Меченный тритием лаурил-глицил-пролил-допамин Российский патент 2018 года по МПК C07K5/62 C07B59/00 A61K38/05 

Изобретение относится к области органической химии и может найти применение в аналитической химии и биологических исследованиях.

При изучении физиологически активных соединений необходимы их меченые аналоги.

Известно, что замена атомов соединений на их меченые аналоги не приводит к изменению каких-либо свойств исходного соединения (Evans Е.А. - Tritium and its compounds, London Butterworths, 1974, p. 48) [1].

Кроме того, показано, что реакции дейтерия и трития с веществами, нанесенными на поверхность катализатора, происходят с близкими скоростями и одинаковой селективностью, а отношение скоростей этих реакций приближается к единице (Золотарев Ю.А., Дадаян А.К., Кост Н.В., Воеводина М.Э., Соколов О.Ю., Козик B.C., Шрам С.И., Азев В.Н., Бочаров Э.В., Богачук А.П., Липкин В.М., Мясоедов Н.Ф. "Количественный анализ пептида HLDF-6-амида и его метаболитов в тканях лабораторных животных с использованием их меченных тритием и дейтерием производных" // Биоорганическая химия, 2015, том 41, №6, с. 644-656 и Zolotarev Yu.A., Dadayan А.K., Borisov Yu.A., Kozik V.S., Nazimov I.V., Ziganshin R.H., Bocharov E.V., Chizhov A.O., Myasoedov N.F. "New Development in the Solid-State Isotope Exchange with Spillover Hydrogen in Organic Compounds" // J. Phys. Chem. C. 2013. V. 117. P. 16878-16884) [2, 3].

Также в работе [1] показано, что в биологических исследованиях принципиально важную роль играет распределение трития в молекулах меченых препаратов. В работе подчеркивается, что при исследовании метаболизма лекарственных препаратов стабильность положения трития является одним из наиболее важных условий биологического эксперимента. Для каждого конкретного исследования требуется определенное распределение трития в молекулах меченых препаратов. Химически устойчивый связанный атом трития может стать подвижным при взаимодействии тритийсодержащего соединения с энзимом. В результате этого атом трития может быть потерян, несмотря на полную сохранность углеродного скелета молекулы. Если же тритий находится в другом фрагменте молекулы вещества, или в молекулах вещества их несколько, то вероятность получения более достоверных данных значительно повышается. При этом важно не только распределение трития, но даже и его стереохимическая конформация. Например, показано, что конверсия холестерина-4-¹⁴С-7α-³Н в холевую кислоту в организме крысы in vivo ведет к потере, по меньшей мере, 93% трития из положения 7. Однако при использовании холестерина-4-¹⁴С-7β-³Н весь тритий оставался в холевой кислоте.

Известен лаурил-глицил-пролил-допамин формулы I:

Допамин играет важную роль в обеспечении когнитивной деятельности. Наиболее известными патологиями, связанными с допамином, являются шизофрения и паркинсонизм, а также обсессивно-компульсивное расстройство. С нарушением допаминергической системы связывают и такие расстройства, как ангедония, депрессия, деменция, патологическая агрессивность, синдром персистирующей лактореи-аменореи, импотенция, акромегалия. Через гематоэнцефалический барьер допамин мало проникает, и повышение уровня дофамина в плазме крови оказывает малое влияние на функции ЦНС. Кроме того, что диффузия допамина через гематоэнцефалический барьер ограничена, он не устойчив в физиологических жидкостях живых организмов (Захаров В.В., Яхно Н.Н. Когнитивные расстройства в пожилом и старческом возрасте: Методическое пособие для врачей. - Москва, 2005 [4]. Левин Я.И. Нейрохимическая медицина. Часть 1. Церебральные допаминергические системы // Современная терапия психических расстройств. - 2008. - №1. [5]. Ашмарин И. П., Ещенко Н. Д., Каразеева Е.П. Нейрохимия в таблицах и схемах. - М.: Экзамен, 2007. [6] Васильев В.Н. Диагностика и терапия инкурабельных нервных и психических заболеваний допаминовой этиологии. Биокоррекция Васильева. - М.: Медиакит, 2009. - 247 с. [7]).

Лаурил-глицил-пролил-допамин лишен этих недостатков. Расчеты показали, что наличие лауриновой кислоты повышает вероятность преодоления гематоэнцефалический барьер в несколько раз (Радченко Е.В., Карпов П.В., Соснин С.Б., Дябина А.С., Соснина Е.А., Палюлин В.А., Зефиров Н.С. "Система прогнозирования фармакокинетических свойств и токсичности лекарственных веществ" // XX менделеевский съезд по общей и прикладной химии, Екатеринбург, 26-30 сентября 2016 г., С. 432. [8], Дябина А.С., Радченко Е.В., Палюлин В.А., Зефиров Н.С. Прогнозирование проникновения органических веществ через гематоэнцефалический барьер // Доклады Академии Наук. 2016. Т. 470. №6. С. 720-723. [9]).

Однако аналог лаурил-глицил-пролил-допамина, меченный тритием по глициновому остатку, не описан.

Техническим результатом, достигаемым настоящим изобретением, является расширение ассортимента меченых аналогов физиологически активных соединений.

Достигается указанный технический результат получением меченного тритием по глициновому остатку лаурил-глицил-пролил-допамина формулы I:

Ниже приведен пример реализации изобретения.

Пример I

Раствор 0.42 мг (2.1 мкмоль) лауриновой кислоты в 0.25 мл хлороформа обработали 0.55 мг (4.8 мкмоль) N-оксисукцинимида 0.45 мг (0.022 мкмоль) ДЦГК. Через 12 часов хлороформ упарили и остаток растворили в 50 мкл этанола. К раствору добавили 5 мкл триэтиламина и 10 мКи (26 Ки/моль) глицина (раствор в 20 мкл вода-изо-PrOH, 3:1). Раствор перемешивали 17 часов. Растворитель упаривали, остаток растворили в 0.5 мл метанола. Хроматографическое выделение проводили на колонке Kromasil 100 С18, 5 мкм, 8*150 мм, подвижная фаза: элюент А - метанол-вода-уксусная кислота (50:50:0.1), элюент В - метанол, линейный градиент В от 0 до 100% в течение 30 мин, скорость потока 2 мл/мин. Время удерживания - 22.94 мин. Выход лаурил-глицина достигал 50%.

Раствор 5 мКи лаурил-[³Н]глицина в 0.2 мл диметилформамида обработали 1 мг 1-оксибензотриазола и 1 мг дициклогексилкарбодиимида. Через 20 минут к раствору прибавили 20 мкл триэтиламина и 1 мг пролил-допамина. Раствор перемешивали 17 часов. Растворитель упаривали, остаток растворили в 0.5 мл метанола. Хроматографическое выделение проводили на колонке Kromasil 100 С18, 5 мкм, 8*150 мм, подвижная фаза: элюент А - метанол-вода-уксусная кислота (70:30:0.1), элюент В - метанол, линейный градиент В от 0 до 100% в течение 30 мин, скорость потока 2 мл/мин. Время удерживания - 13.86 мин. Выход лаурил-глицил-пролил-допамина - 56%.

Таким образом, получен меченный тритием по глициновому остатку лаурил-глицил-пролил-допамин.

Изобретение относится к меченному тритием по глициновому остатку лаурил-глицил-пролил-допамину формулы I, который может найти применение в аналитической химии и биологических исследованиях. 1 пр.

I

Меченный тритием по глициновому остатку лаурил-глицил-пролил-допамин формулы I.