КРИСТАЛЛИЧЕСКИЕ ФОРМЫ 9-АМИНОМЕТИЛ-ЗАМЕЩЕННОГО СОЕДИНЕНИЯ ТЕТРАЦИКЛИНА И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 2022 года по МПК C07D209/54 A61K31/65 A61P31/00 A61P31/04 A61P35/00 A61P3/10 

Область техники

Настоящее изобретение относится к кристаллическим формам 9-аминометил-замещенного соединения тетрациклина и способу их получения, и применению кристаллических форм соединения в производстве лекарственного средства для лечения и/или профилактики заболевания, вызванного чувствительными к тетрациклину бактериями и/или резистентными к тетрациклину бактериями.

Уровень техники

Тетрациклиновые антибиотики являются разновидностью антибиотиков широкого спектра для перорального применения, которые образуются ферментацией актиномицетов-стрептомицетов. Они обладают хорошим фармакологическим действием против риккетсий, многих грамположительных и грамотрицательных бактерий, патогенов венерической лимфогранулемы, патогенов конъюнктивита с включениями и патогенов орнитоза.

В начале 1990-х был разработан новый класс тетрациклиновых лекарственных средств (названных глициклины), и его типовым лекарственным средством является тигециклин (GAR-936), обладающий широким антибактериальным спектром. Тигециклин не только обладает таким же антибактериальным действием, как и предыдущие тетрациклины, но также обладает антибактериальным действием против патогенов, которые были резистентны к тетрациклинам из-за механизма оттока и механизмов рибосомной защиты. До сих пор на рынке не доступны пероральные формы тигециклина.

Кроме того, в WO 2013013505 A1 описано соединение, представленное следующей формулой (I)

Его химическое наименование (4S,4aS,5aR,12aS)-9-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-илметил)-4,7-бис(диметиламино)-3,10,12,12a-тетрагидрокси-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамид. Это соединение обладает широким антибактериальным спектром и высокой антибактериальной активностью.

В WO 2013013505 A1 также описан способ получения соединения, представленного формулой (1). Указанный способ дает аморфную форму соединения, представленного формулой (1) (Фиг. 13), но не дает какую-либо кристаллическую форму соединения, представленного формулой (1).

Сущность изобретения

В процессе изучения и разработки соединения, представленного формулой (1), было обнаружено, что соединение, представленное формулой (1), предрасположено к образованию нестабильного сольвата, что дает неудовлетворительную чистоту, содержание и стабильность. Для получения кристаллических форм с высокой чистотой, высоким содержанием и хорошей стабильностью, авторы данного изобретения провели глубокие исследования на кристаллических формах соединения, представленного формулой (1), и наконец обнаружили кристаллические формы соединения, представленного формулой (1).

Объектом данного изобретения является получение кристаллических форм соединения, представленного формулой (1).

Другим объектом данного изобретения является получением фармацевтически приемлемых кристаллических форм соединения, представленного формулой (1).

Другим объектом данного изобретение является получение способа получения кристаллических форм соединения, представленного формулой (1), и способа превращения одной кристаллической формы в другую кристаллическую форму.

Другим объектом данного изобретения является применение кристаллических форм соединения, представленного формулой (1), в лекарственном средстве для профилактики и/или лечения заболевания, вызванного чувствительными к тетрациклину бактериями и/или резистентными к тетрациклину бактериями, где указанным заболеванием, вызванным чувствительными к тетрациклину бактериями и/или резистентными к тетрациклину бактериями, является, например, инфекция, рак, диабет и другие заболевания, которые, как установлено, поддаются лечению или профилактике другими тетрациклиновыми соединениями.

Авторы данного изобретения провели глубокое исследование на кристаллических формах соединения, представленного формулой (1), и обнаружили:

(1) Аморфная форма

Способ получения, описанный в WO 2013013505 A1, дает аморфную форму соединения, представленного формулой (1), которая имеет пРСА спектр, показанный на Фиг. 13.

Аморфная форма соединения, представленного формулой (1), имеет низкое содержание и сложно очищается. В способе, описанном в примере 1, первая очистка хроматографией на колонке неочищенного продукта дает содержание 84,8%, вторая очистка дает содержание 87,7%, и содержание после нескольких очисток все еще не может удовлетворить требование фармацевтического производства.

Также в исследовании обнаружено, что аморфная форма соединения, представленного формулой (1), имеет плохую стабильность, как показано в таблице 1, содержание через 14 дней при высокой температуре 60°C снижается на 6,6%, содержание через 14 дней в условиях высокой влажности 40°C/75%±5% ОВ снижается на 7,5%, и содержание через 14 дней в условиях освещения 4500 люкс ±500 люкс снижается на 12,1%. Аморфная форма соединения, представленного формулой (1), сама по себе имеет низкое содержание при ее получении, и обладает плохой стабильностью при высокой температуре, при высокой влажности и при освещении. Поэтому аморфная форма соединения, представленного формулой (1), не подходит для фармацевтического производства.

Таким образом, аморфная форма соединения, представленного формулой (1), не может удовлетворять требованиям фармацевтического производства, и поэтому существует крайняя необходимость в поиске фармацевтически приемлемой кристаллической формы, имеющей лучшую чистоту, содержание и стабильность.

(2) Кристаллические формы

Авторы данного изобретения также провели множество исследований на кристаллических формах соединения, представленного формулой (1), и обнаружили кристаллические формы I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII соединения, представленного формулой (1). Необходимо особенно отметить то, что эти восемь различных кристаллических форм не могут быть предсказаны по химической формуле соединения, представленного формулой (1), и структура или свойства любой из этих кристаллических форм также не может быть предсказана.

Кристаллические формы соединения, представленного формулой (1), имеют порошковые рентгеновские дифрактограммы, имеющие следующие характеристические пики, выраженные градусами 2θ, when при измерении с применением облучения Cu-Ka:

Кристаллическая форма I: 10,6°±0,2°, 13,3°±0,2°, 15,9°±0,2°, 24,0°±0,2°;

Кристаллическая форма II: 10,2°±0,2°, 15,9°±0,2°, 17,9°±0,2°, 24,1°±0,2°;

Кристаллическая форма III: 11,7°±0,2°, 16,6°±0,2°, 20,5°±0,2°, 27,3°±0,2°;

Кристаллическая форма IV: 6,8°±0,2°, 10,0°±0,2°, 11,1°±0,2°, 21,5°±0,2°;

Кристаллическая форма V: 9,7°±0,2°, 17,9°±0,2°, 19,2°±0,2°, 23,8°±0,2°;

Кристаллическая форма VI: 7,7°±0,2°, 15,5°±0,2°, 15,9°±0,2°, 19,5°±0,2°;

Кристаллическая форма VII: 11,7°±0,2°, 15,1°±0,2°, 15,9°±0,2°, 17,9°±0,2°;

Кристаллическая форма VIII: 4,8°±0,2°, 9,7°±0,2°, 19,6°±0,2°.

Указанные кристаллические формы соединения, представленного формулой (1), имеют порошковые рентгеновские дифрактограммы, имеющие следующие характеристические пики, выраженные градусами 2θ, при измерении с применением облучения Cu-Ka:

Кристаллическая форма I: 9,0°±0,2°, 10,6°±0,2°, 13,3°±0,2°, 15,9°±0,2°, 23,6°±0,2°, 24,0°±0,2°;

Кристаллическая форма II: 9,3°±0,2°, 10,2°±0,2°, 14,0°±0,2°, 15,9°±0,2°, 17,9°±0,2°, 24,1°±0,2°;

Кристаллическая форма III: 9,5°±0,2°, 11,7°±0,2°, 16,6°±0,2°, 20,5°±0,2°, 22,1°±0,2°, 27,3°±0,2°;

Кристаллическая форма IV: 6,8°±0,2°, 10,0°±0,2°, 11,1°±0,2°, 20,1°±0,2°, 20,5°±0,2°, 21,5°±0,2°;

Кристаллическая форма V: 9,7°±0,2°, 11,8°±0,2°, 17,9°±0,2°, 19,2°±0,2°, 22,1°±0,2°, 23,8°±0,2°;

Кристаллическая форма VI: 7,7°±0,2°, 15,5°±0,2°, 15,9°±0,2°, 17,2°±0,2°, 19,5°±0,2°, 21,2°±0,2°;

Кристаллическая форма VII: 11,7°±0,2°, 15,1°±0,2°, 15,9°±0,2°, 17,9°±0,2°, 20,1°±0,2°, 21,8°±0,2°;

Кристаллическая форма VIII: 4,8°±0,2°, 9,7°±0,2°, 14,6°±0,2°, 19,6°±0,2°, 22,0°±0,2°, 24,5°±0,2°.

Указанные кристаллические формы соединения, представленного формулой (1), имеют порошковые рентгеновские дифрактограммы, имеющие следующие характеристические пики, выраженные градусами 2θ, при измерении с применением облучения Cu-Ka:

Кристаллическая форма I: 9,0°±0,2°, 10,6°±0,2°, 13,3°±0,2°, 14,3°±0,2°, 15,9°±0,2°, 18,0°±0,2°, 20,0°±0,2°, 21,3°±0,2°, 23,6°±0,2°, 24,0°±0,2°;

Кристаллическая форма II: 9,3°±0,2°, 10,2°±0,2°, 14,0°±0,2°, 15,9°±0,2°, 17,9°±0,2°, 20,8°±0,2°, 23,0°±0,2°, 24,1°±0,2°, 24,8°±0,2°, 27,7°±0,2°;

Кристаллическая форма III: 9,5°±0,2°, 11,7°±0,2°, 12,7°±0,2°, 13,5±0,2°, 16,6°±0,2°, 19,8°±0,2°, 20,5°±0,2°, 22,1°±0,2°, 23,5°±0,2°, 27,3°±0,2°, 27,7°±0,2°;

Кристаллическая форма IV: 6,8°±0,2°, 10,0°±0,2°, 11,1°±0,2°, 11,8°±0,2°, 13,9°±0,2°, 14,9°±0,2°, 15,5°±0,2°, 20,1°±0,2°, 20,5°±0,2°, 21,5°±0,2°;

Кристаллическая форма V: 7,1°±0,2°, 9,7°±0,2°, 11,8°±0,2°, 16,5°±0,2°, 17,9°±0,2°, 19,2°±0,2°, 22,1°±0,2°, 23,1°±0,2°, 23,8°±0,2°, 24,9°±0,2°;

Кристаллическая форма VI: 7,7°±0,2°, 15,5°±0,2°, 15,9°±0,2°, 17,2°±0,2°, 18,0°±0,2°, 19,5°±0,2°, 20,6°±0,2°, 21,2°±0,2°, 22,0°±0,2°, 29,5°±0,2°;

Кристаллическая форма VII: 11,0°±0,2°, 11,7°±0,2°, 13,8°±0,2°, 14,3°±0,2°, 15,1°±0,2°, 15,9°±0,2°, 17,9°±0,2°, 20,1°±0,2°, 21,8°±0,2°, 25,6°±0,2°;

Кристаллическая форма VIII: 4,8°±0,2°, 9,7°±0,2°, 14,6°±0,2°, 19,6°±0,2°, 22,0°±0,2°, 24,5°±0,2°.

Среди кристаллических форм соединения, представленного формулой (1),

Кристаллическая форма I имеет эндотермический пик в интервале 180-220°C в своей кривой дифференциальной сканирующей калориметрии;

Кристаллическая форма II имеет эндотермический пик в интервале 195-215°C в своей кривой дифференциальной сканирующей калориметрии;

Кристаллическая форма III имеет эндотермический пик в интервале 150-190°C в своей кривой дифференциальной сканирующей калориметрии;

Кристаллическая форма VII имеет эндотермический пик в интервале 165-205°C в своей кривой дифференциальной сканирующей калориметрии.

Кристаллические формы соединения, представленного формулой (1), которые соответственно отличаются тем, что,

Кристаллическая форма I имеет порошковую рентгеновскую дифрактограмму, показанную на фигуре 1;

Кристаллическая форма II имеет порошковую рентгеновскую дифрактограмму, показанную на фигуре 3;

Кристаллическая форма III имеет порошковую рентгеновскую дифрактограмму, показанную на фигуре 5;

Кристаллическая форма IV имеет порошковую рентгеновскую дифрактограмму, показанную на фигуре 7;

Кристаллическая форма V имеет порошковую рентгеновскую дифрактограмму, показанную на фигуре 8;

Кристаллическая форма VI имеет порошковую рентгеновскую дифрактограмму, показанную на фигуре 9;

Кристаллическая форма VII имеет порошковую рентгеновскую дифрактограмму, показанную на фигуре 10;

Кристаллическая форма VIII имеет порошковую рентгеновскую дифрактограмму, показанную на фигуре 12.

Способ получения кристаллической формы I соединения, представленного формулой (1): соединение, представленное формулой (1), помещают в безводный ацетонитрил для промывания суспензии или в тетрагидрофуран для перемешивания, твердое вещество отделяют от смеси и кристаллическую форму I получают фильтрацией.

Способ получения кристаллической формы II соединения, представленного формулой (1): соединение, представленное формулой (1), помещают в смешанный раствор низшего спирта или этилацетата или ацетона или метанола и воды (1:1-9:1, об./об.) для промывания суспензии, или растворяют в тетрагидрофуране в атмосфере изопропанола или н-гептане, из смеси выделяют твердое вещество, и кристаллическую форму II получают фильтрацией.

Способ получения кристаллической формы III соединения, представленного формулой (1): соединение, представленное формулой (1), помещают в смешанный раствор ацетонитрила и воды в соотношении 1:1-4:1 для промывания суспензии при 0-70°C, и кристаллическую форму III получают фильтрацией в виде сольвата ацетонитрила.

Способ получения кристаллической формы IV соединения, представленного формулой (1): соединение, представленное формулой (1), помещают в смешанный раствор ацетонитрила и воды в соотношении 9:1 для промывания суспензии при 70-90°C с получением кристаллической формы IV.

Способ получения кристаллической формы V соединения, представленного формулой (1): соединение, представленное формулой (1), помещают в смешанный раствор тетрагидрофурана и изопропилацетата для медленного испарения; или соединение, представленное формулой (1), растворяют в тетрагидрофуране, затем по каплям добавляют изопропилацетат, твердое вещество отделяют из смеси и кристаллическую форму V получают фильтрацией, в виде сольвата изопропилацетата.

Способ получения кристаллической формы VI соединения, представленного формулой (1): соединение, представленное формулой (1), помещают в раствор хлороформа для медленного испарения; или соединение, представленное формулой (1), растворяют в хлороформе, помещают в атмосферу изопропанола или н-гептана, и твердое вещество отделяют из смеси; или соединение, представленное формулой (1), растворяют в хлороформе, под индукцией поливинилацетата, полифениленсульфида, мезилата 1,3-диметилимидазолина или перхлората 1,3-диметилимидазолина, хлороформ выпаривают, твердое вещество отделяют от смеси с получением кристаллической формы VI в виде сольвата хлороформа.

Способ получения кристаллической формы VII соединения, представленного формулой (1): соединение, представленное формулой (1), помещают в смешанный раствор ацетонитрила и воды в соотношении 1:1-9:1 (об./об.) для промывания суспензии, фильтруют и сушат в вакууме с получением кристаллической формы VII. Альтернативно, кристаллическую форму III соединения, представленного формулой (1), сушат в вакууме с получением кристаллической формы VII.

Способ получения кристаллической формы VIII соединения, представленного формулой (1): соединение, представленное формулой (1), помещают в изопропилацетат для промывания суспензии, и фильтруют с получением кристаллической формы VIII в виде сольвата изопропилацетата.

В другом исследовании обнаружено, что указанные выше кристаллические формы III, V, VI и VIII являются сольватами и, соответственно, содержат не фармацевтически приемлемые органические растворители, ацетонитрил (растворитель 2 класса, предел концентрации: 410 ч./млн.), хлороформ (растворитель 2 класса, предел концентрации: 60 ч./млн.) и изопропилацетат (растворитель 3 класса, количество остаточного растворителя не более 0,5%). При измерении, кристаллические формы III, V, VI и VIII имеют остаточную концентрацию растворителя ниже фармацевтически приемлемых пределов и не соответствует фармацевтическим требованиям.

Для дальнейшего измерения стабильности аморфной формы в соответствии с фармацевтически приемлемым содержимым, необходимо получить аморфную форму, имеющую высокое содержание. В соответствии с данным изобретением, аморфную форму, имеющую высокое фармацевтически приемлемое содержание (содержание 97,1%), получают из кристаллической формы соединения, представленного формулой (1), имеющей высокое содержание, в качестве исходного материала, и было обнаружено, что содержание аморфной формы снижается в процессе превращения (как показано в примере 1).

Также обнаружено в исследовании, что не все кристаллические формы I, II, III, IV, V, VI, VII и VIII соединения, представленного формулой (1), обладают лучшей стабильностью, чем аморфная форма. Более конкретно, в исследовании стабильности кристаллической формы III, содержание соединения понизилось на около 10% после помещения в условия высокой влажности 40°C/75%±5% ОВ на 14 дней. Можно видеть, что в условиях высокой влажности кристаллическая форма III имеет худшую стабильность, чем аморфная форма. Кроме того, в исследовании стабильности кристаллической формы IV, содержание снижается на 23,1% после помещения в условия освещения 4500 люкс ± 500 люкс на 15 дней, и дополнительно, содержание снижается почти на 10% после помещения в условия высокой температуры 60°C на 15 дней. Указанные выше результаты тестирования показали, что кристаллическая форма IV имеет худшую стабильность, чем аморфная форма в условиях освещения или высокой температуры.

Поэтому не все кристаллические формы I, II, III, IV, V, VI, VII и VIII соединения, представленного формулой (1), могут удовлетворять фармацевтическим требованиям.

(3) Фармацевтически приемлемые кристаллические формы

Основываясь на представленном выше исследовании, в данном изобретении представлена стабильная кристаллическая форма I, стабильная кристаллическая форма II и стабильная кристаллическая форма VII соединения, представленного формулой (1).

Предпочтительные технические решения в соответствии с данным изобретением следующие:

Кристаллические формы соединения, представленного формулой (1), (4S,4aS,5aR,12aS)-9-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-илметил)-4,7-бис(диметиламино)-3,10,12,12a-тетрагидрокси-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида, имеющие порошковые рентгеновские дифрактограммы, имеющие следующие характеристические пики, выраженные градусами 2θ при измерении с применением облучения Cu-Ka:

Кристаллическая форма I: 10,6°±0,2°, 13,3°±0,2°, 15,9°±0,2°, 24,0°±0,2°;

Кристаллическая форма II: 10,2°±0,2°, 15,9°±0,2°, 17,9°±0,2°, 24,1°±0,2°;

Кристаллическая форма VII: 11,7°±0,2°, 15,1°±0,2°, 15,9°±0,2°, 17,9°±0,2°.

Кристаллические формы соединения, представленного формулой (1), имеющие порошковые рентгеновские дифрактограммы, имеющие следующие характеристические пики, выраженные градусами 2θ при измерении с применением облучения Cu-Ka:

Кристаллическая форма I: 9,0°±0,2°, 10,6°±0,2°, 13,3°±0,2°, 15,9°±0,2°, 23,6°±0,2°, 24,0°±0,2°;

Кристаллическая форма II: 9,3°±0,2°, 10,2°±0,2°, 14,0°±0,2°, 15,9°±0,2°, 17,9°±0,2°, 24,1°±0,2°;

Кристаллическая форма VII: 11,7°±0,2°, 15,1°±0,2°, 15,9°±0,2°, 17,9°±0,2°, 20,1°±0,2°, 21,8°±0,2°.

Кристаллические формы соединения, представленного формулой (1), имеющие порошковые рентгеновские дифрактограммы, имеющие следующие характеристические пики, выраженные градусами 2θ при измерении с применением облучения Cu-Ka:

Кристаллическая форма I: 9,0°±0,2°, 10,6°±0,2°, 13,3°±0,2°, 14,3°±0,2°, 15,9°±0,2°, 18,0°±0,2°, 20,0°±0,2°, 21,3°±0,2°, 23,6°±0,2°, 24,0°±0,2°;

Кристаллическая форма II: 9,3°±0,2°, 10,2°±0,2°, 14,0°±0,2°, 15,9°±0,2°, 17,9°±0,2°, 20,8°±0,2°, 23,0°±0,2°, 24,1°±0,2°, 24,8°±0,2°, 27,7°±0,2°;

Кристаллическая форма VII: 11,0°±0,2°, 11,7°±0,2°, 13,8°±0,2°, 14,3°±0,2°, 15,1°±0,2°, 15,9°±0,2°, 17,9°±0,2°, 20,1°±0,2°, 21,8°±0,2°, 25,6°±0,2°.

Среди кристаллических форм соединения, представленного формулой (1),

Кристаллическая форма I имеет эндотермический пик в интервале 180-220°C в своей кривой дифференциальной сканирующей калориметрии;

Кристаллическая форма II имеет эндотермический пик в интервале 195-215°C в своей кривой дифференциальной сканирующей калориметрии;

Кристаллическая форма VII имеет эндотермический пик в интервале 165-205°C в своей кривой дифференциальной сканирующей калориметрии.

Кристаллические формы соединения, представленного формулой (1), которые соответственно отличаются тем, что

Кристаллическая форма I имеет порошковую рентгеновскую дифрактограмму, показанную на фигуре 1;

Кристаллическая форма II имеет порошковую рентгеновскую дифрактограмму, показанную на фигуре 3;

Кристаллическая форма VII имеет порошковую рентгеновскую дифрактограмму, показанную на фигуре 10.

В данном изобретении также представлена фармацевтическая композиция, где указанная фармацевтическая композиция содержит аморфную или кристаллическую формы соединения, представленного формулой (1), и фармацевтически приемлемые носители, где указанные кристаллические формы содержат кристаллическую форму I, II, VII или их комбинацию.

В фармацевтической композиции в соответствии с данным изобретением, указанная кристаллическая форма присутствует в чистой форме. Включая, но не исключительно, содержание кристаллической формы I, II, VII или их комбинации не ниже 94,5% или 95% или 96% или 98% или 99%, например, присутствует менее около 5,5%, менее около 5%, менее около 4%, менее около 2% или менее около 1% примесей. Примеси включают, но не ограничены ими, продукты разложения, продукты окисления, эпимеры, растворители и/или другие нежелательные примеси.

В данном изобретении также представлен фармацевтически приемлемый состав кристаллических форм соединения, представленного формулой (1), и одного или более фармацевтически приемлемых носителей и/или разбавителей, который может находиться в любой фармацевтически приемлемой дозированной форме. В данном изобретении также представлен фармацевтически приемлемый состав, который может быть получен из кристаллических форм соединения, представленного формулой (1), и одного или более фармацевтически приемлемых носителей. Указанный фармацевтический состав относится к обычным составам для клинического применения и может перорально или парентерально вводиться пациенту, нуждающемуся в таком лечении. Для перорального введения, они могут быть получены в виде обычных твердых составов, таких как таблетки, капсулы, пилюли, гранулы и т.д., а также пероральных жидких составов, таких как пероральные растворы, пероральные суспензии, сиропы и т.д. Для парентерального введения, они могут быть в виде инъекций, включая раствор для инъекций, стерильный порошок для инъекций, концентрированный раствор для инъекций и суспензия для инъекций. Для ректального введения они могут быть в виде суппозиториев и подобных. Для транспульмонального введения, они могут быть в виде ингаляций или аэрозолей и подобных. Для местного или чрезкожного введения, они могут быть в виде мазей, паст, кремов, лосьонов, гелей, порошков, растворов или чрезкожных пластырей и подобных. Эти составы могут быть получены обычными методами, которые включают стадию добавления фармацевтически приемлемых носителей, таких как эксципиенты, связующие агенты, увлажнители, разрыхлители, загустители и подобные. Указанные кристаллические формы содержат кристаллическую форму I, II, VII или их комбинацию.

В данном изобретении также представлено применение кристаллических форм соединения, представленного формулой (1), в производстве лекарственного средства для лечения и/или профилактики заболевания, вызванного чувствительными к тетрациклину бактериями и/или резистентными к тетрациклину бактериями, где указанным "заболеванием, вызванным чувствительными к тетрациклину бактериями и/или резистентными к тетрациклину бактериями" является, например, инфекция, рак, диабет и другие заболевания, которые, как установлено, поддаются лечению или профилактике другими соединениями тетрациклина, где указанные кристаллические формы включают кристаллическую форму I, II, VII или их комбинацию.

Кристаллические формы соединения, представленного формулой (1), в соответствии с данным изобретением могут применяться для лечения и/или профилактики чувствительных к тетрациклиновым лекарственным средствам заболеваний, включающих инфекции (например, риккетсиальную инфекцию, венерическую лимфогранулему, конъюнктивит с включениями и инфекцию патогенами орнитоза и другие резистентные к соединению тетрациклина инфекции), рак, диабет и любые другие заболевания, которые, как установлено, поддаются лечению или профилактике соединениями тетрациклина. Кристаллические формы соединения, представленного формулой (1) в соответствии с данным изобретением, имеют широкий антибактериальный спектр и сильную активность против грамположительных и грамотрицательных бактерий, включая аэробные и анаэробные бактерии, а также имеют хорошую фармакокинетику.

По сравнению с ближайшим уровнем техники, кристаллические формы соединения, представленного формулой (1) в соответствии с данным изобретением, имеют следующие преимущества:

(1) кристаллическая форма I, II, VII соединения, представленного формулой (1), в соответствии с данным изобретением, или их комбинация обладают хорошей стабильностью, при этом кристаллические формы I и II обладают лучшей стабильностью, чем кристаллическая форма VII, и кристаллическая форма I обладает лучшей тепловой стабильностью, чем кристаллическая форма II;

(2) кристаллическая форма I, II, VII соединения, представленного формулой (1) в соответствии с данным изобретением, или их комбинация содержит меньшее количество остаточного растворителя, и поэтому менее токсична и имеет меньше побочных эффектов;

(3) кристаллическая форма I, II, VII соединения, представленного формулой (1), в соответствии с данным изобретением, или их комбинация имеют хорошие физико-химические свойства, стабильное качество, высокое содержание и чистоту, и стабильный размер частиц, и поэтому подходит для широкомасштабного промышленного производства.

Кристаллическая форма I, II, VII соединения, представленного формулой (1), в соответствии с данным изобретением, или их комбинация отличается тем, что ее физические свойства, например, стабильность, растворимость, гигроскопичность и скорость растворения, подходят для клинических и терапевтических лекарственных форм; а также тем, что ее физические свойства, например, морфология кристалла, прессуемость, размеры частиц и твердость, подходят для производства твердых лекарственных форм. Указанные выше свойства определяют методами, хорошо известными в данной области техники, такими как рентгеновская дифракция, микроскопия, ИК спектроскопия, тепловой анализ и анализ гигроскопичности.

Известно, что полиморфные формы соединения влияют на растворимость, скорость растворения, биодоступность, химическую и физическую стабильность, текучесть, разъединяемость и прессуемость соединения, а также на безопасность и эффективность лекарственных продуктов на основе соединения (см., например, Knapman, Modern Drug Discovery, 2000, 3(2): 53). Таким образом, становится важно получать и продавать чистое лекарственное средство в его наиболее термодинамически стабильной полиморфной форме и по существу не содержащей другие полиморфы.

Кристаллическая форма соединения с оптимальными физическими и химическими свойствами продвигает разработку активного соединения в виде лекарственных форм. Наиболее применимые физические и химические свойства включают: легкость и воспроизводимость получения, кристалличность, не гигроскопичность, растворимость в воде, стабильность к видимому и ультрафиолетовому низкую скорость разложения в усиленных условиях стабильности температуры и влажности, низкая скорость изомеризации между изомерными формами, и безопасность для долговременного введения человеку. Поэтому необходимо показать преимущества кристаллических форм в примерах.

Кристаллическая форма I, II, VII соединения, представленного формулой (1), в соответствии с данным изобретением, или их комбинация обладают стабильностью при хранении, подходящей кристаллической формой (морфологией кристалла), прессуемостью, текучестью, не слипаются, плотностью, стабильностью размера частиц, свойствами растворения и подобными, которые являются предпочтительными для получения, составления, применения в составе и биологической доступности соединения, представленного формулой (1).

Кристаллические формы I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII и аморфная форма соединения, представленного формулой (1) описанные в данном изобретении, могут быть превращены друг в друга в определенных условиях, и данное изобретение также включает отношение превращения между кристаллической формой I, кристаллической формой II, кристаллической формой III, кристаллической формой IV, кристаллической формой V, кристаллической формой VI, кристаллической формой VII, кристаллической формой VIII и аморфной формой.

Аморфную форму промывают в суспензии в безводном ацетонитриле или перекристаллизовывают в тетрагидрофуране с получением кристаллической формы I;

Аморфную форму промывают в суспензии в метаноле с получением кристаллической формы II;

Аморфную форму промывают в суспензии в смешанном растворе ацетонитрила и воды в соотношении 1:1-4:1 при 0-70°C с получением кристаллической формы III;

Аморфную форму промывают в суспензии в смешанном растворе ацетонитрила и воды в соотношении 9:1 при 70-90°C с получением кристаллической формы IV;

Аморфную форму промывают в суспензии в изопропилацетате с получением кристаллической формы VIII;

Кристаллическую форму II промывают в суспензии в безводном ацетонитриле с получением кристаллической формы I;

Кристаллическую форму III сушат в вакууме с получением кристаллической формы VII;

Кристаллическую форму VII перекристаллизовывают в метаноле с получением кристаллической формы II;

Кристаллические формы V, VI и VIII сушат с получением аморфной формы.

Описание чертежей

Фигура 1: пРСА спектр для кристаллической формы I соединения, представленного формулой (1);

Фигура 2: кривая ДСК для кристаллической формы I соединения, представленного формулой (1);

Фигура 3: пРСА спектр для кристаллической формы II соединения, представленного формулой (1);

Фигура 4: кривая ДСК для кристаллической формы II соединения, представленного формулой (1);

Фигура 5: пРСА спектр для кристаллической формы III соединения, представленного формулой (1);

Фигура 6: кривая ДСК для кристаллической формы III соединения, представленного формулой (1);

Фигура 7: пРСА спектр для кристаллической формы IV соединения, представленного формулой (1);

Фигура 8: пРСА спектр для кристаллической формы V соединения, представленного формулой (1);

Фигура 9: пРСА спектр для кристаллической формы VI соединения, представленного формулой (1);

Фигура 10: пРСА спектр для кристаллической формы VII соединения, представленного формулой (1);

Фигура 11: кривая ДСК для кристаллической формы VII соединения, представленного формулой (1);

Фигура 12: пРСА спектр для кристаллической формы VIII соединения, представленного формулой (1);

Фигура 13: пРСА спектр для аморфной формы соединения, представленного формулой (1);

Фигура 14: отношение превращения между кристаллической формой I, кристаллической формой II, кристаллической формой III, кристаллической формой IV, кристаллической формой V, кристаллической формой VI, кристаллической формой VII, кристаллической формой VIII и аморфной формой соединения, представленного формулой (1), где:

1. Промывка в суспензии в метаноле или промывка в суспензии в смешанном растворе метанола и воды (1:1-9:1, об./об.);

2. Промывка в суспензии в ацетонитриле или тетрагидрофуране;

3. Промывка в суспензии в смешанном растворе ацетонитрила и воды в соотношении 1:1-4:1;

4. Промывка в суспензии в смешанном растворе ацетонитрила и воды в соотношении 9:1;

5. Промывка в суспензии в изопропилацетате;

6. Кристаллизация с медленным испарением раствора хлороформа или под индуцированием поливинилацетата, полифениленсульфида, 1,3-диметилимидазолинмезилата или 1,3-диметилимидазолинперхлората в растворе хлороформа,

7. Медленное испарение смешанного раствора тетрагидрофурана и изопропилацетата (1:1, об./об.); и

8. Сушка теплом.

Промывка в суспензии в соответствии с данным изобретением означает промывку большого количества твердого вещества небольшим количеством растворителя при перемешивании.

Низший спирт в соответствии с данным изобретением означает спирт, содержащий 1-6 атомов углерода, включая метанол, этанол, пропанол, изопропанол, бутанол, изобутанол, н-бутанол, пентанол, гексанол и подобные.

Подробное описание данного изобретения

Данное изобретение подробно описано в следующих вариантах в форме примеров. Однако должно быть понятно, что объем данного изобретения не ограничен следующими примерами, и все технические решения, совершенные на основе представленного выше содержания данного изобретения, включены в объем данного изобретения.

Пример 1: получение аморфной формы (4 S ,4a S ,5a R ,12a S )-9-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-илметил)-4,7-бис(диметиламино)-3,10,12,12a-тетрагидрокси-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида

Согласно способу получения, описанному в заявке на патент WO 2013013505 A1, синтезируют 8 г (4S,4aS,5aR,12aS)-9-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-илметил)-4,7-бис(диметиламино)-3,10,12,12a-тетрагидрокси-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида. Содержание неочищенного продукта составляет 84,8%.

8 г неочищенного продукта растворяют в 1,5 л воды. Добавляют трифторуксусную кислоту для доведения pH до 2-4. После растворения добавляют аммиачную воду для доведения pH до 6,5-7,5. После загрузки проводят препаративное разделение с системой (1% ТФК/вода)/ацетонитрил (6%). Собирают фракцию, содержащую продукт. Водную фазу доводят водным раствором гидроксида натрия до pH 7,5-8,5. Водную фазу выдерживают при температуре 25-30°C и экстрагируют дихлорметаном три раза. Фазы дихлорметана объединяют. Объединенную фазу дихлорметана концентрируют и по каплям добавляют в н-гептан. Смесь охлаждают до температуры 0-5°C, перемешивают в течение 10-30 мин и фильтруют отсасыванием с получением 3,17 г соединения (имеющего содержание 87,7% и чистоту 96,2%).

Молекулярная формула: C₂₉H₃₆N₄O₇

¹H-ЯМР (CD₃OD, 400 МГц) δ: 8,48 (с, 1H), 4,54 (шс, 2H), 4,22 (с, 1H), 3,65 (шс, 4H), 3,46 (м, 1H), 3,35 (с, 6H), 3,25 (м, 1H), 3,10 (с, 3H), 3,05 (с, 1H), 3,00 (с, 3H), 2,60 (м, 1H), 2,37 (м, 1H), 1,87-1,97 (м, 2H), 1,68 (м, 1H), 1,07 (м, 1H), 0,78 (м, 1H).

Для получения аморфной формы (4S,4aS,5aR,12aS)-9-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-илметил)-4,7-бис(диметиламино)-3,10,12,12a-тетрагидрокси-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида, имеющего высокое содержание, пробуют следующие способы:

Кристаллическую форму II соединения, представленного формулой (1) (имеющую содержание 95,6%), растворяют в подходящем количестве дихлорметана и по каплям добавляют в н-гептан при температуре 0-5°C. Смесь перемешивают в течение 30 мин и фильтруют отсасыванием. Полученное твердое вещество сушат в вакууме с получением аморфной формы соединения, представленного формулой (1) (имеющей содержание 93,3%).

Кристаллическую форму II соединения, представленного формулой (1) (имеющую содержание 97,0%) растворяют в подходящем количестве дихлорметана и по каплям добавляют в н-гептан при температуре 0-5°C. Смесь перемешивают в течение 30 мин и фильтруют отсасыванием. Полученное твердое вещество сушат в вакууме с получением аморфной формы соединения, представленного формулой (1) (имеющей содержание 93,9%).

Кристаллическую форму II соединения, представленного формулой (1) (имеющую содержание 98,4%) растворяют в подходящем количестве дихлорметана и по каплям добавляют в н-гептан при температуре 0-5°C. Смесь перемешивают в течение 30 мин и фильтруют отсасыванием. Полученное твердое вещество сушат в вакууме с получением аморфной формы соединения, представленного формулой (1) (имеющей содержание 97,1%).

Твердое вещество характеризуют ПРД как аморфную форму, как показано на Фиг. 13.

Пример 2: Получение кристаллической формы I (4 S ,4a S ,5a R ,12a S )-9-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-илметил)-4,7-бис(диметиламино)-3,10,12,12a-тетрагидрокси-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида

0,5 г аморфной формы соединения, представленного формулой (1), полученной в примере 1 (имеющей содержание 87,7% и чистоту 96,2%) помещают в 5 мл ацетонитрила или 2 мл ТГФ. Смесь нагревают до 55°C и перемешивают в течение 0,5 ч и фильтруют. Полученное твердое вещество помещают в вакуумную сушильную печь и сушат в вакууме при 50°C в течение 12 ч с получением кристаллической формы I, имеющей содержание 97,0%, и чистоту 98,2%.

Кристаллическая форма I имеет спектр порошкового рентгеноструктурного анализа (пРСА), показанный на фигуре 1, в котором основные параметры следующие:

углы 2θ (°) значение d Концентрация (%) 9,025765
10,586120
13,306510
14,277980
15,716330
15,935210
17,646390
18,039520
19,985140
21,261890
22,452190
23,618520
23,966900
24,727390
26,599820
27,485250
28,370430
31,601690
32,827100
35,731580
36,550010
39,294720 9,79798
8,35704
6,65401
6,20339
5,63875
5,56179
5,02613
4,91747
4,44292
4,17892
3,96000
3,76702
3,71305
3,60055
3,35120
3,24522
3,14595
2,83126
2,72832
2,51293
2,45852
2,29288 38,74
100,00
43,61
31,16
55,34
53,43
19,96
31,42
30,34
28,80
28,54
35,07
58,77
24,17
4,21
6,23
4,91
2,64
6,25
8,09
4,56
6,57

Кристаллическая форма I соединения, представленного формулой (1), имеет кривую ДСК, показанную на фигуре 2.

Пример 3: Получение кристаллической формы II (4 S ,4a S ,5a R ,12a S )-9-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-илметил)-4,7-бис(диметиламино)-3,10,12,12a-тетрагидрокси-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида

Способ 1: 1,0 г аморфной формы соединения, представленного формулой (1), полученной в примере 1 (имеющей содержание 87,7%, и чистоту 96,2%) растворяют в 10 мл метанола. Смесь перемешивают при 55°C в течение 1-2 ч и фильтруют. Полученное твердое вещество помещают в вакуумную сушильную печь и сушат в вакууме при 50°C в течение 12 ч с получением кристаллической формы II, имеющей содержание 94,5%, и чистоту 96,4%.

Способ 2: 1,0 г аморфной формы соединения, представленного формулой (1), полученной в примере 1 (имеющей содержание 87,7%, и чистоту 96,2%) после нескольких очисток растворяют в 10 мл метанола. Смесь перемешивают при 55°C в течение 1-2 ч и фильтруют. Полученное твердое вещество помещают в вакуумную сушильную печь и сушат в вакууме при 50°C в течение 12 ч с получением кристаллической формы II, имеющей содержание 98,4%.

Способ 3: 15 мг полученного соединения, представленного формулой (1), помещают в 3 мл пробирку. Пробирку помещают в 20 мл бутыль. Бутыль содержит 4 мл метанола. После выдерживания при комнатной температуре в течение 10 дней получают твердую кристаллическую форму II.

Способ 4: 15 мг полученного соединения, представленного формулой (1), помещают в 3 мл пробирку и растворяют в 0,6 мл ТГФ. Пробирку помещают в 20 мл бутыль. Бутыль содержит 4 мл н-гептана. После выдерживания при комнатной температуре в течение 4 дней твердое вещество отделяют от смеси. Смесь фильтруют с получением кристаллической формы II.

Кристаллическая форма II имеет спектр порошкового рентгеноструктурного анализа (пРСА), показанный на фигуре 3, в котором основные параметры следующие:

углы 2θ (°) значение d Концентрация (%) 9,260124
10,219830
13,957680
15,906220
17,867450
20,822590
23,047770
24,083840
24,817680
27,666960
34,791430
36,987580 9,55053
8,65573
6,34502
5,57186
4,96444
4,26608
3,85900
3,69528
3,58766
3,22432
2,57865
2,43043 32,36
100,00
30,22
67,00
33,45
21,68
22,73
40,93
14,67
4,69
4,46
2,36

Пример 4: Получение кристаллической формы III (4 S ,4a S ,5a R ,12a S )-9-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-илметил)-4,7-бис(диметиламино)-3,10,12,12a-тетрагидрокси-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида (в виде сольвата ацетонитрила)

Способ 1: 500 мг аморфной формы соединения, представленного формулой (1) полученной в примере 1 (имеющей содержание 87,7%, и чистоту 96,2%) помещают в смешанный раствор ацетонитрила и воды (1:1). Смесь перемешивают при 5°C в течение 2 ч и фильтруют с получением кристаллической формы III, имеющей содержание 90,1%, и чистоту 97,7%. Данные исследования стабильности представлены выше.

Способ 2: 16,1 мг аморфной формы соединения, представленного формулой (1), полученной в примере 1 (имеющей содержание 97,1%) помещают в смешанный раствор 0,15 мл ацетонитрила и 0,15 мл воды. Смесь перемешивают при 5°C в течение 2 ч и фильтруют с получением кристаллической формы III.

Кристаллическая форма III имеет спектр порошкового рентгеноструктурного анализа (пРСА), показанный на фигуре 5, и кривую ДСК, показанную на фигуре 6, в котором основные параметры следующие:

углы 2θ (°) значение d Концентрация (%) 8,687313
9,534775
10,907640
11,659660
12,693860
13,549430
14,368000
15,326080
16,603930
18,088170
19,776820
20,496670
22,142080
23,105800
23,494860
23,965170
24,828240
25,543780
26,341220
27,295890
27,651590
30,106550
32,005070
33,610130
35,313900
36,611660
37,342910 10,17893
9,27603
8,11142
7,58989
6,97375
6,53526
6,16473
5,78144
5,33926
4,90436
4,48924
4,33318
4,01475
3,84944
3,78657
3,71331
3,58615
3,48730
3,38351
3,26730
3,22607
2,96837
2,79649
2,66653
2,54169
2,45452
2,40812 27,52
57,43
39,04
100,00
48,44
43,82
17,17
21,57
64,78
18,77
44,02
76,31
53,89
27,66
41,85
21,43
5,35
27,49
24,53
51,68
47,77
11,96
17,76
8,05
18,90
14,25
15,87

Пример 5: Получение кристаллической формы IV (4 S ,4a S ,5a R ,12a S )-9-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-илметил)-4,7-бис(диметиламино)-3,10,12,12a-тетрагидрокси-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида

15 мг аморфной формы соединения, представленного формулой (1), полученной в примере 1, помещают в смешанный раствор 0,9 мл ацетонитрила и 0,1 мл воды. Смесь перемешивают при 80°C в течение 2 ч и фильтруют с получением кристаллической формы IV. Кристаллическая форма IV не стабильна, имеет плохую воспроизводимость.

Кристаллическая форма IV имеет спектр порошкового рентгеноструктурного анализа (пРСА), показанный на фигуре 7, в котором основные параметры следующие:

углы 2θ (°) значение d Концентрация (%) 6,822
7,168
9,013
9,995
11,112
11,779
12,338
13,037
13,887
14,859
15,143
15,535
16,580
17,601
18,177
18,867
19,100
19,843
20,082
20,453
20,862
21,472
22,332
22,592
22,887
23,369
23,770
24,069
24,488
25,576
26,576
27,561
28,205
28,526
29,936
30,269
30,752
31,668
32,258
32,645
33,946
35,371
38,014
39,120
40,111
43,500
44,106 12,94699
12,32169
9,80423
8,84303
7,95586
7,50736
7,16824
6,78547
6,37191
5,95719
5,84613
5,69940
5,34236
5,03492
4,87656
4,69985
4,64303
4,47079
4,41808
4,33877
4,25457
4,13512
3,97776
3,93260
3,88253
3,80350
3,74034
3,69447
3,63213
3,48007
3,35140
3,23374
3,16138
3,12656
2,98239
2,95039
2,90511
2,82316
2,77281
2,74087
2,63876
2,53563
2,36515
2,30080
2,24622
2,07876
2,05161 100,0
6,5
8,3
31,0
39,2
16,7
9,3
5,3
16,8
13,8
7,1
14,6
7,8
3,9
12,4
7,8
6,7
13,6
20,8
18,9
4,9
25,6
7,1
9,6
8,9
7,3
8,1
7,8
7,0
4,4
7,0
5,7
4,6
5,2
7,5
5,8
4,9
4,5
4,7
4,2
4,7
4,4
4,7
4,3
4,6
4,9
4,1

Пример 6: Получение кристаллической формы V (4 S ,4a S ,5a R ,12a S )-9-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-илметил)-4,7-бис(диметиламино)-3,10,12,12a-тетрагидрокси-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида (в виде сольвата изопропилацетата)

Способ 1: 14,8 мг соединения, представленного формулой (1), полученного в примере 1, растворяют в 0,7 мг ТГФ и 0,7 мл изопропилацетата. Растворитель медленно выпаривают при 5°C или при комнатной температуре, и твердое вещество отделяют от смеси. Смесь фильтруют с получением кристаллической формы V.

Способ 2: 15 мг соединения, представленного формулой (1), полученного в примере 1, растворяют в 1,0 мл ТГФ. Затем по каплям добавляют 4 мл изопропилацетата, и твердое вещество отделяют от смеси. Смесь фильтруют с получением the кристаллической формы.

Кристаллическая форма V имеет спектр порошкового рентгеноструктурного анализа (пРСА), показанный на фигуре 8, в котором основные параметры следующие:

углы 2θ (°) значение d Концентрация (%) 4,727485
7,095715
9,727849
11,846180
16,491390
17,883960
19,183180
22,061500
23,092320
23,754860
24,895740
37,480630 18,69238
12,45813
9,09236
7,47080
5,37545
4,95989
4,62681
4,02924
3,85166
3,74571
3,57658
2,39958 4,86
16,14
100,00
17,17
14,44
56,77
53,32
39,42
15,52
45,79
11,30
4,29

Пример 7: Получение кристаллической формы VI (4 S ,4a S ,5a R ,12a S )-9-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-илметил)-4,7-бис(диметиламино)-3,10,12,12a-тетрагидрокси-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида (в виде сольвата хлороформа)

Способ 1: 15 мг соединения, представленного формулой (1), полученного в примере 1, растворяют в 0,5 мл хлороформа. Растворитель медленно выпаривают при комнатной температуре, и твердое вещество отделяют от смеси с получением кристаллической формы VI.

Способ 2: 16,1 мг соединения, представленного формулой (1), полученной в примере 1, помещают в 3 мл флакон и растворяют в 0,8 мл хлороформа. Флакон помещают в 20 мл бутыль, которая содержит 4 мл изопропанола или н-гептана. Смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 4 дней. Твердое вещество отделяют от смеси с получением кристаллической формы VI.

Способ 3: 15 мг кристаллической формы II соединения, представленного формулой (1), полученной в примере, помещают в 3 мл флакон, и флакон помещают в 20 мл бутыль. Бутыль содержит 4 мл хлороформа. Смесь выдерживают при комнатной температуре в течение 10 дней, с получением твердой кристаллической формы VI.

Способ 4: 15 мг соединения, представленного формулой (1), помещают в 3 мл флакон. 0,5 мл хлороформа добавляют до растворения. Затем добавляют 2,98 мг сульфида полифенилена. Растворитель медленно выпаривают при комнатной температуре, и твердое вещество отделяют от смеси с получением кристаллической формы VI.

Способ 5: 15 мг соединения, представленного формулой (1), помещают в 3 мл флакон. 0,5 мл хлороформа добавляют до растворения. Затем добавляют 3 мг мезилата 1,3-диметилимидазолина. Растворитель медленно выпаривают при комнатной температуре, и твердое вещество отделяют от смеси с получением кристаллической формы VI.

Кристаллическая форма VI имеет спектр порошкового рентгеноструктурного анализа (пРСА), показанный на фигуре 9, в котором основные параметры следующие:

углы 2θ (°) значение d Концентрация (%) 7,692313
15,457590
15,909050
17,196630
17,976590
19,542360
20,646680
21,224630
21,974070
29,474920 11,49320
5,73255
5,57087
5,15655
4,93454
4,54257
4,30203
4,18618
4,04507
3,03053 58,12
100,00
43,32
34,40
29,91
56,79
32,34
40,47
28,99
13,31

Пример 8: Получение кристаллической формы VII (4 S ,4a S ,5a R ,12a S )-9-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-илметил)-4,7-бис(диметиламино)-3,10,12,12a-тетрагидрокси-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида

Способ 1: 16,1 мг аморфной формы соединения, представленного формулой (1), полученной в примере 1, помещают в смешанный раствор 0,15 мл ацетонитрила и 0,15 мл воды. Смесь перемешивают при 5°C в течение 2 ч, фильтруют и сушат в вакууме с получением кристаллической формы VII.

Способ 2: 15 мг кристаллической формы II соединения, представленного формулой (1), полученной в примерах, помещают в смешанный раствор 0,8 мл ацетонитрила и 0,2 мл воды (АЦН/H₂O, об./об., 4:1). Смесь взаимодействует при комнатной температуре, ее фильтруют, сушат в вакууме при 50°C в течение 2 ч с получением твердой кристаллической формы VII.

Способ 3: кристаллическую форму III соединения, представленного формулой (1), полученную в примерах, сушат в вакууме с получением кристаллической формы VII.

Кристаллическая форма VII имеет спектр порошкового рентгеноструктурного анализа (пРСА), показанный на фигуре 10, в котором основные параметры следующие:

углы 2θ (°) значение d Концентрация (%) 11,008970
11,728880
13,794880
14,308280
15,145890
15,873440
17,911120
20,133590
21,828890
24,512310
25,622960
26,747930
37,385250 8,03698
7,54525
6,41953
6,19032
5,84981
5,58329
4,95243
4,41049
4,07164
3,63165
3,47670
3,33298
2,40549 20,09
62,33
30,30
30,51
69,50
47,53
100,00
32,48
34,86
12,97
14,08
13,47
4,92

Пример 9: Получение кристаллической формы VIII (4 S ,4a S ,5a R ,12a S )-9-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-илметил)-4,7-бис(диметиламино)-3,10,12,12a-тетрагидрокси-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида (в виде сольвата изопропилацетата)

15 мг аморфной формы соединения, представленного формулой (1), полученной в примере 1, помещают в 1 мл изопропилацетата. Смесь перемешивают при 5°C в течение 2 ч, фильтруют с получением твердого вещества в виде кристаллической формы VIII.

Кристаллическая форма VIII имеет спектр порошкового рентгеноструктурного анализа (пРСА), показанный на фигуре 12, в котором основные параметры следующие:

углы 2θ (°) значение d Концентрация (%) 4,819580
9,734293
14,642940
19,602850
21,998290
24,522330 18,33540
9,08635
6,04959
4,52869
4,04067
3,63019 11,85
100,00
2,19
6,36
0,70
0,51

Далее обсуждаются благоприятные эффекты соединения в соответствии с данным изобретением с помощью анализа стабильности аморфной формы и кристаллических форм. Однако должно быть понятно, что заявленное соединение имеет не только эти благоприятные эффекты.

Анализ 1: Стабильность аморфной формы и кристаллических форм заявленного соединения

Тестируемый образец: аморфную форму, кристаллическую форму I, кристаллическую форму II и кристаллическую форму VII соединения, представленного формулой (1), получают согласно примерам;

Условия тестирования для исследования влияющих факторов:

Высокотемпературные тесты: аморфную форму, кристаллическую форму I, кристаллическую форму II и кристаллическую форму VII соединения, представленного формулой (1), выкладывают на сухое и чистое предметное стекло и выдерживают при 60°C±5°C в течение 14 дней. Образцы берут, соответственно на 7 и 14 дни. Содержание и чистоту соединения, представленного формулой (1), измеряют и сравнивают с этими показателями в 0 день.

Тест при высокой влажности: аморфную форму, кристаллическую форму I, кристаллическую форму II и кристаллическую форму VII соединения, представленного формулой (1) выкладывают на сухое и чистое предметное стекло и выдерживают при 25°C±2°C, ОВ 75%±5%, 40°C±2°C, ОВ 75%±5% в течение 14 дней. Образцы берут, соответственно на 7 и 14 дни. Содержание и чистоту соединения, представленного формулой (1), измеряют и сравнивают с этими показателями в 0 день.

Тест при освещении: аморфную форму, кристаллическую форму I, кристаллическую форму II и кристаллическую форму VII соединения, представленного формулой (1), выкладывают на сухое и чистое предметное стекло и выдерживают при освещении 4500 люкс±500 люкс в освещенной коробке в течение 14 дней. Образцы берут, соответственно на 7 и 14 дни. Содержание и чистоту соединения, представленного формулой (1), измеряют и сравнивают с этими показателями в 0 день.

Содержание: измеряют с применением способа внутреннего стандарта в соответствии с High Performance Liquid Chromatography in Chinese Pharmacopoeia, Appendix V D, Edition 2010.

Чистота: измеряют с применением способа нормализации площади в соответствии с High Performance Liquid Chromatography in Chinese Pharmacopoeia, Appendix V D, Edition 2010.

Таблица 1: Результаты исследования влияющих факторов для аморфной формы и кристаллических форма соединения, представленного формулой (1)

Аморфная форма Кристаллическая форма I Кристаллическая форма II Кристаллическая форма VII Условия теста День теста Чистота (%) Содержание (%) Чистота (%) Содержание (%) Чистота (%) Содержание (%) Чистота (%) Содержание (%) / День 0 98,0 97,1 98,2 97,0 96,4 94,5 97,4 95,8 Высокая температура 60°C День 7 95,8 94,5 97,9 97,7 96,1 95,8 96,8 95,2 День 14 94,3 90,5 97,7 97,3 96,0 96,0 96,2 93,6 25°C/75%±5% ОВ День 7 97,1 98,7 98,1 97,2 96,3 95,9 97,1 96,1 День 14 96,7 93,3 98,1 98,2 96,2 96,1 97,2 95,8 40°C/75%±5% ОВ День 7 94,9 94,7 98,0 97,4 96,2 96,5 96,4 94,6 День 14 92,9 89,6 97,8 97,5 96,1 96,1 95,7 94,5 Освещение 4500 люкс ± 500 люкс День 14 92,9 85,0 98,1 97,8 96,2 96,1 96,6 95,7

Из результатов исследования понятно, что содержание и чистота аморфной формы соединения, представленного формулой (1), сильно меняются в условиях высокой температуры, высокой влажности и освещения, что показывает на нестабильность аморфной формы соединения, представленного формулой (1). Однако, содержание и чистота кристаллических форм I, II, VII соединения, представленного формулой (1), изменяются незначительно в условиях высокой температуры, высокой влажности и освещения, что показывает относительно высокую стабильность кристаллических форм I, II, VII соединения, представленного формулой (1), которые подходят для производства лекарственных средств, хранения и транспортировки, и благоприятны для гарантии пригодности и безопасности в применении лекарственного средства.

Анализ 2: Стабильность кристаллической формы II и кристаллической формы IV в соответствии с данным изобретением.

Тестируемый образец: кристаллическую форму II и кристаллическую форму IV соединения, представленного формулой (1), получают согласно примерам;

Условия тестирования для исследования влияющих факторов:

Высокотемпературные тесты: кристаллическую форму II и кристаллическую форму IV соединения, представленного формулой (1), выкладывают на сухое и чистое предметное стекло и выдерживают при 60°C±5°C в течение 15 дней. Образцы берут, соответственно на 5 и 15 дни. Содержание и чистоту соединения, представленного формулой (1), измеряют и сравнивают с этими показателями в 0 день.

Тест при высокой влажности: кристаллическую форму II и кристаллическую форму IV соединения, представленного формулой (1) выкладывают на сухое и чистое предметное стекло и выдерживают при 25°C±2°C, ОВ 92,5%±5%, 25°C±2°C, ОВ 75%±5%, 40°C±2°C, ОВ 75%±5% в течение 15 дней. Образцы берут, соответственно на 5 и 15 дни. Содержание и чистоту соединения, представленного формулой (1), измеряют и сравнивают с этими показателями в 0 день.

Тест при освещении: кристаллическую форму II и кристаллическую форму IV соединения, представленного формулой (1), выкладывают на сухое и чистое предметное стекло и выдерживают при освещении 4500 люкс ± 500 люкс в освещенной коробке в течение 15 дней. Образцы берут, соответственно на 5 и 15 дни. Содержание и чистоту соединения, представленного формулой (1), измеряют и сравнивают с этими показателями в 0 день.

Содержание: измеряют с применением способа внутреннего стандарта в соответствии с High Performance Liquid Chromatography in Chinese Pharmacopoeia, Appendix V D, Edition 2010.

Чистота: измеряют с применением способа нормализации площади в соответствии с High Performance Liquid Chromatography in Chinese Pharmacopoeia, Appendix V D, Edition 2010.

Результаты тестирования показаны в таблице 2.

Таблица 2: Результаты исследования в тестах влияющих факторов для кристаллических форм соединения, представленного формулой (1)

Кристаллическая форма II Кристаллическая форма IV Условия тестирования День Содержание % Содержание % / 0 98,4 97,0 60°C 15 97,0 88,6 4500 люкс ± 500 люкс 15 97,8 74,6 25°C/ ОВ 75%±5% 15 98,3 93,1 25°C/ ОВ 92,5%±5% 15 96,7 90,3 40°C/ ОВ 75%±5% 15 98,0 74,6

Из результатов исследования видно, что содержание соединения, представленного формулой (1), изменяется очень сильно при попадании кристаллической формы IV соединения, представленного формулой (1), в условия высокой температуры, высокой влажности и освещения, в то время как содержание соединения, представленного формулой (1), изменяется незначительно при попадании кристаллической формы II соединения, представленного формулой (1), в условия высокой температуры, высокой влажности и освещения, показывая на то, что кристаллическая форма II соединения, представленного формулой (1), имеет более высокую стабильность, чем кристаллическая форма IV, и подходит для производства лекарственного средства, хранения и транспортировки, и благоприятна для гарантии пригодности и безопасности в применении лекарственного средства.

Изобретение относится к способу получения кристаллической формы I соединения (4S,4aS,5aR,12aS)-9-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-илметил)-4,7-бис(диметиламино)-3,10,12,12a-тетрагидрокси-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида, представленного формулой (1), где указанная кристаллическая форма характеризуется наличием порошковых рентгеновских дифрактограмм, имеющих следующие характеристические пики, выраженные градусами 2θ при измерении с применением облучения Cu-Ka: 10,6°±0,2°, 13,3°±0,2°, 15,9°±0,2°, 24,0°±0,2°; предназначенного в производстве лекарственного средства для лечения и/или профилактики инфекционного заболевания, вызванного чувствительными к тетрациклину бактериями и/или резистентными к тетрациклину бактериями. Способ характеризуется тем, что соединение, представленное формулой (1), помещают в безводный ацетонитрил или в тетрагидрофуран, полученную смесь нагревают при перемешивании с последующим выделением кристаллической формы I фильтрацией. Технический результат – получение стабильной кристаллической формы соединения формулы (1). 2 табл., 14 ил., 4 пр.

формула (1)

Способ получения кристаллической формы I соединения, представленного формулой (1), (4S,4aS,5aR,12aS)-9-(3-азабицикло[3.1.0]гексан-3-илметил)-4,7-бис(диметиламино)-3,10,12,12a-тетрагидрокси-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида,

,

Формула (1)

где указанная кристаллическая форма характеризуется наличием порошковых рентгеновских дифрактограмм, имеющих следующие характеристические пики, выраженные градусами 2θ при измерении с применением облучения Cu-Ka: 10,6°±0,2°, 13,3°±0,2°, 15,9°±0,2°, 24,0°±0,2°;

где указанный способ отличается тем, что соединение, представленное формулой (1), помещают в безводный ацетонитрил или в тетрагидрофуран, полученную смесь нагревают при перемешивании с последующим выделением кристаллической формы I фильтрацией.