Перекрестная ссылка на родственные заявки
Данная заявка имеет приоритет заявки на предварительный патент США серийный номер 61/900,255, поданной 5 ноября 2013 года, полное описание которой включено в данное описание посредством ссылки.
Предшествующий уровень техники
В последние годы были достигнуты важные успехи в отношении понимания иммунной системы и открытия лекарственных соединений для модифицирования иммунного ответа для лечения или предупреждения заболеваний. Такие являющиеся модификаторами иммунного ответа ("IRM") соединения были открыты в различных классах соединений, включая имидазохинолин-амины, имидазопиридин-амины, 6,7-конденсированные циклоалкилимидазопиридин-амины, 1,2-мостиковые имидазохинолин-амины, тиазолохинолин-амины, оксазолохинолин-амины, тиазолопиридин-амины, оксазолопиридин-амины, имидазонафтиридин-амины, имидазонафтиридин-амины и тиазолонафтиридин-амины (смотри, например, патенты США №№4,689,338; 4,929,624; 5,266,575; 5,268,376; 5,346,905; 5,352,784; 5,389,640; 5,446,153; 5,482,936; 5,756,747; 6,110,929; 6,194,425; 6,331,539; 6,376,669; 6,451,810; 6,525,064; 6,541,485; 6,545,016; 6,545,017; 6,573,273; 6,656,938; 6,660,735; 6,660,747; 6,664,260; 6,664,264; 6,664,265; 6,667,312; 6,670,372; 6,677,347; 6,677,348; 6,677,349; 6,683,088; 6,756,382; 7,799,800; патентные публикации США №№2012/04041 и 2013/0230578. Многие из этих соединений продемонстрировали мощное иммуностимулирование, противовирусную и противоопухолевую (в том числе противораковую) активность, и было также показано, что они полезны в качестве вакцинных адъювантов и для лечения ТН2-опосредованных заболеваний.
Однако способность обеспечивать желаемую терапевтическую пользу у таких соединений зависит от целого ряда факторов, включая пределы, в которых они могут быть приготовлены и в которых их можно доставлять путем, подходящим для конкретных видов лечения. Соответственно, существует потребность в новых способах и композициях для предоставления потенциальной терапевтической пользы от этих важных иммуномодифицирующих лекарственных соединений.
Краткое изложение сущности изобретения
Несмотря на то, что многие заболевания можно лечить путем системной доставки модифицирующих иммунный ответ соединений, системная доставка может иметь повышенные негативные побочные эффекты, такие как системное индуцирование TNF (фактор некроза опухоли), по сравнению с локализованной доставкой, и может также ограничивать количество IRM соединения, терапевтически доступного для лечения заболевания, из-за распространения его по всему организму. Хотя некоторые усовершенствования были сделаны в области локализованной доставки IRM (смотри, например, патент США №7,799,800; и патентные публикации США №№2004/0265351; 2009/0035323; и 2013/0230578), потребность в стабильных композициях, которые обеспечивают повышенную локализацию доставки IRM, остается.
Было обнаружено, что композиции, содержащие IRM соединение, этанол и кунжутное масло, обеспечивают локальную активность IRM соединений в течение продолжительного периода времени.
Согласно настоящему изобретению предложены инъецируемые композиции, содержащие этанол, кунжутное масло и являющее модификатором иммунного ответа (IRM) соединение. IRM соединение имеет общую формулу (I):
где R, R2, X, Y и R1 такие, как определено ниже.
В другом аспекте изобретения предложен способ доставки фармацевтических композиций, описанных в данном документе, включающий инъецирование этой композиции субъекту.
В другом аспекте изобретения предложен способ лечения заболевания, включающий инъецирование субъекту, нуждающемуся в лечении этого заболевания, любой из композиций, описанных в данном документе.
В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ изготовления фармацевтических композиций, содержащих этанол, кунжутное масло и IRM соединение формулы I.
Термин "содержит" и его варианты не имеют ограничивающего значения везде, где эти термины упоминаются в описании изобретения и в формуле изобретения.
В данном документе формы единственного числа ("a", "an", "the"), "по меньшей мере один" и "один или более" используются взаимозаменяемо.
Также в данном документе указание численных диапазонов предельными значениями включают все числа в пределах данного диапазона (например, от 1 до 5 включает 1; 1,5; 2; 2,75; 3; 3,80; 4; 5 и т.д.).
"Индуцировать" и его варианты относятся к измеримому увеличению клеточной активности. Например, индуцирование иммунного ответа может охватывать, например, увеличение продуцирования цитокинов, активацию, пролиферацию или созревание популяции иммунных клеток и/или другой показатель повышения иммунной функции.
"Терапевтический" и его варианты относятся к лечению, которое ослабляет один или более существующих симптомов или клинических признаков, связанных с состоянием.
"Лечить" или его варианты относятся к снижению, ограничению прогрессирования, ослаблению, предупреждению или устранению до любой степени симптомов или признаков, связанных с состоянием.
Приведенное выше краткое изложение сущности изобретения не предназначено для описания каждого раскрытого воплощения или каждого осуществления настоящего изобретения. Описание, которое следует далее, более подробно иллюстрирует воплощения. В нескольких местах описания дано указание списков примеров, которые могут быть использованы в различных комбинациях. В каждом случае, указанные списки служат только в качестве репрезентативной группы и не должны толковаться как эксклюзивный список.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к способам и композициям модификаторов иммунного ответа (IRM), которые могут быть депонированы, в некоторых воплощениях посредством инъекции, внутри локализованного участка ткани и могут обеспечивать локальную активность IRM соединений в течение продолжительного периода времени. Композиции, описанные в данном документе, демонстрируют высокую степень стабильности, в частности IRM соединения.
В общем, композиции по настоящему изобретению содержат этанол, кунжутное масло и IRM соединение, имеющее следующую формулу (I):
где:
X представляет собой алкилен, имеющий вплоть до 8 атомов углерода, возможно прерванный или оканчивающийся -О-;
R2 представляет собой водород, алкил, алкоксиалкиленил, алкиламиноалкиленил или гидроксиалкиленил;
Y представляет собой -С(О)- или -S(O)2-;
R1 представляет собой линейную или разветвленную алифатическую группу, имеющую 11-23 атомов углерода, возможно содержащую одну или более ненасыщенных углерод-углеродных связей; и
R представляет собой водород, галоген или гидроксил; или его фармацевтически приемлемую соль.
В данном документе термины "алкил", "алкенил" и префикс "алк-" охватывают как прямоцепочечные, так и разветвленные группы, и циклические группы, например циклоалкил и циклоалкенил. Если конкретно не указано иное, эти группы содержат от 1 до 23 атомов углерода, причем алкенильные группы содержат от 2 до 23 атомов углерода. В некоторых воплощениях эти группы имеют в сумме вплоть до 20 атомов углерода, вплоть до 18 атомов углерода, вплоть до 16 атомов углерода, вплоть до 10 атомов углерода, вплоть до 8 атомов углерода, вплоть до 7 атомов углерода, вплоть до 6 атомов углерода или вплоть до 4 атомов углерода. Циклические группы могут быть моноциклическими или полициклическими и предпочтительно имеют от 3 до 10 кольцевых атомов углерода. Иллюстративные циклические группы включают циклопропил, циклопропилметил, циклопентил, циклогексил, адамантил и замещенные и незамещенные борнил, норборнил и норборнерил.
Если конкретно не указано иное, "алкилен" и "алкенилен" представляют собой двухвалентные формы "алкильных" и "алкенильных" группы, которые определены выше. Термины "алкиленил" и "алкениленил" используются, когда соответственно "алкилен" и "алкенилен" являются замещенными. Например, алкоксиалкиленильная группа содержит алкиленовую группировку, к которой присоединена алкоксигруппа.
Алкиленовая группа с атомами углерода, возможно "прерванными" -О-, относится группе, имеющей атомы углерода с каждой стороны от -О-. Примером является -СН2-СН2-О-СН2-СН2-.
Алкиленовая группа с атомами углерода, возможно "оканчивающимися" -О-, относится к группе, имеющей -О- на любом конце алкиленовой группы или цепи атомов углерода. Примеры включают -О-СН2-СН2-СН2-СН2- и -СН2-СН2-СН2-СН2-O-. В соединениях, используемых в настоящем изобретении, когда X представляет собой алкилен, имеющий вплоть до 8 атомов углерода, оканчивающийся -О-, тогда -О- может быть связан либо с атомом азота имидазольного кольца, либо с атомом азота амидной (Y представляет собой -С(О)-) или сульфонамидной (Y представляет собой -S(O)2-) группы.
Изобретение охватывает IRM соединения, описанные в данном документе (включая промежуточные соединения), в любых их фармацевтически приемлемых формах, включая твердую, полутвердую, сольваты (например, гидрат), изомеры (например, диастереомеры и энантиомеры), соли, полиморфы, пролекарства и т.п. В частности, если соединение является оптически активным, то изобретение охватывает конкретно каждый из энантиомеров соединения, а также рацемические смеси энантиомеров. Следует иметь в виду, что термин "соединение" охватывает любые и все такие формы, указаны ли они в прямой форме или нет (хотя иногда "соли" указаны в прямой форме).
Для любого из соединений, представленных в данном документе, включая соединения формулы I, каждая из следующих переменных (например, X, R2, R и так далее) в любом ее воплощении может находиться в комбинации с любой одной или более другими переменными в любых их воплощениях и может быть связана с любой из формул, описанных в данном документе, что будет понятно специалисту в данной области техники. Каждая из результирующих комбинаций переменных является воплощением настоящего изобретения.
В некоторых воплощениях X представляет собой алкилен, имеющий вплоть до 8 атомов углерода, возможно прерванный или оканчивающийся -О-.
В некоторых воплощениях X представляет собой алкилен, имеющий вплоть до 4 атомов углерода, возможно прерванный или оканчивающийся -О-.
В некоторых воплощениях X представляет собой -О-С2-8алкилен (например -О-С2-5алкилен). В этих воплощениях -О- напрямую присоединен к атому азота имидазольного кольца.
В некоторых воплощениях X представляет собой -О-С3-8алкилен (например -О-С3-5алкилен). В этих воплощениях -О- напрямую присоединен к атому азота имидазольного кольца.
В некоторых воплощениях X представляет собой -C1-8алкилен (например -С2-5алкилен).
В некоторых воплощениях X представляет собой -С2-8алкилен (например -С2-5алкилен), который прерван -О-.
В некоторых воплощениях X представляет собой -С3-8алкилен (например -С3-5алкилен).
В некоторых воплощениях X представляет собой -О-бутилен (например, -О-СН2-СН2-СН2-СН2-). В этих воплощениях -О- напрямую присоединен к атому азота имидазольного кольца.
В некоторых воплощениях X представляет собой -СН2-СН2-О-СН2-СН2-.
В некоторых воплощениях, включая любое из воплощений формулы I, где X определен, R2 представляет собой водород, алкил, алкоксиалкиленил, алкиламиноалкиленил или гидроксиалкиленил.
В некоторых воплощениях, включая любое из воплощений формулы I, где X определен, R2 представляет собой водород, алкил, алкоксиалкиленил или гидроксиалкиленил.
В некоторых воплощениях, включая любое из воплощений формулы I, где X определен, R2 представляет собой водород, алкил или алкоксиалкиленил.
В некоторых воплощениях, включая любое из воплощений формулы I, где X определен, R2 представляет собой метил, этил, пропил, бутил, этоксиметил, метоксиметил, этиламинометил или 2-метоксиэтил.
В некоторых воплощениях, включая любое из воплощений формулы I, где X определен, R2 представляет собой метил, этил, пропил, бутил, этоксиметил, метоксиметил или 2-метоксиэтил.
В некоторых воплощениях, включая любое из воплощений формулы I, где X определен, R2 представляет собой этил, бутил, этоксиметил или 2-метоксиэтил.
В некоторых воплощениях, включая любое из воплощений формулы I, где X определен, R2 представляет собой С1-4алкил.
В некоторых воплощениях, включая любое из воплощений формулы I, где X определен, R2 представляет собой бутил (например, -СН2-СН2-СН2-СН3).
В некоторых воплощениях, включая любое из приведенных выше воплощений формулы I, где X определен, R2 представляет собой этоксиметил (например, -СН2-O-СН2СН3).
В некоторых воплощениях, включая любое из воплощений формулы I, где X определен, R2 представляет собой метоксиэтил (например, -СН2-СН2-O-СН3).
В некоторых воплощениях, включая любое из воплощений формулы I, где X определен, R2 представляет собой этиламинометил (например, -CH2-NH-СН2СН3).
В некоторых воплощениях, включая любое из воплощений формулы I, где X или R2 определен, R представляет собой водород, галоген, гидроксил, алкил, галогеналкил или алкокси.
В некоторых воплощениях, включая любое из приведенных выше воплощений формулы I, где X или R2 определен, R представляет собой галоген или гидроксил.
В некоторых воплощениях, включая любое из воплощений формулы I, где X определен, или R2 определен, R представляет собой водород.
В некоторых воплощениях, включая любое из воплощений формулы I, где X или R2 определен, R представляет собой галоген. В некоторых воплощениях R представляет собой фтор, хлор или бром.
В некоторых воплощениях, включая любое из приведенных выше воплощений формулы I, где X, R или R2 определен, Y представляет собой -С(O)- или -S(O)2-.
В некоторых воплощениях, включая любое из приведенных выше воплощений формулы I, где X, R или R2 определен, Y представляет собой -С(О)-.
В некоторых воплощениях, включая любое из приведенных выше воплощений формулы I, где X, R, R2 или Y определен, R1 представляет собой линейную или разветвленную алифатическую группу, имеющую 11-23 атомов углерода, возможно содержащую одну или более ненасыщенных углерод-углеродных связей (например, -(СН2)7-СН=СН-(СН2)7-СН3, -(СН2)7-СН=СН-(CH2)5-CH3, -(СН2)9-СН=СН-(СН2)5-СН3, -(СН2)6-(СН2-СН=СН)2-(СН2)4-СН3, -(СН2)6-(СН2-СН=СН)3-СН2-СН3 или -(СН2)2-(СН2-СН=СН)4-(СН2)4-СН3).
В некоторых воплощениях, включая любое из приведенных выше воплощений формулы I, где X, R, R2 или Y определен, R1 представляет собой С11-С23алкил.
В некоторых воплощениях, включая любое из приведенных выше воплощений формулы I, где X, R, R2 или Y определен, R1 представляет собой С15-С23алкил.
В некоторых воплощениях, включая любое из приведенных выше воплощений формулы I, где X, R, R2 или Y определен, R1 представляет собой С15-С19алкил.
В некоторых воплощениях, включая любое из приведенных выше воплощений формулы I, где X, R, R2 или Y определен, R1 представляет собой С15-С17алкил.
В некоторых воплощениях, включая любое из приведенных выше воплощений формулы I, где X, R, R2 или Y определен, R1 представляет собой С17алкил.
В некоторых воплощениях формулы I X представляет собой -О-С3-5алкилен, и R2 представляет собой метил, этил пропил, бутил, этоксиметил, метоксиметил или 2-метоксиэтил.
В некоторых воплощениях формулы I X представляет собой -О-бутилен, и R2 представляет собой бутил.
В некоторых воплощениях формулы I R1 представляет собой прямоцепочечную или разветвленную алкильную группу.
В некоторых воплощениях формулы I R1 представляет собой прямоцепочечную алкильную группу.
В некоторых воплощениях соединение формулы I представляет собой N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид:
или его фармацевтически приемлемую соль,
IRM соединения, используемые в композициях по изобретению, могут быть синтезированы путями синтеза, которые включают способы, аналогичные способам, известным в химических областях, в частности в свете описания, содержащегося в данном документе. Исходные вещества общедоступны из коммерческих источников, таких как Aldrich Chemicals (Milwaukee, Wisconsin, USA), или легко могут быть получены способами, известными специалистам в данной области (например, могут быть получены способами, в общем описанными в Louis F. Fieser and Mary Fieset, Reagents for Organic Synthesis, v. 1-19, Wiley, New York, (1967-1999 ed.); Alan R. Katritsky, Otto Msth-Cohn, Charles W. Rees, Comprehensive Organic Functional Group Transformations, v 1-6, Pergamon Press, Oxford, England, (1995); Barry M. Trost and Ian Fleming, Comprehensive Organic Synthesis, v. 1-8, Pergamon Press, Oxford, England, (1991); или Beilsteins Handbuch der organischen Chemie, 4, Aufl Ed. Springer-Verlag, Berlin, Germany, включая дополнения (также доступный через он-лайн базу данных Beilstein)).
Более подробное описание отдельных реакционных стадий, полезных для получения соединений формулы I, смотри, например, в патенте США №7,799,800; и в патентной публикации США №2013/0230578.
Соединения формулы I могут быть получены также из перспективных промежуточных соединений, описанных в предшествующем уровне техники. Соединения формулы I могут быть получены из перспективных промежуточных соединений формулы XIV, XXIV и XXXVI, которые изображены на реакционных схемах II, III и IV соответственно Международной патентной публикации WO 2012/167081. Соединения формулы I могут быть также получены из перспективного промежуточного соединения формулы VII на реакционной схеме I или из перспективного промежуточного соединения формулы VIII на реакционной схеме II, которые оба описаны в патенте США №6451810. Методики синтеза для получения вышеуказанных перспективных промежуточных соединений также описаны в Международной патентной заявке WO 2012/167081 и в патенте США №6451810.
Соединения формулы I, где X представляет собой -С(О)-, могут быть получены в результате взаимодействия вышеуказанных перспективных промежуточных соединений с соответствующей карбоновой кислотой или соответствующим хлорангидридом карбоновой кислоты с использованием методик, описанных на реакционных схемах II-III в патенте США №6451810. Предпочтительные соединения формулы I, где X представляет собой -С(О)-, могут быть получены с использованием следующих карбоновых кислот (или соответствующих хлорангидридов карбоновых кислот): лауриновая кислота, миристиновая кислота, пальмитиновая кислота, маргариновая кислота, стеариновая кислота, арахидиновая кислота, бегеновая кислота и лигноцериновая кислота. Соединения формулы I, где X представляет собой -С(О)-, и R1 представляет собой ненасыщенную алифатическую группу (т.е. алифатическую группу, имеющую одну или более ненасыщенных углерод-углеродных связей), могут быть получены из ненасыщенных жирных кислот, таких как олеиновая кислота, пальмитолеиновая кислота, вакценовая кислота, линолевая кислота, линоленовая кислота или арахидоновая кислота.
Соединения формулы I, где X представляет собой -S(O)2-, могут быть получены в результате взаимодействия вышеуказанных перспективных промежуточных соединений с подходящим сульфонилхлоридом с использованием методик, описанных на реакционной схеме II в патенте США №6331539.
Специалисты в данной области поймут, что для синтеза соединений по изобретению могут быть использованы другие пути синтеза.
При получении IRM соединений, используемых в композициях по изобретению, иногда может потребоваться защита конкретных функциональных групп при взаимодействии других функциональных групп на промежуточном соединении. Необходимость в такой защите будет варьировать в зависимости от природы конкретной функциональной группы и условий реакционной стадии. Подходящие защитные группы для аминогруппы включают ацетил, трифторацетил, трет-бутоксикарбонил (Boc), бензилоксикарбонил и 9-флуоренилметоксикарбонил (Fmoc). Подходящие защитные группы для гидроксигруппы включают ацетильную группу и силильную группу, такую как трет-бутилдиметилсилильная группа. Общую информацию о защитных группах и их использовании смотри в Т.W. Greene and P.G.M. Wins, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, USA, 1991.
Для выделения IRM соединений, используемых в композиции по изобретению, могут быть использованы общепринятые способы и методы выделения и очистки. Такие методы могут включать, например, все типы хроматографии (высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), колоночная хроматография с использованием обычных адсорбентов, таких как силикагель, и тонкослойная хроматография), перекристаллизация и дифференциальные (т.е. жидкость-жидкость) экстракционные методы.
Этанол, используемый в инъецируемой композиции, описанной в данном документе, типично присутствует в количестве от примерно 1% масс. до примерно 9% масс. В некоторых воплощениях этанол присутствует в количестве от примерно 3% масс. до примерно 8% масс. В некоторых воплощениях этанол присутствует в количестве от примерно 5% масс. до примерно 7,5% масс. В некоторых воплощениях этанол присутствует в количестве от примерно 1% масс. до примерно 3% масс. В некоторых воплощениях этанол присутствует в количестве от примерно 3% масс. до примерно 4% масс. В некоторых воплощениях этанол присутствует в количестве от примерно 4% масс. до примерно 5% масс. В некоторых воплощениях этанол присутствует в количестве от примерно 5% масс. до примерно 6% масс. В некоторых воплощениях этанол присутствует в количестве от примерно 6% масс. до примерно 7% масс. В некоторых воплощениях этанол присутствует в количестве от примерно 6,5% масс. до примерно 7,5% масс. В некоторых воплощениях этанол присутствует в количестве от примерно 8% масс. до примерно 9% масс. В некоторых воплощениях, как описано в способах ниже, избыток этанола (т.е. количество, большее, чем растворимое в кунжутном масле); например, в некоторых воплощениях по меньшей мере 10% масс. этанола, в некоторых воплощениях по меньшей мере 1,2% масс. этанола, в некоторых воплощениях по меньшей мере 1% масс. этанола используют для растворения больших количеств IRM соединения. Когда раствор IRM-этанол добавляют в кунжутное масло, тогда IRM растворяется гораздо быстрее, чем при простом добавлении IRM в предварительно смешанный раствор кунжутное масло-этанол; избыток этанола (который выходит за пределы растворимости в кунжутном масле) затем выпаривают с получением конечной композиции (содержащей 9% масс. этанола или меньше). В некоторых воплощениях этанол, подходящий для использования в инъецируемых композициях, описанных в данном документе, включает этанол, который не содержит никакой воды или дезодоранта. Примером этанола, полезного в композициях по настоящему изобретению, является этанол крепости 200, например дегидратированный спирт сорта USP (Фармакопея США).
Инъецируемые композиции, описанные в данном документе, содержат также кунжутное масло. Кунжутное масло, используемое в композициях, описанных в данном документе, представляет собой кунжутное масло фармацевтического сорта, такое как Sesame Oil, NF. В некоторых воплощениях кунжутное масло может быть рафинированным, таким как когда одно или более полярных соединений по существу удалены из кунжутного масла или их содержание снижено без значительного изменения профиля жирных кислот в кунжутном масле. Например, кунжутное масло может иметь профиль жирных кислот, который включает пальмитиновую кислоту, стеариновую кислоту, олеиновую кислоту и линолевую кислоту. Другие жирные кислоты также могут присутствовать в более низких количествах, обычно менее 1% масс. Полярные соединения, присутствующие в кунжутном масле, могут включать, без ограничения, такие соединения, как моноглицериды, диглицериды, свободные жирные кислоты, растительные стерины, красящее вещество (хлорофилл, каротин), сезамин, сезамолин, продукты окисления и химические вещества из окружающей среды. Полярные соединения в кунжутном масле могут быть количественно измерены в стандартных тестах, таких как тест на кислотное число, тест на гидроксильное число, тест на пероксидное число и тест на следовое азотное число. Для удаления или по существу снижения содержания по меньшей мере одного полярного соединения из кунжутного масла с получением рафинированного кунжутного масла могут быть использованы стандартные методы хроматографии. Подходящие хроматографические методы, которые известны в данной области, включают гравитационную колоночную хроматографию, колоночную флэш-хроматографию, жидкостную хроматографию среднего давления или хроматографию высокого давления.
В некоторых воплощениях кунжутное масло имеет гидроксильное число меньше или равно 2. Гидроксильное число кунжутного масла может быть определено по опубликованной методике, описанной в USP 36 <401> Fats and Fixed Oils, Hydroxyl Value. В некоторых воплощениях кислотное число кунжутного масла меньше или равно 0,1. Кислотное число кунжутного масла может быть определено по опубликованной методике, описанной в USP 36 <401> Fats and Fixed Oils, Acid Value. В некоторых воплощениях пероксидное число кунжутного масла меньше или равно 1. Пероксидное число кунжутного масла может быть определено по опубликованной методике, описанной в USP 36 <401> Fats and Fixed Oils, Peroxide Value. В некоторых воплощениях общее содержание азота в кунжутном масле меньше или равно 1 млн-1. Следовое азотное число кунжутного масла может быть определено по опубликованной методике, описанной в ASTM D5762-12. В некоторых воплощениях кунжутное масло содержит не более 0,05% масс. сезамина. В некоторых воплощениях кунжутное масло содержит не более 0,05% масс, сезамолина. Уровни сезамина и сезамолина могут быть определены согласно опубликованному анализу на сезамин/сезамолин, описанному Т. Tashiro, Y. Fukuda, Т. Osawa и М. Naiki в Journal of the American Oil Chemists' Society, 67, 508 (1990).
Неожиданно было обнаружено, что композиции, содержащие IRM соединение, этанол и рафинированное кунжутное масло, как описано выше, с условием, что одно или более полярных соединений по существу удалено из кунжутного масла, обладают повышенной стабильностью, не только композиции в целом, но и самого IRM соединения. Композиции, описанные в данном документе, демонстрируют высокую степень химической и физической стабильности, в частности IRM соединения. Например, в некоторых воплощениях, описанных в данном документе, таких как, когда используется рафинированное кунжутное масло, эти композиции демонстрируют срок годности, приемлемый для коммерческого использования, например 6-месячный срок годности, 1-летний срок годности и т.п.
В некоторых воплощениях инъецируемая фармацевтическая композиция по настоящему изобретению содержит кунжутное масло, этанол (7,5% масс.), ВНА (300 млн-1) и М-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид (0,15 мг/мл). В некоторых воплощениях инъецируемая фармацевтическая композиция по настоящему изобретению содержит кунжутное масло, этанол (7,5% масс.), ВНА (300 млн-1) и N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид (0,3 мг/мл). В некоторых воплощениях инъецируемая фармацевтическая композиция по настоящему изобретению содержит кунжутное масло, этанол (7,5% масс.), ВНА (300 млн-1) и N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид (0,6 мг/мл). В некоторых воплощениях инъецируемая фармацевтическая композиция по настоящему изобретению содержит кунжутное масло, этанол (7,5% масс.), ВНА (300 млн-1) и N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)-октадеканамид (1,2 мг/мл). В некоторых воплощениях инъецируемая фармацевтическая композиция по настоящему изобретению содержит кунжутное масло, этанол (7,5% масс.), ВНА (300 млн-1) и N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид (2,4 мг/мл).
В некоторых воплощениях инъецируемая фармацевтическая композиция по настоящему изобретению содержит кунжутное масло, этанол (7,5% масс.), ВНА (300 млн-1) и N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид (от 0,1 мг/мл до примерно 2,5 мг/мл).
Факторы, учитываемые при выборе инъецируемой композиции, включают растворимость IRM соединения в композиции, стабильность IRM соединения в композиции, физическую стабильность композиции. Эти факторы особенно важны при разработке композиции, которая может храниться в течение длительного периода времени (>6 месяцев) и при температуре в пределах от 5°C до 40°C.
На химическую стабильность IRM соединения в композиции могут влиять химический состав композиции и условия хранения. Химическая стабильность IRM соединения в композиции может быть определена анализом на содержание IRM соединения в композиции с течением времени с использованием стандартных аналитических методов, таких как ВЭЖХ.
В некоторых воплощениях фармацевтические композиции могут дополнительно содержать одну или более добавок, включающих, без ограничения, антиоксиданты, противомикробные средства, адъюванты, загустители, суспендирующие агенты, поверхностно-активные вещества и диспергирующие агенты. В некоторых воплощениях композиция может содержать добавленный антиоксидант, такой как бутилированный гидроксианизол (ВНА) или бутилированный гидрокситолуол (ВНТ). Концентрация добавленного антиоксиданта может составлять по меньшей мере 10 млн-1, 50 млн-1, 100 млн-1, 200 млн-1 и вплоть до 300 млн-1.
В некоторых воплощениях фармацевтические композиции и способы по настоящему изобретению могут содержать другие дополнительные активные агенты, например в смеси или вводимые отдельно. Такие дополнительные агенты могут включать антиген (например вакцину), химиотерапевтический агент, цитотоксический агент, антитело, противовирусный агент, цитокин, агонист рецептора фактора некроза опухоли (TFR) или дополнительный модификатор иммунного ответа. Агонисты рецептора TNF, которые можно доставлять в сочетании с композицией по настоящему изобретению, включают агонисты рецептора CD40, такие как те, которые раскрыты в публикации заявки на патент США №2004/0141950 (Noelle et al). Другие активные ингредиенты для использования в комбинации с IRM композиции по настоящему изобретению, включают те ингредиенты, которые раскрыты, например, в публикации заявки на патент США №2003/0139364 (Krieg et al).
Было показано, что IRM соединения формулы I индуцируют продуцирование цитокинов, таких как TNF-α (смотри, например, патент США №7,799,800 и патентную публикацию США №2013/0230578). Способность индуцировать продуцирование цитокикнов указывает на то, что IRM соединения, используемые в композициях по изобретению, могут модулировать иммунный ответ множеством разных путей, что делает IRM соединения полезными в лечении целого ряда расстройств. Другие цитокины, чье продуцирование может быть индуцировано введением композиций, раскрытых в данном документе, обычно включают интерфероны типа I (например, INF-α), IL-1, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12, MIP-1, МСР-1 и целый ряд других цитокинов. Среди других эффектов эти и другие цитокины ингибируют продуцирование вирусов и рост опухолевых клеток, что делает композиции по настоящему изобретению полезными в лечении вирусных заболеваний и неопластических заболеваний. Например, было показано, что фактор некроза опухоли, интерфероны или интерлейкины стимулируют быстрое высвобождение некоторых моноцит/макрофаг-производных цитокинов и способны также стимулировать В-клетки секретировать антитела, которые играют важную роль в противовирусной и противоопухолевой активности.
В некоторых воплощениях композиции по настоящему изобретению полезны для лечения сблидных опухолей, таких как опухоли в области головы и шеи, опухоли молочной железы, лимфома, меланома и опухоли мочевого пузыря. В некоторых воплощениях композиции по настоящему изобретению полезны для лечения кожной Т-клеточной лимфомы.
В некоторых воплощениях композиции по настоящему изобретению полезны для лечения вирусных бородавок и гипертрофических или келоидных рубцов.
Согласно настоящему изобретению предложен также способ доставки фармацевтической композиции, описанной в данном документе, включающий инъецирование этой композиции субъекту. Инъецирование может быть, например, подкожным, внутримышечным или в выбранный участок ткани, такой как опухолевое образование. В некоторых воплощениях инъецируют в опухолевое образование, в бородавку или в гипертрофическую рубцовую ткань.
Согласно настоящему изобретению предложен также способ лечения заболевания, включающий инъецирование субъекту, нуждающемуся в лечении этого заболевания, любой из композиций, описанных в данном документе.
Способы по настоящему изобретению можно осуществлять применительно к любому подходящему субъекту. Подходящие субъекты включают животных, таких как люди, приматы, не являющиеся людьми, грызуны, собаки, кошки, лошади, свиньи, овцы, козы или коровы.
Животное, которому вводят композицию для лечения, может иметь заболевание (например, вирусное или неопластическое заболевание), и введение соединения может обеспечивать терапевтическое лечение. Типичные состояния, которые можно лечить путем введения композиции по настоящему изобретению, включают:
(а) неопластические заболевания, такие как меланома, лейкозы (например, миелогенный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, множественная миелома, неходжкинская лимфома, кожная Т-клеточная лимфома, В-клеточная лимфома и волосковоклеточный лейкоз), рак молочной железы, рак легкого, рак предстательной железы, рак толстой кишки, рак в области головы или шеи, рак мочевого пузыря и другие виды рака;
(б) вирусные заболевания, такие как заболевания, возникающие вследствие инфицирования поксивирусом (например, ортопоксивирусом, таким как вирус натуральной оспы или вирус коровьей оспы, или вирусом контагиозного моллюска) или паповавирусом (например, папилломавирусами, такими как те, которые вызывают образование генитальных бородавок, обыкновенных бородавок или плоских бородавок);
(в) заболевания, связанные с заживлением ран, такие как ингибирование образования келоида и другие типы рубцевания (например, усиление заживления ран, включая хронические раны).
В некоторых воплощениях заболевание, которое лечат, представляет собой неопластическое заболевание. В некоторых воплощениях композицию инъецируют в опухолевое образование. В некоторых воплощениях заболевание, которое лечат, выбрано из рака в области головы или шеи, рака молочной железы, лимфомы, меланомы и рака мочевого пузыря.
В некоторых воплощениях заболевание, которое лечат, представляет собой вирусное заболевание, которое вызывает образование бородавок. В некоторых воплощениях композицию инъецируют в бородавку.
Следует иметь в виду, что при лечении, например, заболеваний, упомянутых выше, композиции, раскрытые в данном документе, можно использовать также в комбинации с другими терапиями, такими как другие активные агенты и другие процедуры (например, облучение, химиотерапия, химическая абляция, лазерная абляция, криотерапия и хирургическое удаление).
Точное количество IRM соединения в композициях, которое будет терапевтически эффективным для способов по настоящему изобретению, и окончательный режим, например, будут варьировать в соответствии с факторами, известными в данной области, включающими природу носителя, размер и состояние иммунной системы субъекта (например, подавленная, ослабленная, стимулированная), вид, которому вводят композицию, выбранный режим введения доз, участок применения, конкретная композиция и состояние, которое лечат. Соответственно, нецелесообразно излагать вообще состав композиции, которая содержит этанол, кунжутное масло и IRM соединение формулы I, или количество IRM соединения, которое составляет эффективное количество, или режим введения доз, который является эффективным для всех возможных применений. Специалисты в данной области, однако, легко могут определить подходящие композиции, терапевтически эффективные количества IRM соединения и режим введения доз, основываясь на методологических указаниях, представленных в данном документе, доступной в данной области информации, относящейся к IRM соединениям, и рутинном тестировании. Термин "терапевтически эффективное количество" означает, таким образом, количество IRM соединения, достаточное для индуцирования терапевтического или профилактического эффекта, такого как индуцирование цитокинов, ингибирование ТН2 иммунного ответа, противовирусная или противоопухолевая активность, снижение рубцевания или усиление заживления ран.
Количество композиции или IRM соединения в композиции, эффективное для индуцирования биосинтеза цитокинов, представляет собой количество, достаточное для того, чтобы заставить один или более типов клеток, таких как моноциты, макрофаги, дендритные клетки и В-клетки, продуцировать такое количество одного или более цитокинов, таких как, например, IFN-α, TNF-α, IL-1, IL-6, IL-10 и IL-12, которое выше по сравнению с исходным уровнем таких цитокинов. Точное количество будет варьировать в зависимости от факторов, известных в данной области, но ожидается, что оно будет представлять собой дозу от примерно 10 нанограммов на килограмм (нг/кг) до примерно 50 миллиграммов на килограмм (мг/кг), в некоторых воплощениях от примерно 10 микрограммов на килограмм (мкг/кг) до примерно 5 мг/кг, от примерно 100 мкг/кг до примерно 1 мг/кг или от примерно 0,01 мг/м2 до примерно 10 мг/м2. Альтернативно, доза может быть рассчитана с использованием фактической массы тела, измеренной непосредственно перед началом курса лечения. Для дозировок, рассчитанных этим способом, площадь поверхности тела (м2) рассчитывают перед началом курса лечения с использованием метода Дюбуа (Dubois): м2=(вес кг0,425×рост см0,725)×0,007184. Количество, эффективное для лечения или подавления вирусной инфекции, например, представляет собой количество, которое будет вызывать ослабление одного или более проявлений вирусной инфекции, таких как вирусные повреждения, вирусная нагрузка, скорость продуцирования вируса и летальность, по сравнению с контрольными животными, которых не лечили, и может включать любые вышеупомянутые дозы. Количество соединения или фармацевтической композиции, эффективное для лечения неопластического состояния, представляет собой количество, которое будет вызывать сокращение размеров опухоли или количества опухолевых очагов, и может включать любую из вышеупомянутых доз.
Композиции по изобретению могут индуцировать продуцирование некоторых цитокинов и являются полезными в качестве модификаторов иммунного ответа, которые могут модулировать иммунный ответ множеством разных путей, что делает их полезными в лечении целого ряда расстройств. Среди других эффектов эти и другие цитокины могут ингибировать продуцирование вирусов и рост опухолевых клеток, что делает композиции полезными, например, для лечения вирусных и неопластических заболеваний. Необходимо также отметить, что композиции можно вводить до приобретения заболевания, так что введение композиции может обеспечивать профилактическое лечение.
В дополнение к способности вызывать индуцирование цитокинов композиции по изобретению могут воздействовать на другие аспекты врожденного иммунного ответа. Например, они могут стимулировать активность естественных клеток-киллеров, то есть оказывать воздействие, которое может быть следствием индуцирования цитокинов. Композиции могут также вызывать активацию макрофагов, которые в свою очередь стимулируют секрецию оксида азота и продуцирование дополнительных цитокинов. Кроме того, композиции могут осуществлять пролиферацию и дифференцировку В-лимфоцитов.
Композиции по изобретению могут также оказывать воздействие на приобретенный иммунный ответ. Например, при введении композиции может быть опосредованно индуцировано продуцирование Т-хелпера типа 1 (ТН1) цитокина IF-γ, и может быть подавлено продуцирование Т-хелперов типа 2 (TH2) цитокинов IL-4, IL-5 и IL-13.
Композиции по настоящему изобретению могут быть особенно полезными у индивидуумов с ослабленной иммунной функцией. Например, соединения или соли можно использовать для лечения оппортунистических инфекций и опухолей, которые возникают после подавления опосредованного клетками иммунитета у, например, пациентов с трансплантатом, раковых пациентов и ВИЧ-пациентов.
Согласно изобретению предложен также, например, способ лечения вирусной инфекции у животного и способ лечения неопластического заболевания у животного, включающий введение инъецированием эффективного количества композиции по изобретению этому животному. Количество, эффективное для лечения или ингибирования вирусной инфекции, представляет собой количество, которое будет вызывать ослабление одного или более проявлений вирусной инфекции, таких как вирусные повреждения, вирусная нагрузка, скорость продуцирования вирусов и летальность, по сравнению с контрольными животными, которых не лечили. Точное количество, эффективное для такого лечения, будет варьировать в зависимости от факторов, известных в данной области, но ожидается, что оно будет равно количеству, обеспечивающему доставку дозы IRM соединения от примерно 100 нг/кг до примерно 50 мг/кг, предпочтительно от примерно 1 мкг/кг до примерно 5 мг/кг. Количество композиции, эффективное для лечения неопластического состояния, представляет собой количество, которое будет вызывать сокращение размеров опухоли или количества опухолевых очагов. И снова, точное количество будет варьировать в зависимости от факторов, известных в данной области, но ожидается, что оно будет равно количеству в заданной концентрации лекарственного средства для доставки посредством инъецирования дозы IRM соединения, составляющей от примерно 100 нг/кг до примерно 50 мг/кг, например от примерно 1 мкг/кг до примерно 5 мг/кг.
Конкретные примеры применений композиций по изобретению, доставляемых инъецированием, включают, без ограничения, лечение рака в области головы и шеи и рака молочной железы.
Инъецируемые композиции, описанные в данном документе, могут содержать IRM соединение в диапазоне концентраций с нижним пределом, обусловленным минимальной терапевтической эффективностью IRM соединения, и верхним пределом, обусловленным, прежде всего, растворимостью лекарственного средства. Как правило, концентрация IRM соединения будет составлять от примерно 0,1 мг/мл до примерно 10 мг/мл (приблизительно от 0,1% до примерно 1% масс.). В некоторых воплощениях IRM соединение присутствует в количестве от примерно 0,1 мг/мл до примерно 6 мг/мл. В некоторых воплощениях IRM соединение присутствует в количестве от примерно 0,5 мг/мл до примерно 3 мг/мл.
В некоторых воплощениях способов, раскрытых в данном документе, композицию можно вводить, например, с частотой от одной дозы до множества доз в неделю, хотя в некоторых воплощениях способы по настоящему изобретению могут быть осуществлены путем введения композиции с частотой, выходящей за этот диапазон. В некоторых воплощениях композицию можно вводить от примерно одного раза в месяц до примерно пяти раз в неделю, в некоторых воплощениях композицию вводят один раз в неделю.
Согласно настоящему изобретению предложен также способ изготовления фармацевтических композиций, содержащих этанол, кунжутное масло и IRM соединение формулы I. В некоторых воплощениях способ изготовления включает растворение IRM соединения в этаноле для создания раствора этанол-IRM соединение. В некоторых воплощениях IRM соединение полностью растворяют в этаноле, а в некоторых воплощениях небольшое количество IRM соединения будет оставаться нерастворенным, но большая часть IRM соединения будет растворенной. Раствор этанол-IRM соединение затем смешивают с кунжутным маслом с получением композиции кунжутное масло-этанол-IRM соединение. В некоторых воплощениях IRM соединение будут полностью растворять в композиции кунжутное масло-этанол-IRM соединение, а в некоторых воплощениях небольшое количество IRM соединения будет оставаться нерастворенным в композиции кунжутное масло-этанол-IRM соединение, но большая часть IRM соединения будет растворенной.
В некоторых воплощениях способ изготовления включает смешивание IRM соединения с этанолом и кунжутным маслом одновременно с получением композиции кунжутное масло-этанол-IRM соединение. В некоторых воплощениях IRM соединение будут полностью растворять в композиции кунжутное масло-этанол-IRM соединение, а в некоторых воплощениях небольшое количество IRM соединения будет оставаться нерастворенным в композиции кунжутное масло-этанол-IRM соединение, но большая часть IRM соединения будет растворенной.
В некоторых воплощениях способ изготовления может включать стадию выпаривания части этанола из композиции кунжутное масло-этанол-IRM соединение. Такой способ обеспечивает более быстрое растворение IRM в растворе кунжутное масло-этанол за счет использования избытка этанола (этанол, присутствующий за пределами растворимости в кунжутном масле) во время стадий смешивания. В некоторых воплощениях после выпаривания части этанола этанол остается в конечной композиции, например в количестве от 1% масс. до 9% масс.
Должно быть понятно, что любые добавки, описанные выше, могут быть добавлены во время любой из вышеописанных стадий смешивания.
Воплощения данного изобретения дополнительно иллюстрируются приведенными ниже не ограничивающими примерами, но конкретные вещества и их количества, указанные в этих примерах, а также другие условия и подробности не должны неоправданно толковаться как ограничение данного изобретения.
Примеры
Компоненты инъекционной композиции
Компонент N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид был получен по методике синтеза, описанной в Примере 1 в патентной публикации США №2013/0230578 (Wightman).
Этанол (крепости 200, USP-сорта) получали от Pharmaco-AAPER (Brookfield, СТ) или Columbus Chemical industries (Columbus, WI). Для конечных композиций, содержащих ВНА, свежий исходный образец деоксигенированного этанола получали путем пропускания медленного потока сухого газообразного азота через этанол (барботаж) в течение периода времени примерно от пяти до десяти минут. Сосуд затем немедленно закрывали.
Кунжутное масло было получено от Croda Inc. (Edison, J) в виде продукта SUPER REFINED® Sesame Oil NF/NP-сорта (кодовый номер продукта SR40280). Обозначение "NP" указывает на то, что кунжутное масло не содержит BET (бутилированный гидрокситолуол) в качестве добавленного антиоксиданта. Согласно производителю кунжутное масло с обозначением SUPER REFINED® было очищено флэш-хроматографией для удаления полярных примесей, присутствующих в кунжутном масле. Для конечных композиций, содержащих добавленный ВНА, свежий исходный образец деоксигенированного этанола получали путем пропускания медленного потока сухого газообразного азота через этанол (барботаж) в течение периода времени примерно от десяти минут до двадцати минут. Сосуд затем немедленно закрывали.
Бутилированный гидроксианизол сорта NF (ВНА) был получен от Spectrum Chemical Company (New Brunswick, NJ). Композиции, содержащие ВНА, получали с концентрацией ВНА 300 млн-1.
Аналитический метод
Содержание N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида в инъекционной композиции определяли с использованием обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (прибор Agilent 1100 HPLC, оснащенный ультрафиолетовым детектором, установленным на 321 нм, Agilent Technologies, Santa Clara, CA). Использовали аналитическую колонку Zorbax Bonus RP длиной 150 мм, внутренним диаметром 4,6 мм и размером частиц 3,5 микрон (Agilent Technologies). Колонку поддерживали при 45°C. Градиентное элюирование проводили с использованием подвижной фазы, состоящей из 0,1% трифторуксусной кислоты в воде, метаноле и изопропаноле. Начальная подвижная фаза состояла из 0,1% трифторуксусной кислоты и метанола в соотношении 85:15. Конечная подвижная фаза состояла из 0,1% трифторуксусной кислоты, метанола и изопропанола в соотношении 5:40:55. Скорость потока была равна 1,0 мл в минуту.
Пример 1. Инъекционная композиция: Этанол (7,5 массовых процентов) в кунжутном масле
N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)-октадеканамид (0,21 г) и этанол (26,79 г) добавляли во стеклянный сосуд янтарного цвета. Сосуд закрывали и помещали в ультразвуковую ванну (Branson model S510-DTH, Branson Ultrasonics, Danbury, СТ). Образец обрабатывали ультразвуком до тех пор, пока весь N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид не растворился (примерно десять минут). Полученный этанольный раствор содержал 0,78 массовых процентов N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида. Затем 21,59 г этанольного раствора, содержащего 0,78 массового процента N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида переносили в стеклянный сосуд янтарного цвета, содержащий 277,5 г кунжутного масла. В этот сосуд также добавляли дополнительные 1,08 г этанола. Сосуд закрывали и затем помещали на лабораторный валковый смеситель. Композицию перемешивали до тех пор, пока она визуально не стала прозрачной (перемешивание в течение примерно 15 минут). На конечной стадии композицию пропускали через 0,2-микронный полиэфирсульфоновый (PSA) мембранный фильтр (EMD Millipore, Billerica, MA), и 6 мл композиции собирали в чистый стеклянный "пенициллиновый" флакон (Miller Analytical Company, Bristol, PA). Свободное пространство в верхней части этого флакона продували потоком сухого газообразного азота, и флакон закрывали обжимной алюминиевой крышкой с серой хлорбутил-изопреновой уплотнительной прокладкой (Miller Analytical Company). Концентрация N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида в конечной композиции составляла примерно 0,5 мг/мл.
Пример 2. Инъекционная композиция: Этанол (7,5 массовых процентов) в кунжутном масле, содержащем ВНА
N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)-октадеканамид (0,21 г) и деоксигенированный этанол (26,79 г) добавляли в стеклянный сосуд янтарного цвета. Сосуд закрывали и помещали в ультразвуковую ванну (Branson model S510-DTH). Образец обрабатывали ультразвуком до тех пор, пока весь N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид не растворился (примерно десять минут). Полученный этанольный раствор содержал 0,78 массовых процентов N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)-октадеканамида. Затем 21,59 г этанольного раствора, содержащего 0,78 массовых процентов N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида, и ВНА (90 мг) переносили в стеклянный сосуд янтарного цвета, содержащий 277,5 г деоксигенированного кунжутного масла. Дополнительные 1,08 г деоксигенированного этанола также добавляли в этот сосуд. Медленный поток сухого газообразного азота затем пропускали через композицию в течение примерно 1 секунд. Сосуд закрывали и затем помещали на лабораторный валковый смеситель. Композицию перемешивали до тех пор, пока она визуально не стала прозрачной (перемешивание в течение примерно 5 минут). На конечной стадии композицию пропускали через 0,2-микронный полиэфирсульфоновый (PSA) мембранный фильтр (EMD Millipore, Billerica, MA), и 6 мл композиции собирали в прозрачный стеклянный "пенициллиновый" флакон (Miller Analytical Company, Bristol, PA). Свободное пространство в верхней части флакона продували потоком сухого газообразного азота, и флакон закрывали обжимной алюминиевой крышкой с серой хлорбутил-изопреновой уплотнительной прокладкой (Miller Analytical Company). Концентрация N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида в конечной композиции составляла примерно 0,5 мг/мл.
Пример 3. Инъекционная композиция: Этанол (5 массовых процентов) в кунжутном масле
N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид (0,30 г) и этанол (15,0 г) добавляли в стеклянный сосуд янтарного цвета. Сосуд закрывали и помещали в ультразвуковую ванну (Branson model 8510-DTH). Образец обрабатывали ультразвуком до тех пор, пока весь N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)-октадеканамид не растворился (примерно десять минут). Полученный этанольный раствор содержал 2,0 массового процента N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида. Затем 0,29 г этанольного раствора, содержащего 2,0 массового процента N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида переносили в стеклянный сосуд янтарного цвета, содержащий 10,5 г кунжутного масла. Дополнительные 0,23 г этанола также добавляли в этот сосуд. Сосуд закрывали и затем помещали на лабораторный валковый смеситель. Композицию перемешивали до тех пор, пока она визуально не стала прозрачной (перемешивание в течение примерно 15 минут). На конечной стадии композицию пропускали через 0,2-микронный полиэфирсульфоновый (PSA) мембранный фильтр (EMD Millipore, Billerica, MA), и 6 мл композиции собирали в прозрачный стеклянный "пенициллиновый" флакон (Miller Analytical Company, Bristol, PA). Свободное пространство в верхней части флакона продували потоком сухого газообразного азота, и флакон закрывали алюминиевой обжимной крышкой, с серой хлорбутил-изопреновой уплотнительной прокладкой (Miller Analytical Company). Концентрация N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида в конечной композиции составляла примерно 0,5 мг/мл.
Пример 4. Инъекционная композиция: Этанол (9 массовых процентов) в кунжутном масле
N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид (0,30 г) и этанол (15,0 г) добавляли в стеклянный сосуд янтарного цвета. Сосуд закрывали и помещали в ультразвуковую ванну (Branson model 8510-DTH). Образец обрабатывали ультразвуком до тех пор, пока весь N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)-октадеканамид не растворился (примерно десять минут). Полученный этанольный раствор содержал 2,0 массовых процента N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида. Затем 3,0 г этанольного раствора, содержащего 2,0 массовых процента N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида, переносили в стеклянный сосуд янтарного цвета, содержащий 54,5 г кунжутного масла. Дополнительные 2,4 г этанола также добавляли в этот сосуд. Сосуд закрывали и затем помещали на лабораторный валковый смеситель. Композицию перемешивали до тех пор, пока она визуально не стала прозрачной (перемешивание в течение примерно 15 минут). На конечной стадии композицию пропускали через 0,2-микронный полиэфирсульфоновый (PSA) мембранный фильтр (EMD Millipore, Billerica, MA), и 6 мл композиции собирали в прозрачный стеклянный "пенициллиновый" флакон (Miller Analytical Company, Bristol, PA). Свободное пространство в верхней части флакона продували потоком сухого газообразного азота, и флакон закрывали алюминиевой обжимной крышкой с серой хлорбутил-изопреновой уплотнительной прокладкой (Miller Analytical Company). Концентрация N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида в конечной композиции составляла примерно 1 мг/мл.
Пример 5. Инъекционная композиция: Этанол (8,5 массовых процентов) в кунжутном масле
N-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид (1,22 г) и этанол (60,0 г) добавляли в стеклянный сосуд янтарного цвета. Сосуд закрывали и помещали в ультразвуковую ванну (Branson model 8510-DTH). Образец обрабатывали ультразвуком до тех пор, пока весь N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)-октадеканамид не растворился (примерно тридцать минут). Полученный этанольный раствор содержал 2,0 массовых процента N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида. Затем 9,0 г этанольного раствора, содержащего 2,0 массовых процента N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида, переносили в стеклянный сосуд янтарного цвета, содержащий 60,0 г кунжутного масла. Сосуд закрывали и затем помещали на лабораторный валковый смеситель. Композицию перемешивали до тех пор, пока она визуально не стала прозрачной (перемешивание в течение примерно 15 минут). Поток сухого газообразного азота пропускали над перемешиваемой композицией до выпаривания 3,4 г этанола. На конечной стадии композицию пропускали через 0,2-микронный полиэфирсульфоновый (PSA) мембранный фильтр (EMD Millipore, Billerica, MA), и 6 мл композиции собирали в прозрачный стеклянный "пенициллиновый" флакон (Miller Analytical Company, Bristol, PA). Свободное пространство в верхней части флакона продували потоком сухого газообразного азота, и флакон закрывали алюминиевой обжимной крышкой с серой хлорбутил-изопреновой уплотнительной прокладкой (Miller Analytical Company). Концентрация N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида в конечной композиции составляла примерно 3 мг/мл.
Пример 6. Инъекционная композиция: Этанол (9 массовых процентов) в кунжутном масле
N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид (1,22 г) и этанол (60,0 г) добавляли в стеклянный сосуд янтарного цвета. Сосуд закрывали и помещали в ультразвуковую ванну (Branson model 8510-DTH). Образец обрабатывали ультразвуком до тех пор, пока весь N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)-октадеканамид не растворился (примерно тридцать минут). Полученный этанольный раствор содержал 2,0 массовых процента N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида. Затем 25,0 г этанольного раствора, содержащего 2,0 массовых процента N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида, переносили в стеклянный сосуд янтарного цвета, содержащий 90,5 г кунжутного масла. Сосуд закрывали и затем помещали на лабораторный валковый смеситель. Композицию перемешивали до тех пор, пока она визуально не стала прозрачной (перемешивание в течение примерно 15 минут). Поток сухого газообразного азота пропускали над перемешиваемой композицией до выпаривания 15,5 г этанола. На конечной стадии композицию пропускали через 0,2-микронный полиэфирсульфоновый (PSA) мембранный фильтр (EMD Millipore, Billerica, MA), и 6 мл композиции собирали в прозрачный стеклянный "пенициллиновый" флакон (Miller Analytical Company, Bristol, PA). Свободное пространство в верхней части флакона продували потоком сухого газообразного азота, и флакон закрывали алюминиевой обжимной крышкой с серой хлорбутил-изопреновой уплотнительной прокладкой (Miller Analytical Company). Концентрация N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида в конечной композиции составляла примерно 5 мг/мл.
Пример 7. Инъекционная композиция: Этанол (6,5 массовых процентов) в кунжутном масле
N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид (0,30 г) и этанол (15,3 г) добавляли в стеклянный сосуд янтарного цвета. Сосуд закрывали и помещали в ультразвуковую ванну (Branson model 8510-DTH). Образец обрабатывали ультразвуком до тех пор, пока весь N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)-октадеканамид не растворился (примерно десять минут). Полученный этанольный раствор содержал 1,9 массовых процентов N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида. Затем 0,18 г этанольного раствора, содержащего 1,9 массовых процентов N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида, переносили в стеклянный сосуд янтарного цвета, содержащий 31,7 г кунжутного масла. Дополнительные 2,0 г этанола также добавляли в этот сосуд. Сосуд закрывали и затем помещали на лабораторный валковый смеситель. Композицию перемешивали до тех пор, пока она визуально не стала прозрачной (перемешивание в течение примерно 15 минут). На конечной стадии композицию пропускали через 0,2-микронный полиэфирсульфоновый (PSA) мембранный фильтр (EMD Millipore, Billerica, MA), и 6 мл композиции собирали в прозрачный стеклянный "пенициллиновый" флакон (Miller Analytical Company, Bristol, PA). Свободное пространство в верхней части флакона продували потоком сухого газообразного азота, и флакон закрывали алюминиевой обжимной крышкой с серой хлорбутил-изопреновой уплотнительной прокладкой (Miller Analytical Company). Концентрация N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид в конечной композиции составляла примерно 0,1 мг/мл.
Пример 8. Инъекционная композиция: Этанол (7,2 массовых процентов) в кунжутном масле
Раствор этанола (7,2 массовых процентов) в кунжутном масле получали путем добавления 3,9 г этанола и 50,0 г кунжутного масла в сосуд янтарного цвета при медленном перемешивании. N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид (53,9 мг) затем добавляли в раствор этанол/кунжутное масло. Сосуд закрывали и помещали в ультразвуковую ванну (Branson model 8510-DTH). Образец обрабатывали ультразвуком в течение 30 минут и затем дополнительно встряхивали на шейкере (Erbach Corporation, Ann Arbor, MI) до тех пор, пока весь N-(4-{[4-амино-2-бутил-1H-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид не растворился (примерно 20 часов). Полученный раствор пропускали через 0,2-микронный полиэфирсульфоновый (PSA) мембранный фильтр (EMD Millipore, Billerica, MA) и собирали в стеклянный сосуд. Свободное пространство в верхней части сосуда продували потоком сухого газообразного азота, и сосуд закрывали. Концентрация N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида в конечной композиции составляла примерно 1 мг/г.
Пример 9. Дополнительные инъекционные композиции
Ряд композиций с разными уровнями концентрации этанола (массовых процентов этанола в композиции), концентрации N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида (мг/мл композиции) и концентрации ВНА (млн-1) были получены по общим методикам, описанным в Примерах 1-7. Для Композиций с 9-Н по 9-J использовали деоксигенированный этанол и кунжутное масло. Композиции приведены в Таблице 1.
Были получены композиции, в которых содержание этанола было снижено за счет включения стадии выпаривания этанола непосредственно перед конечной стадией фильтрования. Выпаривание этанола из композиции осуществляли путем пропускания потока сухого газообразного азота над перемешиваемой композицией.
Пример 10. Внутриопухолевое (IT) инъецирование
Все процедуры проводили в соответствии с утвержденными протоколами Институционального комитета по уходу за животными и их использованию (Institutional Animal Саге и Use Committee (IACUC)). Животных размещали в приспособлении, которое было сертифицировано Ассоциацией по оценке и сертифицированию ухода за лабораторными животными (Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care (AAALAC, Frederick, MD)). Самки мышей C57BL/6J-Tyr Albino с массой тела 15-20 граммов были получены из Jackson Labs, Bar Harbor, Maine. Изогенная линия клеток меланомы B16.OVA была получена от Dr. Wynette Dietz из Университета Миннесоты. Эта линия клеток была охарактеризована при 3М и определена как экспрессирующая OVA (овальбумин).
Перед созданием опухоль-несущих мышей животных анестезировали 1%-ным изофлураном в воздухонепроницаемом боксе и затем держали под анестезией путем введения 1%-ного изофлурана через лицевую маску. Каждой мыши присваивали индивидуальный идентификатор (индивидуальный татуированный номер на хвосте). Правый бок выбривали, и 5×105 клеток меланомы B16.OVA в 0,1 мл DPBS (фосфатно-солевой буферный раствор Дульбекко) имплантировали подкожно.
Через семь суток после имплантации мышей рандомизировали на 3 группы (Группы А-С) по 20 мышей на группу. В этот момент средний размер опухоли у мышей составлял приблизительно 20 мм2. Животных с неподходящим размером опухоли идентифицировали и исключали из исследования, основываясь на статистическом методе ROUT, разработанном GraphPad Software (La Jolla, CA). Животные Группы А получали внутриопухолевую инъекцию 0,05 мл композиции из Примера 3. Животные Группы В получали инъекцию 0,05 мл композиции из Примера 3, которую вводили подкожно (SC) в боковой участок, противоположный имплантированной опухоли (т.е. в левый бок). Животные Группы С получали внутриопухолевую инъекцию 0,05 мл контрольной композиции-носителя. Контрольная композиция-носитель была такой же, как композиция из Примера 3, за исключением того, что N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид не входил в состав композиции. Все композиции для Групп А-С вводили шприцем на 0,5 мл с иглой размера 26. Всем трем группам инъецировали соответствующую композицию через 7 суток и через 14 суток после имплантации опухоли. Для Групп А и С внутриопухолевую инъекцию делали в центр опухоли. Перед инъекцией животных анестезировали 1%-ным изофлураном через лицевую маску. У каждого животного размер опухоли измеряли калиброванным штангенциркулем с цифровой индикацией. Все опухоли пальпировались и были видимыми. Если измеренный размер опухоли составлял 200 мм2 или больше, то животного подвергали эвтаназии. Животных наблюдали в течение 90 суток после имплантации опухоли. Для каждого животного данные по размеру опухоли приведены в Таблицах 2А-С, и проценты выживших приведены в Таблице 3. Средняя выживаемость, выраженная в сутках, составила 34 суток для Группы А, 22 суток для Группы В и 21,5 суток для Группы С. Данные по выживаемости животных анализировали с использованием программного обеспечения Prism 5.04 (GraphPad Software). Кривые выживаемости Каплан-Мейера (Kaplan-Meier) сравнивали по логарифмическому ранговому критерию Мантеля-Кокса (Mantel-Cox) с последующим попарным сравнением с использованием критерия Гехана-Бреслоу-Уилкоксона (Gehan-Breslow-Wilcoxon). Средняя выживаемость животных Группы А по сравнению с животными Групп В и С была определена как статистически значимая (значение р<0,0001).
Пример 11
Ряд композиций с фиксированными уровнями концентрации этанола (7,5% масс. этанола в композиции), различными уровнями концентрации N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида в диапазоне от 0,1 мг/мл до 2,5 мг/мл и концентрацией ВНА (300 млн-1) были получены по общим методикам, описанным в Примерах 1-7. Для Композиций с 11-А по 11-Е использовали деоксигенированный этанол и кунжутное масло. Композиции приведены в Таблице 4.
Получены композиции, в которых содержание этанола снижено за счет включения стадии выпаривания этанола непосредственно перед конечной стадией фильтрования. Выпаривание этанола из композиции осуществляли путем пропускания потока сухого газообразного азота над перемешиваемой композицией.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| ГЕТЕРОАРИЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ, СОДЕРЖАЩИЕ ИХ КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ С ПРИМЕНЕНИЕМ ЭТИХ СОЕДИНЕНИЙ | 2007 |
|
RU2478635C2 |
| АРИЛЭФИРЗАМЕЩЕННЫЕ ИМИДАЗОХИНОЛИНЫ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ СОСТАВЫ НА ИХ ОСНОВЕ, СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ВИРУСНОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ НА ИХ ОСНОВЕ, СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ОПУХОЛЕВОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ НА ИХ ОСНОВЕ | 2001 |
|
RU2308456C2 |
| ТИОЭФИРЗАМЕЩЕННЫЕ ИМИДАЗОХИНОЛИНЫ | 2001 |
|
RU2315049C2 |
| ПРОИЗВОДНЫЕ 4-АМИНО-ИМИДАЗОХИНОЛИНА, ПОЛЕЗНЫЕ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ЗАБОЛЕВАНИЙ, ОПОСРЕДОВАННЫХ АГОНИСТАМИ TLR7 И/ИЛИ TLR8 | 2015 |
|
RU2698902C2 |
| Новые производные имидазо[4,5-с]хинолина в качестве ингибиторов LRRK2 | 2018 |
|
RU2773516C2 |
| ГЕТЕРОЦИКЛИЛЭФИРЗАМЕЩЕННЫЕ ИМИДАЗОХИНОЛИНЫ | 2001 |
|
RU2351598C2 |
| ИНДАЗОЛЬНЫЕ ИНГИБИТОРЫ СИГНАЛЬНОГО ПУТИ WNT И ИХ ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ ПРИМЕНЕНИЯ | 2017 |
|
RU2682245C1 |
| ТИОЭФИРЗАМЕЩЕННЫЕ ИМИДАЗОХИНОЛИНЫ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ИХ ОСНОВЕ | 2002 |
|
RU2304143C2 |
| Производные бензимидазола, способы их получения и применения | 2017 |
|
RU2779534C2 |
| 2-(Азаиндол-2-ил)бензимидазолы в качестве ингибиторов PAD4 | 2012 |
|
RU2611010C2 |
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к внутриопухолевой инъекционной композиции. Внутриопухолевая инъекционная фармацевтическая композиция содержит кунжутное масло; этанол и являющееся модификатором иммунного ответа соединение N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с][хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид или его фармацевтически приемлемую соль. Представлены: способ доставки фармацевтической композиции; способ лечения заболевания у субъекта, включающий инъецирование в опухолевое образование субъекта, нуждающегося в лечении этого заболевания, композиции, где заболевание выбрано из рака в области головы или шеи, рака молочной железы, лимфомы, меланомы, кожной Т-клеточной лимфомы и рака мочевого пузыря; cпособ изготовления композиции. Вышеописанная композиция эффективна для внутриопухолевого инъекционного введения, для лечения раковых заболеваний. 4 н. и 11 з.п. ф-лы, 3 табл., 11 пр.
1. Внутриопухолевая инъекционная фармацевтическая композиция, содержащая
кунжутное масло;
этанол; и
являющееся модификатором иммунного ответа соединение N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с][хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамид или его фармацевтически приемлемую соль.
2. Композиция по п. 1, где этанол присутствует в концентрации от 1 до 9 мас.%.
3. Композиция по п. 1, где этанол присутствует в концентрации от 3 до 8 мас.%.
4. Композиция по п. 1, где этанол присутствует в концентрации от 6,5 до 7,5 мас.%.
5. Композиция по п. 1, где являющееся модификатором иммунного ответа соединение присутствует в концентрации от 0,1 до 10 мг/мл.
6. Композиция по п. 1, где гидроксильное число кунжутного масла меньше или равно 2.
7. Композиция по п. 1, где кислотное число кунжутного масла меньше или равно 0,1.
8. Композиция по п. 1, где пероксидное число кунжутного масла меньше или равно 1.
9. Композиция по п. 1, где общее содержание азота в кунжутном масле меньше или равно 1 млн-1.
10. Композиция по п. 1, где кунжутное масло содержит не более 0,05 мас.% сезамина и не более 0,05 мас.% сезамолина.
11. Композиция по п. 1, содержащая:
кунжутное масло;
7,5 мас.% этанола;
300 млн-1 ВНА (булилированный гидроксианизол); и
от 0,1 мг/мл до примерно 2,5 мг/мл N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-
имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида.
12. Способ доставки фармацевтической композиции по любому из пп. 1-11, включающий инъецирование этой композиции в опухолевое образование субъекта.
13. Способ лечения заболевания у субъекта, включающий инъецирование в опухолевое образование субъекта, нуждающегося в лечении этого заболевания, композиции по любому из пп. 1-11, где заболевание выбрано из рака в области головы или шеи, рака молочной железы, лимфомы, меланомы, кожной Т-клеточной лимфомы и рака мочевого пузыря.
14. Способ изготовления композиции по любому из пп. 1-11, включающий
обеспечение наличия
кунжутного масла;
этанола; и
являющегося модификатором иммунного ответа соединения N-(4-{[4-амино-2-бутил-1Н-имидазо[4,5-с][хинолин-1-ил]окси}бутил)октадеканамида или его фармацевтически приемлемой соли;
объединение этого IRM соединения с этанолом с образованием раствора этанол-IRM соединение; и
объединение раствора этанол-IRM соединение с кунжутным маслом с образованием композиции кунжутное масло-этанол-IRM соединение.
15. Способ по п. 14, дополнительно включающий стадию выпаривания части этанола из композиции кунжутное масло-этанол-IRM соединение.
| US 2013230578 A1, 05.09.2013 | |||
| WO 2011112669 A1, 15.09.2011 | |||
| ПНЕВМАТИЧЕСКИЙ ВЫСЕВАЮЩИЙ АППАРАТ ДЛЯ ГНЕЗДОВОГО ПОСЕВА | 2015 |
|
RU2592575C1 |
| Raymond C | |||
| Rowe, Paul J | |||
| Sheskey, Sian C | |||
| Owen, Handbook of Pharmaceutical Excipients // Pharmaceutical Press.- 2006, P | |||
| СИГНАЛЬНОЕ УСТРОЙСТВО | 1923 |
|
SU646A1 |
| Пружинный пистолет пугач | 1927 |
|
SU5762A1 |
| T | |||
| Tashior, Y | |||
| Fukuda, T | |||
| Osawa, M | |||
| Naiki | |||
| Способ приготовления консистентных мазей | 1919 |
|
SU1990A1 |
| - V | |||
| Приспособление для получения кинематографических стерео снимков | 1919 |
|
SU67A1 |
| - P | |||
| Способ выделения сульфокислот из нефтяных масел | 1913 |
|
SU508A1 |
| МОДИФИЦИРОВАННЫЕ БЕЛКИ, СКОНСТРУИРОВАННЫЕ ТОКСИНЫ И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ | 2002 |
|
RU2305684C2 |
| БЕЛИКОВ В.Г | |||
| Фармацевтическая химия | |||
| М.: Высшая школа, 1993, с | |||
| Зубчатое колесо со сменным зубчатым ободом | 1922 |
|
SU43A1 |
