³ изопропилового спирта и экстрагируют в течение 7 мин. После расслаивания системы (2 мин) водную фазу отделяют от органической, анализируют методом УФ-спектрофотометрии и рассчитывают концентрации витаминов в водном концентрате методом Фирордта. На спектрофотометре Shimadzu UV mini - 1240 в кварцевой кювете с толщиной светопоглащающего слоя 1 см измеряют оптическую плотность водно-солевой смеси при длинах волн 246 нм и 360 нм, молярную концентрацию витаминов B₁ (C_B1) и B₁₂ (С_В12) вычисляют по уравнениям:

C_B1=6,17·10^-5·A₂₄₆-4,21·10^-5·A₃₆₀

C_B12=3,36·10^-5·A₃₆₀,

где А₂₄₆ и А₃₆₀ - оптические плотности смеси витаминов В₁ и B₁₂ при 246 нм и 360 нм соответственно.

Коэффициенты распределения (D_B1 и D_B12), степень извлечения (R_B1 и R_B12) и фактор разделения (β) витаминов вычисляют по следующим уравнениям:

где С_{В1, В12(о)} и С_{В1, В12(в)} - концентрации витамина в органической и водной фазах, мг/см³; f - соотношение объемов равновесных водной и органической фаз.

Продолжительность анализа не более 15 мин, экстракционное разделение смеси витаминов B₁ и B₁₂ характеризуются высоким фактором разделения (β=2050), достигается практически полное однократное извлечение витамина B₁₂ из водно-солевой смеси (R=96%) при соотношении объемов водно-солевой смеси и изопропилового спирта 20:1 и использовании в качестве высаливателя сульфата аммония.

При использовании водно-солевых смесей витаминов B₁ и B₁₂, приготовленных с другим высаливателем или с предложенным высаливателем другой концентрации, а также применении других экстрагентов, фактор разделения витаминов и степень извлечения витамина B₁₂ не достигают заявленных максимумов.

Предлагаемый способ экстракционного разделения смеси витаминов B₁ и В₁₂ характеризуется экспрессностью и позволяет разделять смеси витаминов B₁ и B₁₂ (β=2050), практически полностью извлекать витамин B₁₂ из водно-солевой смеси (R=96%) при однократной экстракции, соотношении объемов водно-солевой смеси и изопропилового спирта 20:1 и использовании в качестве высаливателя сульфата аммония.

Аналоги не обнаружены.

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к органическому анализу, и может быть использовано при разработке процессов выделения, разделения и определения витаминов в водном растворе. Способ характеризуется тем, что готовят водно-солевую смесь витаминов B₁ и В₁₂, для чего анализируемые растворы витаминов фармакопейной чистоты помещают в мерную колбу, при перемешивании доводят до метки насыщенным раствором высаливателя, в качестве которого применяют сульфат аммония, витамины экстрагируют изопропиловым спиртом квалификации х.ч., для этого к полученной водно-солевой смеси витаминов добавляют изопропиловый спирт при соотношении объемов водно-солевой смеси витаминов и изопропилового спирта 20:1, экстрагируют в течение 5-7 мин, после расслаивания системы водную фазу отделяют от органической, на УФ-спектрофотометре измеряют оптическую плотность водно-солевой смеси при длинах волн 246 нм и 360 нм (толщина светопоглощающего слоя 1 см), молярную концентрацию витаминов B₁ (C_B1) и В₁₂ (С_В12) вычисляют по уравнениям:

C_B1=6,17·10^-5·A₂₄₆-4,21·10^-5·A₃₆₀

C_B12=3,36·10^-5·A₃₆₀,

где А₄₂₆ и А₃₆₀ - оптические плотности раствора смеси витаминов В₁ и В₁₂ при 246 нм и 360 нм соответственно. Достигается экспрессность анализа и возможность практически полностью извлекать витамин В₁₂ из водно-солевой смеси (R=96%) при однократной экстракции.

Способ раздельного определения витаминов B₁ и В₁₂ в водном растворе, включающий приготовление водно-солевой смеси витаминов В₁ и В₁₂, для чего анализируемые растворы витаминов фармакопейной чистоты помещают в мерную колбу, перемешивают и доводят раствор до метки насыщенным раствором высаливателя, в качестве которого применяют сульфат аммония, экстракцию витаминов изопропиловым спиртом в течение 5-7 мин, для чего к полученной водно-солевой смеси витаминов добавляют изопропиловый спирт при соотношении объемов водно-солевой смеси витаминов и изопропилового спирта 20:1, после расслаивания системы водную фазу отделяют от органической, на УФ-спектрофотометре измеряют оптическую плотность водно-солевой смеси при длинах волн 246 нм и 360 нм, молярную концентрацию витаминов B₁ (C_B1) и B₁₂ (C_B12) вычисляют по уравнениям:
C_B1=6,17·10^-5·A₂₄₆-4,21·10^-5·A₃₆₀,
С_В12=3,36·10^-5·А₃₆₀,
где А₂₄₆ и А₃₆₀ - оптическая плотность раствора смеси витаминов В₂ и B₁₂
при λ=246 нм и λ=360 нм соответственно.