Патентон — пантеон патентов

(19)

RU

(11)

2 766 094

(13)

C2

(51)

МПК

C07K16/28(2006-01-01)

C12N5/10(2006-01-01)

C12N15/13(2006-01-01)

C12N15/63(2006-01-01)

A61K39/395(2006-01-01)

A61P35/00(2006-01-01)

(21) (22)

Заявка

2017123549, 2015-12-04

(24)

Дата начала отсчета патента

2015-12-04

(22)

дата подачи заявки

2015-12-04

(45)

опубликовано

2022-02-07

(72)

авторы

Брентдженс, Ренье, Дж.Смит, Эрик, Л.Лю, Чэн

(73)

патентообладатели

Мемориал Слоан-Кеттеринг Кэнсер СентерЕурека Терапьютикс, Инк.

(56)

Документы, цитированные в отчете о поиске

RYAN M.Cet al"Antibody targeting of B-cell maturation antigen on malignant plasma cells", Mol Cancer Ther 2007, VolНАСОНОВ Е.Л"Белимумаб: прогресс в лечении системной красной волчанки", Науч-практичревматол., 2012, 54(5),

АНТИТЕЛА, НАЦЕЛЕННЫЕ НА АНТИГЕН СОЗРЕВАНИЯ В-КЛЕТОК, И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ Российский патент 2022 года по МПК C07K16/28 C12N5/10 C12N15/13 C12N15/63 A61K39/395 A61P35/00 

Описание патента на изобретение RU2766094C2

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

По настоящей заявке испрашивается приоритет на основании предварительной патентной заявки США с серийным № 62/088246, поданной 5 декабря 2014 г., полное содержание которой включено в настоящий документ посредством ссылки и по отношению к которой испрашивается приоритет.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к антителам, которые связываются с антигеном созревания B-клеток (BCMA), и способам их применения.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

BCMA вовлечен в дифференциацию и сигнализацию B-клеток и, как известно, экспрессируется на незлокачественных дифференцированных B-клетках и плазматических клетках. Несколько групп исследователей подтвердили экспрессию BCMA на поверхности клеток множественной миеломы (MM), при этом одна группа исследователей установила, что он может являться альтернативой CD138 в качестве FACS маркера для злокачественных плазматических клеток из свежих или замороженных образцов, полученных от пациента, с величиной средней относительной СИФ, составляющей 9-16 (n=35) (Frigyesi, I., et al. Robust isolation of malignant plasma cells in multiple myeloma. Blood 123, 1336-1340 (2014); Tai, Y.T., et al. Novel afucosylated anti-B cell maturation antigen-monomethyl auristatin F antibody-drug conjugate (GSK2857916) induces potent and selective anti-multiple myeloma activity. Blood (2014)). Учитывая важную роль BCMA при множественной миеломе, существует потребность в антителах, узнающих BCMA, и способах применения таких средств.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к антителам, которые связываются с антигеном созревания B-клеток (BCMA), и способам их применения.

В конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NOS: 1, 5, 9, 13, 17, 21, 25, 29, 33, 37, 41, 45, 49, 53, 57, 61, и 65, при этом антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, специфически связывается с BCMA человека. Настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NOS: 2, 6, 10, 14, 18, 22, 26, 30, 34, 38, 42, 46, 50, 54, 58, 62, и 66, при этом антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, специфически связывается с BCMA человека. Кроме того, настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему (a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NOS: 1, 5, 9, 13, 17, 21, 25, 29, 33, 37, 41, 45, 49, 53, 57, 61, и 65; и (b) вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NOS: 2, 6, 10, 14, 18, 22, 26, 30, 34, 38, 42, 46, 50, 54, 58, 62, и 66, при этом антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, специфически связывается с BCMA человека.

Кроме того, настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NOS: 1, 5, 9, 13, 17, 21, 25, 29, 33, 37, 41, 45, 49, 53, 57, 61, 65, а также их консервативных модификаций, при этом антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, специфически связывается с BCMA человека. Настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NOS: 2, 6, 10, 14, 18, 22, 26, 30, 34, 38, 42, 46, 50, 54, 58, 62, 66, а также их консервативных модификаций, при этом антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, специфически связывается с BCMA человека. Кроме того, настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему (a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NOS: 1, 5, 9, 13, 17, 21, 25, 29, 33, 37, 41, 45, 49, 53, 57, 61, 65, а также их консервативных модификаций; и (b) вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NOS:, 6, 10, 14, 18, 22, 26, 30, 34, 38, 42, 46, 50, 54, 58, 62, 66, а также их консервативных модификаций, при этом антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, специфически связывается с BCMA человека.

Настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, при этом вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи выбирают из группы, состоящей из: (a) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 1, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 2; (b) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 5, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 6; (c) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 10; (d) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 13, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 14; (e) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 17, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 18; (f) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 21, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 22; (g) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 25, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 26; (h) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 29, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 30; (i) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 33, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 34; (j) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 37, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 38; (k) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 41, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 42; (l) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 45, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 46; (m) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 49, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 50; (n) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 53, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 54; (o) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 57, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 58; (p) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 61, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 62; и (q) вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 65, и вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 66, при этом антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, специфически связывается с BCMA человека.

В конкретных вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит: (a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2; (b) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6; (c) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10; (d) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14; (e) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18; (f) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22; (g) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 25, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 26; (h) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 30; (i) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 33, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 34; (j) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 37, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 38; (k) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 41, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 42; (l) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46; (m) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 49, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 50; (n) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 53, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 54; (o) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 57, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 58; (p) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 61, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 62; или (q) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 65, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 66.

Настоящее изобретение также относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему вариабельную область тяжелой цепи, которая содержит домены CDR1, CDR2 и CDR3; и вариабельную область легкой цепи, которая содержит домены CDR1, CDR2 и CDR3, при этом домены CDR3 вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи выбирают из группы, состоящей из:

(a) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 91, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 94, и ее консервативные модификации;

(b) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 97, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 100, и ее консервативные модификации;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 103, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 106, и ее консервативные модификации;

(d) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 109, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 112, и ее консервативные модификации;

(e) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 115, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 118, и ее консервативные модификации;

(f) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 121, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 124, и ее консервативные модификации;

(g) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 127, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 130, и ее консервативные модификации;

(h) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 133, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 136, и ее консервативные модификации;

(i) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 139, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 142, и ее консервативные модификации;

(j) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 145, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 148, и ее консервативные модификации;

(k) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 151, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 154, и ее консервативные модификации;

(l) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 157, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 160, и ее консервативные модификации;

(m) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 163, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 166, и ее консервативные модификации;

(n) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 169, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 172, и ее консервативные модификации;

(o) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 175, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 178, и ее консервативные модификации;

(p) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 181, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 184, и ее консервативные модификации; и

(q) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 187, и ее консервативные модификации; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 190, и ее консервативные модификации;

при этом антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, специфически связывается с BCMA.

В конкретных вариантах осуществления домены CDR2 вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, выбирают из группы, состоящей из:

(a) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 90, и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 93, и ее консервативные модификации;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 96, и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 99, и ее консервативные модификации;

(c) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 102, и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 105, и ее консервативные модификации;

(d) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 108, и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 111, и ее консервативные модификации;

(e) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 114 и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 117 и ее консервативные модификации;

(f) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 120, и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 123, и ее консервативные модификации;

(g) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 126, и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 129, и ее консервативные модификации;

(h) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 132, и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 135, и ее консервативные модификации;

(i) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 138, и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 141, и ее консервативные модификации;

(j) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 144, и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 147, и ее консервативные модификации;

(k) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 150, и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 153, и ее консервативные модификации;

(l) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 156, и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 159, и ее консервативные модификации;

(m) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 162, и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 165, и ее консервативные модификации;

(n) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 168, и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 171, и ее консервативные модификации;

(o) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 174, и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 177, и ее консервативные модификации;

(p) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 180, и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 183, и ее консервативные модификации; и

(q) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 186, и ее консервативные модификации; и CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 189, и ее консервативные модификации.

В конкретных вариантах осуществления домены CDR1 вариабельной области тяжелой цепи и вариабельной области легкой цепи антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, выбирают из группы, состоящей из:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 89, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 92, и ее консервативные модификации;

(b) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 95, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 98, и ее консервативные модификации;

(c) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 101, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 104, и ее консервативные модификации;

(d) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 107, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 110, и ее консервативные модификации;

(e) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 113, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 116, и ее консервативные модификации;

(f) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 119, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 122, и ее консервативные модификации;

(g) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 125, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 128, и ее консервативные модификации;

(h) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 131, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 134, и ее консервативные модификации;

(i) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 137, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 140, и ее консервативные модификации;

(j) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 143, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 146, и ее консервативные модификации;

(k) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 149, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 152, и ее консервативные модификации;

(l) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 155, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 158, и ее консервативные модификации;

(m) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 161, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 164, и ее консервативные модификации;

(n) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 167, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 170, и ее консервативные модификации;

(o) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 173, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 176, и ее консервативные модификации;

(p) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 179, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 182, и ее консервативные модификации; и

(q) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 185, и ее консервативные модификации; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащего аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 188, и ее консервативные модификации.

В конкретных вариантах осуществления одна или более из последовательностей CDR имеют до примерно 3 аминокислотных замен. В конкретных вариантах осуществления одна или более из последовательностей CDR имеют до примерно 5 аминокислотных замен.

Кроме того, настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 89; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 90; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 91;

(b) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 95; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 96; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 97;

(c) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 101; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 102; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 103;

(d) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 107; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 108; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 109;

(e) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 113; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 114; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 115;

(f) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 119; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 120; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 121;

(g) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 125; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 126; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 127;

(h) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 131; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 132; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 133;

(i) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 137; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 138; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 139;

(j) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 143; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 144; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 145;

(k) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 149; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 150; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 151;

(l) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 155 CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 156; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 157;

(m) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 161; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 162; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 163;

(n) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 167; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 168; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 169;

(o) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 173; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 174; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 175;

(p) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 179; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 180; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 181; или

(q) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 185; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 186; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 187.

Кроме того, настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему:

(a) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 92; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 93; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 94;

(b) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 98; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 99; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий SEQ ID NO: 100;

(c) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 104; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 105; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 106;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 110; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий SEQ ID NO: 111; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 112;

(e) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 116; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 117; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 118;

(f) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 122; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 123; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 124;

(g) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 128; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 129; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 130;

(h) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 134; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 135; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий SEQ ID NO: 136;

(i) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 140; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 141; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 142;

(j) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 146; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 147; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 148;

(k) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 152; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 153; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 154;

(l) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 158; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 159; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 160;

(m) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 164; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 165; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 166;

(n) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 170; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 171; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 172;

(o) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 176; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 177; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 178;

(p) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 182; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 183; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 184; или

(q) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 188; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 189; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 190.

Настоящее изобретение также относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 89; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 90; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 91; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 92; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 93; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 94;

(b) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 95; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 96; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 97; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 98; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 99; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 100;

(c) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 101; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 102; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 103; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 104; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 105; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 106;

(d) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 107; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 108; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 109; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 110; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 111; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 112;

(e) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 113; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 114; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 115; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 116; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 117; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 118;

(f) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 119; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 120; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 121; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 122; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 123; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 124;

(g) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 125; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 126; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 127; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 128; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 129; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 130;

(h) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 131; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 132; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 133; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 134; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SE ID NO: 135; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 136;

(i) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 137; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 138; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 139; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 140; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 141; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 142;

(j) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 143; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 144; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 145; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 146; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SE ID NO: 147; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 148;

(k) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 149; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 150; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 151; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 152; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 153; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 154;

(l) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 155; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 156; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 157; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 158; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 159; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 160;

(m) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 161; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 162; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 163; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 164; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 165; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 166;

(n) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 167; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 168; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 169; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 170; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 171; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 172;

(o) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 173; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 174; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 175; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 176; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 177; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 178;

(p) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 179; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 180; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 181; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 182; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 183; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 184; или

(q) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 185; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 186; CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 187; CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 188; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 189; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 190.

В конкретных вариантах осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, связывается с BMCA человека с аффинностью связывания (Kd), составляющей от примерно 1×10-9 M до примерно 1×10-8 M. В конкретных вариантах осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, связывается с BMCA человека, содержащим аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 71. В конкретных вариантах осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, связывается с областью эпитопа, содержащей аминокислоты 14-22 из SEQ ID NO: 71. Например, антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22. Например, антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 119, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 120, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 121, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 122, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 123, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 124.

Настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, перекрестно конкурирующему за связывание с человеческим BCMA с любым из вышеописанных антител, или их антигенсвязывающих фрагментов. Настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, связывающемуся с тем же эпитопом на человеческом BCMA, что и любое из вышеописанных антител, или их антигенсвязывающих фрагментов.

Кроме того, настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, перекрестно конкурирующему за связывание с человеческим BCMA с эталонным антителом, или его эталонным антигенсвязывающим фрагментом, содержащим: (a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2; (b) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6; (c) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10; (d) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14; (e) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18; (f) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22; (g) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 25, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 26; (h) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 30; (i) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 33, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 34; (j) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 37, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 38; (k) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 41, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 42; (l) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46; (m) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 49, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 50; (n) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 53, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 54; (o) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 57, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 58; (p) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 61, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 62; или (q) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 65, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 66.

Кроме того, настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, связывающемуся с тем же эпитопом на человеческом BCMA, что и эталонное антитело, или его эталонный антигенсвязывающий фрагмент, содержащее: (a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2; (b) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6; (c) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10; (d) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14; (e) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18; (f) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22; (g) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 25, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 26; (h) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 30; (i) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 33, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 34; (j) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 37, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 38; (k) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 41, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 42; (l) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46; (m) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 49, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 50; (n) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 53, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 54; (o) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 57, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 58; (p) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 61, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 62; или (q) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 65, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 66.

В конкретных вариантах осуществления перекрестно конкурирующее антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, связывается с человеческим BCMA, содержащим аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 71. В конкретных вариантах осуществления перекрестно конкурирующее антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, связывается с областью эпитопа, содержащей аминокислоты 14-22 из SEQ ID NO: 71. Например, эталонное антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22. Например, эталонное антитело, или антигенсвязывающий фрагмент, содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 119, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 120, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 121, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 122, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 123, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 124.

Настоящее изобретение также относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NOS: 72-88.

В конкретных вариантах осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит человеческую каркасную область вариабельной области антитела. В конкретных вариантах осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, представляет собой полностью человеческое антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент. В конкретных вариантах осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, представляет собой химерное антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент. В конкретных вариантах осуществления антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, представляет собой гуманизированное антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент. В конкретных вариантах осуществления антигенсвязывающий фрагмент антитела представляет собой Fab, Fab', F(ab')2, Fv или одноцепочечный Fv (scFv) фрагмент.

Настоящее изобретение также относится к композиции, содержащей раскрытое в настоящем документе антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, и фармацевтически приемлемый носитель.

Кроме того, настоящее изобретение относится к иммуноконъюгату, содержащему раскрытое в настоящем документе антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, связанное с терапевтическим средством. В конкретных вариантах осуществления терапевтическое средство представляет собой лекарственное средство, цитотоксин или радиоактивный изотоп. Настоящее изобретение также относится к композиции, содержащей такой иммуноконъюгат и фармацевтически приемлемый носитель.

Кроме того, настоящее изобретение относится к биспецифичной молекуле, содержащей раскрытое в настоящем документе антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, связанное со вторым функциональным фрагментом. В конкретных вариантах осуществления второй функциональный фрагмент имеет иную специфичность связывания, чем антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент. В конкретных вариантах осуществления второй функциональный фрагмент имеет специфичность связывания для иммунной клетки. В конкретных вариантах осуществления второй функциональный фрагмент имеет специфичность связывания для CD3. Настоящее изобретение также относится к композиции, содержащей такую биспецифическую молекулу и фармацевтически приемлемый носитель.

Кроме того, настоящее изобретение относится к выделенной нуклеиновой кислоте, кодирующей раскрытое в настоящем документе антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, экспрессионному вектору, содержащему такую молекулу нуклеиновой кислоты, и клетке-хозяину, содержащей такой экспрессионный вектор.

Кроме того, настоящее изобретение относится к способу обнаружения BCMA в целой клетке или ткани. В конкретных вариантах осуществления способ включает: приведение в контакт клетки или ткани с раскрытым в настоящем документе антителом, или его антигенсвязывающим фрагментом, при этом указанное антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит детектируемую метку; и определение количества меченого антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, связанного с указанной клеткой или тканью, путем измерения количества детектируемой метки, связанной с указанной клеткой или тканью, при этом количество связанного антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, является показателем количества BCMA в указанной клетке или ткани.

Кроме того, настоящее изобретение относится к способу лечения опухоли у субъекта. В конкретных вариантах осуществления способ включает: введение эффективного количества раскрытого в настоящем документе антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, субъекту, в результате чего индуцируется гибель опухолевых клеток у субъекта. В конкретных вариантах осуществления способ приводит к уменьшению количества опухолевых клеток. В конкретных вариантах осуществления способ приводит к уменьшению размера опухоли. В конкретных вариантах осуществления способ приводит к уничтожению опухоли у субъекта. В конкретных вариантах осуществления субъект является человеком.

Кроме того, настоящее изобретение относится к применению раскрытого в настоящем документе антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, для лечения опухоли, а также к раскрытому в настоящем документе антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, предназначенному для лечения опухоли у субъекта.

Кроме того, настоящее изобретение относится к набору для лечения опухоли, включающему раскрытое в настоящем документе антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент. В конкретных вариантах осуществления набор дополнительно включает письменные инструкции по использованию антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, для лечения субъекта, имеющего опухоль.

В конкретных вариантах осуществления опухоль выбирают из группы, состоящей из множественной миеломы, неходжкинской лимфомы, лимфомы Ходжкина, хронического лимфоцитарного лейкоза (CLL), глиобластомы и макроглобулинемии Вальденстрема. В конкретных вариантах осуществления опухоль представляет собой множественную миелому.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР

Следующее далее подробное описание, приведенное в качестве примера, но не предназначенное для ограничения изобретения конкретными описанными вариантами осуществления, может быть понятным в сочетании с сопроводительными чертежами.

На фигуре 1 показана экспрессия BCMA человека в различных тканях.

На фигуре 2 показано картирование эпитопов ET140-3.

На фигуре 3 показано картирование эпитопов ET140-24.

На фигуре 4 показано картирование эпитопов ET140-54.

На фигуре 5 показано картирование эпитопов ET140-3, ET140-24 и ET140-54.

На фигуре 6 представлены данные скрининга ET140-3, ET140-24, ET140-37, ET140-40 и ET140-54 методом ELISA.

На фигуре 7 представлены данные скрининга ET140-3, ET140-24, ET140-37, ET140-40 и ET140-54 методом FACS.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Все публикации, патенты и другие литературные источники, цитированные в настоящем документе, включены в настоящий документ посредством ссылки в полном объеме.

При осуществлении на практике настоящего изобретения используют множество общепринятых методов молекулярной биологии, микробиологии, клеточной биологии, биохимии и иммунологии, которые находятся в пределах компетенции специалиста в данной области. Такие методы подробно описаны в литературе, например, «Molecular Cloning: a Laboratory Manual» 3-е издание, J.F. Sambrook and D.W. Russell, ed. Cold Spring Harbor Laboratory Press 2001; «Recombinant Antibodies for Immunotherapy», Melvyn Little, ed. Cambridge University Press 2009; «Oligonucleotide Synthesis» (M. J. Gait, ed., 1984); «Animal Cell Culture» (R.I. Freshney, ed., 1987); «Methods in Enzymology» (Academic Press, Inc.); «Current Protocols in Molecular Biology» (F.M. Ausubel et al., eds., 1987, и периодические переиздания); «PCR: The Polymerase Chain Reaction», (Mullis et al., ed., 1994); «A Practical Guide to Molecular Cloning» (Perbal Bernard V., 1988); «Phage Display: A Laboratory Manual» (Barbas et al., 2001). Содержание этих и других литературных источников, содержащих стандартные протоколы, широко известные и применяемые специалистами в данной области, включая инструкции производителей, включены в настоящий документ посредством ссылки, как часть настоящего изобретения.

Определения

В приведенном ниже описании будут соблюдаться определенные соглашения в отношении использования терминологии. Как правило, термины, используемые в настоящем документе, должны быть интерпретированы в соответствии с тем значением этих терминов, которое известно специалистам в данной области.

«Антигенсвязывающий белок» представляет собой белок или полипептид, который содержит антигенсвязывающую область или антигенсвязывающую часть, то есть, обладает сильным сродством к другой молекуле, с которой он связывается. Антигенсвязывающие белки включают антитела, химерные антигенные рецепторы (CAR) и слитые белки.

Как известно в данной области, термины «антитело» и «антитела» относятся к антигенсвязывающим белкам иммунной системы. Используемый в настоящем документе термин «антитело» включает целые, полноразмерные антитела, имеющие антигенсвязывающую область, а также любой их фрагмент, в котором сохранена «антигенсвязывающая часть» или «антигенсвязывающая область», или их одиночные цепи, например, одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv). Природное «антитело» представляет собой гликопротеин, содержащий по меньшей мере две тяжелые (H) цепи и две легкие (L) цепи, связанные дисульфидными связями. Каждая тяжелая цепь состоит из вариабельной области тяжелой цепи (используемое в настоящем документе сокращение VH) и константной области (CH) тяжелой цепи. Константная область тяжелой цепи состоит из трех доменов, CH1, CH2 и CH3. Каждая легкая цепь состоит из вариабельной области легкой цепи (используемое в настоящем документе сокращение VL) и константной (CL) области легкой цепи. Константная область легкой цепи состоит из одного домена, CL. Области VH и VL могут быть дополнительно разделены на области гипервариабельности, называемые определяющими комплементарность областями (CDR), которые перемежаются с более консервативными, называемыми каркасными, областями (FR). Каждая VH и VL состоит из трех CDR и четырех FR, расположенных от амино-конца до карбоксильного конца в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Вариабельные области тяжелой и легкой цепей содержат связывающий домен, который взаимодействует с антигеном. Константные области антитела могут опосредовать связывание иммуноглобулина с тканями или факторами хозяина, включая различные клетки иммунной системы (например, эффекторные клетки) и первый компонент (C1q) классической системы комплемента.

Используемый в настоящем документе термин «человеческое антитело» охватывает антитела, имеющие вариабельные области, в которых как каркасные, так и CDR, области происходят из последовательностей человеческих иммуноглобулинов зародышевой линии. Более того, если антитело содержит константную область, то константная область также происходит из последовательностей человеческих иммуноглобулинов зародышевой линии. Человеческие антитела по настоящему изобретению могут содержать аминокислотные остатки, не кодируемые последовательностями человеческих иммуноглобулинов зародышевой линии (например, мутации, внесенные путем случайного или сайт-специфического мутагенеза in vitro, или за счет соматической мутации in vivo).

Используемый в настоящем документе термин «моноклональное антитело» означает антитело, полученное из популяции по существу однородных антител, то есть, отдельные антитела, образующие популяцию, являются идентичными и/или связывают один и тот же эпитоп, за исключением возможных вариантов антител, например, содержащих природные мутации или возникающих в процессе производства препаратов моноклонального антитела; такие варианты, как правило, присутствуют в незначительных количествах. В отличие от препаратов поликлональных антител, которые, как правило, содержат разные антитела, направленные против разных детерминант (эпитопов), каждое моноклональное антитело в препарате моноклонального антитела направлено против одной детерминанты на антигене. Таким образом, определение «моноклональное» указывает на особенность этого антитела, как полученного из по существу однородной популяции антител, и его не следует воспринимать как указание на то, что антитело получено каким-либо конкретным методом. Например, моноклональные антитела, используемые в соответствии с настоящим изобретением, могут быть получены самыми разными методами, включая, но без ограничения, метод гибридом, метод рекомбинантной ДНК, методы фагового дисплея, а также методы с использованием трансгенных животных, в геноме которых присутствуют все или часть локусов человеческих иммуноглобулинов, такие методы и другие иллюстративные методы получения моноклональных антител, описаны в настоящем документе.

Используемый в настоящем документе термин «рекомбинантное человеческое антитело» охватывает все человеческие антитела, которые получены, экспрессированы, созданы или выделены рекомбинантными методами, например, (a) антитела, выделенные из организма животного (например, мыши), которое является трансгенным или трансхромосомным в отношении генов человеческих иммуноглобулинов, либо из гибридомы, полученной из его клеток (описано ниже), (b) антитела, выделенные из клетки-хозяина, трансформированной для экспрессии человеческого антитела, например, из трансфектомы, (c) антитела, выделенные из рекомбинантной комбинаторной библиотеки человеческих антител, и (d) антитела, полученные, экспрессированные, созданные или выделенные любыми другими методами, включающими сплайсинг последовательностей генов человеческих иммуноглобулинов с другими последовательностями ДНК. Такие рекомбинантные человеческие антитела имеют вариабельные области, в которых области каркаса и CDR происходят из последовательностей человеческих иммуноглобулинов зародышевой линии. Однако в конкретных вариантах осуществления такие рекомбинантные человеческие антитела могут быть подвергнуты мутагенезу in vitro (или, если используют животное, трансгенное в отношении последовательностей человеческих Ig, соматическому мутагенезу in vivo) и, следовательно, аминокислотные последовательности областей VH и VL рекомбинантных антител представляют собой последовательности, которые, хотя получены из, и родственны последовательностям человеческих VH и VL зародышевой линии, могут не существовать естественным образом в репертуаре человеческих антител зародышевой линии in vivo.

Термин «гуманизированное антитело» означает антитела, в которых последовательности CDR, полученные из антител зародышевой линии других видов млекопитающих, таких как мышь, были привиты на каркасные последовательности иммуноглобулинов человека. Внутри каркасных последовательностей иммуноглобулинов человека могут быть сделаны дополнительные модификации каркасной области.

Термин «химерное антитело» означает антитело, в котором последовательности вариабельной области происходят из иммуноглобулинов одного биологического вида, а последовательности константной области происходят из иммуноглобулинов другого биологического вида, например, антитело, в котором последовательности вариабельной области происходят из антитела мыши, а последовательности константной области происходят из человеческого антитела.

При использовании в настоящем документе, антитело, которое «специфически связывается с BCMA человека», означает антитело, которое связывается с BCMA человека с KD, составляющей примерно 5×10-7 M или менее, примерно 1×10-7 M или менее, примерно 5×10-8 M или менее, примерно 1×10-8 M или менее, примерно 5×10-9 M или менее, примерно 1×10-9 M или менее, примерно 5×10-10 M или менее, примерно 1×10-10 M или менее, примерно 5×10-11 M или менее, или примерно 1×10-11 M или менее.

Выражения «антитело, которое конкурирует за связывание» или «антитело, которое перекрестно конкурирует за связывание» с эталонным антителом при связывании с антигеном, например, BCMA, относятся к антителу, которое блокирует связывание эталонного антитела с антигеном (например, BCMA) в анализе конкурентного связывания на 50% или более, и наоборот, эталонное антитело блокирует связывание антитела с антигеном (например, BCMA) в анализе конкурентного связывания на 50% или более. Иллюстративный анализ конкурентного связывания описан в разделе «Antibodies», Harlow and Lane (Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, NY).

Используемый в настоящем документе термин «изотип» означает класс антител (например, IgM или IgG1), который закодирован генами константной области тяжелой цепи.

Выражения «антитело, узнающее антиген» и «антитело, специфичное для антигена» в настоящем документе используют взаимозаменяемо с термином «антитело, которое специфически связывается с антигеном (например, полипептидом BMCA)».

Используемый в настоящем документе термин «антигенсвязывающий фрагмент» или «антигенсвязывающая область» антитела означает область или часть антитела, которая связывается с антигеном, и которая придает антителу специфичность в отношении антигена; фрагменты антигенсвязывающих белков, например, антител, включают один или более фрагментов антитела, которые сохраняют способность специфически связываться с антигеном (например, полипептидом BCMA). Показано, что антигенсвязывающую функцию антитела могут выполнять фрагменты полноразмерного антитела. Примеры антигенсвязывающих фрагментов антитела, охваченных термином «фрагменты антитела», включают Fab-фрагмент, одновалентный фрагмент, состоящий из доменов VL, VH, CL и CH1; F(ab)2-фрагмент, двухвалентный фрагмент, содержащий два Fab-фрагмента, связанные дисульфидным мостом в шарнирной области; Fd-фрагмент, состоящий из доменов VH и CH1; Fv-фрагмент, состоящий из доменов VL и VH одного плеча антитела; dAb-фрагмент (Ward et al., 1989 Nature 341: 544-546), который состоит из домена VH; и выделенную определяющую комплементарность область (CDR).

Кроме того, хотя два домена Fv-фрагмента, VL и VH, закодированы разными генами, они могут быть соединены рекомбинантными методами с использованием синтетического линкера, который делает возможным их получение в виде одной белковой цепи, в которой области VL и VH спариваются, образуя одновалентные молекулы. Они известны как одноцепочечные Fv (scFv); смотри, например, Bird et al., 1988 Science 242: 423-426; и Huston et al., 1988 Proc. Natl. Acad. Sci. 85: 5879-5883. Такие фрагменты антитела получают с использованием общепринятых методов, известных специалистам в данной области, и эти фрагменты подвергают скринингу на наличие у них полезных свойств таким же образом, как и целые антитела.

«Выделенное антитело» или «выделенный антигенсвязывающий белок» представляет собой белок, который был идентифицирован и отделен и/или извлечен из компонентов его естественного окружения. «Синтетические антитела» или «рекомбинантные антитела», как правило, получают рекомбинантными методами или методами пептидного синтеза, известными специалистам в данной области.

Термины «BCMA» и «антиген созревания B-клеток» используются взаимозаменяемо и включают варианты, изоформы, гомологи у других биологических видов человеческого BCMA, а также аналоги, имеющие по меньшей мере один общий эпитоп с BCMA (например, BCMA человека). Иллюстративную последовательность BCMA человека можно найти в базе данных генов Entrez под регистрационным №: NP_001183.

Используемый в настоящем документе термин «одноцепочечный вариабельный фрагмент» или «scFv» означает слитый белок из вариабельных областей тяжелой (VH) и легкой (VL) цепей иммуноглобулина (например, мыши или человека), ковалентно связанных, с образованием VH::VL гетеродимера. Вариабельные области тяжелой (VH) и легкой (VL) цепей либо связаны напрямую, либо связаны с помощью закодированного пептидного линкера (например, длиной 10, 15, 20, 25 аминокислот), который соединяет N-конец VH с C-концом VL или C-конец VH с N-концом VL. Как правило, линкер бывает богат остатками глицина для гибкости, а также остатками серина или треонина для растворимости. Линкер может связывать вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи внеклеточного антигенсвязывающего фрагмента. Неограничивающие примеры линкеров приведены в Shen et al., Anal. Chem. 80(6): 1910-1917 (2008) и WO 2014/087010, полное содержание которых включено в настоящий документ посредством ссылки. В конкретных вариантах осуществления линкер представляет собой линкер G4S. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 191, которая представлена ниже:

GGGGSGGGGSGGGGS [SEQ ID NO: 191].

В конкретных вариантах осуществления нуклеотидная последовательность, кодирующая аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, приведена в SEQ ID NO: 192, которая представлена ниже:

GGTGGAGGTGGATCAGGTGGAGGTGGATCTGGTGGAGGTGGATCT [SEQ ID NO: 192].

В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69, которая представлена ниже.

SRGGGGSGGGGSGGGGSLEMA [SEQ ID NO: 69]

В конкретных вариантах осуществления нуклеотидная последовательность, кодирующая аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 69, приведена в SEQ ID NO: 70, которая представлена ниже:

tctagaggtggtggtggtagcggcggcggcggctctggtggtggtggatccctcgagatggcc [SEQ ID NO: 70]

В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность GGGGS [SEQ ID NO: 193].

В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность SGGSGGS [SEQ ID NO: 194].

В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность GGGGSGGGS [SEQ ID NO: 195].

В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность GGGGSGGGGS [SEQ ID NO: 196].

В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность GGGGSGGGGSGGGGGGGS [SEQ ID NO: 197].

В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS [SEQ ID NO: 198].

В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность GGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS [SEQ ID NO: 199].

В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность GGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS [SEQ ID NO: 200].

В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность GGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS [SEQ ID NO: 201].

В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность EPKSCDKTHTCPPCP [SEQ ID NO: 202].

В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность GGGGSGGGSEPKSCDKTHTCPPCP [SEQ ID NO: 203].

В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность

ELKTPLGDTTHTCPRCPEPKSCDTPPPCPRCPEPKSCDTPPPCPRCPEPKSCDTPPPCPRCP [SEQ ID NO: 204].

В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность GSGSGS [SEQ ID NO: 205].

В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность AAA [SEQ ID NO: 206].

Несмотря на удаление константных областей и введение линкера, белки scFv сохраняют специфичность исходного иммуноглобулина. Антитела, представляющие собой одноцепочечный полипептид Fv, могут экспрессироваться с нуклеиновой кислоты, содержащей кодирующие VH и VL последовательности, как описано в Huston, et al. (Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 85: 5879-5883, 1988). Смотри также патенты США №№ 5091513, 5132405 и 4956778; и публикации патентов США №№ 20050196754 и 20050196754. Описаны антагонистические scFv, обладающие ингибирующей активностью (смотри, например, Zhao et al., Hyrbidoma (Larchmt) 2008 27(6): 455-51; Peter et al., J Cachexia Sarcopenia Muscle 2012 August 12; Shieh et al., J Imunol 2009 183(4): 2277-85; Giomarelli et al., Thromb Haemost 2007 97(6): 955-63; Fife et al., J Clin Invst 2006 116(8): 2252-61; Brocks et al., Immunotechnology 1997 3(3): 173-84; Moosmayer et al., Ther Immunol 1995 2(10: 31-40). Описаны агонистические scFv, обладающие стимулирующей активностью (смотри, например, Peter et al., J Biol Chem 2003 25278(38): 36740-7; Xie et al., Nat Biotech 1997 15(8): 768-71; Ledbetter et al., Crit Rev Immunol1997 17(5-6): 427-55; Ho et al., BioChim Biophys Acta 2003 1638(3): 257-66).

Используемый в настоящем документе термин «F(ab)» означает фрагмент структуры антитела, который связывается с антигеном, но является одновалентным и не имеет Fc-части, например, при расщеплении антитела ферментом папаином образуются два F(ab)-фрагмента и Fc-фрагмент (например, константная область тяжелой (H) цепи; Fc-область, которая не связывается с антигеном).

Используемый в настоящем документе термин «F(ab')2» означает фрагменты антитела, получаемые при расщеплении пепсином целых IgG антител, при этом данный фрагмент имеет две антигенсвязывающие области (ab') (двухвалентный), причем каждая (ab') область содержит две отдельные аминокислотные цепи, часть H-цепи и легкая (L) цепь соединены S-S связью для связывания антигена и при этом оставшиеся части H-цепей связаны вместе. «F(ab')2»-фрагмент может быть разделен на два отдельных Fab'-фрагмента.

Используемый в настоящем документе термин «вектор» означает любой генетический элемент, такой как плазмида, фаг, транспозон, космида, хромосома, вирус, вирион и так далее, который способен к репликации, будучи связан с правильными контрольными элементами, и который может переносить последовательности генов в клетки. Таким образом, термин охватывает клонирующие и экспрессионные векторы, а также вирусные векторы и плазмидные векторы.

Используемый в настоящем документе термин «CDR» означает аминокислотные последовательности определяющей комплементарность области антитела, которые представляют собой гипервариабельные области тяжелых и легких цепей иммуноглобулинов. Смотри, например, Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 4-е издание, U.S. Department of Health and Human Services, National Institutes of Health (1987). Используемый в настоящем документе термин «гипервариабельная область» или «HVR» означает каждую из областей вариабельного домена антитела, которая имеет гипервариабельную последовательность («определяющие комплементарность области» или «CDR») и/или образует петли с определенной структурой («гипервариабельные петли»), и/или содержит контактирующие с антигеном остатки («области контакта с антигеном»). Как правило, антитела содержат по три области CDR, или CDR, в вариабельных областях тяжелой цепи и легкой цепи. CDR предоставляют большинство контактирующих остатков для связывания антитела с антигеном или эпитопом.

«Выделенное антитело» представляет собой антитело, которое отделено от компонентов его естественного окружения. В конкретных вариантах осуществления антитело очищено до степени более чем 95% или 99% чистоты, что определяют, например, методом электрофореза (например, SDS-ПААГ, изоэлектрофокусирования (ИЭФ), капиллярного электрофореза) или хроматографии (например, ионообменной или обращенно-фазовой ВЭЖХ). Для получения информации о методах оценки чистоты антитела смотри, например, Flatman et al., J. Chromatogr. B 848: 79-87 (2007).

Термин «выделенная нуклеиновая кислота» относится к молекуле нуклеиновой кислоты, которая была отделена от компонентов ее естественного окружения. Выделенная нуклеиновая кислота включает молекулу нуклеиновой кислоты, содержащуюся в клетках, которые обычно содержат эту молекулу нуклеиновой кислоты, однако эта молекула нуклеиновой кислоты присутствует внехромосомно или в участке хромосомы, который отличается от участка ее естественной локализации в хромосоме.

«Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая антитело» (включая ссылку на конкретное антитело, например, анти-KLB антитело) означает одну или более молекул нуклеиновой кислоты, кодирующих тяжелую и легкую цепи антитела (или его фрагментов), включая такую молекулу(ы) нуклеиновой кислоты, которая находится в одном векторе, отдельных векторах, и такую молекулу(ы) нуклеиновой кислоты, которая присутствует в одном или более участках в клетке-хозяине.

Используемый в настоящем документе термин «вектор» означает молекулу нуклеиновой кислоты, способную к распространению другой нуклеиновой кислоты, с которой она связана. Термин включает вектор в виде структуры самореплицирующейся нуклеиновой кислоты, а также вектор, встроенный в геном клетки-хозяина, в которую он был введен. Некоторые векторы способны управлять экспрессией нуклеиновых кислот, с которыми они функционально связаны. В настоящем документе такие векторы называют «экспрессионными векторами».

«Иммуноконъюгат» представляет собой антитело, конъюгированное с одной или более гетерологичными молекулами, включая, но без ограничения, цитотоксическое средство.

«Эффективное количество» средства, например, анти-BCMA антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, фармацевтической композиции, содержащей его, означает количество, эффективное, в дозах и в течение периодов времени, которые необходимы, для достижения желательного терапевтического или профилактического результата, например, лечения опухоли (например, множественной миеломы).

«Индивидуум» или «субъект» является млекопитающим. Млекопитающие включают, но без ограничения, одомашненных животных (например, коров, овец, кошек, собак и лошадей), приматов (например, людей и отличных от людей приматов, таких как обезьяны), кроликов и грызунов (например, мышей и крыс). В конкретных вариантах осуществления индивидуум или субъект является человеком.

Используемый в настоящем документе термин «лечение» (и его грамматические вариации, такие как «лечить» или «лечащий») означает клиническое вмешательство в попытке изменить естественное течение заболевания у индивидуума, который получает лечение, и которое может производиться либо в профилактических целях, либо во время клинической патологии. Желательные эффекты лечения включают, но не ограничиваются ими, предотвращение возникновения или рецидива заболевания, ослабление симптомов, уменьшение любых прямых или косвенных патологических последствий заболевания, предотвращение метастазирования, снижение скорости прогрессирования заболевания, облегчение или ослабление болезненного состояния, а также достижение ремиссии или более благоприятного прогноза. В конкретных вариантах осуществления антитела по настоящему изобретению используют для отсрочки развития заболевания или для замедления прогрессирования заболевания, например, опухоли (множественной миеломы).

Используемый в настоящем документе термин «примерно» или «приблизительно» означает допустимый диапазон ошибки для конкретной величины, что может определять рядовой специалист в данной области; этот диапазон будет зависеть частично от того, каким образом величину определяют или измеряют, то есть, от ограничений системы измерения. Например, «примерно» может означать «в пределах 3 или более чем 3 стандартных отклонений», в соответствии с практикой в данной области. Альтернативно, «примерно» может означать «диапазон вплоть до 20%, предпочтительно до 10%, более предпочтительно до 5% и даже более предпочтительно до 1% от конкретной величины». Альтернативно, особенно в случае биологических систем или процессов, термин может означать «в пределах порядка величины», предпочтительно в пределах 5-кратного значения, и более предпочтительно, в пределах 2-двукратного значения величины.

При использовании в настоящем документе, любой диапазон концентраций, диапазон процентных значений, диапазон соотношений или диапазон целых чисел следует понимать, как включающий любое целое число в пределах указанного диапазона и, при необходимости, его части (например, одну десятую часть и одну сотую часть целого числа), если нет иных указаний.

Анти-BCMA антитела

Антитела по настоящему изобретению характеризуются конкретными функциональными особенностями или свойствами антител. Например, антитела специфически связываются с BCMA (например, BCMA человека и могут перекрестно реагировать с BCMA других биологических видов, таких как мышь). В конкретных вариантах осуществления антитело по настоящему изобретению связывается с BCMA с высокой аффинностью, например, с Kd, составляющей 1×10-6 M или менее, например, примерно 1×10-7 M или менее, примерно 1×10-8 M или менее, примерно 1×10-9 M или менее, примерно 1×10-10 M или менее, или примерно 1×10-11 M или менее. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело связывается с BCMA (например, BCMA человека) с Kd, составляющей от примерно 1×10-11 M до примерно 1×10-6 M, например, от примерно 1×10-11 M до примерно 1×10-10 M, от примерно 1×10-10 M до примерно 1×10-9 M, от 1×10-9 M до примерно 1×10-8 M, от примерно 1×10-8 M до примерно 1×10-7 M, или от примерно 1×10-7 M до примерно 1×10-6 M. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело связывается с BCMA (например, BCMA человека) с Kd, составляющей примерно 1×10-8 M или менее. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело связывается с BCMA (например, BCMA человека) с Kd, составляющей от примерно 1×10-9 M до примерно 1×10-8 M. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело связывается с BCMA (например, BCMA человека) с Kd, составляющей от примерно 1×10-9 M до примерно 1,5×10-9 M. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело связывается с BCMA (например, BCMA человека) с Kd, составляющей примерно 1,2×10-9 M. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело связывается с BCMA (например, BCMA человека) с Kd, составляющей от примерно 4×10-9 M до примерно 5×10-9 M. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело связывается с BCMA (например, BCMA человека) с Kd, составляющей примерно 5×10-9 M. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело связывается с BCMA (например, BCMA человека) с Kd, составляющей примерно 4,8×10-9 M. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело связывается с BCMA (например, BCMA человека) с Kd, составляющей от примерно 8×10-9 M до примерно 9×10-9 M. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело связывается с BCMA (например, BCMA человека) с Kd, составляющей примерно 8×10-9 M. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело связывается с BCMA (например, BCMA человека) с Kd, составляющей примерно 8,1×10-9 M.

Тяжелая и легкая цепи антитела по настоящему изобретению могут быть полноразмерными (например, антитело может содержать по меньшей мере одну (например, одну или две) полную тяжелую цепь и по меньшей мере одну (например, одну или две) полную легкую цепь) или могут содержать антигенсвязывающую часть (Fab, F(ab')2, Fv или одноцепочечный Fv-фрагмент («scFv»)). В конкретных вариантах осуществления константную область тяжелой цепи антитела выбирают из, например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD и IgE, в частности, выбирают из, например, IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4, более конкретно, IgG1 (например, IgG1 человека). В другом варианте осуществления константную область легкой цепи антитела выбирают из, например, каппа или лямбда, в частности, каппа.

1. Одноцепочечные вариабельные фрагменты (scFv)

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение охватывает антитела, которые содержат последовательность scFv, слитую с одним или более константными доменами, с образованием антитела с Fc-областью человеческого иммуноглобулина, для получения двухвалентного белка, что повышает общую авидность и стабильность антитела. Кроме того, Fc-фрагмент делает возможной прямую конъюгацию других молекул, включая, но без ограничения, флуоресцентные красители, цитотоксины, радиоизотопы и так далее, с антителом, например, для использования в количественном определении антигена, иммобилизации антитела для определения аффинности, для направленной доставки терапевтического средства, для тестирования на Fc-опосредованную цитотоксичность с использованием иммунных эффекторных клеток и для многих других вариантов применения.

Представленные в настоящем документе результаты подчеркивают специфичность, чувствительность и полезность антител по изобретению при таргетировании полипептида BCMA.

Молекулы по изобретению получены в результате идентификации и выбора с использованием фагового дисплея одноцепочечных вариабельных фрагментов (scFv), аминокислотная последовательность которых придает молекулам специфичность в отношении интересующего полипептида BCMA и создает основу для всех антигенсвязывающих белков по изобретению. Таким образом, scFv можно использовать для конструирования множества различных молекул «антител», включая, например, полноразмерные антитела, их фрагменты, такие как Fab и F(ab')2, минитела, слитые белки, в том числе слитые белки scFv-Fc, мультивалентные антитела, то есть, антитела, которые имеют более одной специфичности для одного и того же антигена или разных антигенов, например, биспецифичные антитела, триотела и так далее (смотри Cuesta et al., Multivalent antibodies: when design surpasses evolution. Trends in Biotechnology 28: 355-362 2010).

В конкретных вариантах осуществления антигенсвязывающий белок представляет собой полноразмерное антитело, тяжелая и легкая цепи антитела по настоящему изобретению могут быть полноразмерными (например, антитело может содержать по меньшей мере одну, и предпочтительно две полные тяжелые цепи, и по меньшей мере одну, и предпочтительно две полные легкие цепи), или может содержать антигенсвязывающую часть (Fab, F(ab')2, Fv или одноцепочечный Fv-фрагмент («scFv»)). В конкретных вариантах осуществления константную область тяжелой цепи антитела выбирают из, например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD и IgE. В конкретных вариантах осуществления изотип иммуноглобулина выбирают из IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4, более конкретно, IgG1 (например, IgG1 человека). Выбор изотипа антитела может зависеть от иммунной эффекторной функции, которую антитело предназначено выполнять.

Для конструирования рекомбинантного иммуноглобулина, соответствующие аминокислотные последовательности константных областей различных изотипов иммуноглобулина и способы получения широкого спектра антител известны специалистам в данной области.

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 72 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71, которая представлена ниже, или ее фрагменты), обозначенный ET140-192 (другое название «ET140-42»).

MLQMAGQCSQNEYFDSLLHACIPCQLRCSSNTPPLTCQRYCNASVTNSVKGTNAILWTCLGLSLIISLAVFVLMFLLRKINSEPLKDEFKNTGSGLLGMANIDLEKSRTGDEIILPRGLEYTVEECTCEDCIKSKPKVDSDHCFPLPAMEEGATILVTTKTNDYCKSLPAALSATEIEKSISAR [SEQ ID NO: 71]

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 1. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, смотри таблицу 1. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, смотри таблицу 1. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, смотри таблицу 1. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 89, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 90, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 91, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 1. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 92, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 93, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 94, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 1. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 89, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 90, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 91, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 92, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 93, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 94, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 1. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 89, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 90, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 91, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 92, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 93, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 94.

Таблица 1

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH VSSNSAAWN [SEQ ID NO: 89] YRSKWYN [SEQ ID NO: 90] ARQGYSYYGYSDV [SEQ ID NO: 91] VL SSNIGHND [SEQ ID NO: 92] FDD [SEQ ID NO: 93 AAWDGSLNAFV [SEQ ID NO: 94] Полная VH QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGRTYYRSKWYNDYAVSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPЭДТАVYYCARQGYSYYGYSDVWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 1] ДНК Caggtacagctgcagcagtcaggtccaggactggtgaagccctcgcagaccctctcactcacctgtgccatctccggggacagtgtctctagcaacagtgctgcttggaactggatcaggcagtccccatcgagaggccttgagtggctgggaaggacatactacaggtccaagtggtataatgattatgcagtatctgtgaaaagtcgaataaccatcaacccagacacatccaagaaccagttctccctgcagctgaactctgtgactcccgaggacacggctgtgtattactgtgcgcgccagggttactcttactacggttactctgatgtttggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca [SEQ ID NO: 3] Полная VL QSVLTQPPSVSVAPRQRVTISCSGSSSNIGHNDVSWYQHLPGKAPRLLIYFDDLLPSGVSDRFSASKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDGSLNAFVFGTGTKVTVLG [SEQ ID NO: 2] ДНК Cagtctgtgctgactcagccaccctcggtgtctgtagcccccaggcagagggtcaccatctcgtgttctggaagcagctccaacatcggacataatgatgtaagctggtaccagcatctcccagggaaggctcccagactcctcatctattttgatgacctgctgccgtcaggggtctctgaccgattctctgcctccaagtctggcacctcagcctccctggccatcagtgggctccagtctgaggatgaggctgattattactgtgcagcatgggatggcagcctgaatgcctttgtcttcggaactgggaccaaggtcaccgtcctaggt [SEQ ID NO: 4] scFv QSVLTQPPSVSVAPRQRVTISCSGSSSNIGHNDVSWYQHLPGKAPRLLIYFDDLLPSGVSDRFSASKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDGSLNAFVFGTGTKVTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAQVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGRTYYRSKWYNDYAVSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPЭДТАVYYCARQGYSYYGYSDVWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 72]

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 73 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 или ее фрагменты), обозначенный ET140-197 (другое название «ET140-47»).

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 2. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, смотри таблицу 2. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6, смотри таблицу 2. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6, смотри таблицу 2. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 95, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 96, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 97, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 2. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 98, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 99, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 100, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 2. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 95, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 96, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 97, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 98, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 99, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 100, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 2. В конкретных вариантах осуществления внеклеточный антигенсвязывающий домен содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 95, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 96, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 97, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 98, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 99, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 100.

Таблица 2

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH VSSNSAAWN [SEQ ID NO: 95] YRSKWYN [SEQ ID NO: 96] ARYGFSGSRFYDT [SEQ ID NO: 97] VL SSNIGNNA [SEQ ID NO: 98] FDD [SEQ ID NO: 99] AAWDDSLNGYV [SEQ ID NO: 100] Полная VH QVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGRTYYRSKWYNDYAVSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPЭДТАVYYCARYGFSGSRFYDTWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 5] ДНК Caggtacagctgcagcagtcaggtccaggactggtgaagccctcgcagaccctctcactcacctgtgccatctccggggacagtgtctctagcaacagtgctgcttggaactggatcaggcagtccccatcgagaggccttgagtggctgggaaggacatactacaggtccaagtggtataatgattatgcagtatctgtgaaaagtcgaataaccatcaacccagacacatccaagaaccagttctccctgcagctgaactctgtgactcccgaggacacggctgtgtattactgtgcgcgctacggtttctctggttctcgtttctacgatacttggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca [SEQ ID NO: 7] Полная VL QPVLTQPPSVSEAPRQRVTISCSGSSSNIGNNAVNWYQQLPGKAPKLLIYFDDLLSSGVSDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDDSLNGYVFGTGTKVTVLG [SEQ ID NO: 6] ДНК Cagcctgtgctgactcagccaccctcggtgtctgaagcccccaggcagagggtcaccatctcctgttctggaagcagctccaacatcggaaataatgctgtaaactggtaccagcagctcccaggaaaggctcccaaactcctcatctattttgatgatctgctgtcctcaggggtctctgaccgattctctggctccaagtctggcacctcagcctccctggccatcagtgggctccagtctgaagatgaggctgattattactgtgcagcatgggatgacagcctgaatggttatgtcttcggaactgggaccaaggtcaccgtcctaggt [SEQ ID NO: 8] scFv QPVLTQPPSVSEAPRQRVTISCSGSSSNIGNNAVNWYQQLPGKAPKLLIYFDDLLSSGVSDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDDSLNGYVFGTGTKVTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAQVQLQQSGPGLVKPSQTLSLTCAISGDSVSSNSAAWNWIRQSPSRGLEWLGRTYYRSKWYNDYAVSVKSRITINPDTSKNQFSLQLNSVTPЭДТАVYYCARYGFSGSRFYDTWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 73]

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 74 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 или ее фрагменты), обозначенный ET140-180 (другое название «ET140-30»).

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 3. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9, смотри таблицу 3. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10, смотри таблицу 3. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10, смотри таблицу 3. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 101, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 102, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 103, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 3. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 104, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 105, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 106, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 3. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 101, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 102, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 103, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 104, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 105, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 106, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 3. В конкретных вариантах осуществления внеклеточный антигенсвязывающий домен содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 101, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 102, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 103, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 104, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 105, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 106.

Таблица 3

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH GGTFSSYA [SEQ ID NO: 101] IIPILGIA [SEQ ID NO: 102] ARSGYSKSIVSYMDY [SEQ ID NO: 103] VL SSNIGSNV [SEQ ID NO: 104] RNN [SEQ ID NO: 105] AAWDDSLSGYV [SEQ ID NO: 106] Полная VH EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGRIIPILGIANYAQKFQGRVTMTEDTSTDTAYMELSSLRSЭДТАVYYCARSGYSKSIVSYMDYWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 9] ДНК Gaggtccagctggtgcagtctggagctgaggtgaagaagcctgggtcctcggtgaaggtctcctgcaaggcttctggaggcaccttcagcagctatgctatcagctgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggaaggatcatccctatccttggtatagcaaactacgcacagaagttccagggcagagtcaccatgaccgaggacacatctacagacacagcctacatggagctgagcagcctgagatctgaggacacggccgtgtattactgtgcgcgctctggttactctaaatctatcgtttcttacatggattactggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca [SEQ ID NO: 11] Полная VL LPVLTQPPSTSGTPGQRVTVSCSGSSSNIGSNVVFWYQQLPGTAPKLVIYRNNQRPSGVPDRFSVSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLSGYVFGTGTKVTVLG [SEQ ID NO: 10] ДНК Ctgcctgtgctgactcagcccccctccacgtctgggacccccgggcagagggtcaccgtctcttgttctggaagcagctccaacatcggaagtaatgttgtattctggtaccagcagctcccaggcacggcccccaaacttgtcatctataggaataatcaacggccctcaggggtccctgaccgattctctgtctccaagtctggcacctcagcctccctggccatcagtgggctccggtccgaggacgaggctgattattattgtgcagcttgggatgacagcctgagtggttatgtcttcggaactgggaccaaggtcaccgtcctaggt [SEQ ID NO: 12] scFv LPVLTQPPSTSGTPGQRVTVSCSGSSSNIGSNVVFWYQQLPGTAPKLVIYRNNQRPSGVPDRFSVSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLSGYVFGTGTKVTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAEVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGRIIPILGIANYAQKFQGRVTMTEDTSTDTAYMELSSLRSЭДТАVYYCARSGYSKSIVSYMDYWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 74]

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 75 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 или ее фрагменты), обозначенный ET140-172 (другое название «ET140-22»).

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 4. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, смотри таблицу 4. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, смотри таблицу 4. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, смотри таблицу 4. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 107, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 108, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 109, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 4. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 110, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 111, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 112, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 4. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 107, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 108, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 109, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 110, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 111, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 112, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 4. В конкретных вариантах осуществления внеклеточный антигенсвязывающий домен содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 107, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 108, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 109, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 110, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 111, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 112.

Таблица 4

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH GYTFTSYY [SEQ ID NO: 107] INPSGGST [SEQ ID NO: 108] ARSQWGGVLDY [SEQ ID NO: 109] VL SSNIGARYD [SEQ ID NO: 110] GNN [SEQ ID NO: 111] QSYDSSLSASV [SEQ ID NO: 112] Полная VH EVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYYMHWVRQAPGQGLEWMGIINPSGGSTSYAQKFQGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSЭДТАVYYCARSQWGGVLDYWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 13] ДНК Gaggtccagctggtacagtctggggctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtttcctgcaaggcatctggatacaccttcaccagctactatatgcactgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggaataatcaaccctagtggtggtagcacaagctacgcacagaagttccagggcagagtcaccatgaccagggacacgtccacgagcacagtctacatggagctgagcagcctgagatctgaggacacggccgtgtattactgtgcgcgctctcagtggggtggtgttctggattactggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca [SEQ ID NO: 15] Полная VL QSVVTQPPSVSGAPGQRVTISCSGSSSNIGARYDVQWYQQLPGTAPKLLIFGNNNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAITGLQAEDEADYYCQSYDSSLSASVFGGGTKLTVLG [SEQ ID NO: 14] ДНК Cagtctgtcgtgacgcagccgccctcagtgtctggggccccagggcagagggtcaccatctcctgcagtgggagcagctccaacatcggggcacgttatgatgttcagtggtaccagcagcttccaggaacagcccccaaactcctcatctttggtaacaacaatcggccctcaggggtccctgaccgattctctggctccaagtctggcacgtcagcctccctggccatcactgggctccaggctgaggatgaggctgattattactgccagtcctatgacagcagcctgagtgcttcggtgttcggcggagggaccaagctgaccgtcctaggt [SEQ ID NO: 16] scFv QSVVTQPPSVSGAPGQRVTISCSGSSSNIGARYDVQWYQQLPGTAPKLLIFGNNNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAITGLQAEDEADYYCQSYDSSLSASVFGGGTKLTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAEVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYYMHWVRQAPGQGLEWMGIINPSGGSTSYAQKFQGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSЭДТАVYYCARSQWGGVLDYWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 75]

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 76 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 или ее фрагменты), обозначенный ET140-157 (другое название «ET140-7»).

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 5. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17, смотри таблицу 5. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18, смотри таблицу 5. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18, смотри таблицу 5. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 113, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 114, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 115, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 5. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 116, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 117, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 118, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 5. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 113, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 114, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 115, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 116, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 117, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 118, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 5. В конкретных вариантах осуществления внеклеточный антигенсвязывающий домен содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 113, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 114, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 115, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 116, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 117, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 118.

Таблица 5

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH GGTFSSYA [SEQ ID NO: 113] IIPILGIA [SEQ ID NO: 114] ARTGYESWGSYEVIDR [SEQ ID NO: 115] VL SSNIGSNT [SEQ ID NO: 116] SNN [SEQ ID NO: 117] AAWDDSLNGVV [SEQ ID NO: 118] Полная VH QVQLVESGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGRIIPILGIANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSЭДТАVYYCARTGYESWGSYEVIDRWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 17] ДНК Caggtgcagctggtggagtctggggctgaggtgaagaagcctgggtcctcggtgaaggtctcctgcaaggcttctggaggcaccttcagcagctatgctatcagctgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggaaggatcatccctatccttggtatagcaaactacgcacagaagttccagggcagagtcacgattaccgcggacgaatccacgagcacagcctacatggagctgagcagcctgagatctgaggacacggccgtatattactgtgcgcgcactggttacgaatcttggggttcttacgaagttatcgatcgttggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca [SEQ ID NO: 19] Полная VL QAVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNTVNWYRQLPGTAPKLLIYSNNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDDSLNGVVFGGGTKLTVLG [SEQ ID NO: 18] ДНК Caggctgtgctgactcagccaccctcagcgtctgggacccccgggcagagggtcaccatctcttgttctggaagcagctccaacatcggaagtaatactgtaaactggtaccggcagctcccaggaacggcccccaaactcctcatctatagtaataatcagcggccctcaggggtccctgaccgattctctggctccaagtctggcacctcagcctccctggccatcagtgggctccagtctgaggatgaggctgattattactgtgcagcatgggatgacagcctgaatggtgtggtattcggcggagggaccaagctgaccgtcctaggt [SEQ ID NO: 20] scFv QAVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNTVNWYRQLPGTAPKLLIYSNNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDDSLNGVVFGGGTKLTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAQVQLVESGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGRIIPILGIANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSЭДТАVYYCARTGYESWGSYEVIDRWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 76]

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 77 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 или ее фрагменты), обозначенный ET140-153 (другое название «ET140-3»).

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 6. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21, смотри таблицу 6. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22, смотри таблицу 6. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22, смотри таблицу 6. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 119, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 120, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 121, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 6. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 122, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 123, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 124, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 6. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 119, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 120, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 121, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 122, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 123, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 124, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 6. В конкретных вариантах осуществления внеклеточный антигенсвязывающий домен содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 119, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 120, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 121, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 122, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 123, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 124.

Таблица 6

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH GGTFSSYA [SEQ ID NO: 119] IIPILGIA [SEQ ID NO: 120] ARGGYYSHDMWSED [SEQ ID NO: 121] VL SSNIGSNS [SEQ ID NO: 122] SNN [SEQ ID NO: 123] ATWDDNLNVHYV [SEQ ID NO: 124] Полная VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGRIIPILGIANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSЭДТАVYYCARGGYYSHDMWSEDWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 21] ДНК Caggtgcagctggtgcagtctggggctgaggtgaagaagcctgggtcctcggtgaaggtctcctgcaaggcttctggaggcaccttcagcagctatgctatcagctgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggaaggatcatccctatccttggtatagcaaactacgcacagaagttccagggcagagtcacgattaccgcggacaaatccacgagcacagcctacatggagctgagcagcctgagatctgaggacacggccgtgtattactgtgcgcgcggtggttactactctcatgacatgtggtctgaagattggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca [SEQ ID NO: 23] Полная VL LPVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGRSSNIGSNSVNWYRQLPGAAPKLLIYSNNQRPPGVPVRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEATYYCATWDDNLNVHYVFGTGTKVTVLG [SEQ ID NO: 22] ДНК Ctgcctgtgctgactcagccaccctcagcgtctgggacccccgggcagagggtcaccatctcttgttctggacgcagttccaacatcgggagtaattctgttaactggtatcgacaactcccaggagcggcccccaaactcctcatctatagtaataatcagcggcccccaggggtccctgtgcgattctctggctccaagtctggcacctcagcctccctggccatcagtgggctccagtctgaagatgaggccacttattactgtgcaacatgggatgacaatctgaatgttcactatgtcttcggaactgggaccaaggtcaccgtcctaggt [SEQ ID NO: 24] scFv LPVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGRSSNIGSNSVNWYRQLPGAAPKLLIYSNNQRPPGVPVRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEATYYCATWDDNLNVHYVFGTGTKVTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGRIIPILGIANYAQKFQGRVTITADKSTSTAYMELSSLRSЭДТАVYYCARGGYYSHDMWSEDWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 77]

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 78 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 или ее фрагменты), обозначенный ET140-201 (другое название «ET140-51»).

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 25, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 26, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 7. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 25, смотри таблицу 7. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 26, смотри таблицу 7. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 25, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 26, смотри таблицу 7. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 125, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 126, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 127, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 7. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 128, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 129, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 130, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 7. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 125, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 126, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 127, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 128, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 129, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 130, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 7. В конкретных вариантах осуществления внеклеточный антигенсвязывающий домен содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 125, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 126, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 127, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 128, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 129, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 130.

Таблица 7

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH GGSISNSNW [SEQ ID NO: 125] IYHSGST [SEQ ID NO: 126] ARRDNWKTPTTKIDGFDI [SEQ ID NO: 127] VL SGYSNYK [SEQ ID NO: 128] VGTGGIVG [SEQ ID NO: 129] GADHGSGSNFVYV SEQ ID NO: 130] Полная VH QVQLQESGPGLVKPSGTLSLTCGVSGGSISNSNWWSWVRQPPGKGLEWIGEIYHSGSTKYNPSLRSRVTISVDKSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARRDNWKTPTTKIDGFDIWGQGTMVTVSS [SEQ ID NO: 25] ДНК Caggtgcagctgcaggagtcgggcccaggactggtgaagccttcggggaccctgtccctcacctgcggtgtctctggtggctccatcagcaatagtaactggtggagttgggtccgccagccccccgggaaggggctggagtggattggggaaatctatcatagtgggagcaccaagtacaacccgtccctcaggagtcgagtcaccatatcagtagacaagtccaagaaccagttctccctaaaattgagctctgtgaccgccgcggacacggccgtatattactgtgcgagacgagataactggaagacccccactaccaaaattgatggttttgatatctggggccaagggacaatggtcaccgtctcttca [SEQ ID NO: 27] Полная VL QPVLTQPPSASASLGASVTLTCTLSSGYSNYKVDWYQQRPGKGPRFVMRVGTGGIVGSKGDGIPDRFSVLGSGLNRYLTIKNIQEEDEGDYHCGADHGSGSNFVYVFGTGTKVTVLG [SEQ ID NO: 26] ДНК Cagcctgtgctgactcagccaccttctgcatcagcctccctgggagcctcggtcacactcacctgcaccctgagcagcggctacagtaattataaagtggactggtaccagcagagaccagggaagggcccccggtttgtgatgcgagtgggcactggtgggattgtgggatccaagggggatggcatccctgatcgcttctcagtcttgggctcaggcctgaatcggtacctgaccatcaagaacatccaggaagaagatgagggtgactatcactgtggggcagaccatggcagtgggagcaacttcgtgtatgtcttcggaactgggaccaaggtcaccgtcctaggt [SEQ ID NO: 28] scFv QPVLTQPPSASASLGASVTLTCTLSSGYSNYKVDWYQQRPGKGPRFVMRVGTGGIVGSKGDGIPDRFSVLGSGLNRYLTIKNIQEEDEGDYHCGADHGSGSNFVYVFGTGTKVTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAQVQLQESGPGLVKPSGTLSLTCGVSGGSISNSNWWSWVRQPPGKGLEWIGEIYHSGSTKYNPSLRSRVTISVDKSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARRDNWKTPTTKIDGFDIWGQGTMVTVSS [SEQ ID NO: 78]

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 79 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 или ее фрагменты), обозначенный ET140-167 (другое название «ET140-17»).

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 30, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 8. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29, смотри таблицу 8. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 30, смотри таблицу 8. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 30, смотри таблицу 8. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 131, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 132, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 133, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 8. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 134, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 135, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 136, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 8. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 131, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 132, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 133, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 134, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 135, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 136, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 8. В конкретных вариантах осуществления внеклеточный антигенсвязывающий домен содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 131, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 132, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 133, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 134, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 135, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 136.

Таблица 8

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH GYTFTGYY [SEQ ID NO: 131] INPNSGGT [SEQ ID NO: 132] ARSQWGSSWDY [SEQ ID NO: 133] VL QSISSY [SEQ ID NO: 134] AAS [SEQ ID NO: 135] QQSYSTPPT [SEQ ID NO: 136] Полная VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTGYYMHWVRQAPGQGLEWMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCARSQWGSSWDYWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 29] ДНК Caggtccagctggtacagtctggggctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggatacaccttcaccggctactatatgcactgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggatggatcaaccctaacagtggtggcacaaactatgcacagaagtttcagggcagggtcaccatgaccagggacacgtccatcagcacagcctacatggagctgagcaggctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgcgctctcagtggggttcttcttgggattactggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca [SEQ ID NO: 31] Полная VL DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSYSTPPTFGQGTKVEIKR [SEQ ID NO: 30] ДНК Gacatccagttgacccagtctccatcctccctgtctgcatctgtaggagacagagtcaccatcacttgccgggcaagtcagagcattagcagctatttaaattggtatcagcagaaaccagggaaagcccctaagctcctgatctatgctgcatccagtttgcaaagtggggtcccatcaaggttcagtggcagtggatctgggacagatttcactctcaccatcagcagtctgcaacctgaagattttgcaacttactactgtcaacagagttacagtacccctccgacgttcggccaagggaccaaggtggagatcaaacgt [SEQ ID NO: 32] scFv DIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSYSTPPTFGQGTKVEIKRSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTGYYMHWVRQAPGQGLEWMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCARSQWGSSWDYWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 79]

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 80 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 или ее фрагменты), обозначенный ET140-163 (другое название «ET140-13»).

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 33, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 34, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 9. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 33, смотри таблицу 9. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 34, смотри таблицу 9. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 33, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 34, смотри таблицу 9. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 137, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 138, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 139, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 9. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 140, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 141, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 142, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 9. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 137, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 138, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 139, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 140, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 141, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 142, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 9. В конкретных вариантах осуществления внеклеточный антигенсвязывающий домен содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 137, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 138, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 139, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 140, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 141, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 142.

Таблица 9

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH GYTFTGYY [SEQ ID NO: 137] INPNSGGT [SEQ ID NO: 138] ARSSYHLYGYDS [SEQ ID NO: 139] VL NDYTNYK [SEQ ID NO: 140] VGPGGIVG [SEQ ID NO: 141] GADHGTGSNFVYV [SEQ ID NO: 142] Полная VH EVQLVESGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTGYYMHWVRQAPGQGLEWMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCARSSYHLYGYDSWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 33] ДНК Gaggtgcagctggtggagtccggggctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggatacaccttcaccggctactatatgcactgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggatggatcaaccctaacagtggtggcacaaactatgcacagaagtttcagggcagggtcaccatgaccagggacacgtccatcagcacagcctacatggagctgagcaggctgagatctgacgacacggccgtatattactgtgcgcgctcttcttaccatctgtacggttacgattcttggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca [SEQ ID NO: 35] Полная VL QPVLTQPPSASASLGASVTLTCTLSNDYTNYKVDWYQQRPGKGPRFVMRVGPGGIVGSKGDGIPDRFSVLGSGLNRYLTIKNIQEEDESDYHCGADHGTGSNFVYVFGGGTKLTVLG [SEQ ID NO: 34] ДНК Cagcctgtgctgactcagccaccttctgcatcagcctccctgggagcctcggtcactctcacctgcaccctgagcaacgactacactaattataaagtggactggtaccagcagagaccagggaagggcccccggtttgtgatgcgagtgggccctggtgggattgtgggatccaagggggatggcatccctgatcgcttctcagtcttgggctcaggcctgaatcgatacctgaccatcaagaacatccaggaggaggatgagagtgactaccactgtggggcggaccatggcaccgggagcaacttcgtgtacgtgttcggcggagggaccaagctgaccgtcctaggt [SEQ ID NO: 36] scFv QPVLTQPPSASASLGASVTLTCTLSNDYTNYKVDWYQQRPGKGPRFVMRVGPGGIVGSKGDGIPDRFSVLGSGLNRYLTIKNIQEEDESDYHCGADHGTGSNFVYVFGGGTKLTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAEVQLVESGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTGYYMHWVRQAPGQGLEWMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCARSSYHLYGYDSWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 80]

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 81 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 или ее фрагменты), обозначенный ET140-207 (другое название «ET140-57»).

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 37, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 38, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 98. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 10. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 37, смотри таблицу 10. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 38, смотри таблицу 10. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 37, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 38, смотри таблицу 10. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 143, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 144, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 145, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 10. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 146, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 147, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 148, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 10. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 143, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 144, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 145, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 146, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 147, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 148, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 10. В конкретных вариантах осуществления внеклеточный антигенсвязывающий домен содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 143, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 144, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 145, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 146, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 147, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 148.

Таблица 10

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH GGTFSSYA [SEQ ID NO: 143] IIPIFSTA [SEQ ID NO: 144] ARQPWTWYSPYDQ [SEQ ID NO: 145] VL SGYSNYK [SEQ ID NO: 146] VDTGGIVG [SEQ ID NO: 147] GADHGSGSNFVWV [SEQ ID NO: 148] Полная VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFSTANYAQKFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARQPWTWYSPYDQWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 37] ДНК Caggtgcagctggtgcagtctggggctgaggtgaagaagcctgggtcctcggtgaaggtctcctgcaaggcttctggaggcaccttcagcagctatgctatcagctgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggagggatcatccctatctttagtacagcaaactacgcacagaagttccagggcagagtcaccatgaccacagacacatccacgagcacagcctacatggagctgaggagcctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgcgccagccgtggacttggtactctccgtacgatcagtggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca [SEQ ID NO: 39] Полная VL QPVLTQPPSASASLGASVTLTCTLSSGYSNYKVDWYQQRPGKGPRFLMRVDTGGIVGSKGDGIPDRFSVSGSGLNRYLTIKNIQEEDESDYHCGADHGSGSNFVWVFGGGTKLTVLG [SEQ ID NO: 38] ДНК Cagcctgtgctgactcagccaccttctgcatcagcctccctgggagcctcggtcacactcacctgcaccctgagcagcggctacagtaattataaagtggactggtatcaacagagaccagggaagggcccccggtttctgatgcgagtagacaccggtgggattgtgggatccaagggggatggcatccctgatcgcttctcagtctcgggctcaggtctgaatcggtacctgaccatcaagaacattcaggaagaggatgagagtgactaccactgtggggcagaccatggcagtgggagcaacttcgtgtgggtgttcggcggagggaccaagctgaccgtcctaggt [SEQ ID NO: 40] scFv QPVLTQPPSASASLGASVTLTCTLSSGYSNYKVDWYQQRPGKGPRFLMRVDTGGIVGSKGDGIPDRFSVSGSGLNRYLTIKNIQEEDESDYHCGADHGSGSNFVWVFGGGTKLTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFSTANYAQKFQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARQPWTWYSPYDQWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 81]

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 82 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 или ее фрагменты), обозначенный ET140-165 (другое название «ET140-15»).

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 41, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 42, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 11. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 41, смотри таблицу 11. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 42, смотри таблицу 11. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 41, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 42, смотри таблицу 11. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 149, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 150, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 151, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 11. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 152, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 153, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 154, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 11. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 147, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 150, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 151, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 152, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 153, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 154, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 11. В конкретных вариантах осуществления внеклеточный антигенсвязывающий домен содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 149, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 150, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 151, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 152, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 153, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 154.

Таблица 11

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH GFTFSTYA [SEQ ID NO: 149] ITPGGDRT [SEQ ID NO: 150] ARYYGYMIDM [SEQ ID NO: 151] VL QSLLHSNGYNY [SEQ ID NO: 152] LGS [SEQ ID NO: 153] MQALQTPLT [SEQ ID NO: 154] Полная VH EVQLVETGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSTYAMTWVRQAPGKGLEWVSAITPGGDRTYYADSVKGRFTISRDNSRNTLYLQMNSLRAЭДТАVYYCARYYGYMIDMWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 41] ДНК Gaggtgcagctggtggagactgggggaggcctggtacagcctggggggtccctgagactctcctgtgctgcctctggattcacctttagcacctatgccatgacctgggtccgccaggctccagggaaggggctggagtgggtctcagctattactcctggtggtgatcgcacatactacgcagactccgtgaagggccgtttcactatctccagagacaattccaggaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggccgtatattactgtgcgcgctactacggttacatgatcgatatgtggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca [SEQ ID NO: 43] Полная VL DVVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSQSLLHSNGYNYLDWYLQKPGQSPQLLIYLGSNRASGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQALQTPLTFGGGTKVEIKR [SEQ ID NO: 42] ДНК Gatgttgtgatgactcagtctccactctccctgcccgtcacccctggagagccggcctccatctcctgcaggtctagtcagagcctcctgcatagtaatggatacaactatttggattggtacctgcagaagccagggcagtctccacagctcctgatctatttgggttctaatcgggcctccggggtccctgacaggttcagtggcagtggatcaggcacagattttacactgaaaatcagcagagtggaggctgaggatgttggggtttattactgcatgcaagctctacaaactcctctcactttcggcggagggaccaaggtggaaatcaaacgt [SEQ ID NO: 44] scFv DVVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSQSLLHSNGYNYLDWYLQKPGQSPQLLIYLGSNRASGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQALQTPLTFGGGTKVEIKRSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAEVQLVETGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSTYAMTWVRQAPGKGLEWVSAITPGGDRTYYADSVKGRFTISRDNSRNTLYLQMNSLRAЭДТАVYYCARYYGYMIDMWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 82]

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 83 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 или ее фрагменты), обозначенный ET140-188 (другое название «ET140-38»).

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 12. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, смотри таблицу 12. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46, смотри таблицу 12. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46, смотри таблицу 12. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 155, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 156, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 157, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 12. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 158, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 159, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 160, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 12. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 155, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 156, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 157, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 158, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 159, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 160, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 12. В конкретных вариантах осуществления внеклеточный антигенсвязывающий домен содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 155, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 156, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 157, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 158, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 159, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 160.

Таблица 12

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH GYTFTGYY [SEQ ID NO: 155] INPNSGGT [SEQ ID NO: 156] ARSQWGGTYDY [SEQ ID NO: 157] VL SSNIGSNT [SEQ ID NO: 158] SNN [SEQ ID NO: 159] AAWDDSLNGWV [SEQ ID NO: 160] Полная VH QMQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTGYYVHWLRQAPGQGLEWMGWINPNSGGTNNAQEFQGRITMTRDTSINTAYMELSRLRSDDTAVYYCARSQWGGTYDYWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 45] ДНК Cagatgcagctggtgcagtctggggctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggatacaccttcaccggctattatgtacactggttgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggttggatcaaccctaacagtggcggcacaaacaatgcacaggagtttcaaggcaggatcaccatgaccagggacacgtccatcaacacagcctacatggagctgagcaggctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgcgctctcagtggggtggtacttacgattactggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca [SEQ ID NO: 47] Полная VL SYVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNTVNWYQQVPGTAPKLLIYSNNQRPSGVPDRFSGSKSGASASLAISWLQSEDEADYYCAAWDDSLNGWVFGGGTKLTVLG [SEQ ID NO: 46] ДНК Tcctatgtgctgactcagccaccctcagcgtctgggacccccgggcagagggtcaccatctcttgttctggaagcagctccaacatcggaagtaatactgtaaactggtaccagcaggtcccaggaacggcccccaaactcctcatctatagtaataatcagcggccctcaggggtccctgaccgattctctggctccaagtctggcgcctcagcctccctggccatcagttggctccagtctgaggatgaggctgattattactgtgcagcatgggatgacagcctgaatggttgggtgttcggcggagggaccaagctgaccgtcctaggt [SEQ ID NO: 48] scFv SYVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNTVNWYQQVPGTAPKLLIYSNNQRPSGVPDRFSGSKSGASASLAISWLQSEDEADYYCAAWDDSLNGWVFGGGTKLTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAQMQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTGYYVHWLRQAPGQGLEWMGWINPNSGGTNNAQEFQGRITMTRDTSINTAYMELSRLRSDDTAVYYCARSQWGGTYDYWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 83]

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 84 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 или ее фрагменты), обозначенный ET140-196 (другое название «ET140-46»).

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 49, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 50, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 13. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 49, смотри таблицу 13. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 50, смотри таблицу 13. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 49, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 50, смотри таблицу 13. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 161, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 162, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 163, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 13. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 164, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 165, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 166, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 13. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 161, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 162, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 163, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 164, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 165, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 166, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 13. В конкретных вариантах осуществления внеклеточный антигенсвязывающий домен содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 161, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 162, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 163, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 164, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 165, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 166.

Таблица 13

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH GYDFTTYW [SEQ ID NO: 161] IYPGDSDT [SEQ ID NO: 162] ARMWTFSQDG [SEQ ID NO: 163] VL SSNIGSYT [SEQ ID NO: 164] SNN [SEQ ID NO: 165] AAWDDSLNGYV [SEQ ID NO: 166] Полная VH EVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGYDFTTYWIGWVRQMPGKGLEWMGIIYPGDSDTRYSPSVRGRVTISADKSINTAYLQWSSLEASDTAMYYCARMWTFSQDGWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 49] ДНК gaggtgcagctggtgcagtctggagcagaggtgaaaaagccgggggagtctctgaagatctcctgtaagggttctggatatgactttaccacctactggatcgggtgggtgcgccagatgcccgggaagggcctggagtggatggggatcatctatcctggtgactctgataccagatacagcccgtccgtccgaggccgggtcaccatctcagccgacaagtccatcaacaccgcctatttgcagtggagtagcctggaggcctccgacaccgccatgtattactgtgcgcgcatgtggactttctctcaggatggttggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca [SEQ ID NO: 51] Полная VL QAVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSYTVSWYQQLPGTAPKFLIYSNNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDDSLNGYVFGTGTKVTVLG [SEQ ID NO: 50] ДНК Caggctgtgctgactcagccaccctcagcgtctgggacccccgggcagagggtcaccatctcttgttctggaagcagctccaacatcggaagttatactgtaagctggtaccagcaactcccaggaacggcccccaaattcctcatctattctaataatcagcggccctcaggggtccctgaccgattctctggctccaagtctggcacctcagcctccctggccatcagtgggctccagtctgaggatgaggctgattattactgtgctgcatgggatgacagcctgaatggttatgtcttcggaactgggaccaaggtcaccgtcctaggt [SEQ ID NO: 52] scFv QAVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSYTVSWYQQLPGTAPKFLIYSNNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDDSLNGYVFGTGTKVTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAEVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGYDFTTYWIGWVRQMPGKGLEWMGIIYPGDSDTRYSPSVRGRVTISADKSINTAYLQWSSLEASDTAMYYCARMWTFSQDGWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 84]

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 85 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 или ее фрагменты), обозначенный ET140-204 (другое название «ET140-54»).

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 53, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 54, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 14. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 53, смотри таблицу 14. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 54, смотри таблицу 14. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 53, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 54, смотри таблицу 14. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 167, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 168, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 169, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 14. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 170, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 171, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 172, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 14. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 167, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 168, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 169, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 170, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 171, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 172, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 14. В конкретных вариантах осуществления внеклеточный антигенсвязывающий домен содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 167, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 168, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 169, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 170, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 171, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 172.

Таблица 14

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH GYTFIDYY [SEQ ID NO: 167] INPNSGGT [SEQ ID NO: 168] ARSQRDGYMDY [SEQ ID NO: 169] VL ISCTGTSSD [SEQ ID NO: 170] EDS [SEQ ID NO: 171] SSNTRSSTLV [SEQ ID NO: 172] Полная VH EVQLVQSGAEMKKPGASLKLSCKASGYTFIDYYVYWMRQAPGQGLESMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAMYYCARSQRDGYMDYWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 53] ДНК Gaagtgcagctggtgcagtctggggctgagatgaagaagcctggggcctcactgaagctctcctgcaaggcttctggatacaccttcatcgactactatgtatactggatgcgacaggcccctggacaagggcttgagtccatgggatggatcaaccctaacagtggtggcacaaactatgcacagaagtttcagggcagggtcaccatgaccagggacacgtccatcagcacagcctacatggagctgagcaggctgagatctgacgacaccgccatgtattactgtgcgcgctcccagcgtgacggttacatggattactggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca [SEQ ID NO: 55] Полная VL QSALTQPASVSASPGQSIAISCTGTSSDVGWYQQHPGKAPKLMIYEDSKRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSNTRSSTLVFGGGTKLTVLG [SEQ ID NO: 54] ДНК Caatctgccctgactcagcctgcctccgtgtctgcgtctcctggacagtcgatcgccatctcctgcactggaaccagcagtgacgttggttggtatcaacagcacccaggcaaagcccccaaactcatgatttatgaggacagtaagcggccctcaggggtttctaatcgcttctctggctccaagtctggcaacacggcctccctgaccatctctgggctccaggctgaggacgaggctgattattactgcagctcaaatacaagaagcagcactttggtgttcggcggagggaccaagctgaccgtcctaggt [SEQ ID NO: 56] scFv QSALTQPASVSASPGQSIAISCTGTSSDVGWYQQHPGKAPKLMIYEDSKRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSNTRSSTLVFGGGTKLTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAEVQLVQSGAEMKKPGASLKLSCKASGYTFIDYYVYWMRQAPGQGLESMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAMYYCARSQRDGYMDYWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 85]

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 86 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 или ее фрагменты), обозначенный ET140-190 (другое название «ET140-40»).

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 57, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 58, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 15. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 57, смотри таблицу 15. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 58, смотри таблицу 15. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 57, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 58, смотри таблицу 15. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 173, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 174, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 175, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 15. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 176, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 177, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 178, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 15. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 173, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 174, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 175, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 176, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 177, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 178, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 15. В конкретных вариантах осуществления внеклеточный антигенсвязывающий домен содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 173, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 174, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 175, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 176, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 177, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 178.

Таблица 15

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH GYTFTDYY [SEQ ID NO: 173] INPNSGGT [SEQ ID NO: 174] ARSPYSGVLDK [SEQ ID NO: 175] VL SSNIGAGFD [SEQ ID NO: 176] GNS [SEQ ID NO: 177] QSYDSSLSGYV [SEQ ID NO: 178] Полная VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYYMHWVRQAPGQRLEWMGWINPNSGGTNYAQKFQDRITVTRDTSSNTGYMELTRLRSDDTAVYYCARSPYSGVLDKWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 57] ДНК Caggtccagctggtacagtctggggctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtctcctgcaaggcttctggatacaccttcaccgactactatatgcactgggtgcgacaggcccctggacaacggcttgagtggatgggatggatcaaccctaacagtggtggcacaaactatgcacagaagtttcaggacaggatcaccgtgaccagggacacctccagcaacacaggctacatggagctgaccaggctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgcgctctccgtactctggtgttctggataaatggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca [SEQ ID NO: 59] Полная VL QSVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAGFDVHWYQQLPGTAPKLLIYGNSNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAITGLQAEDEADYYCQSYDSSLSGYVFGTGTKVTVLG [SEQ ID NO: 58] ДНК Cagtctgtgctgacgcagccgccctcagtgtctggggccccagggcagagggtcaccatctcctgcactgggagcagctccaacatcggggcaggttttgatgtacactggtaccagcagcttccaggaacagcccccaaactcctcatctatggtaacagcaatcggccctcaggggtccctgaccgattctctggctccaagtctggcacctcagcctccctggccatcactgggctccaggctgaggatgaggctgattattactgccagtcctatgacagcagcctgagtggttatgtcttcggaactgggaccaaggtcaccgtcctaggt [SEQ ID NO: 60] scFv QSVLTQPPSVSGAPGQRVTISCTGSSSNIGAGFDVHWYQQLPGTAPKLLIYGNSNRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAITGLQAEDEADYYCQSYDSSLSGYVFGTGTKVTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYYMHWVRQAPGQRLEWMGWINPNSGGTNYAQKFQDRITVTRDTSSNTGYMELTRLRSDDTAVYYCARSPYSGVLDKWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 86]

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 87 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 или ее фрагменты), обозначенный ET140-187 (другое название «ET140-37»).

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 61, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 62, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 16. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 61, смотри таблицу 16. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 62, смотри таблицу 16. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 61, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 62, смотри таблицу 16. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 179, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 180, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 181, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 16. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 182, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 183, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 184, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 16. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 179, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 180, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 181, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 182, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 183, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 184, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 16. В конкретных вариантах осуществления внеклеточный антигенсвязывающий домен содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 179, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 180, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 181, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 182, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 183, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 184.

Таблица 16

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH GGTFSSYA [SEQ ID NO: 179] IIPILGTA [SEQ ID NO: 180] ARSGYGSYRWEDS [SEQ ID NO: 181] VL SSNIGSNY [SEQ ID NO: 182] SNN [SEQ ID NO: 183] AAWDDSLSASYV [SEQ ID NO: 184] Полная VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGRIIPILGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSЭДТАVYYCARSGYGSYRWEDSWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 61] ДНК Caggtgcagctggtgcagtctggggctgaggtgaagaagcctgggtcctcggtgaaggtctcctgcaaggcttctggaggcaccttcagcagctatgctatcagctgggtgcgacaggcccctggacaagggcttgagtggatgggaaggatcatccctatccttggtacagcaaactacgcacagaagttccagggcagagtcacgattaccgcggacgaatccacgagcacagcctacatggagctgagcagcctgagatctgaggacacggccgtgtattactgtgcgcgctctggttacggttcttaccgttgggaagattcttggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca [SEQ ID NO: 63] Полная VL QAVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNYVFWYQQLPGTAPKLLIYSNNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLSASYVFGTGTKVTVLG [SEQ ID NO: 62] ДНК Caggctgtgctgactcagccaccctcagcgtctgggacccccgggcagagggtcaccatctcttgttctggaagcagctccaacatcggaagtaattacgtattctggtaccagcagctcccaggaacggcccccaaactcctcatctatagtaataatcagcggccctcaggggtccctgaccgattctctggctccaagtctggcacctcagcctccctggccatcagtgggctccggtccgaggatgaggctgattattactgtgcagcatgggatgacagcctgagtgcctcttatgttttcggaactgggaccaaggtcaccgtcctaggt [SEQ ID NO: 64] scFv QAVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNYVFWYQQLPGTAPKLLIYSNNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCAAWDDSLSASYVFGTGTKVTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGRIIPILGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSЭДТАVYYCARSGYGSYRWEDSWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 87]

В конкретных вариантах осуществления антитело или другой антигенсвязывающий белок представляет собой анти-BCMA scFv, или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий антигенсвязывающую область, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 88 и специфически связывается с полипептидом BCMA (например, полипептидом BCMA, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 или ее фрагменты), обозначенный ET140-174 (другое название «ET140-24»).

В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 65, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 66, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv антитело представляет собой слитый белок scFv-Fc или полноразмерный IgG человека с областями VH и VL или CDR, выбранными из таблицы 17. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 65, смотри таблицу 17. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 66, смотри таблицу 17. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 65, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 66, смотри таблицу 17. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 185, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 186, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 187, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 17. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 188, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 189, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 190, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 17. В конкретных вариантах осуществления анти-BCMA scFv содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 185, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 186, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 187, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 188, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 189, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 190, или ее консервативные модификации, смотри таблицу 17. В конкретных вариантах осуществления внеклеточный антигенсвязывающий домен содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 185, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 186, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 187, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 188, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 189, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 190.

Таблица 17

Антиген Полипептид BCMA, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71 CDR 1 2 3 VH GYSFTSYW [SEQ ID NO: 185] IYPGDSDT [SEQ ID NO: 186] ARYSGSFDN [SEQ ID NO: 187] VL SSNIGSHS [SEQ ID NO: 188] TNN [SEQ ID NO: 189] AAWDGSLNGLV [SEQ ID NO: 190] Полная VH EVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGYSFTSYWIGWVRQMPGKGLEWMGIIYPGDSDTRYSPSFQGHVTISADKSISTAYLQWSSLKASDTAMYYCARYSGSFDNWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 65] ДНК Gaggtgcagctggtgcagtctggagcagaggtgaaaaagcccggggagtctctgaagatctcctgtaagggttctggatacagctttaccagctactggatcggctgggtgcgccagatgcccgggaaaggcctggagtggatggggatcatctatcctggtgactctgataccagatacagcccgtccttccaaggccacgtcaccatctcagctgacaagtccatcagcactgcctacctgcagtggagcagcctgaaggcctcggacaccgccatgtattactgtgcgcgctactctggttctttcgataactggggtcaaggtactctggtgaccgtctcctca [SEQ ID NO: 67] Полная VL SYELTQPPSASGTPGQRVTMSCSGTSSNIGSHSVNWYQQLPGTAPKLLIYTNNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDGSLNGLVFGGGTKLTVLG [SEQ ID NO: 66] ДНК Tcctatgagctgactcagccaccctcagcgtctgggacccccgggcagagggtcaccatgtcttgttctggaaccagctccaacatcggaagtcactctgtaaactggtaccagcagctcccaggaacggcccccaaactcctcatctatactaataatcagcggccctcaggggtccctgaccgattctctggctccaagtctggcacctcagcctccctggccatcagtggcctccagtctgaggatgaggctgattattactgtgcagcatgggatggcagcctgaatggtctggtattcggcggagggaccaagctgaccgtcctaggt [SEQ ID NO: 68] scFv SYELTQPPSASGTPGQRVTMSCSGTSSNIGSHSVNWYQQLPGTAPKLLIYTNNQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDGSLNGLVFGGGTKLTVLGSRGGGGSGGGGSGGGGSLEMAEVQLVQSGAEVKKPGESLKISCKGSGYSFTSYWIGWVRQMPGKGLEWMGIIYPGDSDTRYSPSFQGHVTISADKSISTAYLQWSSLKASDTAMYYCARYSGSFDNWGQGTLVTVSS [SEQ ID NO: 88]

Настоящее изобретение также относится к анти-BCMA scFv антителам, содержащим вариабельную область тяжелой цепи, вариабельную область легкой цепи, пептидный линкер между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи, а также His-метку и HA-метку. В конкретных вариантах осуществления аминокислотная последовательность His-метки и HA-метки содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 246, которая представлена ниже:

TSGQAGQHHHHHHGAYPYDVPDYAS [SEQ ID NO: 246]

Нуклеотидная последовательность, кодирующая SEQ ID NO: 246, соответствует SEQ ID NO: 247, которая представлена ниже:

ACTAGTGGCCAGGCCGGCCAGCACCATCACCATCACCATGGCGCATACCCGTACGACGTTCCGGACTACGCTTCT [SEQ ID NO: 247]

2. Моноклональные антитела

Настоящее изобретение относится к человеческим антителам (например, человеческим моноклональным антителам), которые специфически связываются с BCMA (например, BCMA человека) и которые выделены и структурно охарактеризованы, как описано в примере 2. Аминокислотные последовательности VH человеческих анти-BCMA антител ET140-192 (другое название «ET140-42»), ET140-197 (другое название «ET140-47»), ET140-180 (другое название «ET140-30»), ET140-172 (другое название «ET140-22»), ET140-157 (другое название «ET140-7»), ET140-153 (другое название «ET140-3»), ET140-201 (другое название «ET140-51»), ET140-167 (другое название «ET140-17»), ET140-163 (другое название «ET140-13»), ET140-207 (другое название «ET140-57»), ET140-165 (другое название «ET140-15»), ET140-188 (другое название «ET140-38»), ET140-196 (другое название «ET140-46»), ET140-204 (другое название «ET140-54»), ET140-190 (другое название «ET140-40»), ET140-187 (другое название «ET140-37») и ET140-174 (другое название «ET140-24») приведены в SEQ ID NOs: 1, 5, 9, 13, 17, 21, 25, 29, 33, 37, 41, 45, 49, 53, 57, 61 и 65, соответственно. Аминокислотные последовательности VL из ET140-192, ET140-197, ET140-180, ET140-172, ET140-157, ET140-153, ET140-201, ET140-167, ET140-163, ET140-207, ET140-165, ET140-188, ET140-196, ET140-204, ET140-190, ET140-187, и ET140-174 приведены в SEQ ID NOs: 2, 6, 10, 14, 18, 22, 26, 30, 34, 38, 42, 46, 50, 54, 58, 62 и 66, соответственно.

Учитывая, что каждое из антител ET140-192, ET140-197, ET140-180, ET140-172, ET140-157, ET140-153, ET140-201, ET140-167, ET140-163, ET140-207, ET140-165, ET140-188, ET140-196, ET140-204, ET140-190, ET140-187 и ET140-174 может связываться с BCMA, последовательности VH и VL можно «комбинировать» для создания других анти-BCMA связывающих молекул. Связывание BCMA с такими «комбинированными» антителами можно тестировать в анализах связывания, известных в данной области, включая, например, анализы ELISA, вестерн-блоттинг, RIA, Biacore. Предпочтительно, когда цепи VH и VL комбинируют, то последовательность VH из конкретной пары VH/VL заменяют структурно сходной последовательностью VH. Аналогично, последовательность VL из конкретной пары VH/VL заменяют структурно сходной последовательностью VL.

В конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему: (a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NOs: 1, 5, 9, 13, 17, 21, 25, 29, 33, 37, 41, 45, 49, 53, 57, 61 и 65; и (b) вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NOs: 2, 6, 10, 14, 18, 22, 26, 30, 34, 38, 42, 46, 50, 54, 58, 62 и 66; при этом антитело специфически связывает BCMA, например, BCMA человека.

Предпочтительные комбинации тяжелой и легкой цепей включают:

(a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2; или

(b) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6;

(c) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10;

(d) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14;

(e) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18;

(f) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22;

(g) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 25, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 26;

(h) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 30;

(i) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 33, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 34;

(j) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 37, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 38;

(k) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 41, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 42;

(l) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46;

(m) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 49, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 50;

(n) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 53, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 54;

(o) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 57, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 58;

(p) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 61, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 62; или

(q) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 65, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 66.

В конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к антителам, которые содержат CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи и легкой цепи из антител ET140-192, ET140-197, ET140-180, ET140-172, ET140-157, ET140-153, ET140-201, ET140-167, ET140-163, ET140-207, ET140-165, ET140-188, ET140-196, ET140-204, ET140-190, ET140-187 и ET140-174. Аминокислотные последовательности VH CDR1 из ET140-192, ET140-197, ET140-180, ET140-172, ET140-157, ET140-153, ET140-201, ET140-167, ET140-163, ET140-207, ET140-165, ET140-188, ET140-196, ET140-204, ET140-190, ET140-187 и ET140-174 приведены в SEQ ID NOs: 89, 95, 101, 107, 113, 119, 125, 131, 137, 143, 149, 155, 161, 167, 173, 179 и 185, соответственно. Аминокислотные последовательности VH CDR2 из антител ET140-192, ET140-197, ET140-180, ET140-172, ET140-157, ET140-153, ET140-201, ET140-167, ET140-163, ET140-207, ET140-165, ET140-188, ET140-196, ET140-204, ET140-190, ET140-187 и ET140-174 приведены в SEQ ID NOs: 90, 96, 102, 108, 114, 120, 126, 132, 138, 144, 150, 156, 162, 168, 174, 180 и 186, соответственно. Аминокислотные последовательности VH CDR3 из ET140-192, ET140-197, ET140-180, ET140-172, ET140-157, ET140-153, ET140-201, ET140-167, ET140-163, ET140-207, ET140-165, ET140-188, ET140-196, ET140-204, ET140-190, ET140-187 и ET140-174 приведены в SEQ ID NOs: 91, 97, 103, 109, 115, 121, 127, 133, 139, 145, 151, 157, 163, 169, 175, 181 и 187, соответственно.

Аминокислотные последовательности VL CDR1 из ET140-192, ET140-197, ET140-180, ET140-172, ET140-157, ET140-153, ET140-201, ET140-167, ET140-163, ET140-207, ET140-165, ET140-188, ET140-196, ET140-204, ET140-190, ET140-187 и ET140-174 приведены в SEQ ID NOs: 92, 98, 104, 110, 116, 122, 128, 134, 140, 146, 152, 158, 164, 170, 176, 182 и 188, соответственно. Аминокислотные последовательности VL CDR2 из ET140-192, ET140-197, ET140-180, ET140-172, ET140-157, ET140-153, ET140-201, ET140-167, ET140-163, ET140-207, ET140-165, ET140-188, ET140-196, ET140-204, ET140-190, ET140-187 и ET140-174 приведены в SEQ ID NOs: 93, 99, 105, 111, 117, 123, 129, 135, 141, 147, 153, 159, 165, 171, 177, 183 и 189, соответственно. Аминокислотные последовательности VL CDR3 из ET140-192, ET140-197, ET140-180, ET140-172, ET140-157, ET140-153, ET140-201, ET140-167, ET140-163, ET140-207, ET140-165, ET140-188, ET140-196, ET140-204, ET140-190, ET140-187 и ET140-174 приведены в SEQ ID NOs: 94, 100, 106, 112, 118, 124, 130, 136, 142, 148, 154, 160, 166, 172, 178, 184 и 190, соответственно. Границы областей CDR определены с использованием системы Kabat (Kabat, E. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, пятое издание, U.S. Department of Health и Human Services, NIH Publication No. 91-3242).

Учитывая, что каждое из этих антител может связываться с BCMA, и что специфичность связывания антигена обеспечивается, главным образом, областями CDR1, CDR2 и CDR3, последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 из VH и последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 из VL можно «комбинировать» (то есть, CDR из разных антител можно комбинировать, хотя каждое антитело должно содержать CDR1, CDR2, и CDR3 в VH и CDR1, CDR2, и CDR3 в VL) для создания других анти-BCMA связывающих молекул. Связывание с BCMA таких «комбинированных» антител можно тестировать в анализах связывания, описанных выше. Когда последовательности VH CDR комбинируют, то последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 из конкретной последовательности VH заменяют структурно сходными последовательностями CDR. Аналогично, когда последовательности VL CDR комбинируют, то последовательности CDR1, CDR2 и/или CDR3 из конкретной последовательности VL, предпочтительно, заменяют структурно сходными последовательностями CDR. Для специалиста в данной области будет очевидно, что можно создавать новые последовательности VH и VL путем замены последовательностей одной или более областей CDR из VH и/или VL структурно сходными последовательностями из последовательностей CDR раскрытых в настоящем документе антител ET140-192, ET140-197, ET140-180, ET140-172, ET140-157, ET140-153, ET140-201, ET140-167, ET140-163, ET140-207, ET140-165, ET140-188, ET140-196, ET140-204, ET140-190, ET140-187 и ET140-174.

В конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NOs: 89, 95, 101, 107, 113, 119, 125, 131, 137, 143, 149, 155, 161, 167, 173, 179 и 185;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NOs: 90, 96, 102, 108, 114, 120, 126, 132, 138, 144, 150, 156, 162, 168, 174, 180 и 186;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NOs: 91, 97, 103, 109, 115, 121, 127, 133, 139, 145, 151, 157, 163, 169, 175, 181 и 187;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NOs: 92, 98, 104, 110, 116, 122, 128, 134, 140, 146, 152, 158, 164, 170, 176, 182 и 188;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NOs: 93, 99, 105, 111, 117, 123, 129, 135, 141, 147, 153, 159, 165, 171, 177, 183 и 189; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NOs: 94, 100, 106, 112, 118, 124, 130, 136, 142, 148, 154, 160, 166, 172, 178, 184 и 190;

при этом антитело специфически связывает BCMA, например, BCMA человека.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 89;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 90;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 91;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 92;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 93; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 94.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 95;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 96;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 97;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 98;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 99; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 100.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 101;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 102;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 103;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 104;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 105; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 106.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 107;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 108;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 109;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 110;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 111; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 112.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 113;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 114;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 115;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 116;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 117; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 118.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 119;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 120;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 121;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 122;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 123; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 124.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 125;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 126;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 127;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 128;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 129; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 130.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 131;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 132;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 133;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 134;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 135; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 136.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 137;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 138;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 139;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 140;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 141; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 142.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 143;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 144;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 145;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 146;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 147; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 148.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 149;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 150;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 151;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 152;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 153; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 154.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 155;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 156;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 157;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 158;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 159; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 160.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 161;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 162;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 163;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 164;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 165; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 166.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 167;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 168;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 169;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 170;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 171; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 172.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 173;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 174;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 175;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 176;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 177; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 178.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 179;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 180;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 181;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 182;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 183; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 184.

В конкретных вариантах осуществления антитело содержит:

(a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 185;

(b) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 186;

(c) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 187;

(d) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 188;

(e) CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 189; и

(f) CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 190.

Константная область/каркасная область анти-BCMA антител, раскрытых в настоящем документе, может быть изменена, например, за счет аминокислотной замены, с целью изменения свойств антитела (например, для увеличения, либо уменьшения одного или более из: аффинности связывания антигена, связывания Fc-рецептора, углевода антитела, например, за счет гликозилирования, фукозилирования и так далее, числа остатков цистеина, эффекторной клеточной функции, функции комплемента или для введения сайта конъюгации).

В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело представляет собой полностью человеческое антитело, например, любое из ET140-192, ET140-197, ET140-180, ET140-172, ET140-157, ET140-153, ET140-201, ET140-167, ET140-163, ET140-207, ET140-165, ET140-188, ET140-196, ET140-204, ET140-190, ET140-187 и ET140-174. Полностью человеческие мАт являются предпочтительными для терапевтического использования применительно к людям, поскольку мышиные антитела при введении людям вызывают иммунную реакцию, известную как HAMA-ответ (антитела человека против антител мыши) (Azinovic I., et al. Survival benefit associated with human anti-mouse antibody (HAMA) in patients with B-cell malignancies. Cancer Immunol Immunother 2006; 55(12): 1451-8; Tjandra J.J., et al. Development of human anti-murine antibody (HAMA) response in patients. Immunol Cell Biol 1990; 68(6): 367-76), приводя к серьезным побочным эффектам, включая анафилаксию и реакции гиперчувствительности. Эта иммунная реакция запускается иммунной системой человека, воспринимающей мышиные антитела как чужеродные из-за небольших отличий аминокислотных последовательностей от последовательностей природных человеческих антител. Можно использовать методы гуманизации, известные в данной области (Riechmann L, et al. Reshaping human antibodies for therapy. Nature 1988; 332 (6162): 332:323; Queen C, et al. A humanized antibody that binds to the interleukin 2 receptor. Proc Natl Acad Sci USA 1989; 86 (24): 10029-33), для уменьшения иммуногенности мышиных антител (Gerd R., et al. Serological Analysis of Human Anti-Human Antibody Responses in Colon Cancer Patients Treated with Repeated Doses of Humanized Monoclonal Antibody A33. Cancer Res 2001; 61, 6851-6859).

Использование библиотек фагового дисплея сделало возможным отбор в большом количестве репертуаров Ат на уникальные и редкие Ат против конкретных эпитопов (для более подробной информации о фаговом дисплее смотри McCafferty et al., Phage antibodies: filamentous phage displaying antibody variable domains. Nature, 348: 552-554). Вследствие этого, стала возможной быстрая идентификация человеческих Fab или одноцепочечных Fv (ScFv) фрагментов, высокоспецифичных для молекул комплексов пептид опухолевого антигена-MHC (19-22). Недавно было показано, что иммунотоксины, полученные путем слияния TCR-подобного Fab, специфичного для Аг меланомы MART-1 26-35/A2 или gp100 280-288/A2, с укороченной формой эндотоксина Pseudomonas, ингибируют рост меланомы человека как in vitro, так и in vivo (Klechevsky E., et al. Antitumor activity of immunotoxins with T-cell receptor-like specificity against human melanoma xenografts. Cancer Res 2008; 68 (15): 6360-6367). Кроме того, за счет конструирования полноразмерного мАт с использованием Fab-фрагментов можно напрямую создавать терапевтические человеческие мАт, не тратя месяцы трудоемкой работы, обычно необходимой для разработки терапевтических мАт. Настоящее изобретение включает разработку полностью человеческого мАт, которое узнает, например, полипептид BCMA человека (например, полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 71), для терапии рака.

3. Гомологичные антитела

В конкретных вариантах осуществления антитело по настоящему изобретению содержит вариабельные области тяжелой и легкой цепей, содержащие аминокислотные последовательности, которые гомологичны аминокислотным последовательностям антител, описанных в настоящем документе (например, антител ET140-192, ET140-197, ET140-180, ET140-172, ET140-157, ET140-153, ET140-201, ET140-167, ET140-163, ET140-207, ET140-165, ET140-188, ET140-196, ET140-204, ET140-190, ET140-187 и ET140-174), и при этом антитела сохраняют желательные функциональные свойства анти-BMCA антител по настоящему изобретению.

Например, настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, при этом:

(a) вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NOs: 1, 5, 9, 13, 17, 21, 25, 29, 33, 37, 41, 45, 49, 53, 57, 61 и 65;

(b) вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологична аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NOs: 2, 6, 10, 14, 18, 22, 26, 30, 34, 38, 42, 46, 50, 54, 58, 62 и 66; и

при этом антитело связывается с BCMA человека с Kd, составляющей 1×10-7 M или менее.

В конкретных вариантах осуществления аминокислотные последовательности VH и/или VL могут быть по меньшей мере на примерно 80%, примерно 81%, примерно 82%, примерно 83%, примерно 84%, примерно 85%, примерно 86%, примерно 87%, примерно 88%, примерно 89%, примерно 90%, примерно 91%, примерно 92%, примерно 93%, примерно 94%, примерно 95%, примерно 96%, примерно 97%, примерно 98% или примерно 99% гомологичны последовательностям, приведенным выше. Антитело, содержащее области VH и VL, имеющие высокую степень (то есть, 80% или более) гомологии с областями VH и VL, имеющими последовательности, приведенные выше, можно получать путем мутагенеза (например, сайт-направленного или ПЦР-опосредованного мутагенеза), с последующим тестированием закодированного измененного антитела на сохранение функции (то есть, аффинности связывания) с использованием анализов связывания, описанных в настоящем документе.

При использовании в настоящем документе, процент гомологии между двумя аминокислотными последовательностями эквивалентен проценту идентичности между двумя последовательностями. Процент идентичности между двумя последовательностями зависит от числа идентичных положений в этих последовательностях (то есть, % гомологии=число идентичных положений/общее число положений x 100), с учетом числа разрывов и длины каждого разрыва, который должен быть внесен для оптимального выравнивания двух последовательностей. Сравнение последовательностей и определение процента идентичности между двумя последовательностями можно выполнять с использованием математического алгоритма, как описано в неограничивающих примерах, приведенных ниже.

Процент гомологии между двумя аминокислотными последовательностями можно определять с использованием алгоритма E. Meyers и W. Miller (Comput. Appl. Biosci., 4: 11-17 (1988)), который включен в программу ALIGN (версия 2.0), с использованием таблицы «веса замен остатков» PAM120, штрафа за удлинение разрыва 12 и штрафа за внесение разрыва 4. Кроме того, процент гомологии между двумя аминокислотными последовательностями можно определять с помощью алгоритма Needleman и Wunsch (J. Mol. Biol. 48: 444-453 (1970)), который включен в программу GAP пакета программ GCG (доступна на сайте www.gcg.com), с использованием либо матрицы Blossum 62, либо матрицы PAM250, штрафа за внесение разрыва 16, 14, 12, 10, 8, 6 или 4 и штрафа за удлинение разрыва 1, 2, 3, 4, 5 или 6.

Дополнительно или альтернативно, белковые последовательности по настоящему изобретению также можно использовать в качестве «искомой последовательности» для проведения поиска в общедоступных базах данных с целью, например, выявления родственных последовательностей. Такой поиск можно выполнять с использованием программы XBLAST (версия 2.0), основанной на принципах, описанных в Altschul, et al. (1990) J. Mol. Biol. 215: 403-10. Можно выполнять BLAST-поиск белков с помощью программы XBLAST, оценка=50, длина слова=3, для получения аминокислотных последовательностей, гомологичных молекулам антител по изобретению. Для получения выравниваний с внесенными разрывами в целях сравнения можно использовать программу Gapped BLAST, как описано в Altschul et al., (1997) Nucleic Acids Res. 25(17): 3389-3402. При использовании программ BLAST и Gapped BLAST можно использовать параметры по умолчанию соответствующих программ (например, XBLAST и NBLAST). (Смотри www.ncbi.nlm.nih.gov).

4. Антитела с консервативными модификациями

В конкретных вариантах осуществления антитело по настоящему изобретению содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательности CDR1, CDR2 и CDR3, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательности CDR1, CDR2 и CDR3, при этом одна или более из этих последовательностей CDR содержат конкретные аминокислотные последовательности предпочтительных антител, описанных в настоящем документе (например, антител ET140-192, ET140-197, ET140-180, ET140-172, ET140-157, ET140-153, ET140-201, ET140-167, ET140-163, ET140-207, ET140-165, ET140-188, ET140-196, ET140-204, ET140-190, ET140-187 и ET140-174), или их консервативные модификации, и при этом антитела сохраняют желательные функциональные свойства анти-BCMA антител по настоящему изобретению. Настоящее изобретение относится к выделенному антителу, или его антигенсвязывающему фрагменту, содержащему вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательности CDR1, CDR2, и CDR3, и вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательности CDR1, CDR2, и CDR3, при этом:

(a) последовательность CDR3 вариабельной области тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей SEQ ID NOs: 91, 97, 103, 109, 115, 121, 127, 133, 139, 145, 151, 157, 163, 169, 175, 181 и 187, а также их консервативных модификаций;

(b) последовательность CDR3 вариабельной области легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей SEQ ID NOs: 94, 100, 106, 112, 118, 124, 130, 136, 142, 148, 154, 160, 166, 172, 178, 184 и 190, а также их консервативных модификаций; и антитело связывается с BCMA человека с Kd, составляющей 1×10-7 M или менее.

В конкретных вариантах осуществления последовательность CDR2 вариабельной области тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей SEQ ID NOs: 90, 96, 102, 108, 114, 120, 126, 132, 138, 144, 150, 156, 162, 168, 174, 180 и 186, а также их консервативных модификаций; и последовательность CDR2 вариабельной области легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей SEQ ID NOs: 93, 99, 105, 111, 117, 123, 129, 135, 141, 147, 153, 159, 165, 171, 177, 183 и 189, а также их консервативных модификаций.

В конкретных вариантах осуществления последовательность CDR1 вариабельной области тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей SEQ ID NOs: 89, 95, 101, 107, 113, 119, 125, 131, 137, 143, 149, 155, 161, 167, 173, 179 и 185, а также их консервативных модификаций; и последовательность CDR1 вариабельной области легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей SEQ ID NOs: 92, 98, 104, 110, 116, 122, 128, 134, 140, 146, 152, 158, 164, 170, 176, 182 и 188, а также их консервативных модификаций.

Используемый в настоящем документе термин «консервативные модификации последовательности» означает аминокислотные модификации, которые существенно не затрагивают или не изменяют характеристики связывания антитела, содержащего аминокислотную последовательность. Такие консервативные модификации включают аминокислотные замены, добавления и делеции. Модификации могут быть внесены в антитело по изобретению стандартными методами, известными в данной области, такими как сайт-направленный мутагенез и ПЦР-опосредованный мутагенез.

Консервативные аминокислотные замены являются такими заменами, при которых аминокислотный остаток заменен аминокислотным остатком, имеющим аналогичную боковую цепь. Семейства аминокислотных остатков, имеющих аналогичные боковые цепи, известны в данной области. Иллюстративные консервативные аминокислотные замены приведены в таблице 18. Аминокислотные замены можно вносить в интересующее антитело и проводить скрининг полученных продуктов на наличие желательной активности, например, сохраненного/улучшенного связывания антигена, сниженной иммуногенности, либо улучшенной ADCC или CDC. В конкретных вариантах осуществления последовательность, раскрытая в настоящем документе, например, последовательность CDR, последовательность VH или последовательность VL, может иметь до примерно одного, до примерно двух, до примерно трех, до примерно четырех, до примерно пяти, до примерно шести, до примерно семи, до примерно восьми, до примерно девяти или до примерно десяти аминокислотных остатков, которые модифицированы и/или заменены.

Таблица 18

Исходный остаток Иллюстративные консервативные аминокислотные замены Ala (A) Val; Leu; Ile Arg (R) Lys; Gln; Asn Asn (N) Gln; His; Asp, Lys; Arg Asp (D) Glu; Asn Cys (C) Ser; Ala Gln (Q) Asn; Glu Glu (E) Asp; Gln Gly (G) Ala His (H) Asn; Gln; Lys; Arg Ile (I) Leu; Val; Met; Ala; Phe Leu (L) Ile; Val; Met; Ala; Phe Lys (K) Arg; Gln; Asn Met (M) Leu; Phe; Ile Phe (F) Trp; Leu; Val; Ile; Ala; Tyr Pro (P) Ala Ser (S) Thr Thr (T) Val; Ser Trp (W) Tyr; Phe Tyr (Y) Trp; Phe; Thr; Ser Val (V) Ile; Leu; Met; Phe; Ala

Аминокислоты могут быть сгруппированы на основании общих свойств боковой цепи:

- гидрофобные: норлейцин, Met, Ala, Val, Leu, Ile;

- нейтральные гидрофильные: Cys, Ser, Thr, Asn, Gln;

- кислые: Asp, Glu;

- основные: His, Lys, Arg;

- остатки, которые влияют на ориентацию цепи: Gly, Pro;

- ароматические: Trp, Tyr, Phe.

Не консервативные замены являются заменой представителя одного класса на представителя другого класса.

5. Анти-BCMA антитела, которые перекрестно конкурируют за связывание с BCMA с анти-BCMA антителами по изобретению

Настоящее изобретение относится к антителам, которые перекрестно конкурируют с любым из раскрытых анти-BCMA антител за связывание с BCMA (например, BCMA человека). Например, и без ограничения, перекрестно конкурирующие антитела могут связываться с той же областью эпитопа, например, тем же эпитопом, соседним эпитопом или перекрывающимся эпитопом, что и любое из анти-BCMA антител по настоящему изобретению. В конкретных вариантах осуществления эталонное антитело для исследований перекрестного конкурирования может быть любым из анти-BCMA антител, раскрытых в настоящем документе, например, антител ET140-192, ET140-197, ET140-180, ET140-172, ET140-157, ET140-153, ET140-201, ET140-167, ET140-163, ET140-207, ET140-165, ET140-188, ET140-196, ET140-204, ET140-190, ET140-187 и ET140-174.

В конкретных вариантах осуществления перекрестно конкурирующее антитело связывается с областью эпитопа, содержащей аминокислоты 14-22 из SEQ ID NO: 71. В конкретных вариантах осуществления перекрестно конкурирующее антитело связывается с одной, двумя, тремя, четырьмя, пятью, шестью или семью областями эпитопа, выбранными из группы, состоящей из аминокислот 8-22, 9-23, 10-24, 11-25, 12-26, 13-27, 14-28 и 8-28 из SEQ ID NO: 71.

Такие перекрестно конкурирующие антитела можно идентифицировать на основании их способности перекрестно конкурировать с любым из раскрытых в настоящем документе анти-BCMA антител в стандартных анализах связывания BCMA. Например, можно использовать анализ Biacore, анализы ELISA или метод проточной цитометрии для демонстрации перекрестной конкуренции с антителами по настоящему изобретению. Способность тестируемого антитела ингибировать связывание, например, любого из раскрытых в настоящем документе антител к BMCA (например, антител ET140-192, ET140-197, ET140-180, ET140-172, ET140-157, ET140-153, ET140-201, ET140-167, ET140-163, ET140-207, ET140-165, ET140-188, ET140-196, ET140-204, ET140-190, ET140-187 и ET140-174) с BCMA человека показывает, что тестируемое антитело может конкурировать с любым из раскрытых в настоящем документе анти-BCMA антител за связывание с BCMA человека и, таким образом, связывается с той же областью эпитопа на BCMA человека, что и любое из раскрытых в настоящем документе анти-BCMA антител. В конкретных вариантах осуществления перекрестно конкурирующее антитело связывается с тем же эпитопом на BCMA человека, что и любое из раскрытых в настоящем документе анти-BCMA антител.

6. Характеризация связывания антитела с антигеном

Антитела по настоящему изобретению можно тестировать на связывание с BCMA, например, стандартным методом ELISA. Для определения того, связываются ли выбранные анти-BCMA антитела с уникальными эпитопами, каждое антитело можно биотинилировать с использованием коммерчески доступных реагентов (Pierce, Rockford, IL). Исследования конкурентного связывания с использованием немеченых моноклональных антител и биотинилированных моноклональных антител можно выполнять, используя покрытые BCMA планшеты для ELISA, как описано выше. Связывание биотинилированного мАт можно обнаруживать с помощью зонда стрептавидин-щелочная фосфатаза.

Для определения изотипа очищенных антител можно проводить изотипирование методом ELISA с использованием реагентов, специфичных для антител конкретного изотипа. Затем анти-BCMA человеческие IgG можно тестировать методом вестерн-блоттинга на способность реагировать с антигеном BCMA.

В конкретных вариантах осуществления Kd измеряют в анализе связывания радиоактивно меченого антигена (RIA). В конкретных вариантах осуществления RIA выполняют, используя Fab-вариант интересующего антитела и его антиген. Например, аффинность связывания Fab с антигеном в растворе измеряют путем уравновешивания Fab с минимальной концентрацией (125I)-меченого антигена в присутствии серийно титрованного немеченого антигена, с последующим удержанием связанного антигена на покрытом анти-Fab антителом планшете (смотри, например, Chen et al., J. Mol. Biol. 293: 865-881(1999)).

В конкретных вариантах осуществления Kd измеряют методом поверхностного плазмонного резонанса с использованием системы BIACORE®. Например, в анализе с использованием BIACORE®-2000 или BIACORE®-3000 (BIAcore, Inc., Piscataway, NJ).

Картирование эпитопов

В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело связывается с полипептидом BCMA человека, содержащим аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 71. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело связывается с одним или более фрагментами аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 71. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело связывается с областью эпитопа, содержащей аминокислоты 14-22 из SEQ ID NO: 71. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело связывается с одной, двумя, тремя, четырьмя, пятью, шестью или семью областями эпитопа, выбранными из группы, состоящей из аминокислот 8-22, 9-23, 10-24, 11-25, 12-26, 13-27, 14-28 и 8-28 из SEQ ID NO: 71. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело, которое связывается с областью эпитопа, содержащей аминокислоты 14-22 из SEQ ID NO: 71, содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10, необязательно, с (iii) последовательностью линкера, например, пептидного линкера, между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи. В конкретных вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 69. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело, которое связывается с областью эпитопа, содержащей аминокислоты 14-22 из SEQ ID NO: 71, содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% гомологична аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 21. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело, которое связывается с областью эпитопа, содержащей аминокислоты 14-22 из SEQ ID NO: 71, содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело, которое связывается с областью эпитопа, содержащей аминокислоты 14-22 из SEQ ID NO: 71, содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% гомологична аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 22. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело, которое связывается с областью эпитопа, содержащей аминокислоты 14-22 из SEQ ID NO: 71, содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело, которое связывается с областью эпитопа, содержащей аминокислоты 14-22 из SEQ ID NO: 71, содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело, которое связывается с областью эпитопа, содержащей аминокислоты 14-22 из SEQ ID NO: 71, содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 119, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 120, или ее консервативные модификации, и VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 121, или ее консервативные модификации. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело, которое связывается с областью эпитопа, содержащей аминокислоты 14-22 из SEQ ID NO: 71, содержит VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 122, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 123, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 124, или ее консервативные модификации. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело, которое связывается с областью эпитопа, содержащей аминокислоты 14-22 из SEQ ID NO: 71, содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 119, или ее консервативные модификации, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 120, или ее консервативные модификации, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 121, или ее консервативные модификации, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 122, или ее консервативные модификации, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 123, или ее консервативные модификации, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 124, или ее консервативные модификации. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело, которое связывается с областью эпитопа, содержащей аминокислоты 14-22 из SEQ ID NO: 71, содержит VH CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 119, VH CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 120, VH CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 121, VL CDR1, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 122, VL CDR2, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 123, и VL CDR3, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 124. В конкретных вариантах осуществления раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело представляет собой ET140-3 (или «ET140-153»).

7. Иммуноконъюгаты

Настоящее изобретение относится к анти-BCMA антителу, или его фрагменту, конъюгированному с терапевтическим фрагментом, таким как цитотоксин, лекарственное средство (например, иммунодепрессант) или радиотоксин. Такие конъюгаты в настоящем документе называют «иммуноконъюгатами». Иммуноконъюгаты, которые содержат один или более цитотоксинов, называют «иммунотоксинами». Цитотоксин или цитотоксическое средство включает любое средство, которое наносит вред (например, уничтожает) клеткам. Примеры включают таксол (например, рицин, дифтерийный токсин, гелонин), цитохалазин B, грамицидин D, бромид этидия, эметин, митомицин, этопозид, тенопозид, винкристин, винбластин, колхицин, доксорубицин, даунорубицин, дигидроксиантрацин дион, митоксантрон, митрамицин, актиномицин D, 1-дегидротестостерон, глюкокортикоиды, прокаин, тетракаин, лидокаин, пропранолол и пуромицин, а также их аналоги или гомологи. Терапевтические средства также включают, например, калехеамицин, уреастатин, антиметаболиты (например, метотрексат, 6-меркаптопурин, 6-тиогуанин, цитарабин, 5-фторурацил декарбазин), алкилирующие средства (например, мехлорэтамин, тиотепа, хлорамбуцил, мелфалан, кармустин (BSNU) и ломустин (CCNU), циклофосфамид, бусульфан, дибромманнит, стрептозотоцин, митомицин C и цис-дихлордиамин платину (II) (DDP) цисплатин), антрациклины (например, даунорубицин (бывший дауномицин) и доксорубицин), антибиотики (например, дактиномицин (бывший актиномицин), блеомицин, митрамицин и антрамицин (AMC)), а также антимитотические средства (например, винкристин и винбластин).

Другие примеры терапевтических цитотоксинов, которые можно конъюгировать с анти-BCMA антителом, раскрытым в настоящем документе, включают дуокармицины, калихеамицины, майтанзины и ауристатины, а также их производные. Примером конъюгата калихеамицина с антителом является коммерчески доступный милотарг™ (Wyeth-Ayerst).

Цитотоксины можно конъюгировать с анти-BCMA антителом, раскрытым в настоящем документе, с использованием технологии линкеров, известной в данной области. Примеры типов линкеров, которые были использованы для конъюгации цитотоксина с антителом, включают, но не ограничиваются ими, гидразоновые, тиоэфирные, сложноэфирные, дисульфидные и пептид-содержащие линкеры. Можно выбирать линкер, который, например, подвержен расщеплению при низком значении pH в лизосомальном компартменте или подвержен расщеплению протеазами, такими как протеазы, предпочтительно экспрессируемые в опухолевой ткани, например, катепсины (например, катепсины B, C, D). Для дополнительной информации о типах цитотоксинов, линкерах и способах конъюгации терапевтических средств с антителами, смотри также Saito, G. et al. (2003) Adv. Drug Deliv. Rev. 55: 199-215; Trail, P.A. et al. (2003) Cancer Immunol. Immunother. 52: 328-337; Payne, G. (2003) Cancer Cell 3: 207-212; Allen, T.M. (2002) Nat. Rev. Cancer 2: 750-763; Pastan, I. and Kreitman, R.J. (2002) Curr. Opin. Investig. Drugs 3: 1089-1091; Senter, P.D. and Springer, C.J. (2001) Adv. Drug Deliv. Rev. 53: 247-264.

Анти-BCMA антитела по настоящему изобретению также можно конъюгировать с радиоактивным изотопом для создания цитотоксических радиофармацевтических средств, иначе называемых радиоиммуноконъюгатами. Примеры радиоактивных изотопов, которые можно конъюгировать с антителами для диагностического или терапевтического применения, включают, но не ограничиваются ими, 90Y, 131I, 225Ac, 213Bi, 223Ra и 227Th. Методы получения радиоиммуноконъюгатов известны в данной области. Иллюстративные радиоиммуноконъюгаты коммерчески доступны, в том числе зевалин™ (IDEC Pharmaceuticals) и бексар™ (Corixa Pharmaceuticals), и аналогичные методы можно использовать для получения радиоиммуноконъюгатов с антителами по изобретению.

Конъюгаты с антителами по настоящему изобретению можно использовать для изменения конкретного биологического ответа, и фрагмент лекарственного средства не следует воспринимать, как ограниченный классическими химическими терапевтическими средствами. Например, фрагмент лекарственного средства может представлять собой белок или полипептид, обладающий желаемой биологической активностью. Такие белки могут включать, например, ферментативно активный токсин, или его активный фрагмент, например, абрин, рицин A, экзотоксин Pseudomonas или дифтерийный токсин; такой белок, как фактор некроза опухоли (TNF) или интерферон-γ; или модификаторы биологического ответа, такие как, например, лимфокины, интерлейкин-1 («IL-1»), интерлейкин-2 («IL-2»), интерлейкин-6 («IL-6»), гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор («GM-CSF»), гранулоцитарный колониестимулирующий фактор («G-CSF») или другие факторы роста.

Методы конъюгации такого терапевтического фрагмента с антителами хорошо известны, смотри, например, Arnon et al., «Monoclonal Antibodies For Immunotargeting Of Drugs In Cancer Therapy», в: Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy, Reisfeld et al. (eds.), pp. 243-56 (Alan R. Liss, Inc. 1985); Hellstrom et al., «Antibodies For Drug Delivery», в: Controlled Drug Delivery (2-е издание), Robinson et al. (eds.), pp. 623-53 (Marcel Dekker, Inc. 1987); Thorpe, «Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review», в: Monoclonal Antibodies '84: Biological And Clinical Applications, Pinchera et al. (eds.), pp. 475-506 (1985); «Analysis, Results, And Future Prospective Of The Therapeutic Use Of Radiolabeled Antibody In Cancer Therapy», в: Monoclonal Antibodies For Cancer Detection And Therapy, Baldwin et al. (eds.), pp. 303-16 (Academic Press 1985), и Thorpe et al., «The Preparation And Cytotoxic Properties Of Antibody-Toxin Conjugates», Immunol. Rev., 62: 119-58 (1982).

8. Биспецифичные молекулы

Настоящее изобретение относится к биспецифичным молекулам, содержащим раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело, или его фрагмент. Антитело по настоящему изобретению, или его антигенсвязывающие фрагменты, можно дериватизировать или связывать с другой функциональной молекулой, например, другим пептидом или белком (например, другим антителом или лигандом для рецептора), для создания биспецифичной молекулы, которая связывается с по меньшей мере двумя разными сайтами связывания или целевыми молекулами. Антитело по настоящему изобретению, фактически, можно дериватизировать или связывать с более, чем одной другой функциональной молекулой, для создания мультиспецифичных молекул, которые связываются с более, чем двумя разными сайтами связывания или целевыми молекулами; такие мультиспецифичные молекулы также должны быть охвачены используемым в настоящем документе термином «биспецифичная молекула». Для создания биспецифичной молекулы раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело может быть функционально связано (например, путем химического связывания, генетического слияния, не ковалентной ассоциации или иным образом) с одной или более другими связывающими молекулами, такими как другое антитело, фрагмент антитела, пептид или связывающий миметик, в результате чего образуется биспецифичная молекула.

Настоящее изобретение относится к биспецифичным молекулам, имеющим по меньшей мере первую специфичность связывания для BCMA и вторую специфичность связывания для второго целевого эпитопа. Второй целевой эпитоп может представлять собой эпитоп BCMA или эпитоп не BCMA, например, другого антигена. В конкретных вариантах осуществления биспецифичная молекула является мультиспецифичной, молекула может дополнительно иметь третью специфичность связывания. Если первая часть биспецифичного антитела связывается с антигеном на клетке опухоли, например, и вторая часть биспецифичного антитела узнает антиген на поверхности иммунной эффекторной клетки человека, то антитело способно к рекрутингу активности этой эффекторной клетки за счет специфического связывания с эффекторным антигеном на иммунной эффекторной клетке человека. Вследствие этого, в конкретных вариантах осуществления биспецифичные антитела способны создавать связь между эффекторными клетками, например, T-клетками, и клетками опухолей, тем самым вызывая усиление эффекторной функции. В конкретных вариантах осуществления биспецифичное антитело по настоящему изобретению содержит по меньшей мере первый сайт связывания с BCMA и по меньшей мере второй сайт связывания с иммунной клеткой. Например, и без ограничения, биспецифичное антитело по настоящему изобретению содержит по меньшей мере первый сайт связывания с BCMA и по меньшей мере второй сайт связывания с рецептором, находящемся на поверхности иммунной клетки, например, CD3.

Биспецифичные молекулы по настоящему изобретению можно получать путем конъюгации обладающих специфичностью связывания фрагментов с использованием методов, известных в данной области. Например, каждый обладающий специфичностью связывания фрагмент биспецифичной молекулы можно создавать отдельно, а затем конъюгировать их друг с другом. Если обладающие специфичностью связывания фрагменты представляют собой белки или пептиды, для ковалентной конъюгации можно использовать различные связывающие или сшивающие реагенты. Примеры сшивающих реагентов включают белок A, карбодиимид, N-сукцинимидил-S-ацетил-тиоацетат (SATA), 5,5'-дитиобис-(2-нитробензойную кислоту) (DTNB), o-фенилендималеимид (oPDM), N-сукцинимидил-3-(2-пиридилдитио)пропионат (SPDP) и сульфосукцинимидил-4-(N-малеимидометил)циклогексан-1-карбоксилат (сульфо-SMCC) (смотри, например, Karpovsky et al. (1984) J. Exp. Med. 160: 1686; Liu, M.A. et al. (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82: 8648). Другие методы включают те, которые описаны в Paulus (1985) Behring Ins. Mitt. No. 78, 118-132; Brennan et al. (1985) Science 229: 81-83) и Glennie et al. (1987) J. Immunol. 139: 2367-2375). Предпочтительными конъюгирующими реагентами являются SATA и сульфо-SMCC, оба реагента производит компания Pierce Chemical Co. (Rockford, IL).

Если обладающие специфичностью связывания фрагменты представляют собой антитела, то их можно конъюгировать путем связывания сульфгидрильных групп C-концевых шарнирных областей двух тяжелых цепей. В конкретных вариантах осуществления шарнирная область модифицирована для содержания нечетного числа сульфгидрильных остатков, предпочтительно одного, до конъюгации.

Альтернативно, оба обладающих специфичностью связывания фрагмента могут быть закодированы в одном и том же векторе, с последующей экспрессией и сборкой в одной и той же клетке-хозяине. Такой способ является особенно полезным, если биспецифичная молекула представляет собой слитый белок мАт x мАт, мАт x Fab, Fab x F(ab')2 или лиганд x Fab.

Связывание биспецифичных молекул с их специфическими мишенями можно подтверждать, например, твердофазным иммуноферментным анализом (ELISA), радиоиммунным анализом (RIA), FACS-анализом, биоанализом (например, ингибированием роста) или вестерн-блоттингом. Каждый из этих анализов, как правило, позволяет обнаруживать наличие конкретных интересующих комплексов белок-антитело за счет использования меченого реагента (например, антитела), специфичного для интересующего комплекса. Альтернативно, комплексы можно обнаруживать с помощью различных других иммуноанализов. Например, антитело можно метить радиоактивным изотопом и использовать в радиоиммунном анализе (RIA) (смотри, например, публикацию Weintraub, B., Principles of Radioimmunoassays, Seventh Training Course on Radioligand Assay Techniques, The Endocrine Society, March, 1986, содержание которой включено в настоящий документ посредством ссылки). Радиоактивный изотоп можно обнаруживать, например, с помощью γ-счетчика или сцинтилляционного счетчика, или авторадиографии.

9. Выбор ScFv с высокой аффинностью в отношении полипептида BCMA

Следующим этапом является отбор фага, который связывается с целевым интересующим антигеном с высокой аффинностью, из фагов библиотеки фагового дисплея человеческих белков, которые либо не связываются, либо связываются с низкой аффинностью. Это осуществляют путем итерационного связывания фага с антигеном, который связан с твердой подложкой, например, гранулами или клетками млекопитающих, с последующим удалением не связавшегося фага и элюированием специфически связавшегося фага. В конкретных вариантах осуществления антигены сначала биотинилируют для иммобилизации, например, на Dynabeads M-280 с конъюгированным стрептавидином. Библиотеку фагов инкубируют с клетками, гранулами или другой твердой подложкой, и не связавшийся фаг удаляют промыванием. Связавшиеся клоны отбирают и тестируют.

После отбора положительные клоны scFv тестируют на их связывание с BCMA (BCMA человека) на поверхности живых клетках 3T3 методом проточной цитометрии. Вкратце, фаговые клоны инкубируют с клетками 3T3, избыточно экспрессирующими BCMA. Клетки промывают, а затем добавляют мышиное мАт против белка оболочки M13. Клетки вновь промывают и метят с помощью конъюгата с FITC антител козы против Ig мыши перед проведением проточной цитометрии.

В других вариантах осуществления анти-BCMA антитела могут иметь одну или более аминокислотных замен в каркасной области, внесенных для повышения стабильности белка, связывания антитела, уровней экспрессии или для введения сайта для конъюгации терапевтических средств. Затем эти scFv используют для получения рекомбинантных человеческих моноклональных Ig способами, известными специалистам в данной области.

10. Конструирование полноразмерного мАт с использованием выбранных ScFv-фрагментов

Технология фагового дисплея позволяет быстро отбирать и производить антигенспецифичные scFv и Fab-фрагменты, которые полезны сами по себе, или которые в дальнейшем могут быть использованы для получения полноразмерных антител, антигенсвязывающих белков или их антигенсвязывающих фрагментов. Полноразмерные мАт с Fc-доменами обладают рядом преимуществ перед scFv и Fab антителами. Во-первых, только полноразмерные Ат обладают такой иммунологической функцией, как CDC и DCC, которая опосредована Fc-доменом. Во-вторых, двухвалентные мАт имеют более сильную аффинность при связывании антигена, чем мономерные Fab Ат. В-третьих, время полужизни в плазме и почечный клиренс будет отличаться в случае Fab и двухвалентного мАт. Конкретные особенности и преимущества каждого из них можно соотносить с планируемой эффекторной стратегией. В-четвертых, двухвалентное мАт может быть интернализовано с иной скоростью, чем scFv и Fab, что изменяет иммунную функцию или функцию переносчика. Альфа-эмиттеры, например, не обязательно должны быть интернализованы, чтобы уничтожать мишени, однако эффективность многих лекарственных средств и токсинов повышается при интернализации иммунных комплексов. Таким образом, в конкретных вариантах осуществления после получения клонов scFv, специфичных для BCMA, из библиотек фагового дисплея были созданы полноразмерные IgG мАт с использованием полученных scFv фрагментов.

Для получения рекомбинантных человеческих моноклональных IgG в клетках яичника китайского хомячка (CHO) полноразмерное IgG мАт можно конструировать способом, известным специалистам в данной области (Tomomatsu et al., Production of human monoclonal antibodies against FceRIa by a method combining in vitro immunization with phage display. Biosci Biotechnol Biochem 73(7): 1465-1469 2009). Вкратце, вариабельные области антитела можно субклонировать в экспрессионные векторы млекопитающих с соответствующими константными последовательностями лямбда или каппа легких цепей и Fc подкласса IgG1 (например) (Lidija P., et al. An integrated vector system for the eukaryotic expression of antibodies or their fragments after selection from phage display libraries. Gene 1997; 187(1): 9-18; Lisa J.H., et al. Crystallographic structure of an intact lgG1 monoclonal antibody. Journal of Molecular Biology 1998; 275 (5): 861-872). Можно использовать анализ кинетики связывания (Yasmina N.A., et al. Probing the binding mechanism and affinity of tanezumab, a recombinant humanized anti-NGF monoclonal antibody, using a repertoire of biosensors. Protein Science 2008; 17(8): 1326-1335) для подтверждения специфичного связывания полноразмерного IgG с GRPC5D, с величиной KD в наномолярном диапазоне.

Фармацевтические композиции и способы лечения

Анти-BCMA антитела по настоящему изобретению можно вводить для терапевтического лечения пациенту, имеющему опухоль (например, множественную миелому), в количестве, достаточном для предотвращения, ингибирования или уменьшения прогрессирования опухоли. Прогрессирование включает, например, рост, инвазию, метастазирование и/или рецидив опухоли. Количества, эффективные для этой цели, будут зависеть от степени тяжести заболевания и от общего состояния собственной иммунной системы пациента. Режим дозирования также будет варьироваться в зависимости от степени тяжести заболевания и состояния здоровья пациента, и, как правило, будет включать диапазон от одной болюсной дозы или непрерывной инфузии до нескольких введений в сутки (например, каждые 4-6 часов), или в соответствии с предписанием лечащего врача и состоянием здоровья пациента.

Определение болезненных состояний, поддающихся лечению анти-BCMA антителами по настоящему изобретению, находится в пределах компетенции специалиста в данной области. Например, люди, либо страдающие множественной миеломой, либо имеющие риск развития множественной миеломы, подходят для введения им раскрытых в настоящем документе анти-BCMA антител. Квалифицированный клиницист может с легкостью определять, например, на основании клинических анализов, физического обследования и медицинской/семейной истории, является ли индивидуум кандидатом для подобного лечения.

В конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения опухоли путем введения анти-BCMA антитела, раскрытого в настоящем документе, в сочетании с одним или более другими средствами. Например, настоящее изобретение относится к способу лечения опухоли путем введения анти-BCMA антитела, раскрытого в настоящем документе, совместно с антинеопластическим средством. Анти-BCMA антитело может быть химически или биосинтетически связано с одним или более антинеопластическими средствами.

Неограничивающие примеры соответствующих опухолей включают множественную миелому, неходжкинскую лимфому, лимфому Ходжкина, хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL), глиобластому и макроглобулинемию Вальденстрема. В конкретных вариантах осуществления опухоль представляет собой множественную миелому.

Любой подходящий способ или путь введения можно использовать для введения анти-BCMA антитела, раскрытого в настоящем документе, и, необязательно, для совместного введения антинеопластических средств. Пути введения включают, например, пероральное, внутривенное, внутрибрюшинное, подкожное или внутримышечное введение. Следует подчеркнуть, однако, что настоящее изобретение не ограничено каким-либо конкретным способом или путем введения.

Следует отметить, что раскрытое в настоящем документе анти-BCMA антитело можно вводить в виде конъюгата, который специфически связывается с рецептором и доставляет токсическую, летальную нагрузку после интернализации комплекса лиганд-токсин.

Понятно, что анти-BCMA антитела по настоящему изобретению можно вводить в форме композиции, дополнительно содержащей фармацевтически приемлемый носитель. Подходящие фармацевтически приемлемые носители включают, например, одно или более из: воды, солевого раствора, фосфатно-солевого буфера, декстрозы, глицерина, этанола и тому подобного, а также их сочетания. Фармацевтически приемлемые носители могут дополнительно содержать незначительные количества вспомогательных веществ, таких как увлажняющие средства или эмульгаторы, консерванты или буферы, которые увеличивают срок хранения или эффективность связывающих белков. Инъекционные композиции, как хорошо известно в данной области, могут быть сформулированы так, чтобы обеспечивать быстрое, замедленное или отсроченное высвобождение активного ингредиента после введения млекопитающему.

Настоящее изобретение также относится к применению антител и нуклеиновых кислот, кодирующих их, для лечения опухоли (например, множественной миеломы), для диагностических и прогностических целей, а также в качестве исследовательских инструментов для обнаружения BCMA в клетках и тканях. Фармацевтические композиции, содержащие раскрытые антитела и нуклеиновые кислоты, входят в объем настоящего изобретения. Векторы, содержащие нуклеиновые кислоты по настоящему изобретению, для лечения антителами путем введения иммунотерапевтических векторов, также входят в объем настоящего изобретения. Векторы включают экспрессионные векторы, которые обеспечивают экспрессию и секрецию антител, а также векторы, которые направляют к клеточной поверхности экспрессию антигенсвязывающих белков, таких как химерные антигенные рецепторы.

Клетки, содержащие указанные нуклеиновые кислоты, например, клетки, которые были трансфицированы векторами по изобретению, также входят в объем настоящего изобретения.

Наборы

Настоящее изобретение относится к наборам для лечения или предотвращения опухоли (например, множественной миеломы). В конкретном варианте осуществления набор включает терапевтическую композицию, содержащую эффективное количество анти-BCMA антитела, в стандартной лекарственной форме. В конкретных вариантах осуществления набор включает стерильный контейнер, содержащий терапевтическую или профилактическую вакцину; такие контейнеры могут представлять собой коробки, ампулы, бутылки, флаконы, пробирки, мешки, пакеты, блистерные упаковки или другие подходящие формы контейнеров, известные в данной области. Такие контейнеры могут быть выполнены из пластика, стекла, ламинированной бумаги, металлической фольги или других материалов, подходящих для хранения лекарственных средств.

При необходимости, анти-BCMA антитело предоставляют совместно с инструкциями по введению антитела субъекту, имеющему, или имеющему риск развития опухоли (например, множественной миеломы). Инструкции, как правило, будут содержать информацию об использовании композиции для лечения или предотвращения опухоли (например, множественной миеломы). В других вариантах осуществления инструкции включают по меньшей мере одно из следующего: описание лекарственного средства; схему доз и режим введения для лечения или предотвращения неоплазии (например, множественной миеломы) или ее симптомов; меры предосторожности; предупреждения; показания; противопоказания; информацию о передозировке; побочные реакции; результаты фармакологических исследований на животных, клинических исследований и/или литературные источники. Инструкции могут быть напечатаны непосредственно на контейнере (при возможности), или представлять собой этикетку, прикрепленную к контейнеру, или представлять собой отдельный листок, брошюру, карточку или папку, которые предоставляют в контейнере или вместе с ним.

Методы

Анализ методом проточной цитометрии. Для окрашивания клеточной поверхности клетки можно инкубировать с соответствующими мАт в течение 30 минут на льду, промывать и инкубировать со вторичным реагентом-антителом, при необходимости. Данные проточной цитометрии можно получать на приборе FACS Calibur (Becton Dickinson) и анализировать с помощью программы FlowJo V8.7.1 и 9.4.8.

Отбор и характеризация scFv, специфичных для BCMA. Для отбора клонов мАт используют библиотеку фагового дисплея scFv антител человека. Вкратце, биотинилированное антигены сначала можно смешивать с фаговой библиотекой человеческих scFv, затем комплексы антиген-scFv антитело можно извлекать с помощью конъюгированных со стрептавидином гранул Dynabeads M-280 при пропускании через магнитную решетку. Связавшиеся клоны затем можно элюировать и использовать для инфицирования E. coli XL1-Blue. Фаговые клоны scFv, экспрессированные в бактерии, можно очищать (Yasmina N.A., et al. Probing the binding mechanism and affinity of tanezumab, a recombinant humanized anti-NGF monoclonal antibody, using a repertoire of biosensors. Protein Science 2008; 17(8): 1326-1335; Roberts W.K., et al. Vaccination with CD20 peptides induces a biologically active, specific immune response in mice. Blood 2002: 99 (10): 3748-3755). Можно выполнять 3-4 цикла пэннинга для обогащения фаговых клонов scFv, специфически связывающихся с BCMA. Положительные клоны можно определять стандартным методом ELISA против биотинилированного одноцепочечного BCMA. Затем положительные клоны можно тестировать на их связывание с BCMA на поверхности живых клеток методом проточной цитометрии, используя BCMA+ линию клеток, 3T3. Клетки можно промывать и выполнять следующие этапы окрашивания.

Клетки можно окрашивать, сначала используя очищенные фаговые клоны scFv, с последующим добавлением мышиных анти-M13 мАт и, в завершение, антител козы против Ig мыши, конъюгированных с FITC. Каждый этап окрашивания можно выполнять в течение 30-60 минут на льду, и клетки промывать дважды между всеми этапами окрашивания.

Конструирование полноразмерных мАт с использованием выбранных ScFv фрагментов. Полноразмерные IgG человека из выбранных фаговых клонов можно получать в линиях клеток HEK293 и клеток яичника китайского хомячка (CHO), как описано (Caron P.C., Class K., Laird W., Co M.S., Queen C., Scheinberg D.A. Engineered humanized dimeric forms of IgG are more effective antibodies. J Exp Med 176:1 191-1 195 (1992). Вкратце, вариабельные области антител можно субклонировать в экспрессионные векторы млекопитающих с соответствующими человеческими последовательностями константной области лямбда или каппа легкой цепи и человеческими последовательностями константной области IgG. Молекулярную массу очищенных полноразмерных IgG антител можно измерять методом электрофореза как в восстанавливающих, так и в не восстанавливающих условиях.

Характеризация полноразмерных IgG человека в отношении BCMA. Сначала можно определять специфичности полностью человеческих IgG мАт в отношении BCMA путем окрашивания клеток 3T3, трансдуцированных для избыточной экспрессии BCMA, с последующим использованием вторичного мАт козы против человеческих IgG, конъюгированного с PE или FITC. Интенсивность флуоресценции можно измерять методом проточной цитометрии. Тот же способ можно использовать для определения связывания мАт со свежими опухолевыми клетками и линиями клеток.

Антителозависимая клеточная цитотоксичность (ADCC). Клетками-мишенями, используемыми для изучения ADCC, могут быть клетки 3T3, избыточно экспрессирующие BCMA. Анти-BCMA антитело или контрольное для него человеческое IgG антитело в различных концентрациях можно инкубировать с клетками-мишенями и свежими МКПК в разных соотношениях эффектор:мишень (Э:М) в течение 16 часов. Супернатант можно собирать и цитотоксичность можно измерять в анализе высвобождения LDH с использованием набора Cytotox 96 (без радиоактивности) от компании Promega в соответствии с инструкциями производителя. Цитотоксичность также можно измерять в стандартном 4-часовом анализе высвобождения 51Cr.

ПРИМЕРЫ

Следующие примеры приведены, чтобы предоставить специалистам в данной области полное раскрытие и описание того, как получать и использовать антитела, биспецифичные антитела, содержащие их композиции, применять скрининг и методы лечения по настоящему изобретению, и не предназначены для ограничения объема того, что авторы заявки считают своим изобретением. Понятно, что различные другие варианты осуществления можно выполнять на практике, учитывая, что основное описание приведено выше.

Пример 1 - Экспрессия BCMA в различных тканях

Экспрессию BCMA человека оценивали в различных злокачественных и нормальных тканях путем изучения профилей экспрессии генов в базах данных, таких как энциклопедия линий раковых клеток и BioGPS. Как показано на фигуре 1, BCMA человека экспрессируется на высоком уровне в клетках лимфомы и множественной миеломы, но не в других злокачественных тканях. Нормальная экспрессия, судя по всему, ограничена B-клетками и плазматическими клетками. Потенциальное уничтожение BCMA-нацеленными CAR T-клетками нормальных клеток этого типа не может иметь существенные неблагоприятные последствия, о чем свидетельствует опыт с пациентом авторов изобретения при использовании нацеленных на CD19 CAR T-клеток. Любое отсутствие физиологического продуцирования антител может быть исправлено внутривенным введением иммуноглобулинов.

Пример 2 - Отбор ScFv, специфичных для BCMA, с использованием библиотеки фагового дисплея полностью человеческих белков.

Проводили 3 цикла пэннинга библиотеки фагового дисплея против BCMA для обогащения фаговых клонов scFv, специфически связывающихся с BCMA. Проводили независимые пэннинги с 12 разными фаговыми библиотеками против избыточно экспрессирующих BCMA клеток 3T3, что привело к идентификации 186 клонов. Отдельные фаговые клоны scFv, положительные в отношении BCMA, определяли методом ELISA, и клоны, имеющие уникальные кодирующие последовательности ДНК, дополнительно характеризовали. Для проверки того, связываются ли scFv с BCMA на живых клетках, положительные фаговые клоны тестировали на связывание с BCMA-положительной линией клеток, 3T3. После секвенирования было обнаружено 57 уникальных и положительных в отношении BCMA-Fc клонов из 79 секвенированных положительных клонов; показатель отбора уникальных клонов составил 72%. С помощью FACS-анализа фаговых клонов антител против BCMA-3T3 и исходной линии клеток 3T3 было получено подтверждение для 25 уникальных положительных клонов.

Пример 3 - Данные скрининга для анти-BCMA антител

ELISA-скрининг: На фигуре 6 представлены репрезентативные результаты белкового скрининга методом ELISA против антигена BCMA с использованием специфичных фаговых клонов scFv антител (ET140-3, ET140-24, ET140-37, ET140-40 и ET140-54). В лунки планшетов для ELISA вносили слитый белок ВКД BCMA человека-Fc, контроль-Fc слитый белок или только PBS в качестве пустой пробы, соответственно. Отдельные фаговые клоны из пулов библиотеки фагового дисплея, обогащенных путем пэннинга против слитого белка ВКД BCMA человека-Fc, инкубировали в покрытых лунках планшета. Связывание фаговых клонов обнаруживали с помощью HRP-конъюгированных анти-M13 антител и проводили окрашивание с использованием субстрата TMB. Поглощение определяли при 450 нм.

FACS-скрининг: На фигуре 7 представлены репрезентативные результаты FACS-анализа BCMA-специфичных фаговых клонов антител ET140-3, ET140-24, ET140-37, ET140-40 и ET140-54. Фаговые клоны инкубировали с клетками линии 3T3-BCMA, затем с анти-M13 мышиным антителом. В завершение, APC-меченое 2-е антитело против IgG мыши добавляли в реакционную смесь после промывания. Связывание измеряли методом FACS и выражали в единицах средней интенсивности флуоресценции (СИФ). Клетки, инкубированные только с 2-м антителом, M13 K07 хелперным фагом, и просто клетки использовали в качестве отрицательного контроля.

Пример 4 - Картирование эпитопов анти-BCMA антител

Пептиды BCMA были упорядочены на основании последовательности ВКД с N-концевым биотином+линкер SGSG+15 аминокислот с промежутком в 1 аминокислоту. Пептидная библиотека представлена в таблице 19.

Таблица 19

Пептиды наносили на покрытые стрептавидином планшеты в концентрации 2 мкг/мл в PBST (PBS+ 0,05% Tween-20). Затем промывали и блокировали 3% раствором БСА. После промывания ET140-3, ET140-24, ET140-54 или ET901 mIgG1 в концентрации 1 мкг/мл добавляли в лунки планшета, соответственно. «mIgG1» при использовании во всех примерах указывает на то, что вариабельная область является полностью человеческой, а Fc-часть происходит из IgG1 мыши. Затем в каждую лунку добавляли конъюгированное с HRP выявляющее антитело против IgG мыши. В завершение, при добавлении субстрата TMB развивалась окраска. Для анализа данных регистрировали поглощение при A450. Результаты показаны на фигурах 2-5. Как показано на фигурах 2 и 5, ET140-3 связывалось с пептидами 7-13 (то есть, аминокислотами 8-22, 9-23, 10-24, 11-25, 12-26, 13-27 и 14-28) из SEQ ID NO: 71. Как показано на фигурах 3 и 4, для ET140-24 или ET140-54 не были обнаружены линейные эпитопы.

Выводы: 3 ET140 антитела (mIgG1) наряду с контрольным по изотипу ET901 mIgG1 тестировали на их связывающийся эпитоп против BCMA-ВКД. Пептидную библиотеку, состоящую из 39 пептидов (N-концевой биотин+линкер SGSG+15 аминокислот, со смещением в 1 аминокислоту), использовали для картирования эпитопов методом ELISA. Это позволяло производить поиск линейного связывающегося эпитопа BCMA-ВКД. ET901 mIgG1 использовали в качестве контрольного фона для каждого пептида. Только для ET140-3 удалось идентифицировать его область эпитопа: область, содержащую аминокислоты 14-22 из SEQ ID NO: 71, например, аминокислоты 8-28 из SEQ ID NO: 71.

В случае ET140-24 и ET140-54 не наблюдали никакого существенного связывания с пептидной библиотекой. Это указывало на то, что эти два антитела могут узнавать скорее конформационный эпитоп, а не линейный эпитоп в BCMA.

Пример 5 - Рекомбинантный антиген анти-BCMA антител методом поверхностного плазмонного резонанса

Кинетику взаимодействия между ET140-153 mIgG1 (или «ET140-3 mIgG1»), ET140-174 mIgG1 (или «ET140-24 mIgG1»), ET140-204 mIgG1 (или «ET140-54 mIgG1») и рекомбинантным антигеном BCMA определяли на приборе BIAcore X100. Вкратце, модифицированный стрептавидин в концентрации 50 мкг/мл иммобилизовали на улавливающем сенсорном чипе путем пропускания улавливающего биотин реагента через проточные ячейки со скоростью 2 мкл/мин в течение 5 минут. Биотинилированный белок BCMA-Fc в концентрации 10 мкг/мл загружали на проточную ячейку со скоростью 30 мкл/мин в течение 3 минут. В соответствии со стандартным протоколом определения кинетики выполняли серию инжекций ESK1 в концентрации от 0,6 до 15 мкг/мл, при этом каждый этап состоял из 3-минутной инжекции со скоростью 30 мкл/мин и 3-минутной диссоциации. Затем поверхность регенерировали в течение 2 минут раствором, состоящим из 75% (по объему) 8M гуанидина-HCl и 25% (по объему) 1M NaOH. Кинетические константы получали путем глобальной аппроксимации (модель Ленгмюра для связывания 1:1) с использованием оценочной программы BIAcore X100 (версия 2.0.1). Данные по аффинности связывания приведены в таблице 20.

Таблица 20

Белок KD ET140-24 mIgG1 KD: 4,8 нМ (BiaCore) ET140-54 mIgG1 KD: 8,1 нМ (BiaCore) ET140-3 mIgG1 KD: 1,2 нМ (BiaCore)

Хотя настоящее изобретение было описано в некоторых подробностях и проиллюстрировано примерами для ясности понимания, приведенное описание и примеры не должны быть истолкованы как ограничивающие объем настоящего изобретения. Содержание всех патентов и специальных литературных источников, цитированных в настоящем документе, специально включено в настоящий документ посредством ссылки.

--->

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> MEMORIAL SLOAN-KETTERING CANCER CENTER

EUREKA THERAPEUTICS, INC.

<120> АНТИТЕЛА, НАЦЕЛЕННЫЕ НА АНТИГЕН СОЗРЕВАНИЯ B-КЛЕТОК, И СПОСОБЫ ИХ

ПРИМЕНЕНИЯ

<130> 072734.0352

<140> PCT/US2015/064119

<141> 2015-12-04

<150> 62/088,246

<151> 2014-12-05

<160> 249

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 123

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 1

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn

20 25 30

Ser Ala Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Asp Tyr Ala

50 55 60

Val Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Asn Pro Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Gln Gly Tyr Ser Tyr Tyr Gly Tyr Ser Asp Val

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 2

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 2

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Arg Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly His Asn

20 25 30

Asp Val Ser Trp Tyr Gln His Leu Pro Gly Lys Ala Pro Arg Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Phe Asp Asp Leu Leu Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Ala Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Gly Ser Leu

85 90 95

Asn Ala Phe Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 3

<211> 369

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 3

caggtacagc tgcagcagtc aggtccagga ctggtgaagc cctcgcagac cctctcactc 60

acctgtgcca tctccgggga cagtgtctct agcaacagtg ctgcttggaa ctggatcagg 120

cagtccccat cgagaggcct tgagtggctg ggaaggacat actacaggtc caagtggtat 180

aatgattatg cagtatctgt gaaaagtcga ataaccatca acccagacac atccaagaac 240

cagttctccc tgcagctgaa ctctgtgact cccgaggaca cggctgtgta ttactgtgcg 300

cgccagggtt actcttacta cggttactct gatgtttggg gtcaaggtac tctggtgacc 360

gtctcctca 369

<210> 4

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 4

cagtctgtgc tgactcagcc accctcggtg tctgtagccc ccaggcagag ggtcaccatc 60

tcgtgttctg gaagcagctc caacatcgga cataatgatg taagctggta ccagcatctc 120

ccagggaagg ctcccagact cctcatctat tttgatgacc tgctgccgtc aggggtctct 180

gaccgattct ctgcctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccag 240

tctgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg gcagcctgaa tgcctttgtc 300

ttcggaactg ggaccaaggt caccgtccta ggt 333

<210> 5

<211> 123

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 5

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser Val Ser Ser Asn

20 25 30

Ser Ala Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser Arg Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Gly Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn Asp Tyr Ala

50 55 60

Val Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Asn Pro Asp Thr Ser Lys Asn

65 70 75 80

Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val

85 90 95

Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Gly Phe Ser Gly Ser Arg Phe Tyr Asp Thr

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 6

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 6

Gln Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Glu Ala Pro Arg Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn

20 25 30

Ala Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Phe Asp Asp Leu Leu Ser Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu

85 90 95

Asn Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 7

<211> 369

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 7

caggtacagc tgcagcagtc aggtccagga ctggtgaagc cctcgcagac cctctcactc 60

acctgtgcca tctccgggga cagtgtctct agcaacagtg ctgcttggaa ctggatcagg 120

cagtccccat cgagaggcct tgagtggctg ggaaggacat actacaggtc caagtggtat 180

aatgattatg cagtatctgt gaaaagtcga ataaccatca acccagacac atccaagaac 240

cagttctccc tgcagctgaa ctctgtgact cccgaggaca cggctgtgta ttactgtgcg 300

cgctacggtt tctctggttc tcgtttctac gatacttggg gtcaaggtac tctggtgacc 360

gtctcctca 369

<210> 8

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 8

cagcctgtgc tgactcagcc accctcggtg tctgaagccc ccaggcagag ggtcaccatc 60

tcctgttctg gaagcagctc caacatcgga aataatgctg taaactggta ccagcagctc 120

ccaggaaagg ctcccaaact cctcatctat tttgatgatc tgctgtcctc aggggtctct 180

gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccag 240

tctgaagatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg acagcctgaa tggttatgtc 300

ttcggaactg ggaccaaggt caccgtccta ggt 333

<210> 9

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 9

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Glu Asp Thr Ser Thr Asp Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Gly Tyr Ser Lys Ser Ile Val Ser Tyr Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 10

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 10

Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Thr Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Val Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Val Val Phe Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Val

35 40 45

Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Val Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 11

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 11

gaggtccagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaagg atcatcccta tccttggtat agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accgaggaca catctacaga cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gcgctctggt 300

tactctaaat ctatcgtttc ttacatggat tactggggtc aaggtactct ggtgaccgtc 360

tcctca 366

<210> 12

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 12

ctgcctgtgc tgactcagcc cccctccacg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccgtc 60

tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agtaatgttg tattctggta ccagcagctc 120

ccaggcacgg cccccaaact tgtcatctat aggaataatc aacggccctc aggggtccct 180

gaccgattct ctgtctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccgg 240

tccgaggacg aggctgatta ttattgtgca gcttgggatg acagcctgag tggttatgtc 300

ttcggaactg ggaccaaggt caccgtccta ggt 333

<210> 13

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 13

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ile Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Gln Trp Gly Gly Val Leu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 14

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 14

Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Arg

20 25 30

Tyr Asp Val Gln Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Leu Ile Phe Gly Asn Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser

85 90 95

Leu Ser Ala Ser Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 15

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 15

gaggtccagc tggtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt 60

tcctgcaagg catctggata caccttcacc agctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaata atcaacccta gtggtggtag cacaagctac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accagggaca cgtccacgag cacagtctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gcgctctcag 300

tggggtggtg ttctggatta ctggggtcaa ggtactctgg tgaccgtctc ctca 354

<210> 16

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 16

cagtctgtcg tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc cagggcagag ggtcaccatc 60

tcctgcagtg ggagcagctc caacatcggg gcacgttatg atgttcagtg gtaccagcag 120

cttccaggaa cagcccccaa actcctcatc tttggtaaca acaatcggcc ctcaggggtc 180

cctgaccgat tctctggctc caagtctggc acgtcagcct ccctggccat cactgggctc 240

caggctgagg atgaggctga ttattactgc cagtcctatg acagcagcct gagtgcttcg 300

gtgttcggcg gagggaccaa gctgaccgtc ctaggt 336

<210> 17

<211> 123

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 17

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Thr Gly Tyr Glu Ser Trp Gly Ser Tyr Glu Val Ile Asp Arg

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 18

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 18

Gln Ala Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Thr Val Asn Trp Tyr Arg Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu

85 90 95

Asn Gly Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 19

<211> 369

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 19

caggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaagg atcatcccta tccttggtat agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtat attactgtgc gcgcactggt 300

tacgaatctt ggggttctta cgaagttatc gatcgttggg gtcaaggtac tctggtgacc 360

gtctcctca 369

<210> 20

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 20

caggctgtgc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60

tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agtaatactg taaactggta ccggcagctc 120

ccaggaacgg cccccaaact cctcatctat agtaataatc agcggccctc aggggtccct 180

gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccag 240

tctgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg acagcctgaa tggtgtggta 300

ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggt 333

<210> 21

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 21

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Gly Tyr Tyr Ser His Asp Met Trp Ser Glu Asp Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 22

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 22

Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Arg Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Ser Val Asn Trp Tyr Arg Gln Leu Pro Gly Ala Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Pro Gly Val Pro Val Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Asp Asn Leu

85 90 95

Asn Val His Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 23

<211> 363

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 23

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaagg atcatcccta tccttggtat agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gcgcggtggt 300

tactactctc atgacatgtg gtctgaagat tggggtcaag gtactctggt gaccgtctcc 360

tca 363

<210> 24

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 24

ctgcctgtgc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60

tcttgttctg gacgcagttc caacatcggg agtaattctg ttaactggta tcgacaactc 120

ccaggagcgg cccccaaact cctcatctat agtaataatc agcggccccc aggggtccct 180

gtgcgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccag 240

tctgaagatg aggccactta ttactgtgca acatgggatg acaatctgaa tgttcactat 300

gtcttcggaa ctgggaccaa ggtcaccgtc ctaggt 336

<210> 25

<211> 125

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 25

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gly

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Gly Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Asn Ser

20 25 30

Asn Trp Trp Ser Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp

35 40 45

Ile Gly Glu Ile Tyr His Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Arg Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Lys Ser Lys Asn Gln Phe Ser

65 70 75 80

Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Asp Asn Trp Lys Thr Pro Thr Thr Lys Ile Asp Gly Phe

100 105 110

Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 26

<211> 117

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 26

Gln Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Ala Ser Leu Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Thr Leu Thr Cys Thr Leu Ser Ser Gly Tyr Ser Asn Tyr Lys

20 25 30

Val Asp Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Lys Gly Pro Arg Phe Val Met

35 40 45

Arg Val Gly Thr Gly Gly Ile Val Gly Ser Lys Gly Asp Gly Ile Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Val Leu Gly Ser Gly Leu Asn Arg Tyr Leu Thr Ile

65 70 75 80

Lys Asn Ile Gln Glu Glu Asp Glu Gly Asp Tyr His Cys Gly Ala Asp

85 90 95

His Gly Ser Gly Ser Asn Phe Val Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys

100 105 110

Val Thr Val Leu Gly

115

<210> 27

<211> 375

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 27

caggtgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggggac cctgtccctc 60

acctgcggtg tctctggtgg ctccatcagc aatagtaact ggtggagttg ggtccgccag 120

ccccccggga aggggctgga gtggattggg gaaatctatc atagtgggag caccaagtac 180

aacccgtccc tcaggagtcg agtcaccata tcagtagaca agtccaagaa ccagttctcc 240

ctaaaattga gctctgtgac cgccgcggac acggccgtat attactgtgc gagacgagat 300

aactggaaga cccccactac caaaattgat ggttttgata tctggggcca agggacaatg 360

gtcaccgtct cttca 375

<210> 28

<211> 351

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 28

cagcctgtgc tgactcagcc accttctgca tcagcctccc tgggagcctc ggtcacactc 60

acctgcaccc tgagcagcgg ctacagtaat tataaagtgg actggtacca gcagagacca 120

gggaagggcc cccggtttgt gatgcgagtg ggcactggtg ggattgtggg atccaagggg 180

gatggcatcc ctgatcgctt ctcagtcttg ggctcaggcc tgaatcggta cctgaccatc 240

aagaacatcc aggaagaaga tgagggtgac tatcactgtg gggcagacca tggcagtggg 300

agcaacttcg tgtatgtctt cggaactggg accaaggtca ccgtcctagg t 351

<210> 29

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 29

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Gln Trp Gly Ser Ser Trp Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 30

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 30

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Pro

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

100 105

<210> 31

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 31

caggtccagc tggtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggata caccttcacc ggctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta acagtggtgg cacaaactat 180

gcacagaagt ttcagggcag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcag cacagcctac 240

atggagctga gcaggctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gcgctctcag 300

tggggttctt cttgggatta ctggggtcaa ggtactctgg tgaccgtctc ctca 354

<210> 32

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 32

gacatccagt tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60

atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120

gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180

aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240

gaagattttg caacttacta ctgtcaacag agttacagta cccctccgac gttcggccaa 300

gggaccaagg tggagatcaa acgt 324

<210> 33

<211> 119

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 33

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Ser Tyr His Leu Tyr Gly Tyr Asp Ser Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 34

<211> 117

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 34

Gln Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Ala Ser Leu Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Thr Leu Thr Cys Thr Leu Ser Asn Asp Tyr Thr Asn Tyr Lys

20 25 30

Val Asp Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Lys Gly Pro Arg Phe Val Met

35 40 45

Arg Val Gly Pro Gly Gly Ile Val Gly Ser Lys Gly Asp Gly Ile Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Val Leu Gly Ser Gly Leu Asn Arg Tyr Leu Thr Ile

65 70 75 80

Lys Asn Ile Gln Glu Glu Asp Glu Ser Asp Tyr His Cys Gly Ala Asp

85 90 95

His Gly Thr Gly Ser Asn Phe Val Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys

100 105 110

Leu Thr Val Leu Gly

115

<210> 35

<211> 357

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 35

gaggtgcagc tggtggagtc cggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggata caccttcacc ggctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta acagtggtgg cacaaactat 180

gcacagaagt ttcagggcag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcag cacagcctac 240

atggagctga gcaggctgag atctgacgac acggccgtat attactgtgc gcgctcttct 300

taccatctgt acggttacga ttcttggggt caaggtactc tggtgaccgt ctcctca 357

<210> 36

<211> 351

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 36

cagcctgtgc tgactcagcc accttctgca tcagcctccc tgggagcctc ggtcactctc 60

acctgcaccc tgagcaacga ctacactaat tataaagtgg actggtacca gcagagacca 120

gggaagggcc cccggtttgt gatgcgagtg ggccctggtg ggattgtggg atccaagggg 180

gatggcatcc ctgatcgctt ctcagtcttg ggctcaggcc tgaatcgata cctgaccatc 240

aagaacatcc aggaggagga tgagagtgac taccactgtg gggcggacca tggcaccggg 300

agcaacttcg tgtacgtgtt cggcggaggg accaagctga ccgtcctagg t 351

<210> 37

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 37

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Gly Ile Ile Pro Ile Phe Ser Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gln Pro Trp Thr Trp Tyr Ser Pro Tyr Asp Gln Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 38

<211> 117

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 38

Gln Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Ala Ser Leu Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Thr Leu Thr Cys Thr Leu Ser Ser Gly Tyr Ser Asn Tyr Lys

20 25 30

Val Asp Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Lys Gly Pro Arg Phe Leu Met

35 40 45

Arg Val Asp Thr Gly Gly Ile Val Gly Ser Lys Gly Asp Gly Ile Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Val Ser Gly Ser Gly Leu Asn Arg Tyr Leu Thr Ile

65 70 75 80

Lys Asn Ile Gln Glu Glu Asp Glu Ser Asp Tyr His Cys Gly Ala Asp

85 90 95

His Gly Ser Gly Ser Asn Phe Val Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys

100 105 110

Leu Thr Val Leu Gly

115

<210> 39

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 39

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttagtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accacagaca catccacgag cacagcctac 240

atggagctga ggagcctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gcgccagccg 300

tggacttggt actctccgta cgatcagtgg ggtcaaggta ctctggtgac cgtctcctca 360

<210> 40

<211> 351

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 40

cagcctgtgc tgactcagcc accttctgca tcagcctccc tgggagcctc ggtcacactc 60

acctgcaccc tgagcagcgg ctacagtaat tataaagtgg actggtatca acagagacca 120

gggaagggcc cccggtttct gatgcgagta gacaccggtg ggattgtggg atccaagggg 180

gatggcatcc ctgatcgctt ctcagtctcg ggctcaggtc tgaatcggta cctgaccatc 240

aagaacattc aggaagagga tgagagtgac taccactgtg gggcagacca tggcagtggg 300

agcaacttcg tgtgggtgtt cggcggaggg accaagctga ccgtcctagg t 351

<210> 41

<211> 117

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 41

Glu Val Gln Leu Val Glu Thr Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr

20 25 30

Ala Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Ala Ile Thr Pro Gly Gly Asp Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Arg Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Tyr Tyr Gly Tyr Met Ile Asp Met Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 42

<211> 113

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 42

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser

20 25 30

Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Ala

85 90 95

Leu Gln Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

Arg

<210> 43

<211> 351

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 43

gaggtgcagc tggtggagac tgggggaggc ctggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60

tcctgtgctg cctctggatt cacctttagc acctatgcca tgacctgggt ccgccaggct 120

ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attactcctg gtggtgatcg cacatactac 180

gcagactccg tgaagggccg tttcactatc tccagagaca attccaggaa cacgctgtat 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gcgctactac 300

ggttacatga tcgatatgtg gggtcaaggt actctggtga ccgtctcctc a 351

<210> 44

<211> 339

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 44

gatgttgtga tgactcagtc tccactctcc ctgcccgtca cccctggaga gccggcctcc 60

atctcctgca ggtctagtca gagcctcctg catagtaatg gatacaacta tttggattgg 120

tacctgcaga agccagggca gtctccacag ctcctgatct atttgggttc taatcgggcc 180

tccggggtcc ctgacaggtt cagtggcagt ggatcaggca cagattttac actgaaaatc 240

agcagagtgg aggctgagga tgttggggtt tattactgca tgcaagctct acaaactcct 300

ctcactttcg gcggagggac caaggtggaa atcaaacgt 339

<210> 45

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 45

Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Tyr Val His Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Asn Ala Gln Glu Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Ile Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Asn Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Gln Trp Gly Gly Thr Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 46

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 46

Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Thr Val Asn Trp Tyr Gln Gln Val Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Ala Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Trp Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu

85 90 95

Asn Gly Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 47

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 47

cagatgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggata caccttcacc ggctattatg tacactggtt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggttgg atcaacccta acagtggcgg cacaaacaat 180

gcacaggagt ttcaaggcag gatcaccatg accagggaca cgtccatcaa cacagcctac 240

atggagctga gcaggctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gcgctctcag 300

tggggtggta cttacgatta ctggggtcaa ggtactctgg tgaccgtctc ctca 354

<210> 48

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 48

tcctatgtgc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60

tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agtaatactg taaactggta ccagcaggtc 120

ccaggaacgg cccccaaact cctcatctat agtaataatc agcggccctc aggggtccct 180

gaccgattct ctggctccaa gtctggcgcc tcagcctccc tggccatcag ttggctccag 240

tctgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg acagcctgaa tggttgggtg 300

ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggt 333

<210> 49

<211> 117

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 49

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu

1 5 10 15

Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Asp Phe Thr Thr Tyr

20 25 30

Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Val

50 55 60

Arg Gly Arg Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Asn Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Trp Ser Ser Leu Glu Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Met Trp Thr Phe Ser Gln Asp Gly Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 50

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 50

Gln Ala Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Tyr

20 25 30

Thr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Phe Leu

35 40 45

Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu

85 90 95

Asn Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 51

<211> 351

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 51

gaggtgcagc tggtgcagtc tggagcagag gtgaaaaagc cgggggagtc tctgaagatc 60

tcctgtaagg gttctggata tgactttacc acctactgga tcgggtgggt gcgccagatg 120

cccgggaagg gcctggagtg gatggggatc atctatcctg gtgactctga taccagatac 180

agcccgtccg tccgaggccg ggtcaccatc tcagccgaca agtccatcaa caccgcctat 240

ttgcagtgga gtagcctgga ggcctccgac accgccatgt attactgtgc gcgcatgtgg 300

actttctctc aggatggttg gggtcaaggt actctggtga ccgtctcctc a 351

<210> 52

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 52

caggctgtgc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60

tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agttatactg taagctggta ccagcaactc 120

ccaggaacgg cccccaaatt cctcatctat tctaataatc agcggccctc aggggtccct 180

gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccag 240

tctgaggatg aggctgatta ttactgtgct gcatgggatg acagcctgaa tggttatgtc 300

ttcggaactg ggaccaaggt caccgtccta ggt 333

<210> 53

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 53

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Met Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ile Asp Tyr

20 25 30

Tyr Val Tyr Trp Met Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Ser Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Gln Arg Asp Gly Tyr Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 54

<211> 105

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 54

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Ala Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Ala Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Trp Tyr

20 25 30

Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Glu Asp Ser

35 40 45

Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly

50 55 60

Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala

65 70 75 80

Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Asn Thr Arg Ser Ser Thr Leu Val Phe Gly

85 90 95

Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105

<210> 55

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 55

gaagtgcagc tggtgcagtc tggggctgag atgaagaagc ctggggcctc actgaagctc 60

tcctgcaagg cttctggata caccttcatc gactactatg tatactggat gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtc catgggatgg atcaacccta acagtggtgg cacaaactat 180

gcacagaagt ttcagggcag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcag cacagcctac 240

atggagctga gcaggctgag atctgacgac accgccatgt attactgtgc gcgctcccag 300

cgtgacggtt acatggatta ctggggtcaa ggtactctgg tgaccgtctc ctca 354

<210> 56

<211> 315

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 56

caatctgccc tgactcagcc tgcctccgtg tctgcgtctc ctggacagtc gatcgccatc 60

tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt tggtatcaac agcacccagg caaagccccc 120

aaactcatga tttatgagga cagtaagcgg ccctcagggg tttctaatcg cttctctggc 180

tccaagtctg gcaacacggc ctccctgacc atctctgggc tccaggctga ggacgaggct 240

gattattact gcagctcaaa tacaagaagc agcactttgg tgttcggcgg agggaccaag 300

ctgaccgtcc taggt 315

<210> 57

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 57

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Asp Arg Ile Thr Val Thr Arg Asp Thr Ser Ser Asn Thr Gly Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Thr Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Pro Tyr Ser Gly Val Leu Asp Lys Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 58

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 58

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly

20 25 30

Phe Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser

85 90 95

Leu Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 59

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 59

caggtccagc tggtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggata caccttcacc gactactata tgcactgggt gcgacaggcc 120

cctggacaac ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta acagtggtgg cacaaactat 180

gcacagaagt ttcaggacag gatcaccgtg accagggaca cctccagcaa cacaggctac 240

atggagctga ccaggctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gcgctctccg 300

tactctggtg ttctggataa atggggtcaa ggtactctgg tgaccgtctc ctca 354

<210> 60

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 60

cagtctgtgc tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc cagggcagag ggtcaccatc 60

tcctgcactg ggagcagctc caacatcggg gcaggttttg atgtacactg gtaccagcag 120

cttccaggaa cagcccccaa actcctcatc tatggtaaca gcaatcggcc ctcaggggtc 180

cctgaccgat tctctggctc caagtctggc acctcagcct ccctggccat cactgggctc 240

caggctgagg atgaggctga ttattactgc cagtcctatg acagcagcct gagtggttat 300

gtcttcggaa ctgggaccaa ggtcaccgtc ctaggt 336

<210> 61

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 61

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Gly Tyr Gly Ser Tyr Arg Trp Glu Asp Ser Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 62

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 62

Gln Ala Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Tyr Val Phe Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu

85 90 95

Ser Ala Ser Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 63

<211> 360

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 63

caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60

tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120

cctggacaag ggcttgagtg gatgggaagg atcatcccta tccttggtac agcaaactac 180

gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240

atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gcgctctggt 300

tacggttctt accgttggga agattcttgg ggtcaaggta ctctggtgac cgtctcctca 360

<210> 64

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 64

caggctgtgc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60

tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agtaattacg tattctggta ccagcagctc 120

ccaggaacgg cccccaaact cctcatctat agtaataatc agcggccctc aggggtccct 180

gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccgg 240

tccgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg acagcctgag tgcctcttat 300

gttttcggaa ctgggaccaa ggtcaccgtc ctaggt 336

<210> 65

<211> 116

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 65

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu

1 5 10 15

Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe

50 55 60

Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Tyr Ser Gly Ser Phe Asp Asn Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val

100 105 110

Thr Val Ser Ser

115

<210> 66

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 66

Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Met Ser Cys Ser Gly Thr Ser Ser Asn Ile Gly Ser His

20 25 30

Ser Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Thr Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Gly Ser Leu

85 90 95

Asn Gly Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

<210> 67

<211> 348

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 67

gaggtgcagc tggtgcagtc tggagcagag gtgaaaaagc ccggggagtc tctgaagatc 60

tcctgtaagg gttctggata cagctttacc agctactgga tcggctgggt gcgccagatg 120

cccgggaaag gcctggagtg gatggggatc atctatcctg gtgactctga taccagatac 180

agcccgtcct tccaaggcca cgtcaccatc tcagctgaca agtccatcag cactgcctac 240

ctgcagtgga gcagcctgaa ggcctcggac accgccatgt attactgtgc gcgctactct 300

ggttctttcg ataactgggg tcaaggtact ctggtgaccg tctcctca 348

<210> 68

<211> 333

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полинуклеотид

<400> 68

tcctatgagc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatg 60

tcttgttctg gaaccagctc caacatcgga agtcactctg taaactggta ccagcagctc 120

ccaggaacgg cccccaaact cctcatctat actaataatc agcggccctc aggggtccct 180

gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tggcctccag 240

tctgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg gcagcctgaa tggtctggta 300

ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggt 333

<210> 69

<211> 21

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 69

Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Glu Met Ala

20

<210> 70

<211> 63

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

олигонуклеотид

<400> 70

tctagaggtg gtggtggtag cggcggcggc ggctctggtg gtggtggatc cctcgagatg 60

gcc 63

<210> 71

<211> 184

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 71

Met Leu Gln Met Ala Gly Gln Cys Ser Gln Asn Glu Tyr Phe Asp Ser

1 5 10 15

Leu Leu His Ala Cys Ile Pro Cys Gln Leu Arg Cys Ser Ser Asn Thr

20 25 30

Pro Pro Leu Thr Cys Gln Arg Tyr Cys Asn Ala Ser Val Thr Asn Ser

35 40 45

Val Lys Gly Thr Asn Ala Ile Leu Trp Thr Cys Leu Gly Leu Ser Leu

50 55 60

Ile Ile Ser Leu Ala Val Phe Val Leu Met Phe Leu Leu Arg Lys Ile

65 70 75 80

Asn Ser Glu Pro Leu Lys Asp Glu Phe Lys Asn Thr Gly Ser Gly Leu

85 90 95

Leu Gly Met Ala Asn Ile Asp Leu Glu Lys Ser Arg Thr Gly Asp Glu

100 105 110

Ile Ile Leu Pro Arg Gly Leu Glu Tyr Thr Val Glu Glu Cys Thr Cys

115 120 125

Glu Asp Cys Ile Lys Ser Lys Pro Lys Val Asp Ser Asp His Cys Phe

130 135 140

Pro Leu Pro Ala Met Glu Glu Gly Ala Thr Ile Leu Val Thr Thr Lys

145 150 155 160

Thr Asn Asp Tyr Cys Lys Ser Leu Pro Ala Ala Leu Ser Ala Thr Glu

165 170 175

Ile Glu Lys Ser Ile Ser Ala Arg

180

<210> 72

<211> 255

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 72

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Arg Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly His Asn

20 25 30

Asp Val Ser Trp Tyr Gln His Leu Pro Gly Lys Ala Pro Arg Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Phe Asp Asp Leu Leu Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Ala Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Gly Ser Leu

85 90 95

Asn Ala Phe Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ser

100 105 110

Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

115 120 125

Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val

130 135 140

Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser

145 150 155 160

Val Ser Ser Asn Ser Ala Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser

165 170 175

Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr

180 185 190

Asn Asp Tyr Ala Val Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Asn Pro Asp

195 200 205

Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu

210 215 220

Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gln Gly Tyr Ser Tyr Tyr Gly

225 230 235 240

Tyr Ser Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245 250 255

<210> 73

<211> 255

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 73

Gln Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Glu Ala Pro Arg Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn

20 25 30

Ala Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Phe Asp Asp Leu Leu Ser Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu

85 90 95

Asn Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ser

100 105 110

Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

115 120 125

Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val

130 135 140

Lys Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Ile Ser Gly Asp Ser

145 150 155 160

Val Ser Ser Asn Ser Ala Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Ser Pro Ser

165 170 175

Arg Gly Leu Glu Trp Leu Gly Arg Thr Tyr Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr

180 185 190

Asn Asp Tyr Ala Val Ser Val Lys Ser Arg Ile Thr Ile Asn Pro Asp

195 200 205

Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Pro Glu

210 215 220

Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Gly Phe Ser Gly Ser Arg

225 230 235 240

Phe Tyr Asp Thr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245 250 255

<210> 74

<211> 254

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 74

Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Thr Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Val Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Val Val Phe Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Val

35 40 45

Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Val Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ser

100 105 110

Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

115 120 125

Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys

130 135 140

Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr

145 150 155 160

Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly

165 170 175

Leu Glu Trp Met Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala Asn Tyr

180 185 190

Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Glu Asp Thr Ser Thr

195 200 205

Asp Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala

210 215 220

Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Gly Tyr Ser Lys Ser Ile Val Ser Tyr

225 230 235 240

Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245 250

<210> 75

<211> 251

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 75

Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Arg

20 25 30

Tyr Asp Val Gln Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Leu Ile Phe Gly Asn Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser

85 90 95

Leu Ser Ala Ser Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

115 120 125

Ser Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

130 135 140

Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

145 150 155 160

Thr Phe Thr Ser Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

165 170 175

Gly Leu Glu Trp Met Gly Ile Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr Ser

180 185 190

Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser

195 200 205

Thr Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

210 215 220

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Gln Trp Gly Gly Val Leu Asp Tyr

225 230 235 240

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245 250

<210> 76

<211> 255

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 76

Gln Ala Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Thr Val Asn Trp Tyr Arg Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu

85 90 95

Asn Gly Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser

100 105 110

Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

115 120 125

Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys

130 135 140

Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr

145 150 155 160

Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly

165 170 175

Leu Glu Trp Met Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala Asn Tyr

180 185 190

Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr

195 200 205

Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala

210 215 220

Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Thr Gly Tyr Glu Ser Trp Gly Ser Tyr Glu

225 230 235 240

Val Ile Asp Arg Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245 250 255

<210> 77

<211> 254

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 77

Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Arg Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Ser Val Asn Trp Tyr Arg Gln Leu Pro Gly Ala Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Pro Gly Val Pro Val Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Trp Asp Asp Asn Leu

85 90 95

Asn Val His Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly

100 105 110

Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

115 120 125

Ser Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

130 135 140

Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly

145 150 155 160

Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

165 170 175

Gly Leu Glu Trp Met Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala Asn

180 185 190

Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser

195 200 205

Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

210 215 220

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Gly Tyr Tyr Ser His Asp Met Trp

225 230 235 240

Ser Glu Asp Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245 250

<210> 78

<211> 263

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 78

Gln Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Ala Ser Leu Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Thr Leu Thr Cys Thr Leu Ser Ser Gly Tyr Ser Asn Tyr Lys

20 25 30

Val Asp Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Lys Gly Pro Arg Phe Val Met

35 40 45

Arg Val Gly Thr Gly Gly Ile Val Gly Ser Lys Gly Asp Gly Ile Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Val Leu Gly Ser Gly Leu Asn Arg Tyr Leu Thr Ile

65 70 75 80

Lys Asn Ile Gln Glu Glu Asp Glu Gly Asp Tyr His Cys Gly Ala Asp

85 90 95

His Gly Ser Gly Ser Asn Phe Val Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys

100 105 110

Val Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

115 120 125

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Gln Glu

130 135 140

Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gly Thr Leu Ser Leu Thr Cys

145 150 155 160

Gly Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Asn Ser Asn Trp Trp Ser Trp Val

165 170 175

Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Ile Tyr His

180 185 190

Ser Gly Ser Thr Lys Tyr Asn Pro Ser Leu Arg Ser Arg Val Thr Ile

195 200 205

Ser Val Asp Lys Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val

210 215 220

Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Asp Asn Trp

225 230 235 240

Lys Thr Pro Thr Thr Lys Ile Asp Gly Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly

245 250 255

Thr Met Val Thr Val Ser Ser

260

<210> 79

<211> 247

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 79

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Pro

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Ser Arg Gly Gly

100 105 110

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met

115 120 125

Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly

130 135 140

Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly

145 150 155 160

Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp

165 170 175

Met Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys

180 185 190

Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala

195 200 205

Tyr Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr

210 215 220

Cys Ala Arg Ser Gln Trp Gly Ser Ser Trp Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

225 230 235 240

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245

<210> 80

<211> 257

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 80

Gln Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Ala Ser Leu Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Thr Leu Thr Cys Thr Leu Ser Asn Asp Tyr Thr Asn Tyr Lys

20 25 30

Val Asp Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Lys Gly Pro Arg Phe Val Met

35 40 45

Arg Val Gly Pro Gly Gly Ile Val Gly Ser Lys Gly Asp Gly Ile Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Val Leu Gly Ser Gly Leu Asn Arg Tyr Leu Thr Ile

65 70 75 80

Lys Asn Ile Gln Glu Glu Asp Glu Ser Asp Tyr His Cys Gly Ala Asp

85 90 95

His Gly Thr Gly Ser Asn Phe Val Tyr Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys

100 105 110

Leu Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

115 120 125

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Glu

130 135 140

Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys

145 150 155 160

Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr Tyr Met His Trp Val Arg

165 170 175

Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Asn Pro Asn

180 185 190

Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met

195 200 205

Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Arg Leu

210 215 220

Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Ser Tyr His

225 230 235 240

Leu Tyr Gly Tyr Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser

245 250 255

Ser

<210> 81

<211> 258

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 81

Gln Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Ala Ser Leu Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Thr Leu Thr Cys Thr Leu Ser Ser Gly Tyr Ser Asn Tyr Lys

20 25 30

Val Asp Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Lys Gly Pro Arg Phe Leu Met

35 40 45

Arg Val Asp Thr Gly Gly Ile Val Gly Ser Lys Gly Asp Gly Ile Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Val Ser Gly Ser Gly Leu Asn Arg Tyr Leu Thr Ile

65 70 75 80

Lys Asn Ile Gln Glu Glu Asp Glu Ser Asp Tyr His Cys Gly Ala Asp

85 90 95

His Gly Ser Gly Ser Asn Phe Val Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys

100 105 110

Leu Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

115 120 125

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln

130 135 140

Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys

145 150 155 160

Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg

165 170 175

Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Gly Ile Ile Pro Ile

180 185 190

Phe Ser Thr Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met

195 200 205

Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu

210 215 220

Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gln Pro Trp Thr

225 230 235 240

Trp Tyr Ser Pro Tyr Asp Gln Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

245 250 255

Ser Ser

<210> 82

<211> 251

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 82

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly

1 5 10 15

Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser

20 25 30

Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Ala

85 90 95

Leu Gln Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

115 120 125

Gly Ser Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Glu Thr Gly Gly Gly

130 135 140

Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly

145 150 155 160

Phe Thr Phe Ser Thr Tyr Ala Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly

165 170 175

Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Ala Ile Thr Pro Gly Gly Asp Arg Thr

180 185 190

Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn

195 200 205

Ser Arg Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp

210 215 220

Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Tyr Gly Tyr Met Ile Asp Met

225 230 235 240

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245 250

<210> 83

<211> 250

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 83

Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Thr Val Asn Trp Tyr Gln Gln Val Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Ala Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Trp Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu

85 90 95

Asn Gly Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser

100 105 110

Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

115 120 125

Leu Glu Met Ala Gln Met Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys

130 135 140

Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr

145 150 155 160

Phe Thr Gly Tyr Tyr Val His Trp Leu Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly

165 170 175

Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Asn

180 185 190

Ala Gln Glu Phe Gln Gly Arg Ile Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile

195 200 205

Asn Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala

210 215 220

Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Gln Trp Gly Gly Thr Tyr Asp Tyr Trp

225 230 235 240

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245 250

<210> 84

<211> 249

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 84

Gln Ala Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Tyr

20 25 30

Thr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Phe Leu

35 40 45

Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu

85 90 95

Asn Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly Ser

100 105 110

Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

115 120 125

Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys

130 135 140

Lys Pro Gly Glu Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Asp

145 150 155 160

Phe Thr Thr Tyr Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly

165 170 175

Leu Glu Trp Met Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr

180 185 190

Ser Pro Ser Val Arg Gly Arg Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile

195 200 205

Asn Thr Ala Tyr Leu Gln Trp Ser Ser Leu Glu Ala Ser Asp Thr Ala

210 215 220

Met Tyr Tyr Cys Ala Arg Met Trp Thr Phe Ser Gln Asp Gly Trp Gly

225 230 235 240

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245

<210> 85

<211> 244

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 85

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Ala Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Ala Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Trp Tyr

20 25 30

Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Glu Asp Ser

35 40 45

Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly

50 55 60

Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala

65 70 75 80

Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Asn Thr Arg Ser Ser Thr Leu Val Phe Gly

85 90 95

Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser

100 105 110

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu Met Ala Glu Val

115 120 125

Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Met Lys Lys Pro Gly Ala Ser Leu

130 135 140

Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ile Asp Tyr Tyr Val

145 150 155 160

Tyr Trp Met Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Ser Met Gly Trp

165 170 175

Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly

180 185 190

Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr Met Glu

195 200 205

Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg

210 215 220

Ser Gln Arg Asp Gly Tyr Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val

225 230 235 240

Thr Val Ser Ser

<210> 86

<211> 251

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 86

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly

20 25 30

Phe Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser

85 90 95

Leu Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly

100 105 110

Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

115 120 125

Ser Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

130 135 140

Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr

145 150 155 160

Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

165 170 175

Arg Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn

180 185 190

Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Asp Arg Ile Thr Val Thr Arg Asp Thr Ser

195 200 205

Ser Asn Thr Gly Tyr Met Glu Leu Thr Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr

210 215 220

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Pro Tyr Ser Gly Val Leu Asp Lys

225 230 235 240

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245 250

<210> 87

<211> 253

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 87

Gln Ala Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn

20 25 30

Tyr Val Phe Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Ser Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu

85 90 95

Ser Ala Ser Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu Gly

100 105 110

Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

115 120 125

Ser Leu Glu Met Ala Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val

130 135 140

Lys Lys Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly

145 150 155 160

Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln

165 170 175

Gly Leu Glu Trp Met Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Thr Ala Asn

180 185 190

Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser

195 200 205

Thr Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr

210 215 220

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Gly Tyr Gly Ser Tyr Arg Trp Glu

225 230 235 240

Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245 250

<210> 88

<211> 248

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 88

Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Met Ser Cys Ser Gly Thr Ser Ser Asn Ile Gly Ser His

20 25 30

Ser Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Thr Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Gly Ser Leu

85 90 95

Asn Gly Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser

100 105 110

Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

115 120 125

Leu Glu Met Ala Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys

130 135 140

Lys Pro Gly Glu Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser

145 150 155 160

Phe Thr Ser Tyr Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly

165 170 175

Leu Glu Trp Met Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr

180 185 190

Ser Pro Ser Phe Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile

195 200 205

Ser Thr Ala Tyr Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala

210 215 220

Met Tyr Tyr Cys Ala Arg Tyr Ser Gly Ser Phe Asp Asn Trp Gly Gln

225 230 235 240

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

245

<210> 89

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 89

Val Ser Ser Asn Ser Ala Ala Trp Asn

1 5

<210> 90

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 90

Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn

1 5

<210> 91

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 91

Ala Arg Gln Gly Tyr Ser Tyr Tyr Gly Tyr Ser Asp Val

1 5 10

<210> 92

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 92

Ser Ser Asn Ile Gly His Asn Asp

1 5

<210> 93

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 93

Phe Asp Asp

1

<210> 94

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 94

Ala Ala Trp Asp Gly Ser Leu Asn Ala Phe Val

1 5 10

<210> 95

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 95

Val Ser Ser Asn Ser Ala Ala Trp Asn

1 5

<210> 96

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 96

Tyr Arg Ser Lys Trp Tyr Asn

1 5

<210> 97

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 97

Ala Arg Tyr Gly Phe Ser Gly Ser Arg Phe Tyr Asp Thr

1 5 10

<210> 98

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 98

Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn Ala

1 5

<210> 99

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 99

Phe Asp Asp

1

<210> 100

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 100

Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly Tyr Val

1 5 10

<210> 101

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 101

Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Ala

1 5

<210> 102

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 102

Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala

1 5

<210> 103

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 103

Ala Arg Ser Gly Tyr Ser Lys Ser Ile Val Ser Tyr Met Asp Tyr

1 5 10 15

<210> 104

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 104

Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Val

1 5

<210> 105

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 105

Arg Asn Asn

1

<210> 106

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 106

Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Gly Tyr Val

1 5 10

<210> 107

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 107

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Tyr

1 5

<210> 108

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 108

Ile Asn Pro Ser Gly Gly Ser Thr

1 5

<210> 109

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 109

Ala Arg Ser Gln Trp Gly Gly Val Leu Asp Tyr

1 5 10

<210> 110

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 110

Ser Ser Asn Ile Gly Ala Arg Tyr Asp

1 5

<210> 111

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 111

Gly Asn Asn

1

<210> 112

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 112

Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val

1 5 10

<210> 113

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 113

Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Ala

1 5

<210> 114

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 114

Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala

1 5

<210> 115

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 115

Ala Arg Thr Gly Tyr Glu Ser Trp Gly Ser Tyr Glu Val Ile Asp Arg

1 5 10 15

<210> 116

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 116

Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr

1 5

<210> 117

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 117

Ser Asn Asn

1

<210> 118

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 118

Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly Val Val

1 5 10

<210> 119

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 119

Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Ala

1 5

<210> 120

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 120

Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala

1 5

<210> 121

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 121

Ala Arg Gly Gly Tyr Tyr Ser His Asp Met Trp Ser Glu Asp

1 5 10

<210> 122

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 122

Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Ser

1 5

<210> 123

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 123

Ser Asn Asn

1

<210> 124

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 124

Ala Thr Trp Asp Asp Asn Leu Asn Val His Tyr Val

1 5 10

<210> 125

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 125

Gly Gly Ser Ile Ser Asn Ser Asn Trp

1 5

<210> 126

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 126

Ile Tyr His Ser Gly Ser Thr

1 5

<210> 127

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 127

Ala Arg Arg Asp Asn Trp Lys Thr Pro Thr Thr Lys Ile Asp Gly Phe

1 5 10 15

Asp Ile

<210> 128

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 128

Ser Gly Tyr Ser Asn Tyr Lys

1 5

<210> 129

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 129

Val Gly Thr Gly Gly Ile Val Gly

1 5

<210> 130

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 130

Gly Ala Asp His Gly Ser Gly Ser Asn Phe Val Tyr Val

1 5 10

<210> 131

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 131

Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr Tyr

1 5

<210> 132

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 132

Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr

1 5

<210> 133

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 133

Ala Arg Ser Gln Trp Gly Ser Ser Trp Asp Tyr

1 5 10

<210> 134

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 134

Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

1 5

<210> 135

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 135

Ala Ala Ser

1

<210> 136

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 136

Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Pro Thr

1 5

<210> 137

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 137

Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr Tyr

1 5

<210> 138

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 138

Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr

1 5

<210> 139

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 139

Ala Arg Ser Ser Tyr His Leu Tyr Gly Tyr Asp Ser

1 5 10

<210> 140

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 140

Asn Asp Tyr Thr Asn Tyr Lys

1 5

<210> 141

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 141

Val Gly Pro Gly Gly Ile Val Gly

1 5

<210> 142

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 142

Gly Ala Asp His Gly Thr Gly Ser Asn Phe Val Tyr Val

1 5 10

<210> 143

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 143

Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Ala

1 5

<210> 144

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 144

Ile Ile Pro Ile Phe Ser Thr Ala

1 5

<210> 145

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 145

Ala Arg Gln Pro Trp Thr Trp Tyr Ser Pro Tyr Asp Gln

1 5 10

<210> 146

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 146

Ser Gly Tyr Ser Asn Tyr Lys

1 5

<210> 147

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 147

Val Asp Thr Gly Gly Ile Val Gly

1 5

<210> 148

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 148

Gly Ala Asp His Gly Ser Gly Ser Asn Phe Val Trp Val

1 5 10

<210> 149

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 149

Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr Ala

1 5

<210> 150

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 150

Ile Thr Pro Gly Gly Asp Arg Thr

1 5

<210> 151

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 151

Ala Arg Tyr Tyr Gly Tyr Met Ile Asp Met

1 5 10

<210> 152

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 152

Gln Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Tyr Asn Tyr

1 5 10

<210> 153

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 153

Leu Gly Ser

1

<210> 154

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 154

Met Gln Ala Leu Gln Thr Pro Leu Thr

1 5

<210> 155

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 155

Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr Tyr

1 5

<210> 156

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 156

Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr

1 5

<210> 157

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 157

Ala Arg Ser Gln Trp Gly Gly Thr Tyr Asp Tyr

1 5 10

<210> 158

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 158

Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Thr

1 5

<210> 159

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 159

Ser Asn Asn

1

<210> 160

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 160

Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly Trp Val

1 5 10

<210> 161

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 161

Gly Tyr Asp Phe Thr Thr Tyr Trp

1 5

<210> 162

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 162

Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr

1 5

<210> 163

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 163

Ala Arg Met Trp Thr Phe Ser Gln Asp Gly

1 5 10

<210> 164

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 164

Ser Ser Asn Ile Gly Ser Tyr Thr

1 5

<210> 165

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 165

Ser Asn Asn

1

<210> 166

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 166

Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly Tyr Val

1 5 10

<210> 167

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 167

Gly Tyr Thr Phe Ile Asp Tyr Tyr

1 5

<210> 168

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 168

Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr

1 5

<210> 169

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 169

Ala Arg Ser Gln Arg Asp Gly Tyr Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 170

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 170

Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp

1 5

<210> 171

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 171

Glu Asp Ser

1

<210> 172

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 172

Ser Ser Asn Thr Arg Ser Ser Thr Leu Val

1 5 10

<210> 173

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 173

Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr

1 5

<210> 174

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 174

Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr

1 5

<210> 175

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 175

Ala Arg Ser Pro Tyr Ser Gly Val Leu Asp Lys

1 5 10

<210> 176

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 176

Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Phe Asp

1 5

<210> 177

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 177

Gly Asn Ser

1

<210> 178

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 178

Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Leu Ser Gly Tyr Val

1 5 10

<210> 179

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 179

Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Ala

1 5

<210> 180

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 180

Ile Ile Pro Ile Leu Gly Thr Ala

1 5

<210> 181

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 181

Ala Arg Ser Gly Tyr Gly Ser Tyr Arg Trp Glu Asp Ser

1 5 10

<210> 182

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 182

Ser Ser Asn Ile Gly Ser Asn Tyr

1 5

<210> 183

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 183

Ser Asn Asn

1

<210> 184

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 184

Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Ser Ala Ser Tyr Val

1 5 10

<210> 185

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 185

Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr Trp

1 5

<210> 186

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 186

Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr

1 5

<210> 187

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 187

Ala Arg Tyr Ser Gly Ser Phe Asp Asn

1 5

<210> 188

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 188

Ser Ser Asn Ile Gly Ser His Ser

1 5

<210> 189

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 189

Thr Asn Asn

1

<210> 190

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 190

Ala Ala Trp Asp Gly Ser Leu Asn Gly Leu Val

1 5 10

<210> 191

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 191

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 192

<211> 45

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

олигонуклеотид

<400> 192

ggtggaggtg gatcaggtgg aggtggatct ggtggaggtg gatct 45

<210> 193

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 193

Gly Gly Gly Gly Ser

1 5

<210> 194

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 194

Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser

1 5

<210> 195

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 195

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser

1 5

<210> 196

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 196

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10

<210> 197

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 197

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Gly Gly

1 5 10 15

Gly Ser

<210> 198

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 198

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 199

<211> 25

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 199

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

20 25

<210> 200

<211> 30

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 200

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

20 25 30

<210> 201

<211> 35

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 201

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

20 25 30

Gly Gly Ser

35

<210> 202

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 202

Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro

1 5 10 15

<210> 203

<211> 24

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 203

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

1 5 10 15

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro

20

<210> 204

<211> 62

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

полипептид

<400> 204

Glu Leu Lys Thr Pro Leu Gly Asp Thr Thr His Thr Cys Pro Arg Cys

1 5 10 15

Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys Pro

20 25 30

Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys Pro Glu

35 40 45

Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys Pro

50 55 60

<210> 205

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 205

Gly Ser Gly Ser Gly Ser

1 5

<210> 206

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 206

Ala Ala Ala

1

<210> 207

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 207

Ser Gly Ser Gly Leu Gln Met Ala Gly Gln Cys Ser Gln Asn Glu Tyr

1 5 10 15

Phe Asp Ser

<210> 208

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 208

Ser Gly Ser Gly Gln Met Ala Gly Gln Cys Ser Gln Asn Glu Tyr Phe

1 5 10 15

Asp Ser Leu

<210> 209

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 209

Ser Gly Ser Gly Met Ala Gly Gln Cys Ser Gln Asn Glu Tyr Phe Asp

1 5 10 15

Ser Leu Leu

<210> 210

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 210

Ser Gly Ser Gly Ala Gly Gln Cys Ser Gln Asn Glu Tyr Phe Asp Ser

1 5 10 15

Leu Leu His

<210> 211

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 211

Ser Gly Ser Gly Gly Gln Cys Ser Gln Asn Glu Tyr Phe Asp Ser Leu

1 5 10 15

Leu His Ala

<210> 212

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 212

Ser Gly Ser Gly Gln Cys Ser Gln Asn Glu Tyr Phe Asp Ser Leu Leu

1 5 10 15

His Ala Cys

<210> 213

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 213

Ser Gly Ser Gly Cys Ser Gln Asn Glu Tyr Phe Asp Ser Leu Leu His

1 5 10 15

Ala Cys Ile

<210> 214

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 214

Ser Gly Ser Gly Ser Gln Asn Glu Tyr Phe Asp Ser Leu Leu His Ala

1 5 10 15

Cys Ile Pro

<210> 215

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 215

Ser Gly Ser Gly Gln Asn Glu Tyr Phe Asp Ser Leu Leu His Ala Cys

1 5 10 15

Ile Pro Cys

<210> 216

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 216

Ser Gly Ser Gly Asn Glu Tyr Phe Asp Ser Leu Leu His Ala Cys Ile

1 5 10 15

Pro Cys Gln

<210> 217

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 217

Ser Gly Ser Gly Glu Tyr Phe Asp Ser Leu Leu His Ala Cys Ile Pro

1 5 10 15

Cys Gln Leu

<210> 218

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 218

Ser Gly Ser Gly Tyr Phe Asp Ser Leu Leu His Ala Cys Ile Pro Cys

1 5 10 15

Gln Leu Arg

<210> 219

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 219

Ser Gly Ser Gly Phe Asp Ser Leu Leu His Ala Cys Ile Pro Cys Gln

1 5 10 15

Leu Arg Cys

<210> 220

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 220

Ser Gly Ser Gly Asp Ser Leu Leu His Ala Cys Ile Pro Cys Gln Leu

1 5 10 15

Arg Cys Ser

<210> 221

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 221

Ser Gly Ser Gly Ser Leu Leu His Ala Cys Ile Pro Cys Gln Leu Arg

1 5 10 15

Cys Ser Ser

<210> 222

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 222

Ser Gly Ser Gly Leu Leu His Ala Cys Ile Pro Cys Gln Leu Arg Cys

1 5 10 15

Ser Ser Asn

<210> 223

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 223

Ser Gly Ser Gly Leu His Ala Cys Ile Pro Cys Gln Leu Arg Cys Ser

1 5 10 15

Ser Asn Thr

<210> 224

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 224

Ser Gly Ser Gly His Ala Cys Ile Pro Cys Gln Leu Arg Cys Ser Ser

1 5 10 15

Asn Thr Pro

<210> 225

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 225

Ser Gly Ser Gly Ala Cys Ile Pro Cys Gln Leu Arg Cys Ser Ser Asn

1 5 10 15

Thr Pro Pro

<210> 226

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 226

Ser Gly Ser Gly Cys Ile Pro Cys Gln Leu Arg Cys Ser Ser Asn Thr

1 5 10 15

Pro Pro Leu

<210> 227

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 227

Ser Gly Ser Gly Ile Pro Cys Gln Leu Arg Cys Ser Ser Asn Thr Pro

1 5 10 15

Pro Leu Thr

<210> 228

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 228

Ser Gly Ser Gly Pro Cys Gln Leu Arg Cys Ser Ser Asn Thr Pro Pro

1 5 10 15

Leu Thr Cys

<210> 229

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 229

Ser Gly Ser Gly Cys Gln Leu Arg Cys Ser Ser Asn Thr Pro Pro Leu

1 5 10 15

Thr Cys Gln

<210> 230

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 230

Ser Gly Ser Gly Gln Leu Arg Cys Ser Ser Asn Thr Pro Pro Leu Thr

1 5 10 15

Cys Gln Arg

<210> 231

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 231

Ser Gly Ser Gly Leu Arg Cys Ser Ser Asn Thr Pro Pro Leu Thr Cys

1 5 10 15

Gln Arg Tyr

<210> 232

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 232

Ser Gly Ser Gly Arg Cys Ser Ser Asn Thr Pro Pro Leu Thr Cys Gln

1 5 10 15

Arg Tyr Cys

<210> 233

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 233

Ser Gly Ser Gly Cys Ser Ser Asn Thr Pro Pro Leu Thr Cys Gln Arg

1 5 10 15

Tyr Cys Asn

<210> 234

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 234

Ser Gly Ser Gly Ser Ser Asn Thr Pro Pro Leu Thr Cys Gln Arg Tyr

1 5 10 15

Cys Asn Ala

<210> 235

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 235

Ser Gly Ser Gly Ser Asn Thr Pro Pro Leu Thr Cys Gln Arg Tyr Cys

1 5 10 15

Asn Ala Ser

<210> 236

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 236

Ser Gly Ser Gly Asn Thr Pro Pro Leu Thr Cys Gln Arg Tyr Cys Asn

1 5 10 15

Ala Ser Val

<210> 237

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 237

Ser Gly Ser Gly Thr Pro Pro Leu Thr Cys Gln Arg Tyr Cys Asn Ala

1 5 10 15

Ser Val Thr

<210> 238

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 238

Ser Gly Ser Gly Pro Pro Leu Thr Cys Gln Arg Tyr Cys Asn Ala Ser

1 5 10 15

Val Thr Asn

<210> 239

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 239

Ser Gly Ser Gly Pro Leu Thr Cys Gln Arg Tyr Cys Asn Ala Ser Val

1 5 10 15

Thr Asn Ser

<210> 240

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 240

Ser Gly Ser Gly Leu Thr Cys Gln Arg Tyr Cys Asn Ala Ser Val Thr

1 5 10 15

Asn Ser Val

<210> 241

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 241

Ser Gly Ser Gly Thr Cys Gln Arg Tyr Cys Asn Ala Ser Val Thr Asn

1 5 10 15

Ser Val Lys

<210> 242

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 242

Ser Gly Ser Gly Cys Gln Arg Tyr Cys Asn Ala Ser Val Thr Asn Ser

1 5 10 15

Val Lys Gly

<210> 243

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 243

Ser Gly Ser Gly Gln Arg Tyr Cys Asn Ala Ser Val Thr Asn Ser Val

1 5 10 15

Lys Gly Thr

<210> 244

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 244

Ser Gly Ser Gly Arg Tyr Cys Asn Ala Ser Val Thr Asn Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly Thr Asn

<210> 245

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 245

Ser Gly Ser Gly Tyr Cys Asn Ala Ser Val Thr Asn Ser Val Lys Gly

1 5 10 15

Thr Asn Ala

<210> 246

<211> 25

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 246

Thr Ser Gly Gln Ala Gly Gln His His His His His His Gly Ala Tyr

1 5 10 15

Pro Tyr Asp Val Pro Asp Tyr Ala Ser

20 25

<210> 247

<211> 75

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

олигонуклеотид

<400> 247

actagtggcc aggccggcca gcaccatcac catcaccatg gcgcataccc gtacgacgtt 60

ccggactacg cttct 75

<210> 248

<211> 4

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: Синтетический

пептид

<400> 248

Ser Gly Ser Gly

1

<210> 249

<211> 53

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 249

Leu Gln Met Ala Gly Gln Cys Ser Gln Asn Glu Tyr Phe Asp Ser Leu

1 5 10 15

Leu His Ala Cys Ile Pro Cys Gln Leu Arg Cys Ser Ser Asn Thr Pro

20 25 30

Pro Leu Thr Cys Gln Arg Tyr Cys Asn Ala Ser Val Thr Asn Ser Val

35 40 45

Lys Gly Thr Asn Ala

50

<---

Похожие патенты RU2766094C2

название год авторы номер документа
ХИМЕРНЫЕ АНТИГЕННЫЕ РЕЦЕПТОРЫ, НАЦЕЛЕННЫЕ НА АНТИГЕН СОЗРЕВАНИЯ В-КЛЕТОК, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ 2015
  • Брентдженс Ренье Дж.
  • Смит Эрик Л.
  • Лю Чэн
 RU2761632C2
БЕЛКИ, СВЯЗЫВАЮЩИЕ ВСМА, NKG2D И CD16 2018
  • Чан, Грегори, П.
  • Чеунг, Энн, Ф.
  • Хани, Уилльям
  • Лунде, Брэдли, М.
  • Принц, Бьянка
 RU2805254C2
ЛЕЧЕНИЕ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО НОВООБРАЗОВАНИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ГУМАНИЗИРОВАННОГО ХИМЕРНОГО АНТИГЕННОГО РЕЦЕПТОРА ПРОТИВ ВСМА 2015
  • Брогдон Дженнифер
  • Чой Юджин
  • Эберсбах Хилмар
  • Гласс Дэвид
  • Хют Хитер
  • Джун Карл Х.
  • Манник Джоан
  • Майлон Майкл С.
  • Мерфи Леон
  • Плиса Габриэла
  • Ричардсон Селеста
  • Руелла Марко
  • Сингх Решма
  • Ван Юнцян
  • У Цилун
 RU2751660C2
АНТИ-BCMA АНТИТЕЛА, СОДЕРЖАЩИЕ ТОЛЬКО ТЯЖЁЛУЮ ЦЕПЬ 2017
  • Альдред, Шелли Форс
  • Тринклайн, Натан
  • Харрис, Кэтрин Э.
  • Дэнг, Кевин
  • Ван Схотен, Вим
 RU2781301C2
МОЛЕКУЛЫ АНТИТЕЛ ПРОТИВ APRIL И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ 2016
  • Майетт Джеймс Р.
  • Шрайвер Захари Холмс
  • Венкатакришнан Картхик
  • Уоллекотт Эндрю М.
  • Адари-Холл Хеди
  • Рамакришнан Боопати
  • Бэбкок Грегори
 RU2793755C2
ГУМАНИЗИРОВАННОЕ АНТИТЕЛО К BCMA И BCMA-CAR-T-КЛЕТКИ 2020
  • У, Лицзюн
  • Голубовская, Вита
 RU2762942C1
Антитело к BCMA, его антигенсвязывающий фрагмент и их медицинское применение 2020
  • Хуа Хайцин
  • Бао Жуди
 RU2819660C2
АНТИТЕЛО, НАЦЕЛЕННОЕ НА ВСМА, И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ 2018
  • Ван, Пэн
  • Ван, Хуамао
  • Цзян, Хуа
 RU2799655C2
ГУМАНИЗИРОВАННОЕ АНТИТЕЛО К BCMA И BCMA-CAR-NK-КЛЕТКИ 2020
  • У, Лицзюн
  • Голубовская, Вита
 RU2795443C2
ОЧИСТКА АНТИТЕЛ 2019
  • Искра, Тимоти
  • Сакрамо, Эшли Маргарет
 RU2812161C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 766 094 C2

Реферат патента 2022 года АНТИТЕЛА, НАЦЕЛЕННЫЕ НА АНТИГЕН СОЗРЕВАНИЯ В-КЛЕТОК, И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложены антитела против антигена созревания В-клеток (ВСМА) или их антигенсвязывающие фрагменты, композиции для лечения злокачественных опухолей, иммуноконъюгат, биспецифическая молекула. Также рассмотрена молекула нуклеиновой кислоты, вектор экспрессии, клетка-хозяин, способ детекции ВСМА. Кроме того, предложены способ лечения опухоли, применение анти-ВСМА антитела, набор для лечения опухоли. Данное изобретение может найти дальнейшее применение в терапии опухолей, связанных с экспрессией антигена созревания В-клеток (ВСМА). 14 н. и 18 з.п. ф-лы, 20 табл., 10 ил., 5 пр.

Формула изобретения RU 2 766 094 C2

1. Антитело против антигена созревания B-клеток (BCMA), или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащее:

(a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 65, и вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 66;

(b) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 53, и вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 54;

(c) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 21, и вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 22;

(d) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 57, и вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 58; или

(e) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 последовательности вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO: 61, и вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, CDR2 и CDR3 последовательности вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO: 62.

2. Антитело против антигена созревания B-клеток (BCMA), или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащее:

(a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 185, CDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 186, и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 187; и вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 188, CDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 189, и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность 190;

(b) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 167, CDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 168, и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 169; и вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 170, CDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 171, и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность 172;

(с) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 119, CDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 120, и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 121; и вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 122, CDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 123, и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность 124;

(d) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 173, CDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 174, и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 175; и вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 176, CDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 177, и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность 178; или

(e) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую CDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 179, CDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 180, и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 181; и вариабельную область легкой цепи, содержащую CDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 182, CDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 183, и CDR3, содержащую аминокислотную последовательность 184.

3. Анти-BCMA антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по п.1 или 2, где:

(a) вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на около 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 65;

(b) вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на около 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 53;

(с) вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на около 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 21;

(d) вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на около 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 57; или

(e) вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на около 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 61.

4. Анти-ВСМА антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-3, где:

(a) вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на около 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 66;

(b) вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на около 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 54;

(с) вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на около 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 22;

(d) вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на около 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 58; или

(e) вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на около 90% идентична аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 62.

5. Анти-ВСМА антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-4, где:

(a) вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 65 и вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66;

(b) вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 53 и вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 54;

(с) вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21 и вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22;

(d) вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57 и вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 58; или

(e) вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 61 и вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 62.

6. Анти-ВСМА антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-5, где антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, связывается с BCMA человека, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 71.

7. Анти-ВСМА антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-6, где антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, связывается с ВСМА человека с константой диссоциации (КD) от примерно 1х10-9 М до примерно 1х10-8 М.

8. Анти-ВСМА антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-7, где антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит каркасную область вариабельной области человека.

9. Анти-ВСМА антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-8, который является полностью человеческим антителом, или его антигенсвязывающим фрагментом.

10. Анти-ВСМА антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-8, которое представляет собой химерное или гуманизированное антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент.

11. Анти-ВСМА антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-10, где антигенсвязывающий фрагмент антитела представляет собой антигенсвязывающий фрагмент (Fab), Fab', F(ab')2, вариабельный фрагмент (Fv) или одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv).

12. Анти-ВСМА антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-11, где антигенсвязывающий фрагмент представляет собой scFv, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 77, SEQ ID NO: 85, SEQ ID NO: 86, SEQ ID NO: 87 или SEQ ID NO: 88.

13. Композиция для лечения злокачественной опухоли, связанной с экспрессией антигена созревания B-клеток (ВСМА), содержащая эффективное количество анти-ВСМА антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, по любому из пп.1-12 и фармацевтически приемлемый носитель.

14. Иммуноконъюгат для лечения злокачественной опухоли, связанной с экспрессией антигена созревания В-клеток (ВСМА), содержащий анти-ВСМА антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-12, связанное с терапевтическим средством.

15. Иммуноконъюгат по п.14, где указанное терапевтическое средство представляет собой лекарственное средство, цитотоксин или радиоактивный изотоп.

16. Композиция для лечения злокачественной опухоли, связанной с экспрессией антигена созревания В-клеток (ВСМА), содержащая эффективное количество иммуноконъюгата по п.14 или 15 и фармацевтически приемлемый носитель.

17. Биспецифическая молекула для лечения злокачественной опухоли, связанной с экспрессией антигена созревания В-клеток (ВСМА), содержащая анти-ВСМА антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-12, связанное со второй функциональной частью, где

вторая функциональная часть выбрана из группы, состоящей из антитела, фрагмента антитела, пептида и связывающегося миметика, и

вторая функциональная часть обладает специфичностью связывания с иммунной клеткой.

18. Биспецифическая молекула п.17, где вторая функциональная часть специфично связывается с CD3.

19. Композиция для лечения опухоли, связанной с экспрессией антигена созревания В-клеток (ВСМА), содержащая эффективное количество биспецифической молекулы по п.17 или 18 и фармацевтически приемлемый носитель.

20. Молекула нуклеиновой кислоты, которая кодирует анти-ВСМА антитело или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-12.

21. Вектор экспрессии, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п.20.

22. Клетка-хозяин для экспрессии антитела против антигена созревания В-клеток (ВСМА), или его антигенсвязывающего фрагмента, содержащая вектор экспрессии по п.21.

23. Способ детекции антигена созревания В-клетки (ВCMA) в цельной клетке или ткани, включающий:

приведение клетки или ткани в контакт с анти-ВСМА антителом, или его антигенсвязывающим фрагментом, по любому из пп.1-12, где антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит обнаруживаемую метку; и

определение количества меченого антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, связанного с клеткой или тканью, путем измерения количества обнаруживаемой метки, связанной с клеткой или тканью, где количество связанного антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, указывает на количество BCMA в клетке или ткани.

24. Способ лечения опухоли, связанной с экспрессией антигена созревания В-клеток (ВСМА), у пациента, включающий введение пациенту эффективного количества анти-ВСМА антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, по любому из пп.1-12.

25. Способ по п.24, где опухоль выбрана из группы, состоящей из множественной миеломы, неходжкинской лимфомы, лимфомы Ходжкина, хронического лимфолейкоза (CLL), глиобластомы и макроглобулинемии Вальденстрема.

26. Способ по п.25, где опухолью является множественная миелома.

27. Способ по любому из пп.24-26, где пациентом является человек.

28. Применение анти-ВСМА антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, по любому из пп.1-12 для получения лекарственного средства для лечения опухоли, связанной с экспрессией антигена созревания В-клеток (ВСМА), у пациента.

29. Применение п.28, где опухоль выбрана из группы, состоящей из множественной миеломы, неходжкинской лимфомы, лимфомы Ходжкина, хронического лимфолейкоза (CLL), глиобластомы и макроглобулинемии Вальденстрема.

30. Применение по п.29, где опухолью является множественная миелома.

31. Применение по любому из пп.28-30, где пациентом является человек.

32. Набор для лечения опухоли, связанной с экспрессией антигена созревания В-клеток (ВСМА), содержащий анти-ВСМА антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент, по любому из пп.1-12 и письменные инструкции по применению антитела, или его антигенсвязывающего фрагмента, для лечения индивида с опухолью.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2022 года RU2766094C2

Способ защиты переносных электрических установок от опасностей, связанных с заземлением одной из фаз 1924
  • Подольский Л.П.
 SU2014A1
Приспособление для суммирования отрезков прямых линий 1923
  • Иванцов Г.П.
 SU2010A1
Способ приготовления лака 1924
  • Петров Г.С.
 SU2011A1
RYAN M.C
et al
"Antibody targeting of B-cell maturation antigen on malignant plasma cells", Mol Cancer Ther 2007, Vol
Приспособление для точного наложения листов бумаги при снятии оттисков 1922
  • Асафов Н.И.
 SU6A1
ПРИСПОСОБЛЕНИЕ К КАРДОЧЕСАЛЬНОЙ МАШИНЕ ДЛЯ ПЕРЕДАЧИ ПРОЧЕСА ОТ БАРАБАНА К ВАЛЬЯНУ 1925
  • Иенкина И.М.
 SU3009A1
НАСОНОВ Е.Л
"Белимумаб: прогресс в лечении системной красной волчанки", Науч-практич
ревматол., 2012, 54(5),

RU 2 766 094 C2

Авторы

Брентдженс, Ренье, Дж.

Смит, Эрик, Л.

Лю, Чэн

Даты

2022-02-07—Публикация

2015-12-04—Подача

download Скачать PDF read Похожие патенты