Способ получения биосовместимых висмут-апатитов Российский патент 2022 года по МПК C01B25/455 C01B25/45 A61K6/838 A61L27/12 

Изобретение относится к неорганической химии, касается способа получения биосовместимых висмут-апатитов, которое может быть использован в медицине, в том числе в стоматологии, для производства медицинских керамических материалов, стимулирующих восстановление дефектов костной ткани, а также обеспечивающих защиту от развития бактериальных инфекций.

Одним из самых серьезных последствий хирургического вмешательства является возникновение перипротезной инфекции. Перипротезная инфекция (ППИ) представляет собой одну из наиболее серьезных и часто встречающихся последствий операций по замене суставов. Перипротезная инфекция является второй по частоте причиной ревизии эндопротезов тазобедренного и коленных суставов. Частота ППИ составляет около 1% после первичных вмешательств и возрастает до 10% после ревизионных операций. Причиной развития данного осложнения в большинстве случаев является интраоперационное инфицирование, реже - гематогенное.

Использование антибактериального агента в составе материала имплантатов позволит минимизировать риск возникновения инфекций после оперативного вмешательства и, соответственно, снизить вероятность вторичной операции. Использование висмута, включенного в кристаллическую структуру материала имплантата, позволит увеличить срок антимикробного эффекта от такого материала, при этом не вызывая негативных последствий для организма в целом в виду прочному химическому связыванию висмута в кристаллической решетке. Таким образом, ожидается использование описываемого подхода для получения веществ, на основе которых будут создаваться керамические биоматериалы или покрытия металлических биоматериалов.

Известен состав для пломбирования зубов и цементирования зубных протезов (RU 2097015 C1, кл. А61К 6/06, опубл. 27.11.1997), включающем шихту, содержащую белила цинковые, окись магния, окись висмута, песок кварцевый, молибдат аммония. Согласно изобретению, шихта дополнительно содержит гидроксид кальция и фторид натрия при следующем соотношении компонентов, мас.%: окись магния 9,40 - 10,00; окись висмута 2,00 - 4,00; песок кварцевый 3,00 - 3,50; молибдат аммония 2,40 - 3,50; гидроксид кальция 0,10 - 0,50; фторид натрия 0,10 - 0,50; белила цинковые - остальное. В результате спекания шихты, частицы введенных гидроксида кальция Ca(OH)₂ и фторида натрия NaF насыщают до нужных пределов оксид молибдена, который остается после сгорания аммония и воды. Полученные комплексы молибдена образуют длинные полимерно-неорганические цепи, которые обогащают шихту материала необходимым свойством, воздействующим на регенерацию поврежденных твердых тканей зуба дентин и эмаль. Компоненты шихты подвергают обжигу при температуре 980-1000°C в течение 16-18 ч, расплав охлаждают в проточной воде и измельчают в шаровой мельнице до определенного размера частиц (30 10 мкм). Полученную порошковую фракцию состава просеивают и фасуют. Изобретение обеспечивает придание материалу регенеративных свойств при сохранении высоких физико-механических показателей. В данном изобретении не указан фазовый состав конечного продукта. Кроме того, введение оксида висмута, как и ряда других добавок, осуществляется с целью придания материалу регенеративных свойств при сохранении высоких физико-механических показателей.

В способе получения микрогранул на основе гидроксиапатита кальция (RU 2002128981 A, С01В 21/32, опубл. 10.06.2004) используют смешивание гидроксида кальция и монозамещенного фосфата кальция, моногидрата, в мольном соотношении Са/Р=1,67, добавлении к этой смеси водного раствора, содержащего гидрогель с концентрацией полимера 0,01-10,0 мас.%, перемешивании данных веществ при температуре 20-41°С при нейтральном значении рН 6,8-7,2 с последующем фильтрованием и высушиванием осажденного конечного продукта в виде микрогранул при температуре 105-160°С. В данном случае в качестве неорганического вещества для медицинских целей получают гидроксиапатит, но в качестве антимикробного агента используют органические вещества - алкилрезорцинолы.

Наиболее близким к предлагаемому изобретению является способ получения катионзамещенного фосфата кальция, защищенный патентом RU 2607743 C1, кл. С01В 21/32, С01F11/00, C01F1/00, D82B3/00, опубл. 10.01.2017, принятый за ближайший аналог (прототип).

В способе по прототипу катионзамещенный трикальцийфосфат получают путем осаждения средних фосфатов кальция, образующихся при сливании и постоянном перемешивании водных растворов нитрата кальция и двухзамещенного фосфата аммония, взятых в мольном соотношении 3:2, при рН 7,0, с последующим фильтрованием образовавшегося осадка и его термической обработкой при температурах 700-1300°C. Согласно изобретению к реакционной смеси добавляют рассчитанное количество растворов солей нитратов, или ацетатов, или хлоридов следующих элементов: железа, цинка, меди, натрия, калия, стронция, бария, висмута, кремния, при следующем соотношении реагентов, мол.%:

нитрат кальция - 40-59,9,

двухзамещенный фосфат аммония - 40,

соль железа, цинка, меди, натрия, калия, стронция, бария, висмута, кремния - 0,1-20.

Образующиеся после термической обработки при 700-1300°C порошки характеризуются однородным фазовым составом, соответствующим структуре витлокита, высокодисперсным состоянием с размером частиц от 20 нм до 2 мкм и антимикробной активностью.

В данном случае используется внедрение висмута в кристаллическую структуру сложного фосфата, подобного по кристаллической структуре рассматриваемым апатитам.

Недостатком данного способа является формирование фосфата кальция, отличного по кристаллической структуре от материала костной ткани (гидроксиапатита), и отсутствие висмута в конечном продукте.

В задачу изобретения положено создание нового способа получения биосовместимых висмут-апатитов.

Техническим результатом от использования предлагаемого изобретения является упрощение изготовления, сокращение времени производства.

Это достигается тем, что способ получения биосовместимых висмут-апатитов состава Ca_10-2xBi_xNa_x(PO₄)₆F₂, где x=1,2,3,4, включает помещение в алундовый тигель стехиометричной смеси четырехводного нитрата кальция, пятиводного нитрата висмута, нитрата натрия, гидрофосфата диаммония и фторида аммония, после чего тигель помещают в муфельную печь с закрытой спиралью и нагревают до температуры 300-350°С со скоростью 3-5 град/мин до окончания дегидратации исходных кристаллогидратов и термического разложения используемых реагентов, затем тигель охлаждают до комнатной температуры и шихту диспергируют в агатовой ступке с использованием этилового спирта для создания дополнительного расклинивающего давления, полученный монодисперсный порошок помещают в тигель и прокаливают до 600-670°С со скоростью 5-7 град/мин с диспергированием каждый час в течение 10 минут, далее смесь прокаливается в алундовом тигле при температуре 950-1100°С в течение 7-9 часов; стехиометричную смесь гомогенизируют путем диспергирования в агатовой ступке в течение 10 минут и прокаливанием при температурах 300-350 и 950-1100°С; используют алундовый тигель формы «стакан» или формы «лодочка».

На фиг. 1. представлены порошковые рентгенограммы полученных веществ состава Ca_10-2xBi_xNa_x(PO₄)₆F₂ , где x = 1,2,3,4.

На фиг. 2. представлены АСМ фотография и спектр поверхности образца Ca₈BiNa(PO₄)₆F₂.

Предлагаемый способ получения висмут-апатитов осуществляют следующим образом.

Способ получения висмут-содержащего апатита подразумевает проведение химической реакции в твердой фазе. Для этого берут стехиометричные соотношения четырехводного нитрата кальция, пятиводного нитрата висмута, нитрата натрия, гидрофосфата диаммония и фторида аммония. Смесь гомогенизируют путем диспергирования в агатовой ступке в течение 10 минут. Затем полученную смесь помещают в алундовый тигель и подвергают ступенчатому нагреванию в муфельной печи в интервале температур от 25 до 1100°С с диспергированием шихты каждые 10 минут или 2 часа в зависимости от температурного режима.

На одну массовую часть фторида аммония берут 10.70 мас. частей гидрофосфата аммония, 1.15x частей нитрата натрия, 6.55х мас. частей пятиводного нитрата висмута, 3,19⋅(10-2х) мас. частей четырехводного нитрата кальция (х может принимать целые и дробные значения в интервале от 1 до 5).

Процесс синтеза можно описать следующим уравнением химической реакции:

(10-2x) Ca(NO₃)₂⋅4H₂O + x Bi(NO₃)₃⋅5H₂O + x NaNO₃ + 6 (NH₄)₂HPO₄ + 2 NH₄F →

→ Ca_10-2xBi_xNa_x(PO₄)6F₂ + (50-3x) H₂O + 14 NH₃ + 20 NO₂ + 5O₂

Контроль полноты протекания химической реакции осуществляют методом порошковой рентгенографии. Характерные виды полученных дифрактограмм представлены на фиг. 1.

Дополнительный контроль элементного состава осуществляют методом зондовой микроскопии. На фиг. 2 представлен спектр и микрофотография участка поверхности одного из полученных образцов.

Для оценки цитотоксичности материала использовали стандартный МТТ - тест. В качестве тестовой культуры использовали культуру дермальных фибробластов человека 4-5 пассажа. Культура был стерильна, микоплазмами и вирусами не контаминирована. Жизнеспособность клеток в культуре перед вводом в эксперимент составляла 97%. Относительную интенсивность роста клеток (ОИР) определяли по следующей формуле:

ОИР (%) = (средняя ОП в тестовой культуре - 100) / (средняя ОП в контроле),

где ОП - оптическая плотность

Полученные данные оценивали, ориентируясь на ранговую шкалу оценки цитотоксичности. Результаты представлены в табл. 1

В качестве контроля используется та же клеточная культура, но без добавления каких-либо дополнительных веществ.

Таблица 1

Оценка цитотоксичности материалов (экстракция 7 сутки) Ca_10-2xBi_xNa_x(PO₄)₆F_2,

где x = 1,2,3,4.

Материал х 1 2 3 4 Контроль
(n=8) ОП(М±m) 0,210±0,026 0,242±0,025 0,257±0,053 0,251±0,041 ОИР, % 100 100 100 100 Уровень цитотоксичности 0 0 0 0 Экстракт
(n=8) ОП(М±m) 0,246±0,045 0,227±0,033 0,319±0,044 0,261± 0,038 ОИР, % 117 94 124 102 Уровень цитотоксичности 0 0 0 0 Экстракт 1:1
(n=8) ОП(М±m) 0,279±0,027 0,284±0,019 0,297±0,035 0,300±0,036 ОИР, % 133 117 116 120 Уровень цитотоксичности 0 0 0 0 Экстракт 1:2
(n=8) ОП(М±m) 0,249±0,026 0,290±0,019 0,293±0,031 0,307±0,034 ОИР, % 119 120 114 122 Уровень цитотоксичности 0 0 0 0 Экстракт 1:3
(n=8) ОП(М±m) 0,261±0, 021 0,260±0,03 0,254±0,023 0,271±0,043 ОИР, % 124 107 99 108 Уровень цитотоксичности 0 0 1 0 Экстракт 1:4
(n=8) ОП(М±m) 0,243±0,008 0,343±0,035 0,272±0,027 0,240±0,020 ОИР, % 115 142 106 96 Уровень цитотоксичности 0 0 0 1

Примечание: *р<0,05 критерий Вилкоксона

Таким образом, полученные данные демонстрируют отсутствие цитотоксичности всех исследованных образцов материалов, т.к. во всех сериях ранг цитотоксичности составляет 0 - 1.

Использование матрицы в виде кристаллохимического аналога нативной костной ткани человека обеспечит совместимость материала на основе описываемого вещества с костной тканью при имплантации. Модификация исходного апатита ионам натрия необходима для улучшения свойств остеогенеза материала, фтора - для возможности использования в стоматологии и придания стабильности материалe в химически активной среде организма человека, висмута - для обеспечения антимикробной активности.

Использовании нитратов кальция и висмута вместо оксидов соответствующих элементов позволяет значительно ускорить процесс получения целевого продукта за счет формирования мелкодисперсных соответствующих оксидов с высокой степенью дефектности кристаллической структуры непосредственно в реакционной среде.

Ниже представлены примеры конкретного осуществления предлагаемого изобретения.

Пример 1.

В алундовый тигель формы «стакан» размерами 55 мм х 42 мм помещали 1.4605 г четырехводного нитрата кальция, 1,0000 г пятиводного нитрата висмута, 0,1752 г нитрата натрия, 0,8167 г гидрофосфата диаммония и 0,0764 г фторида аммония. Тигель помещали в муфельную печь с закрытой спиралью и нагревали до температуры 300-350°С со скоростью 3-5 град/мин. Затем тигель охлаждали до комнатной температуры и шихту диспергировали в агатовой ступке с использованием этилового спирта для создания дополнительного расклинивающего давления. Полученный монодисперсный порошок помещали в тигель и нагревали до 600-670°С со скоростью 5-7 град/мин с диспергированием каждый час в течение 10 минут. Далее смесь прокаливается в алундовом тигле при температуре 950-1100°С в течение 7-9 часов.

Пример 2.

Получение висмут-апатита осуществляют аналогично примеру 1, только вместо тигля стандартной формы используют тигель формы «лодочка», что позволяет увеличить площадь соприкосновения реакционной шихты с атмосферой для более простого отвода газообразных продуктов реакции. Полученные висмут-апатиты характеризуются одинаковой степенью чистоты и морфологией поверхности, что свидетельствует об отсутствии влияния формы и объема тигля для проведения реакции с указанными количествами веществ.

Изобретение относится к неорганической химии и касается способа получения биосовместимых висмут-апатитов состава Ca_10-2xBi_xNa_x(PO₄)₆F₂, где x=1, 2, 3, 4, которые могут быть использованы в медицине, в том числе в стоматологии, для производства медицинских керамических материалов, стимулирующих восстановление дефектов костной ткани, а также обеспечивающих защиту от развития бактериальных инфекций. Способ включает помещение в алундовый тигель стехиометричной смеси четырехводного нитрата кальция, пятиводного нитрата висмута, нитрата натрия, гидрофосфата диаммония и фторида аммония, после чего тигель помещают в муфельную печь с закрытой спиралью и нагревают до температуры 300-350°С со скоростью 3-5 град./мин до окончания дегидратации исходных кристаллогидратов и термического разложения используемых реагентов. Затем тигель охлаждают до комнатной температуры и шихту диспергируют в агатовой ступке с использованием этилового спирта для создания дополнительного расклинивающего давления. Полученный монодисперсный порошок помещают в тигель и прокаливают до 600-670°С со скоростью 5-7 град./мин с диспергированием каждый час в течение 10 минут. Далее смесь прокаливают в алундовом тигле при температуре 950-1100°С в течение 7-9 часов. Техническим результатом предлагаемого изобретения является упрощение изготовления висмут-апатитов и сокращение времени производства. 2 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 2 пр.

1. Способ получения биосовместимых висмут-апатитов состава Ca_10-2xBi_xNa_x(PO₄)₆F₂, где x=1, 2, 3, 4, включающий помещение в алундовый тигель стехиометричной смеси четырехводного нитрата кальция, пятиводного нитрата висмута, нитрата натрия, гидрофосфата диаммония и фторида аммония, после чего тигель помещают в муфельную печь с закрытой спиралью и нагревают до температуры 300-350°С со скоростью 3-5 град./мин до окончания дегидратации исходных кристаллогидратов и термического разложения используемых реагентов, затем тигель охлаждают до комнатной температуры и шихту диспергируют в агатовой ступке с использованием этилового спирта для создания дополнительного расклинивающего давления, полученный монодисперсный порошок помещают в тигель и прокаливают до 600-670°С со скоростью 5-7 град./мин с диспергированием каждый час в течение 10 минут, далее смесь прокаливается в алундовом тигле при температуре 950-1100°С в течение 7-9 часов.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что стехиометричную смесь гомогенизируют путем диспергирования в агатовой ступке в течение 10 минут и прокаливанием при температурах 300-350°С и 950-1100°С.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют алундовый тигель формы «стакан» или формы «лодочка».