МОЛЕКУЛЫ АНТИТЕЛ К CD73 И ПУТИ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ Российский патент 2023 года по МПК C07K16/28 A61K39/395 G01N33/68 A61P35/00 

РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

Настоящая заявка испрашивает приоритет по заявке на патент США с порядковым № 62/523481, поданной 22 июня 2017 года, и заявке на патент США с порядковым № 62/636510, поданной 28 февраля 2018 года, содержание которых тем самым включено посредством ссылки во всей своей полноте.

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

Настоящая заявка содержит перечень последовательностей, который был подан в электронном виде в формате ASCII и включен в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. Указанная копия в формате ASCII, созданная 15 июня 2018 года, имеет название N2067-7123WO_SL.txt и размер 497959 байтов.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Кластер дифференцировки 73 (CD73), также известный как экто-5'-нуклеотидаза (экто-5'NT), представляет собой гликозил-фосфатидилинозитол (GPI)-связанный фермент клеточной поверхности, присутствующий в большинстве тканей и, в частности, экспрессируемый в эндотелиальных клетках и подгруппах гематопоэтических клеток (Resta et al., Immunol Rev161:95-109 (1998) и Colgan et al., Prinergic Signal 2:351-60 (2006)). CD73 катализирует превращение аденозинмонофосфата (AMP) в аденозин. Аденозин является сигнальной молекулой, которая опосредует свои биологические эффекты с помощью нескольких рецепторов, в том числе рецепторов аденозина А1, А2А, А2В и А3. Рецептор A2A получил особое внимание из-за его обширной экспрессии на иммунных клетках. Аденозин характеризуется плейотропными эффектами в микроокружении опухоли, в том числе экспансией регуляторных Т-клеток (Tregs), ингибированием ответов эффекторных Т-клеток (Teff), опосредованных интерфероном (IFN)-γ, и экспансией супрессорных клеток миелоидного происхождения (MDSC). См., например, Allard B, et al., Curr Opin Pharmacol 29:7-16 (2016) и Allard D, et al., Immunotherapy 8:145-163 (2016).

CD73 также экспрессируется на раковых клетках, в том числе в случае рака толстой кишки, легкого, поджелудочной железы, яичника, мочевого пузыря, в случае лейкоза, глиомы, глиобластомы, меланомы, рака щитовидной железы, пищевода, простаты и молочной железы (Jin et al., Cancer Res 70:2245-55 (2010 ) и Stagg et al., PNAS 107: 1547-52 (2010); Zhang et al., Cancer Res 70:6407-11 (2010)). Сообщалось, что высокий уровень экспрессии CD73 коррелирует с неблагоприятным исходом при различных проявлениях рака, таких как рак легкого, меланома, трижды негативный рак молочной железы, плоскоклеточный рак головы и шеи и колоректальный рак. См., например, Allard B, et al., Expert Opin Ther Targets 18:863-881 (2014); Leclerc BG, et al., Clin Cancer Res 22:158-166 (2016); Ren ZH, et al., Oncotarget 7:61690-61702 (2016); Ren ZH, et al., Oncol Lett 12:556-562 (2016); и Turcotte M, et al., Cancer Res 75:4494-4503 (2015).

С учетом постоянной потребности в улучшенных стратегиях для нацеливания на заболевания, такие как рак, новые композиции и способы для регулирования активности CD73 и связанные с ними терапевтические средства являются весьма желательными.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ

В данном документе раскрыты молекулы антител, которые связываются с CD73 (кластер дифференцировки 73) с высокой аффинностью и специфичностью. Также предусмотрены молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие молекулы антитела, векторы экспрессии, клетки-хозяева и способы получения молекул антитела. Также предусмотрены иммуноконъюгаты, молекулы мульти- или биспецифических антител и фармацевтические композиции, содержащие молекулы антител. Молекулы антитела к CD73, раскрытые в данном документе, можно применять (отдельно или в комбинации с другими средствами или терапевтическими воздействиями) для лечения, предупреждения и/или диагностики нарушений, в том числе иммунологических нарушений и рака. Таким образом, в данном документе раскрыты композиции и способы лечения и/или диагностики различных нарушений, в том числе рака и иммунологических нарушений, с применением молекул антитела к CD73.

Соответственно, в определенных аспектах в настоящем изобретении предусмотрена молекула антитела (например, выделенная или рекомбинантная молекула антитела), характеризующаяся одним или несколькими (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 или более, например, всеми) из следующих свойств:

(i) связывается с CD73, например CD73 человека, с высокой аффинностью, например, с константой диссоциации (K_D), составляющей менее чем приблизительно 100 нМ, например менее чем приблизительно 10 нМ, 1 нМ, 0,1 нМ или 0,01 нМ, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением системы Octet;

(ii) связывается с растворимым CD73 человека или мембраносвязанным CD73 человека или и с тем, и с другим;

(iii) по сути связывается с CD73 приматов, отличных от человека, например с CD73 макака-крабоеда, с константой диссоциации (K_D), составляющей менее чем приблизительно 100 нМ, например менее чем приблизительно 10 нМ, 1 нМ, 0,1 нМ или 0,01 нМ, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением системы Octet;

(iv) не связывается с CD73 мыши, например, при определении с применением системы Octet, например, как описано в примере 1;

(v) ингибирует или уменьшает ферментативную активность CD73 (например, растворимого CD73 человека или мембраносвязанного CD73 человека), например ингибирует опосредованное CD73 человека превращение аденозинмонофосфата (AMP) в аденозин или уменьшает его уровень, что например, измеряют с помощью способа, описанного в данном документе, например, при исследовании молекулы антитела в виде бивалентного антитела с помощью количественного определения фосфата по реакции с малахитовым зеленым (MG) или с помощью модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1;

(vi) увеличивает уровень пролиферации Т-клеток, стимулированных антителом к CD3/антителом к CD28, например Т-клеток CD4+, в присутствии аденозинмонофосфата (AMP), что например, измеряют с помощью описанного в данном документе способа, например, при исследовании молекулы антитела в виде бивалентного антитела в анализе пролиферации клеток CellTrace Violet (CTV), например, как описано в примере 1;

(vii) увеличивает уровень интернализации CD73 человека в клетку при связывании с CD73 человека, экспрессируемым на поверхности клетки, например увеличивает уровень интернализации CD73 человека в клетку в по меньшей мере 1,2 раза, 1,3 раза, 1,4 раза, 1,5 раза, 2 раза, 2,5 раза, 3 раза, 3,5 раза, 4 раза, 4,5 раза, 5 раз, 6 раз, 7 раз, 8 раз, 9 раз, 10 раз, 15 раз, 20 раз, 30 раз, 40 раз, 50 раз, 60 раз, 70 раз, 80 раз, 90 раз или 100 раз.

(viii) связывается с эпитопом на CD73, например таким же или сходным эпитопом, что и эпитоп, распознаваемый молекулой антитела, описанной в данном документе, например молекулой антитела к CD73 человека, описанной в данном документе, например молекулой антитела из таблицы 1;

(ix) связывается с таким же эпитопом (или по сути таким же) или эпитопом, перекрывающимся (или по сути перекрывающимся) с эпитопом второй молекулы антитела к CD73, где вторая молекула антитела представляет собой молекулу антитела, описанную в данном документе, например молекулу антитела, показанную в таблице 1;

(x) ингибирует, например, конкурентно ингибирует, связывание второй молекулы антитела к CD73, где вторая молекула антитела представляет собой молекулу антитела, описанную в данном документе, например, молекулу антитела, показанную в таблице 1;

(xi) характеризуется той же или аналогичной аффинностью или специфичностью связывания, или и тем, и тем, что и молекула антитела, описанная в таблице 1, например молекула антитела, содержащая вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, показанная в таблице 1;

(xii) связывается с N-концевым доменом CD73 человека;

(xiii) связывается с A-петлей и/или B-петлей CD73 человека;

(xiv) уменьшает уровень водородно-дейтериевого обмена по одной или нескольким областям белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при его связывании, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена;

(xv) при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), вызывает конформационное изменение остатков 368-387 из SEQ ID NO: 105;

(xvi) взаимодействует, например прямо или косвенно, с по меньшей мере одним, двумя, тремя или четырьмя остатками в пределах остатков 158-172 из SEQ ID NO: 105;

(xvii) взаимодействует, например прямо или косвенно, с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 206-215 из SEQ ID NO: 105;

(xviii) взаимодействует, например прямо или косвенно, с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 368-387 из SEQ ID NO: 105 или 106;

(xix) взаимодействует, например прямо или косвенно, с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105;

(xx) связывается с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, при этом, если молекула антитела содержит первый антигенсвязывающий домен и второй антигенсвязывающий домен, первый антигенсвязывающий домен связывается с первым мономером CD73 и второй антигенсвязывающий домен связывается со вторым мономером CD73, например, при исследовании с применением эксклюзионной хроматографии;

(xxi) предпочтительно связывается с CD73 в открытой конформации, например в каталитически неактивной конформации, а не с CD73 в закрытой конформации, например в каталитически активной конформации, например не связывается или связывается с CD73 в закрытой конформации, например с CD73 в каталитически активной конформации, с более низкой аффинностью, например с аффинностью, которая ниже на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, или 99%, чем при связывании молекулы антитела с CD73 в открытой конформации, например каталитически неактивной конформации;

(xxii) блокирует CD73 человека в каталитически неактивной открытой конформации;

(xxiii) предотвращает превращение CD73 человека из каталитически неактивной открытой конформации в каталитически активную закрытую конформацию или уменьшает его уровень, например уменьшает уровень превращения в по меньшей мере 1,5 раза, 2 раза, 5 раз, 10 раз, 20 раз, 30 раз, 40 раз, 50 раз, 60 раз, 70 раз, 80 раз, 90 раз или 100 раз;

(xxiv) характеризуется одним или несколькими биологическими свойствами молекулы антитела, описанной в данном документе, например молекулы антитела, показанной в таблице 1;

(xxv) характеризуется одним или несколькими фармакокинетическими свойствами молекулы антитела, описанной в данном документе, например молекулы антитела, показанной в таблице 1;

(xxvi) модулирует (например, ингибирует) один или несколько видов активности CD73, например, приводит к одному или нескольким из следующего: ингибирование или снижение ферментативной активности CD73; ингибирование превращения аденозинмонофосфата (AMP) в аденозин или уменьшение его уровня; увеличение уровня пролиферации Т-клеток, стимулированных антителом к CD3/антителом к CD28, например Т-клеток CD4+, в присутствии аденозинмонофосфата (AMP); ингибирование пролиферации регуляторных Т-клеток; увеличение уровней ответов эффекторных Т-клеток; и/или ингибирование миграции, инфильтрации или размножения супрессорных клеток миелоидного происхождения.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, при этом, если молекула антитела содержит первый антигенсвязывающий домен и второй антигенсвязывающий домен, первый антигенсвязывающий домен связывается с первым мономером CD73 и второй антигенсвязывающий домен связывается со вторым мономером CD73, например, при исследовании с применением эксклюзионной хроматографии. В одном варианте осуществления первый или второй мономер CD73 содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления первый или второй мономер CD73 состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 30%, 35% или 40% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2. В одном варианте осуществления в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 30%, 35% или 40% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии (SEC), предусматривающей следующие стадии:

(i) инкубирование образца, содержащего эквимолярное количество молекулы бивалентного антитела и мономера CD73, в течение ночи при 4°С;

(ii) пропускание образца через колонку для SEC (например, колонку Shodex Protein KW-803 (ID 8×300 мм)) при комнатной температуре в буфере, содержащем 90% 2x PBS и 10% изопропанола по объему; и

(iii) анализ пиков SEC с получением относительных процентных значений различимых видов антитела к CD73 путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела).

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 70%, 75% или 80% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2. В одном варианте осуществления в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 70%, 75% или 80% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии (SEC), предусматривающей следующие стадии:

(i) инкубирование образца, содержащего эквимолярное количество молекулы бивалентного антитела и мономера CD73, в течение ночи при 4°С;

(ii) пропускание образца через колонку для SEC (например, колонку Shodex Protein KW-803 (ID 8×300 мм)) при комнатной температуре в буфере, содержащем 90% 2x PBS и 10% изопропанола по объему; и

(iii) анализ пиков SEC с получением относительных процентных значений различимых видов антитела к CD73 путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела).

В одном аспекте в данном документе раскрыто несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 60%, 65% или 70% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекул антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2. В одном варианте осуществления в данном документе раскрыто несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 60%, 65% или 70% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекулы антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии (SEC), предусматривающей следующие стадии:

(i) инкубирование образца, содержащего эквимолярное количество молекулы бивалентного антитела и мономера CD73, в течение ночи при 4°С;

(ii) пропускание образца через колонку для SEC (например, колонку Shodex Protein KW-803 (ID 8×300 мм)) при комнатной температуре в буфере, содержащем 90% 2x PBS и 10% изопропанола по объему; и

(iii) анализ пиков SEC с получением относительных процентных значений различимых видов антитела к CD73 путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела).

В одном аспекте в данном документе раскрыто несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 20%, 25% или 30% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекул антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2. В одном варианте осуществления в данном документе раскрыто несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 20%, 25% или 30% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекулы антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии (SEC), предусматривающей следующие стадии:

(i) инкубирование образца, содержащего эквимолярное количество молекулы бивалентного антитела и мономера CD73, в течение ночи при 4°С;

(ii) пропускание образца через колонку для SEC (например, колонку Shodex Protein KW-803 (ID 8×300 мм)) при комнатной температуре в буфере, содержащем 90% 2x PBS и 10% изопропанола по объему; и

(iii) анализ пиков SEC с получением относительных процентных значений различимых видов антитела к CD73 путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, при этом молекула антитела предпочтительно связывается с CD73 в открытой конформации, например каталитически неактивной конформации, а не с CD73 в закрытой конформации, например каталитически активной конформации, например не связывает совсем или связывается с CD73 в закрытой конформации, например с CD73 в каталитически активной конформации, с более низкой аффинностью, например с аффинностью, которая ниже на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, или 99%, чем при связывании молекулы антитела с CD73 в открытой конформации, например каталитически неактивной конформации.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где молекула антитела предотвращает превращение CD73 человека из каталитически неактивной открытой конформации в каталитически активную закрытую конформацию или уменьшает его уровень, например уменьшает уровень превращения в по меньшей мере 1,5 раза, 2 раза, 5 раз, 10 раз, 20 раз, 30 раз, 40 раз, 50 раз, 60 раз, 70 раз, 80 раз, 90 раз или 100 раз по сравнению с уровнем превращения в отсутствие молекулы антитела.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена в одной или нескольких областях белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при его связывании, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остатку(-ам) X_C, выбранным из коровой области С (остатки 368-387 из SEQ ID NO: 105), в большей степени, чем по остатку(-ам) X_A, выбранным из коровой области A (остатки 158-172 из SEQ ID NO: 105), по остатку(-ам) X_B, выбранным из коровой области В (остатки 206-215 из SEQ ID NO: 105), или по остатку(-ам) X_D, выбранным из коровой области D (остатки 297-309 из SEQ ID NO: 105), например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре, при этом

X_C равняется 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, или 20,

X_A равняется 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, или 14,

X_B равняется 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, или 10, и

X_D равняется 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, или 13.

В одном варианте осуществления молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по 20 остаткам, выбранным из коровой области С, в большей степени, чем по

(i) 14 остаткам, выбранным из коровой области A,

(ii) 10 остаткам, выбранным из коровой области B, или

(iii) 13 остаткам, выбранным из коровой области D,

например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области A. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области B. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области A и коровой области B. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области A и коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области B и коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области A, коровой области B и коровой области D.

В одном варианте осуществления молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по 15 остаткам, выбранным из коровой области С, в большей степени, чем по

(i) 10 остаткам, выбранным из коровой области A,

(ii) 8 остаткам, выбранным из коровой области B, или

(iii) 10 остаткам, выбранным из коровой области D,

например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области A. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области B. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области A и коровой области B. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области A и коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области B и коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области A, коровой области B и коровой области D.

В одном варианте осуществления молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по 10 остаткам, выбранным из коровой области С, в большей степени, чем по

(i) 7 остаткам, выбранным из коровой области A,

(ii) 5 остаткам, выбранным из коровой области B, или

(iii) 7 остаткам, выбранным из коровой области D,

например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области A. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области B. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области A и коровой области B. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области A и коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области B и коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области C в большей степени, чем в коровой области A, коровой области B и коровой области D.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172, остаткам 206-215 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остатку(-ам) X_A, выбранным из коровой области А (остатки 158-172 из SEQ ID NO: 105), в большей степени, чем по остатку(-ам) X_B, выбранным из коровой области В (остатки 206-215 из SEQ ID NO: 105), по остатку(-ам) X_C, выбранным из коровой области С (остатки 368-387 из SEQ ID NO: 105), или по остатку(-ам) X_D, выбранным из коровой области D (остатки 297-309 из SEQ ID NO: 105), например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре, при этом:

X_A равняется 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, или 14,

X_B равняется 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, или 10,

X_C равняется 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, или 20, а

X_D равняется 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, или 13.

В одном варианте осуществления молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по 14 остаткам, выбранным из коровой области A, в большей степени, чем по

(i) 10 остаткам, выбранным из коровой области B,

(ii) 20 остаткам, выбранным из коровой области С, или

(iii) 13 остаткам, выбранным из коровой области D,

например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области B. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области С. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области В и коровой области С. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области В и коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области С и коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области В, коровой области С и коровой области D.

В одном варианте осуществления молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по 10 остаткам, выбранным из коровой области A, в большей степени, чем по

(i) 8 остаткам, выбранным из коровой области B,

(ii) 15 остаткам, выбранным из коровой области С, или

(iii) 10 остаткам, выбранным из коровой области D, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области B. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области С. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области В и коровой области С. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области В и коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области С и коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области В, коровой области С и коровой области D.

В одном варианте осуществления молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по 7 остаткам, выбранным из коровой области A, в большей степени, чем по

(i) 5 остаткам, выбранным из коровой области B,

(ii) 10 остаткам, выбранным из коровой области С, или

(iii) 7 остаткам, выбранным из коровой области D,

например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области B. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области С. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области В и коровой области С. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области В и коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области С и коровой области D. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена в коровой области А в большей степени, чем в коровой области В, коровой области С и коровой области D.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 или по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена в одной или нескольких областях белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при его связывании, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105, при этом область, характеризующаяся наибольшим уменьшением среднего уровня водородно-дейтериевого обмена среди одной или нескольких областей, не представляет собой остатки 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему более чем, например, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05 или 0,06 Да на остаток, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему менее чем, например, 0,05, 0,04, 0,03 или 0,02 Да на остаток, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где молекула антитела взаимодействует, например прямо или косвенно, с по меньшей мере одним, двумя, тремя или четырьмя остатками в пределах остатков 158-172 из SEQ ID NO: 105. В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где молекула антитела взаимодействует, например прямо или косвенно, с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где молекула антитела взаимодействует, например прямо или косвенно, с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 368-387 из SEQ ID NO: 105 или 106. В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где молекула антитела взаимодействует, например прямо или косвенно, с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с по меньшей мере одним, двумя, тремя или четырьмя остатками в пределах остатков 158-172 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 206-215 из SEQ ID NO: 105.

В качестве альтернативы или в комбинации с вариантом осуществления, описанным в данном документе, молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня мечения с помощью метки для тандемной масс-спектрометрии (™T) по остатку K136 (пронумерованному в соответствии с SEQ ID NO: 105) белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105, при его связывании, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением изотопного мечения с помощью ТМТ, например, с применением способов, описанных в примере 9, например, с применением изотопного мечения с помощью ТМТ, проводимого в течение времени мечения, составляющего 30 с, при этом необязательно молекула антитела дополнительно обеспечивает уменьшение уровня мечения с помощью ТМТ по одному или нескольким из остатков K133, K162, K179, K206, K214, K285, K291 и K341 (пронумерованных в соответствии с SEQ ID NO: 105) белка, например по одному или нескольким из остатков K162, K206, K214, K285, K291 и K341 (пронумерованных в соответствии с SEQ ID NO: 105) белка. В одном варианте осуществления молекула антитела обеспечивает увеличение уровня мечения с помощью ТМТ по одному или обоим из остатков K262 и K274 (пронумерованным в соответствии с SEQ ID NO: 105) белка при связывании с ним, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением изотопного мечения с помощью ТМТ, например, с применением способов, описанных в примере 9, например, с применением изотопного мечения с помощью ТМТ, проводимого в течение времени мечения, составляющего 30 с. В одном варианте осуществления молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня мечения с помощью метки для тандемной масс-спектрометрии (™T) по остаткам K206 и K214 (пронумерованным в соответствии с SEQ ID NO: 105) белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105, при его связывании, при этом уменьшение по остатку K214 составляет не менее 90, 80, 70, 60 или 50% от уменьшения по остатку K206, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением изотопного мечения с помощью ТМТ, например, с применением способов, описанных в примере 9, например, при этом уменьшение по остатку K214 составляет не менее 90, 80, 70, 60 или 50% от уменьшения по остатку K206 при применении изотопного мечения с помощью ТМТ, проводимого в течение времени мечения, составляющего 30 с, например, при этом уменьшение по остатку K214 составляет не менее 90, 80, 70, 60, 50, 40 или 30% от уменьшения по остатку K206 при применении изотопного мечения с помощью ТМТ, проводимого в течение времени мечения, составляющего 300 с. В одном варианте осуществления молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня мечения с помощью метки для тандемной масс-спектрометрии (™T) по остатку K162 (пронумерованному в соответствии с SEQ ID NO: 105) белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105, при его связывании при исследовании молекулы антитела с применением изотопного мечения с помощью ТМТ, проводимого в течение времени мечения, составляющего 30 с, при этом

(i) молекула антитела не обеспечивает уменьшение уровня мечения с помощью ТМТ по остатку K162 при исследовании с применением изотопного мечения с помощью ТМТ, проводимого в течение времени мечения, составляющего 300 с, или

(ii) молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня мечения с помощью ТМТ по остатку K162 при исследовании с применением изотопного мечения с помощью ТМТ, проводимого в течение времени мечения, составляющего 300 с, при этом уменьшение по остатку K162 при времени мечения, составляющем 300 с составляет не более 20, 30, 40 или 50% от уменьшения по остатку K162 при времени мечения, составляющем 30 с,

например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела, например, с применением способов, описанных в примере 9.

В качестве альтернативы или в комбинации с вариантом осуществления, описанным в данном документе, молекула антитела связывается с одним или несколькими остатками CD73, например, посредством электростатического взаимодействия и/или водородной связи, где один или несколько остатков выбраны из группы, состоящей из остатков Y110, K136, L132, L157, K162, S155 и T209, пронумерованных в соответствии с SEQ ID NO: 105, что, например, определено с применением анализа кристаллической структуры, например с применением способов, описанных в примере 8. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, где молекула антитела характеризуется одним или несколькими (например, 1, 2, 3, 4 или всеми) из следующих свойств:

(i) молекула антитела (например, вариабельная область тяжелой цепи, например R54 из вариабельной области тяжелой цепи, пронумерованной в соответствии с нумерацией по Kabat) связывается с Y110 (например, с карбонилом главной цепи Y110) или с K136 (например, с карбонилом главной цепи K136) из CD73 (пронумерованного в соответствии с SEQ ID NO: 105), например, посредством электростатического взаимодействия, что, например, определено с применением анализа кристаллической структуры, например с применением способов, описанных в примере 8,

(ii) молекула антитела (например, вариабельная область тяжелой цепи, например R31 из вариабельной области тяжелой цепи, пронумерованной в соответствии с нумерацией по Kabat) связывается с L132 (например, с карбонилом главной цепи L132) или с L157 (например, с карбонилом главной цепи L157) из CD73 (пронумерованного в соответствии с SEQ ID NO: 105), например, посредством электростатического взаимодействия, что, например, определено с применением анализа кристаллической структуры, например с применением способов, описанных в примере 8,

(iii) молекула антитела (например, вариабельная область тяжелой цепи, например S99 (например, карбонил главной цепи S99), R31 (например, карбонил главной цепи R31) или E95 (например, боковая цепь E95) из вариабельной области тяжелой цепи, пронумерованной в соответствии с нумерацией по Kabat) связывается с K162 (например, боковой цепью K162) из CD73 (пронумерованного в соответствии с SEQ ID NO: 105), например, посредством электростатического взаимодействия, что, например, определено с применением анализа кристаллической структуры, например с применением способов, описанных в примере 8,

(iv) молекула антитела (например, вариабельная область тяжелой цепи, например E98 из вариабельной области тяжелой цепи, пронумерованной в соответствии с нумерацией по Kabat) связывается с S155 (например, боковой цепью S155) из CD73 (пронумерованного в соответствии с SEQ ID NO: 105), например, посредством водородной связи, что, например, определено с применением анализа кристаллической структуры, например с применением способов, описанных в примере 8, и

(v) молекула антитела (например, вариабельная область легкой цепи, например W32 (например, боковая цепь W32) из вариабельной области легкой цепи, пронумерованной в соответствии с нумерацией по Kabat) связывается с T209 (например, боковой цепью T209) из CD73 (пронумерованного в соответствии с SEQ ID NO: 105), например, посредством водородной связи, что, например, определено с применением анализа кристаллической структуры, например с применением способов, описанных в примере 8.

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с одной или несколькими областями CD73, например, посредством комплементарности формы и/или вандерваальсовых взаимодействий, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 155-170, 136-138 и 209-210, пронумерованных в соответствии с SEQ ID NO: 105, что, например, определено с применением анализа кристаллической структуры, например с применением способов, описанных в примере 8. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, при этом молекула антитела характеризуется одним или несколькими (например, 1, 2 или всеми) из следующих свойств:

(i) молекула антитела (например, вариабельная область тяжелой цепи, например остатки 33, 50, 52, 56, 97, 98, 100 или 100a вариабельной области тяжелой цепи, пронумерованной в соответствии с нумерацией по Kabat) связывается с остатками 155-170 из CD73 (пронумерованного в соответствии с SEQ ID NO: 105), например, посредством комплементарности формы и/или вандерваальсовых взаимодействий, что, например, определено с применением анализа кристаллической структуры, например, с применением способов, описанных в примере 8,

(ii) молекула антитела (например, вариабельная область тяжелой цепи, например остатки 30 или 31 вариабельной области тяжелой цепи, пронумерованной в соответствии с нумерацией по Kabat) связывается с остатками 136-138 из CD73 (пронумерованного в соответствии с SEQ ID NO: 105), например, посредством комплементарности формы и/или вандерваальсовых взаимодействий, что, например, определено с применением анализа кристаллической структуры, например, с применением способов, описанных в примере 8, и

(iii) молекула антитела (например, вариабельная область легкой цепи, например остатки 30 или 32 вариабельной области легкой цепи, пронумерованной в соответствии с нумерацией по Kabat) связывается с остатками 209-210 из CD73 (пронумерованного в соответствии с SEQ ID NO: 105), что, например, определено с применением анализа кристаллической структуры, например с применением способов, описанных в примере 8.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где молекула антитела содержит по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть определяющих комплементарность областей (CDR) (или в совокупности все CDR) из вариабельной области тяжелой и/или вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, показанную в таблице 1 (например, из последовательностей вариабельной области тяжелой и легкой цепи антитела, раскрытого в таблице 1, например, антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398), или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии со схемой нумерации по Kabat (например, как изложено в таблице 1). В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии со схемой нумерации по Chothia (например, как изложено в таблице 1). В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии с комбинированной схемой нумерации, основанной на нумерации по Kabat и нумерации по Chothia (например, как изложено в таблице 1). В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии со схемой нумерации по IMGT (например, как изложено в таблице 1). В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или в совокупности все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен (например, консервативных аминокислотных замен) или делеций по сравнению с аминокислотной последовательностью, показанной в таблице 1, или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, содержащая вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 37).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, содержащая:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности X₁X₂AMS из определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 88), где X₁ представляет собой R, Y или S, и X₂ представляет собой Y или N; аминокислотной последовательности X₁IX₂GX₃GX₄X₅TYYADSVKG из VHCDR2 (SEQ ID NO: 89), где X₁ представляет собой A или S, X₂ представляет собой S или T, X₃ представляет собой S или T, X₄ представляет собой M, G или S, и X₅ представляет собой N, S, L или Y; и аминокислотной последовательности GGLYGSGSYLSDFDL из VHCDR3 (SEQ ID NO: 37); и/или

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности RASQSVGSNLA из определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 48); аминокислотной последовательности GASTRAT из VLCDR2 (SEQ ID NO: 49); и аминокислотной последовательности QQHNAFPYT из VLCDR3 (SEQ ID NO: 50).

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит:

(i) VH, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотной последовательности VHCDR2 под SEQ ID NO: 36 и аминокислотной последовательности VHCDR3 под SEQ ID NO: 37 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен); и VL, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотной последовательности VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотной последовательности VLCDR3 под SEQ ID NO: 50 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен);

(ii) VH, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VHCDR1 под SEQ ID NO: 72, аминокислотной последовательности VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотной последовательности VHCDR3 под SEQ ID NO: 37 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен); и VL, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотной последовательности VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотной последовательности VLCDR3 под SEQ ID NO: 50 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен);

(iii) VH, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотной последовательности VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотной последовательности VHCDR3 под SEQ ID NO: 37 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен); и VL, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотной последовательности VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотной последовательности VLCDR3 под SEQ ID NO: 50 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен);

(iv) VH, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотной последовательности VHCDR2 под SEQ ID NO: 136 и аминокислотной последовательности VHCDR3 под SEQ ID NO: 37 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен); и VL, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотной последовательности VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотной последовательности VLCDR3 под SEQ ID NO: 50 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен);

(v) VH, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотной последовательности VHCDR2 под SEQ ID NO: 146 и аминокислотной последовательности VHCDR3 под SEQ ID NO: 37 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен); и VL, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотной последовательности VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотной последовательности VLCDR3 под SEQ ID NO: 50 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен); или

(vi) VH, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотной последовательности VHCDR2 под SEQ ID NO: 154 и аминокислотной последовательности VHCDR3 под SEQ ID NO: 37 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен); и VL, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотной последовательности VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотной последовательности VLCDR3 под SEQ ID NO: 50 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен).

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 44, 77, 84, 142, 151 или 159 или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 44, 77, 84, 142, 151 или 159.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 55, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 55.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 46, 79, 86, 114, 116 или 117 или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 46, 79, 86, 114, 116 или 117.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 57 или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 57.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 44 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 55 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней);

(ii) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 77 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 55 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней);

(iii) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 84 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 55 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней);

(iv) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 142 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 55 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней);

(v) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 151 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 55 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней); или

(vi) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 159 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 55 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней).

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит:

(i) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 46 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней) и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 57 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней);

(ii) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 114 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 57 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней);

(iii) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 79 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 57 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней);

(iv) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 116 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 57 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней);

(v) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 86 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 57 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней); или

(vi) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 117 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 57 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, содержащая вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP VHCDR3 (SEQ ID NO: 3).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, содержащая:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂YWS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 90), где X₁ представляет собой R, G или S, и X₂ представляет собой Y или R; аминокислотную последовательность YIYX₁X₂GSTX₃YNPSLKS VHCDR2 (SEQ ID NO: 91), где X₁ представляет собой G или S, X₂ представляет собой R, S или T, и X₃ представляет собой N или K; и аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP VHCDR3 (SEQ ID NO: 3); и/или

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQGISSWLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 14); аминокислотную последовательность AASSLQS VLCDR2 (SEQ ID NO: 15); и аминокислотную последовательность QQGNSFPRT VLCDR3 (SEQ ID NO: 16).

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит:

(i) VH, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VHCDR1 под SEQ ID NO: 61, аминокислотной последовательности VHCDR2 под SEQ ID NO: 60 и аминокислотной последовательности VHCDR3 под SEQ ID NO: 3 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен); и VL, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотной последовательности VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотной последовательности VLCDR3 под SEQ ID NO: 16 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен);

(ii) VH, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотной последовательности VHCDR2 под SEQ ID NO: 26 и аминокислотной последовательности VHCDR3 под SEQ ID NO: 3 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен); и VL, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотной последовательности VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотной последовательности VLCDR3 под SEQ ID NO: 16 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен);

(iii) VH, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотной последовательности VHCDR2 под SEQ ID NO: 2 и аминокислотной последовательности VHCDR3 под SEQ ID NO: 3 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен); и VL, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотной последовательности VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотной последовательности VLCDR3 под SEQ ID NO: 16 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен); или

(iv) VH, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VHCDR1 под SEQ ID NO: 163, аминокислотной последовательности VHCDR2 под SEQ ID NO: 162 и аминокислотной последовательности VHCDR3 под SEQ ID NO: 3 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен); и VL, содержащую одно, два или три из аминокислотной последовательности VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотной последовательности VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотной последовательности VLCDR3 под SEQ ID NO: 16 (или последовательности, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащей одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен).

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 66, 31, 10 или 168 или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 66, 31, 10 или 168.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 21 или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 21.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 68, 33, 12, 115, 113 или 112 или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 68, 33, 12, 115, 113 или 112.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 23 или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 23.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 66 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 21 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней);

(ii) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 31 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 21 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней);

(iii) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 10 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 21 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней); или

(iv) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 168 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 21 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней).

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит:

(i) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 68 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 23 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней);

(ii) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 115 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 23 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней);

(iii) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 33 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 23 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней);

(iv) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 113 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 23 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней);

(v) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 12 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 23 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней); или

(vi) тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 112 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней), и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 23 (или последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней).

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VH3-23 человека. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VK3-15 человека. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VH3-23 человека, и вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VK3-15 человека.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VH4-59 человека. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VK1-12 человека. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VH4-59 человека, и вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VK1-12 человека.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VH3-23 человека. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VK1-05 человека. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VH3-23 человека, и вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VK1-05 человека.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VH1-02 человека. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VK1-12 человека. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VH1-02 человека, и вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VK1-12 человека.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VH3-07 человека. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VK4-01 человека. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VH3-07 человека, и вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VK4-01 человека.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VH1-69 человека. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VK3-15 человека. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VH1-69 человека, и вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VK3-15 человека.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VH4-34 человека. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VK1-12 человека. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VH4-34 человека, и вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность, полученную из последовательности зародышевого типа VK1-12 человека.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 представляет собой моноклональное антитело или антитело с одной специфичностью. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 представляет собой биспецифическое или полиспецифическое антитело. Тяжелая и легкая цепи молекулы антитела к CD73 могут быть полноразмерными (например, антитело может содержать по меньшей мере одну или по меньшей мере две полные тяжелые цепи, и по меньшей мере одну или по меньшей мере две полные легкие цепи) или могут содержать антигенсвязывающий фрагмент (например, Fab, F(ab')2, Fv, одноцепочечный фрагмент Fv, однодоменное антитело, диатело (dAb), бивалентное или биспецифическое антитело или его фрагмент, его однодоменный вариант или верблюжье антитело).

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 имеет константную область тяжелой цепи (Fc), выбранную, например, из константных областей тяжелой цепи IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD и IgE; в частности, выбранную, например, из константных областей тяжелой цепи IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4, более конкретно, константной области тяжелой цепи IgG4. В некоторых вариантах осуществления константная область тяжелой цепи представляет такую из IgG4 человека. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит константную область легкой цепи, выбранную из, например, константных областей легкой каппа- или лямбда-цепи. В некоторых вариантах осуществления константная область легкой цепи представляет собой такую каппа-цепи (например, каппа-цепи человека). В некоторых вариантах осуществления константная область изменена, например подвергнута мутации, для модификации свойств молекулы антитела к CD73 (например, повышения или снижения одного или нескольких из связывания с рецептором Fc, гликозилирования антител, числа цистеиновых остатков, функции эффекторных клеток или функции комплемента). В некоторых вариантах осуществления константная область тяжелой цепи IgG4, например IgG4 человека, является подвергнутой мутации в положении 228 в соответствии с нумерацией Eu (например, S на P), например, как показано в таблице 3. В определенных вариантах осуществления молекулы антител к CD73 предусматривают IgG4 человека, подвергнутый мутации в положении 228 в соответствии с нумерацией Eu (например, S на P), например, как показано в таблице 3; и константную область легкой каппа-цепи, например, как показано в таблице 3. В некоторых вариантах осуществления константная область тяжелой цепи IgG4, например IgG4 человека, является подвергнутой мутации в положении 228 (например, S на P) и в положении 235 (например, L на E) в соответствии с нумерацией Eu, например, как показано в таблице 3. В определенных вариантах осуществления молекулы антител к CD73 предусматривают IgG4 человека, подвергнутый мутации в положении 228 (например, S на P) и в положении 235 (например, L на E) в соответствии с нумерацией Eu, например, как показано в таблице 3; и константную область легкой каппа-цепи, например, как показано в таблице 3. В еще одном варианте осуществления константная область тяжелой цепи IgG1, например IgG1 человека, является подвергнутой мутации в одном или нескольких из положения 297 (например, N на A), положения 265 (например, D на A), положения 329 (например, P на A), положения 234 (например, L на A) или положения 235 (например, L на A), все в соответствии с нумерацией Eu, например, как показано в таблице 3. В определенных вариантах осуществления молекулы антител к CD73 содержат IgG1 человека, подвергнутый мутации в одном или нескольких из вышеупомянутых положений, например, как показано, в таблице 3; и константную область легкой каппа-цепи, например, как показано в таблице 3.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит константную область тяжелой цепи, выбранную из IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4, и константную область легкой цепи, выбранную из константных областей легкой каппа- или лямбда-цепи. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит константную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 92-103, 119 и 120, и константную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 104.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к молекуле антитела, которая конкурирует с моноклональным антителом, например молекулой антитела, описанной в данном документе, за связывание с CD73 человека. Настоящее изобретение также относится к молекуле антитела, которая связывается с тем же (или по сути тем же) эпитопом, что и моноклональное антитело, например молекула антитела, описанная в данном документе, к CD73 человека, или перекрывающимся (или по сути перекрывающимся) с ним.

В одном варианте осуществления моноклональное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 37).

В определенных вариантах осуществления моноклональное антитело содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂AMS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 88), где X₁ представляет собой R, Y или S, и X₂ представляет собой Y или N; аминокислотную последовательность X₁IX₂GX₃GX₄X₅TYYADSVKG VHCDR2 (SEQ ID NO: 89), где X₁ представляет собой A или S, X₂ представляет собой S или T, X₃ представляет собой S или T, X₄ представляет собой M, G или S, и X₅ представляет собой N, S, L или Y; и аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL VHCDR3 (SEQ ID NO: 37); и/или

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQSVGSNLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 48); аминокислотную последовательность GASTRAT VLCDR2 (SEQ ID NO: 49); и аминокислотную последовательность QQHNAFPYT VLCDR3 (SEQ ID NO: 50).

В определенных вариантах осуществления моноклональное антитело содержит:

(i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 36 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(ii) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 72, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(iii) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(iv) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 136 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(v) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 146 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50; или

(vi) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 154 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50.

В одном варианте осуществления моноклональное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 3).

В определенных вариантах осуществления моноклональное антитело содержит:

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂YWS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 90), где X₁ представляет собой R, G или S, и X₂ представляет собой Y или R; аминокислотную последовательность YIYX₁X₂GSTX₃YNPSLKS VHCDR2 (SEQ ID NO: 91), где X₁ представляет собой G или S, X₂ представляет собой R, S или T, и X₃ представляет собой N или K; и аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP VHCDR3 (SEQ ID NO: 3); и/или

(ii) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQGISSWLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 14); аминокислотную последовательность AASSLQS VLCDR2 (SEQ ID NO: 15); и аминокислотную последовательность QQGNSFPRT VLCDR3 (SEQ ID NO: 16).

В определенных вариантах осуществления моноклональное антитело содержит:

(i) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 60 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(ii) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(iii) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 2 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16; или

(iv) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 163, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 162 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к молекуле нуклеиновой кислоты, которая содержит одну или обе нуклеотидные последовательности, которые кодируют вариабельные области тяжелой и легкой цепи, CDR, гипервариабельные петли, каркасные области молекул антитела к CD73, описанных в данном документе. В определенных вариантах осуществления нуклеотидная последовательность, которая кодирует молекулу антитела к CD73, является кодон-оптимизированной. Например, настоящее изобретение относится к первой и второй нуклеиновым кислотам, кодирующим вариабельные области соответственно тяжелой и легкой цепей молекулы антитела к CD73, выбранной, например, из любой из 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430 или 398, совместно представленных в таблице 1, или последовательности, по сути идентичной им. Например, нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, такую, как изложено в таблице 1, или последовательность, по сути идентичную ей (например, последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности, или которая отличается на не более чем 3, 6, 15, 30 или 45 нуклеотидов от последовательностей, показанных в таблице 1).

В одном аспекте раскрыты нуклеиновые кислоты, содержащие нуклеотидные последовательности, которые кодируют вариабельные области тяжелой и легкой цепи, и CDR молекул антитела к CD73, описанных в данном документе. Например, в настоящем изобретении предусмотрена первая и вторая нуклеиновые кислоты, кодирующие соответственно вариабельные области тяжелой и легкой цепей молекулы антитела к CD73 в соответствии с таблицей 1, или последовательности, по сути идентичные им. Например, нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую молекулу антитела к CD73 в соответствии с таблицей 1, или последовательность, по сути идентичную этой нуклеотидной последовательности (например, последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности или которая отличается на не более чем 3, 6, 15, 30 или 45 нуклеотидов от вышеуказанной нуклеотидной последовательности).

В определенных вариантах осуществления нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две или три CDR или гипервариабельные петли из вариабельной области тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность, изложенную в таблице 1, или последовательность, по сути гомологичную ей (например, последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащую одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен).

В определенных вариантах осуществления нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две или три CDR или гипервариабельные петли из вариабельной области легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность, изложенную в таблице 1, или последовательность, по сути гомологичную ей (например, последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащую одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен).

В определенных вариантах осуществления нуклеиновая кислота может содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR, или гипервариабельные петли из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей, имеющих аминокислотную последовательность, изложенную в таблице 1, или последовательность, по сути гомологичную ей (например, последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащую одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен).

В определенных вариантах осуществления нуклеиновая кислота кодирует вариабельную область тяжелой цепи, где нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность под SEQ ID NO: 45, 78, 85, 143, 152, 160, 67, 32, 11 или 169 или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 45, 78, 85, 143, 152, 160, 67, 32, 11 или 169.

В определенных вариантах осуществления нуклеиновая кислота кодирует тяжелую цепь, где нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность под SEQ ID NO: 47, 80, 87, 69, 34 или 13 или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 47, 80, 87, 69, 34 или 13.

В определенных вариантах осуществления нуклеиновая кислота кодирует вариабельную область легкой цепи, где нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность под SEQ ID NO: 56, 144, 22 или 170 или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 56, 144, 22 или 170.

В определенных вариантах осуществления нуклеиновая кислота кодирует легкую цепь, где нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность под SEQ ID NO: 58 или 24 или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 58 или 24.

В одном аспекте данное раскрытие относится к клеткам-хозяевам и векторам, содержащим нуклеиновые кислоты, описанные в данном документе. Нуклеиновые кислоты могут присутствовать в одном векторе или отдельных векторах, присутствующих в одной и той же клетке-хозяине или отдельной клетке-хозяине. В данном документе также предусмотрен способ получения молекулы антитела к C73, при этом способ включает культивирование клетки-хозяина, раскрытой в данном документе, в условиях, подходящих для экспрессии гена.

В одном аспекте в настоящем изобретении предусмотрен способ получения молекулы антитела, описанной в данном документе. Способ может включать: обеспечение антигена CD73 (например, антигена, содержащего по меньшей мере часть эпитопа CD73, например, N-концевой домен антигена CD73); получение молекулы антитела, которая связывается с антигеном CD73; и оценивание того, связывается ли молекула антитела с антигеном CD73, или оценивание эффективности молекулы антитела в отношении модулирования, например стимулирования или ингибирования, активности CD73. Способ может дополнительно включать введение молекулы антитела субъекту, например человеку или животному, отличному от человека.

В одном аспекте в настоящем изобретении предусмотрены композиции, например фармацевтические композиции, которые содержат фармацевтически приемлемый носитель, вспомогательное вещество или стабилизатор и по меньшей мере одну из молекул антитела к CD73, описанных в данном документе. В одном варианте осуществления композиция, например фармацевтическая композиция, содержит комбинацию молекулы антитела и одного или нескольких средств, например терапевтического средства или другой молекулы антитела, описанных в данном документе. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела конъюгирована с меткой или терапевтическим средством. В некоторых вариантах осуществления композиции, например фармацевтические композиции, содержат комбинацию молекулы антитела и второго средства, например терапевтического средства или двух или более из вышеупомянутых молекул антитела, дополнительно описанных в данном документе.

Молекулы антитела к CD73, раскрытые в данном документе, могут ингибировать, уменьшать или нейтрализовать один или несколько видов активности CD73, например аденозинмонофосфата (AMP) в аденозин обеспечивать ингибирование или уменьшение ферментативной активности CD73; ингибирование уровня превращения или уменьшение его уровня; увеличение уровня пролиферации Т-клеток, стимулированных антителом к CD3/антителом к CD28, например, Т-клеток CD4+, в присутствии аденозинмонофосфата (AMP); ингибирование пролиферации регуляторных Т-клеток; увеличение уровней ответов эффекторных Т-клеток; и/или ингибирование миграции, инфильтрации или размножения супрессорных клеток миелоидного происхождения. Таким образом, такие молекулы антител можно применять для лечения или предупреждения нарушений, при которых необходимо усиление иммунного ответа у субъекта.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73 (например, каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105, например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если молекула антитела содержит первый антигенсвязывающий домен и второй антигенсвязывающий домен, первый антигенсвязывающий домен связывается с первым мономером CD73 и второй антигенсвязывающий домен связывается со вторым мономером CD73, например, при исследовании с применением эксклюзионной хроматографии; и

(ii) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172, остаткам 206-215 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73 (например, каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105, например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если молекула антитела содержит первый антигенсвязывающий домен и второй антигенсвязывающий домен, первый антигенсвязывающий домен связывается с первым мономером CD73 и второй антигенсвязывающий домен связывается со вторым мономером CD73, например, при исследовании с применением эксклюзионной хроматографии; и

(ii) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 или по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73 (например, каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105, например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если молекула антитела содержит первый антигенсвязывающий домен и второй антигенсвязывающий домен, первый антигенсвязывающий домен связывается с первым мономером CD73 и второй антигенсвязывающий домен связывается со вторым мономером CD73, например, при исследовании с применением эксклюзионной хроматографии; и

(ii) молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена в одной или нескольких областях белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при его связывании, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105, при этом область, характеризующаяся наибольшим уменьшением среднего уровня водородно-дейтериевого обмена среди одной или нескольких областей, не представляет собой остатки 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73 (например, каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105, например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если молекула антитела содержит первый антигенсвязывающий домен и второй антигенсвязывающий домен, первый антигенсвязывающий домен связывается с первым мономером CD73 и второй антигенсвязывающий домен связывается со вторым мономером CD73, например, при исследовании с применением эксклюзионной хроматографии; и

(ii) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему более чем, например, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05 или 0,06 Да на остаток, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73 (например, каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105, например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если молекула антитела содержит первый антигенсвязывающий домен и второй антигенсвязывающий домен, первый антигенсвязывающий домен связывается с первым мономером CD73 и второй антигенсвязывающий домен связывается со вторым мономером CD73, например, при исследовании с применением эксклюзионной хроматографии; и

(ii) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему менее чем, например, 0,05, 0,04, 0,03 или 0,02 Да на остаток, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73 (например, каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105, например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если молекула антитела содержит первый антигенсвязывающий домен и второй антигенсвязывающий домен, первый антигенсвязывающий домен связывается с первым мономером CD73 и второй антигенсвязывающий домен связывается со вторым мономером CD73, например, при исследовании с применением эксклюзионной хроматографии; и

(ii) молекула антитела связывается с по меньшей мере одним, двумя, тремя или четырьмя остатками в пределах остатков 158-172 из SEQ ID NO: 105, и/или с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 206-215 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73 (например, каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105, например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если молекула антитела содержит первый антигенсвязывающий домен и второй антигенсвязывающий домен, первый антигенсвязывающий домен связывается с первым мономером CD73 и второй антигенсвязывающий домен связывается со вторым мономером CD73, например, при исследовании с применением эксклюзионной хроматографии; и

(ii) молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73 (например, каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105, например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если молекула антитела содержит первый антигенсвязывающий домен и второй антигенсвязывающий домен, первый антигенсвязывающий домен связывается с первым мономером CD73 и второй антигенсвязывающий домен связывается со вторым мономером CD73, например, при исследовании с применением эксклюзионной хроматографии; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 37).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73 (например, каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105, например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если молекула антитела содержит первый антигенсвязывающий домен и второй антигенсвязывающий домен, первый антигенсвязывающий домен связывается с первым мономером CD73 и второй антигенсвязывающий домен связывается со вторым мономером CD73, например, при исследовании с применением эксклюзионной хроматографии; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂AMS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 88), где X₁ представляет собой R, Y или S, и X₂ представляет собой Y или N; аминокислотную последовательность X₁IX₂GX₃GX₄X₅TYYADSVKG VHCDR2 (SEQ ID NO: 89), где X₁ представляет собой A или S, X₂ представляет собой S или T, X₃ представляет собой S или T, X₄ представляет собой M, G или S, и X₅ представляет собой N, S, L или Y; и аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL VHCDR3 (SEQ ID NO: 37); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQSVGSNLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 48); аминокислотную последовательность GASTRAT VLCDR2 (SEQ ID NO: 49); и аминокислотную последовательность QQHNAFPYT VLCDR3 (SEQ ID NO: 50).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73 (например, каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105, например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если молекула антитела содержит первый антигенсвязывающий домен и второй антигенсвязывающий домен, первый антигенсвязывающий домен связывается с первым мономером CD73 и второй антигенсвязывающий домен связывается со вторым мономером CD73, например, при исследовании с применением эксклюзионной хроматографии; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 36 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 72, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 136 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(e) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 146 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50; или

(f) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 154 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73 (например, каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105, например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если молекула антитела содержит первый антигенсвязывающий домен и второй антигенсвязывающий домен, первый антигенсвязывающий домен связывается с первым мономером CD73 и второй антигенсвязывающий домен связывается со вторым мономером CD73, например, при исследовании с применением эксклюзионной хроматографии; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 3).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73 (например, каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105, например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если молекула антитела содержит первый антигенсвязывающий домен и второй антигенсвязывающий домен, первый антигенсвязывающий домен связывается с первым мономером CD73 и второй антигенсвязывающий домен связывается со вторым мономером CD73, например, при исследовании с применением эксклюзионной хроматографии; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂YWS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 90), где X₁ представляет собой R, G или S, и X₂ представляет собой Y или R; аминокислотную последовательность YIYX₁X₂GSTX₃YNPSLKS VHCDR2 (SEQ ID NO: 91), где X₁ представляет собой G или S, X₂ представляет собой R, S или T, и X₃ представляет собой N или K; и аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP VHCDR3 (SEQ ID NO: 3); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQGISSWLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 14); аминокислотную последовательность AASSLQS VLCDR2 (SEQ ID NO: 15); и аминокислотную последовательность QQGNSFPRT VLCDR3 (SEQ ID NO: 16).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73 (например, каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105, например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если молекула антитела содержит первый антигенсвязывающий домен и второй антигенсвязывающий домен, первый антигенсвязывающий домен связывается с первым мономером CD73 и второй антигенсвязывающий домен связывается со вторым мономером CD73, например, при исследовании с применением эксклюзионной хроматографии; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 60 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 2 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16; или

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 163, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 162 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, или 80% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172, остаткам 206-215 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, или 80% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 или по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, или 80% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена в одной или нескольких областях белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при его связывании, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105, при этом область, характеризующаяся наибольшим уменьшением среднего уровня водородно-дейтериевого обмена среди одной или нескольких областей, не представляет собой остатки 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, или 80% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему более чем, например, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05 или 0,06 Да на остаток, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, или 80% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему менее чем, например, 0,05, 0,04, 0,03 или 0,02 Да на остаток, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, или 80% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела связывается с по меньшей мере одним, двумя, тремя или четырьмя остатками в пределах остатков 158-172 из SEQ ID NO: 105, и/или с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 206-215 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, или 80% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, или 80% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 37).

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) каждая из молекул антитела во множестве содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, или 80% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂AMS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 88), где X₁ представляет собой R, Y или S, и X₂ представляет собой Y или N; аминокислотную последовательность X₁IX₂GX₃GX₄X₅TYYADSVKG VHCDR2 (SEQ ID NO: 89), где X₁ представляет собой A или S, X₂ представляет собой S или T, X₃ представляет собой S или T, X₄ представляет собой M, G или S, и X₅ представляет собой N, S, L или Y; и аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL VHCDR3 (SEQ ID NO: 37); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQSVGSNLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 48); аминокислотную последовательность GASTRAT VLCDR2 (SEQ ID NO: 49); и аминокислотную последовательность QQHNAFPYT VLCDR3 (SEQ ID NO: 50).

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, или 80% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 36 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 72, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 136 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(e) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 146 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50; или

(f) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 154 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, или 80% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 3).

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, или 80% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂YWS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 90), где X₁ представляет собой R, G или S, и X₂ представляет собой Y или R; аминокислотную последовательность YIYX₁X₂GSTX₃YNPSLKS VHCDR2 (SEQ ID NO: 91), где X₁ представляет собой G или S, X₂ представляет собой R, S или T, и X₃ представляет собой N или K; и аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP VHCDR3 (SEQ ID NO: 3); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQGISSWLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 14); аминокислотную последовательность AASSLQS VLCDR2 (SEQ ID NO: 15); и аминокислотную последовательность QQGNSFPRT VLCDR3 (SEQ ID NO: 16).

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, или 80% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 60 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 2 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16; или

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 163, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 162 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, или 70% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекулы антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172, остаткам 206-215 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, или 70% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекулы антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 или по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, или 70% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекулы антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена в одной или нескольких областях белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при его связывании, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105, при этом область, характеризующаяся наибольшим уменьшением среднего уровня водородно-дейтериевого обмена среди одной или нескольких областей, не представляет собой остатки 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, или 70% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекулы антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему более чем, например, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05 или 0,06 Да на остаток, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, или 70% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекулы антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему менее чем, например, 0,05, 0,04, 0,03 или 0,02 Да на остаток, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, или 70% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекулы антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела связывается с по меньшей мере одним, двумя, тремя или четырьмя остатками в пределах остатков 158-172 из SEQ ID NO: 105, и/или с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 206-215 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, или 70% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекулы антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, или 70% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекулы антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 37).

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, или 70% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекулы антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂AMS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 88), где X₁ представляет собой R, Y или S, и X₂ представляет собой Y или N; аминокислотную последовательность X₁IX₂GX₃GX₄X₅TYYADSVKG VHCDR2 (SEQ ID NO: 89), где X₁ представляет собой A или S, X₂ представляет собой S или T, X₃ представляет собой S или T, X₄ представляет собой M, G или S, и X₅ представляет собой N, S, L или Y; и аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL VHCDR3 (SEQ ID NO: 37); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQSVGSNLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 48); аминокислотную последовательность GASTRAT VLCDR2 (SEQ ID NO: 49); и аминокислотную последовательность QQHNAFPYT VLCDR3 (SEQ ID NO: 50).

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, или 70% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекулы антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 36 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 72, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 136 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(e) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 146 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50; или

(f) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 154 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50.

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, или 70% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекулы антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 3).

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, или 70% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекулы антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂YWS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 90), где X₁ представляет собой R, G или S, и X₂ представляет собой Y или R; аминокислотную последовательность YIYX₁X₂GSTX₃YNPSLKS VHCDR2 (SEQ ID NO: 91), где X₁ представляет собой G или S, X₂ представляет собой R, S или T, и X₃ представляет собой N или K; и аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP VHCDR3 (SEQ ID NO: 3); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQGISSWLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 14); аминокислотную последовательность AASSLQS VLCDR2 (SEQ ID NO: 15); и аминокислотную последовательность QQGNSFPRT VLCDR3 (SEQ ID NO: 16).

В одном аспекте в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), где

(i) если каждая из нескольких молекул антитела содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, или 70% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекулы антитела и два или более димеров CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антитела), например, как описано в примере 2; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 60 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 2 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16; или

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 163, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 162 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172, остаткам 206-215 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1.

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 или по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1.

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена в одной или нескольких областях белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при его связывании, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105, при этом область, характеризующаяся наибольшим уменьшением среднего уровня водородно-дейтериевого обмена среди одной или нескольких областей, не представляет собой остатки 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему более чем, например, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05 или 0,06 Да на остаток, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему менее чем, например, 0,05, 0,04, 0,03 или 0,02 Да на остаток, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с по меньшей мере одним, двумя, тремя или четырьмя остатками в пределах остатков 158-172 из SEQ ID NO: 105, и/или с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 206-215 из SEQ ID NO: 105; и

(ii) молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172, остаткам 206-215 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 37).

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 или по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 37).

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена в одной или нескольких областях белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при его связывании, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105, при этом область, характеризующаяся наибольшим уменьшением среднего уровня водородно-дейтериевого обмена среди одной или нескольких областей, не представляет собой остатки 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 37).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему более чем, например, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05 или 0,06 Да на остаток, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 37).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему менее чем, например, 0,05, 0,04, 0,03 или 0,02 Да на остаток, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 37).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с по меньшей мере одним, двумя, тремя или четырьмя остатками в пределах остатков 158-172 из SEQ ID NO: 105, и/или с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 206-215 из SEQ ID NO: 105; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 37).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172, остаткам 206-215 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂AMS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 88), где X₁ представляет собой R, Y или S, и X₂ представляет собой Y или N; аминокислотную последовательность X₁IX₂GX₃GX₄X₅TYYADSVKG VHCDR2 (SEQ ID NO: 89), где X₁ представляет собой A или S, X₂ представляет собой S или T, X₃ представляет собой S или T, X₄ представляет собой M, G или S, и X₅ представляет собой N, S, L или Y; и аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL VHCDR3 (SEQ ID NO: 37); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQSVGSNLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 48); аминокислотную последовательность GASTRAT VLCDR2 (SEQ ID NO: 49); и аминокислотную последовательность QQHNAFPYT VLCDR3 (SEQ ID NO: 50).

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 или по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂AMS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 88), где X₁ представляет собой R, Y или S, и X₂ представляет собой Y или N; аминокислотную последовательность X₁IX₂GX₃GX₄X₅TYYADSVKG VHCDR2 (SEQ ID NO: 89), где X₁ представляет собой A или S, X₂ представляет собой S или T, X₃ представляет собой S или T, X₄ представляет собой M, G или S, и X₅ представляет собой N, S, L или Y; и аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL VHCDR3 (SEQ ID NO: 37); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQSVGSNLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 48); аминокислотную последовательность GASTRAT VLCDR2 (SEQ ID NO: 49); и аминокислотную последовательность QQHNAFPYT VLCDR3 (SEQ ID NO: 50).

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена в одной или нескольких областях белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при его связывании, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105, при этом область, характеризующаяся наибольшим уменьшением среднего уровня водородно-дейтериевого обмена среди одной или нескольких областей, не представляет собой остатки 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂AMS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 88), где X₁ представляет собой R, Y или S, и X₂ представляет собой Y или N; аминокислотную последовательность X₁IX₂GX₃GX₄X₅TYYADSVKG VHCDR2 (SEQ ID NO: 89), где X₁ представляет собой A или S, X₂ представляет собой S или T, X₃ представляет собой S или T, X₄ представляет собой M, G или S, и X₅ представляет собой N, S, L или Y; и аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL VHCDR3 (SEQ ID NO: 37); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQSVGSNLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 48); аминокислотную последовательность GASTRAT VLCDR2 (SEQ ID NO: 49); и аминокислотную последовательность QQHNAFPYT VLCDR3 (SEQ ID NO: 50).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему более чем, например, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05 или 0,06 Да на остаток, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂AMS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 88), где X₁ представляет собой R, Y или S, и X₂ представляет собой Y или N; аминокислотную последовательность X₁IX₂GX₃GX₄X₅TYYADSVKG VHCDR2 (SEQ ID NO: 89), где X₁ представляет собой A или S, X₂ представляет собой S или T, X₃ представляет собой S или T, X₄ представляет собой M, G или S, и X₅ представляет собой N, S, L или Y; и аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL VHCDR3 (SEQ ID NO: 37); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQSVGSNLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 48); аминокислотную последовательность GASTRAT VLCDR2 (SEQ ID NO: 49); и аминокислотную последовательность QQHNAFPYT VLCDR3 (SEQ ID NO: 50).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему менее чем, например, 0,05, 0,04, 0,03 или 0,02 Да на остаток, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂AMS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 88), где X₁ представляет собой R, Y или S, и X₂ представляет собой Y или N; аминокислотную последовательность X₁IX₂GX₃GX₄X₅TYYADSVKG VHCDR2 (SEQ ID NO: 89), где X₁ представляет собой A или S, X₂ представляет собой S или T, X₃ представляет собой S или T, X₄ представляет собой M, G или S, и X₅ представляет собой N, S, L или Y; и аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL VHCDR3 (SEQ ID NO: 37); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQSVGSNLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 48); аминокислотную последовательность GASTRAT VLCDR2 (SEQ ID NO: 49); и аминокислотную последовательность QQHNAFPYT VLCDR3 (SEQ ID NO: 50).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с по меньшей мере одним, двумя, тремя или четырьмя остатками в пределах остатков 158-172 из SEQ ID NO: 105, и/или с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 206-215 из SEQ ID NO: 105; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂AMS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 88), где X₁ представляет собой R, Y или S, и X₂ представляет собой Y или N; аминокислотную последовательность X₁IX₂GX₃GX₄X₅TYYADSVKG VHCDR2 (SEQ ID NO: 89), где X₁ представляет собой A или S, X₂ представляет собой S или T, X₃ представляет собой S или T, X₄ представляет собой M, G или S, и X₅ представляет собой N, S, L или Y; и аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL VHCDR3 (SEQ ID NO: 37); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQSVGSNLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 48); аминокислотную последовательность GASTRAT VLCDR2 (SEQ ID NO: 49); и аминокислотную последовательность QQHNAFPYT VLCDR3 (SEQ ID NO: 50).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172, остаткам 206-215 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 36 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 72, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 136 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(e) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 146 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50; или

(f) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 154 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50.

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 или по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 36 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 72, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 136 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(e) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 146 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50; или

(f) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 154 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50.

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена в одной или нескольких областях белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при его связывании, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105, при этом область, характеризующаяся наибольшим уменьшением среднего уровня водородно-дейтериевого обмена среди одной или нескольких областей, не представляет собой остатки 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 36 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 72, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 136 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(e) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 146 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50; или

(f) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 154 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему более чем, например, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05 или 0,06 Да на остаток, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 36 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 72, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 136 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(e) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 146 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50; или

(f) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 154 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему менее чем, например, 0,05, 0,04, 0,03 или 0,02 Да на остаток, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 37).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с по меньшей мере одним, двумя, тремя или четырьмя остатками в пределах остатков 158-172 из SEQ ID NO: 105, и/или с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 206-215 из SEQ ID NO: 105; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 36 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 72, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 136 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(e) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 146 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50; или

(f) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 154 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172, остаткам 206-215 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 3).

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 или по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 3).

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена в одной или нескольких областях белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при его связывании, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105, при этом область, характеризующаяся наибольшим уменьшением среднего уровня водородно-дейтериевого обмена среди одной или нескольких областей, не представляет собой остатки 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 3).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему более чем, например, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05 или 0,06 Да на остаток, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 3).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему менее чем, например, 0,05, 0,04, 0,03 или 0,02 Да на остаток, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 3).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с по меньшей мере одним, двумя, тремя или четырьмя остатками в пределах остатков 158-172 из SEQ ID NO: 105, и/или с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 206-215 из SEQ ID NO: 105; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 3).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172, остаткам 206-215 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂YWS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 90), где X₁ представляет собой R, G или S, и X₂ представляет собой Y или R; аминокислотную последовательность YIYX₁X₂GSTX₃YNPSLKS VHCDR2 (SEQ ID NO: 91), где X₁ представляет собой G или S, X₂ представляет собой R, S или T, и X₃ представляет собой N или K; и аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP VHCDR3 (SEQ ID NO: 3); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQGISSWLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 14); аминокислотную последовательность AASSLQS VLCDR2 (SEQ ID NO: 15); и аминокислотную последовательность QQGNSFPRT VLCDR3 (SEQ ID NO: 16).

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 или по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂YWS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 90), где X₁ представляет собой R, G или S, и X₂ представляет собой Y или R; аминокислотную последовательность YIYX₁X₂GSTX₃YNPSLKS VHCDR2 (SEQ ID NO: 91), где X₁ представляет собой G или S, X₂ представляет собой R, S или T, и X₃ представляет собой N или K; и аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP VHCDR3 (SEQ ID NO: 3); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQGISSWLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 14); аминокислотную последовательность AASSLQS VLCDR2 (SEQ ID NO: 15); и аминокислотную последовательность QQGNSFPRT VLCDR3 (SEQ ID NO: 16).

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена в одной или нескольких областях белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при его связывании, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105, при этом область, характеризующаяся наибольшим уменьшением среднего уровня водородно-дейтериевого обмена среди одной или нескольких областей, не представляет собой остатки 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂YWS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 90), где X₁ представляет собой R, G или S, и X₂ представляет собой Y или R; аминокислотную последовательность YIYX₁X₂GSTX₃YNPSLKS VHCDR2 (SEQ ID NO: 91), где X₁ представляет собой G или S, X₂ представляет собой R, S или T, и X₃ представляет собой N или K; и аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP VHCDR3 (SEQ ID NO: 3); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQGISSWLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 14); аминокислотную последовательность AASSLQS VLCDR2 (SEQ ID NO: 15); и аминокислотную последовательность QQGNSFPRT VLCDR3 (SEQ ID NO: 16).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему более чем, например, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05 или 0,06 Да на остаток, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂YWS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 90), где X₁ представляет собой R, G или S, и X₂ представляет собой Y или R; аминокислотную последовательность YIYX₁X₂GSTX₃YNPSLKS VHCDR2 (SEQ ID NO: 91), где X₁ представляет собой G или S, X₂ представляет собой R, S или T, и X₃ представляет собой N или K; и аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP VHCDR3 (SEQ ID NO: 3); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQGISSWLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 14); аминокислотную последовательность AASSLQS VLCDR2 (SEQ ID NO: 15); и аминокислотную последовательность QQGNSFPRT VLCDR3 (SEQ ID NO: 16).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему менее чем, например, 0,05, 0,04, 0,03 или 0,02 Да на остаток, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂YWS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 90), где X₁ представляет собой R, G или S, и X₂ представляет собой Y или R; аминокислотную последовательность YIYX₁X₂GSTX₃YNPSLKS VHCDR2 (SEQ ID NO: 91), где X₁ представляет собой G или S, X₂ представляет собой R, S или T, и X₃ представляет собой N или K; и аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP VHCDR3 (SEQ ID NO: 3); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQGISSWLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 14); аминокислотную последовательность AASSLQS VLCDR2 (SEQ ID NO: 15); и аминокислотную последовательность QQGNSFPRT VLCDR3 (SEQ ID NO: 16).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с по меньшей мере одним, двумя, тремя или четырьмя остатками в пределах остатков 158-172 из SEQ ID NO: 105, и/или с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 206-215 из SEQ ID NO: 105; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂YWS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 90), где X₁ представляет собой R, G или S, и X₂ представляет собой Y или R; аминокислотную последовательность YIYX₁X₂GSTX₃YNPSLKS VHCDR2 (SEQ ID NO: 91), где X₁ представляет собой G или S, X₂ представляет собой R, S или T, и X₃ представляет собой N или K; и аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP VHCDR3 (SEQ ID NO: 3); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQGISSWLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 14); аминокислотную последовательность AASSLQS VLCDR2 (SEQ ID NO: 15); и аминокислотную последовательность QQGNSFPRT VLCDR3 (SEQ ID NO: 16).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172, остаткам 206-215 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 60 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 2 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16; или

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 163, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 162 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 или по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 60 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 2 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16; или

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 163, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 162 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105. В одном варианте осуществления связывание антитела обеспечивает уменьшение среднего уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 и по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена в одной или нескольких областях белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при его связывании, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105, при этом область, характеризующаяся наибольшим уменьшением среднего уровня водородно-дейтериевого обмена среди одной или нескольких областей, не представляет собой остатки 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 60 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 2 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16; или

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 163, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 162 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему более чем, например, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05 или 0,06 Да на остаток, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 60 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 2 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16; или

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 163, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 162 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению среднего уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему менее чем, например, 0,05, 0,04, 0,03 или 0,02 Да на остаток, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, как описано в примере 2, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7-8 (например, рН 7,5) и комнатной температуре; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 60 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 2 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16; или

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 163, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 162 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела связывается с по меньшей мере одним, двумя, тремя или четырьмя остатками в пределах остатков 158-172 из SEQ ID NO: 105, и/или с по меньшей мере одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью остатками в пределах остатков 206-215 из SEQ ID NO: 105; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 60 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 2 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16; или

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 163, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 162 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 37).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂AMS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 88), где X₁ представляет собой R, Y или S, и X₂ представляет собой Y или N; аминокислотную последовательность X₁IX₂GX₃GX₄X₅TYYADSVKG VHCDR2 (SEQ ID NO: 89), где X₁ представляет собой A или S, X₂ представляет собой S или T, X₃ представляет собой S или T, X₄ представляет собой M, G или S, и X₅ представляет собой N, S, L или Y; и аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL VHCDR3 (SEQ ID NO: 37); и

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQSVGSNLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 48); аминокислотную последовательность GASTRAT VLCDR2 (SEQ ID NO: 49); и аминокислотную последовательность QQHNAFPYT VLCDR3 (SEQ ID NO: 50).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 36 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 72, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 136 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50;

(e) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 146 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50; или

(f) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 154 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50.

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1; и

(ii) молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP определяющей комплементарность области 3 тяжелой цепи (VHCDR3) (SEQ ID NO: 3).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1; и

(ii) молекула антитела содержит:

(а) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность X₁X₂YWS определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (VHCDR1) (SEQ ID NO: 90), где X₁ представляет собой R, G или S, и X₂ представляет собой Y или R; аминокислотную последовательность YIYX₁X₂GSTX₃YNPSLKS VHCDR2 (SEQ ID NO: 91), где X₁ представляет собой G или S, X₂ представляет собой R, S или T, и X₃ представляет собой N или K; и аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP VHCDR3 (SEQ ID NO: 3); и/или

(b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность RASQGISSWLA определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (VLCDR1) (SEQ ID NO: 14); аминокислотную последовательность AASSLQS VLCDR2 (SEQ ID NO: 15); и аминокислотную последовательность QQGNSFPRT VLCDR3 (SEQ ID NO: 16).

В одном аспекте в данном документе раскрыта молекула антитела, которая связывается с CD73 человека, где

(i) молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1; и

(ii) молекула антитела содержит:

(a) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 60 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(b) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16;

(c) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 2 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16; или

(d) VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 163, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 162 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16.

Пути применения молекул антитела к CD73

Молекулы антител, раскрытые в данном документе, могут модулировать (например, усиливать, стимулировать, увеличивать, ингибировать, уменьшать или нейтрализовать) одну или несколько видов активности CD73. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела вызывает одно или несколько из ингибирования или уменьшения ферментативной активности CD73; ингибирования превращения аденозинмонофосфата (AMP) в аденозин или уменьшение его уровня; и увеличения уровня пролиферации Т-клеток, стимулированных посредством антитела к CD3/антитела к CD28, например, Т-клеток CD4+, в присутствии аденозинмонофосфата (AMP).

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела ингибирует или уменьшает ферментативную активность CD73 (например, растворимого CD73 человека или мембраносвязанного CD73 человека), например опосредованное CD73 человека превращение аденозинмонофосфата (AMP) в аденозин, что, например, измеряют с помощью способа, описанного в данном документе, например с помощью количественного определения фосфата по реакции с малахитовым зеленым (MG) или модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, как описано в примере 1. В одном варианте осуществления молекула антитела ингибирует ферментативную активность мембраносвязанного CD73 человека на по меньшей мере приблизительно 60%, 70%, 80%, или 90%, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), включающего следующие стадии:

(i) инкубирование титрованной дозы молекулы антитела (например, 1000 нг/мл) с 20000 клеток/мл линии клеток рака человека, экспрессирующих CD73 человека (например, линии клеток рака молочной железы человека MDA-MB-231 или линии клеток рака яичника человека SKOV3) в течение 240 минут при 37°C в присутствии 100 мкМ AMP;

(ii) измерение уровня исчезновения AMP с применением модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), как описано в примере 1; и

(iii) вычисление процента ингибирования, опосредованного молекулой антитела, с применением контроля в нулевой момент времени в качестве 100% ингибирования и контроля отсутствия антитела в качестве 0% ингибирования.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела увеличивает уровень пролиферации Т-клеток, стимулированных антителом к CD3/антителом к CD28, например Т-клеток CD4+, в присутствии аденозинмонофосфата (AMP), что, например, измеряют с помощью описанного в данном документе способа, например, с помощью анализа пролиферации клеток CellTrace Violet (CTV), например анализа из примера 1.

В определенных аспектах предусмотрен способ модулирования (например, стимулирования или ингибирования) иммунного ответа у субъекта. Способ предусматривает введение субъекту молекулы антитела к CD73, раскрытой в данном документе (например, терапевтически эффективного количества молекулы антитела к CD73), отдельно или в комбинации с одним или несколькими средствами или процедурами (например, в комбинации с видами противоопухолевой терапии, например химиотерапией, лучевой терапией и/или другими иммуномодулирующими средствами) таким образом, чтобы обеспечить модулирование иммунного ответа у субъекта. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела ингибирует, уменьшает или нейтрализует иммунный ответ у субъекта.

Субъект может представлять собой млекопитающее, например обезьяну, примата, предпочтительно высшего примата, например человека (например, пациента, имеющего нарушение, описанное в данном документе, или подверженного риску его возникновения). В некоторых вариантах осуществления субъект нуждается в усилении иммунного ответа, а в некоторых вариантах осуществления субъект нуждается в ингибировании иммунного ответа. В одном варианте осуществления субъект имеет нарушение или подвержен риску возникновения нарушения, описанного в данном документе, например рака, как описано в данном документе. В определенных вариантах осуществления субъект страдает иммунной недостаточностью или подвержен риску ее возникновения. Например, субъект подвергается или подвергся лечению с помощью химиотерапии и/или лучевой терапии.

В одном аспекте предусмотрен способ стимулирования иммунного ответа у субъекта. Способ предусматривает введение субъекту молекулы антитела к CD73, описанной в данном документе, например терапевтически эффективного количества молекулы антитела к CD73, отдельно или в комбинации с одним или несколькими средствами или процедурами.

В одном аспекте предусмотрен способ лечения (например, одно или несколько из уменьшения интенсивности, ингибирования или задержки прогрессирования) рака или опухоли у субъекта. Способ предусматривает введение субъекту молекулы антитела к CD73, описанной в данном документе, например терапевтически эффективного количества молекулы антитела к CD73, отдельно или в комбинации с одним или несколькими средствами или процедурами.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела вводят в комбинации со вторым терапевтическим средством или процедурой. В некоторых вариантах осуществления второе терапевтическое средство или процедура выбраны из одного или нескольких из химиотерапии, таргетной противораковой терапии, онколитического лекарственного средства, цитотоксического средства, средства иммунотерапии, цитокина, хирургической процедуры, процедуры обработки облучением, активатора костимулирующей молекулы, ингибитора ингибиторной молекулы (например, ингибитора ингибитора контрольной точки), вакцины или средства клеточной терапии. В некоторых вариантах осуществления второе терапевтическое средство выбрано из одного или нескольких из 1) ингибитора протеинкиназы С (РКС); 2) ингибитора белка теплового шока 90 (HSP90); 3) ингибитора фосфоинозитид-3-киназы (PI3K) и/или мишени рапамицина (mTOR); 4) ингибитора цитохрома P450 (например, ингибитора CYP17 или ингибитора 17-альфа-гидроксилазы/C17-20-лиазы); 5) железохелатирующего средства; 6) ингибитора ароматазы; 7) ингибитора р53, например ингибитора взаимодействия р53/Mdm2; 8) индуктора апоптоза; 9) ингибитора ангиогенеза; 10) ингибитора альдостеронсинтазы; 11) ингибитора рецептора "smoothened" (SMO); 12) ингибитора рецептора пролактина (PRLR); 13) ингибитора передачи сигналов Wnt; 14) ингибитора CDK4/6; 15) ингибитора рецептора 2 фактора роста фибробластов (FGFR2)/рецептора 4 фактора роста фибробластов (FGFR4); 16) ингибитора макрофагального колониестимулирующего фактора (M-CSF); 17) ингибитора одного или нескольких из c-KIT, высвобождения гистамина, Flt3 (например, FLK2/STK1) или PKC; 18) ингибитора одного или нескольких из VEGFR-2 (например, FLK-1/KDR), PDGFR-бета, c-KIT или Raf-киназы C; 19) агониста соматостатина и/или ингибитора высвобождения гормона роста; 20) ингибитора киназы анапластической лимфомы (ALK); 21) ингибитора рецептора инсулиноподобного фактора роста 1 (IGF-1R); 22) ингибитора P-гликопротеина 1; 23) ингибитора рецептора фактора роста эндотелия сосудов (VEGFR); 24) ингибитора киназы BCR-ABL; 25) ингибитора FGFR; 26) ингибитора CYP11B2; 27) ингибитора HDM2, например ингибитора взаимодействия HDM2-p53; 28) ингибитора тирозинкиназы; 29) ингибитора c-MET; 30) ингибитора JAK; 31) ингибитора DAC; 32) ингибитора 11β-гидроксилазы; 33) ингибитора IAP; 34) ингибитора PIM-киназы; 35) ингибитора поркупина; 36) ингибитора BRAF, например BRAF V600E или BRAF дикого типа; 37) ингибитора HER3; 38) ингибитора MEK; или 39) ингибитора липидкиназы.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с ингибитором PD-1. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 выбран из группы, состоящей из PDR001, ниволумаба, пембролизумаба, пидилизумаба, MEDI0680, REGN2810, TSR-042, PF-06801591 и AMP-224. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела к PD-1. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 250 мг до 350 мг, от приблизительно 350 мг до 450 мг или от приблизительно 450 мг до 550 мг, например в дозе приблизительно 300 мг или приблизительно 400 мг, например раз в три недели (Q3W) или раз в четыре недели (Q4W), например в дозе приблизительно 300 мг Q3W или в дозе приблизительно 400 мг Q4W. В одном варианте осуществления молекулу антитела к PD-1 вводят, например путем инфузии в течение периода времени 30 минут или периода времени не более 2 часов. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, от приблизительно 100 мг до 500 мг, от приблизительно 500 мг до 1000 мг, от приблизительно 1000 мг до 1500 мг, от приблизительно 1500 мг до 2000 мг, от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, от приблизительно 2500 мг до 3000 мг, от приблизительно 3000 мг до 3500 мг или от приблизительно 3500 мг до 4000 мг, например в дозе приблизительно 6 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 60 мг, приблизительно 200 мг, приблизительно 600 мг, приблизительно 1200 мг, приблизительно 2400 мг, приблизительно 3000 мг или приблизительно 3600 мг, например раз в неделю (QW), раз в две недели (Q2W) или раз в четыре недели (Q4W), например Q2W. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например путем инфузии, в течение периода времени 30 минут, периода времени 1 час или периода времени не более 2 часов. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 20 мг, Q2W, и молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 60 мг, Q2W, и молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 100 мг до 500 мг, например 200 мг, Q2W, и молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 500 мг до 1000 мг, например 600 мг, Q2W, и молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 1000 мг до 1500 мг, например 1200 мг, Q2W, и молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, например 2400 мг, Q2W, и молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 3000 мг до 3500 мг, например 3000 мг, Q2W, и молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 3500 мг до 4000 мг, например 3600 мг, Q2W, и молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с ингибитором PD-L1. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-L1 выбран из группы, состоящей из FAZ053, атезолизумаба, авелумаба, дурвалумаба и BMS-936559.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с ингибитором CTLA-4. В некоторых вариантах осуществления ингибитор CTLA-4 представляет собой ипилимумаб или тремелимумаб.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с ингибитором TIM-3. В некоторых вариантах осуществления ингибитор TIM-3 выбран из MGB453, TSR-022 или LY3321367.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с ингибитором LAG-3. В некоторых вариантах осуществления ингибитор LAG-3 выбран из группы, состоящей из LAG525, BMS-986016, TSR-033, MK-4280 и REGN3767.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с агонистом GITR. В некоторых вариантах осуществления агонист GITR выбран из группы, состоящей из GWN323 (Novartis), BMS-986156 (BMS), MK-4166 или MK-1248 (Merck), TRX518 (Leap Therapeutics), INCAGN1876 (Incyte/Agenus), AMG 228 (Amgen) и INBRX-110 (Inhibrx).

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с молекулой полиспецифического антитела к CD3. В некоторых вариантах осуществления молекула полиспецифического антитела к CD3 представляет собой молекулу биспецифического антитела к CD3 x к CD123 (например, XENP14045) или молекулу биспецифического антитела к CD3 x к CD20 (например, XENP13676).

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с молекулой цитокина. В некоторых вариантах осуществления молекула цитокина представляет собой IL-15, образующий комплекс с растворимой формой альфа-рецептора IL-15 (IL-15Ra).

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с агонистом STING.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с ингибитором макрофагального колониестимулирующего фактора (M-CSF), при этом необязательно ингибитор M-CSF представляет собой MCS110.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с ингибитором CSF-1R, при этом необязательно ингибитор CSF-1R представляет собой BLZ945.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с ингибитором индоламин-2,3-диоксигеназы (IDO) и/или триптофан-2,3-диоксигеназы (TDO).

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с ингибитором TGF-β.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с антагонистом аденозинового рецептора A2AR. В некоторых вариантах антагонист аденозинового рецептора A2AR выбран из группы, состоящей из PBF509, CPI444, AZD4635, випадента, GBV-2034 и AB928. В некоторых вариантах осуществления антагонист аденозинового рецептора A2AR выбран из группы, состоящей из 5-бром-2,6-ди-(1H-пиразол-1-ил)пиримидин-4-амина; (S)-7-(5-метилфуран-2-ил)-3-((6-(((тетрагидрофуран-3-ил)окси)метил)пиридин-2-ил)метил)-3Н-[1,2,3]триазоло[4,5-d]пиримидин-5-амина; (R)-7-(5-метилфуран-2-ил)-3-((6-(((тетрагидрофуран-3-ил)окси)метил)пиридин-2-ил)метил)-3Н-[1,2,3]триазоло[4,5-d]пиримидин-5-амина или его рацемата; 7-(5-метилфуран-2-ил)-3-((6-(((тетрагидрофуран-3-ил)окси)метил)пиридин-2-ил)метил)-3Н-[1,2,3]триазоло[4,5-d]пиримидин-5-амина и 6-(2-хлор-6-метилпиридин-4-ил)-5-(4-фторфенил)-1,2,4-триазин-3-амина. В некоторых вариантах осуществления антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 20 мг до 60 мг, от приблизительно 60 мг до 100 мг, от приблизительно 100 мг до 140 мг, от приблизительно 140 мг до 180 мг, от приблизительно 180 мг до 220 мг, от приблизительно 220 мг до 260 мг, от приблизительно 260 мг до 300 мг, от приблизительно 300 мг до 340 мг, от приблизительно 340 мг до 380 мг, от приблизительно 380 мг до 480 мг, от приблизительно 480 мг до 580 мг или от приблизительно 580 мг до 680 мг, например в дозе приблизительно 40 мг, приблизительно 80 мг, приблизительно 160 мг, приблизительно 320 мг, приблизительно 480 мг или приблизительно 620 мг, например один раз в сутки (QD), два раза в сутки (BID) или три раза в сутки (TID), например BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, от приблизительно 100 мг до 500 мг, от приблизительно 500 мг до 1000 мг, от приблизительно 1000 мг до 1500 мг, от приблизительно 1500 мг до 2000 мг, от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, от приблизительно 2500 мг до 3000 мг, от приблизительно 3000 мг до 3500 мг или от приблизительно 3500 мг до 4000 мг, например в дозе приблизительно 6 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 60 мг, приблизительно 200 мг, приблизительно 600 мг, приблизительно 1200 мг, приблизительно 2400 мг, приблизительно 3000 мг или приблизительно 3600 мг, например раз в неделю (QW), раз в две недели (Q2W) или раз в четыре недели (Q4W), например Q2W. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 20 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 20 мг до 60 мг, например 40 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 20 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 60 мг до 100 мг, например 80 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 20 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 140 мг до 180 мг, например 160 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 20 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 300 мг до 340 мг, например 320 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например, 60 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 20 мг до 60 мг, например, 40 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 60 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 60 мг до 100 мг, например 80 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 60 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 140 мг до 180 мг, например 160 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 60 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 300 мг до 340 мг, например 320 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 100 мг до 500 мг, например 200 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 20 мг до 60 мг, например 40 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 100 мг до 500 мг, например 200 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 60 мг до 100 мг, например 80 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 100 мг до 500 мг, например 200 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 140 мг до 180 мг, например 160 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 100 мг до 500 мг, например 200 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 300 мг до 340 мг, например 320 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 500 мг до 1000 мг, например 600 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 20 мг до 60 мг, например 40 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 500 мг до 1000 мг, например 600 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 60 мг до 100 мг, например 80 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 500 мг до 1000 мг, например 600 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 140 мг до 180 мг, например 160 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 500 мг до 1000 мг, например 600 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 300 мг до 340 мг, например 320 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 1000 мг до 1500 мг, например 1200 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 20 мг до 60 мг, например 40 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 1000 мг до 1500 мг, например 1200 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 60 мг до 100 мг, например 80 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 1000 мг до 1500 мг, например, 1200 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 140 мг до 180 мг, например 160 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 1000 мг до 1500 мг, например 1200 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 300 мг до 340 мг, например 320 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, например 2400 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 20 мг до 60 мг, например 40 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, например 2400 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 60 мг до 100 мг, например 80 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, например 2400 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 140 мг до 180 мг, например 160 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, например 2400 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 300 мг до 340 мг, например 320 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, например 2400 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 480 мг до 580 мг, например 480 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, например 2400 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 580 мг до 680 мг, например 620 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 3000 мг до 3500 мг, например 3000 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 300 мг до 340 мг, например 320 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 3000 мг до 3500 мг, например 3000 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 480 мг до 580 мг, например 480 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 3000 мг до 3500 мг, например 3000 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 580 мг до 680 мг, например 620 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 3500 мг до 4000 мг, например 3600 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 300 мг до 340 мг, например 320 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 3500 мг до 4000 мг, например 3600 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 480 мг до 580 мг, например 480 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 3500 мг до 4000 мг, например 3600 мг, Q2W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 580 мг до 680 мг, например 620 мг, BID.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с ингибитором PD-1 и антагонистом аденозинового рецептора A2AR. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, от приблизительно 100 мг до 500 мг, от приблизительно 500 мг до 1000 мг, от приблизительно 1000 мг до 1500 мг, от приблизительно 1500 мг до 2000 мг, от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, от приблизительно 2500 мг до 3000 мг, от приблизительно 3000 мг до 3500 мг или от приблизительно 3500 мг до 4000 мг, например в дозе приблизительно 6 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 60 мг, приблизительно 200 мг, приблизительно 600 мг, приблизительно 1200 мг, приблизительно 2400 мг, приблизительно 3000 мг или приблизительно 3600 мг, например раз в неделю (QW), раз в две недели (Q2W) или раз в четыре недели (Q4W), например Q2W. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела к PD-1. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 250 мг до 350 мг, от приблизительно 350 мг до 450 мг или от приблизительно 450 мг до 550 мг, например в дозе приблизительно 300 мг или приблизительно 400 мг, например раз в три недели (Q3W) или раз в четыре недели (Q4W), например в дозе приблизительно 300 мг Q3W или в дозе приблизительно 400 мг Q4W. В некоторых вариантах осуществления антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 20 мг до 60 мг, от приблизительно 60 мг до 100 мг, от приблизительно 100 мг до 140 мг, от приблизительно 140 мг до 180 мг, приблизительно 180 мг до 220 мг, от приблизительно 220 мг до 260 мг, от приблизительно 260 мг до 300 мг, от приблизительно 300 мг до 340 мг, от приблизительно 340 мг до 380 мг, от приблизительно 380 мг до 480 мг, от приблизительно 480 мг до 580 мг или от приблизительно 580 мг до 680 мг, например в дозе приблизительно 40 мг, приблизительно 80 мг, приблизительно 160 мг, приблизительно 320 мг, приблизительно 480 мг или приблизительно 620 мг, например один раз в сутки (QD), два раза в сутки (BID) или три раза в сутки (TID), например BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 20 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 20 мг до 60 мг, например 40 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 20 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 60 мг до 100 мг, например 80 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 20 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 140 мг до 180 мг, например 160 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 20 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 300 мг до 340 мг, например 320 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 60 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 20 мг до 60 мг, например 40 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 60 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 60 мг до 100 мг, например 80 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 60 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 140 мг до 180 мг, например 160 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, например 60 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 300 мг до 340 мг, например 320 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 100 мг до 500 мг, например 200 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 20 мг до 60 мг, например 40 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 100 мг до 500 мг, например 200 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 60 мг до 100 мг, например 80 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 100 мг до 500 мг, например 200 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 140 мг до 180 мг, например 160 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 100 мг до 500 мг, например 200 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 300 мг до 340 мг, например 320 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 500 мг до 1000 мг, например 600 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 20 мг до 60 мг, например 40 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 500 мг до 1000 мг, например 600 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например, 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 60 мг до 100 мг, например 80 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 500 мг до 1000 мг, например 600 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например, 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 140 мг до 180 мг, например 160 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 500 мг до 1000 мг, например 600 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 300 мг до 340 мг, например 320 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 1000 мг до 1500 мг, например 1200 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 20 мг до 60 мг, например 40 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 1000 мг до 1500 мг, например 1200 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 60 мг до 100 мг, например 80 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 1000 мг до 1500 мг, например 1200 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 140 мг до 180 мг, например 160 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 1000 мг до 1500 мг, например 1200 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 300 мг до 340 мг, например 320 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, например 2400 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 20 мг до 60 мг, например 40 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, например 2400 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 60 мг до 100 мг, например 80 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, например 2400 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 140 мг до 180 мг, например 160 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, например 2400 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 300 мг до 340 мг, например 320 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, например 2400 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 480 мг до 580 мг, например 480 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, например 2400 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 580 мг до 680 мг, например 620 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 3000 мг до 3500 мг, например 3000 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 300 мг до 340 мг, например 320 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 3000 мг до 3500 мг, например 3000 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 480 мг до 580 мг, например 480 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 3000 мг до 3500 мг, например 3000 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 580 мг до 680 мг, например 620 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 3500 мг до 4000 мг, например 3600 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 300 мг до 340 мг, например 320 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 3500 мг до 4000 мг, например 3600 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 480 мг до 580 мг, например 480 мг, BID. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 3500 мг до 4000 мг, например 3600 мг, Q2W, молекулу антитела к PD-1 вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 350 мг до 450 мг, например 400 мг, Q4W, и антагонист аденозинового рецептора A2AR вводят, например перорально, в дозе от приблизительно 580 мг до 680 мг, например 620 мг, BID.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с ингибитором PD-L1 и антагонистом аденозинового рецептора A2AR.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с средством терапии на основе Т-клеток с химерным антигенным рецептором (CAR). В некоторых вариантах осуществления средство терапии на основе Т-клеток с CAR представляет собой CTL019.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в комбинации с одним или несколькими средствами, описанными в таблице 18, например, одним или несколькими из 1) ингибитора протеинкиназы С (РКС); 2) ингибитора белка теплового шока 90 (HSP90); 3) ингибитора фосфоинозитид-3-киназы (PI3K) и/или мишени рапамицина (mTOR); 4) ингибитора цитохрома P450 (например, ингибитора CYP17 или ингибитора 17-альфа-гидроксилазы/C17-20-лиазы); 5) железохелатирующего средства; 6) ингибитора ароматазы; 7) ингибитора р53, например ингибитора взаимодействия р53/Mdm2; 8) индуктора апоптоза; 9) ингибитора ангиогенеза; 10) ингибитора альдостеронсинтазы; 11) ингибитора рецептора "smoothened" (SMO); 12) ингибитора рецептора пролактина (PRLR); 13) ингибитора передачи сигналов Wnt; 14) ингибитора CDK4/6; 15) ингибитора рецептора 2 фактора роста фибробластов (FGFR2)/рецептора 4 фактора роста фибробластов (FGFR4); 16) ингибитора макрофагального колониестимулирующего фактора (M-CSF); 17) ингибитора одного или нескольких из c-KIT, высвобождения гистамина, Flt3 (например, FLK2/STK1) или PKC; 18) ингибитора одного или нескольких из VEGFR-2 (например, FLK-1/KDR), PDGFR-бета, c-KIT или Raf-киназы C; 19) агониста соматостатина и/или ингибитора высвобождения гормона роста; 20) ингибитора киназы анапластической лимфомы (ALK); 21) ингибитора рецептора инсулиноподобного фактора роста 1 (IGF-1R); 22) ингибитора P-гликопротеина 1; 23) ингибитора рецептора фактора роста эндотелия сосудов (VEGFR); 24) ингибитора киназы BCR-ABL; 25) ингибитора FGFR; 26) ингибитора CYP11B2; 27) ингибитора HDM2, например ингибитора взаимодействия HDM2-p53; 28) ингибитора тирозинкиназы; 29) ингибитора c-MET; 30) ингибитора JAK; 31) ингибитора DAC; 32) ингибитора 11β-гидроксилазы; 33) ингибитора IAP; 34) ингибитора PIM-киназы; 35) ингибитора поркупина; 36) ингибитора BRAF, например BRAF V600E или BRAF дикого типа; 37) ингибитора HER3; 38) ингибитора MEK; или 39) ингибитора липидкиназы, описанных в данном документе и в таблице 18.

В определенных вариантах осуществления рак, подвергаемый лечению посредством молекулы антитела к CD73 отдельно или в комбинации со вторым терапевтическим средством или процедурой, включает без ограничения солидную опухоль, гематологический рак (например, лейкоз, лимфому, миелому, например множественную миелому) и метастатическое поражение. В некоторых вариантах осуществления рак выбран из рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого), рака поджелудочной железы (например, аденокарциномы протоков поджелудочной железы), рака молочной железы (например, трижды негативного рака молочной железы), меланомы, рака головы и шеи (например, плоскоклеточного рака головы и шеи), колоректального рака (например, колоректального рака с микросателлитной стабильностью (MSS)), рака яичника или рака почки (например, почечно-клеточной карциномы). В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73, используемая отдельно или в комбинации со вторым терапевтическим средством или процедурой, контролирует рост опухоли, уменьшает уровень метастазирования и/или улучшает выживаемость.

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят в дозе от приблизительно 100 мг до 1600 мг, от приблизительно 100 мг до 1400 мг, от приблизительно 100 мг до 1200 мг, от приблизительно 100 мг до 1000 мг, от приблизительно 100 мг до 800 мг, от приблизительно 100 мг до 600 мг, от приблизительно 100 мг до 400 мг, от приблизительно 100 мг до 200 мг или приблизительно 100 мг, приблизительно 180 мг или приблизительно 200 мг, например раз в две недели. В одном варианте осуществления молекулу антитела вводят в дозе по меньшей мере приблизительно 180 мг раз в две недели.

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе от приблизительно 5 мг до 100 мг, от приблизительно 100 мг до 500 мг, от приблизительно 500 мг до 1000 мг, от приблизительно 1000 мг до 1500 мг, от приблизительно 1500 мг до 2000 мг, от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, от приблизительно 2500 мг до 3000 мг, от приблизительно 3000 мг до 3500 мг или от приблизительно 3500 мг до 4000 мг, например раз в неделю (QW), раз в две недели (Q2W) или раз в четыре недели (Q4W). В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 6 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 60 мг, приблизительно 200 мг, приблизительно 600 мг, приблизительно 1200 мг, приблизительно 2400 мг, приблизительно 3000 мг или приблизительно 3600 мг, например QW, Q2W или Q4W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 60 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 200 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 600 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 1200 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 2400 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 3000 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 3600 мг Q2W.

Кроме того, в настоящем изобретении предусмотрены способы усиления иммунного ответа на антиген у субъекта, предусматривающие введение субъекту (i) антигена; и (ii) молекулы антитела к CD73, раскрытой в данном документе, таким образом, что иммунный ответ на антиген у субъекта усиливается. Антигеном может быть, например, опухолевый антиген, вирусный антиген, бактериальный антиген или антиген из патогена.

Молекулу антитела к CD73 можно вводить субъекту системно (например, перорально, парентерально, подкожно, внутривенно, ректально, внутримышечно, внутрибрюшинно, интраназально, трансдермально или посредством ингаляции или внутриполостной установки) или локально. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 вводят внутривенно.

Молекулу антитела к CD73 можно применять отдельно в неконъюгированной форме, или она может быть связана с веществом, например цитотоксическим средством или фрагментом (например, терапевтическим лекарственным средством; соединением, излучающим радиацию; молекулами растительного, грибкового или бактериального происхождения или биологическим белком (например, белковым токсином) или частицей (например, рекомбинантной вирусной частицей, например посредством белка оболочки вируса). Например, антитело к CD73 может быть связано с радиоактивным изотопом, таким как α-, β- или γ-излучатель, или β- и γ-излучатель.

Дозировки и терапевтические схемы приема молекулы антитела к CD73 могут быть определены специалистом в данной области техники.

В другом аспекте предусмотрен способ обнаружения CD73 в биологическом образце или у субъекта. В одном варианте осуществления способ предусматривает (i) приведение образца или субъекта (и необязательно эталонного образца или субъекта) в контакт с молекулой антитела по любому из пп. 1-57 в условиях, которые обеспечивают взаимодействие молекулы антитела и CD73, и (ii) обнаружение образования комплекса между молекулой антитела и образцом или субъектом (и необязательно эталонным образцом или субъектом).

Молекулы антител, описанные в данном документе, являются предпочтительными для применения в способах, описанных в данном документе, хотя можно применять другие антитела к CD73 вместо или в комбинации с молекулой антитела к CD73 по настоящему изобретению.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

На фиг. 1 представлен график, отображающий уровень связывания антител к CD73 или антитела изотипического контроля с Т-клетками CD8+, измеренный с помощью проточной цитометрии. Значения MFI нанесены на график в виде зависимости от концентрации антител. Исследуемые антитела представляют собой антитела к CD73 350, 356, 358, 373, 374, 377 и 379, а также антитело изотипического контроля, все экспрессируемые в формате.B.

На фиг. 2А и 2В представлены графики, показывающие результаты количественного определения неорганического фосфата по реакции с малахитовым зеленым, в котором исследуют способность антитела к CD73 ингибировать опосредованное CD73 превращение аденозинмонофосфата (AMP) в аденозин. Скорость высвобождения неорганического фосфата (Pi) нанесена на график в виде зависимости от исследуемых концентраций AMP. На фиг. 2A рекомбинантный CD73 человека инкубировали с AMP, представляющим собой субстрат, только с буфером ("Km hCD73") или в присутствии антитела изотипического контроля IgG1 ("ISO.C"). На фиг. 2B, рекомбинантный CD73 инкубировали с AMP только с буфером ("Km hCD73") или в присутствии антитела к CD73 350.C в указанных концентрациях ("1 мкг/мл 350.C", "0,3 мкг/мл 350.С" или "0,1 мкг/мл 350.С").

На фиг. 3A, 3B и 3C представлены графики, показывающие результаты количественного определения фосфата по реакции с малахитовым зеленым (MG), в котором определяют способность антитела к CD73 ингибировать ферментативную активность рекомбинантного растворимого CD73 человека или макака-крабоеда. % INH образования фосфата наносят на график в виде зависимости от концентраций антител к CD73 для исследований с применением рекомбинантного CD73 человека (фиг. 3A и 3B) или CD73 макака-крабоеда (фиг. 3C). Исследуемые антитела представляют собой антитела к CD73 350, 356, 373 и 374, экспрессируемые в формате.A или.B.

На фиг. 4 представлен график, показывающий результаты модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), в котором исследуют активность ингибирования ферментов антител к CD73 в отношении CD73, выделенного из линии клеток рака молочной железы MDA-MB-231. % INH нанесен на график в виде зависимости от значений диапазона концентраций антитела к CD73. Исследуемые антитела представляют собой антитела к CD73 350 и 373, экспрессируемые либо в формате.A, либо.B, антитело изотипического контроля, представляющее собой IgG4 S228P ("ISO.A"), и антитело изотипического контроля, представляющее собой IgG4 S228P/L235E- ("ISO.B").

На фиг. 5 представлен график, показывающий результаты модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), в котором исследуют способность антител к CD73 ингибировать ферментативную активность CD73 в сыворотке от пациента с раком поджелудочной железы. % INH превращения AMP нанесено на график в виде зависимости от концентраций антитела к CD73. Исследуемые антитела к CD73 представляют собой антитела 350, 356, 358, 373, 374, 377 и 379, все экспрессируемые в формате.B.

На фиг.6 представлен график, показывающий уровень ингибирования CD73, экспрессируемого на поверхности линии клеток рака молочной железы MDA-MB-231, измеренное с применением количественного определения фосфата по реакции с малахитовым зеленым. % INH превращения AMH нанесен на график в виде зависимости по диапазону концентраций антитела к CD73. Исследуемые антитела к CD73 представляют собой антитела 350, 356, 358, 373, 374, 377 и 379, все в формате.B.

Фиг. 7А, 7В, 7С и 7D представляют собой гистограммы, на которых показаны результаты модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), в котором исследуют способность антител к CD73 ингибировать ферментативную активность CD73, экспрессируемого на поверхности линии клеток рака молочной железы человека MDA-MB-231 (фиг. 7A и 7C) или линии клеток рака молочной железы мыши 4T1 (фиг. 7B и 7D). По оси Y показан процент ингибирования относительно контроля без антител (полное превращение) и контроля в нулевой момент времени (без превращения). Для каждого антитела столбики слева направо представляют дозы 10, 3, 1 и 0,3 мкг/мл. Исследуемые антитела представляют собой антитела 918, 350, 356 и 358 линии 1 (фиг. 7A и 7B) и антитела 930, 373, 374, 376, 377, и 379 линии 3 (фиг. 7C и 7D).

Фиг. 8A и 8B представляют собой графики, на которых показана активность ингибирования фермента антител к CD73 в отношении поверхностного CD73, экспрессируемого на линии клеток рака молочной железы человека MDA-MB-231 или на линии клеток рака яичника человека SKOV3, измеренная с помощью модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG). % INH нанесен на график в виде зависимости от значений диапазона концентраций антитела к CD73. Исследуемые антитела к CD73 представляют собой антитела 350 и 373, экспрессируемые в формате.A или .B.

Фиг. 9А и 9В представляют собой графики, аналогичные таковым на фиг. 8A и 8B. Исследуемые антитела представляют собой антитела к CD73 350, 356, 373 и 374 в формате.A или .B.

Фиг. 10 представляет собой график, на котором показан уровень ингибирования CD73 человека, сверхэкспрессируемого на клетках HEK 293, антителами к CD73, измеренный с помощью модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG). % INH превращения AMH нанесен на график в виде зависимости от значений диапазона концентраций антитела к CD73. Исследуемые антитела представляют собой антитела к CD73 350, 356, 373 и 374 в формате.A или .B.

Фиг. 11A и 11B представляют собой графики, на которых показан уровень ингибирования CD73, экспрессируемого на первичных PBMC человека, выделенных от двух отдельных доноров, посредством антител к CD73, измеренный с помощью модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG). % INH нанесен на график в виде зависимости от значений диапазона концентраций антитела к CD73. Исследуемые антитела к CD73 представляют собой антитела 350, 356 и 358, все в формате.B.

Фиг. 12А и 12В представляют собой графики, на которых показан уровень пролиферации Т-клеток CD4+, стимулированных антителом к CD3/28, в присутствии AMP и антитела к CD73. Индекс пролиферации, мера деления Т-клеток, нанесен на график в виде зависимости от значений диапазона концентраций антител. На фиг. 12А показаны результаты исследования, в котором исследуют антитела к CD73 350, 356, 358, 374, 377 и 379, все в формате.B. На фиг. 12B показаны результаты исследования с применением антител 350 и 372, экспрессируемые в формате.A или .B.

Фиг. 13 представляет собой гистограмму, на которой показаны результаты исследования ксенотрансплантата, в котором исследуют способность антитела к CD73 ингибировать ферментативную активность CD73 in vivo. По оси Y показаны уровни аденозина и инозина в сыворотке крови мышей с иммунной недостаточностью, которым имплантировали линию клеток рака молочной железы с высоким уровнем экспрессии CD73 (MDA-MB-231), измеренные с помощью масс-спектрометрии. Антитела к CD73 350, 356, 373 и 374, экспрессируемые в формате.A или .B, вводили внутрибрюшинно в дозе 20 или 200 мкг/мышь. Контрольное антитело, представляющее собой поликлональный IgG человека, вводили в дозе 200 мкг/мышь.

Фиг. 14 представляет собой график, на котором показано сравнение профилей защиты 373.A и 373.B, измеренных с помощью масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена с фрагментацией (HDx-MS). На фиг. 14 показаны результаты для обмена в течение 1 минуты при рН 7,5 и комнатной температуре.

Фиг. 15 представляет собой график, на котором показано сравнение профилей защиты 350.A2 и 350.B, измеренных с помощью масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена с фрагментацией (HDx-MS). На фиг. 15 показаны результаты для обмена в течение 1 минуты при рН 7,5 и комнатной температуре.

Фиг. 16A представляет собой графическое изображение, показывающее конформационное изменение CD73 между закрытой/активной (база данных структуры белков (PDB) 4H2I) и открытой/неактивной конформацией (PDB 4H2F). Фиг. 16B представляет собой графическое изображение, показывающее открытую/открытую конформацию димера CD73, сконструированного из двух единиц PDB 4H2F после выравнивания С-концевых доменов с PDB 4H1S.

Фиг. 17A и 17B представляют собой графики, на которых показаны SEC-профили комплексов CD73-373.A и CD73-373.B, соответственно.

Фиг. 18A и 18B представляют собой графики, на которых показаны SEC-профили комплексов CD73-350.A2 и CD73-350.B, соответственно.

Фиг. 19 представляет собой график, на котором показаны значения относительного процентного содержания видов CD73/mAb, рассчитанные с применением способа интегрирования.

Фиг. 20 представляет собой схематическое графическое изображение, показывающее модель олигомеризации для объединения интерпретаций HDx и SEC.

Фиг. 21A и 21B представляют собой графики, на которых показан уровень экспрессии CD73 в подмножествах стромальных клеток, проанализированных с помощью проточной цитометрии в опухолях 4T1 от мышей, обработанных пан-антителом к TGFβ или hIgG2 изотипического контроля. На фиг. 21А экспрессия CD73 отображена в виде интенсивности флуоресценции по сравнению с образцами, окрашенными с помощью соответствующих изотипических контролей. Показан один репрезентативный образец. На фиг. 21B показана количественная оценка уровня экспрессии CD73, измеренного в виде средней интенсивности флуоресценции. Каждый символ представляет образец. P-значения указаны там, где они значимы. CAF=фибробласты, ассоциированные с раком.

Фиг. 22A, 22B и 22C представляют собой графики, на которых показаны результаты анализа, в котором оценивали влияние антитела к CD73 на рекомбинацию в В-клетках, обуславливающую переключение класса иммуноглобулинов. Интактные (CD19⁺CD27^-IgM⁺IgD⁺) B-клетки CD73⁺ и CD73^- выделяли из периферической крови здоровых доноров, метили с помощью CFSE и стимулировали in vitro с помощью CpG 2006, антитела к CD40, IL-2, IL-21 и транферрина. Клетки культивировали в присутствии антитела к CD73 350.B или антитела изотипического контроля (IgG4) в трех разных концентрациях: 1, 10 и 100 нг/мл. На фиг. 22А измеряли секрецию IgM в 7-дневном супернатанте клеточной культуры с применением анализа ELISA. На фиг. 22B, уровень пролиферации В-клеток измеряли на день 7, и количества поделившихся клеток, подсчитанные после осуществления электронного гейтирования разбавленной популяции CFSE, нанесены на график для трех различных исследуемых концентраций. На фиг. 22C клетки, секретирующие IgG (IgG SC) подсчитывали с помощью анализа ELISPOT в тот же момент времени. Данные собрали из двух независимых экспериментов.

Фиг. 23 представляет собой панель графиков, на которых показаны объемы отдельных опухолей для указанных групп. Мышей с изотипическим контролем умерщвляли на день 25. В группе, обработанной антителом к PD-1, мыши получали 300 мкг/мышь для всех доз. В группе, обработанной с помощью 350.В, мыши получали 600 мкг/мышь для первой дозы, а затем 400 мкг/мышь для четырех оставшихся доз. Те же схемы дозирования применялись для комбинированной группы. Всех мышей обрабатывали в дни 2, 5, 9, 12 и 17.

Фиг. 24A представляет собой пару графиков, на которых показано обнаружение биотинилированного 373.A на образцах крови от двух доноров, предварительно обработанных с помощью немеченых 373.A. FIG. 24B представляет собой график, на котором показано процентное значение занятости мишени на T-клетках CD8+ антителом 373.A.

Фиг. 25A и 25B представляет собой панель графиков, на которых показано, что пролиферация T-клеток CD4+ и CD8+ подавлялась с помощью AMP во время TCR-опосредованной активации, и это подавление можно было отменить с помощью антитела 373.A.

На фиг. 26A и 26B показаны остатки CD73 (жирный, курсив и подчеркнуто одной линией), которые взаимодействуют с тяжелой цепью Fab 350.A2 посредством прямых энтальпийных взаимодействий (Y110, L132, K136, S155, L157 и K162, пронумерованные в соответствии с SEQ ID NO: 105) (фиг. 26A) или вандерваальсовых и гидрофобных взаимодействий (остатки 136-138 и 155-170, пронумерованные в соответствии с SEQ ID NO: 105) (фиг. 26B), измеренных в примере 8. На фиг. 26C и 26D показаны остатки тяжелой цепи Fab 350.A2 (жирный, курсив и подчеркнуто одной линией), которые взаимодействуют с CD73 посредством прямых энтальпийных взаимодействий (R31, R54, E95, E98 и S99, пронумерованные в соответствии с Kabat, или R31, R54, E98, E101 и S102, пронумерованные в соответствии с их линейными положениями в SEQ ID NO: 331) (фиг. 26C) или вандерваальсовых и гидрофобных взаимодействий (остатки 30, 31, 33, 50, 52, 56, 97, 98, 100, и 100a, пронумерованной в соответствии с нумерацией по Kabat, или остатки 30, 31, 33, 50, 52, 56, 100, 101, 103, и 104, пронумерованные в соответствии с их линейными положениями в SEQ ID NO: 331) (фиг. 26D), измеренных в примере 8. На фиг. 26E и 26F показаны остатки CD73 (жирный, курсив и подчеркнуто одной линией), которые взаимодействуют с легкой цепью Fab 350.A2 посредством прямых энтальпийных взаимодействий (T209, пронумерованный в соответствии с SEQ ID NO: 105) (фиг. 26E) или вандерваальсовых и гидрофобных взаимодействий (остатки 209 и 210, пронумерованные в соответствии с SEQ ID NO: 105) (фиг. 26F), измеренных в примере 8. На фиг. 26G и 26H показаны остатки легкой цепи Fab 350.A2 (жирный, курсив и подчеркнуто одной линией), которые взаимодействуют с CD73 посредством прямых энтальпийных взаимодействий (W32, пронумерованная в соответствии с нумерацией по Kabat их линейными положениями в SEQ ID NO: 23) (фиг. 26G) или вандерваальсовых и гидрофобных взаимодействий (остатки 30 и 32, пронумерованные в соответствии с нумерацией по Kabat или их линейными положениями в SEQ ID NO: 23) (фиг. 26H), измеренных в примере 8. Сигнальный пептид подчеркнут двойной линией на фиг. 26A, 26B, 26E и 26F.

Фиг. 27А и 27В представляют собой графики, на которых показано отличие между уровнями мечения, наблюдаемыми для комплексов CD73/mAb и отдельно CD73 после импульса мечения 30 с.

Фиг. 28А и 28В представляют собой графики, на которых показано отличие между уровнями мечения, наблюдаемыми для комплексов CD73/mAb и отдельно CD73 после импульса мечения 300 с.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ТАБЛИЦ

В таблице 1 представлены аминокислотные и нуклеотидные последовательности для иллюстративных антител к CD73.

В таблице 2 представлены консенсусные последовательности CDR для иллюстративных антител к CD73.

В таблице 3 представлены аминокислотные последовательности тяжелых цепей IgG человека и легкой каппа-цепи человека.

В таблице 4 представлены иллюстративные последовательности CD73.

В таблицах 5 и 6 представлены аминокислотные и/или нуклеотидные последовательности иллюстративных молекул антитела к PD-1.

В таблицах 7 и 8 представлены аминокислотные и/или нуклеотидные последовательности иллюстративных молекул антитела к PD-L1.

В таблицах 9 и 10 представлены аминокислотные и/или нуклеотидные последовательности иллюстративных молекул антитела к LAG-3.

В таблицах 11 и 12 представлены аминокислотные и/или нуклеотидные последовательности иллюстративных молекул антитела к TIM-3.

В таблицах 13 и 14 представлены аминокислотные и/или нуклеотидные последовательности иллюстративных молекул антитела к GITR.

В таблице 15 представлены аминокислотные последовательности иллюстративных молекул биспецифического антитела к CD3.

В таблицах 16 и 17 представлены аминокислотные последовательности иллюстративных комплексов IL15/IL-15Ra.

Таблица 18 представляет собой краткое описание выбранных терапевтических средств, которые можно вводить в комбинации с молекулами антитела к CD73, описанными в данном документе. В таблице 18 слева направо представлено следующее: обозначение соединения второго терапевтического средства, структура соединения и публикация патента(-ов), в котором(-ых) раскрыто указанное соединение.

В таблице 19 представлены обозначения для двух линий антител к CD73.

В таблице 20 представлены значения аффинности связывания для антител к CD73.

В таблице 21 представлены значения аффинности связывания для Fab антител к CD73.

В таблице 22 представлены предварительные уровни доз для 373.A.

В таблице 23 представлены предварительные уровни доз для 373.A в комбинации с PBF509.

В таблице 24 представлены предварительные уровни доз для 373.A в комбинации с BAP049-клон-E.

В таблице 25 представлены предварительные уровни доз PBF509 в комбинации с 373.A и BAP049-клон-E.

В таблице 26 представлены соответствующие последовательности зародышевого типа антител к CD73.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Используемый в данном документе термин "CD73" относится к "кластеру дифференцировки 73", также известному как 5'-нуклеотидаза (5'-NT) или экто-5'-нуклеотидаза. Термин "CD73" включает мутанты, фрагменты, варианты, изоформы и гомологи полноразмерного CD73 дикого типа. В одном варианте осуществления белок CD73 кодируется геном NT5E. Иллюстративные последовательности CD73 доступны в базе данных Uniprot под номерами доступа Q6NZX3 и P21589. Иллюстративные аминокислотные последовательности незрелого CD73 представлены под SEQ ID NO: 105-107. "Мономер CD73" относится к полипептиду, содержащему внеклеточный домен CD73. В одном варианте осуществления мономер CD73 представляет собой полноразмерный CD73. "Димер CD73" относится к двум полипептидам (например, двум нековалентно связанным полипептидам), состоящим из двух мономеров CD73 (например, двух идентичных мономеров CD73), взаимодействующих друг с другом с образованием стабильного димера, например димера, образованного посредством белок-белковых взаимодействий между C-концевыми доменами мономеров CD73. В одном варианте осуществления димер CD73 представляет собой встречающийся в природе димер CD73.

Без ограничения теорией, CD73 человека содержит два домена. Консервативный N-концевой домен (соответствующий приблизительно остаткам 29-310 из SEQ ID NO: 105) и консервативный С-концевой домен (соответствующий приблизительно остаткам 343-513 из SEQ ID NO: 105), которые связаны одиночной α-спиралью (соответствующей приблизительно остаткам 318-336 из SEQ ID NO: 105). Активный сайт обнаруживается в основном в закрытой конформации и образуется между C- и N-концевыми доменами. Что касается ферментативного катализа, движение N-концевого домена на ~100° относительно С-концевого домена может обеспечить связывание и высвобождение субстрата, что происходит в открытой (каталитически неактивной) конформации. CD73 человека образует димер посредством белок-белковых взаимодействий между С-концевыми доменами. Площадь утопленной поверхности, а также молекулярные взаимодействия на границе раздела димеров значительно различаются между активной и неактивной конформациями фермента. См., например, Knapp K, et al., Structure 20:2161-73 (2012), включенную в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

Соответственно, в настоящем изобретении предусмотрены, по меньшей мере помимо всего прочего, молекулы антител, которые связываются с CD73 с высокой аффинностью и специфичностью. В одном варианте осуществления в данном документе раскрыты антитела человека, которые связываются с CD73. В одном варианте осуществления в данном документе раскрыты молекулы антител, которые способны ингибировать или уменьшать ферментативную активность CD73, например CD73 человека, например растворимого CD73 человека или мембраносвязанного CD73 человека. В одном варианте осуществления в данном документе раскрыты молекулы антител, которые способны ингибировать опосредованное CD73 превращение аденозинмонофосфата (AMP) в аденозин или уменьшать его уровень. Дополнительные аспекты настоящего изобретения включают молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие молекулы антител, векторы экспрессии, клетки-хозяева и способы получения молекул антитела. Также предусмотрены иммуноконъюгаты, молекулы поли- или биспецифических антител и фармацевтические композиции, содержащие молекулы антител. Молекулы антитела к CD73, раскрытые в данном документе, можно применять для лечения, предупреждения и/или диагностики раковых или злокачественных нарушений, например солидных опухолей и опухолей жидких тканей, например рака легких (например, немелкоклеточного рака легких), рака поджелудочной железы (например, аденокарциномы протоков поджелудочной железы), рака молочной железы (например, трижды негативного рака молочной железы), меланомы, рака головы и шеи (например, плоскоклеточного рака головы и шеи), колоректального рака (например, колоректального рака с микросателлитной стабильностью (MSS)), рака яичника или рака почки (например, почечно-клеточной карциномы). Молекулы антитела к CD73, раскрытые в данном документе, можно применять для лечения, предупреждения и/или диагностики инфекционного заболевания. Таким образом, в данном документе раскрыты способы обнаружения CD73, а также способы лечения различных нарушений, в том числе рака и инфекционных заболеваний, с применением молекул антитела к CD73.

Дополнительные термины определены ниже и по всему тексту данной заявки.

Используемые в данном документе формы единственного числа относятся к одному или более чем одному (например, по меньшей мере одному) грамматическому объекту формы. Используемый в данном документе термин "множество" означает два или более.

Термин "или" используется в данном документе для обозначения термина "и/или" и используется взаимозаменяемо с ним, если контекст явно не указывает на иное.

Термины "приблизительно" и "примерно" будут обычно означать приемлемую степень погрешности для измеряемого количества с учетом природы или точности измерений. Иллюстративные значения степени погрешности находятся в пределах 20 процентов (%), как правило, в пределах 10%, и в большинстве случаев в пределах 5% от заданного значения или диапазона значений.

Композиции и способы, раскрытые в данном документе, охватывают полипептиды и нуклеиновые кислоты, имеющие указанные последовательности или последовательности, по сути идентичные им или сходные с ними, например последовательности, характеризующиеся по меньшей мере приблизительно 85%, 90% или 95% идентичностью с указанной последовательностью. В контексте аминокислотной последовательности термин "по сути идентичный" используется в данном документе для обозначения первой аминокислотной последовательности, которая содержит достаточное или минимальное количество аминокислотных остатков, которые являются i) идентичными выровненным аминокислотным остаткам во второй аминокислотной последовательности или ii) их консервативными заменами, так что первая и вторая аминокислотные последовательности могут иметь один и тот же структурный домен и/или одну и ту же функциональную активность. Например, аминокислотные последовательности, которые содержат один и тот же структурный домен, характеризуются по меньшей мере приблизительно 85%, 90%. 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с эталонной последовательностью, например последовательностью, предусмотренной в данном документе.

В контексте нуклеотидной последовательности термин "по сути идентичный" используется в данном документе для обозначения последовательности первой нуклеиновой кислоты, которая содержит достаточное или минимальное количество нуклеотидов, которые идентичны выровненным нуклеотидам в последовательности второй нуклеиновой кислоты, так что первая и вторая нуклеотидные последовательности кодируют полипептид, имеющий одну и ту же функциональную активность, или кодируют домен полипептида с одной и той же структурой или полипептид с одной и той же функциональной активностью. Например, нуклеотидные последовательности характеризуются по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичностью с эталонной последовательностью, например последовательностью, предусмотренной в данном документе.

Термин "функциональный вариант" относится к полипептидам, которые имеют аминокислотную последовательность, по сути идентичную встречающейся в природе последовательности, или кодируются по сути идентичной нуклеотидной последовательностью и способны проявлять один или несколько видов активности встречающейся в природе последовательности.

Расчеты гомологии или идентичности последовательностей между последовательностями (термины используются в данном документе взаимозаменяемо) выполняют следующим образом.

Чтобы определить процентную идентичность двух аминокислотных последовательностей или двух последовательностей нуклеиновых кислот, последовательности выравнивают в целях оптимального сравнения (например, для оптимального выравнивания можно вводить гэпы в одну или обе из первой и второй аминокислотной последовательности или последовательности нуклеиновых кислот, и негомологичные последовательности могут не учитываться в целях сравнения). В предпочтительном варианте осуществления длина эталонной последовательности, выровненной в целях сравнения, составляет по меньшей мере 30%, например по меньшей мере 40%, 50%, 60%, например по меньшей мере 70%, 80%, 90%, 100% длины эталонной последовательности. Затем сравнивают аминокислотные остатки или нуклеотиды в соответствующих аминокислотных положениях или нуклеотидных положениях. Если положение в первой последовательности занято тем же аминокислотным остатком или нуклеотидом, что и соответствующее положение во второй последовательности, тогда молекулы являются идентичными по данному положению.

Процентная идентичность двух последовательностей зависит от числа идентичных положений, общих для последовательностей, при этом учитывается число гэпов и длина каждого гэпа, которые необходимо ввести для оптимального выравнивания двух последовательностей.

Сравнение последовательностей и определение процентной идентичности двух последовательностей можно осуществлять с применением математического алгоритма. В некоторых вариантах осуществления процентную идентичность двух аминокислотных последовательностей определяют с помощью алгоритма Нидлмана-Вунша ((1970) J. Mol. Biol. 48:444-453), который был включен в программу GAP в составе пакета программного обеспечения GCG (доступного на http://www.gcg.com), с применением либо матрицы Blossom 62, либо матрицы PAM250, и штрафа за открытие гэпа, составляющего 16, 14, 12, 10, 8, 6 или 4, и штрафа за продление гэпа, составляющего 1, 2, 3, 4, 5 или 6. В определенных вариантах осуществления процентную идентичность между двумя нуклеотидными последовательностями определяют с применением программы GAP в составе пакета программного обеспечения GCG (доступного на http://www.gcg.com) с применением матрицы NWSgapdna.CMP и штрафа за открытие гэпа, составляющего 40, 50, 60, 70 или 80, и штрафа за продление гэпа, составляющего 1, 2, 3, 4, 5 или 6. Одним подходящим набором параметров (и тем, который следует применять, если не указано иное) является оценочная матрица Blossum 62 со штрафом за открытие гэпа 12, штрафом за продление гэпа 4 и штрафом за сдвиг рамки гэпа 5.

Процентную идентичность двух аминокислотных или нуклеотидных последовательностей можно определить с помощью алгоритма E. Meyers и W. Miller ((1989) CABIOS, 4:11-17), который был включен в программу ALIGN (версия 2.0), с применением таблицы весов замен остатков PAM120, штрафа за продление гэпа 12 и штрафа за открытие гэпа 4.

Последовательности нуклеиновой кислоты и белка, описанные в данном документе, можно применять в качестве "запрашиваемой последовательности" для проведения поиска в общедоступных базах данных, например, для идентификации других представителей семейства или родственных последовательностей. Такие поиски можно выполнять с применением программ NBLAST и XBLAST (версия 2.0) Altschul, et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-10. Поиски нуклеотидов в BLAST можно выполнять с помощью программы NBLAST, оценка=100, длина слова=12, чтобы получить нуклеотидные последовательности, гомологичные молекулам нуклеиновой кислоты, описанным в данном документе. Поиски белка в BLAST можно выполнять с помощью программы XBLAST, оценка=50, длина слова=3, чтобы получить аминокислотные последовательности, гомологичные молекулам белка, описанным в данном документе. Для получения выравниваний с гэпами в целях сравнения можно использовать Gapped BLAST, как описано в Altschul et al., (1997) Nucleic Acids Res. 25:3389-3402. При использовании программ BLAST и Gapped BLAST можно применять параметры по умолчанию из соответствующих программ (например, XBLAST и NBLAST). См. http://www.ncbi.nlm.nih.gov.

Используемый в данном документе термин "гибридизируется в условиях низкой жесткости, умеренной жесткости, высокой жесткости или очень высокой жесткости" описывает условия гибридизации и отмывки. Руководство по проведению реакций гибридизации можно найти в Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, N.Y. (1989), 6.3.1-6.3.6, которое включено в данный документ посредством ссылки. В этой ссылке описаны способы с применением водной среды и неводной среды, и можно применять любой из них. Конкретные условия гибридизации, упоминаемые в данном документе, являются следующими: 1) условия гибридизации низкой жесткости - в 6X хлориде натрия/цитрате натрия (SSC) при приблизительно 45°C, затем две промывки в 0,2X SSC, 0,1% SDS при по меньшей мере 50°C (температура промывок может быть повышена до 55°C для условий низкой жесткости); 2) условия гибридизации умеренной жесткости - в 6X SSC при приблизительно 45°C, затем одна или несколько промывок в 0,2X SSC, 0,1% SDS при 60°C; 3) условия гибридизации высокой жесткости - в 6X SSC при приблизительно 45°C, затем одна или несколько промывок в 0,2X SSC, 0,1% SDS при 65°C; и предпочтительно 4) условия гибридизации очень высокой жесткости представляют собой 0,5 М фосфат натрия, 7% SDS при 65°C, затем одна или несколько промывок при 0,2X SSC, 1% SDS при 65°C. Условия очень высокой жесткости (4) являются подходящими условиями и такими, которые следует использовать, если не указано иное.

Следует понимать, что молекулы по настоящему изобретению могут иметь дополнительные консервативные или несущественные аминокислотные замены, которые не оказывают существенного влияния на их функции.

Термин "аминокислота" предназначен для охвата всех молекул, как природных, так и синтетических, которые содержат как функциональную аминогруппу, так и кислотную функциональную группу, и могут быть включены в полимер из встречающихся в природе аминокислот. Типичные аминокислоты включают встречающиеся в природе аминокислоты; их аналоги, производные и родственные соединения; аналоги аминокислот, имеющие вариантные боковые цепи; и все стереоизомеры любого из вышеперечисленного. Используемый в данном документе термин "аминокислота" включает как D-, так и L-оптические изомеры и пептидомиметики.

"Консервативная аминокислотная замена" представляет собой замену, при которой аминокислотный остаток замещается аминокислотным остатком, имеющим сходную боковую цепь. Семейства аминокислотных остатков, имеющих сходные боковые цепи, были определены в уровне техники. Эти семейства включают аминокислоты с основными боковыми цепями (например, лизин, аргинин, гистидин), кислыми боковыми цепями (например, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота), незаряженными полярными боковыми цепями (например, глицин, аспарагин, глутамин, серин, треонин, тирозин, цистеин), неполярными боковыми цепями (например, аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан), бета-разветвленными боковыми цепями (например, треонин, валин, изолейцин) и ароматическими боковыми цепями (например, тирозин, фенилаланин, триптофан, гистидин).

Термины "полипептид", "пептид" и "белок" (если одноцепочечный) используются в данном документе взаимозаменяемо для обозначения полимеров из аминокислот любой длины. Полимер может быть линейным или разветвленным, он может содержать модифицированные аминокислоты, и он может прерываться молекулами, отличными от аминокислот. Термины также охватывают полимер из аминокислот, который был модифицирован; например, посредством образования дисульфидной связи, гликозилирования, липидизации, ацетилирования, фосфорилирования или любой другой манипуляции, такой как конъюгирование с метящим компонентом. Полипептид может быть выделен из природных источников, может быть получен с помощью методик на основе рекомбинации из эукариотического или прокариотического хозяина или может быть продуктом процедур синтеза.

Термины "нуклеиновая кислота", "последовательность нуклеиновой кислоты", "нуклеотидная последовательность" или "полинуклеотидная последовательность" и "полинуклеотид" используются взаимозаменяемо. Они относятся к полимерной форме нуклеотидов любой длины, либо дезоксирибонуклеотидов, либо рибонуклеотидов, либо их аналогов. Полинуклеотид может быть либо одноцепочечным, либо двухцепочечным, и если он одноцепочечный, то может представлять собой кодирующую цепь или некодирующую (антисмысловую) цепь. Полинуклеотид может содержать модифицированные нуклеотиды, такие как метилированные нуклеотиды и аналоги нуклеотидов. Последовательность нуклеотидов может быть прервана компонентами, не являющимися нуклеотидами. Полинуклеотид может быть дополнительно модифицирован после полимеризации, например, путем конъюгирования с метящим компонентом. Нуклеиновая кислота может представлять собой рекомбинантный полинуклеотид или полинуклеотид геномного, cDNA, полусинтетического или синтетического происхождения, который либо не встречается в природе, либо связан с другим полинуклеотидом в неприродном расположении.

Используемый в данном документе термин "выделенный" относится к материалу, который удален из своей исходной или нативной окружающей среды (например, природной окружающей среды, если он встречается в природе). Например, встречающийся в природе полинуклеотид или полипептид, присутствующий в живом животном, не является выделенным, но тот же полинуклеотид или полипептид, выделенный посредством вмешательства человека из некоторых или из всех совместно существующих материалов в природной системе, является выделенным. Такие полинуклеотиды могут быть частью вектора, и/или такие полинуклеотиды или полипептиды могут быть частью композиции и все еще являться выделенными, поскольку такой вектор или композиция не являются частью окружающей среды, в которой они встречаются в природе.

Термин "химерный антигенный рецептор" или, в качестве альтернативы "CAR" относится к набору полипептидов, как правило, двух в простейших вариантах осуществления, которые, находясь в иммунной эффекторной клетке, наделяют клетку специфичностью в отношении клетки-мишени, как правило, раковой клетки, и способностью образования внутриклеточного сигнала. В некоторых вариантах осуществления CAR содержит по меньшей мере внеклеточный антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и цитоплазматический сигнальный домен (также называемый в данном документе "внутриклеточным сигнальным доменом"), содержащий функциональный сигнальный домен, полученный из стимулирующей молекулы и/или костимулирующей молекулы, определенных в данном документе ниже. В некоторых аспектах полипептиды из набора являются смежными друг с другом. В некоторых вариантах осуществления набор полипептидов включает димеризационный переключатель, который при наличии димеризующей молекулы может связывать полипептиды друг с другом, например, может связывать антигенсвязывающий домен с внутриклеточным сигнальным доменом. В одном аспекте стимулирующая молекула представляет собой дзета-цепь, ассоциированную с Т-клеточным рецепторным комплексом. В одном аспекте цитоплазматический сигнальный домен дополнительно содержит один или несколько функциональных сигнальных доменов, полученных из по меньшей мере одной костимулирующей молекулы, определенной ниже. В одном аспекте костимулирующая молекула выбрана из костимулирующих молекул, описанных в данном документе, например, 4-1BB (т. е. CD137), CD27 и/или CD28. В одном аспекте CAR предусматривает химерный слитый белок, содержащий внеклеточный антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, содержащий функциональный сигнальный домен, полученный из стимулирующей молекулы. В одном аспекте CAR предусматривает химерный слитый белок, содержащий внеклеточный антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, содержащий функциональный сигнальный домен, полученный из костимулирующей молекулы, и функциональный сигнальный домен, полученный из стимулирующей молекулы. В одном аспекте CAR предусматривает химерный слитый белок, содержащий внеклеточный антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, содержащий два функциональных сигнальных домена, полученных из одной или нескольких костимулирующих молекул, и функциональный сигнальный домен, полученный из стимулирующей молекулы. В одном аспекте CAR предусматривает химерный слитый белок, содержащий внеклеточный антигенсвязывающий домен, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, содержащий по меньшей мере два функциональных сигнальных домена, полученных из одной или нескольких костимулирующих молекул, и функциональный сигнальный домен, полученный из стимулирующей молекулы. В одном аспекте CAR содержит необязательную лидерную последовательность на амино-конце (N-конце) слитого белка CAR. В одном аспекте CAR дополнительно содержит лидерную последовательность на N-конце внеклеточного антигенсвязывающего домена, при этом лидерная последовательность необязательно отщепляется от антигенсвязывающего домена (например, scFv) в ходе клеточного процессинга и локализации CAR в клеточной мембране.

Термин "сигнальный домен" относится к функциональной части белка, которая действует путем передачи информации внутри клетки для регуляции клеточной активности посредством определенных сигнальных путей, образуя вторичные мессенджеры или функционируя в качестве эффекторов путем ответа на такие мессенджеры.

Используемый в данном документе термин "внутриклеточный сигнальный домен" относится к внутриклеточной части молекулы. Внутриклеточный сигнальный домен генерирует сигнал, который способствует иммунной эффекторной функции клетки, содержащей CAR, например, CART-клетки. Примеры иммунной эффекторной функции, например, у CART-клетки, включают цитолитическую активность и хелперную активность, в том числе секрецию цитокинов.

В варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен может предусматривать первичный внутриклеточный сигнальный домен. Иллюстративные первичные внутриклеточные сигнальные домены включают в себя домены, полученные из молекул, отвечающих за первичную стимуляцию или антигензависимую стимуляцию. В варианте осуществления внутриклеточный сигнальный домен может предусматривать костимулирующий внутриклеточный домен. Иллюстративные костимулирующие внутриклеточные сигнальные домены включают в себя домены, полученные из молекул, отвечающих за передачу костимулирующих сигналов или антигеннезависимую стимуляцию. Например, в случае CART первичный внутриклеточный сигнальный домен может предусматривать цитоплазматическую последовательность Т-клеточного рецептора, и костимулирующий внутриклеточный сигнальный домен может предусматривать цитоплазматическую последовательность корецептора или костимулирующей молекулы.

Первичный внутриклеточный сигнальный домен может содержать сигнальный мотив, который известен как иммунорецепторный тирозиновый активирующий мотив или ITAM. Примеры первичных цитоплазматических сигнальных последовательностей, содержащих ITAM, включают без ограничения последовательности, полученные из CD3-дзета, общей гамма-цепи FcR (FCER1G), Fc-гамма RIIa, FcR-бета (Fc-эпсилон R1b), CD3-гамма, CD3-дельта, CD3-эпсилон, CD79a, CD79b, DAP10 и DAP12.

Термин "дзета" или в качестве альтернативы "дзета-цепь", "CD3-дзета" или "TCR-дзета" определяют как белок, представленный под № доступа в GenBank BAG36664.1, или эквивалентные остатки из вида, отличного от человека, например, мыши, грызуна, нечеловекообразной обезьяны, человекообразной обезьяны и т. п., и "стимулирующий домен дзета" или в качестве альтернативы "стимулирующий домен CD3-дзета" или "стимулирующий домен TCR-дзета" определяют как аминокислотные остатки цитоплазматического домена дзета-цепи или его функциональных производных, которые являются достаточными для функциональной передачи исходного сигнала, необходимого для активации Т-клеток. В одном аспекте цитоплазматический домен дзета содержит остатки 52-164 под № доступа GenBank BAG36664.1 или эквивалентные остатки из вида, отличного от человека, например, мыши, грызуна, нечеловекообразной обезьяны, человекообразной обезьяны и т. п., которые являются его функциональными ортологами.

Термин "костимулирующая молекула" относится к когнатному партнеру по связыванию на Т-клетке, который связывается с костимулирующим лигандом, опосредуя тем самым костимулируемый ответ Т-клетки, такой как без ограничения пролиферация. Костимулирующие молекулы представляют собой молекулы клеточной поверхности, отличные от антигенных рецепторов или их лигандов, которые способствуют эффективному иммунному ответу. Костимулирующие молекулы включают без ограничения молекулу MHC I класса, BTLA и лиганд Toll-подобного рецептора, а также OX40, CD27, CD28, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278) и 4-1BB (CD137). Дополнительные примеры таких костимулирующих молекул включают CDS, ICAM-1, GITR, BAFFR, HVEM (LIGHTR), SLAMF7, NKp80 (KLRF1), NKp44, NKp30, NKp46, CD160, CD19, CD4, CD8-альфа, CD8-бета, IL2R-бета, IL2R-гамма, IL7R-альфа, ITGA4, VLA1, CD49a, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, CD11d, ITGAE, CD103, ITGAL, CD11a, LFA-1, ITGAM, CD11b, ITGAX, CD11c, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA-1, ITGB7, NKG2D, NKG2C, TNFR2, TRANCE/RANKL, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96 (Tactile), CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), CD69, SLAMF6 (NTB-A, Ly108), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD162), LTBR, LAT, GADS, SLP-76, PAG/Cbp, CD19a и лиганд, который связывается с CD83.

Костимулирующий внутриклеточный сигнальный домен может представлять собой внутриклеточную часть костимулирующей молекулы. Костимулирующая молекула может быть представлена следующими семействами белков: белки семейства TNF-рецепторов, иммуноглобулиноподобные белки, цитокиновые рецепторы, интегрины, сигнальные молекулы активации лимфоцитов (белки SLAM) и активирующие рецепторы NK-клеток. Примеры таких молекул включают CD27, CD28, 4-1BB (CD137), OX40, GITR, CD30, CD40, ICOS, BAFFR, HVEM, ICAM-1, антиген-1, ассоциированный с функцией лимфоцитов (LFA-1), CD2, CDS, CD7, CD287, LIGHT, NKG2C, NKG2D, SLAMF7, NKp80, NKp30, NKp44, NKp46, CD160, B7-H3 и лиганд, который связывается с CD83, и т. п.

Внутриклеточный сигнальный домен может содержать всю внутриклеточную часть или весь нативный внутриклеточный сигнальный домен молекулы, из которой он получен, или их функциональный фрагмент или производное.

Термин "4-1BB" относится к представителю суперсемейства TNFR с аминокислотной последовательностью, представленной под № доступа в GenBank AAA62478.2, или эквивалентным остаткам из вида, отличного от человека, например мыши, грызуна, нечеловекообразной обезьяны, человекообразной обезьяны и т. п.; и "костимулирующий домен 4-1BB" определяют как аминокислотные остатки 214-255 под № доступа в GenBank AAA62478.2 или эквивалентные остатки из вида, отличного от человека, например мыши, грызуна, нечеловекообразной обезьяны, человекообразной обезьяны и т. п.

Используемый в данном документе термин "иммунная эффекторная клетка" относится к клетке, которая участвует в иммунном ответе, например, способствуя иммунному эффекторному ответу. Примеры иммунных эффекторных клеток включают Т-клетки, например, альфа/бета-Т-клетки и гамма/дельта-Т-клетки, В-клетки, естественные клетки-киллеры (NK), естественные T-клетки-киллеры (NKT), тучные клетки и фагоциты миелоидного происхождения.

Используемый в данном документе термин "иммунная эффекторная функция" или "иммунный эффекторный ответ" относится к функции или ответу, например, иммунной эффекторной клетки, которые усиливают иммунную атаку на клетку-мишень или способствуют ей. Например, иммунная эффекторная функция или ответ относятся к свойству T- или NK-клетки, которое способствует уничтожению или ингибированию роста или пролиферации клетки-мишени. В случае с Т-клеткой первичная стимуляция и костимуляция являются примерами иммунной эффекторной функции или ответа.

Термины "ассоциированный с раком антиген" или "опухолевый антиген" взаимозаменяемо относятся к молекуле (как правило, белку, углеводу или липиду), которая экспрессируется на поверхности раковой клетки либо полностью, либо в виде фрагмента (например, молекула MHC/пептид), и которая является применимой для предпочтительного нацеливания фармакологического средства на раковую клетку. В некоторых вариантах осуществления опухолевый антиген представляет собой маркер, экспрессируемый как нормальными клетками, так и раковыми клетками, например, маркер линии дифференцировки, например, CD19 на В-клетках. В некоторых вариантах осуществления опухолевый антиген представляет собой молекулу клеточной поверхности, которая сверхэкспрессируется в раковой клетке по сравнению с нормальной клеткой, например, характеризуется 1-кратной сверхэкспрессией, 2-кратной сверхэкспрессией, 3-кратной или большей сверхэкспрессией по сравнению с нормальной клеткой. В некоторых вариантах осуществления опухолевый антиген представляет собой молекулу клеточной поверхности, которая синтезируется в раковой клетке ненадлежащим образом, например молекулу, которая содержит делеции, добавления или мутации по сравнению с молекулой, экспрессируемой на нормальной клетке. В некоторых вариантах осуществления опухолевый антиген будет экспрессироваться исключительно на клеточной поверхности раковой клетки, полностью или в виде фрагмента (например, молекула MHC/пептид), и не будет синтезироваться или экспрессироваться на поверхности нормальной клетки. В некоторых вариантах осуществления CAR по настоящему изобретению включают CAR, содержащие антигенсвязывающий домен (например, антитело или фрагмент антитела), который связывается с пептидом, презентируемым молекулой MHC. Обычно пептиды, полученные из эндогенных белков, заполняют карманы молекул главного комплекса гистосовместимости (MHC) I класса и распознаются T-клеточными рецепторами (TCR) на T-лимфоцитах CD8+. Комплексы молекул MHC I класса конститутивно экспрессируются всеми ядерными клетками. При раке комплексы вирусоспецифический и/или опухолеспецифический пептид/молекула MHC представляют собой уникальный класс мишеней клеточной поверхности для иммунотерапии. Были описаны TCR-подобные антитела, нацеливающиеся на пептиды, полученные из вирусных или опухолевых антигенов, связанные с лейкоцитарным антигеном человека (HLA)-A1 или HLA-A2 (см., например, Sastry et al., J Virol. 2011 85(5):1935-1942; Sergeeva et al., Blood, 2011 117(16):4262-4272; Verma et al., J Immunol 2010 184(4):2156-2165; Willemsen et al., Gene Ther 2001 8(21):1601-1608; Dao et al., Sci Transl Med 2013 5(176):176ra33; Tassev et al., Cancer Gene Ther 2012 19(2):84-100). Например, TCR-подобное антитело можно идентифицировать при скрининге библиотеки, такой как фаг-дисплейная библиотека scFv человека.

Ниже дополнительно подробно описаны различные аспекты в отношении композиций и способов, представленных в данном документе. Дополнительные определения изложены по всему тексту настоящего описания.

Молекулы антител

В одном варианте осуществления молекула антитела связывается с CD73 млекопитающего, например человека. Например, молекула антитела связывается с эпитопом, например линейным или конформационным эпитопом, например, описанным в данном документе эпитопом, на CD73.

Используемый в данном документе термин "молекула антитела" относится к белку, например, к цепи иммуноглобулина или ее фрагменту, содержащему по меньшей мере одну последовательность вариабельного домена иммуноглобулина. Термин "молекула антитела" предусматривает, например, моноклональное антитело (в том числе полноразмерное антитело, которое содержит Fc-область иммуноглобулина). В одном варианте осуществления молекула антитела предусматривает полноразмерное антитело или полноразмерную цепь иммуноглобулина. В одном варианте осуществления молекула антитела предусматривает антигенсвязывающий или функциональный фрагмент полноразмерного антитела или полноразмерной цепи иммуноглобулина.

Как используется в данном документе, молекула антитела "связывается" с антигеном, таким образом, как такое связывание понимается специалистом в данной области. В одном варианте осуществления антитело связывается с антигеном с константой диссоциации (K_D), составляющей приблизительно 1 × 10^-3 М или менее, 1 × 10^-4 М или менее или 1 × 10^-5 М или менее.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу моноспецифического антитела и связывает один эпитоп, например молекулу моноспецифического антитела, содержащую несколько последовательностей вариабельного домена иммуноглобулина, каждая из которых связывает один и тот же эпитоп.

В одном варианте осуществления молекула антитела представляет собой молекулу полиспецифического антитела, например, она содержит несколько последовательностей вариабельного домена иммуноглобулина, где первая из нескольких последовательностей вариабельного домена иммуноглобулина характеризуется специфичностью связывания с первым эпитопом, а вторая из нескольких последовательностей вариабельного домена иммуноглобулина характеризуется специфичностью связывания со вторым эпитопом. В варианте осуществления первый и второй эпитопы находятся на одном и том же антигене, например на одном и том же белке (или субъединице мультимерного белка). В варианте осуществления первый и второй эпитопы перекрываются или по сути перекрываются. В варианте осуществления первый и второй эпитопы не перекрываются или по сути не перекрываются. В варианте осуществления первый и второй эпитопы находятся на разных антигенах, например на разных белках (или на разных субъединицах мультимерного белка). В одном варианте осуществления молекула полиспецифического антитела содержит третий, четвертый или пятый вариабельные домены иммуноглобулина. В одном варианте осуществления молекула полиспецифического антитела представляет собой молекулу биспецифического антитела, молекулу триспецифического антитела или молекулу тетраспецифического антитела,

В варианте осуществления молекула полиспецифического антитела представляет собой молекулу биспецифического антитела. Биспецифическое антитело характеризуется специфичностью в отношении не более двух антигенов. Молекула биспецифического антитела характеризуется первой последовательностью вариабельного домена иммуноглобулина, которая характеризуется специфичностью связывания с первым эпитопом, и второй последовательностью вариабельного домена иммуноглобулина, которая характеризуется специфичностью связывания со вторым эпитопом. В варианте осуществления первый и второй эпитопы находятся на одном и том же антигене, например на одном и том же белке (или субъединице мультимерного белка). В варианте осуществления первый и второй эпитопы перекрываются или по сути перекрываются. В варианте осуществления первый и второй эпитопы не перекрываются или по сути не перекрываются. В варианте осуществления первый и второй эпитопы находятся на разных антигенах, например на разных белках (или на разных субъединицах мультимерного белка). В варианте осуществления молекула биспецифического антитела содержит последовательность вариабельного домена тяжелой цепи и последовательность вариабельного домена легкой цепи, которые характеризуются специфичностью связывания с первым эпитопом, и последовательность вариабельного домена тяжелой цепи и последовательность вариабельного домена легкой цепи, которые характеризуются специфичностью связывания со вторым эпитопом. В варианте осуществления молекула биспецифического антитела содержит полуантитело, характеризующееся специфичностью связывания с первым эпитопом, и полуантитело, характеризующееся специфичностью связывания со вторым эпитопом. В варианте осуществления молекула биспецифического антитела содержит полуантитело или его фрагмент, характеризующиеся специфичностью связывания с первым эпитопом, и полуантитело или его фрагмент, характеризующиеся специфичностью связывания со вторым эпитопом. В варианте осуществления молекула биспецифического антитела содержит scFv или его фрагмент, характеризующиеся специфичностью связывания с первым эпитопом, и scFv или его фрагмент, характеризующиеся специфичностью связывания со вторым эпитопом.

В одном варианте осуществления молекула антитела предусматривает диатело и одноцепочечную молекулу, а также антигенсвязывающий фрагмент антитела (например, Fab, F(ab')₂ и Fv). Например, молекула антитела может содержать последовательность вариабельного домена тяжелой (H) цепи (сокращенно в данном документе VH) и последовательность вариабельного домена легкой (L) цепи (сокращенно в данном документе VL). В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь и легкую цепь или состоит из них (в данном документе называется полуантитело). В другом примере молекула антитела содержит две последовательности вариабельных доменов тяжелой (H) цепи и две последовательности вариабельных доменов легкой (L) цепи, образуя, таким образом, два антигенсвязывающих участка, такие как Fab, Fab', F(ab')₂, Fc, Fd, Fd', Fv, одноцепочечные антитела (например, scFv), антитела с одним вариабельным доменом, диатела (Dab) (бивалентные и биспецифические) и химерные (например, гуманизированные) антитела, которые могут быть получены путем модификации целых антител или таковых, синтезированных de novo с использованием технологий рекомбинантной ДНК. Эти функциональные фрагменты антител сохраняют способность избирательно связываться с их соответствующим антигеном или рецептором. Антитела и фрагменты антител могут быть из любого класса антител, в том числе без ограничения IgG, IgA, IgM, IgD и IgE, и из любого подкласса (например, IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4) антител. Препарат молекул антитела может быть моноклональным или поликлональным. Молекула антитела может также представлять собой человеческое, гуманизированное, CDR-привитое или полученное in vitro антитело. Антитело может иметь константную область тяжелой цепи, выбранную, например, из IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4. Антитело также может иметь легкую цепь, выбранную, например, из каппа или лямбда. Термин "иммуноглобулин" (Ig) в данном документе используется взаимозаменяемо с термином "антитело".

Примеры антигенсвязывающих фрагментов молекулы антитела включают: (i) фрагмент Fab, моновалентный фрагмент, состоящий из доменов VL, VH, CL и CH1; (ii) фрагмент F(ab')₂, бивалентный фрагмент, содержащий два фрагмента Fab, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области; (iii) фрагмент Fd, состоящий из доменов VH и CH1; (iv) фрагмент Fv, состоящий из доменов VL и VH одного плеча антитела, (v) фрагмент диатела (dAb), который состоит из домена VH; (vi) верблюжий или камелизованный вариабельный домен; (vii) одноцепочечный Fv (scFv), см., например, Bird et al. (1988) Science 242:423-426; and Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883); (viii) однодоменное антитело. Такие фрагменты антител можно получать с помощью любого подходящего способа, в том числе традиционных методик, известных специалистам в данной области, и фрагменты можно подвергать скринингу на пригодность таким же образом, как и интактные антитела.

Термин "антитело" включает интактные молекулы, а также их функциональные фрагменты. Константные области антител могут быть изменены, например подвергнуты мутации, для модификации свойств антитела (например, для повышения или снижения одного или нескольких из уровня связывания с рецептором Fc, уровня гликозилирования антител, числа цистеиновых остатков, функции эффекторных клеток или функции комплемента).

Антитела, раскрытые в данном документе, также могут представлять собой однодоменные антитела. Однодоменные антитела могут включать антитела, определяющие комплементарность области которых являются частью однодоменного полипептида. Примеры включают без ограничения антитела на основе тяжелых цепей, антитела, в природных условиях лишенные легких цепей, однодоменные антитела, полученные из традиционных 4-цепочечных антител, сконструированные антитела и однодоменные каркасные структуры, отличные от полученных из антител. Однодоменные антитела могут представлять собой любые антитела, известные из уровня техники, или любые однодоменные антитела, которые будут известны в будущем. Однодоменные антитела могут быть получены из любых видов, в том числе без ограничения из мыши, человека, верблюда, ламы, рыбы, акулы, козы, кролика и быка. Согласно другому аспекту однодоменное антитело представляет собой встречающееся в природе однодоменное антитело, известное как антитело на основе тяжелых цепей, лишенное легких цепей. Такие однодоменные антитела раскрыты в WO 9404678, например. В целях ясности этот вариабельный домен, полученный из антитела на основе тяжелых цепей, в природных условиях лишенного легкой цепи, именуется в данном документе как VHH или нанотело, чтобы отличать его от традиционного VH четырехцепочечных иммуноглобулинов. Такую молекулу VHH можно получить из антител видов Camelidae, например из верблюда, ламы, дромадера, альпаки и гуанако. Другие виды, помимо Camelidae, могут продуцировать антитела на основе тяжелых цепей, в природных условиях лишенные легкой цепи; такие VHH входят в объем настоящего изобретения.

Области VH и VL можно подразделить на области гипервариабельности, называемые "определяющими комплементарность областями" (CDR), которые чередуются с областями, являющимися более консервативными, называемыми "каркасными областями" (FR или FW).

Размеры каркасной области и CDR были точно определены с помощью ряда способов (см. Kabat, E. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Depar™ent of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242; Chothia, C. et al. (1987) J. Mol. Biol. 196:901-917; и определения AbM, используемого в программном обеспечении Oxford Molecular's AbM для моделирования антител. См. в целом, например, Protein Sequence and Structure Analysis of Antibody Variable Domains. В: Antibody Engineering Lab Manual (Ed.: Duebel, S. and Kontermann, R., Springer-Verlag, Heidelberg).

Термины "определяющая комплементарность область" и "CDR", используемые в данном документе, относятся к последовательностям аминокислот в вариабельных областях антитела, которые придают антигенную специфичность и аффинность связывания. В некоторых вариантах осуществления, в каждой вариабельной области тяжелой цепи присутствуют три CDR (HCDR1, HCDR2 и HCDR3), и в каждой вариабельной области легкой цепи присутствуют три CDR (LCDR1, LCDR2 и LCDR3).

Точные границы аминокислотной последовательности данного CDR могут быть определены с использованием любой из хорошо известных схем, в том числе описанных в Kabat et al. (1991), "Sequences of Proteins of Immunological Interest," 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (схема нумерации в соответствии с "Kabat"), Al-Lazikani et al., (1997) JMB 273,927-948 (схема нумерации в соответствии с "Chothia"). Как используется в данном документе, CDR, определенные в соответствии со схемой нумерации "Chothia", также иногда называют "гипервариабельными петлями".

Например, согласно Kabat аминокислотные остатки CDR в вариабельном домене тяжелой цепи (VH) нумеруются 31-35 (HCDR1), 50-65 (HCDR2) и 95-102 (HCDR3); а аминокислотные остатки CDR в вариабельном домене легкой цепи (VL) нумеруются 24-34 (LCDR1), 50-56 (LCDR2) и 89-97 (LCDR3). Согласно Chothia аминокислоты CDR в VH нумеруются 26-32 (HCDR1), 52-56 (HCDR2) и 95-102 (HCDR3); а аминокислотные остатки в VL нумеруются 26-32 (LCDR1), 50-52 (LCDR2) и 91-96 (LCDR3). Объединяя определения CDR согласно Kabat и согласно Chothia, CDR состоят из аминокислотных остатков 26-35 (HCDR1), 50-65 (HCDR2) и 95-102 (HCDR3) в человеческом VH и аминокислотных остатков 24-34 (LCDR1), 50-56 (LCDR2) и 89-97 (LCDR3) в человеческом VL.

Согласно всем определениям, каждый из VH и VL, как правило, содержит три CDR и четыре FR, расположенные от аминоконца к карбоксиконцу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.

Как правило, если конкретно не указано иное, молекулы антитела к CD73 могут содержать любую комбинацию одной или нескольких CDR по Kabat, CDR по Chothia, комбинацию CDR по Kabat и Chothia, CDR согласно IMGT и/или альтернативному определению, например, описанному в таблице 1.

Используемый в данном документе термин "последовательность вариабельного домена иммуноглобулина" относится к аминокислотной последовательности, которая может образовывать структуру вариабельного домена иммуноглобулина. Например, последовательность может содержать всю аминокислотную последовательность встречающегося в природе вариабельного домена или ее часть. Например, последовательность может содержать одну, две или более N- или С-концевых аминокислот, или не содержать их или может содержать другие изменения, которые совместимы с образованием белковой структуры.

Термин "антигенсвязывающий участок" относится к части молекулы антитела, которая содержит детерминанты, которые образуют участок взаимодействия, который связывается с полипептидом CD73 или его эпитопом. Что касается белков (или белковых миметиков), антигенсвязывающий участок обычно содержит одну или несколько петель (из по меньшей мере, например, четырех аминокислот или аминокислотных миметиков), которые образуют участок взаимодействия, связывающийся с полипептидом CD73. Обычно антигенсвязывающий участок молекулы антитела содержит по меньшей мере одну или две CDR и/или гипервариабельные петли или, более обычно, по меньшей мере три, четыре, пять или шесть CDR и/или гипервариабельных петель.

Используемый в данном документе термин "нумерация Eu" относится к соглашению о нумерации Eu для константных областей антитела, как описано в Edelman, G.M. et al., Proc. Natl. Acad. USA, 63, 78-85 (1969) и Kabat et al., в "Sequences of Proteins of Immunological Interest", U.S. Dept. Health and Human Services, 5th edition, 1991.

Термины "конкурировать" или "перекрестно конкурировать" используются в данном документе взаимозаменяемо для обозначения способности молекулы антитела препятствовать связыванию молекулы антитела к CD73, например молекулы антитела к CD73, представленной в данном документе, с мишенью, например CD73 человека. Препятствование связыванию может быть прямым или косвенным (например, посредством аллостерической модуляции молекулы антитела или мишени). Степень, в которой молекула антитела способна препятствовать связыванию другой молекулы антитела с мишенью, и, следовательно, можно ли сказать, что она конкурирует, может быть определена с использованием анализа конкурентного связывания, например анализа методом проточной цитометрии, анализа ELISA или BIACORE. В некоторых вариантах осуществления анализ конкурентного связывания представляет собой количественный конкурентный анализ. В некоторых вариантах осуществления первая молекула антитела к CD73 конкурирует за связывание с мишенью со второй молекулой антитела к CD73, если связывание первой молекулы антитела с мишенью снижается на 10% или более, например на 20% или более, 30% или более, 40% или более, 50% или более, 55% или более, 60% или более, 65% или более, 70% или более, 75% или более, 80% или более, 85% или более, 90% или более, 95% или более, 98% или более, 99% или более в конкурентном анализе связывания (например, конкурентном анализе, описанном в данном документе).

Используемый в данном документе термин "эпитоп" относится к фрагментам антигена (например, CD73 человека), которые специфически взаимодействуют с молекулой антитела. Такие фрагменты, также называемые в данном документе эпитопными детерминантами, обычно содержат или являются частью таких элементов, как боковые цепи аминокислот или боковые цепи сахаров. Эпитопная детерминанта может быть определена способами, известными из уровня техники или раскрытыми в данном документе, например, с помощью кристаллографии или анализе водородно-дейтериевого обмена. По меньшей мере один или несколько фрагментов в молекуле антитела, которые специфически взаимодействуют с эпитопной детерминантой, обычно находятся в CDR. Как правило, эпитоп имеет специфические трехмерные характеристики структуры. Как правило, эпитоп имеет специфические характеристики заряда. Некоторые эпитопы являются линейными эпитопами, тогда как другие являются конформационными эпитопами.

В одном варианте осуществления эпитопная детерминанта представляет собой фрагмент на антигене, например такой как боковая цепь аминокислоты или боковая цепь сахара или их часть, который, когда молекула антигена и антитела совместно кристаллизуются, находится в пределах предварительно определенного расстояния, например в пределах 5 ангстрем, от фрагмента молекулы антитела, упоминаемого в данном документе как "кристаллографическая эпитопная детерминанта". Кристаллографические эпитопные детерминанты эпитопа все вместе называют "кристаллографическим эпитопом".

Первая молекула антитела связывается с тем же эпитопом, что и вторая молекула антитела (например, молекула эталонного антитела, например молекула антитела, раскрытая в данном документе), если первое антитело взаимодействует с теми же эпитопными детерминантами на антигене, что и второе антитело или эталонное антитело, например, если взаимодействие измеряют одинаковым образом как для антитела, так и для второго или эталонного антитела. Эпитопы, которые перекрываются, имеют по меньшей мере одну общую эпитопную детерминанту. Первая молекула антитела связывает с эпитопом, который перекрывается с эпитопом второй молекулы антитела (например, молекулой эталонного антитела, например антителом, раскрытым в данном документе), если обе молекулы антител взаимодействуют с одной и той же эпитопной детерминантой. Первая и вторая молекула антитела (например, молекула эталонного антитела, например молекула антитела, раскрытая в данном документе) связывают по сути перекрывающиеся эпитопы, если по меньшей мере половина эпитопных детерминант второго или эталонного антитела обнаружены как эпитопные детерминанты в эпитопе первого антитела. Первая и вторая молекула антитела (например, молекула эталонного антитела, например молекула антитела, раскрытая в данном документе) связывают по сути один и тот же эпитоп, если первая молекула антитела связывает по меньшей мере половину коровых эпитопных детерминант эпитопа второго или эталонного антитела, где коровые эпитопные детерминанты определяют, например, с помощью кристаллографии или водородно-дейтериевого обмена.

Как используется в данном документе, молекула антитела "уменьшает уровень водородно-дейтериевого обмена" во фрагменте антигена, если водородно-дейтериевый обмен во фрагменте антигена в присутствии молекулы антитела становится ниже, чем водородно-дейтериевый обмен во фрагменте антигена в отсутствие молекулы антитела, что измеряют при помощи анализа водородно-дейтериевого обмена.

Как используется в данном документе, уменьшение "среднего уровня водородно-дейтериевого обмена" определяется по уровню нормализованного водородно-дейтериевого обмена (Да на остаток) во фрагменте антигена в отсутствие антитела минус уровень нормализованного водородно-дейтериевого обмена (Да на остаток) во фрагменте антигена в присутствии антитела.

Используемые в данном документе термины "моноклональное антитело" или "композиция на основе моноклональных антител" относятся к препарату из молекул антитела одного молекулярного состава. Композиция на основе моноклонального антитела проявляет одну специфичность и аффинность связывания в отношении конкретного эпитопа. Моноклональное антитело может быть получено с помощью технологии гибридом или с помощью способов, в которых не используется технология гибридом (например, способов на основе рекомбинации).

"Эффективный в отношении человека" белок представляет собой белок, который не вызывает ответа с образованием нейтрализующего антитела, например ответа с образованием антитела человека к антигену мыши (НАМА). HAMA может создавать проблемы при ряде обстоятельств, например, если молекулу антитела вводят повторно, например при лечении хронического или рецидивирующего заболевания. Ответ с образованием HAMA может сделать повторное введение антител потенциально неэффективным из-за увеличения уровня выведения антител из сыворотки крови (см., например, Saleh et al., Cancer Immunol. Immunother., 32:180-190 (1990)), и ввиду потенциальных аллергических реакций (см.,например, LoBuglio et al., Hybridoma, 5:5117-5123 (1986)).

Молекула антитела может представлять собой поликлональное или моноклональное антитело. В других вариантах осуществления антитело может быть получено с помощью рекомбинации, например его можно получить с помощью дрожжевого дисплея, фагового дисплея или с помощью комбинаторных способов. В качестве альтернативы, такие антитела могут отбирать из синтетических систем презентации антител на основе дрожжей, таких как описанные, например, в Y. Xu et al, Addressing polyspecificity of antibodies selected from an in vitro yeast presentation system: a FACS-based, high-throughput selection and analytical tool. PEDS 26.10, 663-70 (2013); WO2009036379; WO2010105256; и WO2012009568, включенных в данный документ посредством ссылок во всей их полноте.

В одном варианте осуществления антитело представляет собой полностью человеческое антитело (например, антитело, полученное с помощью дрожжевого дисплея, антитело, полученное с помощью фагового дисплея, или антитело, полученное от мыши, которое сконструировали с помощью генной инженерии с получением антитела из последовательности человеческого иммуноглобулина) или антитело, не являющееся человеческим, например антитело грызуна (мыши или крысы), козы, примата (например, обезьяны) или верблюда. Способы получения антител грызунов известны из уровня техники.

Человеческие моноклональные антитела могут быть преимущественно получены с применением трансгенных мышей, несущих гены человеческого иммуноглобулина, а не мышиной системы. Спленоциты от таких трансгенных мышей, иммунизированных представляющим интерес антигеном, используются для получения гибридом, которые секретируют mAb человека со специфическими значениями аффинности в отношении эпитопов из белка человека (см., например, Wood et al. международную заявку WO 91/00906, Kucherlapati et al. публикацию согласно PCT WO 91/10741; Lonberg et al. международную заявку WO 92/03918; Kay et al. международную заявку 92/03917; Lonberg, N. et al. 1994 Nature 368:856-859; Green, L.L. et al. 1994 Nature Genet. 7:13-21; Morrison, S.L. et al. 1994 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:6851-6855; Bruggeman et al. 1993 Year Immunol 7:33-40; Tuaillon et al. 1993 PNAS 90:3720-3724; Bruggeman et al. 1991 Eur J Immunol 21:1323-1326).

Антитело может представлять собой антитело, в котором вариабельная область или ее часть, например CDR, вырабатываются в организме, отличном от человеческого, например крысы или мыши. Химерные антитела, антитела с привитыми CDR и гуманизированные антитела включены в объем настоящего изобретения. Антитела, вырабатываемые в организме, отличном от человеческого, например в организме крысы или мыши, и которые затем подвергают модификации, например, в вариабельном каркасе или константной области, для снижения антигенности у человека, входят в объем настоящего изобретения.

Антитела могут быть получены с помощью любых подходящих методик на основе рекомбинации ДНК, известных из уровня техники (см. Robinson et al., публикацию международной заявки на патент PCT/US86/02269; Akira, et al., заявку на европейский патент 184187; Taniguchi, M., заявку на европейский патент 171496; Morrison et al., заявку на европейский патент 173494; Neuberger et al., международную заявку WO 86/01533; Cabilly et al. патент США № 4816567; Cabilly et al., заявку на европейский патент 125023; Better et al. (1988 Science 240:1041-1043); Liu et al. (1987) PNAS 84:3439-3443; Liu et al., 1987, J. Immunol. 139:3521-3526; Sun et al. (1987) PNAS 84:214-218; Nishimura et al., 1987, Canc. Res. 47:999-1005; Wood et al. (1985) Nature 314:446-449; и Shaw et al., 1988, J. Natl Cancer Inst. 80:1553-1559).

В гуманизированном антителе или антителе с привитыми CDR по меньшей мере одну или две, но как правило, все три реципиентные CDR (из тяжелых и легких цепей иммуноглобулина) замещают донорной CDR. Антитело может быть замещено по меньшей мере частью CDR, не принадлежащей человеку, или только некоторые из CDR могут быть замещены CDR, не принадлежащими человеку. Необходимо только заменить количество CDR, необходимых для связывания гуманизированного антитела к CD73. В некоторых вариантах осуществления донор представляет собой антитело грызуна, например антитело крысы или мыши, а реципиент представляет собой каркасную область человека или консенсусную каркасную область человека. Как правило, иммуноглобулин, из которого получают CDR, называют "донорным", а иммуноглобулин, из которого получают каркас, называют "акцепторным". В одном варианте осуществления донорный иммуноглобулин представляет собой отличный от человеческого иммуноглобулин (например, иммуноглобулин грызуна). Акцепторная каркасная область представляет собой встречающуюся в природе (например, человеческую) каркасную область или консенсусную каркасную область или последовательность, на приблизительно 85% или больше, например на 90%, 95%, 99% или больше, идентичную им.

Используемый в данном документе термин "консенсусная последовательность" относится к последовательности, образованной из наиболее часто встречающихся аминокислот (или нуклеотидов) в семействе родственных последовательностей (см., например, Winnaker, From Genes to Clones (Verlagsgesellschaft, Weinheim, Germany 1987). В семействе белков каждое положение в консенсусной последовательности занято аминокислотой, наиболее часто встречающейся в этом положении в пределах семейства. Если две аминокислоты встречаются одинаково часто, любая из них может быть включена в консенсусную последовательность. "Консенсусный каркас" относится к каркасной области в консенсусной последовательности иммуноглобулина.

Антитело может быть гуманизировано с помощью способов, известных из уровня техники (см. например, Morrison, S. L., 1985, Science 229:1202-1207, Oi et al., 1986, BioTechniques 4:214, и Queen et al. патент США № 5585089, патент США № 5693761 и патент США № 5693762, содержание каждого из которых включено в данный документ посредством ссылки).

Гуманизированные или антитела с привитыми CDR антитела можно получать с помощью CDR-прививки или CDR-замены, где одна, две или все CDR иммуноглобулиновой цепи могут быть заменены. См., например, патент США № 5225539; Jones et al. 1986 Nature 321:552-525; Verhoeyan et al. 1988 Science 239:1534; Beidler et al. 1988 J. Immunol. 141:4053-4060; Winter патент США № 5225539, содержание каждого из которых специально включено в данный документ посредством ссылки

Также в объем настоящего изобретения включены гуманизированные антитела, в которых определенные аминокислоты были замещены, удалены или добавлены. Критерии выбора аминокислот от донора описаны в патенте США № 5585089, например, разделы 12-16 патента США № 5585089, например разделы 12-16 патента США № 5585089, содержание которых включено в настоящее описание посредством ссылки. Другие методики гуманизации антител описаны в Padlan et al. EP 519596 A1, опубликованном 23 декабря 1992 г.

Молекула антитела может представлять собой одноцепочечное антитело. Одноцепочечное антитело (scFV) может быть сконструированным (см., например, Colcher, D. et al. (1999) Ann N Y Acad Sci 880:263-80; и Reiter, Y. (1996) Clin Cancer Res 2:245-52). Одноцепочечное антитело может быть димеризовано или мультимеризовано с получением поливалентных антител, характеризующихся специфичностью в отношении разных эпитопов одного и того же белка-мишени.

В еще других вариантах осуществления молекула антитела содержит константную область тяжелой цепи, выбранную, например, из константных областей тяжелой цепи IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA1, IgA2, IgD и IgE; в частности, выбранную, например, из (например, человеческих) константных областей тяжелой цепи IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4. В другом варианте осуществления молекула антитела содержит константную область легкой цепи, выбранную, например, из (например, человеческой) константных областей легкой каппа-цепи или лямбда-цепи. Константная область может быть изменена, например, подвергнута мутации, для модификации свойств антитела (например, для повышения или снижения одного или нескольких из уровня связывания с рецептором Fc, уровня гликозилирования антител, числа цистеиновых остатков, функции эффекторных клеток и/или функции комплемента). В некоторых вариантах осуществления антитело обладает эффекторной функцией и может связывать комплемент. В других вариантах осуществления антитело не рекрутирует эффекторные клетки и не связывает комплемент. В определенных вариантах осуществления антитело обладает пониженной способностью связываться с рецептором Fc или не имеет ее. Например, оно может представлять собой изотип или подтип, фрагмент или другой мутант, который не поддерживает связывание с рецептором Fc, например, оно содержит область связывания с рецептором Fc, подвергнутую мутагенезу, или эта область удалена.

Способы изменения константной области антитела известны из уровня техники. Антитела с измененной функцией, например измененной аффиностью в отношении эффекторного лиганда, такого как FcR на клетке или компоненте С1 комплемента, можно получать путем замены по меньшей мере одного аминокислотного остатка в константной части антитела другим остатком (см. например, EP 388151 A1, патент США № 5624821 и патент США № 5648260, содержание каждого из которых включено в данный документ посредством ссылки). Также рассматривают аминокислотные мутации, которые стабилизируют структуру антитела, такие как S228P (нумерация Eu) в IgG4 человека. Могут быть описаны аналогичные виды изменений, которые, в случае их применения в отношении иммуноглобулина мыши или других видов, уменьшают или устраняют эти функции.

Молекула антитела может быть дериватизированой или связанной с другой функциональной молекулой (например, другим пептидом или белком). Используемый в данном документе термин "дериватизированная" молекула антитела представляет собой молекулу, которая была модифицирована. Способы дериватизации включают без ограничения добавление флуоресцентного фрагмента, радионуклеотида, токсина, фермента или аффинного лиганда, такого как биотин. Соответственно, предполагается, что молекулы антител по настоящему изобретению включают дериватизированные и иным образом модифицированные формы антител, описанные в данном документе, в том числе молекулы иммуноадгезии. Например, молекула антитела может быть функционально связана (посредством химического соединения, генетического слияния, нековалентной ассоциации или иным образом) с одним или несколькими другими молекулярными объектами, такими как другое антитело (например, биспецифическое антитело или диатело), средство, обеспечивающее обнаружение, цитотоксическое средство, фармацевтическое средство и/или белок или пептид, которые могут опосредовать ассоциацию антитела или части антитела с другой молекулой (такой как коровая область стрептавидина или полигистидиновая метка).

Молекулу дериватизированного антитела одного типа получают путем сшивания двух или более антител (одного и того же типа или разных типов, например, для создания биспецифических антител). Подходящие сшивающие средства включают средства, которые являются гетеробифункциональными и при этом содержат две группы, реагирующие отдельно, разделенные подходящим спейсером (например, м-малеимидобензоил-N-гидроксисукцинимидным эфиром), или гомобифункциональными (например, дисукцинимидилсуберат). Такие линкеры доступны от Pierce Chemical Company, Рокфорд, Иллинойс.

Применимые средства, обеспечивающие обнаружение, с помощью которых можно дериватизировать (или пометить) молекулу антитела по настоящему изобретению, включают флуоресцентные соединения, различные ферменты, простетические группы, люминесцентные материалы, биолюминесцентные материалы, атомы металлов, излучающие флуоресценцию, например европий (Eu) и другие антаниды, и радиоактивные материалы (описанные ниже). Типичные флуоресцентные средства, обеспечивающие обнаружение, включают флуоресцеин, изотиоцианат флуоресцеина, родамин, 5-диметиламин-1-нафталинсульфонилхлорид, фикоэритрин и т. п. Антитело также может быть дериватизировано с помощью ферментов, обеспечивающих обнаружение, таких как щелочная фосфатаза, пероксидаза хрена, β-галактозидаза, ацетилхолинэстераза, глюкозооксидаза и т. п. Если антитело дериватизировано с помощью фермента, обеспечивающего обнаружение, его обнаруживают путем добавления дополнительных реагентов, которые используются ферментом с получением детектируемого продукта реакции. Например, при присутствии средства, обеспечивающего обнаружение, представляющего собой пероксидазу хрена, добавление перекиси водорода и диаминобензидина приводит к получению окрашенного продукта реакции, который можно обнаружить. Молекула антитела также может быть дериватизирована с помощью простетической группы (например, стрептавидин/биотин и авидин/биотин). Например, антитело может быть дериватизировано с помощью биотина и обнаруживаться путем непрямого измерения уровня связывания авидина или стрептавидина. Примеры подходящих флуоресцентных материалов включают умбеллиферон, флуоресцеин, изотиоцианат флуоресцеина, родамин, дихлортриазиниламин флуоресцеина, дансилхлорид или фикоэритрин; пример люминесцентного материала включает люминол; и примеры биолюминесцентных материалов включают люциферазу, люциферин и экворин.

Меченую молекулу антитела можно применять, например, для диагностики и/или эксперимента в ряде случаев, в том числе (i) для выделения заранее определенного антигена с помощью стандартных методик, таких как аффинная хроматография или иммунопреципитация; (ii) для обнаружения заранее определенного антигена (например, в клеточном лизате или клеточном супернатанте) для оценки количества и характера экспрессии белка; (iii) для контроля уровней белка в ткани в качестве части процедуры клинического исследования, например, для определения эффективности данного режима лечения.

Молекула антитела может быть конъюгирована с другим молекулярным объектом, как правило меткой или терапевтическим (например, иммуномодулирующим, иммуностимуляторным, цитотоксическим или цитостатическим) средством или фрагментом. Радиоактивные изотопы можно применять в диагностических или терапевтических применениях. Радиоактивные изотопы, которые могут быть присоединены к антителам к CD73, включают без ограничения α-, β- или γ-излучатели или β- и γ-излучатели. Такие радиоактивные изотопы включают без ограничения йод (¹³¹I или ¹²⁵I), иттрий (⁹⁰Y), лютеций ( ¹⁷⁷Lu), актинидий (²²⁵Ac), празеодим, астатин ( ²¹¹At), рений (¹⁸⁶Re), висмут (²¹²Bi или ²¹³Bi), индий (¹¹¹In), технеций (⁹⁹mTc), фосфор (³²P), родий (¹⁸⁸Rh), сера (³⁵S), углерод (¹⁴C), тритий (³H), хром (⁵¹Cr), хлор (³⁶Cl), кобальт (⁵⁷Co или ⁵⁸Co), железо ( ⁵⁹Fe), селен (⁷⁵Se) или галлий (⁶⁷Ga). Радиоизотопы, применяемые в качестве терапевтических средств, включают иттрий (⁹⁰Y), лютеций (¹⁷⁷Lu), актиний (²²⁵Ac), празеодим, астатин (²¹¹At), рений (¹⁸⁶Re), висмут (²¹²Bi или ²¹³Bi) и родий (¹⁸⁸Rh). Радиоизотопы, применяемые в качестве меток, например, для применения в диагностике, включают йод (¹³¹I или ¹²⁵I), индий (¹¹¹In), технеций (⁹⁹mTc), фосфор (³²P), углерод (¹⁴C) и тритий (³ H) или один или несколько изотопов для терапевтического применения, перечисленных выше.

Настоящее изобретение относится к молекулам антител с радиоактивной меткой и способам их мечения. В одном варианте осуществления раскрыт способ мечения молекулы антитела. Способ предусматривает приведение молекулы антитела в контакт с хелатирующим средством с получением таким образом конъюгированного антитела. Конъюгированное антитело метят радиоактивной меткой с помощью радиоизотопа, например ¹¹¹индия, ⁹⁰иттрия и ¹⁷⁷лютеция, с получением таким образом меченой молекулы антитела.

Как обсуждалось выше, молекула антитела может быть конъюгирована с терапевтическим средством. Терапевтически активные радиоизотопы уже упоминались. Примеры других терапевтических средств включают таксол, цитохалазин B, грамицидин D, бромид этидия, эметин, митомицин, этопозид, тенопозид, винкристин, винбластин, колхицин, доксорубицин, даунорубицин, дигидроксиантрациндион, митоксантрон, митрамицин, актиномицин D, 1-дегидротестостерон, глюкокортикоиды, прокаин, тетракаин, лидокаин, пропранолол, пуромицин, майтанзиноиды, например майтанзинол (см. патент США № 5208020), CC-1065 (см. патенты США №№ 5475092, 5585499, 5846545), и их аналоги или гомологи. Терапевтические средства включают без ограничения антиметаболиты (например, метотрексат, 6-меркаптопурин, 6-тиогуанин, цитарабин, 5-фторурацил декарбазин), алкилирующие средства (например, мехлорэтамин, тиотэпа, хлорамбуцил, CC-1065, мелфалан, кармустин (BSNU) и ломустин (CCNU), циклофосфамид, бусульфан, дибромоманнитол, стрептозотоцин, митомицин C и цис-дихлордиамин платины (II) (DDP), цисплатин), антрациклины (например, даунорубицин (ранее дауномицин) и доксорубицин), антибиотики (например, дактиномицин (ранее актиномицин), блеомицин, митрамицин и антрамицин (AMC)) и антимитотические средства (например, винкристин, винбластин, таксол и майтансиноиды).

В одном аспекте настоящее изобретение относится к способу получения молекулы, связывающей мишень, которая связывается с рецептором CD73. Например, молекула, связывающая мишень, представляет собой молекулу антитела. Способ предусматривает: предоставление белка-мишени, который содержит по меньшей мере часть белка, не являющегося человеческим, причем эта часть гомологична (идентична на по меньшей мере 70, 75, 80, 85, 87, 90, 92, 94, 95, 96, 97, 98, или 99%) соответствующей части белка-мишени человека, но отличается на по меньшей мере одну аминокислоту (например, по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь или девять аминокислот); получение молекулы антитела, которая связывается с антигеном; и оценку эффективности связывающего средства в отношении модулирования активности белка-мишени. Способ может дополнительно предусматривать введение связывающего средства (например, молекулы антитела) или его производного (например, молекулы гуманизированного антитела) субъекту, представляющему собой человека.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела представляет собой молекулу полиспецифического (например, биспецифического или триспецифического) антитела. Протоколы для создания молекул биспецифического или гетеродимерного антител известны из уровня техники, включая без ограничения, например, подход "выступ во впадину", как описано, например, в US 5731168; спаривание Fc с использованием направленного электростатического взаимодействия, как описано, например, в WO 09/089004, WO 06/106905 и WO 2010/129304; образование гетеродимеров путем конструирования доменов с обменом нитей (SEED), как описано, например, в WO 07/110205; обмен Fab-фрагментами, как описано, например, в WO 08/119353, WO 2011/131746 и WO 2013/060867; двойные конъюгаты антител, например, получаемые путем сшивания антител с созданием биспецифической структуры с помощью гетеробифункционального реагента, содержащего реакционноспособную аминогруппу и реакционноспособную сульфгидрильную группу, как описано, например, в US 4433059; детерминанты биспецифических антител, создаваемые путем рекомбинации полуантител (пары тяжелая-легкая цепь или Fab) из разных антител посредством цикла восстановления и окисления дисульфидных связей между двумя тяжелыми цепями, как описано, например, в US 4444878; трифункциональные антитела, например, три Fab'-фрагмента, сшитые с помощью реакционноспособных сульфгидрильных групп, как описано, например, в US5273743; биосинтетические связывающие белки, например, пары scFv, сшитых на С-концевых хвостах, предпочтительно посредством химической сшивки посредством дисульфидных связей или реакционноспособных аминогрупп, как описано, например, в US5534254; бифункциональные антитела, например, Fab-фрагменты с различной специфичностью связывания, димеризованные с помощью лейциновых "застежек" (например, c-fos и c-jun), заменивших константный домен, как описано, например, в US5582996; биспецифические и олигоспецифические моно- и олиговалентные рецепторы, например, VH-CH1-области двух антител (два Fab-фрагмента), связанные полипептидным спейсером между CH1-областью одного антитела и VH-областью другого антитела, обычно с ассоциированными легкими цепями, как описано, например, в US5591828; биспецифические конъюгаты ДНК-антитело, например, получаемые путем сшивки антител или Fab-фрагментов двухнитевым фрагментом ДНК, как описано, например, в US5635602; биспецифические слитые белки, например, экспрессионную конструкцию, содержащую два scFv с гидрофильным спиральным пептидным линкером между ними и полной константной областью, как описано, например, в US5637481; поливалентные и полиспецифические связывающие белки, например, димер полипептидов, имеющий первый домен со связывающей областью вариабельной области тяжелой цепи Ig и второй домен со связывающей областью вариабельной области легкой цепи Ig, как правило, называемые диателами (также охватываются структуры более высокого порядка для создания биспецифических, триспецифических или тетраспецифических молекул, как описано, например, в US5837242; конструкции миниантител со связанными VL- и VH-цепями, дополнительно соединенными пептидными спейсерами с шарнирной областью антитела и СН3-областью, которые могут быть димеризованы с образованием биспецифических/поливалентных молекул, как описано, например, в US5837821; VH- и VL-домены, связанные коротким пептидным линкером (например, из 5 или 10 аминокислот) или вовсе не имеющие линкера, в любой ориентации, которые могут образовывать димеры с образованием биспецифических диател; тримеры и тетрамеры, как описано, например, в US5844094; нить из VH-доменов (или VL-доменов у представителей семейства), соединенных пептидными связями со сшиваемыми группами на С-конце, дополнительно ассоциированных с VL-доменами с образованием последовательно соединенных Fv (или scFv), как описано, например, в US5864019; и одноцепочечные связывающие полипептиды как с VH-, так и с VL-доменами, связанными пептидным линкером, объединенные в поливалентные структуры посредством нековалентной или химической сшивки с образованием, например, гомобивалентных, гетеробивалентных, тривалентных и тетравалентных структур с использованием формата как типа scFv, так и типа диатела, как описано, например, в US5869620. Дополнительные иллюстративные полиспецифические и биспецифические молекулы и способы их получения находятся, например, в US5910573, US5932448, US5959083, US5989830, US6005079, US6239259, US6294353, US6333396, US6476198, US6511663, US6670453, US6743896, US6809185, US6833441, US7129330, US7183076, US7521056, US7527787, US7534866, US7612181, US2002004587A1, US2002076406A1, US2002103345A1, US2003207346A1, US2003211078A1, US2004219643A1, US2004220388A1, US2004242847A1, US2005003403A1, US2005004352A1, US2005069552A1, US2005079170A1, US2005100543A1, US2005136049A1, US2005136051A1, US2005163782A1, US2005266425A1, US2006083747A1, US2006120960A1, US2006204493A1, US2006263367A1, US2007004909A1, US2007087381A1, US2007128150A1, US2007141049A1, US2007154901A1, US2007274985A1, US2008050370A1, US2008069820A1, US2008152645A1, US2008171855A1, US2008241884A1, US2008254512A1, US2008260738A1, US2009130106A1, US2009148905A1, US2009155275A1, US2009162359A1, US2009162360A1, US2009175851A1, US2009175867A1, US2009232811A1, US2009234105A1, US2009263392A1, US2009274649A1, EP346087A2, WO0006605A2, WO02072635A2, WO04081051A1, WO06020258A2, WO2007044887A2, WO2007095338A2, WO2007137760A2, WO2008119353A1, WO2009021754A2, WO2009068630A1, WO9103493A1, WO9323537A1, WO9409131A1, WO9412625A2, WO9509917A1, WO9637621A2, WO9964460A1. Содержание вышеупомянутых заявок включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

В других вариантах осуществления молекула антитела к CD73 (например, молекула моноспецифического, биспецифического или полиспецифического антитела) ковалентно связана, например слита, с другим партнером, например с белком, например одним, двумя или более цитокинами, например в виде слитой молекулы, например слитого белка.

"Слитый белок" и "слитый полипептид" относятся к полипептиду, имеющему по меньшей мере две части, ковалентно связанные друг с другом, где каждая из частей представляет собой полипептид, характеризующийся отличными свойствами. Свойство может представлять собой биологическое свойство, такое как активность in vitro или in vivo. Свойство также может представлять собой простое химическое или физическое свойство, такое как связывание с молекулой-мишенью, катализ реакции и т. д. Такие две части могут быть связаны непосредственно одной пептидной связью или с помощью пептидного линкера, но находятся в одной рамке считывания.

В настоящем изобретении предусмотрена выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая любую из вышеупомянутых молекул антитела, векторы и их клетки-хозяева. Молекула нуклеиновой кислоты включает без ограничения РНК, геномную ДНК и кДНК.

Иллюстративные молекулы антител к CD73

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну антигенсвязывающую область, например вариабельную область или ее антигенсвязывающий фрагмент, из антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанных в таблице 1; или кодируемого нуклеотидной последовательностью из таблицы 1; или последовательностью по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две, три или четыре вариабельные области из антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанных в таблице 1; или кодируемого нуклеотидной последовательностью из таблицы 1; или последовательностью по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну или две вариабельные области тяжелой цепи из антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанных в таблице 1; или кодируемого нуклеотидной последовательностью из таблицы 1; или последовательностью по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну или две вариабельные области легкой цепи из антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанных в таблице 1; или кодируемого нуклеотидной последовательностью из таблицы 1; или последовательностью по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей.

В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит константную область тяжелой цепи IgG4, например IgG4 человека. В другом варианте осуществления IgG4 человека содержит замену (например, замену Ser на Pro) в положении 228 по нумерации Eu. В еще одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит константную область тяжелой цепи IgG1, например IgG1 человека. В одном варианте осуществления IgG1 человека содержит замену (например, замену Asn на Ala) в положении 297 по нумерации Eu. В одном варианте осуществления IgG1 человека содержит замену (например, замену Asp на Ala) в положении 265 по нумерации Eu, замену (например, замену Pro на Ala) в положении 329 по нумерации Eu или и то, и другое. В одном варианте осуществления IgG1 человека содержит замену (например, замену Leu на Ala) в положении 234 по нумерации Eu, замену (например, замену Leu на Ala) в положении 235 по нумерации Eu или и то, и другое. В одном варианте осуществления константная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, изложенную в таблице 3, или последовательность, по сути идентичную (например, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) ей.

В еще одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит константную область легкой каппа-цепи, например константную область легкой каппа-цепи человека. В одном варианте осуществления константная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, изложенную в таблице 3, или последовательность, по сути идентичную (например, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) ей.

В другом варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит константную область тяжелой цепи IgG4, например IgG4 человека, и константную область легкой каппа-цепи, например константную область легкой каппа-цепи человека, например константную область тяжелой и легкой цепей, содержащую аминокислотную последовательность, изложенную в таблице 3, или последовательность, по сути идентичную (например, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) ей. В еще другом варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит константную область тяжелой цепи IgG1, например IgG1 человека, и константную область легкой каппа-цепи, например константную область легкой каппа-цепи человека, например константную область тяжелой и легкой цепей, содержащую аминокислотную последовательность, изложенную в таблице 3, или последовательность, по сути идентичную (например, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) ей. В одном варианте осуществления IgG1 человека содержит замену в положении 297 в соответствии с нумерацией Eu (например, замену Asn на Ala). В одном варианте осуществления IgG1 человека содержит замену в положении 265 в соответствии с нумерацией Eu, замену в положении 329 в соответствии с нумерацией Eu или обе (например, замену Asp на Ala в положении 265 и/или замену Pro на Ala в положении 329). В одном варианте осуществления IgG1 человека содержит замену в положении 234 в соответствии с нумерацией Eu, замену в положении 235 в соответствии с нумерацией Eu или обе (например, замену Leu на Ala в положении 234 и/или замену Leu на Ala в положении 235).

В другом варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область и константную область тяжелой цепи, вариабельную область и константную область легкой цепи, или и то, и другое, содержащие аминокислотную последовательность из 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанных в таблице 1; или кодируемых нуклеотидной последовательностью из таблицы 1; или последовательностью по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три определяющие комплементарность области (CDR) из вариабельной области тяжелой цепи антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанных в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью из таблицы 1; или последовательностью по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три определяющие комплементарность области (CDR) из вариабельной области тяжелой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, показанную в таблице 1, или кодируемую нуклеотидной последовательностью из таблицы 1. В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или в совокупности все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять или больше изменений, например аминокислотных замен, вставок или делеций по сравнению с аминокислотной последовательностью, показанной в таблице 1, или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит замену в CDR тяжелой цепи, например одну или несколько замен в CDR1, CDR2 и/или CDR3 тяжелой цепи.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три определяющие комплементарность области (CDR) из вариабельной области легкой цепи антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанного в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью из таблицы 1; или последовательностью по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три CDR (или в совокупности все CDR) из вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, показанную в таблице 1 или кодируемую нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления одна или несколько CDR (или в совокупности все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или больше изменений, например аминокислотных замен, вставок или делеций по сравнению с CDR, показанными в таблице 1, или кодируемыми нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три CDR (или в совокупности все CDR) из вариабельной области легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, показанную в таблице 1 или кодируемую нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления одна или несколько CDR (или в совокупности все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или больше изменений, например аминокислотных замен, вставок или делеций по сравнению с CDR, показанными в таблице 1, или кодируемыми нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR (или в совокупности все CDR) из вариабельной области тяжелой и легкой цепи, содержащей аминокислотную последовательность, показанную в таблице 1 или кодируемую нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления одна или несколько CDR (или в совокупности все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или больше изменений, например аминокислотных замен, вставок или делеций по сравнению с CDR, показанными в таблице 1, или кодируемыми нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит все шесть CDR из антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанного в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью из таблицы 1, или близкородственные CDR, например CDR, которые являются идентичными или которые имеют по меньшей мере одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или вставок, например консервативных замен). В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 может содержать любую CDR, описанную в данном документе. В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит замену в CDR тяжелой цепи, например одну или несколько замен в CDR1, CDR2 и/или CDR3 тяжелой цепи.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три CDR в соответствии с Kabat et al. (например, по меньшей мере одну, две или три CDR в соответствии с нумерацией по Kabat, изложенных в таблице 1) из вариабельной области тяжелой цепи антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанного в таблице 1 или кодируемого нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1; или последовательностью, по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей; или которая имеет по меньшей мере одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или вставок, например консервативных замен) по сравнению с одной, двумя или тремя CDR в соответствии с Kabat et al., показанными в таблице 1.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три CDR в соответствии с Kabat et al. (например, по меньшей мере одну, две или три CDR в соответствии с нумерацией по Kabat, изложенных в таблице 1) из вариабельной области легкой цепи антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или кодируемого нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1; или последовательностью, по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей; или которая имеет по меньшей мере одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или вставок, например консервативных замен) по сравнению с одной, двумя или тремя CDR в соответствии с Kabat et al., показанными в таблице 1.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR в соответствии с Kabat et al. (например, по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR в соответствии с нумерацией по Kabat, изложенных в таблице 1) из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанного в таблице 1 или кодируемого нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1; или последовательностью, по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей; или которая имеет по меньшей мере одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или вставок, например консервативных замен) по сравнению с одной, двумя, тремя, четырьмя, пятью или шестью CDR в соответствии с Kabat et al, показанными в таблице 1.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит все шесть CDR в соответствии с Kabat et al. (например, все шесть CDR в соответствии с нумерацией по Kabat, изложенных в таблице 1) из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанного в таблице 1 или кодируемого нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1; или последовательностью, по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей; или которая имеет по меньшей мере одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или вставок, например консервативных замен) по сравнению со всеми шестью CDR в соответствии с Kabat et al., показанными в таблице 1. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 может содержать любую CDR, описанную в данном документе.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три гипервариабельные петли по Chothia (например, по меньшей мере одну, две или три гипервариабельные петли в соответствии с нумерацией по Chothia, изложенные в таблице 1) из вариабельной области тяжелой цепи антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанного в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью из таблицы 1; или по меньшей мере аминокислоты из этих гипервариабельных петель, которые взаимодействуют с CD73; или которые имеют по меньшей мере одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или вставок, например консервативных замен) по сравнению с одной, двумя или тремя гипервариабельными петлями по Chothia et al., показанными в таблице 1.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три гипервариабельные петли по Chothia (например, по меньшей мере одну, две или три гипервариабельные петли в соответствии с нумерацией по Chothia, изложенные в таблице 1) из вариабельной области легкой цепи антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанного в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью из таблицы 1; или по меньшей мере аминокислоты из этих гипервариабельных петель, которые взаимодействуют с CD73; или которые имеют по меньшей мере одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или вставок, например консервативных замен) по сравнению с одной, двумя или тремя гипервариабельными петлями по Chothia et al., показанными в таблице 1.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть гипервариабельных петель (например, по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть гипервариабельных петель в соответствии с нумерацией по Chothia, изложенные в таблице 1) из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398 или описанного в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью из таблицы 1; или по меньшей мере аминокислоты из этих гипервариабельных петель, которые взаимодействуют с CD73; или которые имеют по меньшей мере одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или вставок, например консервативных замен) по сравнению с одной, двумя, тремя, четырьмя, пятью или шестью гипервариабельными петлями по Chothia et al., показанными в таблице 1.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит все шесть гипервариабельных петель (например, все шесть гипервариабельных петель в соответствии с нумерацией по Chothia, изложенные в таблице 1) антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398;, или близкородственные гипервариабельные петли, например гипервариабельные петли, которые являются идентичными или которые имеют по меньше мере одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или вставок, например консервативных замен); или которые имеют по меньшей мере одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или вставок, например консервативных замен) по сравнению со всеми шестью гипервариабельными петлями по Chothia et al., показанными в таблице 1. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 может содержать любую гипервариабельную петлю, описанную в данном документе.

В еще одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три гипервариабельные петли, которые имеют те же канонические структуры, что и соответствующая гипервариабельная петля антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398,, например те же канонические структуры, что и по меньшей мере петля 1 и/или петля 2 вариабельных доменов тяжелой и/или легкой цепей антитела, описанного в данном документе. См., например, Chothia et al., (1992) J. Mol. Biol. 227:799-817; Tomlinson et al., (1992) J. Mol. Biol. 227:776-798 в отношении описаний канонических структур гипервариабельных петель. Эти структуры можно определить путем рассмотрения таблиц, описанных в данных ссылках.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит комбинацию CDR или гипервариабельных петель, определенных в соответствии с Kabat et al. и Chothia et al.

В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три CDR или гипервариабельные петли из вариабельной области тяжелой цепи антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398,, в соответствии с нумерацией по Kabat и Chothia (например, по меньшей мере одну, две или три CDR или гипервариабельные петли в соответствии с нумерацией по Kabat и Chothia, изложенные в таблице 1); или кодируемые нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1; или последовательностью, по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей; или которая имеет по меньшей мере одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или вставок, например консервативных замен) по сравнению с одной, двумя или тремя CDR или гипервариабельными петлями по Kabat и/или Chothia, показанными в таблице 1.

В другом варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три CDR или гипервариабельные петли из вариабельной области легкой цепи антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398, в соответствии с нумерацией по Kabat и Chothia (например, по меньшей мере одну, две или три CDR или гипервариабельные петли в соответствии с нумерацией по Kabat и Chothia, изложенные в таблице 1); или кодируемые нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1; или последовательностью, по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей; или которая имеет по меньшей мере одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или вставок, например консервативных замен) по сравнению с одной, двумя или тремя CDR или гипервариабельными петлями по Kabat и/или Chothia, показанными в таблице 1.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три CDR по нумерации IMGT (например, по меньшей мере одну, две или три CDR по нумерации IMGT, изложенные в таблице 1) из вариабельной области тяжелой цепи антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанного в таблице 1 или кодируемого нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1; или последовательностью, по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей; или которая имеет по меньшей мере одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или вставок, например консервативных замен) по сравнению с одной, двумя или тремя CDR по нумерации IMGT, показанными в таблице 1.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три CDR по нумерации IMGT (например, по меньшей мере одну, две или три CDR по нумерации IMGT, изложенные в таблице 1) из вариабельной области легкой цепи антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или кодируемого нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1; или последовательностью, по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей; или которая имеет по меньшей мере одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или вставок, например консервативных замен) по сравнению с одной, двумя или тремя CDR по нумерации IMGT, показанными в таблице 1.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR по нумерации IMGT (например, по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть CDR по нумерации IMGT, изложенные в таблице 1) из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанного в таблице 1 или кодируемого нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1; или последовательностью, по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей; или которая имеет по меньшей мере одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или вставок, например консервативных замен) по сравнению с одной, двумя, тремя, четырьмя, пятью или шестью CDR по нумерации IMGT, показанными в таблице 1.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит все шесть CDR по нумерации IMGT (например, все шесть CDR по нумерации IMGT, изложенные в таблице 1) из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанного в таблице 1; или кодируемого нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 1; или или последовательностью, по сути идентичной (например, характеризующейся по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности) любой из вышеупомянутых последовательностей; или которая имеет по меньшей мере одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, делеций или вставок, например консервативных замен) по сравнению со всеми шестью CDR по нумерации IMGT, показанными в таблице 1. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 может содержать любую CDR, описанную в данном документе.

Молекула антитела к CD73 может содержать любую комбинацию CDR или гипервариабельных петель в соответствии с нумерацией по Kabat и Chothia.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три гипервариабельные петли по нумерации Chothia из вариабельной области тяжелой цепи антитела, описанного в данном документе, например антитела из таблицы 1, или по меньшей мере аминокислоты из этих гипервариабельных петель, которые взаимодействуют с CD73.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три гипервариабельные петли по нумерации Chothia из вариабельной области легкой цепи антитела, описанного в данном документе, например антитела из таблицы 1, или по меньшей мере аминокислоты из этих гипервариабельных петель, которые взаимодействуют с CD73.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три гипервариабельные петли по Kabat из вариабельной области тяжелой цепи антитела, описанного в данном документе, например антитела из таблицы 1, или по меньшей мере аминокислоты из этих гипервариабельных петель, которые взаимодействуют с CD73.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три гипервариабельные петли по Kabat из вариабельной области легкой цепи антитела, описанного в данном документе, например антитела из таблицы 1, или по меньшей мере аминокислоты из этих гипервариабельных петель, которые взаимодействуют с CD73.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три гипервариабельные петли по IMGT из вариабельной области тяжелой цепи антитела, описанного в данном документе, например антитела из таблицы 1, или по меньшей мере аминокислоты из этих гипервариабельных петель, которые взаимодействуют с CD73.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три гипервариабельные петли по IMGT из вариабельной области легкой цепи антитела, описанного в данном документе, например антитела из таблицы 1, или по меньшей мере аминокислоты из этих гипервариабельных петель, которые взаимодействуют с CD73.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть гипервариабельных петель из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей антитела, описанного в данном документе, например антитела из таблицы 1, или по меньшей мере аминокислоты из этих гипервариабельных петель, которые взаимодействуют с CD73.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит все шесть гипервариабельных петель из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей антитела, описанного в данном документе, например антитела из таблицы 1, или по меньшей мере аминокислоты из тех гипервариабельных петель, которые взаимодействуют с CD73, или близкородственных гипервариабельных петель, например гипервариабельных петель, которые являются идентичными или имеют, по меньшей мере, одно изменение аминокислоты, но не более двух, трех или четырех изменений (например, замен, например консервативных замен, делеций или вставок).

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три гипервариабельные петли, которые имеют те же канонические структуры, что и соответствующая гипервариабельная петля антитела, описанного в данном документе, например антитела из таблицы 1, например те же канонические структуры, что и по меньшей мере петля 1 и/или петля 2 вариабельных доменов тяжелой и/или легкой цепей антитела, описанного в данном документе. См., например, Chothia et al., (1992) J. Mol. Biol. 227:799-817; Tomlinson et al., (1992) J. Mol. Biol. 227:776-798 в отношении описаний канонических структур гипервариабельных петель. Эти структуры можно определить путем рассмотрения таблиц, описанных в данных литературных источниках. В варианте осуществления, например варианте осуществления, предусматривающем вариабельную область, CDR (например, CDR по Chothia, Kabat или IMGT) или другую последовательность, упоминаемую в данном документе, например в таблице 1, молекула антитела представляет собой молекулу моноспецифического антитела, молекулу биспецифического антитела или представляет собой молекулу антитела, которая содержит антигенсвязывающий фрагмент антитела, например полуантитело или антигенсвязывающий фрагмент полуантитела.

В некоторых вариантах осуществления вариабельный домен тяжелой или легкой цепей, или оба, молекулы антитела к CD73 содержат аминокислотную последовательность, которая является по сути идентичной аминокислотной последовательности, раскрытой в данном документе, например характеризуется по меньшей мере приблизительно 80%, 85%, 90%, 92%, 95%, 97%, 98%, или 99% идентичностью последовательности с вариабельной областью антитела, раскрытого в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398; или описанного в таблице 1, или кодируемого нуклеотидной последовательностью, описанной в таблице 1; или которая отличается по меньшей мере 1 или 5 остатками, но менее чем 40, 30, 20 или 10 остатками, от вариабельной области антитела, описанного в данном документе.

В определенных вариантах осуществления вариабельный домен тяжелой или легкой цепей или оба из молекулы антитела к CD73 содержат аминокислотную последовательность, кодируемую последовательностью нуклеиновой кислоты, описанной в данном документе, или нуклеиновой кислотой, которая гибридизируется с последовательностью нуклеиновой кислоты, описанной в данном документе (например, последовательностью нуклеиновой кислоты, показанной в таблице 1), или последовательностью, комплементарной ей, например, в условиях низкой жесткости, средней жесткости или высокой жесткости или других условиях гибридизации, описанных в данном документе.

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две, три или четыре антигенсвязывающие области, например вариабельные области, имеющие аминокислотную последовательность, изложенную в таблице 1, или последовательность, по сути идентичную ей (например последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней, или которая отличается на не более чем 1, 2, 5, 10 или 15 аминокислотных остатков от последовательностей, показанных в таблице 1). В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит домен VH и/или VL, кодируемый нуклеиновой кислотой, имеющей нуклеотидную последовательность, которая кодирует антитело из таблицы 1, или последовательность, по сути идентичную ей (например, последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней, или которая отличается на не более чем 3, 6, 15, 30 или 45 нуклеотидов от последовательностей, показанных в таблице 1).

В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три (например, все) CDR из вариабельной области тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность, изложенную в таблице 1, или последовательность, по сути гомологичную ей (например, последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащую одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит меньшей мере одну, две или три (например, все) CDR из вариабельной области легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность, изложенную в таблице 1, или последовательность, по сути гомологичную ей (например, последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащую одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен). В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть (например, все) CDR из вариабельных областей тяжелой и легкой цепей, имеющих аминокислотную последовательность, изложенную в таблице 1, или последовательность, по сути гомологичную ей (например, последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащую одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен).

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три (например, все) CDR и/или гипервариабельные петли из вариабельной области тяжелой цепи, имеющей аминокислотную последовательность антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398,, в общем представленных в таблице 1, или последовательность, по сути идентичную ей (например, последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с ней и/или содержащую одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен). В определенных вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит по меньшей мере одну, две или три (например, все) CDR и/или гипервариабельные петли из вариабельной области легкой цепи, имеющей аминокислотную последовательность антитела, описанного в данном документе, например антитела, выбранного из антитела 918, 350, 356, 358, 930, 373, 374, 376, 377, 379, 363, 366, 407, 893, 939, 430, или 398,, совместно представленных в таблице 1, или последовательность, по сути идентичную ей (например, последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99%идентичностью последовательности с ней и/или содержащую одну, две, три или более замен, вставок или делеций, например консервативных замен). В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит все шесть CDR и/или гипервариабельных петель, описанных в данном документе, например, описанных в таблице 1.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела содержит вариабельную область, которая является идентичной по последовательности, или которая отличается на 1, 2, 3 или 4 аминокислоты от вариабельной области, описанной в данном документе (например, FR-области, раскрытой в данном документе).

В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность GGLYGSGSYLSDFDL VHCDR3 (SEQ ID NO: 37). В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность ESQESPYNNWFDP VHCDR3 (SEQ ID NO: 3).

В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 88, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 89 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50, каждая из которых раскрыта в таблице 2. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 90, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 91 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16, каждая из которых раскрыта в таблице 2.

В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 122, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 123 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 51, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 53, каждая из которых раскрыта в таблице 2. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 124, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 125 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 17, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 18 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 19, каждая из которых раскрыта в таблице 2.

В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 126, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 89 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50, каждая из которых раскрыта в таблице 2. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 127, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 91 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16, каждая из которых раскрыта в таблице 2.

В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 128, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 129 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 43; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 54, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50, каждая из которых раскрыта в таблице 2. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 130, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 131 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 9; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 20, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 18 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16, каждая из которых раскрыта в таблице 2.

В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 189, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 89 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 43; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50, каждая из которых раскрыта в таблице 2. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 196, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 91 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 9; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16, каждая из которых раскрыта в таблице 2.

В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 36 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 72, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 38, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 136 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 146 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 137, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 154 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 61, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 60 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 2 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 163, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 162 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 39, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 40 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 51, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 53. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 73, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 74 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 51, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 53. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 82, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 74 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 51, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 53. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 138, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 139 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 51, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 53. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 147, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 148 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 51, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 53. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 155, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 156 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 51, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 53. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 62, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 63 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 17, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 18 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 19. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 27, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 28 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 17, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 18 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 19. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 5, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 6 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 17, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 18 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 19. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 164, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 165 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 17, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 18 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 19.

В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 35, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 36 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 70, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 81, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 135, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 136 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 145, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 146 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 153, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 154 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 37; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 59, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 60 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 25, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 1, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 2 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 161, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 162 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 3; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 41, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 42 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 43; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 54, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 75, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 76 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 43; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 54, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 83, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 76 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 43; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 54, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 140, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 141 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 43; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 54, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 149, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 150 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 43; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 54, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 157, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 158 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 43; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 54, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 52 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 64, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 65 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 9; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 20, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 18 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 29, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 30 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 9; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 20, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 18 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 8 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 9; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 20, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 18 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 166, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 167 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 9; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 20, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 18 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16.

В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 190, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 36 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 43; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 191, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 43; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 192, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 71 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 43; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 193, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 136 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 43; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 194, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 146 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 43; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 195, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 154 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 43; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 48, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 49 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 50. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 197, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 60 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 9; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 198, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 26 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 9; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 199, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 2 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 9; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16. В одном варианте осуществления молекула антитела к CD73 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 200, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 162 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 9; и VL, содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 14, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 15 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 16.

В других вариантах осуществления вышеупомянутые антитела содержат вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с любой из SEQ ID NO: 44, 77, 84, 142, 151 или 159. В других вариантах осуществления вышеупомянутые антитела содержат вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с любой из SEQ ID NO: 66, 31, 10 или 168.

В других вариантах осуществления вышеупомянутые антитела содержат вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с любой из SEQ ID NO: 55 или 21.

В других вариантах осуществления вышеупомянутые антитела содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с любой из SEQ ID NO: 46, 79, 86, 114, 116 или 117. В других вариантах осуществления вышеупомянутые антитела содержат тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с любой из SEQ ID NO: 68, 33, 12, 115, 113 или 112.

В других вариантах осуществления вышеупомянутые антитела содержат легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с любой из SEQ ID NO: 57 или 23.

В других вариантах осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 44; и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 55. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 77; и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 55. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 84; и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 55. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 142; и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 55. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 151; и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 55. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 159; и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 55. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 66; и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 21. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 31; и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 21. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 10; и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 21. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 168; и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 21.

В других вариантах осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 46; и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 57. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 79; и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 57. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 86; и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 57. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 114; и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 57. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 116; и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 57. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 117; и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 57. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 68; и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 23. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 33; и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 23. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 12; и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 23. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 115; и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 23. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 113; и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 23. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 112; и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 23.

В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 81, 201, 37, 205, 206 и 207 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 38, 201, 37, 205, 206 и 207 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 82, 202, 37, 208, 209 и 228 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 83, 203, 43, 229, 209 и 207 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 192, 201, 43, 205, 206 и 207 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VH и VL, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 204 и 230 соответственно (или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с ними).

В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 81, 231, 37, 205, 206 и 207 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 38, 231, 37, 205, 206 и 207 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 82, 232, 37, 208, 209 и 228 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 83, 233, 43, 229, 209 и 207 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 192, 231, 43, 205, 206 и 207 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VH и VL, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 234 и 230 соответственно (или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с ними).

В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 235, 236, 237, 246, 15 и 247 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 238, 236, 237, 246, 15 и 247 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 239, 240, 237, 248, 18 и 249 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 241, 242, 243, 250, 18 и 247 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 244, 236, 243, 246, 15 и 247 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VH и VL, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 245 и 251 соответственно (или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с ними).

В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 252, 253, 254, 262, 263 и 264 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 255, 253, 254, 262, 263 и 264 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 155, 256, 254, 265, 266 и 267 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 257, 258, 259, 268, 266 и 264 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 260, 253, 259, 262, 263 и 264 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VH и VL, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 261 и 269 соответственно (или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с ними).

В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 287, 288, 289, 298, 49 и 299 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 290, 288, 289, 298, 49 и 299 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 291, 292, 289, 300, 52 и 301 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 293, 294, 295, 302, 52 и 299 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 296, 288, 295, 298, 49 и 299 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VH и VL, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 297 и 303 соответственно (или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с ними).

В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 304, 305, 306, 14, 15 и 314 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 61, 305, 306, 14, 15 и 314 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 307, 308, 306, 17, 18 и 315 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 309, 310, 311, 20, 18 и 314 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 312, 305, 311, 14, 15 и 314 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VH и VL, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 313 и 316 соответственно (или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с ними).

В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 317, 318, 319, 14, 15 и 328 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 320, 318, 319, 14, 15 и 328 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 321, 322, 319, 17, 18 и 329 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 323, 324, 325, 20, 18 и 328 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VHCDR1, VHCDR2, VHCDR3, VLCDR1, VLCDR2 и VLCDR3, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 326, 318, 325, 14, 15 и 328 соответственно. В других вариантах осуществления молекула антитела содержит VH и VL, содержащие аминокислотные последовательности под SEQ ID NO: 327 и 330 соответственно (или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85% (например, по меньшей мере 90%, 95%, 97%, 98%, 99%, или 100%) идентичностью последовательности с ними).

В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител выбраны из полноразмерного антитела, биспецифического антитела, Fab, F(ab')2, Fv или одноцепочечного фрагмента Fv (scFv).

В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат константную область тяжелой цепи, выбранную из IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4.

В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител содержат константную область легкой цепи, выбранную из константных областей легкой каппа-или лямбда-цепи.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит вариабельную область тяжелой цепи, вариабельную область легкой цепи, константную область тяжелой цепи и/или константную область легкой цепи, раскрытые в таблице 1. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит константную область тяжелой цепи и/или константную область легкой цепи, раскрытые в таблице 3. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит константную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 92-103, 119 и 120. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 содержит константную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 104.

Иллюстративные последовательности антител к CD73 описаны в таблицах 1 и 2 ниже.

Таблица 1. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности для иллюстративных антител к CD73.

358 SEQ ID NO: 1 (объединенная) HCDR1 GGSISGRYWS SEQ ID NO: 2 (объединенная) HCDR2 YIYGTGSTNYNPSLKS SEQ ID NO: 3 (объединенная) HCDR3 ESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 4 (Kabat) HCDR1 GRYWS SEQ ID NO: 2 (Kabat) HCDR2 YIYGTGSTNYNPSLKS SEQ ID NO: 3 (Kabat) HCDR3 ESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 5 (Chothia) HCDR1 GGSISGR SEQ ID NO: 6 (Chothia) HCDR2 YGTGS SEQ ID NO: 3 (Chothia) HCDR3 ESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 7 (IMGT) HCDR1 GGSISGRY SEQ ID NO: 8 (IMGT) HCDR2 IYGTGST SEQ ID NO: 9 (IMGT) HCDR3 ARESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 199 (альтернативная) HCDR1 GSISGRYWS SEQ ID NO: 2 (альтернативная) HCDR2 YIYGTGSTNYNPSLKS SEQ ID NO: 9 (альтернативная) HCDR3 ARESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 10 VH QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISGRYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYGTGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARESQESPYNNWFDPWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 11 ДНК, кодирующая VH CAAGTGCAGCTGCAGGAATCTGGCCCTGGCCTGGTCAAGCCCTCCGAGACACTGTCCCTGACCTGCACCGTGTCCGGCGGCTCCATCTCCGGCCGGTACTGGTCTTGGATCCGGCAGCCTCCCGGCAAGGGCCTGGAATGGATCGGCTACATCTACGGCACCGGCTCCACCAACTACAACCCCAGCCTGAAGTCCAGAGTGACCATCTCCGTGGACACCTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGTCCTCCGTGACCGCCGCTGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCAGAGAGTCCCAGGAATCCCCTTACAACAATTGGTTCGACCCCTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTGTCCTCT SEQ ID NO: 12 Тяжелая цепь 358.A QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISGRYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYGTGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARESQESPYNNWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGX,
где X представляет собой K или отсутствует. SEQ ID NO: 13 ДНК, кодирующая тяжелую цепь 358.A CAAGTGCAGCTGCAGGAATCTGGCCCTGGCCTGGTCAAGCCCTCCGAGACACTGTCCCTGACCTGCACCGTGTCCGGCGGCTCCATCTCCGGCCGGTACTGGTCTTGGATCCGGCAGCCTCCCGGCAAGGGCCTGGAATGGATCGGCTACATCTACGGCACCGGCTCCACCAACTACAACCCCAGCCTGAAGTCCAGAGTGACCATCTCCGTGGACACCTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGTCCTCCGTGACCGCCGCTGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCAGAGAGTCCCAGGAATCCCCTTACAACAATTGGTTCGACCCCTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTGTCCTCTGCTTCCACCAAGGGCCCCTCCGTGTTCCCTCTGGCCCCTTGCTCCCGGTCCACCTCCGAGTCTACCGCCGCTCTGGGCTGCCTCGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACTCTGGCGCCCTGACCTCCGGCGTGCACACCTTCCCTGCCGTGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCCCTGTCCAGCGTCGTGACCGTGCCCTCCTCCAGCCTGGGCACCAAGACCTACACCTGTAACGTGGACCACAAGCCCTCCAACACCAAAGTGGACAAGCGGGTGGAATCTAAGTACGGCCCTCCCTGCCCTCCTTGCCCTGCCCCTGAGTTCCTGGGCGGACCTTCCGTGTTCCTGTTCCCTCCAAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCTCCCGGACCCCTGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAAGATCCCGAAGTCCAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAACAGTTCAACTCCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGCCTGCCCTCCAGCATCGAAAAGACCATCTCCAAGGCCAAGGGCCAGCCCCGCGAGCCCCAAGTGTACACCCTGCCTCCCAGCCAGGAAGAGATGACCAAGAATCAAGTGTCCCTGACTTGTCTGGTCAAGGGCTTCTACCCCTCCGATATCGCCGTGGAGTGGGAGTCCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTGTACTCTCGGCTGACCGTGGACAAGTCCCGGTGGCAGGAAGGCAACGTCTTCTCCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGTCCCTGTCCCTGTCTCTGGGCX₁X₂X₃,
где X₁ представляет собой A, X₂ представляет собой A, и X₃ представляет собой G; или X₁ отсутствует, X₂ отсутствует и X₃ отсутствует. SEQ ID NO: 112 Тяжелая цепь 358.B QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISGRYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYGTGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARESQESPYNNWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFEGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGX,
где X представляет собой K или отсутствует SEQ ID NO: 14 (объединенная) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (объединенная) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 16 (объединенная) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 14 (Kabat) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (Kabat) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 16 (Kabat) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 17 (Chothia) LCDR1 SQGISSW SEQ ID NO: 18 (Chothia) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 19 (Chothia) LCDR3 GNSFPR SEQ ID NO: 20 (IMGT) LCDR1 QGISSW SEQ ID NO: 18 (IMGT) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 16 (IMGT) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 14 (альтернативная) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (альтернативная) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 16 (альтернативная) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 21 VL DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQGNSFPRTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 22 ДНК, кодирующая VL GACATCCAGATGACCCAGAGCCCCTCCTCCGTGTCCGCCTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTCGGGCCTCCCAGGGCATCTCCAGCTGGCTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCCAGCCTGCAGTCCGGCGTGCCCTCCAGATTCTCCGGCTCTGGCTCCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGGCAACTCCTTCCCTCGGACCTTCGGCGGAGGCACCAAAGTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 23 Легкая цепь DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQGNSFPRTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 24 ДНК, кодирующая легкую цепь GACATCCAGATGACCCAGAGCCCCTCCTCCGTGTCCGCCTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTCGGGCCTCCCAGGGCATCTCCAGCTGGCTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCCAGCCTGCAGTCCGGCGTGCCCTCCAGATTCTCCGGCTCTGGCTCCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGGCAACTCCTTCCCTCGGACCTTCGGCGGAGGCACCAAAGTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCTCCGTGTTCATCTTCCCACCCTCCGACGAGCAGCTGAAGTCCGGCACCGCCTCCGTCGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCTCGCGAGGCCAAAGTGCAGTGGAAAGTGGACAACGCCCTGCAGTCCGGCAACTCCCAGGAATCCGTCACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGCACCTACTCCCTGTCCTCCACCCTGACCCTGTCCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAAGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGTCCTTCAACCGGGGCGAGTGC 356 SEQ ID NO: 25 (объединенная) HCDR1 GGSIEGRYWS SEQ ID NO: 26 (объединенная) HCDR2 YIYGSGSTKYNPSLKS SEQ ID NO: 3 (объединенная) HCDR3 ESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 4 (Kabat) HCDR1 GRYWS SEQ ID NO: 26 (Kabat) HCDR2 YIYGSGSTKYNPSLKS SEQ ID NO: 3 (Kabat) HCDR3 ESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 27 (Chothia) HCDR1 GGSIEGR SEQ ID NO: 28 (Chothia) HCDR2 YGSGS SEQ ID NO: 3 (Chothia) HCDR3 ESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 29 (IMGT) HCDR1 GGSIEGRY SEQ ID NO: 30 (IMGT) HCDR2 IYGSGST SEQ ID NO: 9 (IMGT) HCDR3 ARESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 198 (альтернативная) HCDR1 GSIEGRYWS SEQ ID NO: 26 (альтернативная) HCDR2 YIYGSGSTKYNPSLKS SEQ ID NO: 9 (альтернативная) HCDR3 ARESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 31 VH QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSIEGRYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYGSGSTKYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARESQESPYNNWFDPWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 32 ДНК, кодирующая VH CAAGTGCAGCTGCAGGAATCTGGCCCTGGCCTGGTCAAGCCCTCCGAGACACTGTCCCTGACCTGCACCGTGTCCGGCGGCTCTATCGAGGGCCGGTACTGGTCCTGGATCCGGCAGCCTCCTGGCAAGGGCCTGGAATGGATCGGCTACATCTACGGCTCCGGCTCCACCAAGTACAACCCCAGCCTGAAGTCCAGAGTGACCATCTCCGTGGACACCTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGTCCTCCGTGACCGCCGCTGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCAGAGAGTCCCAGGAATCCCCTTACAACAATTGGTTCGACCCCTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTGTCCTCT SEQ ID NO: 33 Тяжелая цепь 356.A QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSIEGRYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYGSGSTKYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARESQESPYNNWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGX,
где X представляет собой K или отсутствует SEQ ID NO: 34 ДНК, кодирующая тяжелую цепь 356.A CAAGTGCAGCTGCAGGAATCTGGCCCTGGCCTGGTCAAGCCCTCCGAGACACTGTCCCTGACCTGCACCGTGTCCGGCGGCTCTATCGAGGGCCGGTACTGGTCCTGGATCCGGCAGCCTCCTGGCAAGGGCCTGGAATGGATCGGCTACATCTACGGCTCCGGCTCCACCAAGTACAACCCCAGCCTGAAGTCCAGAGTGACCATCTCCGTGGACACCTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGTCCTCCGTGACCGCCGCTGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCAGAGAGTCCCAGGAATCCCCTTACAACAATTGGTTCGACCCCTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTGTCCTCTGCCTCCACCAAGGGCCCCTCCGTGTTCCCTCTGGCCCCTTGCTCCCGGTCCACCTCCGAGTCTACCGCCGCTCTGGGCTGCCTCGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACTCTGGCGCCCTGACCTCCGGCGTGCACACCTTCCCTGCCGTGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCCCTGTCCAGCGTCGTGACCGTGCCCTCCTCCAGCCTGGGCACCAAGACCTACACCTGTAACGTGGACCACAAGCCCTCCAACACCAAAGTGGACAAGCGGGTGGAATCTAAGTACGGCCCTCCCTGCCCTCCTTGCCCTGCCCCTGAGTTCCTGGGCGGACCTTCCGTGTTCCTGTTCCCTCCAAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCTCCCGGACCCCTGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAAGATCCCGAAGTCCAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAACAGTTCAACTCCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGCCTGCCCTCCAGCATCGAAAAGACCATCTCCAAGGCCAAGGGCCAGCCCCGCGAGCCCCAAGTGTACACCCTGCCTCCCAGCCAGGAAGAGATGACCAAGAATCAAGTGTCCCTGACTTGTCTGGTCAAGGGCTTCTACCCCTCCGATATCGCCGTGGAGTGGGAGTCCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTGTACTCTCGGCTGACCGTGGACAAGTCCCGGTGGCAGGAAGGCAACGTCTTCTCCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGTCCCTGTCCCTGTCTCTGGGC X₁X₂X₃,
где X₁ представляет собой A, X₂ представляет собой A, и X₃ представляет собой G; или X₁ отсутствует, X₂ отсутствует и X₃ отсутствует. SEQ ID NO: 113 Тяжелая цепь 356.B QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSIEGRYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYGSGSTKYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARESQESPYNNWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFEGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGX,
где X представляет собой K или отсутствует SEQ ID NO: 14 (объединенная) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (объединенная) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 16 (объединенная) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 14 (Kabat) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (Kabat) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 16 (Kabat) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 17 (Chothia) LCDR1 SQGISSW SEQ ID NO: 18 (Chothia) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 19 (Chothia) LCDR3 GNSFPR SEQ ID NO: 20 (IMGT) LCDR1 QGISSW SEQ ID NO: 18 (IMGT) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 16 (IMGT) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 14 (альтернативная) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (альтернативная) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 16 (альтернативная) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 21 VL DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQGNSFPRTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 22 ДНК, кодирующая VL GACATCCAGATGACCCAGAGCCCCTCCTCCGTGTCCGCCTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTCGGGCCTCCCAGGGCATCTCCAGCTGGCTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCCAGCCTGCAGTCCGGCGTGCCCTCCAGATTCTCCGGCTCTGGCTCCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGGCAACTCCTTCCCTCGGACCTTCGGCGGAGGCACCAAAGTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 23 Легкая цепь DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQGNSFPRTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 24 ДНК, кодирующая легкую цепь GACATCCAGATGACCCAGAGCCCCTCCTCCGTGTCCGCCTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTCGGGCCTCCCAGGGCATCTCCAGCTGGCTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCCAGCCTGCAGTCCGGCGTGCCCTCCAGATTCTCCGGCTCTGGCTCCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGGCAACTCCTTCCCTCGGACCTTCGGCGGAGGCACCAAAGTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCTCCGTGTTCATCTTCCCACCCTCCGACGAGCAGCTGAAGTCCGGCACCGCCTCCGTCGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCTCGCGAGGCCAAAGTGCAGTGGAAAGTGGACAACGCCCTGCAGTCCGGCAACTCCCAGGAATCCGTCACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGCACCTACTCCCTGTCCTCCACCCTGACCCTGTCCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAAGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGTCCTTCAACCGGGGCGAGTGC 373 SEQ ID NO: 35 (объединенная) HCDR1 GFTFHRYAMS SEQ ID NO: 36 (объединенная) HCDR2 AISGSGMNTYYADSVKG SEQ ID NO: 37 (объединенная) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 38 (Kabat) HCDR1 RYAMS SEQ ID NO: 36 (Kabat) HCDR2 AISGSGMNTYYADSVKG SEQ ID NO: 37 (Kabat) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 39 (Chothia) HCDR1 GFTFHRY SEQ ID NO: 40 (Chothia) HCDR2 SGSGMN SEQ ID NO: 37 (Chothia) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 41 (IMGT) HCDR1 GFTFHRYA SEQ ID NO: 42 (IMGT) HCDR2 ISGSGMNT SEQ ID NO: 43 (IMGT) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 190 (альтернативная) HCDR1 FTFHRYAMS SEQ ID NO: 36 (альтернативная) HCDR2 AISGSGMNTYYADSVKG SEQ ID NO: 43 (альтернативная) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 44 VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFHRYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGMNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGLYGSGSYLSDFDLWGRGTLVTVSS SEQ ID NO: 45 ДНК, кодирующая VH GAAGTGCAGCTGCTGGAATCTGGCGGCGGACTGGTGCAGCCTGGCGGCTCCCTGAGACTGTCTTGCGCCGCCTCCGGCTTCACCTTCCACAGATACGCCATGTCCTGGGTCCGACAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGGAGTGGGTGTCCGCCATCTCCGGCTCCGGCATGAACACCTACTACGCCGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGTGCCAGAGGCGGCCTGTACGGCTCCGGCTCCTACCTGTCCGACTTCGACCTGTGGGGCAGAGGCACCCTGGTCACCGTGTCCTCC SEQ ID NO: 46 Тяжелая цепь 373.A EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFHRYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGMNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGLYGSGSYLSDFDLWGRGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGX,
где X представляет собой K или отсутствует SEQ ID NO: 47 ДНК, кодирующая тяжелую цепь 373.A GAAGTGCAGCTGCTGGAATCTGGCGGCGGACTGGTGCAGCCTGGCGGCTCCCTGAGACTGTCTTGCGCCGCCTCCGGCTTCACCTTCCACAGATACGCCATGTCCTGGGTCCGACAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGGAGTGGGTGTCCGCCATCTCCGGCTCCGGCATGAACACCTACTACGCCGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGTGCCAGAGGCGGCCTGTACGGCTCCGGCTCCTACCTGTCCGACTTCGACCTGTGGGGCAGAGGCACCCTGGTCACCGTGTCCTCCGCCTCCACAAAGGGCCCCTCCGTGTTCCCTCTGGCCCCTTGCTCCCGGTCCACCTCCGAGTCTACCGCCGCTCTGGGCTGCCTCGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACTCTGGCGCCCTGACCTCCGGCGTGCACACCTTCCCTGCCGTGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCCCTGTCCAGCGTCGTGACCGTGCCCTCCTCCAGCCTGGGCACCAAGACCTACACCTGTAACGTGGACCACAAGCCCTCCAACACCAAAGTGGACAAGCGGGTGGAATCTAAGTACGGCCCTCCCTGCCCTCCTTGCCCTGCCCCTGAGTTCCTGGGCGGACCTTCCGTGTTCCTGTTCCCTCCAAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCTCCCGGACCCCTGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAAGATCCCGAAGTCCAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAACAGTTCAACTCCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGCCTGCCCTCCAGCATCGAAAAGACCATCTCCAAGGCCAAGGGCCAGCCCCGCGAGCCCCAAGTGTACACCCTGCCTCCCAGCCAGGAAGAGATGACCAAGAATCAAGTGTCCCTGACTTGTCTGGTCAAGGGCTTCTACCCCTCCGATATCGCCGTGGAGTGGGAGTCCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTGTACTCTCGGCTGACCGTGGACAAGTCCCGGTGGCAGGAAGGCAACGTCTTCTCCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGTCCCTGTCCCTGTCTCTGGGC X₁X₂X₃,
где X₁ представляет собой A, X₂ представляет собой A, и X₃ представляет собой G; или X₁ отсутствует, X₂ отсутствует и X₃ отсутствует. SEQ ID NO: 114 Тяжелая цепь 373.B EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFHRYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGMNTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGLYGSGSYLSDFDLWGRGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFEGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGX,
где X представляет собой K или отсутствует SEQ ID NO: 48 (объединенная) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (объединенная) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (объединенная) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 48 (Kabat) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (Kabat) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (Kabat) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 51 (Chothia) LCDR1 SQSVGSN SEQ ID NO: 52 (Chothia) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 53 (Chothia) LCDR3 HNAFPY SEQ ID NO: 54 (IMGT) LCDR1 QSVGSN SEQ ID NO: 52 (IMGT) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 50 (IMGT) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 48 (альтернативная) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (альтернативная) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (альтернативная) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 55 VL EIVLTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVGSNLAWYQQKPGQAPRLLIYGASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQHNAFPYTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 56 ДНК, кодирующая VL GAGATCGTGCTGACACAGTCCCCTGCCACCCTGTCTGTGTCTCCCGGCGAGAGAGCCACCCTGAGCTGCAGAGCCTCCCAGTCCGTGGGCTCCAACCTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCCCCTCGGCTGCTGATCTACGGCGCCTCTACCAGAGCCACCGGCATCCCTGCCAGATTCTCCGGCTCTGGCTCCGGCACCGAGTTCACCCTGACCATCTCCAGCCTGCAGTCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAGCACAACGCCTTCCCTTACACCTTCGGCGGAGGCACCAAAGTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 57 Легкая цепь EIVLTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVGSNLAWYQQKPGQAPRLLIYGASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQHNAFPYTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 58 ДНК, кодирующая легкую цепь GAGATCGTGCTGACACAGTCCCCTGCCACCCTGTCTGTGTCTCCCGGCGAGAGAGCCACCCTGAGCTGCAGAGCCTCCCAGTCCGTGGGCTCCAACCTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCCCCTCGGCTGCTGATCTACGGCGCCTCTACCAGAGCCACCGGCATCCCTGCCAGATTCTCCGGCTCTGGCTCCGGCACCGAGTTCACCCTGACCATCTCCAGCCTGCAGTCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAGCACAACGCCTTCCCTTACACCTTCGGCGGAGGCACCAAAGTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCTCCGTGTTCATCTTCCCACCCTCCGACGAGCAGCTGAAGTCCGGCACCGCCTCCGTCGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCTCGCGAGGCCAAAGTGCAGTGGAAAGTGGACAACGCCCTGCAGTCCGGCAACTCCCAGGAATCCGTCACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGCACCTACTCCCTGTCCTCCACCCTGACCCTGTCCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAAGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGTCCTTCAACCGGGGCGAGTGC 350 SEQ ID NO: 59 (объединенная) HCDR1 GGSIERYYWS SEQ ID NO: 60 (объединенная) HCDR2 YIYGRGSTNYNPSLKS SEQ ID NO: 3 (объединенная) HCDR3 ESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 61 (Kabat) HCDR1 RYYWS SEQ ID NO: 60 (Kabat) HCDR2 YIYGRGSTNYNPSLKS SEQ ID NO: 3 (Kabat) HCDR3 ESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 62 (Chothia) HCDR1 GGSIERY SEQ ID NO: 63 (Chothia) HCDR2 YGRGS SEQ ID NO: 3 (Chothia) HCDR3 ESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 64 (IMGT) HCDR1 GGSIERYY SEQ ID NO: 65 (IMGT) HCDR2 IYGRGST SEQ ID NO: 9 (IMGT) HCDR3 ARESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 197 (альтернативная) HCDR1 GSIERYYWS SEQ ID NO: 60 (альтернативная) HCDR2 YIYGRGSTNYNPSLKS SEQ ID NO: 9 (альтернативная) HCDR3 ARESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 66 VH QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSIERYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYGRGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARESQESPYNNWFDPWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 67 ДНК, кодирующая VH CAAGTGCAGCTGCAGGAATCTGGCCCTGGCCTGGTCAAGCCCTCCGAGACACTGTCCCTGACCTGCACCGTGTCCGGCGGCTCCATCGAGCGGTACTACTGGTCCTGGATCCGGCAGCCTCCCGGCAAGGGCCTGGAATGGATCGGCTACATCTACGGCAGAGGCTCCACCAACTACAACCCCAGCCTGAAGTCCAGAGTGACCATCTCCGTGGACACCTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGTCCTCCGTGACCGCCGCTGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCAGAGAGTCCCAGGAATCCCCTTACAACAATTGGTTCGACCCCTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTGTCCTCT SEQ ID NO: 68 Тяжелая цепь 350.A QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSIERYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYGRGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARESQESPYNNWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGX,
где X представляет собой K или отсутствует SEQ ID NO: 69 ДНК, кодирующая тяжелую цепь 350.A CAAGTGCAGCTGCAGGAATCTGGCCCTGGCCTGGTCAAGCCCTCCGAGACACTGTCCCTGACCTGCACCGTGTCCGGCGGCTCCATCGAGCGGTACTACTGGTCCTGGATCCGGCAGCCTCCCGGCAAGGGCCTGGAATGGATCGGCTACATCTACGGCAGAGGCTCCACCAACTACAACCCCAGCCTGAAGTCCAGAGTGACCATCTCCGTGGACACCTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGTCCTCCGTGACCGCCGCTGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCAGAGAGTCCCAGGAATCCCCTTACAACAATTGGTTCGACCCCTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTGTCCTCTGCCTCCACCAAGGGCCCCTCCGTGTTCCCTCTGGCCCCTTGCTCCCGGTCCACCTCCGAGTCTACCGCCGCTCTGGGCTGCCTCGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACTCTGGCGCCCTGACCTCCGGCGTGCACACCTTCCCTGCCGTGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCCCTGTCCAGCGTCGTGACCGTGCCCTCCTCCAGCCTGGGCACCAAGACCTACACCTGTAACGTGGACCACAAGCCCTCCAACACCAAAGTGGACAAGCGGGTGGAATCTAAGTACGGCCCTCCCTGCCCTCCTTGCCCTGCCCCTGAGTTCCTGGGCGGACCTTCCGTGTTCCTGTTCCCTCCAAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCTCCCGGACCCCTGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAAGATCCCGAAGTCCAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAACAGTTCAACTCCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGCCTGCCCTCCAGCATCGAAAAGACCATCTCCAAGGCCAAGGGCCAGCCCCGCGAGCCCCAAGTGTACACCCTGCCTCCCAGCCAGGAAGAGATGACCAAGAATCAAGTGTCCCTGACTTGTCTGGTCAAGGGCTTCTACCCCTCCGATATCGCCGTGGAGTGGGAGTCCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTGTACTCTCGGCTGACCGTGGACAAGTCCCGGTGGCAGGAAGGCAACGTCTTCTCCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGTCCCTGTCCCTGTCTCTGGGC X₁X₂X₃,
где X₁ представляет собой A, X₂ представляет собой A, и X₃ представляет собой G; или X₁ отсутствует, X₂ отсутствует и X₃ отсутствует. SEQ ID NO: 115 Тяжелая цепь 350.B QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSIERYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYGRGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARESQESPYNNWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFEGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGX,
где X представляет собой K или отсутствует SEQ ID NO: 331 Тяжелая цепь 350 Fab QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSIERYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYGRGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARESQESPYNNWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGP SEQ ID NO: 14 (объединенная) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (объединенная) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 16 (объединенная) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 14 (Kabat) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (Kabat) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 16 (Kabat) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 17 (Chothia) LCDR1 SQGISSW SEQ ID NO: 18 (Chothia) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 19 (Chothia) LCDR3 GNSFPR SEQ ID NO: 20 (IMGT) LCDR1 QGISSW SEQ ID NO: 18 (IMGT) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 16 (IMGT) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 14 (альтернативная) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (альтернативная) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 16 (альтернативная) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 21 VL DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQGNSFPRTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 22 ДНК, кодирующая VL GACATCCAGATGACCCAGAGCCCCTCCTCCGTGTCCGCCTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTCGGGCCTCCCAGGGCATCTCCAGCTGGCTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCCAGCCTGCAGTCCGGCGTGCCCTCCAGATTCTCCGGCTCTGGCTCCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGGCAACTCCTTCCCTCGGACCTTCGGCGGAGGCACCAAAGTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 23 Легкая цепь DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQGNSFPRTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 24 ДНК, кодирующая легкую цепь GACATCCAGATGACCCAGAGCCCCTCCTCCGTGTCCGCCTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTCGGGCCTCCCAGGGCATCTCCAGCTGGCTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCCAGCCTGCAGTCCGGCGTGCCCTCCAGATTCTCCGGCTCTGGCTCCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGGGCAACTCCTTCCCTCGGACCTTCGGCGGAGGCACCAAAGTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCTCCGTGTTCATCTTCCCACCCTCCGACGAGCAGCTGAAGTCCGGCACCGCCTCCGTCGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCTCGCGAGGCCAAAGTGCAGTGGAAAGTGGACAACGCCCTGCAGTCCGGCAACTCCCAGGAATCCGTCACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGCACCTACTCCCTGTCCTCCACCCTGACCCTGTCCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAAGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGTCCTTCAACCGGGGCGAGTGC 374 SEQ ID NO: 70 (объединенная) HCDR1 GFTFSYNAMS SEQ ID NO: 71 (объединенная) HCDR2 SISGTGGSTYYADSVKG SEQ ID NO: 37 (объединенная) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 72 (Kabat) HCDR1 YNAMS SEQ ID NO: 71 (Kabat) HCDR2 SISGTGGSTYYADSVKG SEQ ID NO: 37 (Kabat) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 73 (Chothia) HCDR1 GFTFSYN SEQ ID NO: 74 (Chothia) HCDR2 SGTGGS SEQ ID NO: 37 (Chothia) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 75 (IMGT) HCDR1 GFTFSYNA SEQ ID NO: 76 (IMGT) HCDR2 ISGTGGST SEQ ID NO: 43 (IMGT) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 191 (альтернативная) HCDR1 FTFSYNAMS SEQ ID NO: 71 (альтернативная) HCDR2 SISGTGGSTYYADSVKG SEQ ID NO: 43 (альтернативная) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 77 VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSYNAMSWVRQAPGKGLEWVSSISGTGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGLYGSGSYLSDFDLWGRGTLVTVSS SEQ ID NO: 78 ДНК, кодирующая VH GAAGTGCAGCTGCTGGAATCTGGCGGCGGACTGGTGCAGCCTGGCGGCTCCCTGAGACTGTCTTGCGCCGCCTCCGGCTTCACCTTCTCCTACAACGCCATGTCCTGGGTCCGACAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGGAGTGGGTGTCCTCCATCTCCGGCACCGGCGGCTCCACCTACTACGCCGACTCTGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGTGCCAGAGGCGGCCTGTACGGCTCCGGCTCCTACCTGTCCGACTTCGACCTGTGGGGCAGAGGCACCCTGGTCACCGTGTCCTCC SEQ ID NO: 79 Тяжелая цепь 374.A EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSYNAMSWVRQAPGKGLEWVSSISGTGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGLYGSGSYLSDFDLWGRGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGX,
где X представляет собой K или отсутствует SEQ ID NO: 80 ДНК, кодирующая тяжелую цепь 374.A GAAGTGCAGCTGCTGGAATCTGGCGGCGGACTGGTGCAGCCTGGCGGCTCCCTGAGACTGTCTTGCGCCGCCTCCGGCTTCACCTTCTCCTACAACGCCATGTCCTGGGTCCGACAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGGAGTGGGTGTCCTCCATCTCCGGCACCGGCGGCTCCACCTACTACGCCGACTCTGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGTGCCAGAGGCGGCCTGTACGGCTCCGGCTCCTACCTGTCCGACTTCGACCTGTGGGGCAGAGGCACCCTGGTCACCGTGTCCTCCGCCTCCACAAAGGGCCCCTCCGTGTTCCCTCTGGCCCCTTGCTCCCGGTCCACCTCCGAGTCTACCGCCGCTCTGGGCTGCCTCGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACTCTGGCGCCCTGACCTCCGGCGTGCACACCTTCCCTGCCGTGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCCCTGTCCAGCGTCGTGACCGTGCCCTCCTCCAGCCTGGGCACCAAGACCTACACCTGTAACGTGGACCACAAGCCCTCCAACACCAAAGTGGACAAGCGGGTGGAATCTAAGTACGGCCCTCCCTGCCCTCCTTGCCCTGCCCCTGAGTTCCTGGGCGGACCTTCCGTGTTCCTGTTCCCTCCAAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCTCCCGGACCCCTGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAAGATCCCGAAGTCCAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAACAGTTCAACTCCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGCCTGCCCTCCAGCATCGAAAAGACCATCTCCAAGGCCAAGGGCCAGCCCCGCGAGCCCCAAGTGTACACCCTGCCTCCCAGCCAGGAAGAGATGACCAAGAATCAAGTGTCCCTGACTTGTCTGGTCAAGGGCTTCTACCCCTCCGATATCGCCGTGGAGTGGGAGTCCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTGTACTCTCGGCTGACCGTGGACAAGTCCCGGTGGCAGGAAGGCAACGTCTTCTCCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGTCCCTGTCCCTGTCTCTGGGC X₁X₂X₃,
где X₁ представляет собой A, X₂ представляет собой A, и X₃ представляет собой G; или X₁ отсутствует, X₂ отсутствует и X₃ отсутствует. SEQ ID NO: 116 Тяжелая цепь 374.B EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSYNAMSWVRQAPGKGLEWVSSISGTGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGLYGSGSYLSDFDLWGRGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFEGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGX,
где X представляет собой K или отсутствует SEQ ID NO: 48 (объединенная) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (объединенная) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (объединенная) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 48 (Kabat) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (Kabat) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (Kabat) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 51 (Chothia) LCDR1 SQSVGSN SEQ ID NO: 52 (Chothia) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 53 (Chothia) LCDR3 HNAFPY SEQ ID NO: 54 (IMGT) LCDR1 QSVGSN SEQ ID NO: 52 (IMGT) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 50 (IMGT) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 48 (альтернативная) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (альтернативная) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (альтернативная) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 55 VL EIVLTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVGSNLAWYQQKPGQAPRLLIYGASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQHNAFPYTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 56 ДНК, кодирующая VL GAGATCGTGCTGACACAGTCCCCTGCCACCCTGTCTGTGTCTCCCGGCGAGAGAGCCACCCTGAGCTGCAGAGCCTCCCAGTCCGTGGGCTCCAACCTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCCCCTCGGCTGCTGATCTACGGCGCCTCTACCAGAGCCACCGGCATCCCTGCCAGATTCTCCGGCTCTGGCTCCGGCACCGAGTTCACCCTGACCATCTCCAGCCTGCAGTCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAGCACAACGCCTTCCCTTACACCTTCGGCGGAGGCACCAAAGTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 57 Легкая цепь EIVLTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVGSNLAWYQQKPGQAPRLLIYGASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQHNAFPYTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 58 ДНК, кодирующая легкую цепь GAGATCGTGCTGACACAGTCCCCTGCCACCCTGTCTGTGTCTCCCGGCGAGAGAGCCACCCTGAGCTGCAGAGCCTCCCAGTCCGTGGGCTCCAACCTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCCCCTCGGCTGCTGATCTACGGCGCCTCTACCAGAGCCACCGGCATCCCTGCCAGATTCTCCGGCTCTGGCTCCGGCACCGAGTTCACCCTGACCATCTCCAGCCTGCAGTCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAGCACAACGCCTTCCCTTACACCTTCGGCGGAGGCACCAAAGTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCTCCGTGTTCATCTTCCCACCCTCCGACGAGCAGCTGAAGTCCGGCACCGCCTCCGTCGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCTCGCGAGGCCAAAGTGCAGTGGAAAGTGGACAACGCCCTGCAGTCCGGCAACTCCCAGGAATCCGTCACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGCACCTACTCCCTGTCCTCCACCCTGACCCTGTCCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAAGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGTCCTTCAACCGGGGCGAGTGC 379 SEQ ID NO: 81 (объединенная) HCDR1 GFTFSRYAMS SEQ ID NO: 71 (объединенная) HCDR2 SISGTGGSTYYADSVKG SEQ ID NO: 37 (объединенная) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 38 (Kabat) HCDR1 RYAMS SEQ ID NO: 71 (Kabat) HCDR2 SISGTGGSTYYADSVKG SEQ ID NO: 37 (Kabat) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 82 (Chothia) HCDR1 GFTFSRY SEQ ID NO: 74 (Chothia) HCDR2 SGTGGS SEQ ID NO: 37 (Chothia) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 83 (IMGT) HCDR1 GFTFSRYA SEQ ID NO: 76 (IMGT) HCDR2 ISGTGGST SEQ ID NO: 43 (IMGT) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 192 (альтернативная) HCDR1 FTFSRYAMS SEQ ID NO: 71 (альтернативная) HCDR2 SISGTGGSTYYADSVKG SEQ ID NO: 43 (альтернативная) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 84 VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSRYAMSWVRQAPGKGLEWVSSISGTGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGLYGSGSYLSDFDLWGRGTLVTVSS SEQ ID NO: 85 ДНК, кодирующая VH GAAGTGCAGCTGCTGGAATCTGGCGGCGGACTGGTGCAGCCTGGCGGCTCCCTGAGACTGTCTTGCGCCGCCTCCGGCTTCACCTTCTCCAGATACGCCATGTCCTGGGTCCGACAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGGAGTGGGTGTCCTCCATCTCCGGCACCGGCGGCTCCACCTACTACGCCGACTCTGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGTGCCAGAGGCGGCCTGTACGGCTCCGGCTCCTACCTGTCCGACTTCGACCTGTGGGGCAGAGGCACCCTGGTCACCGTGTCCTCC SEQ ID NO: 86 Тяжелая цепь 379.A EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSRYAMSWVRQAPGKGLEWVSSISGTGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGLYGSGSYLSDFDLWGRGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGX,
где X представляет собой K или отсутствует SEQ ID NO: 87 ДНК, кодирующая тяжелую цепь 379.A GAAGTGCAGCTGCTGGAATCTGGCGGCGGACTGGTGCAGCCTGGCGGCTCCCTGAGACTGTCTTGCGCCGCCTCCGGCTTCACCTTCTCCAGATACGCCATGTCCTGGGTCCGACAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGGAGTGGGTGTCCTCCATCTCCGGCACCGGCGGCTCCACCTACTACGCCGACTCTGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGTGCCAGAGGCGGCCTGTACGGCTCCGGCTCCTACCTGTCCGACTTCGACCTGTGGGGCAGAGGCACCCTGGTCACCGTGTCCTCCGCCTCCACAAAGGGCCCCTCCGTGTTCCCTCTGGCCCCTTGCTCCCGGTCCACCTCCGAGTCTACCGCCGCTCTGGGCTGCCTCGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACTCTGGCGCCCTGACCTCCGGCGTGCACACCTTCCCTGCCGTGCTGCAGTCCTCCGGCCTGTACTCCCTGTCCAGCGTCGTGACCGTGCCCTCCTCCAGCCTGGGCACCAAGACCTACACCTGTAACGTGGACCACAAGCCCTCCAACACCAAAGTGGACAAGCGGGTGGAATCTAAGTACGGCCCTCCCTGCCCTCCTTGCCCTGCCCCTGAGTTCCTGGGCGGACCTTCCGTGTTCCTGTTCCCTCCAAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCTCCCGGACCCCTGAAGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAAGATCCCGAAGTCCAGTTCAATTGGTACGTGGACGGCGTGGAAGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAACAGTTCAACTCCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGCCTGCCCTCCAGCATCGAAAAGACCATCTCCAAGGCCAAGGGCCAGCCCCGCGAGCCCCAAGTGTACACCCTGCCTCCCAGCCAGGAAGAGATGACCAAGAATCAAGTGTCCCTGACTTGTCTGGTCAAGGGCTTCTACCCCTCCGATATCGCCGTGGAGTGGGAGTCCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTGTACTCTCGGCTGACCGTGGACAAGTCCCGGTGGCAGGAAGGCAACGTCTTCTCCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGTCCCTGTCCCTGTCTCTGGGC X₁X₂X₃,
где X₁ представляет собой A, X₂ представляет собой A, и X₃ представляет собой G; или X₁ отсутствует, X₂ отсутствует и X₃ отсутствует. SEQ ID NO: 117 Тяжелая цепь 379.B EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSRYAMSWVRQAPGKGLEWVSSISGTGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGLYGSGSYLSDFDLWGRGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFEGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGX,
где X представляет собой K или отсутствует SEQ ID NO: 48 (объединенная) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (объединенная) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (объединенная) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 48 (Kabat) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (Kabat) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (Kabat) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 51 (Chothia) LCDR1 SQSVGSN SEQ ID NO: 52 (Chothia) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 53 (Chothia) LCDR3 HNAFPY SEQ ID NO: 54 (IMGT) LCDR1 QSVGSN SEQ ID NO: 52 (IMGT) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 50 (IMGT) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 48 (альтернативная) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (альтернативная) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (альтернативная) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 55 VL EIVLTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVGSNLAWYQQKPGQAPRLLIYGASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQHNAFPYTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 56 ДНК, кодирующая VL GAGATCGTGCTGACACAGTCCCCTGCCACCCTGTCTGTGTCTCCCGGCGAGAGAGCCACCCTGAGCTGCAGAGCCTCCCAGTCCGTGGGCTCCAACCTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCCCCTCGGCTGCTGATCTACGGCGCCTCTACCAGAGCCACCGGCATCCCTGCCAGATTCTCCGGCTCTGGCTCCGGCACCGAGTTCACCCTGACCATCTCCAGCCTGCAGTCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAGCACAACGCCTTCCCTTACACCTTCGGCGGAGGCACCAAAGTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 57 Легкая цепь EIVLTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVGSNLAWYQQKPGQAPRLLIYGASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQHNAFPYTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 58 ДНК, кодирующая легкую цепь GAGATCGTGCTGACACAGTCCCCTGCCACCCTGTCTGTGTCTCCCGGCGAGAGAGCCACCCTGAGCTGCAGAGCCTCCCAGTCCGTGGGCTCCAACCTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCCCCTCGGCTGCTGATCTACGGCGCCTCTACCAGAGCCACCGGCATCCCTGCCAGATTCTCCGGCTCTGGCTCCGGCACCGAGTTCACCCTGACCATCTCCAGCCTGCAGTCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAGCACAACGCCTTCCCTTACACCTTCGGCGGAGGCACCAAAGTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCTCCGTGTTCATCTTCCCACCCTCCGACGAGCAGCTGAAGTCCGGCACCGCCTCCGTCGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCTCGCGAGGCCAAAGTGCAGTGGAAAGTGGACAACGCCCTGCAGTCCGGCAACTCCCAGGAATCCGTCACCGAGCAGGACTCCAAGGACAGCACCTACTCCCTGTCCTCCACCCTGACCCTGTCCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAAGTGTACGCCTGCGAAGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGTCCTTCAACCGGGGCGAGTGC 376 SEQ ID NO: 135 (объединенная) HCDR1 GFTFRSYAMS SEQ ID NO: 136 (объединенная) HCDR2 AITGSGGLTYYADSVKG SEQ ID NO: 37 (объединенная) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 137 (Kabat) HCDR1 SYAMS SEQ ID NO: 136 (Kabat) HCDR2 AITGSGGLTYYADSVKG SEQ ID NO: 37 (Kabat) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 138 (Chothia) HCDR1 GFTFRSY SEQ ID NO: 139 (Chothia) HCDR2 TGSGGL SEQ ID NO: 37 (Chothia) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 140 (IMGT) HCDR1 GFTFRSYA SEQ ID NO: 141 (IMGT) HCDR2 ITGSGGLT SEQ ID NO: 43 (IMGT) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 193 (альтернативная) HCDR1 FTFRSYAMS SEQ ID NO: 136 (альтернативная) HCDR2 AITGSGGLTYYADSVKG SEQ ID NO: 43 (альтернативная) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 142 VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFRSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAITGSGGLTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGLYGSGSYLSDFDLWGRGTLVTVSS SEQ ID NO: 143 ДНК, кодирующая VH GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTCGTAGCTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTACGGGAAGTGGTGGTTTGACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAGGTGGATTGTACGGAAGCGGAAGCTACTTGAGTGACTTCGACCTATGGGGGAGAGGTACCTTGGTCACCGTCTCCTCA SEQ ID NO: 48 (объединенная) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (объединенная) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (объединенная) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 48 (Kabat) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (Kabat) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (Kabat) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 51 (Chothia) LCDR1 SQSVGSN SEQ ID NO: 52 (Chothia) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 53 (Chothia) LCDR3 HNAFPY SEQ ID NO: 54 (IMGT) LCDR1 QSVGSN SEQ ID NO: 52 (IMGT) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 50 (IMGT) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 48 (альтернативная) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (альтернативная) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (альтернативная) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 55 VL EIVLTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVGSNLAWYQQKPGQAPRLLIYGASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQHNAFPYTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 144 ДНК, кодирующая VL GAAATAGTGTTGACGCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTGTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTGGCAGCAACTTAGCCTGGTACCAGCAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGTGCATCCACCAGGGCCACTGGTATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGTCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCACAATGCCTTCCCTTACACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 377 SEQ ID NO: 145 (объединенная) HCDR1 GFTFKSYAMS SEQ ID NO: 146 (объединенная) HCDR2 AISGSGSYTYYADSVKG SEQ ID NO: 37 (объединенная) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 137 (Kabat) HCDR1 SYAMS SEQ ID NO: 146 (Kabat) HCDR2 AISGSGSYTYYADSVKG SEQ ID NO: 37 (Kabat) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 147 (Chothia) HCDR1 GFTFKSY SEQ ID NO: 148 (Chothia) HCDR2 SGSGSY SEQ ID NO: 37 (Chothia) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 149 (IMGT) HCDR1 GFTFKSYA SEQ ID NO: 150 (IMGT) HCDR2 ISGSGSYT SEQ ID NO: 43 (IMGT) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 194 (альтернативная) HCDR1 FTFKSYAMS SEQ ID NO: 146 (альтернативная) HCDR2 AISGSGSYTYYADSVKG SEQ ID NO: 43 (альтернативная) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 151 VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFKSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGSYTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGLYGSGSYLSDFDLWGRGTLVTVSS SEQ ID NO: 152 ДНК, кодирующая VH GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAAGAGCTATGCCATGAGTTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGGAAGTGGTTCGTATACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAGGTGGATTGTACGGAAGCGGAAGCTACTTGAGTGACTTCGACCTATGGGGGAGAGGTACCTTGGTCACCGTCTCCTCA SEQ ID NO: 48 (объединенная) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (объединенная) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (объединенная) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 48 (Kabat) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (Kabat) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (Kabat) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 51 (Chothia) LCDR1 SQSVGSN SEQ ID NO: 52 (Chothia) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 53 (Chothia) LCDR3 HNAFPY SEQ ID NO: 54 (IMGT) LCDR1 QSVGSN SEQ ID NO: 52 (IMGT) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 50 (IMGT) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 48 (альтернативная) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (альтернативная) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (альтернативная) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 55 VL EIVLTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVGSNLAWYQQKPGQAPRLLIYGASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQHNAFPYTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 144 ДНК, кодирующая VL GAAATAGTGTTGACGCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTGTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTGGCAGCAACTTAGCCTGGTACCAGCAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGTGCATCCACCAGGGCCACTGGTATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGTCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCACAATGCCTTCCCTTACACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 930 SEQ ID NO: 153 (объединенная) HCDR1 GFTFSSYAMS SEQ ID NO: 154 (объединенная) HCDR2 AISGSGGSTYYADSVKG SEQ ID NO: 37 (объединенная) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 137 (Kabat) HCDR1 SYAMS SEQ ID NO: 154 (Kabat) HCDR2 AISGSGGSTYYADSVKG SEQ ID NO: 37 (Kabat) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 155 (Chothia) HCDR1 GFTFSSY SEQ ID NO: 156 (Chothia) HCDR2 SGSGGS SEQ ID NO: 37 (Chothia) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 157 (IMGT) HCDR1 GFTFSSYA SEQ ID NO: 158 (IMGT) HCDR2 ISGSGGST SEQ ID NO: 43 (IMGT) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 195 (альтернативная) HCDR1 FTFSSYAMS SEQ ID NO: 154 (альтернативная) HCDR2 AISGSGGSTYYADSVKG SEQ ID NO: 43 (альтернативная) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 159 VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGLYGSGSYLSDFDLWGRGTLVTVSS SEQ ID NO: 160 ДНК, кодирующая VH GAGGTGCAGCTGTTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTACAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGCAGCTATGCCATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGGTCTCAGCTATTAGTGGTAGTGGTGGTAGCACATACTACGCAGACTCCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAGGTGGATTGTACGGAAGCGGAAGCTACTTGAGTGACTTCGACCTATGGGGGAGAGGTACCTTGGTCACCGTCTCCTCA SEQ ID NO: 48 (объединенная) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (объединенная) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (объединенная) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 48 (Kabat) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (Kabat) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (Kabat) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 51 (Chothia) LCDR1 SQSVGSN SEQ ID NO: 52 (Chothia) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 53 (Chothia) LCDR3 HNAFPY SEQ ID NO: 54 (IMGT) LCDR1 QSVGSN SEQ ID NO: 52 (IMGT) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 50 (IMGT) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 48 (альтернативная) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (альтернативная) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (альтернативная) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 55 VL EIVLTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVGSNLAWYQQKPGQAPRLLIYGASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQHNAFPYTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 144 ДНК, кодирующая VL GAAATAGTGTTGACGCAGTCTCCAGCCACCCTGTCTGTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTGGCAGCAACTTAGCCTGGTACCAGCAGAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTATGGTGCATCCACCAGGGCCACTGGTATCCCAGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGTCTGAAGATTTTGCAGTTTATTACTGTCAGCAGCACAATGCCTTCCCTTACACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 918 SEQ ID NO: 161 (объединенная) HCDR1 GGSISSYYWS SEQ ID NO: 162 (объединенная) HCDR2 YIYSSGSTNYNPSLKS SEQ ID NO: 3 (объединенная) HCDR3 ESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 163 (Kabat) HCDR1 SYYWS SEQ ID NO: 162 (Kabat) HCDR2 YIYSSGSTNYNPSLKS SEQ ID NO: 3 (Kabat) HCDR3 ESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 164 (Chothia) HCDR1 GGSISSY SEQ ID NO: 165 (Chothia) HCDR2 YSSGS SEQ ID NO: 3 (Chothia) HCDR3 ESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 166 (IMGT) HCDR1 GGSISSYY SEQ ID NO: 167 (IMGT) HCDR2 IYSSGST SEQ ID NO: 9 (IMGT) HCDR3 ARESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 200 (альтернативная) HCDR1 GSISSYYWS SEQ ID NO: 162 (альтернативная) HCDR2 YIYSSGSTNYNPSLKS SEQ ID NO: 9 (альтернативная) HCDR3 ARESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 168 VH QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYSSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARESQESPYNNWFDPWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 169 ДНК, кодирующая VH CAGGTGCAGCTGCAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCACTGTCTCTGGTGGCTCCATCAGTAGTTACTACTGGAGCTGGATCCGGCAGCCCCCAGGGAAGGGACTGGAGTGGATTGGGTATATCTATAGTAGTGGGAGCACCAACTACAACCCCTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAGTAGACACGTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGTTCTGTGACCGCCGCAGACACGGCGGTGTACTACTGCGCCAGAGAATCTCAGGAGAGTCCATACAACAATTGGTTCGACCCATGGGGACAGGGTACATTGGTCACCGTCTCCTCA SEQ ID NO: 14 (объединенная) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (объединенная) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 16 (объединенная) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 14 (Kabat) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (Kabat) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 16 (Kabat) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 17 (Chothia) LCDR1 SQGISSW SEQ ID NO: 18 (Chothia) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 19 (Chothia) LCDR3 GNSFPR SEQ ID NO: 20 (IMGT) LCDR1 QGISSW SEQ ID NO: 18 (IMGT) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 16 (IMGT) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 14 (альтернативная) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (альтернативная) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 16 (альтернативная) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 21 VL DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQGNSFPRTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 170 ДНК, кодирующая VL GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCTTCCGTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGTCGGGCGAGTCAGGGTATTAGCAGCTGGTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCAGCAGGGAAACAGTTTCCCTAGGACTTTTGGCGGAGGGACCAAGGTTGAGATCAAA 363 SEQ ID NO: 81 (объединенная) HCDR1 GFTFSRYAMS SEQ ID NO: 201 (объединенная) HCDR2 AISGTGISTYYADSVKG SEQ ID NO: 37 (объединенная) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 38 (Kabat) HCDR1 RYAMS SEQ ID NO: 201 (Kabat) HCDR2 AISGTGISTYYADSVKG SEQ ID NO: 37 (Kabat) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 82 (Chothia) HCDR1 GFTFSRY SEQ ID NO: 202 (Chothia) HCDR2 SGTGIS SEQ ID NO: 37 (Chothia) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 83 (IMGT) HCDR1 GFTFSRYA SEQ ID NO: 203 (IMGT) HCDR2 ISGTGIST SEQ ID NO: 43 (IMGT) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 192 (альтернативная) HCDR1 FTFSRYAMS SEQ ID NO: 201 (альтернативная) HCDR2 AISGTGISTYYADSVKG SEQ ID NO: 43 (альтернативная) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 204 VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSRYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGTGISTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGLYGSGSYLSDFDLWGRGTLVTVSS SEQ ID NO: 205 (объединенная) LCDR1 RASQSISSWLA SEQ ID NO: 206 (объединенная) LCDR2 DASSLES SEQ ID NO: 207 (объединенная) LCDR3 QQSNTFYT SEQ ID NO: 205 (Kabat) LCDR1 RASQSISSWLA SEQ ID NO: 206 (Kabat) LCDR2 DASSLES SEQ ID NO: 207 (Kabat) LCDR3 QQSNTFYT SEQ ID NO: 208 (Chothia) LCDR1 SQSISSW SEQ ID NO: 209 (Chothia) LCDR2 DAS SEQ ID NO: 228 (Chothia) LCDR3 SNTFY SEQ ID NO: 229 (IMGT) LCDR1 QSISSW SEQ ID NO: 209 (IMGT) LCDR2 DAS SEQ ID NO: 207 (IMGT) LCDR3 QQSNTFYT SEQ ID NO: 205 (альтернативная) LCDR1 RASQSISSWLA SEQ ID NO: 206 (альтернативная) LCDR2 DASSLES SEQ ID NO: 207 (альтернативная) LCDR3 QQSNTFYT SEQ ID NO: 230 VL DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQSNTFYTFGGGTKVEIK 366 SEQ ID NO: 81 (объединенная) HCDR1 GFTFSRYAMS SEQ ID NO: 231 (объединенная) HCDR2 AISGTGLSTYYADSVKG SEQ ID NO: 37 (объединенная) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 38 (Kabat) HCDR1 RYAMS SEQ ID NO: 231 (Kabat) HCDR2 AISGTGLSTYYADSVKG SEQ ID NO: 37 (Kabat) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 82 (Chothia) HCDR1 GFTFSRY SEQ ID NO: 232 (Chothia) HCDR2 SGTGLS SEQ ID NO: 37 (Chothia) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 83 (IMGT) HCDR1 GFTFSRYA SEQ ID NO: 233 (IMGT) HCDR2 ISGTGLST SEQ ID NO: 43 (IMGT) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 192 (альтернативная) HCDR1 FTFSRYAMS SEQ ID NO: 231 (альтернативная) HCDR2 AISGTGLSTYYADSVKG SEQ ID NO: 43 (альтернативная) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 234 VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSRYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGTGLSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGLYGSGSYLSDFDLWGRGTLVTVSS SEQ ID NO: 205 (объединенная) LCDR1 RASQSISSWLA SEQ ID NO: 206 (объединенная) LCDR2 DASSLES SEQ ID NO: 207 (объединенная) LCDR3 QQSNTFYT SEQ ID NO: 205 (Kabat) LCDR1 RASQSISSWLA SEQ ID NO: 206 (Kabat) LCDR2 DASSLES SEQ ID NO: 207 (Kabat) LCDR3 QQSNTFYT SEQ ID NO: 208 (Chothia) LCDR1 SQSISSW SEQ ID NO: 209 (Chothia) LCDR2 DAS SEQ ID NO: 228 (Chothia) LCDR3 SNTFY SEQ ID NO: 229 (IMGT) LCDR1 QSISSW SEQ ID NO: 209 (IMGT) LCDR2 DAS SEQ ID NO: 207 (IMGT) LCDR3 QQSNTFYT SEQ ID NO: 205 (альтернативная) LCDR1 RASQSISSWLA SEQ ID NO: 206 (альтернативная) LCDR2 DASSLES SEQ ID NO: 207 (альтернативная) LCDR3 QQSNTFYT SEQ ID NO: 230 VL DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQSNTFYTFGGGTKVEIK 407 SEQ ID NO: 235 (объединенная) HCDR1 GYTFTYYWMH SEQ ID NO: 236 (объединенная) HCDR2 SINPNSGSTNYAQKFQG SEQ ID NO: 237 (объединенная) HCDR3 DTGGDKSPLTYYYYGMDV SEQ ID NO: 238 (Kabat) HCDR1 YYWMH SEQ ID NO: 236 (Kabat) HCDR2 SINPNSGSTNYAQKFQG SEQ ID NO: 237 (Kabat) HCDR3 DTGGDKSPLTYYYYGMDV SEQ ID NO: 239 (Chothia) HCDR1 GYTFTYY SEQ ID NO: 240 (Chothia) HCDR2 NPNSGS SEQ ID NO: 237 (Chothia) HCDR3 DTGGDKSPLTYYYYGMDV SEQ ID NO: 241 (IMGT) HCDR1 GYTFTYYW SEQ ID NO: 242 (IMGT) HCDR2 INPNSGST SEQ ID NO: 243 (IMGT) HCDR3 ARDTGGDKSPLTYYYYGMDV SEQ ID NO: 244 (альтернативная) HCDR1 YTFTYYWMH SEQ ID NO: 236 (альтернативная) HCDR2 SINPNSGSTNYAQKFQG SEQ ID NO: 243 (альтернативная) HCDR3 ARDTGGDKSPLTYYYYGMDV SEQ ID NO: 245 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTYYWMHWVRQAPGQGLEWMGSINPNSGSTNYAQKFQGRV™TRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCARDTGGDKSPLTYYYYGMDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 246 (объединенная) LCDR1 RASQGISRWLA SEQ ID NO: 15 (объединенная) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 247 (объединенная) LCDR3 QQAIALPPFT SEQ ID NO: 246 (Kabat) LCDR1 RASQGISRWLA SEQ ID NO: 15 (Kabat) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 247 (Kabat) LCDR3 QQAIALPPFT SEQ ID NO: 248 (Chothia) LCDR1 SQGISRW SEQ ID NO: 18 (Chothia) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 249 (Chothia) LCDR3 AIALPPF SEQ ID NO: 250 (IMGT) LCDR1 QGISRW SEQ ID NO: 18 (IMGT) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 247 (IMGT) LCDR3 QQAIALPPFT SEQ ID NO: 246 (альтернативная) LCDR1 RASQGISRWLA SEQ ID NO: 15 (альтернативная) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 247 (альтернативная) LCDR3 QQAIALPPFT SEQ ID NO: 251 VL DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISRWLAWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQAIALPPFTFGGGTKVEIK 893 SEQ ID NO: 252 (объединенная) HCDR1 GFTFSSYWMS SEQ ID NO: 253 (объединенная) HCDR2 NIKQDGSEKYYVDSVKG SEQ ID NO: 254 (объединенная) HCDR3 APEYYSTTTRLYYYYGMDV SEQ ID NO: 255 (Kabat) HCDR1 SYWMS SEQ ID NO: 253 (Kabat) HCDR2 NIKQDGSEKYYVDSVKG SEQ ID NO: 254 (Kabat) HCDR3 APEYYSTTTRLYYYYGMDV SEQ ID NO: 155 (Chothia) HCDR1 GFTFSSY SEQ ID NO: 256 (Chothia) HCDR2 KQDGSE SEQ ID NO: 254 (Chothia) HCDR3 APEYYSTTTRLYYYYGMDV SEQ ID NO: 257 (IMGT) HCDR1 GFTFSSYW SEQ ID NO: 258 (IMGT) HCDR2 IKQDGSEK SEQ ID NO: 259 (IMGT) HCDR3 ARAPEYYSTTTRLYYYYGMDV SEQ ID NO: 260 (альтернативная) HCDR1 FTFSSYWMS SEQ ID NO: 253 (альтернативная) HCDR2 NIKQDGSEKYYVDSVKG SEQ ID NO: 259 (альтернативная) HCDR3 ARAPEYYSTTTRLYYYYGMDV SEQ ID NO: 261 VH EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQAPGKGLEWVANIKQDGSEKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARAPEYYSTTTRLYYYYGMDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 262 (объединенная) LCDR1 KSSQSVLYSSNNKNYLA SEQ ID NO: 263 (объединенная) LCDR2 WASTRES SEQ ID NO: 264 (объединенная) LCDR3 QQYDAHPFT SEQ ID NO: 262 (Kabat) LCDR1 KSSQSVLYSSNNKNYLA SEQ ID NO: 263 (Kabat) LCDR2 WASTRES SEQ ID NO: 264 (Kabat) LCDR3 QQYDAHPFT SEQ ID NO: 265 (Chothia) LCDR1 SQSVLYSSNNKNY SEQ ID NO: 266 (Chothia) LCDR2 WAS SEQ ID NO: 267 (Chothia) LCDR3 YDAHPF SEQ ID NO: 268 (IMGT) LCDR1 QSVLYSSNNKNY SEQ ID NO: 266 (IMGT) LCDR2 WAS SEQ ID NO: 264 (IMGT) LCDR3 QQYDAHPFT SEQ ID NO: 262 (альтернативная) LCDR1 KSSQSVLYSSNNKNYLA SEQ ID NO: 263 (альтернативная) LCDR2 WASTRES SEQ ID NO: 264 (альтернативная) LCDR3 QQYDAHPFT SEQ ID NO: 269 VL DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYDAHPFTFGGGTKVEIK 939 SEQ ID NO: 287 (объединенная) HCDR1 GGTFSSYAIS SEQ ID NO: 288 (объединенная) HCDR2 GIIPIFGTANYAQKFQG SEQ ID NO: 289 (объединенная) HCDR3 HYYDYWSGYYTNTGIY SEQ ID NO: 290 (Kabat) HCDR1 SYAIS SEQ ID NO: 288 (Kabat) HCDR2 GIIPIFGTANYAQKFQG SEQ ID NO: 289 (Kabat) HCDR3 HYYDYWSGYYTNTGIY SEQ ID NO: 291 (Chothia) HCDR1 GGTFSSY SEQ ID NO: 292 (Chothia) HCDR2 IPIFGT SEQ ID NO: 289 (Chothia) HCDR3 HYYDYWSGYYTNTGIY SEQ ID NO: 293 (IMGT) HCDR1 GGTFSSYA SEQ ID NO: 294 (IMGT) HCDR2 IIPIFGTA SEQ ID NO: 295 (IMGT) HCDR3 ARHYYDYWSGYYTNTGIY SEQ ID NO: 296 (альтернативная) HCDR1 GTFSSYAIS SEQ ID NO: 288 (альтернативная) HCDR2 GIIPIFGTANYAQKFQG SEQ ID NO: 295 (альтернативная) HCDR3 ARHYYDYWSGYYTNTGIY SEQ ID NO: 297 VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARHYYDYWSGYYTNTGIYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 298 (объединенная) LCDR1 RASQSVSSNLA SEQ ID NO: 49 (объединенная) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 299 (объединенная) LCDR3 QQSGALPIT SEQ ID NO: 298 (Kabat) LCDR1 RASQSVSSNLA SEQ ID NO: 49 (Kabat) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 299 (Kabat) LCDR3 QQSGALPIT SEQ ID NO: 300 (Chothia) LCDR1 SQSVSSN SEQ ID NO: 52 (Chothia) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 301 (Chothia) LCDR3 SGALPI SEQ ID NO: 302 (IMGT) LCDR1 QSVSSN SEQ ID NO: 52 (IMGT) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 299 (IMGT) LCDR3 QQSGALPIT SEQ ID NO: 298 (альтернативная) LCDR1 RASQSVSSNLA SEQ ID NO: 49 (альтернативная) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 299 (альтернативная) LCDR3 QQSGALPIT SEQ ID NO: 303 VL EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASQSVSSNLAWYQQKPGQAPRLLIYGASTRATGIPARFSGSGSGTEFTLTISSLQSEDFAVYYCQQSGALPITFGGGTKVEIK 430 SEQ ID NO: 304 (объединенная) HCDR1 GGSFLRYYWS SEQ ID NO: 305 (объединенная) HCDR2 EIDHSGSTNYNPSLKS SEQ ID NO: 306 (объединенная) HCDR3 GQNYYGSGSADGFDP SEQ ID NO: 61 (Kabat) HCDR1 RYYWS SEQ ID NO: 305 (Kabat) HCDR2 EIDHSGSTNYNPSLKS SEQ ID NO: 306 (Kabat) HCDR3 GQNYYGSGSADGFDP SEQ ID NO: 307 (Chothia) HCDR1 GGSFLRY SEQ ID NO: 308 (Chothia) HCDR2 DHSGS SEQ ID NO: 306 (Chothia) HCDR3 GQNYYGSGSADGFDP SEQ ID NO: 309 (IMGT) HCDR1 GGSFLRYY SEQ ID NO: 310 (IMGT) HCDR2 IDHSGST SEQ ID NO: 311 (IMGT) HCDR3 ARGQNYYGSGSADGFDP SEQ ID NO: 312 (альтернативная) HCDR1 GSFLRYYWS SEQ ID NO: 305 (альтернативная) HCDR2 EIDHSGSTNYNPSLKS SEQ ID NO: 311 (альтернативная) HCDR3 ARGQNYYGSGSADGFDP SEQ ID NO: 313 VH QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFLRYYWSWIRQPPGKGLEWIGEIDHSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARGQNYYGSGSADGFDPWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 14 (объединенная) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (объединенная) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 314 (объединенная) LCDR3 QQANSFPPT SEQ ID NO: 14 (Kabat) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (Kabat) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 314 (Kabat) LCDR3 QQANSFPPT SEQ ID NO: 17 (Chothia) LCDR1 SQGISSW SEQ ID NO: 18 (Chothia) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 315 (Chothia) LCDR3 ANSFPP SEQ ID NO: 20 (IMGT) LCDR1 QGISSW SEQ ID NO: 18 (IMGT) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 314 (IMGT) LCDR3 QQANSFPPT SEQ ID NO: 14 (альтернативная) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (альтернативная) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 314 (альтернативная) LCDR3 QQANSFPPT SEQ ID NO: 316 VL DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQANSFPPTFGGGTKVEIK 398 SEQ ID NO: 317 (объединенная) HCDR1 GGSFSGYYWS SEQ ID NO: 318 (объединенная) HCDR2 EIDASGSTRYNPSLKS SEQ ID NO: 319 (объединенная) HCDR3 PLYDAYLDV SEQ ID NO: 320 (Kabat) HCDR1 GYYWS SEQ ID NO: 318 (Kabat) HCDR2 EIDASGSTRYNPSLKS SEQ ID NO: 319 (Kabat) HCDR3 PLYDAYLDV SEQ ID NO: 321 (Chothia) HCDR1 GGSFSGY SEQ ID NO: 322 (Chothia) HCDR2 DASGS SEQ ID NO: 319 (Chothia) HCDR3 PLYDAYLDV SEQ ID NO: 323 (IMGT) HCDR1 GGSFSGYY SEQ ID NO: 324 (IMGT) HCDR2 IDASGST SEQ ID NO: 325 (IMGT) HCDR3 ARPLYDAYLDV SEQ ID NO: 326 (альтернативная) HCDR1 GSFSGYYWS SEQ ID NO: 318 (альтернативная) HCDR2 EIDASGSTRYNPSLKS SEQ ID NO: 325 (альтернативная) HCDR3 ARPLYDAYLDV SEQ ID NO: 327 VH QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSGYYWSWIRQPPGKGLEWIGEIDASGSTRYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARPLYDAYLDVWGQG™VTVSS SEQ ID NO: 14 (объединенная) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (объединенная) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 328 (объединенная) LCDR3 QQAPIYPIT SEQ ID NO: 14 (Kabat) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (Kabat) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 328 (Kabat) LCDR3 QQAPIYPIT SEQ ID NO: 17 (Chothia) LCDR1 SQGISSW SEQ ID NO: 18 (Chothia) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 329 (Chothia) LCDR3 APIYPI SEQ ID NO: 20 (IMGT) LCDR1 QGISSW SEQ ID NO: 18 (IMGT) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 328 (IMGT) LCDR3 QQAPIYPIT SEQ ID NO: 14 (альтернативная) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (альтернативная) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 328 (альтернативная) LCDR3 QQAPIYPIT SEQ ID NO: 330 VL DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQAPIYPITFGGGTKVEIK

Таблица 2. Консенсусные последовательности CDR для иллюстративных антител к CD73

Линия 3 SEQ ID NO: 126 (объединенная) HCDR1 GFTFX₁X₂X₃AMS, где
X₁ представляет собой H, S, R или K;
X₂ представляет собой R, Y или S; и
X₃ представляет собой Y или N SEQ ID NO: 89 (объединенная) HCDR2 X₁IX₂GX₃GX₄X₅TYYADSVKG, где
X₁ представляет собой A или S;
X₂ представляет собой S или T;
X₃ представляет собой S или T;
X₄ представляет собой M, G или S; и
X₅ представляет собой N, S, L или Y SEQ ID NO: 37 (объединенная) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 48 (объединенная) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (объединенная) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (объединенная) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 88 (Kabat) HCDR1 X₁X₂AMS, где
X₁ представляет собой R, Y или S; и
X₂ представляет собой Y или N SEQ ID NO: 89 (Kabat) HCDR2 X₁IX₂GX₃GX₄X₅TYYADSVKG, где
X₁ представляет собой A или S;
X₂ представляет собой S или T;
X₃ представляет собой S или T;
X₄ представляет собой M, G или S; и
X₅ представляет собой N, S, L или Y SEQ ID NO: 37 (Kabat) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 48 (Kabat) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (Kabat) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (Kabat) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 122 (Chothia) HCDR1 GFTFX₁X₂X₃, где
X₁ представляет собой H, S, R или K;
X₂ представляет собой R, Y или S; и
X₃ представляет собой Y или N SEQ ID NO: 123 (Chothia) HCDR2 X₁GX₂GX₃X₄, где
X₁ представляет собой S или T;
X₂ представляет собой S или T;
X₃ представляет собой M, G или S; и
X₄ представляет собой N, S, L или Y SEQ ID NO: 37 (Chothia) HCDR3 GGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 51 (Chothia) LCDR1 SQSVGSN SEQ ID NO: 52 (Chothia) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 53 (Chothia) LCDR3 HNAFPY SEQ ID NO: 128 (IMGT) HCDR1 GFTFX₁X₂X₃A, где
X₁ представляет собой H, S, R или K;
X₂ представляет собой R, Y или S; и
X₃ представляет собой Y или N SEQ ID NO: 129 (IMGT) HCDR2 IX₁GX₂GX₃X₄T, где
X₁ представляет собой S или T;
X₂ представляет собой S или T;
X₃ представляет собой M, G или S; и
X₄ представляет собой N, S, L или Y SEQ ID NO: 43 (IMGT) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 54 (IMGT) LCDR1 QSVGSN SEQ ID NO: 52 (IMGT) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 50 (IMGT) LCDR3 QQHNAFPYT SEQ ID NO: 189 (альтернативная) HCDR1 FTFX₁X₂X₃AMS, где
X₁ представляет собой H, S, R или K;
X₂ представляет собой R, Y или S; и
X₃ представляет собой Y или N SEQ ID NO: 89 (альтернативная) HCDR2 X₁IX₂GX₃GX₄X₅TYYADSVKG, где
X₁ представляет собой A или S;
X₂ представляет собой S или T;
X₃ представляет собой S или T;
X₄ представляет собой M, G или S; и
X₅ представляет собой N, S, L или Y SEQ ID NO: 43 (альтернативная) HCDR3 ARGGLYGSGSYLSDFDL SEQ ID NO: 48 (альтернативная) LCDR1 RASQSVGSNLA SEQ ID NO: 49 (альтернативная) LCDR2 GASTRAT SEQ ID NO: 50 (альтернативная) LCDR3 QQHNAFPYT Линия 1 SEQ ID NO: 127 (объединенная) HCDR1 GGSIX₁X₂X₃YWS, где
X₁ представляет собой E или S;
X₂ представляет собой R, G или S; и
X₃ представляет собой Y или R SEQ ID NO: 91 (объединенная) HCDR2 YIYX₁X₂GSTX₃YNPSLKS, где
X₁ представляет собой G или S;
X₂ представляет собой R, S или T; и
X₃ представляет собой N или K SEQ ID NO: 3 (объединенная) HCDR3 ESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 14 (объединенная) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (объединенная) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 16 (объединенная) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 90 (Kabat) HCDR1 X₁X₂YWS, где
X₁ представляет собой R, G или S; и
X₂ представляет собой Y или R SEQ ID NO: 91 (Kabat) HCDR2 YIYX₁X₂GSTX₃YNPSLKS, где
X₁ представляет собой G или S;
X₂ представляет собой R, S или T; и
X₃ представляет собой N или K SEQ ID NO: 3 (Kabat) HCDR3 ESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 14 (Kabat) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (Kabat) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 16 (Kabat) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 124 (Chothia) HCDR1 GGSIX₁X₂X₃, где
X₁ представляет собой E или S;
X₂ представляет собой R, G или S; и
X₃ представляет собой Y или R SEQ ID NO: 125 (Chothia) HCDR2 YX₁X₂GS, где
X₁ представляет собой G или S; и
X₂ представляет собой R, S или T SEQ ID NO: 3 (Chothia) HCDR3 ESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 17 (Chothia) LCDR1 SQGISSW SEQ ID NO: 18 (Chothia) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 19 (Chothia) LCDR3 GNSFPR SEQ ID NO: 130 (IMGT) HCDR1 GGSIX₁X₂X₃Y, где
X₁ представляет собой E или S;
X₂ представляет собой R, G или S; и
X₃ представляет собой Y или R SEQ ID NO: 131 (IMGT) HCDR2 IYX₁X₂GST, где
X₁ представляет собой G или S; и
X₂ представляет собой R, S или T SEQ ID NO: 9 (IMGT) HCDR3 ARESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 20 (IMGT) LCDR1 QGISSW SEQ ID NO: 18 (IMGT) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 16 (IMGT) LCDR3 QQGNSFPRT SEQ ID NO: 196 (альтернативная) HCDR1 GSIX₁X₂X3YWS, где
X₁ представляет собой E или S;
X₂ представляет собой R, G или S; и
X₃ представляет собой Y или R SEQ ID NO: 91 (альтернативная) HCDR2 YIYX₁X₂GSTX₃YNPSLKS, где
X₁ представляет собой G или S;
X₂ представляет собой R, S или T; и
X₃ представляет собой N или K SEQ ID NO: 9 (альтернативная) HCDR3 ARESQESPYNNWFDP SEQ ID NO: 14 (альтернативная) LCDR1 RASQGISSWLA SEQ ID NO: 15 (альтернативная) LCDR2 AASSLQS SEQ ID NO: 16 (альтернативная) LCDR3 QQGNSFPRT

Таблица 26. Соответствующие последовательности зародышевого типа антител к CD73

Антитело VH зародышевого типа VL зародышевого типа 918 VH4-59 VK1-12 350 VH4-59 VK1-12 356 VH4-59 VK1-12 358 VH4-59 VK1-12 930 VH3-23 VK3-15 373 VH3-23 VK3-15 374 VH3-23 VK3-15 376 VH3-23 VK3-15 377 VH3-23 VK3-15 379 VH3-23 VK3-15 363 VH3-23 VK1-05 366 VH3-23 VK1-05 407 VH1-02 VK1-12 893 VH3-07 VK4-01 939 VH1-69 VK3-15 430 VH4-34 VK1-12 398 VH4-34 VK1-12

Таблица 3. Аминокислотные последовательности константной области тяжелой цепи IgG человека и легкой каппа-цепи человека.

SEQ ID NO Описание Последовательность 92 IgG4 (S228P) ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK 93 IgG4 (S228P), не содержащий C-концевого лизина ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG 94 IgG4 (S228P/L235E) ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFEGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK 95 IgG4 (S228P/L235E), не содержащий C-концевого лизина ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFEGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG 119 IgG1 дикого типа ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 120 IgG1 дикого типа, не содержащий C-концевого лизина ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 96 IgG1 дикого типа ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 97 IgG1 дикого типа, не содержащий C-концевого лизина ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 98 IgG1 (N297A) ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 99 IgG1 (N297A), не содержащий C-концевого лизина ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 100 IgG1 (D265A/P329A) ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVAVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALAAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 101 IgG1 (D265A/P329A), не содержащий C-концевого лизина ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVAVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALAAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 102 IgG1 (L234A/L235A) ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 103 IgG1 (L234A/L235A), не содержащий C-концевого лизина ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 104 Константная область каппа-цепи человека RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Таблица 4. Иллюстративные последовательности CD73

SEQ ID NO Описание Последовательность 105 CD73 человека (Q6NZX3) MCPRAARAPATLLLALGAVLWPAAGAWELTILHTNDVHSRLEQTSEDSSKCVNASRCMGGVARLFTKVQQIRRAEPNVLLLDAGDQYQGTIWFTVYKGAEVAHFMNALRYDAMALGNHEFDNGVEGLIEPLLKEAKFPILSANIKAKGPLASQISGLYLPYKVLPVGDEVVGIVGYTSKETPFLSNPGTNLVFEDEITALQPEVDKLKTLNVNKIIALGHSGFEMDKLIAQKVRGVDVVVGGHSNTFLYTGNPPSKEVPAGKYPFIVTSDDGRKVPVVQAYAFGKYLGYLKIEFDERGNVISSHGNPILLNSSIPEDPSIKADINKWRIKLDNYSTQELGKTIVYLDGSSQSCRFRECNMGNLICDAMINNNLRHADETFWNHVSMCILNGGGIRSPIDERNNGTITWENLAAVLPFGGTFDLVQLKGSTLKKAFEHSVHRYGQSTGEFLQVGGIHVVYDLSRKPGDRVVKLDVLCTKCRVPSYDPLKMDEVYKVILPNFLANGGDGFQMIKDELLRHDSGDQDINVVSTYISKMKVIYPAVEGRIKFSTGSHCHGSFSLIFLSLWAVIFVLYQ 106 Изоформа CD73 человека (P21589-1) MCPRAARAPATLLLALGAVLWPAAGAWELTILHTNDVHSRLEQTSEDSSKCVNASRCMGGVARLFTKVQQIRRAEPNVLLLDAGDQYQGTIWFTVYKGAEVAHFMNALRYDAMALGNHEFDNGVEGLIEPLLKEAKFPILSANIKAKGPLASQISGLYLPYKVLPVGDEVVGIVGYTSKETPFLSNPGTNLVFEDEITALQPEVDKLKTLNVNKIIALGHSGFEMDKLIAQKVRGVDVVVGGHSNTFLYTGNPPSKEVPAGKYPFIVTSDDGRKVPVVQAYAFGKYLGYLKIEFDERGNVISSHGNPILLNSSIPEDPSIKADINKWRIKLDNYSTQELGKTIVYLDGSSQSCRFRECNMGNLICDAMINNNLRHTDEMFWNHVSMCILNGGGIRSPIDERNNGTITWENLAAVLPFGGTFDLVQLKGSTLKKAFEHSVHRYGQSTGEFLQVGGIHVVYDLSRKPGDRVVKLDVLCTKCRVPSYDPLKMDEVYKVILPNFLANGGDGFQMIKDELLRHDSGDQDINVVSTYISKMKVIYPAVEGRIKFSTGSHCHGSFSLIFLSLWAVIFVLYQ 107 Изоформа CD73 человека (P21589-2) MCPRAARAPATLLLALGAVLWPAAGAWELTILHTNDVHSRLEQTSEDSSKCVNASRCMGGVARLFTKVQQIRRAEPNVLLLDAGDQYQGTIWFTVYKGAEVAHFMNALRYDAMALGNHEFDNGVEGLIEPLLKEAKFPILSANIKAKGPLASQISGLYLPYKVLPVGDEVVGIVGYTSKETPFLSNPGTNLVFEDEITALQPEVDKLKTLNVNKIIALGHSGFEMDKLIAQKVRGVDVVVGGHSNTFLYTGNPPSKEVPAGKYPFIVTSDDGRKVPVVQAYAFGKYLGYLKIEFDERGNVISSHGNPILLNSSIPEDPSIKADINKWRIKLDNYSTQELGKTIVYLDGSSQSCRFRECNMGNLICDAMINNNLRHTDEMFWNHVSMCILNGGGIRSPIDERNNGIHVVYDLSRKPGDRVVKLDVLCTKCRVPSYDPLKMDEVYKVILPNFLANGGDGFQMIKDELLRHDSGDQDINVVSTYISKMKVIYPAVEGRIKFSTGSHCHGSFSLIFLSLWAVIFVLYQ 108 Фрагмент CD73 (диапазон остатков 158-172 из SEQ ID NO: 105) YLPYKVLPVGDEVVG 109 Фрагмент CD73 (диапазон остатков 206-215 из SEQ ID NO: 105) KLKTLNVNKI 110 Фрагмент CD73 (диапазон остатков 368-387 из SEQ ID NO: 105) MINNNLRHADETFWNHVSMC 121 Фрагмент CD73 (диапазон остатков 368-387 из SEQ ID NO: 106) MINNNLRHTDEMFWNHVSMC 111 Фрагмент CD73 (диапазон остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105) YQGTIWFTVYKGAEVAHF 118 Фрагмент CD73 (диапазон остатков 297-309 из SEQ ID NO: 105) RGNVISSHGNPIL 134 Фрагмент CD73 (диапазон остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105) WELTILHTNDVHSRLEQTSEDSSKCVNASRCMGGVARLFTKVQQIRRAEPNVLLLDAGDQYQGTIWFTVYKGAEVAHFMNALRYDAMALGNHEFDNGVEGLIEPLLKEAKFPILSANIKAKGPLASQISGLYLPYKVLPVGDEVVGIVGYTSKETPFLSNPGTNLVFEDEITALQPEVDKLKTLNVNKIIALGHSGFEMDKLIAQKVRGVDVVVGGHSNTFLYTGNPPSKEVPAGKYPFIVTSDDGRKVPVVQAYAFGKYLGYLKIEFDERGNVISSHGNPILLNSSIPEDPSIKADINKWRIKLDNYSTQELGKTIVYLDGSSQSCRFRECNMGNLICDAMINNNLRHADETFWNHVSMCILNGGGIRSPIDERNNGTITWENLAAVLPFGGTFDLVQLKGSTLKKAFEHSVHRYGQSTGEFLQVGGIHVVYDLSRKPGDRVVKLDVLCTKCRVPSYDPLKMDEVYKVILPNFLANGGDGFQMIKDELLRHDSGDQDINVVSTYISKMKVIYPAVEGRIK 171 Фрагмент CD73 (диапазон остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105), слитый с 6-His-меткой на C-конце (SEQ ID NO: 922) WELTILHTNDVHSRLEQTSEDSSKCVNASRCMGGVARLFTKVQQIRRAEPNVLLLDAGDQYQGTIWFTVYKGAEVAHFMNALRYDAMALGNHEFDNGVEGLIEPLLKEAKFPILSANIKAKGPLASQISGLYLPYKVLPVGDEVVGIVGYTSKETPFLSNPGTNLVFEDEITALQPEVDKLKTLNVNKIIALGHSGFEMDKLIAQKVRGVDVVVGGHSNTFLYTGNPPSKEVPAGKYPFIVTSDDGRKVPVVQAYAFGKYLGYLKIEFDERGNVISSHGNPILLNSSIPEDPSIKADINKWRIKLDNYSTQELGKTIVYLDGSSQSCRFRECNMGNLICDAMINNNLRHADETFWNHVSMCILNGGGIRSPIDERNNGTITWENLAAVLPFGGTFDLVQLKGSTLKKAFEHSVHRYGQSTGEFLQVGGIHVVYDLSRKPGDRVVKLDVLCTKCRVPSYDPLKMDEVYKVILPNFLANGGDGFQMIKDELLRHDSGDQDINVVSTYISKMKVIYPAVEGRIKHHHHHH 332 Фрагмент CD73 (диапазон остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105), слитый с 6-His-меткой на C-конце (SEQ ID NO: 922), содержащий сигнальный пептид MCPRAARAPATLLLALGAVLWPAAGAWELTILHTNDVHSRLEQTSEDSSKCVNASRCMGGVARLFTKVQQIRRAEPNVLLLDAGDQYQGTIWFTVYKGAEVAHFMNALRYDAMALGNHEFDNGVEGLIEPLLKEAKFPILSANIKAKGPLASQISGLYLPYKVLPVGDEVVGIVGYTSKETPFLSNPGTNLVFEDEITALQPEVDKLKTLNVNKIIALGHSGFEMDKLIAQKVRGVDVVVGGHSNTFLYTGNPPSKEVPAGKYPFIVTSDDGRKVPVVQAYAFGKYLGYLKIEFDERGNVISSHGNPILLNSSIPEDPSIKADINKWRIKLDNYSTQELGKTIVYLDGSSQSCRFRECNMGNLICDAMINNNLRHADETFWNHVSMCILNGGGIRSPIDERNNGTITWENLAAVLPFGGTFDLVQLKGSTLKKAFEHSVHRYGQSTGEFLQVGGIHVVYDLSRKPGDRVVKLDVLCTKCRVPSYDPLKMDEVYKVILPNFLANGGDGFQMIKDELLRHDSGDQDINVVSTYISKMKVIYPAVEGRIKHHHHHH

В других вариантах осуществления вышеупомянутые молекулы антител способны связываться с CD73 человека с константой диссоциации (K_D), составляющей менее чем приблизительно 1×10^-4 M, 1×10^-5 M, 1×10^-6 M, 1×10^-7 M, 1×10^-8 M, 1×10^-9 M, которую, например, измеряют с помощью систем Biacore, Octet, проточной цитометрии или ELISA.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела связывается с CD73 млекопитающего, например, человека или макака-крабоеда. Например, молекула антитела связывается с эпитопом, например, линейным или конформационным эпитопом (например, описанным в данном документе эпитопом) на CD73. В определенных аспектах предпочтительной является идентификация антитела, которое с высокой аффинностью связывается с гомологами представляющего интерес белка человека и макака-крабоеда. Данная требуемая перекрестная реактивность обеспечивает возможность исследовать одно и то же антитело (или два антитела с одинаковыми CDR или вариабельными областями) на животной модели и затем вводить пациентам-людям в качестве терапевтического средства.

В некоторых вариантах осуществления в данном документе раскрыта выделенная молекула антитела, которая конкурирует за связывание с CD73 человека с вышеупомянутыми молекулами антител к CD73.

В некоторых вариантах осуществления в данном документе раскрыта выделенная молекула антитела, которая связывается с тем же эпитопом, по сути тем же эпитопом, с перекрывающимся эпитопом, или по сути перекрывающимся эпитопом, что и вышеупомянутые молекулы антител к CD73.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела связывается с N-концевым доменом CD73 человека. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела связывается с A-петлей и/или B-петлей CD73 человека. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела при связывании с CD73 человека, индуцирует конформационное изменение в С-петле CD73 человека.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена в одной или нескольких областях белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при его связывании, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, например, способа, применяемого на фиг. 14 и 15. Репрезентативные данные показаны на фиг. 14 и 15. В некоторых вариантах осуществления водородно-дейтериевый обмен уменьшается на по меньшей мере 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, или 90%.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена в одной или нескольких областях белка, содержащего аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 106, при его связывании, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 106, например, при исследовании молекулы антитела в виде молекулы бивалентного антитела с применением масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к большему уменьшению водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, что, например, измеряют с помощью способа, описанного в данном документе, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7,5 и комнатной температуре, например, способа, применяемого на фиг. 14 и 15. Репрезентативные данные показаны на фиг. 14 и 15. В некоторых вариантах осуществления уменьшение водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 является по меньшей мере 1,2-кратным, 1,3-кратным, 1,4-кратным, 1,5-кратным, 1,6-кратным, 1,7-кратным, 1,8-кратным, 1,9-кратным, 2-кратным, 2,5-кратным, 3-кратным, 3,5-кратным или 4-кратным относительно уменьшения водородно-дейтериевого обмена по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 106), приводит к большему уменьшению водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 106, чем по остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 106, что, например, измеряют с помощью способа, описанного в данном документе, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7,5 и комнатной температуре.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 при связывании с CD73 человека, обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена в С-петле CD73 человека в большей степени, чем в А-петле, B-петле или D-петле CD73 человека, который, например, измеряют с помощью способа, описанного в данном документе, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при рН 7,5 и комнатной температуре, например, с помощью способа, применяемого на фиг. 14 и 15. Репрезентативные данные показаны на фиг. 14 и 15. В некоторых вариантах осуществления уменьшение водородно-дейтериевого обмена в С-петле CD73 человека является по меньшей мере 1,2-кратным, 1,3-кратным, 1,4-кратным, 1,5-кратным, 1,6-кратным, 1,7-кратным, 1,8-кратным, 1,9-кратным, 2-кратным, 2,5-кратным, 3-кратным, 3,5-кратным или 4-кратным относительно уменьшения водородно-дейтериевого обмена в A-петле, B-петле или D-петле CD73 человека.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 158-172, остаткам 206-215 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, что, например, измеряют с помощью способа, описанного в данном документе, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7,5 и комнатной температуре, например, способа, применяемого на фиг. 14 и 15. Репрезентативные данные показаны на фиг. 14 и 15. В некоторых вариантах осуществления уменьшение водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105 является по меньшей мере 1,2-кратным, 1,3-кратным, 1,4-кратным, 1,5-кратным, 1,6-кратным, 1,7-кратным, 1,8-кратным, 1,9-кратным, 2-кратным, 2,5-кратным, 3-кратным, 3,5-кратным или 4-кратным относительно уменьшения водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172, остаткам 206-215 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 106, обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 106 в большей степени, чем по остаткам 158-172, остаткам 206-215 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 106, что, например, измеряют с помощью способа, описанного в данном документе, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7,5 и комнатной температуре.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 при связывании с CD73 человека, обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена в А-петле CD73 человека в большей степени, чем в В-петле, С-петле или D-петле CD73 человека, который, например, измеряют с помощью способа, описанного в данном документе, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при рН 7,5 и комнатной температуре, например, с помощью способа, применяемого на фиг. 14 и 15. Репрезентативные данные показаны на фиг. 14 и 15. В некоторых вариантах осуществления уменьшение водородно-дейтериевого обмена в А-петле CD73 человека является по меньшей мере 1,2-кратным, 1,3-кратным, 1,4-кратным, 1,5-кратным, 1,6-кратным, 1,7-кратным, 1,8-кратным, 1,9-кратным, 2-кратным, 2,5-кратным, 3-кратным, 3,5-кратным или 4-кратным относительно уменьшения водородно-дейтериевого обмена в В-петле, С-петле или D-петле CD73 человека.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 в большей степени, чем по остаткам 206-215, остаткам 368-387 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105, что, например, измеряют с помощью способа, описанного в данном документе, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7,5 и комнатной температуре, например, способа, применяемого на фиг. 14 и 15. Репрезентативные данные показаны на фиг. 14 и 15. В некоторых вариантах осуществления уменьшение водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 105 является по меньшей мере 1,2-кратным, 1,3-кратным, 1,4-кратным, 1,5-кратным, 1,6-кратным, 1,7-кратным, 1,8-кратным, 1,9-кратным, 2-кратным, 2,5-кратным, 3-кратным, 3,5-кратным или 4-кратным относительно уменьшения водородно-дейтериевого обмена по остаткам 206-215, остаткам 368-387 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 105.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), обеспечивает уменьшение уровня водородно-дейтериевого обмена по остаткам 158-172 из SEQ ID NO: 106 в большей степени, чем по остаткам 206-215, остаткам 368-387 или остаткам 297-309 из SEQ ID NO: 106, что, например, измеряют с помощью способа, описанного в данном документе, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7,5 и комнатной температуре.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), способна обеспечивать уменьшение водородно-дейтериевый обмен в одной или нескольких областях CD73 человека, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105, при этом область, характеризующаяся наибольшим уменьшением среди одной или нескольких областей, не представляет собой остатки 206-215 из SEQ ID NO: 105, что, например, измеряют с помощью способа, описанного в данном документе, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7,5 и комнатной температуре, например, способа, применяемого на фиг. 14 и 15. Репрезентативные данные показаны на фиг. 14 и 15.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 106, способна обеспечивать уменьшение водородно-дейтериевый обмен в одной или нескольких областях CD73 человека, при этом одна или несколько областей выбраны из группы, состоящей из остатков 158-172, остатков 206-215, остатков 368-387 и остатков 87-104 из SEQ ID NO: 106, при этом область, характеризующаяся наибольшим уменьшением среди одной или нескольких областей, не представляет собой остатки 206-215 из SEQ ID NO: 106, что, например, измеряют с помощью способа, описанного в данном документе, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7,5 и комнатной температуре.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему более чем, например, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05 или 0,06 Да на остаток, по остаткам 368-387 из SEQ ID NO: 105, что, например, измеряют с помощью способа, описанного в данном документе, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7,5 и комнатной температуре, например, способа, применяемого на фиг. 14 и 15. Репрезентативные данные показаны на фиг. 14 и 15.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 при связывании с белком, содержащим аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например, белком, состоящим из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), приводит к снижению уровня водородно-дейтериевого обмена, составляющему менее чем, например, 0,05, 0,04, 0,03 или 0,02 Да на остаток, по остаткам 206-215 из SEQ ID NO: 105, что, например, измеряют с помощью способа, описанного в данном документе, например масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена, проводимой с обменом в течение 1 минуты при pH 7,5 и комнатной температуре, например, способа, применяемого на фиг. 14 и 15. Репрезентативные данные показаны на фиг. 14 и 15.

В некоторых вариантах осуществления представлена молекула антитела, которая связывается с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, при этом, если молекула антитела содержит первый антигенсвязывающий домен и второй антигенсвязывающий домен, первый антигенсвязывающий домен связывается с первым мономером CD73 и второй антигенсвязывающий домен связывается со вторым мономером CD73, например, при исследовании с применением эксклюзионной хроматографии, например, при исследовании с применением способа, описанного в данном документе, например, способа, применяемого на фиг. 17A и 17B.

В некоторых вариантах осуществления в данном документе раскрыта композиция, содержащая несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если каждая из молекул антитела во множестве содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, по меньшей мере 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, или 80% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов состоит из одной молекулы антитела и одного димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антител), например, при исследовании с применением способа, описанного в данном документе, например, способа, применяемого на фиг. 17A, 17B, 18A и 18B. Репрезентативные данные показаны на фиг. 17A, 17B, 18A и 18B.

В некоторых вариантах осуществления в данном документе раскрыто несколько молекул антитела, которые связываются с димером CD73 человека, причем указанный димер состоит из первого мономера CD73 и второго мономера CD73, причем каждый мономер содержит аминокислотную последовательность из остатков 27-547 из SEQ ID NO: 105 (например каждый мономер состоит из аминокислотной последовательности под SEQ ID NO: 171), при этом, если каждая из молекул антитела во множестве содержит один и тот же первый антигенсвязывающий домен и один и тот же второй антигенсвязывающий домен, не более 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, или 70% молекул антитела в указанной композиции связываются с димером CD73 с образованием комплекса, где каждый из указанных комплексов содержит две или более молекул антитела и два или более димера CD73, например, при измерении с применением эксклюзионной хроматографии, и процентное значение получают путем определения количества молекул антитела в комплексе по отношению к общему количеству молекул антитела, связывающихся с CD73 (исключая несвязанные молекулы антител), например, при исследовании с применением способа, описанного в данном документе, например, способа, применяемого на фиг. 17A, 17B, 18A и 18B. Репрезентативные данные показаны на фиг. 17A, 17B, 18A и 18B.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 после связывания с CD73 человека не приводит к олигомеризации CD73 человека.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела предпочтительно связывается с CD73 в открытой конформации, например в каталитически неактивной конформации, а не с CD73 в закрытой конформации, например в каталитически активной конформации, например не связывается или связывается с CD73 в закрытой конформации, например с CD73 в каталитически активной конформации, с более низкой аффинностью, например с аффинностью, которая ниже на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, или 99%, чем при связывании молекулы антитела с CD73 в открытой конформации, например каталитически неактивной конформации;

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 обеспечивает предотвращение превращения CD73 человека из каталитически неактивной открытой конформации в каталитически активную закрытую конформацию или уменьшение его уровня. В некоторых вариантах осуществления уровень превращения CD73 человека из каталитически неактивной открытой конформации в каталитически активную закрытую конформацию уменьшается в по меньшей мере 1,5 раза, 2 раза, 5 раз, 10 раз, 20 раз, 30 раз, 40 раз, 50 раз, 60 раз, 70 раз, 80 раз, 90 раз или 100 раз по сравнению с уровнем превращения в отсутствие молекулы антитела.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 взаимодействует, например прямо или косвенно с по меньшей мере одним остатком в пределах остатков 158-172 из SEQ ID NO: 105. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 взаимодействует, например прямо или косвенно с по меньшей мере одним остатком в пределах остатков 206-215 из SEQ ID NO: 105. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 взаимодействует, например прямо или косвенно с по меньшей мере одним остатком в пределах остатков 368-387 из SEQ ID NO: 105. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 взаимодействует, например прямо или косвенно с по меньшей мере одним остатком в пределах остатков 87-104 из SEQ ID NO: 105. В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 взаимодействует, например прямо или косвенно с по меньшей мере одним остатком в пределах остатков 368-387 из SEQ ID NO: 106.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 ингибирует или обеспечивает уменьшение ферментативной активности CD73 (например, растворимого CD73 человека или мембраносвязанного CD73 человека), например, опосредованного CD73 человека превращения аденозинмонофосфата (AMP) в аденозин, что, например, измеряют с помощью способа, описанного в данном документе, например с помощью количественного определения фосфата по реакции с малахитовым зеленым (MG) или модифицированного анализа Cell Titer Glo (CTG), например, способа, применяемого на фиг. 2B, 3A, 3B, 3C, 4, 5, 6, 7A, 7B, 7C, 8A, 8B, 9A, 9B, 10, 11A, 11B или 13. Репрезентативные данные показаны на фиг. 2B, 3A, 3B, 3C, 4, 5, 6, 7A, 7B, 7C, 8A, 8B, 9A, 9B, 10, 11A, 11B и 13. В некоторых вариантах осуществления ферментативная активность CD73 (например, растворимого CD73 человека или мембраносвязанного CD73 человека) уменьшается на по меньшей мере 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, или 99%.

В некоторых вариантах осуществления молекула антитела к CD73 обеспечивает увеличение уровня пролиферации Т-клеток, стимулированных антителом к CD3/антителом к CD28, например Т-клеток CD4+, в присутствии аденозинмонофосфата (AMP), что, например, измеряют с помощью описанного в данном документе способа, например, с помощью анализа пролиферации клеток CellTrace Violet (CTV), например, способа, применяемого на фиг. 12A или 12B. Репрезентативные данные показаны на фиг. 12A и 12B. В некоторых вариантах осуществления, пролиферация Т-клеток, стимулированных посредством антител к CD3/антител к CD28, например, Т-клеток CD4+, увеличена по меньшей мере 2-кратно, 3-кратно, 4-кратно, 5-кратно, 6-кратно, 7-кратно, 8-кратно, 9-кратно или 10-кратно.

В другом аспекте настоящее изобретение предусматривает выделенную нуклеиновую кислоту, кодирующую любую из вышеупомянутых молекул антитела, векторы и их клетки-хозяева. Молекула нуклеиновой кислоты включает без ограничения РНК, геномную ДНК и cDNA.

В некоторых вариантах осуществления выделенная нуклеиновая кислота кодирует вариабельную область тяжелой цепи антитела, вариабельную область легкой цепи, тяжелую цепь и/или легкую цепь любой из вышеупомянутых молекул антитела.

В некоторых вариантах осуществления выделенная нуклеиновая кислота кодирует вариабельную область тяжелой цепи, где нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность под SEQ ID NO: 45, 78, 85, 143, 152, 160, 67, 32, 11, или 169, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 45, 78, 85, 143, 152, 160, 67, 32, 11, или 169.

В некоторых вариантах осуществления выделенная нуклеиновая кислота кодирует тяжелую цепь, где нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность под SEQ ID NO: 47, 80, 87, 69, 34, или 13, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 47, 80, 87, 69, 34, или 13.

В некоторых вариантах осуществления выделенная нуклеиновая кислота кодирует вариабельную область легкой цепи, где нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность под SEQ ID NO: 56, 144, 22 или 170 или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 56, 144, 22 или 170.

В некоторых вариантах осуществления выделенная нуклеиновая кислота кодирует легкую цепь, где нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность под SEQ ID NO: 58 или 24 или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 58 или 24.

Фармацевтические композиции и наборы

В некоторых аспектах в настоящем изобретении предусмотрены композиции, например, фармацевтически приемлемые композиции, которые содержат описанную в данном документе молекулу антитела к CD73, составленную вместе с фармацевтически приемлемым носителем. Используемый в данном документе термин "фармацевтически приемлемый носитель" включает все без исключения растворители, дисперсионные среды, изотонические и замедляющие абсорбцию средства и т. п., которые являются физиологически совместимыми. Носитель может быть подходящим для внутривенного, внутримышечного, подкожного, парентерального, ректального, спинального или эпидермального введения (например, посредством инъекции или инфузии).

Композиции, представленные в данном документе, могут находиться в различных формах. Они включают, например, жидкие, полутвердые и твердые лекарственные формы, такие как жидкие растворы (например, растворы для инъекции или инфузии), дисперсии или суспензии, липосомы и суппозитории. Подходящая форма зависит от предполагаемого способа введения и терапевтического применения. Обычные подходящие композиции находятся в форме растворов для инъекции или инфузии. Один подходящий способ введения представляет собой парентеральный (например, внутривенный, подкожный, внутрибрюшинный, внутримышечный). В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела вводят с помощью внутривенной инфузии или инъекции. В определенных вариантах осуществления антитело вводят с помощью внутримышечной или подкожной инъекции.

Фразы "парентеральное введение" и "вводимый парентерально", используемые в данном документе, относятся к способам введения, отличным от энтерального и местного введения, обычно с помощью инъекции, и включают без ограничения внутривенную, внутримышечную, внутриартериальную, интратекальную, внутрикапсульную, интраорбитальную, внутрисердечную, внутрикожную, внутрибрюшинную, транстрахеальную, подкожную, субкутикулярную, внутрисуставную, подкапсулярную, субарахноидальную, интраспинальную, эпидуральную и интрастернальную инъекцию и инфузию.

Терапевтические композиции, как правило, должны быть стерильными и стабильными в условиях производства и хранения. Композиция может быть составлена в виде раствора, микроэмульсии, дисперсии, липосомы или другой упорядоченной структуры, подходящей для высокой концентрации антитела. Стерильные инъекционные растворы можно получать путем включения активного соединения (т. е. антитела или части антитела) в требуемом количестве в соответствующий растворитель с одним из перечисленных выше ингредиентов или с комбинацией таковых, при необходимости, с последующей стерилизацией фильтрованием. Как правило, дисперсии получают путем включения активного соединения в стерильную среду-носитель, которая содержит основную дисперсионную среду и другие требуемые ингредиенты из тех, что перечислены выше. В случае стерильных порошков для получения стерильных инъекционных растворов предпочтительными способами получения являются вакуумная сушка и лиофилизация, которые дают в результате порошок из активного ингредиента и любого дополнительного желаемого ингредиента из их раствора, ранее стерилизованного фильтрацией. Надлежащую текучесть раствора можно поддерживать, например, путем применения покрывающего средства, такого как лецитин, с помощью поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсии и путем применения поверхностно-активных веществ. Продолжительное всасывание инъекционных композиций могут обеспечивать включением в композицию средства, которое замедляет всасывание, например, моностеаратных солей и желатина.

Молекулу антитела можно вводить с помощью ряда способов. Несколько способов известны из уровня техники, и для многих терапевтических применений подходящим путем/способом введения является внутривенная инъекция или инфузия. В одном варианте осуществления молекулы антител можно вводить путем внутривенной инфузии со скоростью более 20 мг/мин, например, 20-40 мг/мин. В одном варианте осуществления молекулы антител можно вводить путем внутривенной инфузии со скоростью, превышающей или равной 40 мг/мин, для достижения дозы от приблизительно 35 до 440 мг/м², от приблизительно 70 до 310 мг/м² или от приблизительно 110 до 130 мг/м². В варианте осуществления молекулы антител можно вводить с помощью внутривенной инфузии со скоростью менее 10 мг/мин, например, равной 5 мг/мин или меньше, с достижением дозы от приблизительно 1 до 100 мг/м², например, от приблизительно 5 до 50 мг/м², от приблизительно 7 до 25 мг/м² или приблизительно 10 мг/м². Как будет понятно специалисту в данной области техники, путь и/или способ введения будут варьироваться в зависимости от необходимых результатов. В определенных вариантах осуществления активное соединение может быть получено с носителем, который будет защищать соединение от быстрого высвобождения, например, состав с контролируемым высвобождением, в том числе имплантаты, трансдермальные пластыри и микроинкапсулированные системы доставки. Можно применять биоразлагаемые, биосовместимые полимеры, такие как этиленвинилацетат, полиангидриды, полигликолевая кислота, коллаген, сложные полиортоэфиры и полимолочная кислота. Многие способы получения таких составов запатентованы или общеизвестны для специалистов в данной области техники. См., например, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978.

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела можно вводить перорально, например, с помощью инертного разбавителя или усвояемого съедобного носителя. Молекулу антитела (и другие ингредиенты, если необходимо) также можно заключать в желатиновую капсулу с твердой или мягкой с оболочкой, спрессовывать в таблетки или вводить непосредственно в рацион субъекта. Для перорального терапевтического введения молекулу антитела можно вводить со вспомогательными веществами и применять в форме проглатываемых таблеток, буккальных таблеток, пастилок, капсул, настоек, суспензий, сиропов, пластинок и т. п. Для введения молекулы антитела по настоящему изобретению путем, отличным от парентерального, может потребоваться покрытие соединения или совместное введение соединения с материалом для предотвращения его инактивации. Терапевтические композиции также можно вводить с помощью медицинских устройств, известных из уровня техники.

Схемы дозирования корректируют для обеспечения требуемого ответа (например, терапевтического ответа). Например, можно вводить одну болюсную дозу, можно вводить несколько разделенных доз в течение некоторого времени, или дозу можно пропорционально снижать или увеличивать в соответствии с потребностями терапевтической ситуации. Особенно преимущественным является составление композиций для парентерального применения в виде единичной лекарственной формы для удобства введения и однородности дозирования. Единичная лекарственная форма, как используется в данном документе, относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичных доз для субъектов, подлежащих лечению; при этом каждая единица содержит предварительно определенное количество активного соединения, рассчитанное для получения требуемого терапевтического эффекта, в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем. Параметры единичных дозированных форм продиктованы и непосредственно зависят от (a) уникальных характеристик активного соединения и конкретного терапевтического эффекта, который должен быть достигнут, и (b) ограничений, свойственных в данной области техники в отношении составления такого активного соединения для лечения чувствительности у индивидуумов.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, раскрытую в данном документе, вводят путем инъекции (например, подкожно или внутривенно) в дозе (например, фиксированной дозе) от приблизительно 60 мг до 2400 мг, например, от приблизительно 100мг до 2400 мг, от приблизительно 100 мг до 2200 мг, от приблизительно 100 мг до 2000 мг, от приблизительно 100 мг до 1800 мг, от приблизительно 100 мг до 1600 мг, от приблизительно 100 мг до 1400 мг, от приблизительно 100 мг до 1200 мг, от приблизительно 100 мг до 1000 мг, от приблизительно 100 мг до 800 мг, от приблизительно 100 мг до 600 мг, от приблизительно 100 мг до 400 мг, от приблизительно 100 мг до 200 мг или приблизительно 100 мг, приблизительно 180 мг или приблизительно 200 мг. Схема введения доз (например, схема введения фиксированных доз) может варьироваться, например, от одного раза в неделю до одного раза в 2, 3 или 4 недели. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73, раскрытую в данном документе, вводят в дозе от приблизительно 100 мг до 200 мг раз в неделю, раз в две недели или раз в три недели. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73, раскрытую в данном документе, вводят в дозе по меньшей мере приблизительно 180 мг раз в две недели.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, раскрытую в данном документе, вводят посредством инъекции (например, подкожно или внутривенно) в дозе (например, фиксированной дозе) от приблизительно 5 мг до 100 мг, от приблизительно 100 мг до 500 мг, от приблизительно 500 мг до 1000 мг, от приблизительно 1000 мг до 1500 мг, от приблизительно 1500 мг до 2000 мг, от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, от приблизительно 2500 мг до 3000 мг, от приблизительно 3000 мг до 3500 мг или от приблизительно 3500 мг до 4000 мг, например, раз в неделю (QW), раз в две недели (Q2W) или раз в четыре недели (Q4W). В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 6 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 60 мг, приблизительно 200 мг, приблизительно 600 мг, приблизительно 1200 мг, приблизительно 2400 мг, приблизительно 3000 мг или приблизительно 3600 мг, например QW, Q2W или Q4W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 60 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 200 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 600 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 1200 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 2400 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 3000 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 3600 мг Q2W.

В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73, раскрытую в данном документе, вводят, например путем инфузии, в течение периода времени 30 минут, периода времени 1 час или периода времени не более 2 часов.

Иллюстративный неограничивающий диапазон для терапевтически или профилактически эффективного количества молекулы антитела составляет 0,1-30 мг/кг, более предпочтительно 1-25 мг/кг. Дозировки и терапевтические схемы приема молекулы антитела к CD73 могут быть определены специалистом в данной области техники. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят путем инъекции (например, подкожно или внутривенно) в дозе от приблизительно 1 до 40 мг/кг, например от 1 до 30 мг/кг, например, от приблизительно 5 до 25 мг/кг, от приблизительно 10 до 20 мг/кг, от приблизительно 1 до 5 мг/кг, от 1 до 10 мг/кг, от 5 до 15 мг/кг, от 10 до 20 мг/кг, от 15 до 25 мг/кг или приблизительно 3 мг/кг. Схема введения доз может варьировать от, например, раза в неделю до раза в 2, 3 или 4 недели. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в дозе от приблизительно 10 до 20 мг/кг раз в две недели. Молекулу антитела можно вводить с помощью внутривенной инфузии со скоростью более 20 мг/мин., например, 20-40 мг/мин., например, равной 40 мг/мин. или больше, с достижением дозы от приблизительно 35 до 440 мг/м², от приблизительно 70 до 310 мг/м² или от приблизительно 110 до 130 мг/м². В вариантах осуществления при скорости инфузии приблизительно 110-130 мг/м² достигается уровень приблизительно 3 мг/кг. В других вариантах осуществления молекулу антитела можно вводить с помощью внутривенной инфузии со скоростью менее 10 мг/мин., например, равной 5 мг/мин. или меньше, с достижением дозы от приблизительно 1 до 100 мг/м², например, от приблизительно 5 до 50 мг/м², от приблизительно 7 до 25 мг/м² или приблизительно 10 мг/м². В некоторых вариантах осуществления антитело вводят в течение периода приблизительно 30 мин. Следует отметить, что значения дозировки могут варьироваться в зависимости от типа и тяжести состояния, которое подлежит облегчению. Следует также понимать, что для любого конкретного субъекта конкретные схемы дозирования следует корректировать во времени в соответствии с индивидуальной потребностью и профессиональным решением лица, осуществляющего или контролирующего введение композиций, и что диапазоны дозировок, указанные в данном документе, являются лишь иллюстративными и не предназначены для ограничения объема или практического применения заявленной композиции.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут содержать "терапевтически эффективное количество" или "профилактически эффективное количество" молекулы антитела по настоящему изобретению. "Терапевтически эффективное количество" относится к количеству, эффективному в дозах и в течение периодов времени, необходимых для достижения требуемого терапевтического результата. Терапевтически эффективное количество модифицированного антитела или фрагмента антитела может варьироваться в соответствии с такими факторами, как стадия заболевания, возраст, пол и вес индивидуума, и способностью антитела и части антитела вызывать необходимый ответ у индивидуума. Терапевтически эффективное количество также представляет собой такое, при котором благоприятные эффекты превосходят любые токсичные или пагубные эффекты молекулы антитела. "Терапевтически эффективная доза" предпочтительно обеспечивает ингибирование измеряемого параметра на по меньшей мере приблизительно 20%, более предпочтительно на по меньшей мере приблизительно 40%, еще более предпочтительно на по меньшей мере приблизительно 60% и еще более предпочтительно на по меньшей мере приблизительно 80% по сравнению с субъектами, не подвергавшимися лечению. Измеряемым параметром может быть, например, скорость роста опухоли или скорость роста патогена. Способность молекулы антитела ингибировать измеряемый параметр может быть оценена в системе, представляющей собой животную модель, обеспечивающей возможность прогнозирования эффективности при соответствующем заболевании человека. В качестве альтернативы это свойство композиции можно оценить, исследуя способность соединения к ингибированию, например, ингибированию в анализах in vitro, известных специалисту-практику.

"Профилактически эффективное количество" относится к количеству, эффективному в дозах и в течение периодов времени, необходимых для достижения требуемого профилактического результата. Как правило, поскольку профилактическую дозу применяют у субъектов до возникновения заболевания или на более ранней его стадии, то профилактически эффективное количество будет меньше, чем терапевтически эффективное количество.

Также в объем настоящего изобретения входит набор, содержащий молекулу антитела, описанную в данном документе. Набор может содержать один или несколько других элементов, в том числе инструкции по применению; другие реагенты, например, метку, терапевтическое средство или средство, пригодное для хелатирования или иного объединения, антитело к метке или терапевтическому средству или радиозащитную композицию; устройства или другие материалы для подготовки молекулы антитела к введению; фармацевтически приемлемые носители; и устройства или другие материалы для введения субъекту.

Пути применения молекул антитела к CD73

Молекулы антител к CD73, раскрытые в данном документе, имеют диагностические, а также терапевтические и профилактические свойства in vitro и in vivo. Например, данные молекулы можно вводить в клетки в культуре in vitro или ex vivo или субъекту, например, субъекту, представляющему собой человека, для лечения, предупреждения и/или диагностики различных нарушений, таких как виды рака и инфекционные нарушения.

Соответственно, в одном аспекте настоящее изобретение предусматривает способ модификации иммунного ответа у субъекта, включающий введение субъекту молекулы антитела, описанной в данном документе, так что иммунный ответ у субъекта модифицируется. В одном варианте осуществления иммунный ответ усиливается, стимулируется или регулируется с повышением. В одном варианте осуществления молекулы антитела обеспечивают усиление иммунного ответа у субъекта посредством блокады CD73.

Используемый в данном документе термин "субъект" предназначен для обозначения человека и животных, отличных от человека. В одном варианте осуществления субъект является субъектом, представляющим собой человека, например, пациентом-человеком, имеющим нарушение или состояние, характеризующееся аномальным функционированием CD73. Термин "животные, отличные от человека" включает млекопитающих и отличных от млекопитающих животных, таких как приматы, отличные от человека. В одном варианте осуществления субъектом является человек. В одном варианте осуществления субъект представляет собой пациента-человека, нуждающегося в усилении иммунного ответа. В одном варианте осуществления субъект страдает иммунной недостаточностью, например, субъект подвергается или подвергся лечению с помощью химиотерапии и/или лучевой терапии. В качестве альтернативы или в комбинации с этим субъект страдает иммунной недостаточностью или подвержен риску ее возникновения в результате инфекции. Способы и композиции, описанные в данном документе, подходят для лечения пациентов-людей, имеющих нарушение, которое можно лечить путем усиления опосредованного Т-клетками иммунного ответа. Например, способы и композиции, описанные в данном документе, могут усиливать ряд иммунных активностей. В одном варианте осуществления субъект имеет повышенное количество или активность опухоль-инфильтрующих Т-лимфоцитов (TIL).

Пути терапевтического применения

Рак

В одном аспекте настоящее изобретение относится к лечению субъекта in vivo с применением молекулы антитела к CD73, благодаря чему ингибируется или уменьшается рост раковых опухолей. Антитело к CD73 можно применять в отдельности для ингибирования роста раковых опухолей. В качестве альтернативы, антитело к CD73 можно применять в комбинации с одним или несколькими из стандартного лечения (например, при видах рака), другой молекулы антитела, иммуномодулятора (например, активатора костимулирующей молекулы или ингибитора коингибирующей молекулы); вакцины, например, терапевтической противораковой вакцины; или других форм клеточной терапии, как описано ниже.

Соответственно, в одном варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает способ подавления роста опухолевых клеток у субъекта, который предусматривает введение субъекту терапевтически эффективного количества молекулы антитела к CD73, раскрытой в данном документе.

В одном варианте осуществления способы являются подходящими для лечения рака in vivo. Для достижения антигенспецифического усиления иммунитета молекулу антитела к CD73 можно вводить вместе с представляющим интерес антигеном. Когда антитела к CD73 вводят в комбинации с одним или более средствами, комбинацию можно вводить в любом прядке или одновременно.

Типы рака

В другом аспекте предусмотрен способ лечения субъекта, например, уменьшения интенсивности или облегчения гиперпролиферативного состояния или нарушения (например, рака), например, солидной опухоли, гематологического рака, опухоли мягких тканей или метастатического поражения у субъекта. Способ предусматривает введение субъекту одной или нескольких молекул антитела к CD73, описанных в данном документе, отдельно или в комбинации с другими средствами или терапевтическими способами.

Используемый в данном документе термин "рак" подразумевается как включающий все типы злокачественных образований или онкогенных процессов, метастатических тканей или злокачественно трансформированных клеток, тканей или органов независимо от гистопатологического типа или стадии инвазивности. Примеры злокачественных нарушений включают без ограничения солидные опухоли, гематологические виды рака, опухоли мягких тканей и метастатические поражения. Примеры солидных опухолей включают злокачественные новообразования, например, формы саркомы и карциномы (включая формы аденокарциномы и плоскоклеточной карциномы), различных систем органов, такие как злокачественные новообразования, поражающие печень, легкое, молочную железу, лимфоидную ткань, желудочно-кишечный тракт (например, толстую кишку), мочеполовой тракт (например, клетки почки, уротелия), предстательную железу и глотку. Формы аденокарциномы включают злокачественные новообразования, такие как большинство форм рака толстой кишки, рак прямой кишки, почечно-клеточная карцинома, рак печени, немелкоклеточная карцинома легкого, рак тонкого кишечника и рак пищевода. Формы плоскоклеточной карциномы включают злокачественные новообразования, например, в легком, пищеводе, коже, области головы и шеи, полости рта, анальном отверстии и шейке матки. В одном варианте осуществления рак представляет собой меланому, например, меланому на поздней стадии. Метастатические поражения вышеупомянутых форм рака также можно лечить или предупреждать с применением способов и композиций по настоящему изобретению.

Иллюстративные онкозаболевания, рост которых можно подавлять с применением молекул антитела, раскрытых в данном документе, включают виды рака, как правило, отвечающие на иммунотерапию. Неограничивающие примеры предпочтительных видов рака для лечения включают меланому (например, метастатическую злокачественную меланому), рак почки (например, светлоклеточную карциному), рак предстательной железы (например, гормонально-рефрактерную аденокарциному предстательной железы), рак молочной железы, рак толстой кишки и рак легкого (например, немелкоклеточный рак легкого). Дополнительно рефрактерные или рецидивирующие злокачественные опухоли можно лечить с помощью молекул антитела, описанных в данном документе.

Примеры других видов рака, которые можно лечить, включают рак костей, рак поджелудочной железы, рак кожи, рак головы или шеи, кожную или внутриглазную злокачественную меланому, рак матки, рак яичника, рак прямой кишки, рак анального канала, рак желудка и пищевода, рак желудка, рак яичка, рак матки, карциному фаллопиевых труб, карциному эндометрия, карциному шейки матки, карциному влагалища, карциному вульвы, рак из клеток Меркеля, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, рак пищевода, рак тонкого кишечника, рак эндокринной системы, рак щитовидной железы, рак паращитовидной железы, рак надпочечника, саркому мягких тканей, рак уретры, рак полового члена, хроническую или острую формы лейкоза, включая острый миелоидный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз, острый лимфобластный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, солидные опухоли детского возраста, лимфоцитарную лимфому, рак мочевого пузыря, множественную миелому, миелодиспластические синдромы, рак почки или мочеточника, карциному почечной лоханки, неоплазию центральной нервной системы (ЦНС), первичную лимфому ЦНС, ангиогенез опухоли, опухоль спинного мозга, глиому ствола головного мозга, аденому гипофиза, саркому Капоши, эпидермоидный рак, плоскоклеточный рак, T-клеточную лимфому, виды рака, вызванные влиянием окружающей среды, включая виды рака, вызванные влиянием асбеста (например, мезотелиома), и комбинации указанных видов рака.

В некоторых вариантах осуществления средства терапии, представленные в данном документе, можно применять для лечения пациента, у которого имеется (или который идентифицирован как имеющий) рак, связанный с инфекцией, например, вирусной или бактериальной инфекцией. Иллюстративные виды рака включают рак шейки матки, рак анального канала, HPV-ассоциированный плоскоклеточный рак головы и шеи, HPV-ассоциированные папилломы пищевода, HHV6-ассоциированные лимфомы, EBV-ассоциированные виды лимфомы (в том числе лимфома Беркитта), MALT-лимфома ЖКТ, другие виды MALT-лимфомы, связанные с инфекцией, HCC и саркому Капоши.

В других вариантах осуществления рак представляет собой гематологическое злокачественное новообразование или рак, включающий без ограничения лейкоз или лимфому. Например, молекулу антитела к CD73 можно применять для лечения видов рака и злокачественных новообразований, включая без ограничения, например, виды острого лейкоза, включая без ограничения, например, B-клеточный острый лимфоидный лейкоз ("BALL"), T-клеточный острый лимфоидный лейкоз ("TALL"), острый лимфоидный лейкоз (ALL); один или несколько видов хронического лейкоза, включая без ограничения, например, хронический миелолейкоз (CML), хронический лимфолейкоз (CLL); дополнительные гематологические виды рака или гематологические состояния, включая без ограничения, например, B-клеточный пролимфоцитарный лейкоз, бластное плазмоцитоидное дендритное клеточное новообразование, лимфому Беркитта, диффузную B-крупноклеточную лимфому, фолликулярную лимфому, лейкоз ворсистых клеток, мелкоклеточную или крупноклеточную фолликулярную лимфому, злокачественные лимфопролиферативные состояния, MALT-лимфому, лимфому из клеток мантийной зоны, лимфому маргинальной зоны, множественную миелому, миелодисплазию и миелодиспластический синдром, неходжкинскую лимфому, плазмобластную лимфому, плазмоцитоидное дендритное клеточное новообразование, макроглобулинемию Вальденстрема и "предлейкоз", которые представляют собой разнообразную совокупность гематологических состояний, объединенных неэффективной выработкой (или дисплазией) миелоидных клеток крови, и т. п.

В одном варианте осуществления рак выбран из рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого (NSCLC) (например, NSCLC с плоскоклеточной и/или неплоскоклеточной гистологией или аденокарциномы NSCLC)), меланомы (например, меланомы на поздней стадии), рака почки (например, почечно-клеточной карциномы, например, светлоклеточной почечно-клеточной карциномы), рака печени, миеломы (например, множественной миеломы), рака предстательной железы, рака молочной железы (например, рака молочной железы, при котором не экспрессируются один, два или все из рецептора эстрогена, рецептора прогестерона или Her2/neu, например, трижды негативного рака молочной железы), колоректального рака (колоректального рака с микросателлитной стабильностью (MSS)), рака яичника, рака поджелудочной железы, рака головы и шеи (например, плоскоклеточной карциномы головы и шеи (HNSCC), рака анального канала, рака желудка и пищевода, рака щитовидной железы, рака шейки матки, лимфопролиферативного заболевания (например, посттрансплантационного лимфопролиферативного заболевания) или гемобластоза, T-клеточной лимфомы, неходжкинской лимфомы или лейкоза (например, миелоидного лейкоза).

В одном варианте осуществления рак выбран из рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого), рака поджелудочной железы (например, аденокарциномы протоков поджелудочной железы), рака молочной железы (например, трижды негативного рака молочной железы), меланомы, рака головы и шеи (например, плоскоклеточного рака головы и шеи), колоректального рака (например, колоректального рака с микросателлитной стабильностью (MSS)), рака яичника или рака почки (например, почечно-клеточной карциномы).

В одном варианте осуществления рак выбран из рака мочевого пузыря, лейкоза, лимфомы, глиомы, глиобластомы, рака яичника, рака щитовидной железы, рака пищевода, рака предстательной железы, рака матки/шейки матки, рака яичка, рака пищевода, рака желудочно-кишечного тракта, рака толстой кишки, рака почки, рака желудка, рака половых клеток, рака кости, рака печени, рака кожи, новообразования центральной нервной системы, миеломы, саркомы и ассоциированного с вирусом рака.

Комбинация молекул антитела к CD73

Молекулы антитела к CD73 можно применять в комбинации с другими средствами терапии. Например, комбинированная терапия может включать композицию по настоящему изобретению, совместно составленную и/или вводимую вместе с одним или несколькими дополнительными терапевтическими средствами, например, одним или несколькими противораковыми средствами, цитотоксическими или цитостатическими средствами, гормональным лечением, вакцинами и/или другими средствами иммунотерапии. В других вариантах осуществления молекулы антитела вводят в комбинации с другими методами терапевтического лечения, включая хирургическое вмешательство, облучение, криохирургию и/или термотерапию. В таких средствах комбинированной терапии можно преимущественно применять более низкие дозы вводимых терапевтических средств, таким образом избегая возможных токсических эффектов или осложнений, связанных с различными средствами монотерапии.

Термин "в комбинации с" не предназначен для обозначения того, что терапия или терапевтические средства должны быть введены в одно и то же время и/или составлены для доставки вместе, хотя данные способы доставки находятся в пределах объема, описанного в данном документе. Молекулы антитела к CD73 можно вводить одновременно с одним или несколькими дополнительными средствами терапии или терапевтическими средствами, до или после них. Молекула антитела к CD73 и другое средство или терапевтический протокол можно вводить в любом порядке. Как правило, каждое средство будет вводиться в дозе и/или по временному графику, которые определены для данного средства. Также следует понимать, что дополнительное терапевтическое средство, применяемое в данной комбинации, можно вводить совместно в одной композиции или вводить по отдельности в разных композициях. В целом, ожидается, что дополнительные терапевтические средства, применяемые в комбинации, будут применяться при уровнях, которые не превышают уровни, при которых они применяются по отдельности. В некоторых вариантах осуществления уровни, используемые в комбинации, будут ниже уровней при использовании по отдельности.

Иллюстративные антагонисты аденозиновых рецепторов A2A

В определенных вариантах осуществления молекулы антитела к CD73, описанные в данном документе, вводят в комбинации с антагонистом аденозинового рецептора A2A (A2AR). Иллюстративные антагонисты A2AR включают, например, PBF509 (Palobiofarma/Novartis), CPI444/V81444 (Corvus/Genentech), AZD4635/HTL-1071 (AstraZeneca/Heptares), випаденант (Redox/Juno), GBV-2034 (Globav) (Globavir), AB928 (Arcus Biosciences), теофиллин, истрадефиллин (Kyowa Hakko Kogyo), тозаденант/SYN-115 (Acorda), KW-6356 (Kyowa Hakko Kogyo), ST-4206 (Leadiant Biosciences) и преладенант/SCH 420814 (Merck/Schering).

В определенных вариантах осуществления антагонист A2AR представляет собой PBF509. PBF509 и другие антагонисты A2AR раскрыты в US 8796284 и WO 2017/025918, включенных в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. PBF509 относится к 5-бром-2,6-ди-(1H-пиразол-1-ил)пиримидин-4-амину со следующей структурой:

В определенных вариантах осуществления антагонист A2AR представляет собой CPI444/V81444. CPI-444 и другие антагонисты A2AR раскрыты в WO 2009/156737, включенной в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. В определенных вариантах осуществления антагонист A2AR представляет собой (S)-7-(5-метилфуран-2-ил)-3-((6-(((тетрагидрофуран-3-ил)окси)метил)пиридин-2-ил)метил)-3H[1,2,3]триазоло[4,5-d]пиримидин-5-амин. В определенных вариантах осуществления антагонист A2AR представляет собой (R)-7-(5-метилфуран-2-ил)-3-((6-(((тетрагидрофуран-3-ил)окси)метил)пиридин-2-ил)метил)-3H[1,2,3]триазоло[4,5-d]пиримидин-5-амин или его рацемат. В определенных вариантах осуществления антагонист A2AR представляет собой 7-(5-метилфуран-2-ил)-3-((6-(((тетрагидрофуран-3-ил)окси)метил)пиридин-2-ил)метил)-3H[1,2,3]триазоло[4,5-d]пиримидин-5-амин. В определенных вариантах антагонист A2AR имеет следующую структуру:

В определенных вариантах осуществления антагонист A2AR представляет собой AZD4635/HTL-1071. Антагонисты A2AR раскрыты в WO 2011/095625, включенной в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. В определенных вариантах осуществления антагонист A2AR представляет собой 6-(2-хлор-6-метилпиридин-4-ил)-5-(4-фторфенил)-1,2,4-триазин-3-амин. В определенных вариантах антагонист A2AR имеет следующую структуру:

В определенных вариантах осуществления антагонист A2AR представляет собой ST-4206 (Leadiant Biosciences). В определенных вариантах осуществления антагонист A2AR представляет собой антагонист A2AR, описанный в патенте США № 9331997, полностью включенном в настоящий документ посредством ссылки. В определенных вариантах осуществления антагонист A2AR имеет следующую структуру:

В определенных вариантах осуществления антагонист A2AR представляет собой антагонист A2AR, описанный в US8114845, US9029393, US20170015758 или US20160129108, полностью включенных в настоящий документ посредством ссылки.

В определенных вариантах осуществления антагонист A2AR представляет собой истрадефиллин (регистрационный номер CAS: 155270-99-8). Истрадефиллин также известен как KW-6002 или 8-[(E)-2-(3,4-диметоксифенил)винил]-1,3-диэтил-7-метил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион. Истрадефиллин раскрыт, например, в LeWitt et al. (2008) Annals of Neurology 63 (3): 295-302).

В определенных вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой тозаденант (Biotie). Тозаденант также известен как SYN115 или 4-гидрокси-N-(4-метокси-7-морфолин-4-ил-1,3-бензотиазол-2-ил)-4-метилпиперидин-1-карбоксамид. Тозаденант блокирует действие эндогенного аденозина на рецепторы А2а, что приводит к усилению действия дофамина на рецептор D2 и ингибированию действия глутамата на рецептор mGluR5. В некоторых вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой преладенант (регистрационный номер CAS: 377727-87-2). Преладенант также известен как SCH 420814 или 2-(2-фуранил)-7-[2-[4-[4-(2-метоксиэтокси)фенил]-1-пиперазинил]этил]7H-пиразоло[4,3-е][1,2,4]триазоло[1,5-с]пиримидин-5-амин. Преладенант был разработан как лекарственное средство, действующее как мощный и избирательный антагонист аденозинового рецептора А2А.

В определенных вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой випаденан. Випаденан также известен как BIIB014, V2006 или 3-[(4-амино-3-метилфенил)метил]-7-(фуран-2-ил)триазоло[4,5-d]пиримидин-5-амин.

Другие иллюстративные антагонисты A2aR включают, например, ATL-444, MSX-3, SCH-58261, SCH-412,348, SCH-442,416, VER-6623, VER-6947, VER-7835, CGS-15943 или ZM-241,385.

В некоторых вариантах осуществления антагонист A2aR представляет собой антагонист пути с участием A2aR (например, ингибитор CD-73, например, антитело к CD73), представляет собой MEDI9447. MEDI9447 представляет собой моноклональное антитело, специфичное к CD73. Нацеливание на внеклеточное продуцирование аденозина посредством CD73 может снижать иммуносупрессивное действие аденозина. Сообщалось, что MEDI9447 обладает рядом параметров активности, например, ингибированием активности эктонуклеотидазы CD73, ослаблением АМР-опосредованной супрессии лимфоцитов и подавлением роста сингенной опухоли. MEDI9447 может управлять изменениями как в миелоидных, так и лимфоидных инфильтрирующих популяциях лейкоцитов в микроокружении опухоли. Эти изменения включают, например, увеличение показателей эффекторных клеток CD8 и активированных макрофагов и уменьшение пропорций клеток-супрессоров миелоидного происхождения (MDSC) и регуляторных Т-лимфоцитов.

Иллюстративные ингибиторы PD-1

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с ингибитором PD-1. Ингибитор PD-1 может представлять собой антитело, его антигенсвязывающий фрагмент, иммуноадгезин, слитый белок или олигопептид. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-1 выбран из PDR001 (Novartis), ниволумаба (Bristol-Myers Squibb), пембролизумаба (Merck & Co), пидилизумаба (CureTech), MEDI0680 (Medimmune), REGN2810 (Regeneron), TSR-042 (Tesaro), PF-06801591 (Pfizer), BGB-A317 (Beigene), BGB-108 (Beigene), INCSHR1210 (Incyte) или AMP-224 (Amplimmune).

Иллюстративные молекулы антитела к PD-1

В одном варианте осуществления ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела к PD-1. В одном варианте осуществления ингибитор PD-1 представляет собой молекулу антитела к PD-1, описанную в US 2015/0210769, опубликованном 30 июля 2015 г. под названием "Antibody Molecules to PD-1 and Uses Thereof", включенном посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть определяющих комплементарность областей (CDR) (или в совокупности все CDR) из вариабельной области тяжелой и легкой цепей, содержащей аминокислотную последовательность, показанную в таблице 5 (например, из последовательностей вариабельной области тяжелой и легкой цепей BAP049-клона-E или BAP049-клона-B, раскрытых в таблице 5), или кодируемую нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 5. В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии со схемой нумерации по Kabat (например, как изложено в таблице 5). В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии со схемой нумерации по Chothia (например, как изложено в таблице 5). В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии с комбинированной схемой нумерации CDR как по Kabat, так и по Chothia (например, как изложено в таблице 5). В одном варианте осуществления CDR1 VH согласно комбинированной схеме нумерации CDR по Kabat и Chothia содержит аминокислотную последовательность GYTFTTYWMH (SEQ ID NO: 541). В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или в совокупности все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен (например, консервативных аминокислотных замен) или делеций по сравнению с аминокислотной последовательностью, показанной в таблице 5, или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 5.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 501, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 502 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 503; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 510, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 511 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 512, каждая из которых раскрыта в таблице 5.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, содержащую VHCDR1, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 524, VHCDR2, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 525, и VHCDR3, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 526; и VL, содержащую VLCDR1, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 529, VLCDR2, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 530, и VLCDR3, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 531, каждая из которых раскрыта в таблице 5.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 506, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 506. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 520, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 520. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 516, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 516. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 506, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 520. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 506, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 516.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 507, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 507. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 521 или 517, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 521 или 517. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 507, и VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 521 или 517.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 508, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 508. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 522, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 522. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 518, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 518. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 508, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 522. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 508, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 518.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 509, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 509. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 523 или 519, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 523 или 519. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 509, и легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 523 или 519.

Молекулы антител, описанные в данном документе, можно получать с использованием векторов, клеток-хозяев и способов, описанных в US 2015/0210769, включенном посредством ссылки во всей своей полноте.

Таблица 5. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности иллюстративных молекул антитела к PD-1

HC BAP049-клон-B SEQ ID NO: 501 (Kabat) HCDR1 TYWMH SEQ ID NO: 502 (Kabat) HCDR2 NIYPGTGGSNFDEKFKN SEQ ID NO: 503 (Kabat) HCDR3 WTTGTGAY SEQ ID NO: 504 (Chothia) HCDR1 GYTFTTY SEQ ID NO: 505 (Chothia) HCDR2 YPGTGG SEQ ID NO: 503 (Chothia) HCDR3 WTTGTGAY SEQ ID NO: 506 VH EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTTYWMHWVRQATGQGLEWMGNIYPGTGGSNFDEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRWTTGTGAYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 507 ДНК, кодирующая VH Gaggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaagcccggcgagtcactgagaattagctgtaaaggttcaggctacaccttcactacctactggatgcactgggtccgccaggctaccggtcaaggcctcgagtggatgggtaatatctaccccggcaccggcggctctaacttcgacgagaagtttaagaatagagtgactatcaccgccgataagtctactagcaccgcctatatggaactgtctagcctgagatcagaggacaccgccgtctactactgcactaggtggactaccggcacaggcgcctactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagc SEQ ID NO: 508 Тяжелая цепь EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTTYWMHWVRQATGQGLEWMGNIYPGTGGSNFDEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRWTTGTGAYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 509 ДНК, кодирующая тяжелую цепь gaggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaagcccggcgagtcactgagaattagctgtaaaggttcaggctacaccttcactacctactggatgcactgggtccgccaggctaccggtcaaggcctcgagtggatgggtaatatctaccccggcaccggcggctctaacttcgacgagaagtttaagaatagagtgactatcaccgccgataagtctactagcaccgcctatatggaactgtctagcctgagatcagaggacaccgccgtctactactgcactaggtggactaccggcacaggcgcctactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagcgctagcactaagggcccgtccgtgttccccctggcaccttgtagccggagcactagcgaatccaccgctgccctcggctgcctggtcaaggattacttcccggagcccgtgaccgtgtcctggaacagcggagccctgacctccggagtgcacaccttccccgctgtgctgcagagctccgggctgtactcgctgtcgtcggtggtcacggtgccttcatctagcctgggtaccaagacctacacttgcaacgtggaccacaagccttccaacactaaggtggacaagcgcgtcgaatcgaagtacggcccaccgtgcccgccttgtcccgcgccggagttcctcggcggtccctcggtctttctgttcccaccgaagcccaaggacactttgatgatttcccgcacccctgaagtgacatgcgtggtcgtggacgtgtcacaggaagatccggaggtgcagttcaattggtacgtggatggcgtcgaggtgcacaacgccaaaaccaagccgagggaggagcagttcaactccacttaccgcgtcgtgtccgtgctgacggtgctgcatcaggactggctgaacgggaaggagtacaagtgcaaagtgtccaacaagggacttcctagctcaatcgaaaagaccatctcgaaagccaagggacagccccgggaaccccaagtgtataccctgccaccgagccaggaagaaatgactaagaaccaagtctcattgacttgccttgtgaagggcttctacccatcggatatcgccgtggaatgggagtccaacggccagccggaaaacaactacaagaccacccctccggtgctggactcagacggatccttcttcctctactcgcggctgaccgtggataagagcagatggcaggagggaaatgtgttcagctgttctgtgatgcatgaagccctgcacaaccactacactcagaagtccctgtccctctccctggga LC BAP049-клон-B SEQ ID NO: 510 (Kabat) LCDR1 KSSQSLLDSGNQKNFLT SEQ ID NO: 511 (Kabat) LCDR2 WASTRES SEQ ID NO: 512 (Kabat) LCDR3 QNDYSYPYT SEQ ID NO: 513 (Chothia) LCDR1 SQSLLDSGNQKNF SEQ ID NO: 514 (Chothia) LCDR2 WAS SEQ ID NO: 515 (Chothia) LCDR3 DYSYPY SEQ ID NO: 516 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGKAPKLLIYWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 517 ДНК, кодирующая VL Gagatcgtcctgactcagtcacccgctaccctgagcctgagccctggcgagcgggctacactgagctgtaaatctagtcagtcactgctggatagcggtaatcagaagaacttcctgacctggtatcagcagaagcccggtaaagcccctaagctgctgatctactgggcctctactagagaatcaggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgacttcaccttcactatctctagcctgcagcccgaggatatcgctacctactactgtcagaacgactatagctacccctacaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaag SEQ ID NO: 518 Легкая цепь EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGKAPKLLIYWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 519 ДНК, кодирующая легкую цепь Gagatcgtcctgactcagtcacccgctaccctgagcctgagccctggcgagcgggctacactgagctgtaaatctagtcagtcactgctggatagcggtaatcagaagaacttcctgacctggtatcagcagaagcccggtaaagcccctaagctgctgatctactgggcctctactagagaatcaggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgacttcaccttcactatctctagcctgcagcccgaggatatcgctacctactactgtcagaacgactatagctacccctacaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaagcgtacggtggccgctcccagcgtgttcatcttcccccccagcgacgagcagctgaagagcggcaccgccagcgtggtgtgcctgctgaacaacttctacccccgggaggccaaggtgcagtggaaggtggacaacgccctgcagagcggcaacagccaggagagcgtcaccgagcaggacagcaaggactccacctacagcctgagcagcaccctgaccctgagcaaggccgactacgagaagcataaggtgtacgcctgcgaggtgacccaccagggcctgtccagccccgtgaccaagagcttcaacaggggcgagtgc HC BAP049-клон-E SEQ ID NO: 501 (Kabat) HCDR1 TYWMH SEQ ID NO: 502 (Kabat) HCDR2 NIYPGTGGSNFDEKFKN SEQ ID NO: 503 (Kabat) HCDR3 WTTGTGAY SEQ ID NO: 504 (Chothia) HCDR1 GYTFTTY SEQ ID NO: 505 (Chothia) HCDR2 YPGTGG SEQ ID NO: 503 (Chothia) HCDR3 WTTGTGAY SEQ ID NO: 506 VH EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTTYWMHWVRQATGQGLEWMGNIYPGTGGSNFDEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRWTTGTGAYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 507 ДНК, кодирующая VH Gaggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaagcccggcgagtcactgagaattagctgtaaaggttcaggctacaccttcactacctactggatgcactgggtccgccaggctaccggtcaaggcctcgagtggatgggtaatatctaccccggcaccggcggctctaacttcgacgagaagtttaagaatagagtgactatcaccgccgataagtctactagcaccgcctatatggaactgtctagcctgagatcagaggacaccgccgtctactactgcactaggtggactaccggcacaggcgcctactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagc SEQ ID NO: 508 Тяжелая цепь EVQLVQSGAEVKKPGESLRISCKGSGYTFTTYWMHWVRQATGQGLEWMGNIYPGTGGSNFDEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCTRWTTGTGAYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 509 ДНК, кодирующая тяжелую цепь gaggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaagcccggcgagtcactgagaattagctgtaaaggttcaggctacaccttcactacctactggatgcactgggtccgccaggctaccggtcaaggcctcgagtggatgggtaatatctaccccggcaccggcggctctaacttcgacgagaagtttaagaatagagtgactatcaccgccgataagtctactagcaccgcctatatggaactgtctagcctgagatcagaggacaccgccgtctactactgcactaggtggactaccggcacaggcgcctactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagcgctagcactaagggcccgtccgtgttccccctggcaccttgtagccggagcactagcgaatccaccgctgccctcggctgcctggtcaaggattacttcccggagcccgtgaccgtgtcctggaacagcggagccctgacctccggagtgcacaccttccccgctgtgctgcagagctccgggctgtactcgctgtcgtcggtggtcacggtgccttcatctagcctgggtaccaagacctacacttgcaacgtggaccacaagccttccaacactaaggtggacaagcgcgtcgaatcgaagtacggcccaccgtgcccgccttgtcccgcgccggagttcctcggcggtccctcggtctttctgttcccaccgaagcccaaggacactttgatgatttcccgcacccctgaagtgacatgcgtggtcgtggacgtgtcacaggaagatccggaggtgcagttcaattggtacgtggatggcgtcgaggtgcacaacgccaaaaccaagccgagggaggagcagttcaactccacttaccgcgtcgtgtccgtgctgacggtgctgcatcaggactggctgaacgggaaggagtacaagtgcaaagtgtccaacaagggacttcctagctcaatcgaaaagaccatctcgaaagccaagggacagccccgggaaccccaagtgtataccctgccaccgagccaggaagaaatgactaagaaccaagtctcattgacttgccttgtgaagggcttctacccatcggatatcgccgtggaatgggagtccaacggccagccggaaaacaactacaagaccacccctccggtgctggactcagacggatccttcttcctctactcgcggctgaccgtggataagagcagatggcaggagggaaatgtgttcagctgttctgtgatgcatgaagccctgcacaaccactacactcagaagtccctgtccctctccctggga LC BAP049-клон-E SEQ ID NO: 510 (Kabat) LCDR1 KSSQSLLDSGNQKNFLT SEQ ID NO: 511 (Kabat) LCDR2 WASTRES SEQ ID NO: 512 (Kabat) LCDR3 QNDYSYPYT SEQ ID NO: 513 (Chothia) LCDR1 SQSLLDSGNQKNF SEQ ID NO: 514 (Chothia) LCDR2 WAS SEQ ID NO: 515 (Chothia) LCDR3 DYSYPY SEQ ID NO: 520 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGQAPRLLIYWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 521 ДНК, кодирующая VL Gagatcgtcctgactcagtcacccgctaccctgagcctgagccctggcgagcgggctacactgagctgtaaatctagtcagtcactgctggatagcggtaatcagaagaacttcctgacctggtatcagcagaagcccggtcaagcccctagactgctgatctactgggcctctactagagaatcaggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgacttcaccttcactatctctagcctggaagccgaggacgccgctacctactactgtcagaacgactatagctacccctacaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaag SEQ ID NO: 522 Легкая цепь EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCKSSQSLLDSGNQKNFLTWYQQKPGQAPRLLIYWASTRESGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQNDYSYPYTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 523 ДНК, кодирующая легкую цепь Gagatcgtcctgactcagtcacccgctaccctgagcctgagccctggcgagcgggctacactgagctgtaaatctagtcagtcactgctggatagcggtaatcagaagaacttcctgacctggtatcagcagaagcccggtcaagcccctagactgctgatctactgggcctctactagagaatcaggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgacttcaccttcactatctctagcctggaagccgaggacgccgctacctactactgtcagaacgactatagctacccctacaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaagcgtacggtggccgctcccagcgtgttcatcttcccccccagcgacgagcagctgaagagcggcaccgccagcgtggtgtgcctgctgaacaacttctacccccgggaggccaaggtgcagtggaaggtggacaacgccctgcagagcggcaacagccaggagagcgtcaccgagcaggacagcaaggactccacctacagcctgagcagcaccctgaccctgagcaaggccgactacgagaagcataaggtgtacgcctgcgaggtgacccaccagggcctgtccagccccgtgaccaagagcttcaacaggggcgagtgc HC BAP049-клон-B SEQ ID NO: 524 (Kabat) HCDR1 ACCTACTGGATGCAC SEQ ID NO: 525 (Kabat) HCDR2 AATATCTACCCCGGCACCGGCGGCTCTAACTTCGACGAGAAGTTTAAGAAT SEQ ID NO: 526 (Kabat) HCDR3 TGGACTACCGGCACAGGCGCCTAC SEQ ID NO: 527 (Chothia) HCDR1 GGCTACACCTTCACTACCTAC SEQ ID NO: 528 (Chothia) HCDR2 TACCCCGGCACCGGCGGC SEQ ID NO: 526 (Chothia) HCDR3 TGGACTACCGGCACAGGCGCCTAC LC BAP049-клон-B SEQ ID NO: 529 (Kabat) LCDR1 AAATCTAGTCAGTCACTGCTGGATAGCGGTAATCAGAAGAACTTCCTGACC SEQ ID NO: 530 (Kabat) LCDR2 TGGGCCTCTACTAGAGAATCA SEQ ID NO: 531 (Kabat) LCDR3 CAGAACGACTATAGCTACCCCTACACC SEQ ID NO: 532 (Chothia) LCDR1 AGTCAGTCACTGCTGGATAGCGGTAATCAGAAGAACTTC SEQ ID NO: 533 (Chothia) LCDR2 TGGGCCTCT SEQ ID NO: 534 (Chothia) LCDR3 GACTATAGCTACCCCTAC HC BAP049-клон-E SEQ ID NO: 524 (Kabat) HCDR1 ACCTACTGGATGCAC SEQ ID NO: 525 (Kabat) HCDR2 AATATCTACCCCGGCACCGGCGGCTCTAACTTCGACGAGAAGTTTAAGAAT SEQ ID NO: 526 (Kabat) HCDR3 TGGACTACCGGCACAGGCGCCTAC SEQ ID NO: 527 (Chothia) HCDR1 GGCTACACCTTCACTACCTAC SEQ ID NO: 528 (Chothia) HCDR2 TACCCCGGCACCGGCGGC SEQ ID NO: 526 (Chothia) HCDR3 TGGACTACCGGCACAGGCGCCTAC LC BAP049-клон-E SEQ ID NO: 529 (Kabat) LCDR1 AAATCTAGTCAGTCACTGCTGGATAGCGGTAATCAGAAGAACTTCCTGACC SEQ ID NO: 530 (Kabat) LCDR2 TGGGCCTCTACTAGAGAATCA SEQ ID NO: 531 (Kabat) LCDR3 CAGAACGACTATAGCTACCCCTACACC SEQ ID NO: 532 (Chothia) LCDR1 AGTCAGTCACTGCTGGATAGCGGTAATCAGAAGAACTTC SEQ ID NO: 533 (Chothia) LCDR2 TGGGCCTCT SEQ ID NO: 534 (Chothia) LCDR3 GACTATAGCTACCCCTAC

Другие иллюстративные ингибиторы PD-1

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 представляет собой ниволумаб (Bristol-Myers Squibb), также известный как MDX-1106, MDX-1106-04, ONO-4538, BMS-936558 или OPDIVO®. Ниволумаб (клон 5C4) и другие антитела к PD-1 раскрыты в US 8008449 и WO 2006/121168, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи ниволумаба, например, раскрытые в таблице 6.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 представляет собой пембролизумаб (Merck & Co), также известный как ламбролизумаб, MK-3475, MK03475, SCH-900475 или KEYTRUDA®. Пембролизумаб и другие антитела к PD-1 раскрыты в Hamid, O. et al. (2013) New England Journal of Medicine 369 (2): 134-44, US 8354509 и WO 2009/114335, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи пембролизумаба, например, раскрытые в таблице 6.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 представляет собой пидилизумаб (CureTech), также известный как CT-011. Пидилизумаб и другие антитела к PD-1 раскрыты в Rosenblatt, J. et al. (2011) J Immunotherapy 34(5): 409-18, US 7695715, US 7332582 и US 8686119, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи пидилизумаба, например, раскрытые в таблице 6.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 представляет собой MEDI0680 (Medimmune), также известное как AMP-514. MEDI0680 и другие антитела к PD-1 раскрыты в US 9205148 и WO 2012/145493, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи MEDI0680.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 представляет собой REGN2810 (Regeneron). В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи REGN2810.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 представляет собой PF-06801591 (Pfizer). В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи PF-06801591.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 представляет собой BGB-A317 или BGB-108 (Beigene). В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи BGB-A317 или BGB-108.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 представляет собой INCSHR1210 (Incyte), также известное как INCSHR01210 или SHR-1210. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи INCSHR1210.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 представляет собой TSR-042 (Tesaro), также известное как ANB011. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи TSR-042.

Дополнительные известные антитела к PD-1 включают антитела, описанные, например, в WO 2015/112800, WO 2016/092419, WO 2015/085847, WO 2014/179664, WO 2014/194302, WO 2014/209804, WO 2015/200119, US 8735553, US 7488802, US 8927697, US 8993731 и US 9102727, включенных посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления антитело к PD-1 представляет собой антитело, которое конкурирует за связывание с тем же эпитопом на PD-1, что и одно из антител к PD-1, описанных в данном документе, и/или связывает его.

В одном варианте осуществления ингибитор PD-1 представляет собой пептид, который ингибирует сигнальный путь с участием PD-1, например, как описано в US 8907053, включенном посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления ингибитор PD-1 представляет собой иммуноадгезин (например, иммуноадгезин, содержащий внеклеточную или PD-1-связывающую часть PD-L1 или PD-L2, слитую с константным участком (например, Fc-участок последовательности иммуноглобулина)). В одном варианте осуществления ингибитор PD-1 представляет собой AMP-224 (B7-DCIg (Amplimmune), например, раскрытый в WO 2010/027827 и WO 2011/066342, включенных посредством ссылки во всей своей полноте).

Таблица 6. Аминокислотные последовательности других иллюстративных молекул антитела к PD-1

Ниволумаб SEQ ID NO: 535 Тяжелая цепь QVQLVESGGGVVQPGRSLRLDCKASGITFSNSGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSKRYYADSVKGRFTISRDNSKNTLFLQMNSLRAEDTAVYYCATNDDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO: 536 Легкая цепь EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQSSNWPRTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC Пембролизумаб SEQ ID NO: 537 Тяжелая цепь QVQLVQSGVEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYMYWVRQAPGQGLEWMGGINPSNGGTNFNEKFKNRVTLTTDSSTTTAYMELKSLQFDDTAVYYCARRDYRFDMGFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO: 538 Легкая цепь EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKGVSTSGYSYLHWYQQKPGQAPRLLIYLASYLESGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQHSRDLPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC Пидилизумаб SEQ ID NO: 539 Тяжелая цепь QVQLVQSGSELKKPGASVKISCKASGYTFTNYGMNWVRQAPGQGLQWMGWINTDSGESTYAEEFKGRFVFSLDTSVNTAYLQITSLTAEDTGMYFCVRVGYDALDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 540 Легкая цепь EIVLTQSPSSLSASVGDRVTITCSARSSVSYMHWFQQKPGKAPKLWIYRTSNLASGVPSRFSGSGSGTSYCLTINSLQPEDFATYYCQQRSSFPLTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Иллюстративные ингибиторы PD-L1

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с ингибитором PD-L1. Ингибитор PD-L1 может представлять собой антитело, его антигенсвязывающий фрагмент, иммуноадгезин, слитый белок или олигопептид. В некоторых вариантах осуществления ингибитор PD-L1 выбран из FAZ053 (Novartis), атезолизумаба (Genentech/Roche), авелумаба (Merck Serono и Pfizer), дурвалумаба (MedImmune/AstraZeneca) или BMS-936559 (Bristol-Myers Squibb).

Иллюстративные молекулы антитела к PD-L1

В одном варианте осуществления ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела к PD-L1. В одном варианте осуществления ингибитор PD-L1 представляет собой молекулу антитела к PD-L1, раскрытую в US 2016/0108123, опубликованном 21 апреля 2016 г. под названием "Antibody Molecules to PD-L1 and Uses Thereof", включенном посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть определяющих комплементарность областей (CDR) (или в совокупности все CDR) из вариабельной области тяжелой и легкой цепей, содержащей аминокислотную последовательность, показанную в таблице 7 (например, из последовательностей вариабельной области тяжелой и легкой цепей BAP058-клона O или BAP058-клона N, раскрытых в таблице 7), или кодируемую нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 7. В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии со схемой нумерации по Kabat (например, как изложено в таблице 7). В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии со схемой нумерации по Chothia (например, как изложено в таблице 7). В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии с комбинированной схемой нумерации CDR как по Kabat, так и по Chothia (например, как изложено в таблице 7). В одном варианте осуществления CDR1 VH согласно комбинированной схеме нумерации CDR по Kabat и Chothia содержит аминокислотную последовательность GYTFTSYWMY (SEQ ID NO: 647). В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или в совокупности все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен (например, консервативных аминокислотных замен) или делеций по сравнению с аминокислотной последовательностью, показанной в таблице 7, или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 7.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 601, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 602 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 603; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 609, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 610 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 611, каждая из которых раскрыта в таблице 7.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит VH, содержащую VHCDR1, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 628, VHCDR2, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 629, и VHCDR3, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 630; и VL, содержащую VLCDR1, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 633, VLCDR2, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 634, и VLCDR3, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 635, каждая из которых раскрыта в таблице 7.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 606, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 606. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 616, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 616. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 620, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 620. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 624, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 624. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 606, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 616. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 620, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 624.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 607, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 607. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 617, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 617. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 621, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 621. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 625, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 625. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 607, и VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 617. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 621, и VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 625.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 608, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 608. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 618, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 618. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 622, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 622. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 626, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 626. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 608, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 618. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 622, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 626.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 615, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 615. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 619, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 619. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 623, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 623. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 627, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 627. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 615, и легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 619. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 623, и легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 627.

Молекулы антител, описанные в данном документе, можно получать с использованием векторов, клеток-хозяев и способов, описанных в US 2016/0108123, включенном посредством ссылки во всей своей полноте.

Таблица 7. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности иллюстративных молекул антитела к PD-L1

HC BAP058-клон O SEQ ID NO: 601 (Kabat) HCDR1 SYWMY SEQ ID NO: 602 (Kabat) HCDR2 RIDPNSGSTKYNEKFKN SEQ ID NO: 603 (Kabat) HCDR3 DYRKGLYAMDY SEQ ID NO: 604 (Chothia) HCDR1 GYTFTSY SEQ ID NO: 605 (Chothia) HCDR2 DPNSGS SEQ ID NO: 603 (Chothia) HCDR3 DYRKGLYAMDY SEQ ID NO: 606 VH EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWVRQARGQRLEWIGRIDPNSGSTKYNEKFKNRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 607 ДНК, кодирующая VH GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTACCGTGAAGATTAGCTGTAAAGTCTCAGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTCCGACAGGCTAGAGGGCAAAGACTGGAGTGGATCGGTAGAATCGACCCTAATAGCGGCTCTACTAAGTATAACGAGAAGTTTAAGAATAGGTTCACTATTAGTAGGGATAACTCTAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAATAGCCTGAGAGCCGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGACTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTTCA SEQ ID NO: 608 Тяжелая цепь EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWVRQARGQRLEWIGRIDPNSGSTKYNEKFKNRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 615 ДНК, кодирующая тяжелую цепь GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTACCGTGAAGATTAGCTGTAAAGTCTCAGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTCCGACAGGCTAGAGGGCAAAGACTGGAGTGGATCGGTAGAATCGACCCTAATAGCGGCTCTACTAAGTATAACGAGAAGTTTAAGAATAGGTTCACTATTAGTAGGGATAACTCTAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAATAGCCTGAGAGCCGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGACTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTTCAGCTAGCACTAAGGGCCCGTCCGTGTTCCCCCTGGCACCTTGTAGCCGGAGCACTAGCGAATCCACCGCTGCCCTCGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTCCCGGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCTCCGGAGTGCACACCTTCCCCGCTGTGCTGCAGAGCTCCGGGCTGTACTCGCTGTCGTCGGTGGTCACGGTGCCTTCATCTAGCCTGGGTACCAAGACCTACACTTGCAACGTGGACCACAAGCCTTCCAACACTAAGGTGGACAAGCGCGTCGAATCGAAGTACGGCCCACCGTGCCCGCCTTGTCCCGCGCCGGAGTTCCTCGGCGGTCCCTCGGTCTTTCTGTTCCCACCGAAGCCCAAGGACACTTTGATGATTTCCCGCACCCCTGAAGTGACATGCGTGGTCGTGGACGTGTCACAGGAAGATCCGGAGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGATGGCGTCGAGGTGCACAACGCCAAAACCAAGCCGAGGGAGGAGCAGTTCAACTCCACTTACCGCGTCGTGTCCGTGCTGACGGTGCTGCATCAGGACTGGCTGAACGGGAAGGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGACTTCCTAGCTCAATCGAAAAGACCATCTCGAAAGCCAAGGGACAGCCCCGGGAACCCCAAGTGTATACCCTGCCACCGAGCCAGGAAGAAATGACTAAGAACCAAGTCTCATTGACTTGCCTTGTGAAGGGCTTCTACCCATCGGATATCGCCGTGGAATGGGAGTCCAACGGCCAGCCGGAAAACAACTACAAGACCACCCCTCCGGTGCTGGACTCAGACGGATCCTTCTTCCTCTACTCGCGGCTGACCGTGGATAAGAGCAGATGGCAGGAGGGAAATGTGTTCAGCTGTTCTGTGATGCATGAAGCCCTGCACAACCACTACACTCAGAAGTCCCTGTCCCTCTCCCTGGGA LC BAP058-клон O SEQ ID NO: 609 (Kabat) LCDR1 KASQDVGTAVA SEQ ID NO: 610 (Kabat) LCDR2 WASTRHT SEQ ID NO: 611(Kabat) LCDR3 QQYNSYPLT SEQ ID NO: 612 (Chothia) LCDR1 SQDVGTA SEQ ID NO: 613 (Chothia) LCDR2 WAS SEQ ID NO: 614 (Chothia) LCDR3 YNSYPL SEQ ID NO: 616 VL AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYLQKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 617 ДНК, кодирующая VL GCTATTCAGCTGACTCAGTCACCTAGTAGCCTGAGCGCTAGTGTGGGCGATAGAGTGACTATCACCTGTAAAGCCTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCTGCAGAAGCCTGGTCAATCACCTCAGCTGCTGATCTACTGGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCTTCACTATCTCTTCACTGGAAGCCGAGGACGCCGCTACCTACTACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGGTCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAG SEQ ID NO: 618 Легкая цепь AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQDVGTAVAWYLQKPGQSPQLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLEAEDAATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 619 ДНК, кодирующая легкую цепь GCTATTCAGCTGACTCAGTCACCTAGTAGCCTGAGCGCTAGTGTGGGCGATAGAGTGACTATCACCTGTAAAGCCTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCTGCAGAAGCCTGGTCAATCACCTCAGCTGCTGATCTACTGGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCTTCACTATCTCTTCACTGGAAGCCGAGGACGCCGCTACCTACTACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGGTCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC HC BAP058-клон N SEQ ID NO: 601 (Kabat) HCDR1 SYWMY SEQ ID NO: 602 (Kabat) HCDR2 RIDPNSGSTKYNEKFKN SEQ ID NO: 603 (Kabat) HCDR3 DYRKGLYAMDY SEQ ID NO: 604 (Chothia) HCDR1 GYTFTSY SEQ ID NO: 605 (Chothia) HCDR2 DPNSGS SEQ ID NO: 603 (Chothia) HCDR3 DYRKGLYAMDY SEQ ID NO: 620 VH EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWVRQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 621 ДНК, кодирующая VH GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTACCGTGAAGATTAGCTGTAAAGTCTCAGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTCCGACAGGCTACCGGTCAAGGCCTGGAGTGGATGGGTAGAATCGACCCTAATAGCGGCTCTACTAAGTATAACGAGAAGTTTAAGAATAGAGTGACTATCACCGCCGATAAGTCTACTAGCACCGCCTATATGGAACTGTCTAGCCTGAGATCAGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGACTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTTCA SEQ ID NO: 622 Тяжелая цепь EVQLVQSGAEVKKPGATVKISCKVSGYTFTSYWMYWVRQATGQGLEWMGRIDPNSGSTKYNEKFKNRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARDYRKGLYAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 623 ДНК, кодирующая тяжелую цепь GAAGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTACCGTGAAGATTAGCTGTAAAGTCTCAGGCTACACCTTCACTAGCTACTGGATGTACTGGGTCCGACAGGCTACCGGTCAAGGCCTGGAGTGGATGGGTAGAATCGACCCTAATAGCGGCTCTACTAAGTATAACGAGAAGTTTAAGAATAGAGTGACTATCACCGCCGATAAGTCTACTAGCACCGCCTATATGGAACTGTCTAGCCTGAGATCAGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGACTATAGAAAGGGCCTGTACGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTTCAGCTAGCACTAAGGGCCCGTCCGTGTTCCCCCTGGCACCTTGTAGCCGGAGCACTAGCGAATCCACCGCTGCCCTCGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTCCCGGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCTCCGGAGTGCACACCTTCCCCGCTGTGCTGCAGAGCTCCGGGCTGTACTCGCTGTCGTCGGTGGTCACGGTGCCTTCATCTAGCCTGGGTACCAAGACCTACACTTGCAACGTGGACCACAAGCCTTCCAACACTAAGGTGGACAAGCGCGTCGAATCGAAGTACGGCCCACCGTGCCCGCCTTGTCCCGCGCCGGAGTTCCTCGGCGGTCCCTCGGTCTTTCTGTTCCCACCGAAGCCCAAGGACACTTTGATGATTTCCCGCACCCCTGAAGTGACATGCGTGGTCGTGGACGTGTCACAGGAAGATCCGGAGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGATGGCGTCGAGGTGCACAACGCCAAAACCAAGCCGAGGGAGGAGCAGTTCAACTCCACTTACCGCGTCGTGTCCGTGCTGACGGTGCTGCATCAGGACTGGCTGAACGGGAAGGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGACTTCCTAGCTCAATCGAAAAGACCATCTCGAAAGCCAAGGGACAGCCCCGGGAACCCCAAGTGTATACCCTGCCACCGAGCCAGGAAGAAATGACTAAGAACCAAGTCTCATTGACTTGCCTTGTGAAGGGCTTCTACCCATCGGATATCGCCGTGGAATGGGAGTCCAACGGCCAGCCGGAAAACAACTACAAGACCACCCCTCCGGTGCTGGACTCAGACGGATCCTTCTTCCTCTACTCGCGGCTGACCGTGGATAAGAGCAGATGGCAGGAGGGAAATGTGTTCAGCTGTTCTGTGATGCATGAAGCCCTGCACAACCACTACACTCAGAAGTCCCTGTCCCTCTCCCTGGGA LC BAP058-клон N SEQ ID NO: 609 (Kabat) LCDR1 KASQDVGTAVA SEQ ID NO: 610 (Kabat) LCDR2 WASTRHT SEQ ID NO: 611(Kabat) LCDR3 QQYNSYPLT SEQ ID NO: 612 (Chothia) LCDR1 SQDVGTA SEQ ID NO: 613 (Chothia) LCDR2 WAS SEQ ID NO: 614 (Chothia) LCDR3 YNSYPL SEQ ID NO: 624 VL DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQQKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 625 ДНК, кодирующая VL GACGTCGTGATGACTCAGTCACCCCTGAGCCTGCCCGTGACCCTGGGGCAGCCCGCCTCTATTAGCTGTAAAGCCTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCAGGGCAAGCCCCTAGACTGCTGATCTACTGGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGAGTTCACCCTGACTATCTCTTCACTGCAGCCCGACGACTTCGCTACCTACTACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGGTCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAG SEQ ID NO: 626 Легкая цепь DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCKASQDVGTAVAWYQQKPGQAPRLLIYWASTRHTGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYNSYPLTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 627 ДНК, кодирующая легкую цепь GACGTCGTGATGACTCAGTCACCCCTGAGCCTGCCCGTGACCCTGGGGCAGCCCGCCTCTATTAGCTGTAAAGCCTCTCAGGACGTGGGCACCGCCGTGGCCTGGTATCAGCAGAAGCCAGGGCAAGCCCCTAGACTGCTGATCTACTGGGCCTCTACTAGACACACCGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGAGTTCACCCTGACTATCTCTTCACTGCAGCCCGACGACTTCGCTACCTACTACTGTCAGCAGTATAATAGCTACCCCCTGACCTTCGGTCAAGGCACTAAGGTCGAGATTAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC HC BAP058-клон O SEQ ID NO: 628 (Kabat) HCDR1 agctactggatgtac SEQ ID NO: 629 (Kabat) HCDR2 agaatcgaccctaatagcggctctactaagtataacgagaagtttaagaat SEQ ID NO: 630 (Kabat) HCDR3 gactatagaaagggcctgtacgctatggactac SEQ ID NO: 631 (Chothia) HCDR1 ggctacaccttcactagctac SEQ ID NO: 632 (Chothia) HCDR2 gaccctaatagcggctct SEQ ID NO: 630 (Chothia) HCDR3 gactatagaaagggcctgtacgctatggactac LC BAP058-клон O SEQ ID NO: 633 (Kabat) LCDR1 aaagcctctcaggacgtgggcaccgccgtggcc SEQ ID NO: 634 (Kabat) LCDR2 tgggcctctactagacacacc SEQ ID NO: 635 (Kabat) LCDR3 cagcagtataatagctaccccctgacc SEQ ID NO: 636 (Chothia) LCDR1 tctcaggacgtgggcaccgcc SEQ ID NO: 637 (Chothia) LCDR2 tgggcctct SEQ ID NO: 638 (Chothia) LCDR3 tataatagctaccccctg HC BAP058-клон N SEQ ID NO: 628 (Kabat) HCDR1 agctactggatgtac SEQ ID NO: 629 (Kabat) HCDR2 agaatcgaccctaatagcggctctactaagtataacgagaagtttaagaat SEQ ID NO: 630 (Kabat) HCDR3 gactatagaaagggcctgtacgctatggactac SEQ ID NO: 631 (Chothia) HCDR1 ggctacaccttcactagctac SEQ ID NO: 632 (Chothia) HCDR2 gaccctaatagcggctct SEQ ID NO: 630 (Chothia) HCDR3 gactatagaaagggcctgtacgctatggactac LC BAP058-клон N SEQ ID NO: 633 (Kabat) LCDR1 aaagcctctcaggacgtgggcaccgccgtggcc SEQ ID NO: 634 (Kabat) LCDR2 tgggcctctactagacacacc SEQ ID NO: 635 (Kabat) LCDR3 cagcagtataatagctaccccctgacc SEQ ID NO: 636 (Chothia) LCDR1 tctcaggacgtgggcaccgcc SEQ ID NO: 637 (Chothia) LCDR2 tgggcctct SEQ ID NO: 638 (Chothia) LCDR3 tataatagctaccccctg

Другие иллюстративные ингибиторы PD-L1

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-1 представляет собой атезолизумаб (Genentech/Roche), также известный как MPDL3280A, RG7446, RO5541267, YW243.55.S70 или TECENTRIQ™. Атезолизумаб и другие антитела к PD-L1 раскрыты в US 8217149, включенном посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи атезолизумаба, например, раскрытые в таблице 8.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 представляет собой авелумаб (Merck Serono и Pfizer), также известный как MSB0010718C. Авелумаб и другие антитела к PD-L1 раскрыты в WO 2013/079174, включенном посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи авелумаба, например, раскрытые в таблице 8.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 представляет собой дурвалумаб (MedImmune/AstraZeneca), также известный как MEDI4736. Дурвалумаб и другие антитела к PD-L1 раскрыты в US 8779108, включенном посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи дурвалумаба, например, раскрытые в таблице 8.

В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 представляет собой BMS-936559 (Bristol-Myers Squibb), также известное как MDX-1105 или 12A4. BMS-936559 и другие антитела к PD-L1 раскрыты в US 7943743 и WO 2015/081158, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к PD-L1 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи BMS-936559, например, раскрытые в таблице 8.

Дополнительные известные антитела к PD-L1 включают антитела, описанные, например, в WO 2015/181342, WO 2014/100079, WO 2016/000619, WO 2014/022758, WO 2014/055897, WO 2015/061668, WO 2013/079174, WO 2012/145493, WO 2015/112805, WO 2015/109124, WO 2015/195163, US 8168179, US 8552154, US 8460927 и US 9175082, включенных посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления антитело к PD-L1 представляет собой антитело, которое конкурирует за связывание с тем же эпитопом на PD-L1, что и одно из антител к PD-L1, описанных в данном документе, и/или связывает его.

Таблица 8. Аминокислотные последовательности других иллюстративных молекул антитела к PD-L1

Атезолизумаб SEQ ID NO: 639 Тяжелая цепь EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSDSWIHWVRQAPGKGLEWVAWISPYGGSTYYADSVKGRFTISADTSKNTAYLQMNSLRAEDTAVYYCARRHWPGGFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 640 Легкая цепь DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQYLYHPATFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC Авелумаб SEQ ID NO: 641 Тяжелая цепь EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYIMMWVRQAPGKGLEWVSSIYPSGGITFYADTVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARIKLGTVTTVDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 642 Легкая цепь QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCSSYTSSSTRVFGTGTKVTVLGQPKANPTVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADGSPVKAGVETTKPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS Дурвалумаб SEQ ID NO: 643 Тяжелая цепь EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSRYWMSWVRQAPGKGLEWVANIKQDGSEKYYVDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCAREGGWFGELAFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEFEGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 644 Легкая цепь EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQRVSSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSLPWTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC BMS-936559 SEQ ID NO: 645 VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKTSGDTFSTYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGKAHYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYFCARKFHFVSGSPFGMDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 646 VL EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPTFGQGTKVEIK

Иллюстративные ингибиторы LAG-3

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с ингибитором LAG-3, известным из уровня техники. Ингибитор LAG-3 может представлять собой антитело, его антигенсвязывающий фрагмент, иммуноадгезин, слитый белок или олигопептид. В некоторых вариантах осуществления ингибитор LAG-3 выбран из LAG525 (Novartis), BMS-986016 (Bristol-Myers Squibb), TSR-033 (Tesaro), MK-4280 (Merck & Co) или REGN3767 (Regeneron).

Иллюстративные молекулы антитела к LAG-3

В одном варианте осуществления ингибитор LAG-3 представляет собой молекулу антитела к LAG-3. В одном варианте осуществления ингибитор LAG-3 представляет собой молекулу антитела к LAG-3, раскрытого в US 2015/0259420, опубликованном 17 сентября 2015 г. под названием "Antibody Molecules to LAG-3 and Uses Thereof", включенном посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть определяющих комплементарность областей (CDR) (или в совокупности все CDR) из вариабельной области тяжелой и легкой цепей, содержащей аминокислотную последовательность, показанную в таблице 9 (например, из последовательностей вариабельной области тяжелой и легкой цепей BAP050-клона I или BAP050-клона J, раскрытых в таблице 9), или кодируемую нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 9. В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии со схемой нумерации по Kabat (например, как изложено в таблице 9). В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии со схемой нумерации по Chothia (например, как изложено в таблице 5). В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии с комбинированной схемой нумерации CDR как по Kabat, так и по Chothia (например, как изложено в таблице 9). В одном варианте осуществления CDR1 VH согласно комбинированной схеме нумерации CDR по Kabat и Chothia содержит аминокислотную последовательность GFTLTNYGMN (SEQ ID NO: 766). В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или в совокупности все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен (например, консервативных аминокислотных замен) или делеций по сравнению с аминокислотной последовательностью, показанной в таблице 9, или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 9.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 701, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 702 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 703; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 710, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 711 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 712, каждая из которых раскрыта в таблице 9.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит VH, содержащую VHCDR1, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 736 или 737, VHCDR2, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 738 или 739, и VHCDR3, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 740 или 741; и VL, содержащую VLCDR1, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 746 или 747, VLCDR2, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 748 или 749, и VLCDR3, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 750 или 751, каждая из которых раскрыта в таблице 9. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит VH, содержащую VHCDR1, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 758 или 737, VHCDR2, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 759 или 739, и VHCDR3, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 760 или 741; и VL, содержащую VLCDR1, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 746 или 747, VLCDR2, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 748 или 749, и VLCDR3, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 750 или 751, каждая из которых раскрыта в таблице 9.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 706, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 706. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 718, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 718. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 724, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 724. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 730, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 730. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 706, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 718. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 724, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 730.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 707 или 708 или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 707 или 708. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 719 или 720 или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 719 или 720. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 725 или 726 или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 725 или 726. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 731 или 732 или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 731 или 732. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 707 или 708, и VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 719 или 720. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 725 или 726, и VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 731 или 732.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 709, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 709. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 721, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 721. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 727, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 727. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 733, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 733. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 709, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 721. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 727, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 733.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 716 или 717 или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 716 или 717. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 722 или 723 или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 722 или 723. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 728 или 729 или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 728 или 729. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 734 или 735 или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 734 или 735. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 716 или 717, и легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 722 или 723. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 728 или 729, и легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 734 или 735.

Молекулы антител, описанные в данном документе, можно получать с использованием векторов, клеток-хозяев и способов, описанных в US 2015/0259420, включенном посредством ссылки во всей своей полноте.

Таблица 9. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности иллюстративных молекул антитела к LAG-3

HC BAP050-клон I SEQ ID NO: 701 (Kabat) HCDR1 NYGMN SEQ ID NO: 702 (Kabat) HCDR2 WINTDTGEPTYADDFKG SEQ ID NO: 703 (Kabat) HCDR3 NPPYYYGTNNAEAMDY SEQ ID NO: 704 (Chothia) HCDR1 GFTLTNY SEQ ID NO: 705 (Chothia) HCDR2 NTDTGE SEQ ID NO: 703 (Chothia) HCDR3 NPPYYYGTNNAEAMDY SEQ ID NO:706 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTLTNYGMNWVRQARGQRLEWIGWINTDTGEPTYADDFKGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYGTNNAEAMDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 707 ДНК, кодирующая VH Caagtgcagctggtgcagtcgggagccgaagtgaagaagcctggagcctcggtgaaggtgtcgtgcaaggcatccggattcaccctcaccaattacgggatgaactgggtcagacaggcccggggtcaacggctggagtggatcggatggattaacaccgacaccggggagcctacctacgcggacgatttcaagggacggttcgtgttctccctcgacacctccgtgtccaccgcctacctccaaatctcctcactgaaagcggaggacaccgccgtgtactattgcgcgaggaacccgccctactactacggaaccaacaacgccgaagccatggactactggggccagggcaccactgtgactgtgtccagc SEQ ID NO: 708 ДНК, кодирующая VH CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCCTCTGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAACTGGGTGCGACAGGCCAGGGGCCAGCGGCTGGAATGGATCGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTCTCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCAGATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGTACTACTGCGCCCGGAACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTATTGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCT SEQ ID NO: 709 Тяжелая цепь QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTLTNYGMNWVRQARGQRLEWIGWINTDTGEPTYADDFKGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYGTNNAEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 716 ДНК, кодирующая тяжелую цепь caagtgcagctggtgcagtcgggagccgaagtgaagaagcctggagcctcggtgaaggtgtcgtgcaaggcatccggattcaccctcaccaattacgggatgaactgggtcagacaggcccggggtcaacggctggagtggatcggatggattaacaccgacaccggggagcctacctacgcggacgatttcaagggacggttcgtgttctccctcgacacctccgtgtccaccgcctacctccaaatctcctcactgaaagcggaggacaccgccgtgtactattgcgcgaggaacccgccctactactacggaaccaacaacgccgaagccatggactactggggccagggcaccactgtgactgtgtccagcgcgtccactaagggcccgtccgtgttccccctggcaccttgtagccggagcactagcgaatccaccgctgccctcggctgcctggtcaaggattacttcccggagcccgtgaccgtgtcctggaacagcggagccctgacctccggagtgcacaccttccccgctgtgctgcagagctccgggctgtactcgctgtcgtcggtggtcacggtgccttcatctagcctgggtaccaagacctacacttgcaacgtggaccacaagccttccaacactaaggtggacaagcgcgtcgaatcgaagtacggcccaccgtgcccgccttgtcccgcgccggagttcctcggcggtccctcggtctttctgttcccaccgaagcccaaggacactttgatgatttcccgcacccctgaagtgacatgcgtggtcgtggacgtgtcacaggaagatccggaggtgcagttcaattggtacgtggatggcgtcgaggtgcacaacgccaaaaccaagccgagggaggagcagttcaactccacttaccgcgtcgtgtccgtgctgacggtgctgcatcaggactggctgaacgggaaggagtacaagtgcaaagtgtccaacaagggacttcctagctcaatcgaaaagaccatctcgaaagccaagggacagccccgggaaccccaagtgtataccctgccaccgagccaggaagaaatgactaagaaccaagtctcattgacttgccttgtgaagggcttctacccatcggatatcgccgtggaatgggagtccaacggccagccggaaaacaactacaagaccacccctccggtgctggactcagacggatccttcttcctctactcgcggctgaccgtggataagagcagatggcaggagggaaatgtgttcagctgttctgtgatgcatgaagccctgcacaaccactacactcagaagtccctgtccctctccctggga SEQ ID NO: 717 ДНК, кодирующая тяжелую цепь CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCCTCTGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAACTGGGTGCGACAGGCCAGGGGCCAGCGGCTGGAATGGATCGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTCTCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCAGATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGTACTACTGCGCCCGGAACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTATTGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCTGCTTCTACCAAGGGGCCCAGCGTGTTCCCCCTGGCCCCCTGCTCCAGAAGCACCAGCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTGGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCCGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACAGCCTGAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCAGCAGCAGCCTGGGCACCAAGACCTACACCTGTAACGTGGACCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGGGTGGAGAGCAAGTACGGCCCACCCTGCCCCCCCTGCCCAGCCCCCGAGTTCCTGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCCCCCAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCAGAACCCCCGAGGTGACCTGTGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAGGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAGCAGTTTAACAGCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGTAAGGTCTCCAACAAGGGCCTGCCAAGCAGCATCGAAAAGACCATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCTAGAGAGCCCCAGGTCTACACCCTGCCACCCAGCCAAGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTGGTGAAGGGCTTCTACCCAAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCCCCAGTGCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTACAGCAGGCTGACCGTGGACAAGTCCAGATGGCAGGAGGGCAACGTCTTTAGCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGAGCCTGAGCCTGTCCCTGGGC LC BAP050-клон I SEQ ID NO: 710 (Kabat) LCDR1 SSSQDISNYLN SEQ ID NO: 711 (Kabat) LCDR2 YTSTLHL SEQ ID NO: 712 (Kabat) LCDR3 QQYYNLPWT SEQ ID NO: 713 (Chothia) LCDR1 SQDISNY SEQ ID NO: 714 (Chothia) LCDR2 YTS SEQ ID NO: 715 (Chothia) LCDR3 YYNLPW SEQ ID NO: 718 VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSSSQDISNYLNWYLQKPGQSPQLLIYYTSTLHLGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYYNLPWTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 719 ДНК, кодирующая VL Gatattcagatgactcagtcacctagtagcctgagcgctagtgtgggcgatagagtgactatcacctgtagctctagtcaggatatctctaactacctgaactggtatctgcagaagcccggtcaatcacctcagctgctgatctactacactagcaccctgcacctgggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgagttcaccctgactatctctagcctgcagcccgacgacttcgctacctactactgtcagcagtactataacctgccctggaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaag SEQ ID NO: 720 ДНК, кодирующая VL GACATCCAGATGACCCAGTCCCCCTCCAGCCTGTCTGCTTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTTCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAACTGGTATCTGCAGAAGCCCGGCCAGTCCCCTCAGCTGCTGATCTACTACACCTCCACCCTGCACCTGGGCGTGCCCTCCAGATTTTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGAGTTTACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGACGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACCTTCGGCCAGGGCACCAAGGTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 721 Легкая цепь DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSSSQDISNYLNWYLQKPGQSPQLLIYYTSTLHLGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQQYYNLPWTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 722 ДНК, кодирующая легкую цепь Gatattcagatgactcagtcacctagtagcctgagcgctagtgtgggcgatagagtgactatcacctgtagctctagtcaggatatctctaactacctgaactggtatctgcagaagcccggtcaatcacctcagctgctgatctactacactagcaccctgcacctgggcgtgccctctaggtttagcggtagcggtagtggcaccgagttcaccctgactatctctagcctgcagcccgacgacttcgctacctactactgtcagcagtactataacctgccctggaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaagcgtacggtggccgctcccagcgtgttcatcttcccccccagcgacgagcagctgaagagcggcaccgccagcgtggtgtgcctgctgaacaacttctacccccgggaggccaaggtgcagtggaaggtggacaacgccctgcagagcggcaacagccaggagagcgtcaccgagcaggacagcaaggactccacctacagcctgagcagcaccctgaccctgagcaaggccgactacgagaagcataaggtgtacgcctgcgaggtgacccaccagggcctgtccagccccgtgaccaagagcttcaacaggggcgagtgc SEQ ID NO: 723 ДНК, кодирующая легкую цепь GACATCCAGATGACCCAGTCCCCCTCCAGCCTGTCTGCTTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTTCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAACTGGTATCTGCAGAAGCCCGGCCAGTCCCCTCAGCTGCTGATCTACTACACCTCCACCCTGCACCTGGGCGTGCCCTCCAGATTTTCCGGCTCTGGCTCTGGCACCGAGTTTACCCTGACCATCAGCTCCCTGCAGCCCGACGACTTCGCCACCTACTACTGCCAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACCTTCGGCCAGGGCACCAAGGTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCAAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGTCTGCTGAACAACTTCTACCCCAGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGTGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC HC BAP050-клон J SEQ ID NO: 701 (Kabat) HCDR1 NYGMN SEQ ID NO: 702 (Kabat) HCDR2 WINTDTGEPTYADDFKG SEQ ID NO: 703 (Kabat) HCDR3 NPPYYYGTNNAEAMDY SEQ ID NO: 704 (Chothia) HCDR1 GFTLTNY SEQ ID NO: 705 (Chothia) HCDR2 NTDTGE SEQ ID NO: 703 (Chothia) HCDR3 NPPYYYGTNNAEAMDY SEQ ID NO: 724 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTLTNYGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTDTGEPTYADDFKGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYGTNNAEAMDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 725 ДНК, кодирующая VH Caggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaaacccggcgctagtgtgaaagtcagctgtaaagctagtggcttcaccctgactaactacgggatgaactgggtccgccaggccccaggtcaaggcctcgagtggatgggctggattaacaccgacaccggcgagcctacctacgccgacgactttaagggcagattcgtgtttagcctggacactagtgtgtctaccgcctacctgcagatctctagcctgaaggccgaggacaccgccgtctactactgcgctagaaaccccccctactactacggcactaacaacgccgaggctatggactactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagc SEQ ID NO: 726 ДНК, кодирующая VH CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCCTCTGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAGGGCCTGGAATGGATGGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTCTCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCAGATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGTACTACTGCGCCCGGAACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTATTGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCT SEQ ID NO: 727 Тяжелая цепь QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGFTLTNYGMNWVRQAPGQGLEWMGWINTDTGEPTYADDFKGRFVFSLDTSVSTAYLQISSLKAEDTAVYYCARNPPYYYGTNNAEAMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 728 ДНК, кодирующая тяжелую цепь caggtgcagctggtgcagtcaggcgccgaagtgaagaaacccggcgctagtgtgaaagtcagctgtaaagctagtggcttcaccctgactaactacgggatgaactgggtccgccaggccccaggtcaaggcctcgagtggatgggctggattaacaccgacaccggcgagcctacctacgccgacgactttaagggcagattcgtgtttagcctggacactagtgtgtctaccgcctacctgcagatctctagcctgaaggccgaggacaccgccgtctactactgcgctagaaaccccccctactactacggcactaacaacgccgaggctatggactactggggtcaaggcactaccgtgaccgtgtctagcgctagcactaagggcccgtccgtgttccccctggcaccttgtagccggagcactagcgaatccaccgctgccctcggctgcctggtcaaggattacttcccggagcccgtgaccgtgtcctggaacagcggagccctgacctccggagtgcacaccttccccgctgtgctgcagagctccgggctgtactcgctgtcgtcggtggtcacggtgccttcatctagcctgggtaccaagacctacacttgcaacgtggaccacaagccttccaacactaaggtggacaagcgcgtcgaatcgaagtacggcccaccgtgcccgccttgtcccgcgccggagttcctcggcggtccctcggtctttctgttcccaccgaagcccaaggacactttgatgatttcccgcacccctgaagtgacatgcgtggtcgtggacgtgtcacaggaagatccggaggtgcagttcaattggtacgtggatggcgtcgaggtgcacaacgccaaaaccaagccgagggaggagcagttcaactccacttaccgcgtcgtgtccgtgctgacggtgctgcatcaggactggctgaacgggaaggagtacaagtgcaaagtgtccaacaagggacttcctagctcaatcgaaaagaccatctcgaaagccaagggacagccccgggaaccccaagtgtataccctgccaccgagccaggaagaaatgactaagaaccaagtctcattgacttgccttgtgaagggcttctacccatcggatatcgccgtggaatgggagtccaacggccagccggaaaacaactacaagaccacccctccggtgctggactcagacggatccttcttcctctactcgcggctgaccgtggataagagcagatggcaggagggaaatgtgttcagctgttctgtgatgcatgaagccctgcacaaccactacactcagaagtccctgtccctctccctggga SEQ ID NO: 729 ДНК, кодирующая тяжелую цепь CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGCGCCGAAGTGAAGAAACCTGGCGCCTCCGTGAAGGTGTCCTGCAAGGCCTCTGGCTTCACCCTGACCAACTACGGCATGAACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAGGGCCTGGAATGGATGGGCTGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGCAGATTCGTGTTCTCCCTGGACACCTCCGTGTCCACCGCCTACCTGCAGATCTCCAGCCTGAAGGCCGAGGATACCGCCGTGTACTACTGCGCCCGGAACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTATTGGGGCCAGGGCACCACCGTGACCGTGTCCTCTGCTTCTACCAAGGGGCCCAGCGTGTTCCCCCTGGCCCCCTGCTCCAGAAGCACCAGCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTGGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCCGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACAGCCTGAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCAGCAGCAGCCTGGGCACCAAGACCTACACCTGTAACGTGGACCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGGGTGGAGAGCAAGTACGGCCCACCCTGCCCCCCCTGCCCAGCCCCCGAGTTCCTGGGCGGACCCAGCGTGTTCCTGTTCCCCCCCAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCAGAACCCCCGAGGTGACCTGTGTGGTGGTGGACGTGTCCCAGGAGGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAGCAGTTTAACAGCACCTACCGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAGTACAAGTGTAAGGTCTCCAACAAGGGCCTGCCAAGCAGCATCGAAAAGACCATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCTAGAGAGCCCCAGGTCTACACCCTGCCACCCAGCCAAGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTGGTGAAGGGCTTCTACCCAAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCCCCAGTGCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTACAGCAGGCTGACCGTGGACAAGTCCAGATGGCAGGAGGGCAACGTCTTTAGCTGCTCCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGAGCCTGAGCCTGTCCCTGGGC LC BAP050-клон J SEQ ID NO: 710 (Kabat) LCDR1 SSSQDISNYLN SEQ ID NO: 711 (Kabat) LCDR2 YTSTLHL SEQ ID NO: 712 (Kabat) LCDR3 QQYYNLPWT SEQ ID NO: 713 (Chothia) LCDR1 SQDISNY SEQ ID NO: 714 (Chothia) LCDR2 YTS SEQ ID NO: 715 (Chothia) LCDR3 YYNLPW SEQ ID NO: 730 VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSSSQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSTLHLGIPPRFSGSGYGTDFTLTINNIESEDAAYYFCQQYYNLPWTFGQGTKVEIK SEQ ID NO: 731 ДНК, кодирующая VL Gatattcagatgactcagtcacctagtagcctgagcgctagtgtgggcgatagagtgactatcacctgtagctctagtcaggatatctctaactacctgaactggtatcagcagaagcccggtaaagcccctaagctgctgatctactacactagcaccctgcacctgggaatcccccctaggtttagcggtagcggctacggcaccgacttcaccctgactattaacaatatcgagtcagaggacgccgcctactacttctgtcagcagtactataacctgccctggaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaag SEQ ID NO: 732 ДНК, кодирующая VL GACATCCAGATGACCCAGTCCCCCTCCAGCCTGTCTGCTTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTTCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAGCTGCTGATCTACTACACCTCCACCCTGCACCTGGGCATCCCCCCTAGATTCTCCGGCTCTGGCTACGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAACAACATCGAGTCCGAGGACGCCGCCTACTACTTCTGCCAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACCTTCGGCCAGGGCACCAAGGTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 733 Легкая цепь DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCSSSQDISNYLNWYQQKPGKAPKLLIYYTSTLHLGIPPRFSGSGYGTDFTLTINNIESEDAAYYFCQQYYNLPWTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 734 ДНК, кодирующая легкую цепь Gatattcagatgactcagtcacctagtagcctgagcgctagtgtgggcgatagagtgactatcacctgtagctctagtcaggatatctctaactacctgaactggtatcagcagaagcccggtaaagcccctaagctgctgatctactacactagcaccctgcacctgggaatcccccctaggtttagcggtagcggctacggcaccgacttcaccctgactattaacaatatcgagtcagaggacgccgcctactacttctgtcagcagtactataacctgccctggaccttcggtcaaggcactaaggtcgagattaagcgtacggtggccgctcccagcgtgttcatcttcccccccagcgacgagcagctgaagagcggcaccgccagcgtggtgtgcctgctgaacaacttctacccccgggaggccaaggtgcagtggaaggtggacaacgccctgcagagcggcaacagccaggagagcgtcaccgagcaggacagcaaggactccacctacagcctgagcagcaccctgaccctgagcaaggccgactacgagaagcataaggtgtacgcctgcgaggtgacccaccagggcctgtccagccccgtgaccaagagcttcaacaggggcgagtgc SEQ ID NO: 735 ДНК, кодирующая легкую цепь GACATCCAGATGACCCAGTCCCCCTCCAGCCTGTCTGCTTCCGTGGGCGACAGAGTGACCATCACCTGTTCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCAAGGCCCCCAAGCTGCTGATCTACTACACCTCCACCCTGCACCTGGGCATCCCCCCTAGATTCTCCGGCTCTGGCTACGGCACCGACTTCACCCTGACCATCAACAACATCGAGTCCGAGGACGCCGCCTACTACTTCTGCCAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACCTTCGGCCAGGGCACCAAGGTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCAAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGTCTGCTGAACAACTTCTACCCCAGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCACAAGGTGTACGCCTGTGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC HC BAP050-клон I SEQ ID NO: 736 (Kabat) HCDR1 aattacgggatgaac SEQ ID NO: 737 (Kabat) HCDR1 AACTACGGCATGAAC SEQ ID NO: 738 (Kabat) HCDR2 tggattaacaccgacaccggggagcctacctacgcggacgatttcaaggga SEQ ID NO: 739 (Kabat) HCDR2 TGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGC SEQ ID NO: 740 (Kabat) HCDR3 aacccgccctactactacggaaccaacaacgccgaagccatggactac SEQ ID NO: 741 (Kabat) HCDR3 AACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTAT SEQ ID NO: 742 (Chothia) HCDR1 ggattcaccctcaccaattac SEQ ID NO: 743 (Chothia) HCDR1 GGCTTCACCCTGACCAACTAC SEQ ID NO: 744 (Chothia) HCDR2 aacaccgacaccggggag SEQ ID NO: 745 (Chothia) HCDR2 AACACCGACACCGGCGAG SEQ ID NO: 740 (Chothia) HCDR3 aacccgccctactactacggaaccaacaacgccgaagccatggactac SEQ ID NO: 741 (Chothia) HCDR3 AACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTAT LC BAP050-клон I SEQ ID NO: 746 (Kabat) LCDR1 agctctagtcaggatatctctaactacctgaac SEQ ID NO: 747 (Kabat) LCDR1 TCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAAC SEQ ID NO: 748 (Kabat) LCDR2 tacactagcaccctgcacctg SEQ ID NO: 749 (Kabat) LCDR2 TACACCTCCACCCTGCACCTG SEQ ID NO: 750 (Kabat) LCDR3 cagcagtactataacctgccctggacc SEQ ID NO: 751 (Kabat) LCDR3 CAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACC SEQ ID NO: 752 (Chothia) LCDR1 agtcaggatatctctaactac SEQ ID NO: 753 (Chothia) LCDR1 AGCCAGGACATCTCCAACTAC SEQ ID NO: 754 (Chothia) LCDR2 tacactagc SEQ ID NO: 755 (Chothia) LCDR2 TACACCTCC SEQ ID NO: 756 (Chothia) LCDR3 tactataacctgccctgg SEQ ID NO: 757 (Chothia) LCDR3 TACTACAACCTGCCCTGG HC BAP050-клон J SEQ ID NO: 758 (Kabat) HCDR1 aactacgggatgaac SEQ ID NO: 737 (Kabat) HCDR1 AACTACGGCATGAAC SEQ ID NO: 759 (Kabat) HCDR2 tggattaacaccgacaccggcgagcctacctacgccgacgactttaagggc SEQ ID NO: 739 (Kabat) HCDR2 TGGATCAACACCGACACCGGCGAGCCTACCTACGCCGACGACTTCAAGGGC SEQ ID NO: 760 (Kabat) HCDR3 aaccccccctactactacggcactaacaacgccgaggctatggactac SEQ ID NO: 741 (Kabat) HCDR3 AACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTAT SEQ ID NO: 761 (Chothia) HCDR1 ggcttcaccctgactaactac SEQ ID NO: 743 (Chothia) HCDR1 GGCTTCACCCTGACCAACTAC SEQ ID NO: 744 (Chothia) HCDR2 aacaccgacaccggggag SEQ ID NO: 745 (Chothia) HCDR2 AACACCGACACCGGCGAG SEQ ID NO: 760 (Chothia) HCDR3 aaccccccctactactacggcactaacaacgccgaggctatggactac SEQ ID NO: 741 (Chothia) HCDR3 AACCCCCCTTACTACTACGGCACCAACAACGCCGAGGCCATGGACTAT LC BAP050-клон J SEQ ID NO: 746 (Kabat) LCDR1 agctctagtcaggatatctctaactacctgaac SEQ ID NO: 747 (Kabat) LCDR1 TCCTCCAGCCAGGACATCTCCAACTACCTGAAC SEQ ID NO: 748 (Kabat) LCDR2 TACACTAGCACCCTGCACCTG SEQ ID NO: 749 (Kabat) LCDR2 TACACCTCCACCCTGCACCTG SEQ ID NO: 750 (Kabat) LCDR3 cagcagtactataacctgccctggacc SEQ ID NO: 751 (Kabat) LCDR3 CAGCAGTACTACAACCTGCCCTGGACC SEQ ID NO: 752 (Chothia) LCDR1 agtcaggatatctctaactac SEQ ID NO: 753 (Chothia) LCDR1 AGCCAGGACATCTCCAACTAC SEQ ID NO: 754 (Chothia) LCDR2 TACACTAGC SEQ ID NO: 755 (Chothia) LCDR2 TACACCTCC SEQ ID NO: 756 (Chothia) LCDR3 tactataacctgccctgg SEQ ID NO: 757 (Chothia) LCDR3 TACTACAACCTGCCCTGG

Другие иллюстративные ингибиторы LAG-3

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 представляет собой BMS-986016 (Bristol-Myers Squibb), также известное как BMS986016. BMS-986016 и другие антитела к LAG-3 раскрыты в WO 2015/116539 и US 9505839, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи BMS-986016, например, раскрытые в таблице 10.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 представляет собой TSR-033 (Tesaro). В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи TSR-033.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 представляет собой MK-4280 (Merck & Co). В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи MK-4280.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 представляет собой REGN3767 (Regeneron). В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи REGN3767.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 представляет собой IMP731 или GSK2831781 (GSK и Prima BioMed). IMP731 и другие антитела к LAG-3 раскрыты в WO 2008/132601 и US 9244059, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи IMP731, например, раскрытые в таблице 10. В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи GSK2831781.

В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 представляет собой IMP761 (Prima BioMed). В одном варианте осуществления молекула антитела к LAG-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи IMP761.

Дополнительные известные антитела к LAG-3 включают антитела, описанные, например, в WO 2008/132601, WO 2010/019570, WO 2014/140180, WO 2015/116539, WO 2015/200119, WO 2016/028672, US 9244059, US 9505839, включенных посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления антитело к LAG-3 представляет собой антитело, которое конкурирует за связывание с тем же эпитопом на LAG-3, что и одно из антител к LAG-3, описанных в данном документе, и/или связывает его.

В одном варианте осуществления ингибитор, представляющий собой антитело к LAG-3, представляет собой растворимый белок LAG-3, например, IMP321 (Prima BioMed), например, раскрытый в WO 2009/044273, включенном посредством ссылки во всей своей полноте.

Таблица 10. Аминокислотные последовательности других иллюстративных молекул антитела к LAG-3

BMS-986016 SEQ ID NO: 762 Тяжелая цепь QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSDYYWNWIRQPPGKGLEWIGEINHRGSTNSNPSLKSRVTLSLDTSKNQFSLKLRSVTAADTAVYYCAFGYSDYEYNWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK SEQ ID NO: 763 Легкая цепь EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSISSYLAWYQQKPGQAPRLLIYDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWPLTFGQGTNLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC IMP731 SEQ ID NO: 764 Тяжелая цепь QVQLKESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTAYGVNWVRQPPGKGLEWLGMIWDDGSTDYNSALKSRLSISKDNSKSQVFLKMNSLQTDDTARYYCAREGDVAFDYWGQGTTLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 765 Легкая цепь DIVMTQSPSSLAVSVGQKV™SCKSSQSLLNGSNQKNYLAWYQQKPGQSPKLLVYFASTRDSGVPDRFIGSGSGTDFTLTISSVQAEDLADYFCLQHFGTPPTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Иллюстративные ингибиторы TIM-3

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с ингибитором TIM-3. Ингибитор TIM-3 может представлять собой антитело, его антигенсвязывающий фрагмент, иммуноадгезин, слитый белок или олигопептид. В некоторых вариантах осуществления ингибитор TIM-3 выбран из MGB453 (Novartis), TSR-022 (Tesaro) или LY3321367 (Eli Lilly).

Иллюстративные молекулы антитела к TIM-3

В одном варианте осуществления ингибитор TIM-3 представляет собой молекулу антитела к TIM-3. В одном варианте осуществления ингибитор TIM-3 представляет собой молекулу антитела к TIM-3, раскрытого в US 2015/0218274, опубликованном 6 августа 2015 г. под названием "Antibody Molecules to TIM-3 and Uses Thereof", включенном посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть определяющих комплементарность областей (CDR) (или в совокупности все CDR) из вариабельной области тяжелой и легкой цепей, содержащей аминокислотную последовательность, показанную в таблице 11 (например, из последовательностей вариабельной области тяжелой и легкой цепей ABTIM3-hum11 или ABTIM3-hum03, раскрытых в таблице 11), или кодируемую нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 11. В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии со схемой нумерации по Kabat (например, как изложено в таблице 11). В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии со схемой нумерации по Chothia (например, как изложено в таблице 11). В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или в совокупности все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен (например, консервативных аминокислотных замен) или делеций по сравнению с аминокислотной последовательностью, показанной в таблице 11, или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 11.

В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 801, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 802 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 803; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 810, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 811 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 812, каждая из которых раскрыта в таблице 11. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 801, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 820 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 803; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 810, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 811 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 812, каждая из которых раскрыта в таблице 11.

В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 806, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 806. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 816, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 816. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 822, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 822. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 826, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 826. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 806, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 816. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 822, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 826.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 807, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 807. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 817, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 817. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 823, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 823. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 827, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 827. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 807, и VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 817. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 823, и VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 827.

В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 808, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 808. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 818, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 818. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 824, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 824. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 828, или аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 828. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 808, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 818. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 824, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 828.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 809, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 809. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 819, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 819. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 825, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 825. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 829, или нуклеотидную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90%, 95%, или 99% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 829. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 809, и легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 819. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 825, и легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 829.

Молекулы антител, описанные в данном документе, можно получать с использованием векторов, клеток-хозяев и способов, описанных в US 2015/0218274, включенном посредством ссылки во всей своей полноте.

Таблица 11. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности иллюстративных молекул антитела к TIM-3

ABTIM3-hum11 SEQ ID NO: 801 (Kabat) HCDR1 SYNMH SEQ ID NO: 802 (Kabat) HCDR2 DIYPGNGDTSYNQKFKG SEQ ID NO: 803 (Kabat) HCDR3 VGGAFPMDY SEQ ID NO: 804 (Chothia) HCDR1 GYTFTSY SEQ ID NO: 805 (Chothia) HCDR2 YPGNGD SEQ ID NO: 803 (Chothia) HCDR3 VGGAFPMDY SEQ ID NO: 806 VH QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGDIYPGNGDTSYNQKFKGRVTITADKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARVGGAFPMDYWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 807 ДНК, кодирующая VH CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCTCTAGCGTGAAAGTTTCTTGTAAAGCTAGTGGCTACACCTTCACTAGCTATAATATGCACTGGGTTCGCCAGGCCCCAGGGCAAGGCCTCGAGTGGATGGGCGATATCTACCCCGGGAACGGCGACACTAGTTATAATCAGAAGTTTAAGGGTAGAGTCACTATCACCGCCGATAAGTCTACTAGCACCGTCTATATGGAACTGAGTTCCCTGAGGTCTGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGTGGGCGGAGCCTTCCCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTAGC SEQ ID NO: 808 Тяжелая цепь QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGDIYPGNGDTSYNQKFKGRVTITADKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARVGGAFPMDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 809 ДНК, кодирующая тяжелую цепь CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCTCTAGCGTGAAAGTTTCTTGTAAAGCTAGTGGCTACACCTTCACTAGCTATAATATGCACTGGGTTCGCCAGGCCCCAGGGCAAGGCCTCGAGTGGATGGGCGATATCTACCCCGGGAACGGCGACACTAGTTATAATCAGAAGTTTAAGGGTAGAGTCACTATCACCGCCGATAAGTCTACTAGCACCGTCTATATGGAACTGAGTTCCCTGAGGTCTGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGTGGGCGGAGCCTTCCCTATGGACTACTGGGGTCAAGGCACTACCGTGACCGTGTCTAGCGCTAGCACTAAGGGCCCGTCCGTGTTCCCCCTGGCACCTTGTAGCCGGAGCACTAGCGAATCCACCGCTGCCCTCGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTCCCGGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCTCCGGAGTGCACACCTTCCCCGCTGTGCTGCAGAGCTCCGGGCTGTACTCGCTGTCGTCGGTGGTCACGGTGCCTTCATCTAGCCTGGGTACCAAGACCTACACTTGCAACGTGGACCACAAGCCTTCCAACACTAAGGTGGACAAGCGCGTCGAATCGAAGTACGGCCCACCGTGCCCGCCTTGTCCCGCGCCGGAGTTCCTCGGCGGTCCCTCGGTCTTTCTGTTCCCACCGAAGCCCAAGGACACTTTGATGATTTCCCGCACCCCTGAAGTGACATGCGTGGTCGTGGACGTGTCACAGGAAGATCCGGAGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGATGGCGTCGAGGTGCACAACGCCAAAACCAAGCCGAGGGAGGAGCAGTTCAACTCCACTTACCGCGTCGTGTCCGTGCTGACGGTGCTGCATCAGGACTGGCTGAACGGGAAGGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGACTTCCTAGCTCAATCGAAAAGACCATCTCGAAAGCCAAGGGACAGCCCCGGGAACCCCAAGTGTATACCCTGCCACCGAGCCAGGAAGAAATGACTAAGAACCAAGTCTCATTGACTTGCCTTGTGAAGGGCTTCTACCCATCGGATATCGCCGTGGAATGGGAGTCCAACGGCCAGCCGGAAAACAACTACAAGACCACCCCTCCGGTGCTGGACTCAGACGGATCCTTCTTCCTCTACTCGCGGCTGACCGTGGATAAGAGCAGATGGCAGGAGGGAAATGTGTTCAGCTGTTCTGTGATGCATGAAGCCCTGCACAACCACTACACTCAGAAGTCCCTGTCCCTCTCCCTGGGA SEQ ID NO: 810 (Kabat) LCDR1 RASESVEYYGTSLMQ SEQ ID NO: 811 (Kabat) LCDR2 AASNVES SEQ ID NO: 812 (Kabat) LCDR3 QQSRKDPST SEQ ID NO: 813 (Chothia) LCDR1 SESVEYYGTSL SEQ ID NO: 814 (Chothia) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 815 (Chothia) LCDR3 SRKDPS SEQ ID NO: 816 VL AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASESVEYYGTSLMQWYQQKPGKAPKLLIYAASNVESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYFCQQSRKDPSTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 817 ДНК, кодирующая VL GCTATTCAGCTGACTCAGTCACCTAGTAGCCTGAGCGCTAGTGTGGGCGATAGAGTGACTATCACCTGTAGAGCTAGTGAATCAGTCGAGTACTACGGCACTAGCCTGATGCAGTGGTATCAGCAGAAGCCCGGGAAAGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCTAACGTGGAATCAGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCCTGACTATCTCTAGCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCTACCTACTTCTGTCAGCAGTCTAGGAAGGACCCTAGCACCTTCGGCGGAGGCACTAAGGTCGAGATTAAG SEQ ID NO: 818 Легкая цепь AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASESVEYYGTSLMQWYQQKPGKAPKLLIYAASNVESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYFCQQSRKDPSTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 819 ДНК, кодирующая легкую цепь GCTATTCAGCTGACTCAGTCACCTAGTAGCCTGAGCGCTAGTGTGGGCGATAGAGTGACTATCACCTGTAGAGCTAGTGAATCAGTCGAGTACTACGGCACTAGCCTGATGCAGTGGTATCAGCAGAAGCCCGGGAAAGCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCTAACGTGGAATCAGGCGTGCCCTCTAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCCTGACTATCTCTAGCCTGCAGCCCGAGGACTTCGCTACCTACTTCTGTCAGCAGTCTAGGAAGGACCCTAGCACCTTCGGCGGAGGCACTAAGGTCGAGATTAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC ABTIM3-hum03 SEQ ID NO: 801 (Kabat) HCDR1 SYNMH SEQ ID NO: 820 (Kabat) HCDR2 DIYPGQGDTSYNQKFKG SEQ ID NO: 803 (Kabat) HCDR3 VGGAFPMDY SEQ ID NO: 804 (Chothia) HCDR1 GYTFTSY SEQ ID NO: 821 (Chothia) HCDR2 YPGQGD SEQ ID NO: 803 (Chothia) HCDR3 VGGAFPMDY SEQ ID NO: 822 VH QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWIGDIYPGQGDTSYNQKFKGRA™TADKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARVGGAFPMDYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 823 ДНК, кодирующая VH CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTAGTGTGAAAGTTAGCTGTAAAGCTAGTGGCTATACTTTCACTTCTTATAATATGCACTGGGTCCGCCAGGCCCCAGGTCAAGGCCTCGAGTGGATCGGCGATATCTACCCCGGTCAAGGCGACACTTCCTATAATCAGAAGTTTAAGGGTAGAGCTACTATGACCGCCGATAAGTCTACTTCTACCGTCTATATGGAACTGAGTTCCCTGAGGTCTGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGTGGGCGGAGCCTTCCCAATGGACTACTGGGGTCAAGGCACCCTGGTCACCGTGTCTAGC SEQ ID NO: 824 Тяжелая цепь QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWIGDIYPGQGDTSYNQKFKGRA™TADKSTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARVGGAFPMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLG SEQ ID NO: 825 ДНК, кодирующая тяжелую цепь CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCAGGCGCCGAAGTGAAGAAACCCGGCGCTAGTGTGAAAGTTAGCTGTAAAGCTAGTGGCTATACTTTCACTTCTTATAATATGCACTGGGTCCGCCAGGCCCCAGGTCAAGGCCTCGAGTGGATCGGCGATATCTACCCCGGTCAAGGCGACACTTCCTATAATCAGAAGTTTAAGGGTAGAGCTACTATGACCGCCGATAAGTCTACTTCTACCGTCTATATGGAACTGAGTTCCCTGAGGTCTGAGGACACCGCCGTCTACTACTGCGCTAGAGTGGGCGGAGCCTTCCCAATGGACTACTGGGGTCAAGGCACCCTGGTCACCGTGTCTAGCGCTAGCACTAAGGGCCCGTCCGTGTTCCCCCTGGCACCTTGTAGCCGGAGCACTAGCGAATCCACCGCTGCCCTCGGCTGCCTGGTCAAGGATTACTTCCCGGAGCCCGTGACCGTGTCCTGGAACAGCGGAGCCCTGACCTCCGGAGTGCACACCTTCCCCGCTGTGCTGCAGAGCTCCGGGCTGTACTCGCTGTCGTCGGTGGTCACGGTGCCTTCATCTAGCCTGGGTACCAAGACCTACACTTGCAACGTGGACCACAAGCCTTCCAACACTAAGGTGGACAAGCGCGTCGAATCGAAGTACGGCCCACCGTGCCCGCCTTGTCCCGCGCCGGAGTTCCTCGGCGGTCCCTCGGTCTTTCTGTTCCCACCGAAGCCCAAGGACACTTTGATGATTTCCCGCACCCCTGAAGTGACATGCGTGGTCGTGGACGTGTCACAGGAAGATCCGGAGGTGCAGTTCAATTGGTACGTGGATGGCGTCGAGGTGCACAACGCCAAAACCAAGCCGAGGGAGGAGCAGTTCAACTCCACTTACCGCGTCGTGTCCGTGCTGACGGTGCTGCATCAGGACTGGCTGAACGGGAAGGAGTACAAGTGCAAAGTGTCCAACAAGGGACTTCCTAGCTCAATCGAAAAGACCATCTCGAAAGCCAAGGGACAGCCCCGGGAACCCCAAGTGTATACCCTGCCACCGAGCCAGGAAGAAATGACTAAGAACCAAGTCTCATTGACTTGCCTTGTGAAGGGCTTCTACCCATCGGATATCGCCGTGGAATGGGAGTCCAACGGCCAGCCGGAAAACAACTACAAGACCACCCCTCCGGTGCTGGACTCAGACGGATCCTTCTTCCTCTACTCGCGGCTGACCGTGGATAAGAGCAGATGGCAGGAGGGAAATGTGTTCAGCTGTTCTGTGATGCATGAAGCCCTGCACAACCACTACACTCAGAAGTCCCTGTCCCTCTCCCTGGGA SEQ ID NO: 810 (Kabat) LCDR1 RASESVEYYGTSLMQ SEQ ID NO: 811 (Kabat) LCDR2 AASNVES SEQ ID NO: 812 (Kabat) LCDR3 QQSRKDPST SEQ ID NO: 813 (Chothia) LCDR1 SESVEYYGTSL SEQ ID NO: 814 (Chothia) LCDR2 AAS SEQ ID NO: 815 (Chothia) LCDR3 SRKDPS SEQ ID NO: 826 VL DIVLTQSPDSLAVSLGERATINCRASESVEYYGTSLMQWYQQKPGQPPKLLIYAASNVESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQSRKDPSTFGGGTKVEIK SEQ ID NO: 827 ДНК, кодирующая VL GATATCGTCCTGACTCAGTCACCCGATAGCCTGGCCGTCAGCCTGGGCGAGCGGGCTACTATTAACTGTAGAGCTAGTGAATCAGTCGAGTACTACGGCACTAGCCTGATGCAGTGGTATCAGCAGAAGCCCGGTCAACCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCTAACGTGGAATCAGGCGTGCCCGATAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCCTGACTATTAGTAGCCTGCAGGCCGAGGACGTGGCCGTCTACTACTGTCAGCAGTCTAGGAAGGACCCTAGCACCTTCGGCGGAGGCACTAAGGTCGAGATTAAG SEQ ID NO: 828 Легкая цепь DIVLTQSPDSLAVSLGERATINCRASESVEYYGTSLMQWYQQKPGQPPKLLIYAASNVESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQSRKDPSTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 829 ДНК, кодирующая легкую цепь GATATCGTCCTGACTCAGTCACCCGATAGCCTGGCCGTCAGCCTGGGCGAGCGGGCTACTATTAACTGTAGAGCTAGTGAATCAGTCGAGTACTACGGCACTAGCCTGATGCAGTGGTATCAGCAGAAGCCCGGTCAACCCCCTAAGCTGCTGATCTACGCCGCCTCTAACGTGGAATCAGGCGTGCCCGATAGGTTTAGCGGTAGCGGTAGTGGCACCGACTTCACCCTGACTATTAGTAGCCTGCAGGCCGAGGACGTGGCCGTCTACTACTGTCAGCAGTCTAGGAAGGACCCTAGCACCTTCGGCGGAGGCACTAAGGTCGAGATTAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC

Другие иллюстративные ингибиторы TIM-3

В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 представляет собой TSR-022 (AnaptysBio/Tesaro). В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи TSR-022. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи APE5137 или APE5121, например, раскрытые в таблице 12. APE5137, APE5121 и другие антитела к TIM-3 раскрыты в WO 2016/161270, включенном посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 представляет собой LY3321367 (Eli Lilly). В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи LY3321367.

В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 представляет собой клон антитела F38-2E2. В одном варианте осуществления молекула антитела к TIM-3 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи F38-2E2.

Дополнительные известные антитела к TIM-3 включают антитела, описанные, например, в WO 2016/111947, WO 2016/071448, WO 2016/144803, US 8552156, US 8841418 и US 9163087, включенных посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления антитело к TIM-3 представляет собой антитело, которое конкурирует за связывание с тем же эпитопом на TIM-3, что и одно из антител к TIM-3, описанных в данном документе, и/или связывает его.

Таблица 12. Аминокислотные последовательности других иллюстративных молекул антитела к TIM-3

APE5137 SEQ ID NO: 830 VH EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAAASGFTFSSYDMSWVRQAPGKGLDWVSTISGGGTYTYYQDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCASMDYWGQGTTVTVSSA SEQ ID NO: 831 VL DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSIRRYLNWYHQKPGKAPKLLIYGASTLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFAVYYCQQSHSAPLTFGGGTKVEIKR APE5121 SEQ ID NO: 832 VH EVQVLESGGGLVQPGGSLRLYCVASGFTFSGSYAMSWVRQAPGKGLEWVSAISGSGGSTYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKKYYVGPADYWGQGTLVTVSSG SEQ ID NO: 833 VL DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVLYSSNNKNYLAWYQHKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSSPLTFGGGTKIEVK

Иллюстративные ингибиторы CTLA-4

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с ингибитором CTLA-4. Ингибитор CTLA-4 может представлять собой антитело, его антигенсвязывающий фрагмент, иммуноадгезин, слитый белок или олигопептид. В некоторых вариантах осуществления ингибитор CTLA-4 представляет собой ипилимумаб (Yervoy®, Bristol-Myers Squibb) или тремелимумаб (Pfizer). Антитело ипилимумаб и другие антитела к CTLA-4 раскрыты в патенте США № 6984202, включенном в настоящий документ посредством ссылки. Антитело тремелимумаб и другие антитела к CTLA-4 раскрыты в патенте США № 7411057, включенном в настоящий документ посредством ссылки.

Иллюстративные агонисты GITR

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с агонистом GITR. Агонист GITR может представлять собой антитело, его антигенсвязывающий фрагмент, иммуноадгезин, слитый белок или олигопептид. В некоторых вариантах осуществления агонист GITR представляет собой GWN323 (Novartis), BMS-986156 (BMS), MK-4166 или MK-1248 (Merck), TRX518 (Leap Therapeutics), INCAGN1876 (Incyte/Agenus), AMG 228 (Amgen) или INBRX-110 (Inhibrx).

Иллюстративные молекулы антитела к GITR

В одном варианте осуществления агонист GITR представляет собой молекулу антитела к GITR. В одном варианте осуществления агонист GITR представляет собой молекулу антитела к GITR, описанную в WO 2016/057846, опубликованной 14 апреля 2016 г. под названием "Compositions and Methods of Use for Augmented Immune Response and Cancer Therapy", включенной посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит по меньшей мере одну, две, три, четыре, пять или шесть определяющих комплементарность областей (CDR) (или в совокупности все CDR) из вариабельной области тяжелой и легкой цепей, содержащей аминокислотную последовательность, показанную в таблице 13 (например, из последовательностей вариабельной области тяжелой и легкой цепей MAB7, раскрытых в таблице 13), или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 13. В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии со схемой нумерации по Kabat (например, как изложено в таблице 13). В некоторых вариантах осуществления CDR определены в соответствии со схемой нумерации по Chothia (например, как изложено в таблице 13). В одном варианте осуществления одна или несколько CDR (или в совокупности все CDR) имеют одно, два, три, четыре, пять, шесть или более изменений, например, аминокислотных замен (например, консервативных аминокислотных замен) или делеций по сравнению с аминокислотной последовательностью, показанной в таблице 13, или кодируемой нуклеотидной последовательностью, показанной в таблице 13.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность VHCDR1 под SEQ ID NO: 909, аминокислотную последовательность VHCDR2 под SEQ ID NO: 911 и аминокислотную последовательность VHCDR3 под SEQ ID NO: 913; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность VLCDR1 под SEQ ID NO: 914, аминокислотную последовательность VLCDR2 под SEQ ID NO: 916 и аминокислотную последовательность VLCDR3 под SEQ ID NO: 918, каждая из которых раскрыта в таблице 13.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 901 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичную SEQ ID NO: 901. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 902 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичную SEQ ID NO: 902. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 901, и VL, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 902.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 905 или нуклеотидную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичную SEQ ID NO: 905. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 906 или нуклеотидную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичную SEQ ID NO: 906. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит VH, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 905, и VL, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 906.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 903 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичную SEQ ID NO: 903. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 904 или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичную SEQ ID NO: 904. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 903, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 904.

В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 907 или нуклеотидную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичную SEQ ID NO: 907. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 908 или нуклеотидную последовательность, на по меньшей мере 85%, 90%, 95%, или 99% или больше идентичную SEQ ID NO: 908. В одном варианте осуществления молекула антитела содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 907, и легкую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью под SEQ ID NO: 908.

Молекулы антител, описанные в данном документе, можно получать с использованием векторов, клеток-хозяев и способов, описанных в WO 2016/057846, включенном посредством ссылки во всей своей полноте.

Таблица 13. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности иллюстративной молекулы антитела к GITR

MAB7 SEQ ID NO: 901 VH EVQLVESGGGLVQSGGSLRLSCAASGFSLSSYGVDWVRQAPGKGLEWVGVIWGGGGTYYASSLMGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARHAYGHDGGFAMDYWGQGTLVTVSS SEQ ID NO: 902 VL EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASESVSSNVAWYQQRPGQAPRLLIYGASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCGQSYSYPFTFGQGTKLEIK SEQ ID NO: 903 Тяжелая цепь EVQLVESGGGLVQSGGSLRLSCAASGFSLSSYGVDWVRQAPGKGLEWVGVIWGGGGTYYASSLMGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARHAYGHDGGFAMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 904 Легкая цепь EIVMTQSPATLSVSPGERATLSCRASESVSSNVAWYQQRPGQAPRLLIYGASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCGQSYSYPFTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC SEQ ID NO: 905 ДНК, кодирующая VH GAGGTGCAGCTGGTGGAATCTGGCGGCGGACTGGTGCAGTCCGGCGGCTCTCTGAGACTGTCTTGCGCTGCCTCCGGCTTCTCCCTGTCCTCTTACGGCGTGGACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGGAATGGGTGGGAGTGATCTGGGGCGGAGGCGGCACCTACTACGCCTCTTCCCTGATGGGCCGGTTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCAGACACGCCTACGGCCACGACGGCGGCTTCGCCATGGATTATTGGGGCCAGGGCACCCTGGTGACAGTGTCCTCC SEQ ID NO: 906 ДНК, кодирующая VL GAGATCGTGATGACCCAGTCCCCCGCCACCCTGTCTGTGTCTCCCGGCGAGAGAGCCACCCTGAGCTGCAGAGCCTCCGAGTCCGTGTCCTCCAACGTGGCCTGGTATCAGCAGAGACCTGGTCAGGCCCCTCGGCTGCTGATCTACGGCGCCTCTAACCGGGCCACCGGCATCCCTGCCAGATTCTCCGGCTCCGGCAGCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCTCCCGGCTGGAACCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCGGCCAGTCCTACTCATACCCCTTCACCTTCGGCCAGGGCACCAAGCTGGAAATCAAG SEQ ID NO: 907 ДНК, кодирующая тяжелую цепь GAGGTGCAGCTGGTGGAATCTGGCGGCGGACTGGTGCAGTCCGGCGGCTCTCTGAGACTGTCTTGCGCTGCCTCCGGCTTCTCCCTGTCCTCTTACGGCGTGGACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGGAATGGGTGGGAGTGATCTGGGGCGGAGGCGGCACCTACTACGCCTCTTCCCTGATGGGCCGGTTCACCATCTCCCGGGACAACTCCAAGAACACCCTGTACCTGCAGATGAACTCCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCGCCAGACACGCCTACGGCCACGACGGCGGCTTCGCCATGGATTATTGGGGCCAGGGCACCCTGGTGACAGTGTCCTCCGCTAGCACCAAGGGCCCAAGTGTGTTTCCCCTGGCCCCCAGCAGCAAGTCTACTTCCGGCGGAACTGCTGCCCTGGGTTGCCTGGTGAAGGACTACTTCCCCGAGCCCGTGACAGTGTCCTGGAACTCTGGGGCTCTGACTTCCGGCGTGCACACCTTCCCCGCCGTGCTGCAGAGCAGCGGCCTGTACAGCCTGAGCAGCGTGGTGACAGTGCCCTCCAGCTCTCTGGGAACCCAGACCTATATCTGCAACGTGAACCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGAGTGGAGCCCAAGAGCTGCGACAAGACCCACACCTGCCCCCCCTGCCCAGCTCCAGAACTGCTGGGAGGGCCTTCCGTGTTCCTGTTCCCCCCCAAGCCCAAGGACACCCTGATGATCAGCAGGACCCCCGAGGTGACCTGCGTGGTGGTGGACGTGTCCCACGAGGACCCAGAGGTGAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCACAACGCCAAGACCAAGCCCAGAGAGGAGCAGTACAACAGCACCTACAGGGTGGTGTCCGTGCTGACCGTGCTGCACCAGGACTGGCTGAACGGCAAAGAATACAAGTGCAAAGTCTCCAACAAGGCCCTGCCAGCCCCAATCGAAAAGACAATCAGCAAGGCCAAGGGCCAGCCACGGGAGCCCCAGGTGTACACCCTGCCCCCCAGCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTGTCCCTGACCTGTCTGGTGAAGGGCTTCTACCCCAGCGATATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAACGGCCAGCCCGAGAACAACTACAAGACCACCCCCCCAGTGCTGGACAGCGACGGCAGCTTCTTCCTGTACAGCAAGCTGACCGTGGACAAGTCCAGGTGGCAGCAGGGCAACGTGTTCAGCTGCAGCGTGATGCACGAGGCCCTGCACAACCACTACACCCAGAAGTCCCTGAGCCTGAGCCCCGGCAAG SEQ ID NO: 908 ДНК, кодирующая легкую цепь GAGATCGTGATGACCCAGTCCCCCGCCACCCTGTCTGTGTCTCCCGGCGAGAGAGCCACCCTGAGCTGCAGAGCCTCCGAGTCCGTGTCCTCCAACGTGGCCTGGTATCAGCAGAGACCTGGTCAGGCCCCTCGGCTGCTGATCTACGGCGCCTCTAACCGGGCCACCGGCATCCCTGCCAGATTCTCCGGCTCCGGCAGCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCTCCCGGCTGGAACCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCGGCCAGTCCTACTCATACCCCTTCACCTTCGGCCAGGGCACCAAGCTGGAAATCAAGCGTACGGTGGCCGCTCCCAGCGTGTTCATCTTCCCCCCCAGCGACGAGCAGCTGAAGAGCGGCACCGCCAGCGTGGTGTGCCTGCTGAACAACTTCTACCCCCGGGAGGCCAAGGTGCAGTGGAAGGTGGACAACGCCCTGCAGAGCGGCAACAGCCAGGAGAGCGTCACCGAGCAGGACAGCAAGGACTCCACCTACAGCCTGAGCAGCACCCTGACCCTGAGCAAGGCCGACTACGAGAAGCATAAGGTGTACGCCTGCGAGGTGACCCACCAGGGCCTGTCCAGCCCCGTGACCAAGAGCTTCAACAGGGGCGAGTGC SEQ ID NO: 909 (KABAT) HCDR1 SYGVD SEQ ID NO: 910 (CHOTHIA) HCDR1 GFSLSSY SEQ ID NO: 911 (KABAT) HCDR2 VIWGGGGTYYASSLMG SEQ ID NO: 912 (CHOTHIA) HCDR2 WGGGG SEQ ID NO: 913 (KABAT) HCDR3 HAYGHDGGFAMDY SEQ ID NO: 913 (CHOTHIA) HCDR3 HAYGHDGGFAMDY SEQ ID NO: 914 (KABAT) LCDR1 RASESVSSNVA SEQ ID NO: 915 (CHOTHIA) LCDR1 SESVSSN SEQ ID NO: 916 (KABAT) LCDR2 GASNRAT SEQ ID NO: 917 (CHOTHIA) LCDR2 GAS SEQ ID NO: 918 (KABAT) LCDR3 GQSYSYPFT SEQ ID NO: 919 (CHOTHIA) LCDR3 SYSYPF

Другие иллюстративные агонисты GITR

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR представляет собой BMS-986156 (Bristol-Myers Squibb), также известный как BMS 986156 или BMS986156. BMS-986156 и другие антитела к GITR раскрыты, например, в US 9228016 и WO 2016/196792, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи BMS-986156, например, раскрытые в таблице 14.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR представляет собой MK-4166 или MK-1248 (Merck). MK-4166, MK-1248 и другие антитела к GITR раскрыты, например, в US 8709424, WO 2011/028683, WO 2015/026684 и Mahne et al. Cancer Res. 2017; 77(5):1108-1118, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи MK-4166 или MK-1248.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR представляет собой TRX518 (Leap Therapeutics). TRX518 и другие антитела к GITR раскрыты, например, в US 7812135, US 8388967, US 9028823, WO 2006/105021 и Ponte J et al. (2010) Clinical Immunology; 135:S96, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи TRX518.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR представляет собой INCAGN1876 (Incyte/Agenus). INCAGN1876 и другие антитела к GITR раскрыты, например, в US 2015/0368349 и WO 2015/184099, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи INCAGN1876.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR представляет собой AMG 228 (Amgen). AMG 228 и другие антитела к GITR раскрыты, например, в US 9464139 и WO 2015/031667, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи AMG 228.

В одном варианте осуществления молекула антитела к GITR представляет собой INBRX-110 (Inhibrx). INBRX-110 и другие антитела к GITR раскрыты, например, в US 2017/0022284 и WO 2017/015623, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления агонист GITR содержит одну или несколько последовательностей CDR (или в совокупности все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи INBRX-110.

В одном варианте осуществления агонист GITR (например, слитый белок) представляет собой MEDI 1873 (MedImmune), также известный как MEDI1873. MEDI 1873 и другие агонисты GITR раскрыты, например, в US 2017/0073386, WO 2017/025610 и Ross et al. Cancer Res 2016; 76(14 Suppl): Abstract № 561, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления агонист GITR содержит один или несколько из Fc-домена IgG, функционального домена для мультимеризации и домена для связывания с рецептором из индуцируемого глюкокортикоидами лиганда рецептора TNF (GITRL) MEDI 1873.

Дополнительные известные агонисты GITR (например, антитела к GITR) включают описанные, например, в WO 2016/054638, включенной посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления антитело к GITR представляет собой антитело, которое конкурирует за связывание с тем же эпитопом на GITR, что и одно из антител к GITR, описанных в данном документе, и/или связывает его.

В одном варианте осуществления агонист GITR представляет собой пептид, который активирует путь передачи сигнала посредством GITR. В одном варианте осуществления агонист GITR представляет собой иммуноадгезинсвязывающий фрагмент (например, иммуноадгезинсвязывающий фрагмент, содержащий внеклеточную или GITR-связывающую часть GITRL), слитый с константной областью (например, последовательностью Fc-области иммуноглобулина).

Таблица 14. Аминокислотные последовательности других иллюстративных молекул антитела к GITR

BMS-986156 SEQ ID NO: 920 VH QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYEGSNKYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGGSMVRGDYYYGMDVWGQGTTVTVSS SEQ ID NO: 921 VL AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGISSALAWYQQKPGKAPKLLIYDASSLESGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPYTFGQGTKLEIK

Иллюстративные молекулы полиспецифического антитела к CD3

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с молекулой полиспецифического антитела к CD3 (например, молекулой биспецифического антитела к CD3). В одном варианте осуществления молекула полиспецифического антитела к CD3 связывается с CD3 и опухолевым антигеном-мишенью (TTA). В одном варианте осуществления TTA выбран из CD19, CD20, CD38 или CD123. В одном варианте осуществления молекула полиспецифического антитела к CD3 имеет формат, раскрытый на фигурах 1А, 1В, 1С и 125 в WO 2016/182751, включенной в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте.

В одном варианте осуществления молекула полиспецифического антитела к CD3 представляет собой молекулу биспецифического антитела к CD3 x CD123, например, XENP14045 (например, как указано в таблице 15), или молекулу биспецифического антитела к CD3 x CD123, раскрытого в WO 2016/086189 или WO 2016/182751, включенных в данный документ посредством ссылки во всей их полноте. В одном варианте осуществления молекула биспецифического антитела к CD3 x CD123 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи XENP14045, или аминокислотную последовательность, по сути идентичную им (например, последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90% или 95% идентичностью последовательности с ними).

В одном варианте осуществления полиспецифического антитело к CD3 представляет собой молекулу биспецифического антитела к CD3 x CD20, например, XENP13676 (например, как указано в таблице 15), или молекулу биспецифического антитела к CD3 x CD20, раскрытого в WO 2016/086189 или WO 2016/182751, включенных в данный документ посредством ссылки во всей их полноте. В одном варианте осуществления молекула биспецифического антитела к CD3 x CD20 содержит одну или несколько последовательностей CDR (или все последовательности CDR), последовательность вариабельной области тяжелой цепи или легкой цепи, или последовательность тяжелой цепи или легкой цепи XENP13676, или аминокислотную последовательность, по сути идентичную им (например, последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90% или 95% идентичностью последовательности с ними).

Таблица 15. Аминокислотные последовательности иллюстративных молекул биспецифического антитела к CD3

XENP14045 (Fab-scFv-Fc антитела к CD123 x CD3) SEQ ID NO: 177 Тяжелая цепь 1 (Fab-Fc антитела к CD123) QVQLQQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTDYYMKWVKQSHGKSLEWMGDIIPSNGATFYNQKFKGKATLTVDRSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSHLLRASWFAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSDTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVKHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEEYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCDVSGFYPSDIAVEWESDGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWEQGDVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 178 Тяжелая цепь 2 (scFv-Fc антитела к CD3) EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSTYAMNWVRQAPGKGLEWVGRIRSKYNNYATYYADSVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVRHGNFGDSYVSWFAYWGQGTLVTVSSGKPGSGKPGSGKPGSGKPGSQAVVTQEPSLTVSPGGTVTLTCGSSTGAVTTSNYANWVQQKPGKSPRGLIGGTNKRAPGVPARFSGSLLGGKAALTISGAQPEDEADYYCALWYSNHWVFGGGTKLTVLEPKSSDKTHTCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVKHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREQMTKNQVKLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 179 Легкая цепь DFVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSLLNTGNQKNYLTWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQNDYSYPYTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC XENP13676 (Fab-scFv-Fc антитела к CD20 x CD3) SEQ ID NO: 180 Тяжелая цепь 1 (Fab-Fc) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYNMHWVRQAPGQGLEWMGAIYPGNGDTSYNQKFQGRVTITADKSISTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSTYYGGDWYFNVWGAGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSDTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVKHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEEYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCDVSGFYPSDIAVEWESDGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWEQGDVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 181 Тяжелая цепь 2 (scFv-Fc) EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSTYAMNWVRQAPGKGLEWVGRIRSKYNNYATYYADSVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCVRHGNFGDSYVSWFAYWGQGTLVTVSSGKPGSGKPGSGKPGSGKPGSQAVVTQEPSLTVSPGGTVTLTCGSSTGAVTTSNYANWVQQKPGKSPRGLIGGTNKRAPGVPARFSGSLLGGKAALTISGAQPEDEADYYCALWYSNHWVFGGGTKLTVLEPKSSDKTHTCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVKHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREQMTKNQVKLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK SEQ ID NO: 182 Легкая цепь QIVLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASSSVSYIHWFQQKPGKSPKPLIYATSNLASGVPVRFSGSGSGTDYTLTISSLQPEDFATYYCQQWTSNPPTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

Иллюстративные комплексы IL15/IL-15Ra

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с комплексом IL-15/IL-15Ra. В некоторых вариантах осуществления комплекс IL-15/IL-15Ra выбран из NIZ985 (Novartis), ATL-803 (Altor) или CYP0150 (Cytune).

Иллюстративные комплексы IL-15/IL-15Ra

В одном варианте осуществления комплекс IL-15/IL-15Ra содержит IL-15 человека в комплексе с растворимой формой IL-15Ra человека. Комплекс может содержать IL-15, ковалентно или нековалентно связанный с растворимой формой IL-15Ra. В конкретном варианте осуществления IL-15 человека нековалентно связан с растворимой формой IL-15Ra. В конкретном варианте осуществления IL-15 человека из композиции содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 183 из таблицы 16, и растворимая форма IL-15Ra содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 184 из таблицы 16, описанные в WO 2014/066527, включенном посредством ссылки во всей своей полноте. Молекулы, описанные в данном документе, можно получать с использованием векторов, клеток-хозяев и способов, описанных в WO 2007/084342, включенном посредством ссылки во всей своей полноте.

Таблица 16. Аминокислотные и нуклеотидные последовательности иллюстративных комплексов IL-15/IL-15Ra

NIZ985 SEQ ID NO: 183 IL-15 человека NWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS SEQ ID NO: 184 Растворимый IL-15Ra человека ITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIRDPALVHQRPAPPSTVTTAGVTPQPESLSPSGKEPAASSPSSNNTAATTAAIVPGSQLMPSKSPSTGTTEISSHESSHGTPSQTTAKNWELTASASHQPPGVYPQG

Другие иллюстративные комплексы IL-15/IL-15Ra

В одном варианте осуществления комплекс IL-15/IL-15Ra представляет собой ALT-803, слитый белок на основе IL-15/IL-15Ra и Fc (растворимый комплекс IL-15N72D:IL-15RaSu/Fc). ALT-803 описан в WO 2008/143794, включенном посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления слитый белок на основе IL-15/IL-15Ra и Fc содержит последовательности, раскрытые в таблице 17.

В одном варианте осуществления комплекс IL-15/IL-15Ra содержит IL-15, слитый с доменом sushi IL-15Ra (CYP0150, Cytune). Домен sushi IL-15Ra относится к домену, начинающемуся с первого цистеинового остатка после сигнального пептида IL-15Ra и заканчивающемуся четвертым цистеиновым остатком после указанного сигнального пептида. Комплекс IL-15, слитого с доменом sushi IL-15Ra, раскрыт в WO 2007/04606 и WO 2012/175222, включенных посредством ссылки во всей своей полноте. В одном варианте осуществления слитый белок IL-15/домен sushi IL-15Ra содержит последовательности, раскрытые в таблице 17.

Таблица 17. Аминокислотные последовательности других иллюстративных комплексов IL-15/IL-15Ra

ALT-803 (Altor) SEQ ID NO: 185 IL-15N72D NWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANDSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS SEQ ID NO: 186 IL-15RaSu/Fc ITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIREPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK Слитый белок IL-15/домен sushi IL-15Ra (Cytune) SEQ ID NO: 187 IL-15 человека NWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEXKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS
Где X представляет собой E или K SEQ ID NO: 188 Домен sushi и шарнирный домен IL-15Ra человека ITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIRDPALVHQRPAPP

Иллюстративные агонисты STING

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с агонистом STING. В некоторых вариантах осуществления комбинацию применяют для лечения рака, например, рака, описанного в данном документе, например, солидной опухоли (например, рака молочной железы, плоскоклеточной карциномы, меланомы, рака яичника, карциномы фаллопиевой трубы, перитонеальной карциномы, саркомы мягких тканей, рака пищевода, рака головы и шеи, рака эндометрия, рака шейки матки или базальноклеточной карциномы), например, гематологического злокачественного новообразования (например, лейкоза (например, хронического лимфолейкоза (CLL) или лимфомы (например, В-клеточной лимфомы маргинальной зоны, мелкоклеточной лимфоцитарной лимфомы, фолликулярной лимфомы, лимфомы Ходжкина, неходжкинской лимфомы)). В некоторых вариантах осуществления рак выбран из рака головы и шеи (например, плоскоклеточной карциномы головы и шеи (HNSCC), рака кожи (например, меланомы), рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого (NSCLC)) или рака молочной железы (например, трижды негативного рака молочной железы (TNBC)).

В некоторых вариантах осуществления агонист STING представляет собой циклический динуклеотид, например, циклический динуклеотид, который содержит пуриновые или пиримидиновые нуклеотидные основания (например, аденозиновые, гуаниновые, урациловые, тиминовые или цитозиновые нуклеотидные основания). В некоторых вариантах осуществления нуклеотидные основания циклического динуклеотида предусматривают одно и то же нуклеотидное основание или разные нуклеотидные основания.

В некоторых вариантах осуществления агонист STING содержит аденозиновые или гуанозиновые нуклеотидные основания. В некоторых вариантах осуществления агонист STING содержит одно аденозиновое нуклеотидное основание и одно гуанозиновое нуклеотидное основание. В некоторых вариантах осуществления агонист STING содержит два аденозиновых нуклеотидных основания или два гуанозиновых нуклеотидных основания.

В некоторых вариантах осуществления агонист STING включает модифицированный циклический динуклеотид, например, содержащий модифицированное нуклеотидное основание, модифицированную рибозу или модифицированную фосфатную связь. В некоторых вариантах осуществления модифицированный циклический динуклеотид содержит модифицированную фосфатную связь, например, тиофосфат.

В некоторых вариантах осуществления агонист STING содержит циклический динуклеотид (например, модифицированный циклический динуклеотид) с 2',5'- или 3',5'-фосфатными связями. В некоторых вариантах осуществления агонист STING включает циклический динуклеотид (например, модифицированный циклический динуклеотид) со стереохимией Rp или Sp вокруг фосфатных связей.

В некоторых вариантах осуществления агонист STING представляет собой Rp, Rp-дитио-2',3'-c-di-AMP (например, Rp, Rp-дитио-c-[A(2',5')pA(3',5')p]) или его циклический динуклеотидный аналог. В некоторых вариантах осуществления агонист STING представляет собой соединение, показанное в патентной публикации США № US2015/0056224 (например, соединение на фигуре 2c, например, соединение 21 или соединение 22). В некоторых вариантах осуществления агонист STING представляет собой c-[G(2',5')pG(3',5')p], его O-замещенное производное дитиорибозы или представляет собой соединение, показанное на фиг. 4 публикаций согласно PCT №№ WO 2014/189805 и WO 2014/189806. В некоторых вариантах осуществления агонист STING представляет собой c-[A(2',5')pA(3',5')p] или его O-замещенное производное дитиорибозы или представляет собой соединение, показанное на фиг. 5 публикаций согласно PCT №№ WO 2014/189805 и WO 2014/189806. В некоторых вариантах осуществления агонист STING представляет собой c-[G(2',5')pA(3',5')p] или его O-замещенное производное дитиорибозы или представляет собой соединение, показанное на фиг. 5 публикаций согласно PCT №№ WO 2014/189805 и WO 2014/189806. В некоторых вариантах осуществления агонист STING представляет собой 2'-0-пропаргил-циклический-[A(2',5')pA(3',5')p] (2'-0-пропаргил-ML-CDA) или соединение, показанное на фиг. 7 публикации согласно PCT № WO 2014/189806.

Другие иллюстративные агонисты STING раскрыты, например, в публикациях согласно PCT №№ WO 2014/189805 и WO 2014/189806 и публикации США № 2015/0056225.

Иллюстративные средства, связывающие CSF-1/1R

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации со средством, связывающим CSF-1/1R. В некоторых вариантах осуществления комбинацию применяют для лечения рака, например рака, описанного в данном документе, например солидной опухоли (например, рака предстательной железы, рака молочной железы или пигментного виллонодулярного синовита (PVNS)).

В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, представляет собой ингибитор макрофагального колониестимулирующего фактора (M-CSF). M-CSF также иногда известен как CSF-1.

В другом варианте осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, представляет собой ингибитор тирозинкиназы CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-гидроксициклогексил)амино)бензо[d]тиазол-6-ил)окси)-N-метилпиколинамид (соединение A15) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2005/073224. В некоторых вариантах осуществления рак выбран из рака головного мозга (например, мультиформной глиобластомы (GBM)), рака поджелудочной железы или рака молочной железы (например, трижды негативного рака молочной железы (TNBC)).

В другом варианте осуществления средство, связывающее CSF-1/1R (например, ингибитор тирозинкиназы CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R)-2-гидроксициклогексил)амино)бензо[d]тиазол-6-ил)окси)-N-метилпиколинамид (соединение A15) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2005/073224, вводят в комбинации с ингибитором CD73 (например, молекулой антитела к CD73).

В определенных вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R (например, ингибитор тирозинкиназы CSF-1R), 4-((2-(((1R,2R)-2-гидроксициклогексил)амино)бензо[d]тиазол-6-ил)окси)-N-метилпиколинамид (соединение А15) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2005/073224, вводят в комбинации с ингибитором CD73 (например, молекулой антитела к CD73) для лечения рака, например, солидной опухоли (например, солидной опухоли на поздней стадии), например, рака мозга (например, мультиформной глиобластомы (GBM), например, рецидивирующей глиобластомы), рака молочной железы (например, трижды негативного рака молочной железы (например, NTBC)) или рака поджелудочной железы (например, рака поджелудочной железы на поздней стадии).

В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, представляет собой ингибитор M-CSF, соединение A33 или средство, связывающее CSF-1, раскрытое в публикации согласно PCT № WO 2004/045532 или публикации согласно PCT № WO 2005/068503, в том числе RX1 или 5H4 (например, молекула антитела или фрагмент Fab к M-CSF). В некоторых вариантах осуществления рак выбран из рака эндометрия, рака кожи (например, меланомы), рака поджелудочной железы или рака молочной железы (например, трижды негативного рака молочной железы (TNBC)).

В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, представляет собой ингибитор CSF1R или 4-(2-((1R, 2R)-2-гидроксициклогексиламино)бензотиазол-6-илокси)-N-метилпиколинамид. 4-(2-((1R,2R)-2-гидроксициклогексиламино)бензотиазол-6-илокси)-N-метилпиколинамид раскрыт как пример 157 на странице 117 публикации согласно РСТ № WO 2007/121484.

В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, представляет собой пексидартиниб (регистрационный номер CAS 1029044-16-3). Пексидартиниб также известен как PLX3397 или 5-((5-хлор-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-3-ил)метил)-N-((6-(трифторметил)пиридин-3-ил)метил)пиридин-2-амин. Пексидартиниб является низкомолекулярным ингибитором рецепторных тирозинкиназ (RTK) KIT, CSF1R и FLT3. В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, например, пексидартиниб, применяют в комбинации с ингибитором CD73, например, молекулой антитела к CD73, описанной в данном документе.

В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, представляет собой эмактузумаб. Эмактузумаб также известен как RG7155 или RO5509554. Эмактузумаб является гуманизированным mAb IgG1, нацеливающимся на CSF1R. В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, например, пексидартиниб, применяют в комбинации с ингибитором CD73, например, молекулой антитела к CD73, описанной в данном документе.

В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, представляет собой FPA008. FPA008 является гуманизированным mAb, которое ингибирует CSF1R. В некоторых вариантах осуществления средство, связывающее CSF-1/1R, например, FPA008, применяют в комбинации с ингибитором CD73, например, молекулой антитела к CD73, описанной в данном документе.

Иллюстративные ингибиторы IDO/TDO

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с ингибитором индоламин-2,3-диоксигеназы (IDO) и/или триптофан-2,3-диоксигеназы (TDO). В некоторых вариантах осуществления комбинацию применяют для лечения рака, например, рака, описанного в данном документе, например, солидной опухоли (например, меланомы, немелкоклеточного рака легкого, рака толстой кишки, плоскоклеточного рака головы и шеи, рака яичника, рака брюшины, рака фаллопиевой трубы, рака молочной железы (например, метастатического или HER2-негативного рака молочной железы)), например, гематологического злокачественного новообразования (например, лимфомы, например, неходжкинской лимфомы или лимфомы Ходжкина (например, диффузной В-крупноклеточной лимфомы (DLBCL))).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор IDO/TDO выбран из (4E)-4-[(3-хлор-4-фторанилино)нитросометилиден]-1,2,5-оксадиазол-3-амина (также известного как INCB24360),индоксимода (1-метил-D-триптофана) или α-циклогексил-5H-имидазо[5,1-a]изоиндол-5-этанола (также известного как NLG919).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор IDO/TDO представляет собой эпакадостат (регистрационный номер CAS: 1204669-58-8). Эпакадостат также известен как INCB24360 или INCB024360 (Incyte). Эпакадостат представляет собой мощный и избирательный ингибитор индоламин-2,3-диоксигеназы (IDO1) с IC50 10 нМ, с высокой избирательностью по сравнению с другими родственными ферментами, такими как IDO2 или триптофан-2,3-диоксигеназа (TDO).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор IDO/TDO представляет собой индоксимод (New Link Genetics). Индоксимод, D-изомер 1-метил-триптофана, является перорально вводимым низкомолекулярным ингибитором пути индоламин-2,3-диоксигеназы (IDO), который нарушает механизмы, благодаря которым опухоли избегают иммуноопосредованного разрушения.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор IDO/TDO представляет собой NLG919 (New Link Genetics). NLG919 является мощным ингибитором пути IDO (индоламин-(2,3)-диоксигеназы) с Ki/EC50 7 нМ/75 нМ в бесклеточных анализах.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор IDO/TDO представляет собой F001287 (Flexus/BMS). F001287 является низкомолекулярным ингибитором индоламин-2,3-диоксигеназы 1 (IDO1).

Иллюстративные ингибиторы TGF-β

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с ингибитором трансформирующего фактора роста бета (TGF-β). В некоторых вариантах осуществления комбинацию применяют для лечения рака, например, рака, описанного в данном документе, например, солидной опухоли (например, рака головного мозга (например, глиомы), меланомы, рака почки (например, почечно-клеточной карциномы), злокачественной мезотелиомы плевры (например, рецидивирующей злокачественной мезотелиомы плевры) или рака молочной железы (например, метастатического рака молочной железы)). В определенных вариантах осуществления рак выбран из колоректального рака (например, колоректального рака с микросателлитной стабильностью (MSS CRC), рака печени (например, гепатоцеллюлярной карциномы), рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого (HSCLC)), рака молочной железы (например, трижды негативного рака молочной железы (TNBC)), рака с экспрессией TGF-β, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы или рака почки (например, почечно-клеточной карциномы).

TGF-β относится к большому семейству структурно родственных цитокинов, включающему, например, костные морфогенетические белки (BMP), факторы роста и дифференцировки, активины и ингибины. В некоторых вариантах осуществления описанные в данном документе ингибиторы TGF-β могут связывать и/или ингибировать одну или несколько изоформ TGF-β (например, одну, две или все из TGF-β1, TGF-β2 или TGF-β3).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор TGF-β представляет собой фрезолимумаб (регистрационный номер CAS: 948564-73-6). Фрезолимумаб также известен как GC1008. Фрезолимумаб представляет собой моноклональное антитело человека, которое связывается и ингибирует изоформы 1, 2 и 3 TGF-бета.

Тяжелая цепь фрезолимумаба характеризуется аминокислотной последовательностью: QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFSSNVISWVRQAPGQGLEWMGGVIPIVDIANYAQRFKGRVTITADESTSTTYMELSSLRSEDTAVYYCASTLGLVLDAMDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (SEQ ID NO: 172).

Легкая цепь фрезолимумаба характеризуется аминокислотной последовательностью: ETVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSLGSSYLAWYQQKPGQAPRLLIYGASSRAPGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYADSPITFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO: 173).

Фрезолимумаб раскрыт, например, в WO 2006/086469, US 8383780 и US 8591901.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор TGF-β представляет собой XOMA 089. XOMA 089 также известен как XPA.42.089. XOMA 089 представляет собой полностью человеческое моноклональное антитело, которое связывает и нейтрализует лиганды TGF-бета 1 и 2.

Вариабельная область тяжелой цепи XOMA 089 имеет аминокислотную последовательность: QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSSYAISWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTANYAQKFQGRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGLWEVRALPSVYWGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 174) (раскрыта под SEQ ID NO: 6 в WO 2012/167143).

Вариабельная область легкой цепи XOMA 089 имеет аминокислотную последовательность: SYELTQPPSVSVAPGQTARITCGANDIGSKSVHWYQQKAGQAPVLVVSEDIIRPSGIPERISGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDRDSDQYVFGTGTKVTVLG (SEQ ID NO: 175) (раскрыта под SEQ ID NO: 8 в WO 2012/167143).

В определенных вариантах осуществления комбинация содержит ингибитор CD73 (например, молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе) и ингибитор TGF-β (например, ингибитор TGF-β, описанный в данном документе).

В одном варианте осуществления комбинация содержит ингибитор TGF-β, XOMA 089 или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2012/167143, и ингибитор CD73 (например, антитело к CD73, описанное в данном документе).

В одном варианте осуществления ингибитор TGF-β, XOMA 089 или соединение, раскрытое в публикации согласно PCT № WO 2012/167143, вводят в комбинации с ингибитором CD73 (например, молекулой антитела к CD73) для лечения рака поджелудочной железы, колоректального рака (например, колоректального рака с микросателлитной стабильностью (MSS-CRC)), рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого), рака молочной железы (например, трижды негативного рака молочной железы), рака печени (например, гепатоцеллюлярная карцинома), рака предстательной железы или рака почки (например, светлоклеточной почечно-клеточной карциномы).

Иллюстративные ингибиторы VEGFR

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с ингибитором рецептора фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) (например, ингибитором одного или нескольких из VEGFR (например, VEGFR-1, VEGFR-2 или VEGFR-3) или VEGF). В некоторых вариантах осуществления комбинацию применяют для лечения рака, например, рака, описанного в данном документе, например, солидной опухоли (например, меланомы, рака молочной железы, рака толстой кишки, рака пищевода, желудочно-кишечной стромальной опухоли (GIST) рака почки (например, почечно-клеточной карциномы), рака печени, немелкоклеточного рака легкого (NSCLC), рака яичника, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы или рака желудка), например, гематологического злокачественного новообразования (например, лимфомы).

В других вариантах осуществления ингибитор VEGFR представляет собой ваталаниба сукцинат (соединение A47) или соединение, раскрытое в EP 296122.

В другом варианте осуществления ингибитор VEGFR представляет собой один или несколько из VEGFR-2, PDGFRбета, KIT или киназы Raf C, 1-метил-5-((2-(5-(трифторметил)-1H-имидазол-2-ил)пиридин-4-ил)окси)-N-(4-(трифторметил)фенил)-1H-бензо[d]имидазол-2-амина (соединения A37) или соединения, раскрытого в публикации согласно РСТ № WO 2007/030377.

Другие иллюстративные ингибиторы пути VEGFR, которые можно применять в комбинациях, раскрытых в данном документе, включают, например, бевацизумаб (AVASTIN®), акситиниб (INLYTA®); бриваниба аланинат (BMS-582664, (S)-((R)-1-(4-(4-фтор-2-метил-1Н-индол-5-илокси)-5-метилпирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-илокси)пропан-2-ил)2-аминопропаноат); сорафениб (NEXAVAR®); пазопаниб (VOTRIENT®); сунитиниб малат (SUTENT®); цедираниб (AZD2171, CAS 288383-20-1); варгатеф (BIBF1120, CAS 928326-83-4); форетиниб (GSK1363089); телатиниб (BAY57-9352, CAS 332012-40-5); апатиниб (YN968D1, CAS 811803-05-1); иматиниб (GLEEVEC®); понатиниб (AP24534, CAS 943319-70-8); тивозаниб (AV951, CAS 475108-18-0); регорафениб (BAY73-4506, CAS 755037-03-7); ваталаниба дигидрохлорид (PTK787, CAS 212141-51-0); бриваниб (BMS-540215, CAS 649735-46-6); вандетаниб (CAPRELSA® или AZD6474); дифосфат мотесаниб (AMG706, CAS 857876-30-3, N-(2,3-дигидро-3,3-диметил-1Н-индол-6-ил)-2-[(4-пиридинилметил)амино]-3-пиридинкарбоксамид, описанный в публикации согласно РСТ № WO 02/066470); линфаниб (ABT869, CAS 796967-16-3); кабозантиниб (XL184, CAS 849217-68-1); лестауртиниб (CAS 111358-88-4); N-[5-[[[5-(1,1-диметилэтил)-2-оксазолил]метил]тио]-2-тиазолил]-4-пиперидинкарбоксамид (BMS38703, CAS 345627-80-7); (3R, 4R)-4-амино-1-((4-((3-метоксифенил)амино)пирроло[2,1-е][1,2,4]триазин-5-ил)метил)пиперидин-3-ол (BMS690514); N-(3,4-дихлор-2-фторфенил)-6-метокси-7-[[(3aα,5β,6aα)октагидро-2-метилциклопента[c]пиррол-5-ил]метокси]-4-хиназолинамин (XL647, CAS 781613-23-8); 4-метил-3-[[1-метил-6-(3-пиридинил)-1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-ил]амино]-N-[3-(трифторметил)фенил]-бензамид (BHG712, CAS 940310-85-0); афлиберцепт (EYLEA®) и эндостатин (ENDOSTAR®).

Иллюстративные антитела к VEGF, которые можно применять в раскрытых в данном документе комбинациях, включают, например, моноклональное антитело, которое связывается с тем же эпитопом, что и моноклональное антитело к VEGF A4.6.1, полученное из гибридомы ATCC HB 10709; рекомбинантное гуманизированное моноклональное антитело к VEGF, полученное в соответствии с Presta et al. (1997) Cancer Res. 57:4593-4599. В одном варианте осуществления антитело к VEGF представляет собой бевацизумаб (BV), также известный как rhuMAb VEGF или AVASTIN®. Он содержит мутированные каркасные области человеческого IgG1 и антигенсвязывающие определяющие комплементарность области из мышиного моноклонального антитела к hVEGF A.4.6.1, которое блокирует связывание VEGF человека с его рецепторами. Бевацизумаб и другие гуманизированные антитела к VEGF дополнительно описаны в патенте США № 6884879, поданном 26 февраля 2005 г. Дополнительные антитела включают антитела серии G6 или B20 (например, G6-31, B20-4.1), описанные в публикации согласно РСТ № WO2005/012359, публикации согласно РСТ № WO2005/044853, содержание этих патентных заявок явным образом включено в настоящий документ посредством ссылки. Для рассмотрения дополнительных антител см. патенты США №№ 7060269, 6582959, 6703020, 6054297, WO98/45332, WO 96/30046, WO94/10202, EP 0666868B1, публикации заявок на патент США № 2006/009360, 2005/0186208, 2003/0206899, 2003/0190317, 2003/0203409 и 2005/0112126; и Popkov et al, Journal of Immunological Methods 288: 149-164 (2004). Другие антитела включают антитела, которые связываются с функциональным эпитопом на VEGF человека, содержащим остатки F17, Ml 8, D19, Y21, Y25, Q89, 191, Kl 01, El 03 и C104 или, альтернативно, содержащим остатки F17, Y21, Q22 Y25, D63, 183 и Q89.

Иллюстративные ингибиторы c-MET

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с ингибитором c-MET. В некоторых вариантах осуществления комбинацию применяют для лечения рака, например, рака, описанного в данном документе, например, солидной опухоли (например, немелкоклеточного рака легкого, рака поджелудочной железы, рака печени, рака щитовидной железы (например, анапластической карциномы щитовидной железы), опухоли головного мозга (например, глиобластомы), рака почки (например, почечно-клеточной карциномы) или рака головы и шеи (например, плоскоклеточной карциномы головы и шеи). В определенных вариантах осуществления рак представляет собой рак печени, например, гепатоцеллюлярную карциному (HCC) (например, HCC с экспрессией c-MET).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-MET представляет собой соединение A17 или соединение, описанное в патентах США №№ 7767675 и 8420645).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-MET представляет собой JNJ-38877605. JNJ-38877605 представляет собой доступный для перорального применения низкомолекулярный ингибитор c-Met. JNJ-38877605 избирательно связывается с c-MET, тем самым ингибируя фосфорилирование c-MET и нарушая пути передачи сигнала с участием c-Met.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-Met представляет собой AMG 208. AMG 208 является избирательным низкомолекулярным ингибитором c-MET. AMG 208 ингибирует лиганд-зависимую и лиганд-независимую активацию c-MET, ингибируя его тирозинкиназную активность, что может приводить к подавлению роста клеток в опухолях, которые сверхэкспрессируют c-Met.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-Met представляет собой AMG 337. AMG 337 является биодоступным при пероральном применении ингибитором c-Met. AMG 337 избирательно связывается с c-MET, тем самым нарушая пути передачи сигнала с участием c-MET.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-Met представляет собой LY2801653. LY2801653 представляет собой доступный для перорального применения низкомолекулярный ингибитор c-Met. LY2801653 избирательно связывается с c-MET, тем самым ингибируя фосфорилирование c-MET и нарушая пути передачи сигнала с участием c-Met.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-Met представляет собой MSC2156119J. MSC2156119J является биодоступным при пероральном применении ингибитором c-Met. MSC2156119J избирательно связывается с c-MET, что ингибирует фосфорилирование c-MET и нарушает пути передачи сигнала, опосредованные c-Met.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-MET представляет собой капматиниб. Капматиниб также известен как INCB028060. Капматиниб является биодоступным при пероральном применении ингибитором c-MET. Капматиниб избирательно связывается с c-Met, тем самым ингибируя фосфорилирование c-Met и нарушая пути передачи сигнала с участием c-Met.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-MET представляет собой кризотиниб. Кризотиниб также известен как PF-02341066. Кризотиниб является доступным при пероральном применении ингибитором рецепторной тирозинкиназы киназы анапластической лимфомы (ALK) и рецептора фактора роста c-Met/гепатоцитов (HGFR) на основе аминопиридина. Кризотиниб ATP-конкурентным способом связывается и ингибирует ALK-киназу и слитые белки на основе ALK. Кроме того, кризотиниб ингибирует киназу c-Met и нарушает путь передачи сигнала с участием c-Met. В целом, это средство подавляет рост опухолевых клеток.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-MET представляет собой голватиниб. Голватиниб является биодоступным при пероральном применении двойным ингибитором киназ c-MET и VEGFR-2 с потенциальной противоопухолевой активностью. Голватиниб связывается и ингибирует активность как c-MET, так и VEGFR-2, что может подавлять рост опухолевых клеток и выживание опухолевых клеток, которые сверхэкспрессируют эти рецепторные тирозинкиназы.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-MET представляет собой тивантиниб. Тивантиниб также известен как ARQ 197. Тивантиниб является биодоступным при пероральном применении низкомолекулярным ингибитором c-MET. Тивантиниб связывается с белком c-MET и нарушает пути передачи сигнала с участием c-Met, что может вызывать клеточную гибель в опухолевых клетках, сверхэкспрессирующих белок c-MET или конститутивно экспрессирующих активированный белок c-Met.

Иллюстративные ингибиторы IAP

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с ингибитором ингибитора белка апоптоза (IAP). В некоторых вариантах осуществления комбинацию применяют для лечения рака, например, рака, описанного в данном документе, например, солидной опухоли (например, колоректального рака (CRC), рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого (NSCLC)), рака молочной железы (например, трижды негативного рака молочной железы (TNBC)), рака яичника или рака поджелудочной железы), например гематологического злокачественного новообразования (например, множественной миеломы).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор IAP представляет собой (S)-N-((S)-1-циклогексил-2-((S)-2-(4-(4-фторбензоил)тиазол-2-ил)пирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)-2-(метиламино)пропанамид (соединение A21) или соединение, раскрытое в патенте США № 8552003.

В некоторых вариантах осуществления комбинация, описанная в данном документе, содержит ингибитор IAP, (S)-N-((S)-1-циклогексил-2-((S)-2-(4-(4-фторбензоил)тиазол-2-ил))пирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)-2-(метиламино)пропанамид (соединение А21) или соединение, раскрытое в патенте США № 8552003, и ингибитор молекулы, представляющей собой контрольную точку иммунного ответа, например, ингибитор CD73 (например, молекулу антитела к CD73).

Иллюстративные ингибиторы EGFR

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с ингибитором рецептора эпидермального фактора роста (EGFR). В некоторых вариантах осуществления комбинацию применяют для лечения рака, например, рака, описанного в данном документе, например, солидной опухоли (например, рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого), рака поджелудочной железы, рака молочной железы (например, трижды негативного рака молочной железы (TNBC)) или рака толстой кишки). В определенных вариантах осуществления рак выбран из колоректального рака (например, колоректального рака с микросателлитной стабильностью (MSS CRC)), рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого) или рака молочной железы (например, трижды негативного рака легкого (TNBC)).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор EGFR представляет собой (R, E)-N-(7-хлор-1-(1-(4-(диметиламино)бут-2-еноил)азепан-3-ил)-1H-бензо[d]имидазол-2-ил)-2-метилизоникотинамид (соединение A40) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2013/184757.

В некоторых вариантах осуществления комбинация, описанная в данном документе, содержит ингибитор EGFR, (R, E)-N-(7-хлор-1-(1-(4-(диметиламино)бут-2-еноил)азепан-3-ил)-1H-бензо[d]имидазол-2-ил)-2-метилизоникотинамид (соединение A40) или соединение, раскрытое в публикации согласно PCT № WO 2013/184757, и ингибитор молекулы, представляющей собой контрольную точку иммунного ответа, например, ингибитор CD73 (например, молекулу антитела к CD73).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор EGFR, (R, E)-N-(7-хлор-1-(1-(4-(диметиламино)бут-2-еноил)азепан-3-ил)-1H-бензо[d]имидазол-2-ил)-2-метилизоникотинамид (соединение А40) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2013/184757, вводят в комбинации с ингибитором CD73 (например, молекулой антитела к CD73) для лечения колоректального рака (CRC) (например, MSS-CRC), рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого (NSCLC)) или рака молочной железы (например, трижды негативного рака молочной железы (TNBC)).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор EGFR выбран из одного или нескольких из эрлотиниба, гефитиниба, цетуксимаба, панитумумаба, нецитумумаба, PF-00299804, нимотузумаба или RO5083945.

Иллюстративные ингибиторы mTOR

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с ингибитором мишени рапамицина (mTOR). В некоторых вариантах осуществления комбинацию применяют для лечения рака, например, рака, описанного в данном документе, например, солидной опухоли (например, рака предстательной железы, рака молочной железы, рака головного мозга, рака мочевого пузыря, рака поджелудочной железы, рака почки или рака печени, рака легкого (например, мелкоклеточного рака легкого или немелкоклеточного рака легкого), рака респираторного тракта/грудной клетки, саркомы, рака кости, немелкоклеточного рака легкого, эндокринного рака, астроцитомы, рака шейки матки, неврологического рака, рака ЖКТ или меланомы), например, гематологического злокачественного новообразования (например, лейкоза (например, лимфоцитарного лейкоза), например, лимфомы, или, например, множественной миеломы). В определенных вариантах осуществления рак выбран из колоректального рака (например, колоректального рака с микросателлитной стабильностью (MSS CRC)), рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого) или рака молочной железы (например, трижды негативного рака легкого (TNBC)).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор mTOR представляет собой 8-(6-метоксипиридин-3-ил)-3-метил-1-(4-пиперазин-1-ил-3-трифторметилфенил)-1,3-дигидроимидазо[4,5-с]хинолин-2-он (соединение А41).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор mTOR представляет собой эверолимус (также известный как AFINITOR®; соединение A36) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2014/085318.

В некоторых вариантах осуществления комбинация, описанная в данном документе, содержит ингибитор mTOR, эверолимус (соединение A36) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2014/085318, и ингибитор молекулы, представляющей собой контрольную точку иммунного ответа, например, ингибитор CD73 (например, молекулу антитела к CD73).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор mTOR, эверолимус (соединение A36) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2014/085318, вводят в комбинации с ингибитором CD73 (например, молекулой антитела к CD73) для лечения колоректального рака, рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого (NSCLC)) или рака молочной железы (например, трижды негативного рака молочной железы (NTBC)).

В некоторых вариантах ингибитор mTOR выбран из одного или нескольких из рапамицина, темсиролимуса (TORISEL®), AZD8055, BGT226, XL765, PF-4691502, GDC0980, SF1126, OSI-027, GSK1059615, KU-0063794, WYE-354, паломида 529 (P529), PF-04691502 или PKI-587, ридафоролимуса (официально известного как деферолимус, (1R,2R,4S)-4-[(2R)-2[(1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28Z,30S,32S,35R)-1,18-дигидрокси-19,30-диметокси-15,17,21,23,29,35-гексаметил-2,3,10,14,20-пентаоксо-11,36-диокса-4-азатрицикло[30.3.1.04,9] гексатриаконта-16,24,26,28-тетраен-12-ил] пропил]-2-метоксициклогексилдиметилфосфината, также известного как AP23573 и MK8669 и описанного в публикации согласно РСТ № WO 03/064383); эверолимуса (AFINITOR® или RAD001); рапамицина (AY22989, SIROLIMUS®); симапимода (регистрационный номер CAS: 164301-51-3); (5-{2,4-бис[(3S)-3-метилморфолин-4-ил]пиридо[2,3-d]пиримидин-7-ил}-2-метоксифенил)метанола (AZD8055); 2-амино-8-[транс-4-(2-гидроксиэтокси)циклогексил]-6-(6-метокси-3-пиридинил)-4-метил-пиридо[2,3-d]пиримидин-7(8Н)-она (PF04691502, регистрационный номер CAS: 1013101-36-4); N2-[1,4-диоксо-4-[[4-(4-оксо-8-фенил-4H-1-бензопиран-2-ил)морфолиний-4-ил]метокси]бутил]-L-аргинилглицил-L-α-аспартил-L-серина (SEQ ID NO: 176) в форме внутренней соли (SF1126, регистрационный номер CAS: 936487-67-1) или XL765 (SAR245409).

Другие иллюстративные ингибиторы mTOR включают без ограничения темсиролимус; ридафоролимус (1R,2R,4S)-4-[(2R)-2-[(1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28Z,30S,32S,35R)-1,18-дигидрокси-19,30-диметокси-15,17,21,23,29,35-гексаметил-2,3,10,14,20-пентаоксо-11,36-диокса-4-азатрицикло[30,3,1,0^4,9]гексатриаконта-16,24,26,28-тетраен-12-ил]пропил]-2-метоксициклогексиладиметилфосфинат, также известный как AP23573 и MK8669; эверолимус (RAD001); рапамицин (AY22989); симапимод; (5-{2,4-бис[(3S)-3-метилморфолин-4-ил]пиридо[2,3-d]пиримидин-7-ил}-2-метоксифенил)метанол (AZD8055); 2-амино-8-[транс-4-(2-гидроксиэтокси)циклогексил]-6-(6-метокси-3-пиридинил)-4-метилпиридо[2,3-d]пиримидин-7(8H)-он (PF04691502) и N²-[1,4-диоксо-4-[[4-(4-оксо-8-фенил-4H-1-бензопиран-2-ил)морфолиний-4-ил]метокси]бутил]-L-аргинилглицил-L-α-аспартил-L-серин- (SEQ ID NO: 176), внутреннюю соль (SF1126); и XL765.

Иллюстративные ингибиторы PI3K-γ, -δ

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с ингибитором фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфат-3-киназы (PI3K), например, фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфат-3-киназы гамма и/или дельта (PI3K-γ,δ). В некоторых вариантах осуществления комбинацию применяют для лечения рака, например, рака, описанного в данном документе, например, солидной опухоли (например, рака предстательной железы, рака молочной железы, рака головного мозга, рака мочевого пузыря, рака поджелудочной железы, рака почки, солидной опухоли, рака печени, немелкоклеточного рака легкого, эндокринного рака, рака яичника, меланомы, рака женской репродуктивной системы, рака пищеварительного/желудочно-кишечного тракта, мультиформной глиобластомы, рака головы и шеи или рака толстой кишки), например, гематологического злокачественного новообразования (например, лейкоза (например, лимфоцитарного лейкоза, например, хронического лимфоцитарного лейкоза (CLL) (например, рецидивирующего CLL)), например, лимфомы (например, неходжкинской лимфомы (например, рецидивирующей фолликулярной В-клеточной неходжкинской лимфомы (FL) или рецидивирующей мелкоклеточной лимфоцитарной лимфомы (SLL)) или, например, множественной миеломы).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор PI3K представляет собой ингибитор дельта- и гамма-изоформ PI3K. Иллюстративные ингибиторы PI3K, которые можно применять в комбинации, описаны, например, в WO 2010/036380, WO 2010/006086, WO 09/114870, WO 05/113556, GSK 2126458, GDC-0980, GDC-0941, Sanofi XL147, XL756, XL147, PF-46915032, BKM 120, CAL-101, CAL 263, SF1126, PX-886 и двойной ингибитор PI3K.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор PI3K-γ,δ представляет собой иделалисиб (регистрационный номер CAS: 870281-82-6). Иделалисиб также известен как ZYDELIG®, GS-1101, CAL-101 или 5-фтор-3-фенил-2-[(1S)-1-(7H-пурин-6-иламино)пропил]-4(3H)-хиназолинон. Иделалисиб блокирует P110δ, дельта-изоформу PI3K. Иделалисиб раскрыт, например, в Wu et al. Journal of Hematology & Oncology (2013) 6: 36.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор PI3K-γ,δ представляет собой 8-(6-метоксипиридин-3-ил)-3-метил-1-(4-пиперазин-1-ил-3-трифторметилфенил)-1,3-дигидроимидазо[4,5-с]хинолин-2-он (соединение А41).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор PI3K-γ,δ представляет собой бупарлизиб (соединение A6) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2007/084786.

Другие иллюстративные ингибиторы PI3K-γ,δ, которые можно применять в комбинации, включают, например, пиктилизиб (GDC-0941), LY294002, пиларализиб (XL147), PI-3065, PI-103, VS-5584 (SB2343), CZC24832, дувелисиб (IPI-145, INK1197), TG100-115, CAY10505, GSK1059615, PF-04691502, AS-605240, воксталисиб (SAR245409, XL765), IC-87114, омипалисиб (GSK2126458, GSK458), TG100713, гедатолисиб (PF-05212384, PKI-587), аналог PKI-402, XL147, PIK-90, PIK-293, PIK-294, 3-метиладенин (3-MA), AS-252424, AS-604850 или апитолисиб (GDC-0980, RG7422).

В некоторых вариантах осуществления ингибитор PI3K представляет собой соединение A8 или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO2010/029082.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор PI3K представляет собой ингибитор всех форм PI3K, (4S,5R)-3-(2'-амино-2-морфолино-4'-(трифторметил)-[4,5'-бипиримидин]-6-ил)-4-(гидроксиметил)-5-метилоксазолидин-2-он (соединение A13) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO2013/124826.

Иллюстративные ингибиторы PI3K-γ,-δ включают без ограничения дувелисиб и иделалисиб. Иделалисиб (также называемый GS-1101 или CAL-101; Gilead) представляет собой малую молекулу, которая блокирует дельта-изоформу PI3K. Структура иделалисиба (5-фтор-3-фенил-2-[(1S)-1-(7H-пурин-6-иламино)пропил]-4(3H)-хиназолинона) показана ниже.

Дувелисиб (также называемый IPI-145; Infinity Pharmaceuticals and Abbvie) представляет собой малую молекулу, которая блокирует PI3K-δ,γ. Структура дувелисиба (8-хлор-2-фенил-3-[(1S)-1-(9H-пурин-6-иламино)этил]-1(2H)-изохинолинона) показана ниже.

В одном варианте осуществления ингибитор представляет собой двойной ингибитор фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3K) и mTOR, выбранный из 2-амино-8-[транс-4-(2-гидроксиэтокси)циклогексил]-6-(6-метокси-3-пиридинил)-4-метилпиридо[2,3-d]пиримидин-7(8H)-она (PF-04691502); N-[4-[[4-(диметиламино)-1-пиперидинил]карбонил]фенил]-N'-[4-(4,6-ди-4-морфолинил-1,3,5-триазин-2-ил)фенил]мочевины (PF-05212384, PKI-587); апитолисиба (GDC-0980, RG7422); 2,4-дифтор-N-{2-(метилокси)-5-[4-(4-пиридазинил)-6-хинолинил]-3-пиридинил}бензолсульфонамида (GSK2126458); 8-(6-метоксипиридин-3-ил)-3-метил-1-(4-(пиперазин-1-ил)-3-(трифтометил)фенил)-1H-имидазо[4,5-c]хинолин-2(3H)-она малеиновой кислоты (NVP-BGT226); 3-[4-(4-морфолинилпиридо[3',2':4,5]фуро[3,2-d]пиримидин-2-ил]фенола (PI-103); 5-(9-изопропил-8-метил-2-морфолино-9H-пурин-6-ил)пиримидин-2-амина (VS-5584, SB2343) или N-[2-[(3,5-диметоксифенил)амино]хиноксалин-3-ил]-4-[(4-метил-3-метоксифенил)карбонил]аминофенилсульфонамида (XL765).

Иллюстративные ингибиторы JAK

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, вводят в комбинации с ингибитором Янус-киназы (JAK). В некоторых вариантах осуществления комбинацию применяют для лечения рака, например, рака, описанного в данном документе, например, солидной опухоли (например, рака толстой кишки, рака предстательной железы, рака легкого, рака молочной железы или рака поджелудочной железы), например, гематологического злокачественного новообразования (например, лейкоза (например, миелоидного лейкоза или лимфоцитарного лейкоза), например, лимфомы (например, неходжкинской лимфомы), или множественной миеломы.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор JAK представляет собой 2-фтор-N-метил-4-(7-(хинолин-6-илметил)имидазо[1,2-b][1,2,4]триазин-2-ил)бензамид (соединение A17) или его дигидрохлоридную соль или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2007/070514.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор JAK представляет собой руксолитиниба фосфат (также известный как JAKAFI; соединение A18) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2007/070514.

Иллюстративные средства клеточной терапии

Молекулы антитела к CD73 также можно объединять со средством клеточной терапии, например, терапией на основе химерного антигенного рецептора (CAR), терапией на основе T-клеток, терапией на основе естественных клеток-киллеров (NK) или терапией на основе дендритных клеток.

Комбинации со средствами терапии на основе CAR

Молекулы антитела к CD73, описанные в данном документе, можно вводить в комбинации со вторым терапевтическим средством, например, клеткой, содержащей химерный антигенный рецептор (CAR). CAR может содержать i) внеклеточный антигенсвязывающий домен, ii) трансмембранный домен и iii) внутриклеточный сигнальный домен (который может содержать один или оба из первичного сигнального домена и костимулирующего домена). CAR может дополнительно содержать лидерную последовательность и/или шарнирную последовательность. В конкретных вариантах осуществления конструкция на основе CAR содержит домен scFv, где scFv может предшествовать необязательная лидерная последовательность, а за ним могут следовать необязательная шарнирная последовательность, трансмембранная область и внутриклеточный сигнальный домен, например, где домены являются смежными и находятся в одной и той же рамке считывания с образованием единого слитого белка.

В некоторых вариантах осуществления молекула CAR предусматривает молекулу CAR для CD19, описанную в данном документе, например, молекулу CAR для CD19, описанную в US 2015/0283178, например, CTL019. В вариантах осуществления CAR для CD19 содержит аминокислотную или имеет нуклеотидную последовательность, представленную в US 2015/0283178, полностью включенном в настоящий документ посредством ссылки, или последовательность, по сути идентичную ей (например, последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90% или 95% идентичностью последовательности с ней).

В одном варианте осуществления Т-клетка с CAR, которая связывается с CD19, имеет обозначение согласно USAN TISAGENLECLEUCEL-T. CTL019 получают посредством генной модификации T-клеток, опосредованной стабильной вставкой путем трансдукции с помощью самоинактивирующегося лентивирусного (LV) вектора, дефектного по репликации, содержащего трансген CTL019 под контролем промотора EF-1 альфа. CTL019 может представлять собой смесь положительных и отрицательных по трансгену Т-клеток, которые доставляют субъекту из расчета процентного количества положительных по трансгену Т-клеток.

В одном варианте осуществления CAR для CD19 содержит аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 12 в публикации согласно PCT WO2012/079000. В варианте осуществления аминокислотная последовательность представляет собой:

MALPVTALLLPLALLLHAARPdiqmtqttsslsaslgdrvtiscrasqdiskylnwyqqkpdgtvklliyhtsrlhsgvpsrfsgsgsgtdysltisnleqediatyfcqqgntlpytfgggtkleitggggsggggsggggsevklqesgpglvapsqslsvtctvsgvslpdygvswirqpprkglewlgviwgsettyynsalksrltiikdnsksqvflkmnslqtddtaiyycakhyyyggsyamdywgqgtsvtvsstttpaprpptpaptiasqplslrpeacrpaaggavhtrgldfacdiyiwaplagtcgvlllslvitlyckrgrkkllyifkqpfmrpvqttqeedgcscrfpeeeeggcelrvkfsrsadapaykqgqnqlynelnlgrreeydvldkrrgrdpemggkprrknpqeglynelqkdkmaeayseigmkgerrrgkghdglyqglstatkdtydalhmqalppr (SEQ ID NO: 132) или последовательность, по сути идентичную ей (например, последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90% или 95% идентичностью), с последовательностью сигнального пептида или без нее, которая указана заглавными буквами.

В одном варианте осуществления аминокислотная последовательность представляет собой:

diqmtqttsslsaslgdrvtiscrasqdiskylnwyqqkpdgtvklliyhtsrlhsgvpsrfsgsgsgtdysltisnleqediatyfcqqgntlpytfgggtkleitggggsggggsggggsevklqesgpglvapsqslsvtctvsgvslpdygvswirqpprkglewlgviwgsettyynsalksrltiikdnsksqvflkmnslqtddtaiyycakhyyyggsyamdywgqgtsvtvsstttpaprpptpaptiasqplslrpeacrpaaggavhtrgldfacdiyiwaplagtcgvlllslvitlyckrgrkkllyifkqpfmrpvqttqeedgcscrfpeeeeggcelrvkfsrsadapaykqgqnqlynelnlgrreeydvldkrrgrdpemggkprrknpqeglynelqkdkmaeayseigmkgerrrgkghdglyqglstatkdtydalhmqalppr (SEQ ID NO: 133), или последовательность, по сути гомологичную ей (например, последовательность, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90% или 95% идентичностью последовательности с ней).

Антигенсвязывающий домен химерного антигенного рецептора (CAR)

Антигенсвязывающий домен может представлять собой любой домен, который связывается с антигеном, в том числе без ограничения моноклональное антитело, поликлональное антитело, рекомбинантное антитело, антитело человека, гуманизированное антитело и их функциональный фрагмент, в том числе без ограничения однодоменное антитело, такое как вариабельный домен тяжелой цепи (VH), вариабельный домен легкой цепи (VL) и вариабельный домен (VHH) нанотела, полученного от верблюдовых, а также альтернативную каркасную структуру, которая, как известно из уровня техники, функционирует в качестве антигенсвязывающего домена, такую как рекомбинантный фибронектиновый домен, T-клеточный рецептор (TCR) или его фрагмент, например, одноцепочечный TCR и т. п. В некоторых случаях целесообразно, чтобы антигенсвязывающий домен был получен из того же вида, в организме которого в конечном итоге будут применять CAR. Например, для применения у людей может быть целесообразно, чтобы антигенсвязывающий домен CAR содержал человеческие или гуманизированные остатки в антигенсвязывающем домене антитела или фрагмента антитела.

В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий домен CAR представляет собой scFv-фрагмент антитела, которое является гуманизированным по сравнению с мышиной последовательностью scFv, из которой он получен.

В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий домен связывается с опухолевым антигеном, описанным в данном документе. В вариантах осуществления опухолевый антиген выбран из CD19; CD123; CD22; CD30; CD171; CS-1 (также называемого CD2 подгруппы 1, CRACC, SLAMF7, CD319 и 19A24); лектиноподобной молекулы 1 С-типа (CLL-1 или CLECL1); CD33; варианта III рецептора эпидермального фактора роста (EGFRvIII); ганглиозида G2 (GD2); ганглиозида GD3 (aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer); антигена созревания В-клеток (BCMA), являющегося представителем семейства рецепторов TNF; Tn-антигена ((Tn-Ag) или (GalNAcα-Ser/Thr)); простатического специфического мембранного антигена (PSMA); орфанного рецептора 1, подобного тирозинкиназному рецептору (ROR1); Fms-подобной тирозинкиназы 3 (FLT3); опухолеассоциированного гликопротеина 72 (TAG72); CD38; CD44v6; раково-эмбрионального антигена (СЕА); молекулы адгезии эпителиальных клеток (ЕРСАМ); В7Н3 (CD276); KIT (CD117); альфа-2-субъединицы рецептора интерлейкина-13 (IL-13Ra2 или CD213A2); мезотелина; альфа-субъединицы рецептора интерлейкина 11 (IL-11Ra); антигена стволовых клеток предстательной железы (PSCA); сериновой протеазы 21 (тестизина или PRSS21); рецептора 2 фактора роста эндотелия сосудов (VEGFR2); антигена системы Льюис (Y); CD24; рецептора фактора роста тромбоцитов бета-типа (PDGFR-бета); стадиеспецифического эмбрионального антигена 4 (SSEA-4); CD20; рецептора фолиевой кислоты альфа; рецепторной тирозинпротеинкиназы ERBB2 (Her2/neu); муцина 1, ассоциированного с клеточной поверхностью (MUC1); рецептора эпидермального фактора роста (EGFR); молекулы адгезии нервных клеток (NCAM); простазы; простатической кислой фосфатазы (РАР); мутантного фактора элонгации 2 (ELF2M); эфрина В2; белка активации фибробластов альфа (FAP); рецептора инсулиноподобного фактора роста 1 (рецептора IGF-I), карбоангидразы IX (CAIX); субъединицы бета-типа 9 протеасомы (просомы, мультикаталитической протеазы) (LMP2); гликопротеина 100 (gp100); онкогенного слитого белка, состоящего из кластерного региона точечных разрывов (BCR) и гомолога 1 онкогена вируса лейкоза мышей Абельсона (Abl) (bcr-abl); тирозиназы; рецептора 2 эфрина А-типа (EphA2); фукозил-GM1; молекулы адгезии, представляющей собой сиалилированный антиген системы Льюис (sLe); ганглиозида GM3 (aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-4)bDGlcp(1-1)Cer); трансглутаминазы 5 (TGS5); высокомолекулярного антигена, ассоциированного с меланомой (HMWMAA); ганглиозида о-ацетил-GD2 (OAcGD2); рецептора фолиевой кислоты бета; опухолевого эндотелиального маркера 1 (TEM1/CD248); антигена, родственного опухолевому эндотелиальному маркеру 7 (TEM7R); клаудина 6 (CLDN6); рецептора тиреотропного гормона (TSHR); представителя D группы 5 класса С рецепторов, сопряженных с G-белками (GPRC5D); белка, кодируемого открытой рамкой считывания 61 X-хромосомы (CXORF61); CD97; CD179a; киназы анапластической лимфомы (ALK); полисиаловой кислоты; плацентоспецифического белка 1 (PLAC1); гексасахаридной части гликоцерамида globoH (GloboH); дифференцировочного антигена молочной железы (NY-BR-1); уроплакина 2 (UPK2); клеточного рецептора 1 вируса гепатита A (HAVCR1); бета-3-адренорецептора (ADRB3); паннексина 3 (PANX3); рецептора 20, сопряженного с G-белком (GPR20); антигена локуса K9 комплекса лимфоцитарных антигенов 6 (LY6K); обонятельного рецептора 51Е2 (OR51E2); белка, кодируемого альтернативной рамкой считывания гена TCR-гамма (TARP); белка опухоли Вильмса (WT1); раково-тестикулярного антигена 1 (NY-ESO-1); раково-тестикулярного антигена 2 (LAGE-1a); антигена 1, ассоциированного с меланомой (MAGE-A1); белка, кодируемого транслокационным вариантом 6 гена ETS, локализованным в р-плече 12 хромосомы (ETV6-AML); белка сперматозоидов 17 (SPA17); представителя 1А семейства X-антигенов (XAGE1); ангиопоэтин-связывающего рецептора клеточной поверхности 2 (TIE-2); раково-тестикулярного антигена меланомы 1 (MAD-CT-1); раково-тестикулярного антигена меланомы 2 (MAD-CT-2); Fos-родственного антигена 1; опухолевого белка р53 (р53); мутантного р53; простеина; сурвивина; теломеразы; опухолевого антигена 1 карциномы предстательной железы (РСТА-1 или галектина 8), антигена меланомы 1, распознаваемого Т-клетками (MelanA или MART1); мутантного антигена саркомы крыс (Ras); обратной транскриптазы теломеразы человека (hTERT); антигенов саркомы с точечными разрывами при транслокации; меланомного ингибитора апоптоза (ML-IAP); ERG (продукта слитого гена трансмембранной сериновой протеазы 2 (™PRSS2) и ETS); N-ацетилглюкозаминилтрансферазы V (NA17); белка с парным box-доменом Рах-3 (РАХЗ); андрогенового рецептора; циклина В1; нейробластомного гомолога онкогена вируса миелоцитоматоза птиц v-myc (MYCN); представителя С семейства гомологов Ras (RhoC); белка 2, родственного тирозиназе (TRP-2); цитохрома Р450 1В1 (CYP1B1); антигена, подобного CCCTC-связывающему фактору (белку с "цинковыми пальцами") (BORIS или Brother of the Regulator of Imprinted Sites), антигена плоскоклеточной карциномы 3, распознаваемого Т-клетками (SART3); белка с парным box-доменом Рах-5 (РАХ5); проакрозин-связывающего белка sp32 (OY-TES1); лимфоцитоспецифической протеинтирозинкиназы (LCK); якорного белка 4 киназы A (AKAP-4); антигена 2 синовиальной саркомы с точечным разрывом в X-хромосоме (SSX2); рецептора конечных продуктов гликирования (RAGE-1); почечного убиквитарного белка 1 (RU1); почечного убиквитарного белка 2 (RU2); легумаина; Е6 вируса папилломы человека (Е6 HPV); Е7 вируса папилломы человека (Е7 HPV); кишечной карбоксилэстеразы; мутантного белка теплового шока 70-2 (mut-hsp70-2); CD79a; CD79b; CD72; иммуноглобулиноподобного рецептора 1, ассоциированного с лейкоцитами (LAIR1); рецептора Fc-фрагмента IgA (FCAR или CD89); представителя 2 подсемейства А лейкоцитарных иммуноглобулиноподобных рецепторов (LILRA2); представителя f семейства белков, подобных молекулам CD300 (CD300LF); представителя А семейства 12 лектиновых доменов С-типа (CLEC12A); антигена 2 стромальных клеток костного мозга (BST2); антигена 2, подобного муциноподобному рецептору гормона, содержащего EGF-подобный модуль (EMR2); лимфоцитарного антигена 75 (LY75); глипикана 3 (GPC3); антигена 5, подобного Fc-рецептору (FCRL5); и полипептида 1, подобного иммуноглобулину лямбда (IGLL1).

В одном варианте осуществления молекула CAR предусматривает молекулу CAR для BCMA, например, CAR для BCMA, описанную в US 2016/0046724 или WO 2016/014565, включенных в настоящий документ посредством ссылки. В вариантах осуществления CAR для BCMA содержит аминокислотную последовательность или имеет нуклеотидную последовательность молекулы CAR или антигенсвязывающий домен в соответствии с US 2016/0046724 или таблицей 1 или 16, SEQ ID NO: 271 или SEQ ID NO: 273 из WO 2016/014565, включенной в настоящий документ посредством ссылки, или последовательность, по сути идентичную любой из вышеупомянутых последовательностей (например, характеризующуюся по меньшей мере приблизительно 85%, 90% или 95% идентичностью последовательности с любой из вышеупомянутых последовательностей CAR для BCMA). Аминокислотные последовательности молекул CAR для BCMA и антигенсвязывающих доменов (например, содержащих одну, две, три CDR VH и одну, две, три CDR VL по Kabat или Chothia) и нуклеотидные последовательности, кодирующие их, указаны в WO 2016/014565.

Трансмембранный домен химерного антигенного рецептора (CAR)

Что касается трансмембранного домена, в различных вариантах осуществления CAR можно разработать так, чтобы он содержал трансмембранный домен, присоединенный к внеклеточному домену CAR.

Трансмембранный домен можно получить либо из природного, либо из рекомбинантного источника. Если источник является природным, домен можно получить из любого мембраносвязанного или трансмембранного белка. В одном аспекте трансмембранный домен способен передавать сигнал внутриклеточному(-ым) домену(-ам) всякий раз, когда CAR связывается с мишенью. Трансмембранный домен может включать по меньшей мере трансмембранную(-ые) область(-и), например, альфа-, бета или дзета-цепи Т-клеточного рецептора, CD28, CD27, CD3-эпсилон, CD45, CD4, CD5, CD8, CD9, CD16, CD22, CD33, CD37, CD64, CD80, CD86, CD134, CD137, CD154. В некоторых вариантах осуществления трансмембранный домен может включать по меньшей мере трансмембранную(трансмембранные) область(области), например, KIRDS2, OX40, CD2, CD27, LFA-1 (CD11a, CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD40, BAFFR, HVEM (LIGHTR), SLAMF7, NKp80 (KLRF1), NKp44, NKp30, NKp46, CD160, CD19, IL2R-бета, IL2R-гамма, IL7R α, ITGA1, VLA1, CD49a, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, CD11d, ITGAE, CD103, ITGAL, CD11a, LFA-1, ITGAM, CD11b, ITGAX, CD11c, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA-1, ITGB7, TNFR2, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96 (Tactile), CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), SLAMF6 (NTB-A, Ly108), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD162), LTBR, PAG/Cbp, NKG2D или NKG2C.

В некоторых случаях трансмембранный домен может быть присоединен к внеклеточной области CAR, например, антигенсвязывающему домену CAR, с помощью шарнирной области, например, шарнирной области из белка человека. Например, в одном варианте осуществления шарнирная область может представлять собой шарнирную область Ig (иммуноглобулина) человека (например, шарнирную область IgG4, шарнирную область IgD), линкер GS (например, линкер GS, описанный в данном документе), шарнирную область KIR2DS2 или шарнирную область CD8a.

Внутриклеточный сигнальный домен химерного антигенного рецептора (CAR)

Цитоплазматический домен или область CAR включает внутриклеточный сигнальный домен. Внутриклеточный сигнальный домен обычно отвечает за активацию по меньшей мере одной из нормальных эффекторных функций иммунной клетки, в которую был введен CAR.

Примеры внутриклеточных сигнальных доменов для применения в CAR включают цитоплазматические последовательности Т-клеточного рецептора (TCR) и корецепторов, которые действуют совместно, инициируя передачу сигнала после привлечения антигенного рецептора, и любое производное или вариант этих последовательностей и любую рекомбинантную последовательность, которая обладает такими же функциональными возможностями.

Первичный сигнальный домен регулирует первичную активацию комплекса TCR либо стимулирующим образом, либо ингибирующим образом. Первичные внутриклеточные сигнальные домены, которые действуют стимулирующим образом, могут содержать сигнальные мотивы, известные как иммунорецепторные тирозиновые активирующие мотивы или ITAM.

Примеры первичных внутриклеточных сигнальных доменов, содержащих ITAM, включают домены CD3-дзета, общей гамма-цепи FcR (FCER1G), Fc-гамма RIIa, FcR-бета (Fc-эпсилон R1b), CD3-гамма, CD3-дельта, CD3-эпсилон, CD79a, CD79b, DAP10 и DAP12. В одном варианте осуществления CAR содержит внутриклеточный сигнальный домен, например, первичный сигнальный домен CD3-дзета.

Внутриклеточный сигнальный домен CAR может содержать сигнальный домен CD3-дзета в отдельности или в комбинации с любым(любыми) другим(другими) необходимым(необходимыми) внутриклеточным(внутриклеточными) сигнальным(сигнальными) доменом(доменами), применимым(применимыми) в качестве составной части CAR по настоящему изобретению. Например, внутриклеточный сигнальный домен CAR может содержать часть дзета-цепи CD3 и костимулирующий сигнальный домен. Костимулирующий сигнальный домен относится к части CAR, содержащей внутриклеточный домен костимулирующей молекулы. Костимулирующая молекула представляет собой молекулу клеточной поверхности, отличную от антигенного рецептора или его лигандов, которая необходима для эффективного ответа лимфоцитов на антиген. Примеры таких молекул включают CD27, CD28, 4-1BB (CD137), OX40, CD30, CD40, PD-1, ICOS, антиген 1, ассоциированный с функцией лимфоцитов (LFA-1), CD2, CD7, LIGHT, NKG2C, B7-H3 и лиганд, который связывается с CD83, и т. п. Например, было продемонстрировано, что костимуляция с помощью CD27 усиливает размножение, эффекторную функцию и выживание CART-клеток человека in vitro и увеличивает персистенцию и противоопухолевую активность T-клеток человека in vivo (Song et al. Blood. 2012; 119(3):696-706). Дополнительные примеры таких костимулирующих молекул включают CDS, ICAM-1, GITR, BAFFR, HVEM (LIGHTR), SLAMF7, NKp80 (KLRF1), NKp44, NKp30, NKp46, CD160, CD19, CD4, CD8-альфа, CD8-бета, IL2R-бета, IL2R-гамма, IL7R-альфа, ITGA4, VLA1, CD49a, ITGA4, IA4, CD49D, ITGA6, VLA-6, CD49f, ITGAD, CD11d, ITGAE, CD103, ITGAL, CD11a, LFA-1, ITGAM, CD11b, ITGAX, CD11c, ITGB1, CD29, ITGB2, CD18, LFA-1, ITGB7, TNFR2, TRANCE/RANKL, DNAM1 (CD226), SLAMF4 (CD244, 2B4), CD84, CD96 (Tactile), NKG2D, CEACAM1, CRTAM, Ly9 (CD229), CD160 (BY55), PSGL1, CD100 (SEMA4D), CD69, SLAMF6 (NTB-A, Ly108), SLAM (SLAMF1, CD150, IPO-3), BLAME (SLAMF8), SELPLG (CD162), LTBR, LAT, GADS, SLP-76, PAG/Cbp и CD19a.

Активация и размножение иммунных эффекторных клеток (например, T-клеток)

Иммунные эффекторные клетки, такие как Т-клетки, можно активировать и размножать, как правило, с применением способов, описанных, например, в патентах США №№ 6352694; 6534055; 6905680; 6692964; 5858358; 6887466; 6905681; 7144575; 7067318; 7172869; 7232566; 7175843; 5883223; 6905874; 6797514; 6867041 и публикации заявки на патент США № 2006/0121005, включенных в данный документ посредством ссылки

Примеры иммунных эффекторных клеток включают Т-клетки, например, альфа/бета-Т-клетки и гамма/дельта-Т-клетки, В-клетки, естественные клетки-киллеры (NK), естественные T-клетки-киллеры (NKT), тучные клетки и фагоциты миелоидного происхождения.

Способы получения CAR-экспрессирующих клеток описаны, например, в US 2016/0185861, включенном в настоящий документ посредством ссылки.

Иллюстративные противораковые вакцины

Молекулы антитела к CD73 можно объединять с иммуногенным средством, таким как раковые клетки, очищенные опухолевые антигены (в том числе рекомбинантные белки, пептиды и молекулы углеводов), клетки и клетки, трансфицированные генами, кодирующими иммуностимулирующие цитокины (He et al. (2004) J. Immunol. 173:4919-28). Неограничивающие примеры противоопухолевых вакцин, которые можно применять, включают пептиды антигенов меланомы, такие как пептиды gp100, антигены MAGE, Trp-2, MART1 и/или тирозиназу, опухолевые клетки, трансфицированные с обеспечением экспрессии цитокина GM-CSF, вакцины на основе ДНК, вакцины на основе РНК и вакцины на основе вирусной трансдукции. Противораковая вакцина может быть профилактической или терапевтической.

Блокаду CD73 можно применять в сочетании с коллекцией рекомбинантных белков и/или пептидов, экспрессируемых в опухоли, для выработки иммунного ответа на эти белки.

Другие противоопухолевые вакцины могут включать белки из вирусов, вовлеченных в виды рака человека, такие как вирусы папилломы человека (HPV), вирусы гепатита (HBV и HCV), вирус герпеса саркомы Капоши (KHSV) и вирус Эпштейна-Барр (EBV). Другой формой опухолеспецифического антигена, который можно применять в сочетании с блокадой CD73, являются очищенные белки теплового шока (HSP), выделенные из самой опухолевой ткани. Такие белки теплового шока содержат фрагменты белков из опухолевых клеток, и эти HSP очень эффективны при доставке в антигенпрезентирующие клетки для вызывания опухолевого иммунитета (Suot, R & Srivastava, P (1995) Science 269:1585-1588; Tamura, Y. et al. (1997) Science 278:117-120).

Дендритные клетки (DC) являются мощными антигенпрезентирующими клетками, которые можно применять для инициации антигенспецифических ответов. DC могут быть получены ex vivo и загружены различными белковыми и пептидными антигенами, а также экстрактами опухолевых клеток (Nestle, F. et al. (1998) Nature Medicine 4: 328-332). DC также могут быть трансдуцированы генетическим путем, чтобы также экспрессировать указанные опухолевые антигены. DC также были слиты непосредственно с опухолевыми клетками в целях иммунизации (Kugler, A. et al. (2000) Nature Medicine 6:332-336). Как способ вакцинации, иммунизацию с помощью DC можно эффективно объединять с блокадой CD73 для активации более сильных противоопухолевых ответов.

Иллюстративные онколитические вирусы

Молекулы антитела к CD73 можно вводить в комбинации с онколитическими вирусами. В вариантах осуществления онколитические вирусы способны избирательно реплицироваться в раковой клетке и вызывать ее гибель или замедление ее роста. В некоторых случаях онколитические вирусы не оказывают эффекта или оказывают минимальный эффект в отношении клеток, отличных от раковых. В некоторых вариантах осуществления комбинацию применяют для лечения рака, например, рака, описанного в данном документе. В определенных вариантах осуществления рак представляет собой рак мозга, например, глиобластому (GBM). Онколитический вирус включает без ограничения онколитический аденовирус, онколитические вирусы простого герпеса, онколитические ретровирусы, онколитические парвовирусы, онколитический вирус осповакцины, онколитический вирус Синдбис, онколитический вирус гриппа или онколитический РНК-содержащий вирус (например, онколитический реовирус, онколитический вирус болезни Ньюкасла (NDV), онколитический вирус кори или онколитический вирус везикулярного стоматита (VSV)).

Иллюстративные онколитические вирусы включают без ограничения следующие:

онколитический аденовирус группы B (ColoAd1) (PsiOxus Therapeutics Ltd.) (см., например, клиническое исследование с идентификационным номером NCT02053220);

ONCOS-102 (ранее называемый CGTG-102), который представляет собой аденовирус, содержащий гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF) (Oncos Therapeutics) (см., например, клиническое испытание с идентификационным номером NCT01598129);

VCN-01, который представляет собой генетически модифицированный онколитический аденовирус человека, кодирующий гиалуронидазу PH20 человека (VCN Biosciences, S.L.) (см., например, клинические испытание с идентификационными номерами NCT02045602 и NCT02045589);

условно-репликативный аденовирус ICOVIR-5, который представляет собой вирус, полученный из аденовируса дикого типа человека серотипа 5 (Had5), который был модифицирован для избирательной репликации в раковых клетках с нарушенной регуляцией пути ретинобластома/E2F (Institut Català d'Oncologia) (см., например, клиническое испытание с идентификационным номером NCT01864759);

Celyvir, который содержит аутологические мезенхимальные стволовые клетки, полученные из костного мозга (MSC), инфицированные ICOVIR5, онколитический аденовирус (Hospital Infantil Universitario Мадрид, Испания/Ramon Alemany) (см., например, клиническое испытание с идентификационным номером NCT01844661);

CG0070, который представляет собой условно-репликативный онколитический аденовирус серотипа 5 (Ad5), в котором промотор E2F-1 человека регулирует экспрессию важного гена вируса E1a, за счет чего обеспечивается ограничение вирусной репликации и цитотоксичности в дефектных в отношении Rb-пути опухолевых клетках (Cold Genesys, Inc.) (см., например, клиническое испытание с идентификационным номером NCT02143804); или

DNX-2401 (ранее называемый Delta-24-RGD), который представляет собой аденовирус, который был сконструирован для избирательной репликации в дефектных в отношении пути ретинобластомы (Rb) клетках и для более эффективного инфицирования клеток, которые экспрессируют определенные связывающиеся с RGD интегрины (Clinica Universidad de Navarra, Universidad de Navarra/DNAtrix, Inc.) (см., например, клиническое испытание с идентификационным номером NCT01956734).

В некоторых вариантах осуществления онколитический вирус, описанный в данном документе, вводят с помощью инъекции, например подкожной, внутриартериальной, внутривенной, внутримышечной, интратекальной или интраперитонеальной инъекций. В вариантах осуществления онколитический вирус, описанный в данном документе, вводят внутрь опухоли, трансдермально, трансмукозально, перорально, интраназально или посредством ингаляционного введения.

Дополнительные иллюстративные виды терапии рака

Иллюстративные комбинации молекул антитела к CD73 (по отдельности или в комбинации с другими стимулирующими средствами) и стандартная помощь при раке включают по меньшей мере следующее. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, например молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, применяют в комбинации со стандартным химиотерапевтическим средством для лечения рака, включающим без ограничения анастрозол (Arimidex®), бикалутамид (Casodex®), блеомицина сульфат (Blenoxane®), бусульфан (Myleran®), бусульфан для инъекций (Busulfex®), капецитабин (Xeloda®), N4-пентоксикарбонил-5-дезокси-5-фторцитидин, карбоплатин (Paraplatin®), кармустин (BiCNU®), хлорамбуцил (Leukeran®), цисплатин (Platinol®), кладрибин (Leustatin®), циклофосфамид (Cytoxan® или Neosar®), цитарабин, цитозина арабинозид (Cytosar-U®), липосомальный цитарабин в для инъекций (DepoCyt®), дакарбазин (DTIC-Dome®), дактиномицин (актиномицин D, Cosmegan), даунорубицина гидрохлорид (Cerubidine®), липосомальный даунорубицина цитрат для инъекций (DaunoXome®), дексаметазон, доцетаксел (Taxotere®), доксорубицина гидрохлорид (Adriamycin®, Rubex®), этопозид (Vepesid®), флударабина фосфат (Fludara®), 5-фторурацил (Adrucil®, Efudex®), флутамид (Eulexin®), тезацитибин, гемцитабин (дифтордезоксицитидин), гидроксимочевину (Hydrea®), идарубицин (Idamycin®), ифосфамид (IFEX®), иринотекан (Camptosar®), L-аспарагиназу (ELSPAR®), лейковорин кальция, мелфалан (Alkeran®), 6-меркаптопурин (Purinethol®), метотрексат (Folex®), митоксантрон (Novantrone®), милотарг, паклитаксел (Taxol®), феникс (иттрий-90/MX-DTPA), пентостатин, имплантат с полифепросаном 20 и кармустином (Gliadel®), тамоксифена цитрат (Nolvadex®), тенипозид (Vumon®), 6-тиогуанин, тиотепу, тирапазамин (Tirazone®), топотекана гидрохлорид для инъекций (Hycamptin®), винбластин (Velban®), винкристин (Oncovin®), винорелбин (Navelbine®), ибрутиниб, иделализиб и брентуксимаба ведотин.

Иллюстративные алкилирующие средства включают без ограничения азотистые иприты, производные этиленимина, алкилсульфонаты, производные нитрозомочевины и триазены: урациловый иприт (Aminouracil Mustard®, Chlorethaminacil®, Demethyldopan®, Desmethyldopan®, Haemanthamine®, Nordopan®, Uracil nitrogen mustard®, Uracillost®, Uracilmostaza®, Uramustin®, Uramustine®), хлорметин (Mustargen®), циклофосфамид (Cytoxan®, Neosar®, Clafen®, Endoxan®, Procytox®, Revimmune™), ифосфамид (Mitoxana®), мелфалан (Alkeran®), хлорамбуцил (Leukeran®), пипоброман (Amedel®, Vercyte®), триэтиленмеламин (Hemel®, Hexalen®, Hexastat®), триэтилентиофосфорамин, темозоломид (Temodar®), тиотепу (Thioplex®), бусульфан (Busilvex®, Myleran®), кармустин (BiCNU®), ломустин (CeeNU®), стрептозоцин (Zanosar®) и дакарбазин (DTIC-Dome®). Дополнительные иллюстративные алкилирующие средства включают без ограничения оксалиплатин (Eloxatin®); темозоломид (Temodar® и Temodal®); дактиномицин (также известный как актиномицин-D, Cosmegen®); мелфалан (также известный как L-PAM, L-сарколизин и фенилаланин-иприт, Alkeran®); алтретамин (также известный как гексаметилмеламин (HMM), Hexalen®); кармустин (BiCNU®); бендамустин (Treanda®); бусульфан (Busulfex® и Myleran®); карбоплатин (Paraplatin®); ломустин (также известный как CCNU, CeeNU®); цисплатин (также известный как CDDP, Platinol® и Platinol®-AQ); хлорамбуцил (Leukeran®); циклофосфамид (Cytoxan® и Neosar®); дакарбазин (также известный как DTIC, DIC и имидазолкарбоксамид, DTIC-Dome®); алтретамин (также известный как гексаметилмеламин (HMM), Hexalen®); ифосфамид (Ifex®); преднумустин; прокарбазин (Matulane®); мехлорэтамин (также известный как азотистый иприт, мустин и мехлорэтамина гидрохлорид, Mustargen®); стрептозоцин (Zanosar®); тиотепу (также известный как тиофосфоамид, TESPA и TSPA, Thioplex®); циклофосфамид (Endoxan®, Cytoxan®, Neosar®, Procytox®, Revimmune®) и бендамустин HCl (Treanda®).

Иллюстративные антрациклины включают, например, доксорубицин (Adriamycin® и Rubex®); блеомицин (lenoxane®); даунорубицин (даунорубицина гидрохлорид, дауномицин и рубидомицина гидрохлорид, Cerubidine®); липосомальный даунорубицин (липосомальный даунорубицина цитрат, DaunoXome®); митоксантрон (DHAD, Novantrone®); эпирубицин (Ellence™); идарубицин (Idamycin®, Idamycin PFS®); митомицин C (Mutamycin®); гелданамицин; гербимицин; равидомицин и дезацетилравидомицин. Иллюстративные алкалоиды барвинка, которые можно применять в комбинации с молекулами антитела к CD73, включают без ограничения винорелбина тартрат (Navelbine®), винкристин (Oncovin®) и виндезин (Eldisine®); винбластин (также известный как винбластина сульфат, винкалейкобластин и VLB, Alkaban-AQ® и Velban®) и винорелбин (Navelbine®).

Иллюстративные ингибиторы протеосом, которые можно применять в комбинации с молекулами антитела к CD73, включают без ограничения бортезомиб (Velcade®); карфилзомиб (PX-171-007, (S)-4-метил-N-((S)-1-(((S)-4-метил-1-((R)-2-метилоксиран-2-ил)-1-оксопентан-2-ил)амино)-1-оксо-3-фенилпропан-2-ил)-2-((S)-2-(2-морфолиноацетамидо)-4-фенилбутанамидо)-пентанамид); маризомиб (NPI-0052); иксазомиба цитрат (MLN-9708); деланзомиб (CEP-18770); и O-метил-N-[(2-метил-5-тиазолил)карбонил]-L-серил-O-метил-N-[(1S)-2-[(2R)-2-метил-2-оксиранил]-2-оксо-1-(фенилметил)этил]-L-серинамид (ONX-0912).

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, например молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, применяют в комбинации с ингибитором тирозинкиназы (например, ингибитором рецепторной тирозинкиназы (RTK)). Иллюстративные ингибиторы тирозинкиназы включают без ограничения ингибитор пути эпидермального фактора роста (EGF) (например, ингибитор рецептора эпидермального фактора роста (EGFR)), ингибитор пути фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) (например, ингибитор рецептора фактора роста эндотелия сосудов (VEGFR) (например, ингибитор VEGFR-1, ингибитор VEGFR-2, ингибитор VEGFR-3)), ингибитор пути фактора роста тромбоцитов (PDGF) (например, ингибитор рецептора фактора роста тромбоцитов (PDGFR) (например, ингибитор PDGFR-β)), ингибитор RAF-1, ингибитор KIT и ингибитор RET. В некоторых вариантах осуществления противораковое средство, применяемое в комбинации с ингибитором белка hedgehog, выбрано из группы, состоящей из акситиниба (AG013736), бозутиниба (SKI-606), цедираниба (RECENTIN™, AZD2171), дазатиниба (SPRYCEL®, BMS-354825), эрлотиниба (TARCEVA®), гефитиниба (IRESSA®), иматиниба (Gleevec®, CGP57148B, STI-571), лапатиниба (TYKERB®, TYVERB®), лестауртиниба (CEP-701), нератиниба (HKI-272), нилотиниба (TASIGNA®), семаксаниба (семаксаниб, SU5416), сунитиниба (SUTENT®, SU11248), тоцераниба (PALLADIA®), вандетаниба (ZACTIMA®, ZD6474), ваталаниба (PTK787, PTK/ZK), трастузумаба (HERCEPTIN®), бевацизумаба (AVASTIN®), ритуксимаба (RITUXAN®), цетуксимаба (ERBITUX®), панитумумаба (VECTIBIX®), ранибизумаба (Lucentis®), нилотиниба (TASIGNA®), сорафениба (NEXAVAR®), алемтузумаба (CAMPATH®), гемтузумаба озогамицина (MYLOTARG®), ENMD-2076, PCI-32765, AC220, BIBW 2992 (TOVOK™), SGX523, PF-04217903, PF-02341066, PF-299804, BMS-777607, ABT-869, MP470, BIBF 1120 (VARGATEF®), AP24534, JNJ-26483327, MGCD265, DCC-2036, BMS-690154, CEP-11981, тивозаниба (AV-951), OSI-930, MM-121, XL-184, XL-647, XL228, AEE788, AG-490, AST-6, BMS-599626, CUDC-101, PD153035, пелитиниба (EKB-569), вандетаниба (зактима), WZ3146, WZ4002, WZ8040, ABT-869 (линифаниб), AEE788, AP24534 (понатиниб), AV-951 (тивозаниб), акситиниба, BAY 73-4506 (регорафениб), бриваниба аланината (BMS-582664), бриваниба (BMS-540215), цедираниба (AZD2171), CP 673451, CYC116, E7080, Ki8751, маситиниба (AB1010), MGCD-265, мотесаниба дифосфата (AMG-706), MP-470, OSI-930, пазопаниба гидрохлорида, PD173074, сорафениба тозилата (Bay 43-9006), SU 5402, TSU-68 (SU6668), ваталаниба, XL880 (GSK1363089, EXEL-2880). Отобранные ингибиторы тирозинкиназы выбраны из сунитиниба, эрлотиниба, гефитиниба или сорафениба.

Лучевую терапию можно осуществлять с помощью одного из нескольких способов или комбинации способов, в том числе без ограничения дистанционной лучевой терапии, внутренней лучевой терапии, способа на основе имплантации источника излучения, стереотаксической радиохирургии, системной лучевой терапии, радиотерапии и постоянной или временной интерстициальной брахитерапии. Термин "брахитерапия" относится к лучевой терапии, осуществляемой пространственно ограниченным радиоактивным материалом, введенным в организм в месте опухоли или рядом с ней или в другом месте пролиферативного заболевания ткани. Термин предназначен без ограничения для включения воздействия с помощью радиоактивных изотопов (например, At-211, I-131, I-125, Y-90, Re-186, Re-188, Sm-153, Bi-212, P-32 и радиоактивных изотопов Lu). Подходящие источники излучения для применения в качестве средства для кондиционирования клеток по настоящему изобретению включают как твердые вещества, так и жидкости. В качестве неограничивающего примера, источник излучения может представлять собой радионуклид, такой как I-125, I-131, Yb-169, Ir-192 в качестве твердого источника, I-125 в качестве твердого источника или другие радионуклиды, которые испускают фотоны, бета-частицы, гамма-излучение или другие терапевтические лучи. Радиоактивный материал также может представлять собой жидкость, полученную из любого раствора радионуклида(-ов), например раствора I-125 или I-131, или радиоактивную жидкость можно получить с использованием суспензии подходящей жидкости, содержащей мелкие частицы твердых радионуклидов, таких как Au-198, Y-90.

Блокаду CD73 также можно эффективно сочетать с химиотерапевтическими режимами. В этих случаях возможно снизить дозу вводимого химиотерапевтического реагента.

Иллюстративные цитотоксические средства, которые можно вводить в комбинации с молекулой антитела к CD73, включают антимикротубулиновые средства, ингибиторы топоизомераз, антиметаболиты, ингибиторы митоза, алкилирующие средства, антрациклины, алкалоиды барвинка, интеркалирующие средства, средства, способные нарушать путь передачи сигнала, средства, которые стимулируют апоптоз, ингибиторы протеосом и излучение (например, местное облучение или общее облучение тела).

В определенных вариантах осуществления любая из комбинаций, раскрытых в данном документе, в качестве альтернативы или в комбинации, дополнительно включает одно или несколько из средств, описанных в таблице 18.

Таблица 18. Отобранные терапевтические средства, которые можно вводить в комбинации с молекулами антитела к CD73, например, в виде отдельного средства или в комбинации с другими иммуномодуляторами, описанными в данном документе. Каждая публикация, перечисленная в этой таблице, включена в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте, включая все структурные формулы.

Обозначение соединения Непатентованное название
Торговое название Структура соединения Патенты/публикации заявок на патент A1 Сотрастаурин EP 1682103
US 2007/142401
WO 2005/039549 A2 Нилотиниба HCl моногидрат
TASIGNA®
HCl • H₂O WO 2004/005281
US 7169791 A7 WO 2009/141386
US 2010/0105667 A8 WO 2010/029082 A10 WO 2011/076786 A11 Деферазирокс
EXJADE® WO 1997/049395 A12 Летрозол
FEMARA® US 4978672 A13 WO 2013/124826 US 2013/0225574 A14 WO 2013/111105 A15 WO 2005/073224 A16 Иматиниба мезилат
GLEEVEC®
Мезилат WO 1999/003854 A17
Дигидрохлоридная соль EP 2099447
US 7767675
US 8420645 A18 Руксолитиниба фосфат JAKAFI® H₃PO₄ WO 2007/070514 EP 2474545 US 7598257 WO 2014/018632 A19 Панобиностат WO 2014/072493
WO 2002/022577
EP 1870399 A20 Озилодростат WO 2007/024945 A21 WO 2008/016893 EP 2051990 US 8546336 A23 Церитиниб
ZYKADIA™ WO 2008/073687 US 8039479 A24 US 8415355
US 8685980 A25 WO 2010/007120 A26 Человеческое моноклональное антитело к PRLR US 7867493 A27 WO 2010/026124 EP 2344474 US 2010/0056576
WO2008/106692 A28 WO 2010/101849 A30 WO 2011/101409 A31 Человеческое моноклональное антитело к HER3 WO 2012/022814 EP 2606070
US 8735551 A32 Конъюгат антитела с лекарственным средством (ADC) WO 2014/160160 Ab: 12425 (см. таблицу 1, абзац [00191])
Линкер: SMCC (см. абзац [00117]
Полезная нагрузка: DM1 (см. абзац [00111]
См. также п. 29 формулы изобретения A33 Моноклональное антитело или Fab к M-CSF WO 2004/045532 A35 Мидостаурин WO 2003/037347 EP 1441737
US 2012/252785 A36 Эверолимус AFINITOR® WO 2014/085318 A37 WO 2007/030377 US 7482367 A38 Пасиреотида диаспартат
SIGNIFOR® WO2002/010192
US 7473761 A40 WO 2013/184757 A41 WO 2006/122806 A42 WO 2008/073687 US 8372858 A43 WO 2010/002655
US 8519129 A44 WO 2010/002655 US 8519129 A45 WO 2010/002655 A46 Валсподар
AMDRAY™ EP 296122 A47 Ваталаниба сукцинат
сукцинат WO 98/35958 A48 Ингибитор IDH WO2014/141104 A49 Ингибитор BCR-ABL
WO2013/171639 WO2013/171640 WO2013/171641 WO2013/171642 A50 Ингибитор cRAF WO2014/151616 A51 АТФ-конкурентный ингибитор ERK1/2 WO2015/066188

В некоторых вариантах осуществления дополнительное терапевтическое средство выбрано из одного или нескольких из следующего: 1) ингибитора протеинкиназы С (РКС); 2) ингибитора белка теплового шока 90 (HSP90); 3) ингибитора фосфоинозитид-3-киназы (PI3K) и/или мишени рапамицина (mTOR); 4) ингибитора цитохрома P450 (например, ингибитора CYP17 или ингибитора 17-альфа-гидроксилазы/C17-20-лиазы); 5) железохелатирующего средства; 6) ингибитора ароматазы; 7) ингибитора р53, например ингибитора взаимодействия р53/Mdm2; 8) индуктора апоптоза; 9) ингибитора ангиогенеза; 10) ингибитора альдостеронсинтазы; 11) ингибитора рецептора "smoothened" (SMO); 12) ингибитора рецептора пролактина (PRLR); 13) ингибитора передачи сигналов Wnt; 14) ингибитора CDK4/6; 15) ингибитора рецептора 2 фактора роста фибробластов (FGFR2)/рецептора 4 фактора роста фибробластов (FGFR4); 16) ингибитора макрофагального колониестимулирующего фактора (M-CSF); 17) ингибитора одного или нескольких из c-KIT, высвобождения гистамина, Flt3 (например, FLK2/STK1) или PKC; 18) ингибитора одного или нескольких из VEGFR-2 (например, FLK-1/KDR), PDGFR-бета, c-KIT или Raf-киназы C; 19) агониста соматостатина и/или ингибитора высвобождения гормона роста; 20) ингибитора киназы анапластической лимфомы (ALK); 21) ингибитора рецептора инсулиноподобного фактора роста 1 (IGF-1R); 22) ингибитора P-гликопротеина 1; 23) ингибитора рецептора фактора роста эндотелия сосудов (VEGFR); 24) ингибитора киназы BCR-ABL; 25) ингибитора FGFR; 26) ингибитора CYP11B2; 27) ингибитора HDM2, например ингибитора взаимодействия HDM2-p53; 28) ингибитора тирозинкиназы; 29) ингибитора c-MET; 30) ингибитора JAK; 31) ингибитора DAC; 32) ингибитора 11β-гидроксилазы; 33) ингибитора IAP; 34) ингибитора PIM-киназы; 35) ингибитора поркупина; 36) ингибитора BRAF, например BRAF V600E или BRAF дикого типа; 37) ингибитора HER3; 38) ингибитора MEK; или 39) ингибитора липидкиназы, описанных в данном документе и в таблице 18.

Иллюстративные ингибиторы тирозинкиназы включают без ограничения ингибитор пути эпидермального фактора роста (EGF) (например, ингибитор рецептора эпидермального фактора роста (EGFR)), ингибитор пути фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) (например, ингибитор рецептора фактора роста эндотелия сосудов (VEGFR) (например, ингибитор VEGFR-1, ингибитор VEGFR-2, ингибитор VEGFR-3)), ингибитор пути фактора роста тромбоцитов (PDGF) (например, ингибитор рецептора фактора роста тромбоцитов (PDGFR) (например, ингибитор PDGFR-β)), ингибитор RAF-1, ингибитор KIT и ингибитор RET.

В одном варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор PKC, сотрастаурин (соединение A1) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2005/039549, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор PKC представляет собой сотрастаурин (соединение A1) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2005/039549. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с сотрастаурином (соединением A1) или соединением, описанным в публикации согласно РСТ № WO 2005/039549, для лечения нарушения, такого как рак, меланома, неходжкинская лимфома, воспалительное заболевание кишечника, отторжение трансплантата, офтальмологическое нарушение или псориаз.

В одном варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор BCR-ABL, TASIGNA (соединение A2), или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2004/005281, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор BCR-ABL представляет собой TASIGNA или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2004/005281. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с TASIGNA (соединением A2) или соединением, описанным в публикации согласно РСТ № WO 2004/005281, для лечения нарушения, такого как лимфоцитарный лейкоз, болезнь Паркинсона, неврологический рак, меланома, рак пищеварительного/желудочно-кишечного тракта, колоректальный рак, миелоидный лейкоз, рак головы и шеи или легочная гипертензия.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, включает или используется в комбинации с ингибитором HSP90 для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе, например рака, множественной миеломы, немелкоклеточного рака легкого, лимфомы, рака ЖКТ, рака молочной железы, рака пищеварительного/желудочно-кишечного тракта, рака поджелудочной железы, колоректального рака, солидной опухоли или нарушения кроветворения.

В другом варианте осуществления комбинацию, например комбинацию, содержащую молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, применяют в комбинации с ингибитором PI3K и/или mTOR, 8-(6-метоксипиридин-3-ил)-3-метил-1-(4-пиперазин-1-ил-3-трифторметилфенил)-1,3-дигидроимидазо[4,5-с]хинолин-2-оном (соединением A41) для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор PI3K и/или mTOR представляет собой 8-(6-метоксипиридин-3-ил)-3-метил-1-(4-пиперазин-1-ил-3-трифторметилфенил)-1,3-дигидроимидазо[4,5-с]хинолин-2-он (соединение А41). В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с 8-(6-метоксипиридин-3-ил)-3-метил-1-(4-пиперазин-1-ил-3-трифторметилфенил)-1,3-дигидроимидазо[4,5-c]хинолин-2-оном (соединением A41) для лечения нарушения, такого как рак, рак предстательной железы, лейкоз (например, лимфоцитарный лейкоз), рак молочной железы, рак головного мозга, рак мочевого пузыря, рак поджелудочной железы, рак почки, солидная опухоль или рак печени.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор FGFR, 3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-(6-((4-(4-этилпиперазин-1-ил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-1-метилмочевину (соединение A5) или соединение, раскрытое в патенте США № 8552002, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор FGFR представляет собой 3-(2,6-дихлор-3,5-диметоксифенил)-1-(6-((4-(4-этилпиперазин-1-ил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)-1-метилмочевину (соединение А5) или соединение, раскрытое в патенте США № 8552002. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с соединением A5 или соединением, описанным в US 8552002, для лечения нарушения, такого как рак пищеварительного/желудочно-кишечного тракта, гематологический рак или солидная опухоль. Соединение А5 характеризуется следующей структурой:

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор PI3K, бупарлизиб (соединение A6), или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2007/084786, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор PI3K представляет собой бупарлизиб (соединение A6) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2007/084786. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с бупарлизибом (соединением А6) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2007/084786, для лечения нарушения, такого как рак предстательной железы, немелкоклеточный рак легкого, эндокринный рак, лейкоз, рак яичника, меланома, рак мочевого пузыря, рак молочной железы, рак женской репродуктивной системы, рак пищеварительного/желудочно-кишечного тракта, колоректальный рак, мультиформная глиобластома, солидная опухоль, неходжкинская лимфома, нарушение кроветворения или рак головы и шеи. Соединение А6 характеризуется следующей структурой:

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор FGFR, 8-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-N-(4-((диметиламино)метил)-1Н-имидазол-2-ил)хиноксалин-5-карбоксамид (соединение А7), или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2009/141386, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор FGFR представляет собой 8-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-N-(4-((диметиламино)метил)-1H-имидазол-2-ил)хиноксалин-5-карбоксамид (соединение A7) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2009/141386. В одном варианте осуществления ингибитор FGFR представляет собой 8-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-N-(4-((диметиламино)метил)-1H-имидазол-2-ил)хиноксалин-5-карбоксамид (соединение A7). В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с 8-(2,6-дифтор-3,5-диметоксифенил)-N-(4-((диметиламино)метил)-1H-имидазол-2-ил)хиноксалин-5-карбоксамидом (соединением A7) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2009/141386, для лечения нарушения, такого как рак, характеризующийся ангиогенезом.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор PI3K, (S)-N1-(4-метил-5-(2-(1,1,1-трифтор-2-метилпропан-2-ил)пиридин-4-ил)тиазол-2-ил)пирролидин-1,2-дикарбоксамид (соединение A8) или соединение, раскрытое в PCT № WO 2010/029082, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор PI3K представляет собой (S)-N1-(4-метил-5-(2-(1,1,1-трифтор-2-метилпропан-2-ил)пиридин-4-ил)тиазол-2-ил)пирролидин-1,2-дикарбоксамид (соединение A8) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2010/029082. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с (S)-N1-(4-метил-5-(2-(1,1,1-трифтор-2-метилпропан-2-ил)пиридин-4-ил)тиазол-2-ил)пирролидин-1,2-дикарбоксамидом (соединением A8) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2010/029082, для лечения нарушения, такого как рак ЖКТ, рак молочной железы, рак поджелудочной железы, рак пищеварительного/желудочно-кишечного тракта, солидная опухоль и рак головы и шеи.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор цитохрома P450, (например, ингибитор CYP17) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2010/149755, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор цитохрома P450 (например, ингибитор CYP17) представляет собой CFG920 или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2010/149755, US 8263635 B2 или EP 2445903 B1. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2010/149755, для лечения рака предстательной железы.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор HDM2, (S)-1-(4-хлорфенил)-7-изопропокси-6-метокси-2-(4-(метил(((1r,4S)-4-(4-метил-3-оксопиперазин-1-ил)циклогексил)метил)амино)фенил)-1,2-дигидроизохинолин-3(4H)-он (соединение A10) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2011/076786, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе). В одном варианте осуществления ингибитор HDM2 представляет собой (S)-1-(4-хлорфенил)-7-изопропокси-6-метокси-2-(4-(метил(((1r,4S)-4-(4-метил-3-оксопиперазин-1-ил)циклогексил)метил)амино)фенил)-1,2-дигидроизохинолин-3(4H)-он (соединение A10) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2011/076786. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с (S)-1-(4-хлорфенил)-7-изопропокси-6-метокси-2-(4-(метил(((1r,4S)-4-(4-метил-3-оксопиперазин-1-ил)циклогексил)метил)амино)фенил)-1,2-дигидроизохинолин-3(4H)-оном (соединением A10) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2011/076786, для лечения нарушения, такого как солидная опухоль.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит железо-хелатирующее средство, деферазирокс (также известное как EXJADE; соединение A11) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 1997/049395, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления железо-хелатирующее средство представляет собой деферазирокс или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 1997/049395. В одном варианте осуществления железо-хелатирующее средство представляет собой деферазирокс (соединение A11). В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с деферазироксом (соединением A11) или соединением, раскрытым в публикации PCT № WO 1997/049395, для лечения перегрузки железом, гемохроматоза или миелодисплазии.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор ароматазы, летрозол (также известный как FEMARA; соединение A12) или соединение, раскрытое в патенте США № 4978672, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор ароматазы представляет собой летрозол (соединение A12) или соединение, раскрытое в патенте США 4978672. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с летрозолом (соединением A12) или соединением, раскрытым в патенте США 4978672, для лечения нарушения, такого как рак, лейомиосаркома, рак эндометрия, рак молочной железы, рак женской репродуктивной системы или гормональная недостаточность.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор PI3K, например, ингибитор всех форм PI3K, (4S,5R)-3-(2'-амино-2-морфолино-4'-(трифторметил)-[4,5'-бипиримидин]-6-ил)-4-(гидроксиметил)-5-метилоксазолидин-2-он (соединение A13) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO2013/124826, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор PI3K представляет собой (4S,5R)-3-(2'-амино-2-морфолино-4'-(трифторметил)-[4,5'-бипиримидин]-6-ил)-4-(гидроксиметил)-5-метилоксазолидин-2-он (соединение A13) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO2013/124826. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с (4S,5R)-3-(2'-амино-2-морфолино-4'-(трифторметил)-[4,5'-бипиримидин]-6-ил)-4-(гидроксиметил)-5-метилоксазолидин-2-оном (соединением A13) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO2013/124826, для лечения нарушения, такого как рак или солидная опухоль на поздней стадии.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор p53 и/или ингибитор взаимодействия p53/Mdm2, (S)-5-(5-хлор-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)-6-(4-хлорфенил)-2-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-1-изопропил-5,6-дигидропирроло[3,4-d]имидазол-4(1H)-он (соединение A14) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO2013/111105, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор p53 и/или ингибитор взаимодействия p53/Mdm2 представляет собой (S)-5-(5-хлор-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)-6-(4-хлорфенил)-2-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-1-изопропил-5,6-дигидропирроло[3,4-d]имидазол-4(1H)-он (соединение A14) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO2013/111105. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с (S)-5-(5-хлор-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)-6-(4-хлорфенил)-2-(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-1-изопропил-5,6-дигидропирроло[3,4-d]имидазол-4(1H)-оном (соединением A14) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO2013/111105, для лечения нарушения, такого как рак или саркома мягких тканей.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор тирозинкиназы CSF-1R, 4-((2-(((1R,2R))-2-гидроксициклогексил)амино)бензо[d]тиазол-6-ил)окси)-N-метилпиколинамид (соединение А15) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2005/073224, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор тирозинкиназы CSF-1R представляет собой 4-((2-(((1R,2R)-2-гидроксициклогексил)амино)бензо[d]тиазол-6-ил)окси)-N-метилпиколинамид (соединение A15) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2005/073224. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с 4-((2-(((1R,2R)-2-гидроксициклогексил)амино)бензо[d]тиазол-6-ил)окси)-N-метилпиколинамидом (соединением A15) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2005/073224, для лечения нарушения, такого как рак.

В определенных вариантах осуществления ингибитор тирозинкиназы CSF-1R 4-((2-(((1R,2R)-2-гидроксициклогексил)амино)бензо[d]тиазол-6-ил)окси)-N-метилпиколинамид (соединение A15) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2005/073224, вводят в комбинации с ингибитором CD73 (например, молекулой антитела к CD73) для лечения рака, например солидной опухоли (например, солидной опухоли на поздней стадии). Иллюстративные виды рака, которые можно подвергать лечению посредством комбинации, включают без ограничения рак мозга (например, мультиформную глиобластому (GBM), например рецидивирующую глиобластому), рак молочной железы (например, трижды негативный рак молочной железы (например, NTBC)) или рак поджелудочной железы (например, рак поджелудочной железы на поздней стадии). Общие признаки этих видов рака включают, например, биологию опухолей, характеризующуюся высоким уровнем ТАМ в микроокружении опухоли, что может способствовать ускользанию от иммунного надзора и подавлению иммунитета. В некоторых вариантах осуществления блокада CSF-1R в сочетании со средством терапии на основе антитела к CD73 может, например, способствовать перепрограммированию ТАМ и/или устранять иммуносупрессию инфильтрирующих опухоль лимфоцитов (TIL).

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит индуктор апоптоза и/или ингибитор ангиогенеза, такой как мезилат иматиниба (также известный как GLEEVEC®; соединение А16), или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO1999/003854, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например описанного нарушения. В одном варианте осуществления индуктор апоптоза и/или ингибитор ангиогенеза представляет собой иматиниба мезилат (соединение A16) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO1999/003854. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с иматиниба мезилатом (соединением A16) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO1999/003854, для лечения нарушения, такого как рак, множественная миелома, рак предстательной железы, немелкоклеточный рак легкого, лимфома, рак ЖКТ, меланома, рак молочной железы, рак поджелудочной железы, рак пищеварительного/желудочно-кишечного тракта, колоректальный рак, мультиформная глиобластома, рак печени, рак головы и шеи, астма, рассеянный склероз, аллергия, болезнь Альцгеймера, амиотрофический боковой склероз или ревматоидный артрит.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитором JAK, 2-фтор-N-метил-4-(7-(хинолин-6)-илметил)имидазо[1,2-b][1,2,4]триазин-2-ил)бензамид (соединение A17) или его дигидрохлоридную соль или соединение, раскрытое в публикации PCT № WO 2007/070514, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор JAK представляет собой 2-фтор-N-метил-4-(7-(хинолин-6-илметил)имидазо[1,2-b][1,2,4]триазин-2-ил)бензамид (соединение A17) или его дигидрохлоридную соль или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2007/070514. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с 2-фтор-N-метил-4-(7-(хинолин-6-илметил)имидазо[1,2-b][1,2,4]триазин-2-ил)бензамидом (соединением A17) или его дигидрохлоридной солью или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2007/070514, для лечения нарушения, такого как колоректальный рак, миелоидный лейкоз, гематологический рак, аутоиммунное заболевание, неходжкинская лимфома или тромбоцитемия.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор JAK, руксолитиниба фосфат (также известный как JAKAFI; соединение A18) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2007/070514, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор JAK представляет собой руксолитиниба фосфат (соединение A18) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2007/070514. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с руксолитиниба фосфатом (соединением A18) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2007/070514, для лечения нарушения, такого как рак предстательной железы, лимфоцитарный лейкоз, множественная миелома, лимфома, рак легкого, лейкоз, кахексия, рак молочной железы, рак поджелудочной железы, ревматоидный артрит, псориаз, колоректальный рак, миелоидный лейкоз, гематологический рак, аутоиммунное заболевание, неходжкинская лимфома или тромбоцитемия.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор деацетилазы (DAC), панобиностат (соединение A19) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2014/072493, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор DAC представляет собой панобиностат (соединение A19) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2014/072493. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с панобиностатом (соединением A19), соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2014/072493, для лечения нарушения, такого как колоректальный рак, мелкоклеточный рак легкого, рак респираторного тракта/грудной клетки, рак предстательной железы, множественная миелома, миелодиспластический синдром, рак кости, немелкоклеточный рак легкого, эндокринный рак, лимфома, неврологический рак, лейкоз, HIV/AIDS, иммунологическое нарушение, отторжение трансплантата, рак ЖКТ, меланома, рак молочной железы (например, трижды негативный рак молочной железы (NTBC)), рак поджелудочной железы, колоректальный рак, мультиформная глиобластома, миелоидный лейкоз, гематологический рак, рак почки, неходжкинская лимфома, рак головы и шеи, нарушения кроветворения или рак печени. В некоторых вариантах осуществления рак выбран из колоректального рака (например, колоректального рака с микросателлитной стабильностью (MSS CRC)), рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого) или рака молочной железы (например, трижды негативного рака легких (TNBC)).

В некоторых вариантах осуществления комбинация, описанная в данном документе, содержит ингибитор деацетилазы (DAC), панобиностат (соединение A19) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2014/072493, и ингибитор молекулы, представляющей собой контрольную точку иммунного ответа, например ингибитор CD73 (например, молекулу антитела к CD73).

В одном варианте осуществления ингибитор DAC, панобиностат (соединение A19) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2014/072493, вводят в комбинации с ингибитором CD73 (например, молекулой антитела к CD73) для лечения колоректального рака (например, MSS CRC), рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого (NSCLC)) или рака молочной железы (например, трижды негативного рака молочной железы (TNBC)).

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор одного или нескольких из цитохрома P450 (например, 11B2), альдостерона или ангиогенеза, озилодростат (соединение A20) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO2007/024945, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор одного или нескольких из цитохрома P450 (например, 11B2), альдостерона или ангиогенеза представляет собой озилодростат (соединение A20) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO2007/024945. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с озилодростатом (соединением A20) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO2007/024945, для лечения нарушения, такого как синдром Кушинга, гипертензия или сердечная недостаточность.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор IAP, (S)-N-((S)-1-циклогексил-2-((S)-2-(4-(4-фторбензоил)тиазол-2-ил)пирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)-2-(метиламино)пропанамид (соединение A21) или соединение, раскрытое в US 8552003, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор IAP представляет собой (S)-N-((S)-1-циклогексил-2-((S)-2-(4-(4-фторбензоил)тиазол-2-ил)пирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)-2-(метиламино)пропанамид (соединение A21) или соединение, раскрытое в патенте США 8552003. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с (S)-N-((S)-1-циклогексил-2-((S)-2-(4-(4-фторбензоил)тиазол-2)-ил)пирролидин-1-ил)-2-оксоэтил)-2-(метиламино)пропанамидом (соединение A21) или соединением, раскрытым в патенте США № 8552003, для лечения нарушения, такого как множественная миелома, колоректальный рак (CLC), рак легких (например, немелкоклеточный рак легких (NSCLC), рак молочной железы (например, трижды негативный рак молочной железы (TNBC)), рак яичника, рак поджелудочной железы или нарушение кроветворения. В некоторых вариантах осуществления рак выбран из колоректального рака (например, колоректального рака с микросателлитной стабильностью (MSS CRC)), рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого) или рака молочной железы (например, трижды негативного рака легких (TNBC)).

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор "smoothened" (SMO), (R)-2-(5-(4-(6-)бензил-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-2-метилпиперазин-1-ил)пиразин-2-ил)пропан-2-ол (соединение A25) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2010/007120, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор SMO представляет собой (R)-2-(5-(4-(6-бензил-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-2-метилпиперазин-1-ил)пиразин-2-ил)пропан-2-ол (соединение A25) или соединение, раскрытое в публикации PCT согласно WO 2010/007120. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с (R)-2-(5-(4-(6-бензил-4,5-диметилпиридазин-3-ил)-2-метилпиперазин-1-ил)пиразин-2-ил)пропан-2-олом (соединением A25) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2010/007120, для лечения нарушения, такого как рак, медуллобластома, мелкоклеточный рак легкого, рак предстательной железы, базальноклеточная карцинома, рак поджелудочной железы или воспаление.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор Alk, церитиниб (также известный как ZYKADIA; соединение A23) или применяется в комбинации с ним для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор Alk представляет собой церитиниб (соединение A23). В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с церитинибом (соединение A23)для лечения нарушения, такого как немелкоклеточный рак легкого или солидные опухоли.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор JAK и/или CDK4/6, 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид (соединение A24) или соединение, раскрытое в патенте США 8415355 или патенте США 8685980, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор JAK и/или CDK4/6 представляет собой 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид (соединение A24) или соединение, раскрытое в патенте США 8415355 или патенте США 8685980. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамидом (соединением A24) или соединением, раскрытым в US 8415355 или US 8685980, для лечения нарушения, такого как лимфома, неврологический рак, меланома, рак молочной железы или солидная опухоль.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор рецептора пролактина (PRLR), молекулу человеческого моноклонального антитела (соединение A26), описанную в патенте США № 7867493, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор PRLR представляет собой человеческое моноклональное антитело (соединение A26), раскрытое в US 7867493. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с молекулой человеческого моноклонального антитела (соединением A26), раскрытой в патенте США 7867493, для лечения нарушения, такого как рак, рак предстательной железы или рак молочной железы.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор PIM-киназы, N-(4-((1R,3S,5S)-3-амино-5-метилциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторпиколинамид (соединение A27) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2010/026124, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор PIM-киназы представляет собой N-(4-((1R,3S,5S)-3-амино-5-метилциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторпиколинамид (соединение A27) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2010/026124. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с N-(4-((1R,3S,5S)-3-амино-5-метилциклогексил)пиридин-3-ил)-6-(2,6-дифторфенил)-5-фторпиколинамидом (соединением A27) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2010/026124, для лечения нарушения, такого как множественная миелома, миелодиспластический синдром, миелоидный лейкоз или неходжкинская лимфома.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор передачи сигналов Wnt, 2-(2',3-диметил-[2,4'-бипиридином)]-5-ил)-N-(5-(пиразин-2-ил)пиридин-2-ил)ацетамидом (соединение А28) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2010/101849, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например, нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор передачи сигналов Wnt представляет собой 2-(2',3-диметил-[2,4'-бипиридин]-5-ил)-N-(5-(пиразин-2-ил)пиридин-2-ил)ацетамид (соединение A28) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2010/101849. В одном варианте осуществления ингибитор передачи сигналов Wnt представляет собой 2-(2',3-диметил-[2,4'-бипиридин]-5-ил)-N-(5-(пиразин-2-ил)пиридин-2-ил)ацетамид (соединение A28). В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с 2-(2',3-диметил-[2,4'-бипиридин]-5-ил)-N-(5-(пиразин-2-ил)пиридин-2-ил)ацетамидом (соединением A28) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2010/101849, для лечения нарушения, такого как солидная опухоль (например, рак головы и шеи, плоскоклеточная карцинома, рак молочной железы, рак поджелудочной железы или рак толстой кишки). В определенных вариантах осуществления рак выбран из рака кожи (например, меланомы), солидной опухоли с высокой микросателлитной неустойчивостью (MSI-high), рака поджелудочной железы или рака молочной железы (например, трижды негативного рака молочной железы (TNBC)).

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор BRAF или применяется в комбинации с ним для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе, например мелкоклеточного рака легкого, меланомы или колоректального рака.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор CDK4/6, 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-((1R,6S)-9-метил-4-оксо-3,9-диазабицикло[4.2.1]нонан-3-ил)пиридин-2-ил)амино)-7Н-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид (соединение A30) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2011/101409, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор CDK4/6 представляет собой 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-((1R,6S)-9-метил-4-оксо-3,9-диазабицикло[4.2.1]нонан-3-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамид (соединение A30) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2011/101409. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с 7-циклопентил-N, N-диметил-2-((5-((1R,6S)-9-метил-4-оксо-3,9-диазабицикло[4.2.1]нонан-3-ил)пиридин-2-ил)амино)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-6-карбоксамидом (соединением A30) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2011/101409, для лечения нарушения, такого как рак, лимфома из клеток мантийной зоны, липосаркома, немелкоклеточный рак легкого, меланома, плоскоклеточный рак пищевода или рак молочной железы.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор HER3, соединение A31 или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2012/022814, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор HER3 представляет собой соединение A31 или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ WO 2012/022814. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с соединением A31 или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ WO 2012/022814, для лечения нарушения, такого как рак ЖКТ, рак пищевода, рак головы и шеи, плоскоклеточная карцинома, рак желудка, рак молочной железы (например, метастатический рак молочной железы) или рак пищеварительного/желудочно-кишечного тракта.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор FGFR2 и/или FGFR4, соединение A32 или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2014/160160 (например, конъюгат лекарственного средства и молекулы антитела к FGFR2 и/или FGFR4, например mAb 12425), или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор FGFR2 и/или FGFR4 представляет собой соединение A32 или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2014/160160. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с соединением A32 или соединением, описанным в таблице 18, для лечения нарушения, такого как рак, рак ЖКТ, рак молочной железы, рабдомиосаркома, рак печени, рак надпочечника, рак легкого, рак пищевода, рак толстой кишки или рак эндометрия.

В некоторых вариантах осуществления соединение A32 представляет собой конъюгат лекарственного средства и молекулы антитела к FGFR2 и/или FGFR4, например mAb 12425.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор M-CSF, соединение A33 или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2004/045532 (например, молекулу антитела или фрагмент Fab к M-CSF), или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор M-CSF представляет собой соединение A33 или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2004/045532. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с соединением A33 или соединением, которое описано в публикации согласно РСТ № WO 2004/045532, для лечения нарушения, такого как рак, рак предстательной железы, рак молочной железы или пигментный виллонодулярный синовит (PVNS).

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор MEK или применяется в комбинации с ним для лечения нарушения, такого как немелкоклеточный рак легкого, мультисистемное генетическое нарушение, меланома, рак яичника, рак пищеварительного/желудочно-кишечного тракта, ревматоидный артрит или колоректальный рак.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор одного или нескольких из c-KIT, высвобождения гистамина, Flt3 (например, FLK2/STK1) или РКС, мидостаурин (соединение А35) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2003/037347, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор представляет собой мидостаурин (соединение A35) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2003/037347. В одном варианте осуществления ингибитор одного или нескольких из c-KIT, высвобождения гистамина, Flt3 (например, FLK2/STK1) или PKC представляет собой мидостаурин. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с мидостаурином (соединением A35) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2003/037347, для лечения нарушения, такого как рак, колоректальный рак, миелоидный лейкоз, миелодиспластический синдром, возрастная макулярная дегенерация, диабетическое осложнение или дерматологическое нарушение.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор TOR (например, ингибитор mTOR), эверолимус (также известный как AFINITOR; соединение A36) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2014/085318, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор TOR представляет собой эверолимус (соединение A36) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2014/085318. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с эверолимусом (соединением A36) для лечения нарушения, такого как колоректальный рак, интерстициальное заболевание легких, мелкоклеточный рак легкого, рак респираторного тракта/грудной клетки, рак предстательной железы, множественная миелома, саркома, возрастная макулярная дегенерация, рак кости, туберозный склероз, немелкоклеточный рак легкого, эндокринный рак, лимфома, неврологические нарушения, астроцитома, рак шейки матки, неврологический рак, лейкоз, иммунологические нарушения, отторжение трансплантата, рак ЖКТ, меланома, эпилепсия, рак молочной железы (например, трижды негативного рака легких (TNBC) или рак мочевого пузыря. В некоторых вариантах осуществления рак выбран из колоректального рака (например, колоректального рака с микросателлитной стабильностью (MSS CRC)), рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого) или рака молочной железы (например, трижды негативного рака легких (TNBC)).

В некоторых вариантах осуществления комбинация, описанная в данном документе, содержит ингибитор mTOR, эверолимус (соединение A36) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2014/085318, и ингибитор молекулы, представляющей собой контрольную точку иммунного ответа, например ингибитор CD73 (например, молекулу антитела к CD73).

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор одного или нескольких из VEGFR-2, PDGFRbeta, KIT или киназы Raf C, 1-метил-5-((2-(5-(трифторметил)-1H-имидазол-2-ил)пиридин-4-ил)окси)-N-(4-(трифторметил)фенил)-1H-бензо[d]имидазол-2-амин (соединение A37) или с соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2007/030377, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор одного или нескольких из VEGFR-2, PDGFRbeta, KIT или киназы Raf C представляет собой 1-метил-5-((2-(5-(трифторметил)-1H-имидазол-2-ил)пиридин-4-ил)окси)-N-(4-(трифторметил)фенил)-1H-бензо[d]имидазол-2-амин (соединение A37) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2007/030377. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с 1-метил-5-((2-(5-(трифторметил)-1H-имидазол-2-ил)пиридин-4-ил)окси)-N-(4-(трифторметил)фенил)-1H-бензо[d]имидазол-2-амином (соединением A37) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2007/030377, для лечения нарушения, такого как рак, меланома или солидная опухоль.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит агонист соматостатина и/или ингибитор высвобождения гормона роста, пасиреотида диаспартат (также известный как SIGNIFOR; соединение A38), или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO2002/010192 или патенте США № 7473761, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления агонист соматостатина и/или ингибитор высвобождения гормона роста представляет собой пасиреотида диаспартат (соединение A38) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO2002/010192 или патенте США № 7473761. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с пасиреотида диаспартатом (соединением A38) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO2002/010192 или патенте США № 7473761, для лечения нарушения, такого как рак предстательной железы, эндокринный рак, неврологический рак, нейроэндокринная опухоль (NET) (например, атипичная карциноидная опухоль легкого), рак кожи (например, меланома или карцинома Меркеля), рак поджелудочной железы, рак печени, синдром Кушинга, нарушение функции гастроинтестинального тракта, акромегалия, нарушение функции печени и желчных протоков или цирроз печени.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит модулятор трансдукции сигнала и/или ингибитор ангиогенеза или применяется в комбинации с ними, например, для лечения нарушения, такого как рак, рак респираторного тракта/грудной клетки, множественная миелома, рак предстательной железы, немелкоклеточный рак легкого, эндокринный рак или неврологическое генетическое нарушение.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор EGFR, (R, E)-N-(7-хлор-1-(1)-(4-(диметиламино)бут-2-еноил)азепан-3-ил)-1Н-бензо[d]имидазол-2-ил)-2-метилизоникотинамид (соединение A40) или соединение, раскрытое в PCT № WO 2013/184757, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор EGFR представляет собой (R, E)-N-(7-хлор-1-(1-(4-(диметиламино)бут-2-еноил)азепан-3-ил)-1H-бензо[d]имидазол-2-ил)-2-метилизоникотинамид (соединение A40) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2013/184757. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с (R, E)-N-(7-хлор-1-(1-(4-(диметиламино)бут-2-еноил)азепан-3-ил)-1H-бензо[d]имидазол-2-ил)-2-метилизоникотинамидом (соединением A40) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2013/184757, для лечения нарушения, такого как рак, например солидная опухоль.

В некоторых вариантах осуществления ингибитор EGFR, (R, E)-N-(7-хлор-1-(1-(4-(диметиламино)бут-2-еноил)азепан-3-ил)-1H-бензо[d]имидазол-2-ил)-2-метилизоникотинамид (соединение А40) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2013/184757, вводят в комбинации с ингибитором CD73 (например, молекулой антитела к CD73) для лечения колоректального рака (CRC), рака легкого (например, немелкоклеточного рака легкого (NSCLC)) или рака молочной железы (например, трижды негативного рака молочной железы (TNBC)).

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор ALK, N⁶-(2-изопропокси-5-метил-4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил)-N⁴-(2-(изопропилсульфонил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4,6-диамин (соединение A42) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2008/073687, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор ALK представляет собой N⁶-(2-изопропокси-5-метил-4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил)-N⁴-(2-(изопропилсульфонил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4,6-диамин (соединение A42) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2008/073687. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с N⁶-(2-изопропокси-5-метил-4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил)-N⁴-(2-(изопропилсульфонил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4,6-диамином (соединением A42) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2008/073687, для лечения нарушения, такого как рак, анапластическая крупноклеточная лимфома (ALCL), немелкоклеточная карцинома легкого (NSCLC) или нейробластома.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор IGF-1R, 3-(4-(4-((5-хлор-4-((5-метил-1H-пиразол-3-ил)амино)пиримидин-2-ил)амино)-5-фтор-2-метилфенил)пиперидин-1-ил)тиэтан-1,1-диоксид (соединение A43), 5-хлор-N²-(2-фтор-5-метил-4-(1-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)пиперидин-4-ил)фенил)-N⁴-(5-метил-1H-пиразол-3-ил)пиримидин-2,4-диамин (соединение A44) или 5-хлор-N2-(4-(1-этилпиперидин-4-ил)-2-фтор-5-метилфенил)-N⁴-(5-метил-1H-пиразол-3-ил)пиримидин-2,4-диамин (соединение A45) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2010/002655, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например описанного нарушения. В одном варианте осуществления ингибитор IGF-1R представляет собой 3-(4-(4-((5-хлор-4-((5-метил-1H-пиразол-3-ил)амино)пиримидин-2-ил)амино)-5-фтор-2-метилфенил)пиперидин-1-ил)тиэтан-1,1-диоксид (соединение A43), 5-хлор-N²-(2-фтор-5-метил-4-(1-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)пиперидин-4-ил)фенил)-N⁴-(5-метил-1H-пиразол-3-ил)пиримидин-2,4-диамин (соединение A44), 5-хлор-N2-(4-(1-этилпиперидин-4-ил)-2-фтор-5-метилфенил)-N⁴-(5-метил-1H-пиразол-3-ил)пиримидин-2,4-диамин (соединение A45) или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO 2010/002655. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с 3-(4-(4-((5-хлор-4-((5-метил-1H-пиразол-3-ил)амино)пиримидин-2-ил)амино)-5-фтор-2-метилфенил)пиперидин-1-ил)тиэтан-1,1-диоксидом (соединением A43), 5-хлор-N²-(2-фтор-5-метил-4-(1-(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)пиперидин-4-ил)фенил)-N⁴-(5-метил-1H-пиразол-3-ил)пиримидин-2,4-диамином (соединением A44), 5-хлор-N2-(4-(1-этилпиперидин-4-ил)-2-фтор-5-метилфенил)-N⁴-(5-метил-1H-пиразол-3-ил)пиримидин-2,4-диамином (соединением A45) или соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO 2010/002655, для лечения нарушения, такого как рак или саркома.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор P-гликопротеина 1, валсподар (также известный как AMDRAY; соединение A46) или соединение, раскрытое в EP 296122, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор P-гликопротеина 1 представляет собой валсподар (соединение A46) или соединение, раскрытое в EP 296122. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с валсподаром (соединением A46) или соединением, раскрытым в EP 296122, для лечения нарушения, такого как рак или опухоль, резистентная к лекарственным средствам.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит один или несколько из ингибитора VEGFR, сукцината ваталаниба (соединения A47) или соединения, раскрытого в EP 296122, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор VEGFR представляет собой ваталаниба сукцинат (соединение A47) или соединение, раскрытое в EP 296122. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с ваталаниба сукцинатом (соединением A47) или соединением, описанным в EP 296122, для лечения рака.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор IDH или соединение, раскрытое в WO2014/141104, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор IDH представляет собой соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO2014/141104. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации соединением, описанным в WO2014/141104, для лечения нарушения, такого как рак.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор BCL-ABL или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO2013/171639, WO2013/171640, WO2013/171641 или WO2013/171642, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор BCL-ABL представляет собой соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO2013/171639, WO2013/171640, WO2013/171641 или WO2013/171642. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 применяют в комбинации с соединением, раскрытым в публикации согласно РСТ № WO2013/171639, WO2013/171640, WO2013/171641 или WO2013/171642, для лечения нарушения, такого как рак.

В другом варианте осуществления комбинация, например комбинация, содержащая молекулу антитела к CD73, описанную в данном документе, содержит ингибитор c-RAF или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO2014/151616, или применяется в комбинации с ними для лечения нарушения, например нарушения, описанного в данном документе. В одном варианте осуществления ингибитор c-RAF представляет собой соединение A50 или соединение, раскрытое в публикации согласно РСТ № WO2014/151616. В некоторых вариантах осуществления ингибитор c-RAF или соединение A50 представляет собой соединение формулы (I):

или его фармацевтически приемлемую соль, где

Z¹ представляет собой O, S, S(=O) или SO₂;

Z² представляет собой N, S или CR^a, где R^a представляет собой H, галоген, C_1-4-алкил или C_1-4-галогеналкил;

R¹ представляет собой CN, галоген, OH, C_1-4-алкокси или C_1-4-алкил, который необязательно замещен одной-тремя группами, выбранными из галогена, C_1-4-алкокси, CN или гидроксила;

Кольцо B выбрано из фенила, пиридина, пиримидина, пиразина, пиридазина, пиридона, пиримидона, пиразинона, пиридазинона и тиазола, каждый из которых необязательно замещен не более чем двумя группами, выбранными из галогена, OH, CN, C_1-4-алкила, C_2-4-алкенила, -O-(C_1-4-алкила), NH₂, NH-(C_1-4-алкила), -N(C_1-4-алкила)₂, -SO₂R², NHSO₂R², NHC(O)R², NHCO₂R², C₃-₆-циклоалкила, 5-6-членного гетероарила, -O-C₃-₆-циклоалкила, -O-(5-6-членного гетероарила), C_4-8-гетероциклоалкила и -O-(4-8-членного гетероциклоалкила), где каждый их гетероциклоалкила и гетероарила содержит не более трех гетероатомов, выбранных из N, O и S, в качестве членов кольца,

где каждый C_1-4-алкил, C_2-4-алкенил, C_3-6-циклоалкил, 5-6-членный гетероарил и 4-8-членный гетероциклоалкил, каждый необязательно замещен не более чем тремя группами, выбранными из оксо, гидроксила, галогена, C_1-4-алкила, C_1-4-галогеналкила, C_1-4-алкокси и -(CH₂)_1-2Q, где Q представляет собой OH, C_1-4-алкокси, -CN, NH₂, -NHR³, -N(R³)₂, -SO₂R³, NHSO₂R³, NHC(O)OR³ или NHC(O)R³; каждый R² и R³ независимо представляет собой _C1-4-алкил; и

Кольцо B необязательно конденсировано с 5-6-членным ароматическим или неароматическим кольцом, содержащим не более двух гетероатомов, выбранных из N, O и S, при этом 5-6-членное кольцо может быть замещено галогеном, C_1-4-алкилом, C_1-4-галогеналкилом или C_1-4-алкокси, и если конденсированное кольцо не является ароматическим, варианты заместителя могут дополнительно включать оксо;

каждый Y независимо выбран из C_1-4-алкила, C_1-4-алкокси, CN, галогена, оксо, -(CH₂)_POR⁴, -(CH₂)p N(R⁴)₂, -(CH₂)pNHC(O)R⁴, -(CH₂)_pNHCOO(C_1-4-алкила) и имидазола.

или две группы Y в кольце A необязательно вместе образуют кольцо, конденсированное с кольцом А или образующее мостиковую связь с ним, где указанное кольцо, присоединенное путем конденсации или образования мостиковой связи, необязательно содержит гетероатом, выбранный из N, O и S, в качестве члена кольца, и необязательно замещен не более чем двумя группами, выбранными из C_1-4-алкила, C_1-4-алкокси, CN, галогена, оксо, -(CH₂)_pOR⁴, -(CH₂)_P N(R⁴)₂, -(CH₂)_pNHC(O)R⁴, и -(CH₂)_pNHCOO(C_1-4-алкила);

каждый R⁴ независимо представляет собой H или C_1-4-алкил;

каждое p независимо равняется 0, 1 или 2;

q равняется 0, 1 или 2;

Z³, Z⁴ и Z⁵ независимо выбраны из CH и N, и необязательно NO;

L представляет собой -C(=O)-NR⁴-[CY] или -NR⁴-C(=O)-[CY], где [CY] указывает, какой атом L присоединен к CY; и

CY представляет собой ароматическое кольцо, выбранное из фенила, пиридина, пиримидина, пиразина, пиридазина, пиридона, тиазола, изотиазола, оксазола, пиразола и изоксазола, при этом кольцо необязательно слито с кольцом, представляющим собой тиофен, имидазол, оксазолон или пиррол;

и CY замещен не более чем двумя группами, выбранными из галогена, CN, R⁵, OR⁵, SO₂R⁵, -S(=NH)(=O)R⁵, OH, NH₂, NHR⁵ и -N(R⁵)₂,

где каждый R⁵ независимо представляет собой C_1-4-алкил, C_2-4-алкенил, C_2-6-гетероциклил, 5-членный гетероарил, содержащий до трех гетероатомов, выбранных из N, O и S, в качестве членов кольца или C_3-8-циклоалкил, и R⁵ необязательно замещен не более чем четырьмя группами, выбранными из оксо, галогена, CN, R⁶, OH, OR⁶, SO₂R⁶, NH₂, NHR⁶, N(R⁶)₂, NHSO₂R⁶, NHCOOR⁶, NHC(=O)R⁶, -CH₂OR⁷, -CH₂N(R⁷)₂, где каждый

R⁶ независимо представляет собой C_1-4-алкил, и каждый R⁷ независимо представляет собой H или C_1-4-алкил;

и два R⁴, R⁵, R⁶ или R⁷ на одном и том же атоме азота могут быть взяты вместе для образования 5-6-членного гетероциклического кольца, необязательно содержащего дополнительный N, O или S в качестве члена кольца и необязательно замещенного с помощью не более двух групп, выбранных из C_1-4-алкила, оксо, галогена, ОН и C_1-4-алкокси.

Способы введения молекул антитела известны из уровня техники и описаны ниже. Подходящие дозировки используемых молекул будут зависеть от возраста и веса субъекта и конкретного применяемого лекарственного средства. Дозировки и терапевтические схемы приема молекулы антитела к CD73 могут быть определены специалистом в данной области техники.

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят путем инъекции (например, внутривенно) в дозе (например, фиксированной дозе) от приблизительно 60 мг до 2400 мг, например от приблизительно 100 мг до 2400 мг, от приблизительно 100 мг до 2200 мг, от приблизительно 100 мг до 2000 мг, от приблизительно 100 мг до 1800 мг, от приблизительно 100 мг до 1600 мг, от приблизительно 100 мг до 1400 мг, от приблизительно 100 мг до 1200 мг, от приблизительно 100 мг до 1000 мг, от приблизительно 100 мг до 800 мг, от приблизительно 100 мг до 600 мг, от приблизительно 100 мг до 400 мг, от приблизительно 100 мг до 200 мг или приблизительно 100 мг, приблизительно 180 мг или приблизительно 200 мг. Схема введения доз может варьировать от, например, раза в неделю до раза в 2, 3 или 4 недели. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в дозе приблизительно 100 мг раз в две недели путем внутривенной инфузии. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в дозе по меньшей мере приблизительно 180 мг раз в две недели путем внутривенной инфузии. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в дозе приблизительно 200 мг раз в две недели путем внутривенной инфузии.

В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73, раскрытую в данном документе, вводят путем инъекции (например, подкожно или внутривенно) в дозе (например, фиксированной дозе) от приблизительно 5 мг до 100 мг, от приблизительно 100 мг до 500 мг, от приблизительно 500 мг до 1000 мг, от приблизительно 1000 мг до 1500 мг, от приблизительно 1500 мг до 2000 мг, от приблизительно 2000 мг до 2500 мг, от приблизительно 2500 мг до 3000 мг, от приблизительно 3000 мг до 3500 мг или от приблизительно 3500 мг до 4000 мг, например раз в неделю (QW), раз в две недели (Q2W) или раз в четыре недели (Q4W). В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 6 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 60 мг, приблизительно 200 мг, приблизительно 600 мг, приблизительно 1200 мг, приблизительно 2400 мг, приблизительно 3000 мг, или приблизительно 3600 мг, например QW, Q2W или Q4W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 60 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 200 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 600 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 1200 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 2400 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 3000 мг Q2W. В определенных вариантах осуществления молекулу антитела вводят, например внутривенно, в дозе приблизительно 3600 мг Q2W.

В определенных вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят путем инъекции (например, внутривенно) в дозе от приблизительно 1 до 30 мг/кг, например от приблизительно 5 до 25 мг/кг, от приблизительно 10 до 20 мг/кг, от приблизительно 1 до 5 мг/кг или приблизительно 3 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в дозе приблизительно 1 мг/кг, приблизительно 3 мг/кг или 10 мг/кг, приблизительно 20 мг/кг, приблизительно 30 мг/кг или приблизительно 40 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в дозе приблизительно 1-3 мг/кг или приблизительно 3-10 мг/кг. В некоторых вариантах осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в дозе приблизительно 0,5-2, 2-4, 2-5, 5-15 или 5-20 мг/кг. Схема введения доз может варьировать от, например, раза в неделю до раза в 2, 3 или 4 недели. В одном варианте осуществления молекулу антитела к CD73 вводят в дозе от приблизительно 10 до 20 мг/кг раз в две недели.

Молекулы антител могут применяться в виде неконъюгированных форм или конъюгированных со вторым средством, например цитотоксическим лекарственным средством, радиоизотопом или белком, например белковым токсином или вирусным белком. Такой способ предусматривает: введение молекулы антитела, отдельно или конъюгированной с цитотоксическим лекарственным средством, субъекту, нуждающемуся в таком лечении. Молекулы антител можно применять для доставки различных терапевтических средств, например цитотоксического фрагмента, например терапевтического лекарственного средства, радиоизотопа, молекул растительного, грибкового или бактериального происхождения или белков биологического происхождения (например, белковых токсинов) или частиц (например, рекомбинантных вирусных частиц, например, с помощью белка оболочки вируса) или их смеси.

Диагностические пути применения

В одном аспекте в настоящем изобретении обеспечивают способ диагностики для обнаружения присутствия белка CD73 in vitro (например, в биологическом образце, таком как биоптат ткани, например, из раковой ткани) или in vivo (например, визуализация в субъекте in vivo). Способ предусматривает: (i) приведение образца в контакт с молекулой антитела, описанной в данном документе, или введение субъекту молекулы антитела; (необязательно) (ii) приведение в контакт эталонного образца, например контрольного образца (например, контрольного биологического образца, такого как плазма крови, ткань, биоптат) или контрольного субъекта)); и (iii) обнаружение образования комплекса между молекулой антитела и образцом или субъектом, или контрольным образцом или субъектом, где изменение, например статистически значимое изменение, в образовании комплекса в образце или субъекте относительно контрольного образца или субъекта свидетельствует о наличии CD73 в образце. Молекулу антитела можно прямо или косвенно метить с помощью вещества, обеспечивающего обнаружение, для обеспечения обнаружения связанного или несвязанного антитела. Подходящие вещества, обеспечивающие обнаружение, включают различные ферменты, простетические группы, флуоресцентные материалы, люминесцентные материалы и радиоактивные материалы, описанные выше и описанные более подробно ниже.