СОПУТСТВУЮЩАЯ ИНФОРМАЦИЯ
Настоящая заявка испрашивает преимущество даты приоритета предварительной заявки США № 62/531215, поданной 11 июля 2017 г., содержание которой полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки.
ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Компонент комплемента 5 (C5) является пятым компонентом комплемента, который играет важную роль в воспалительных процессах и киллинге клеток. Активированный пептид C5a, который представляет собой анафилатоксин, который обладает сильной спазмогенной и хемотаксической активностью, образуется из альфа полипептида в результате расщепления C5-конвертазой. Продукт расщепления макромолекулы C5b может образовывать комплекс с компонентом комплемента C6, и этот комплекс является основой для образования мембраноатакующего комплекса (MAC), который включает дополнительные компоненты комплемента.
При нарушенной регуляции C5 может привести к ослабленному иммунитету у пациентов или расстройствам, характеризующимся чрезмерной клеточной деградацией (например, гемолитическим расстройствам, вызываемым C5-опосредованным гемолизом).
Поскольку нарушенная регуляция C5 может привести к тяжелым и разрушительным фенотипам, необходимы модуляторы C5 активности с подходящими фармацевтическими свойствами (например, периодом полужизни).
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее раскрытие представляет сконструированные полипептиды, которые специфически связываются с компонентом комплемента C5 или сывороточным альбумином, при этом такие сконструированные полипептиды могут представлять собой вариабельные домены sdAb или Ig. В некоторых вариантах осуществления сконструированные полипептиды не снижают существенным образом или не ингибируют связывание сывороточного альбумина с FcRn, или не уменьшают существенным образом период полужизни сывороточного альбумина. Настоящее раскрытие также представляет слитые белки, включающие такие сконструированные полипептиды, где такие слитые белки могут представлять собой мультивалентные и мультиспецифические слитые белки. Настоящее раскрытие также представляет молекулы нуклеиновых кислот, которые кодируют такие сконструированные полипептиды или слитые белки, и способы получения таких сконструированных полипептидов или слитых белков. Настоящее раскрытие также представляет фармацевтические композиции, которые включают такие сконструированные полипептиды или слитые белки, и способы лечения с использованием таких сконструированных полипептидов или слитых белков.
В одном варианте осуществления изобретение направлено на слитый белок, включающий сконструированный полипептид, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, и сконструированный полипептид, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, где сконструированный полипептид, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, слит с полипептидом, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, либо непосредственно, либо через пептидный линкер. В особом варианте осуществления C-концевой остаток полипептида, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, слит либо непосредственно, либо через линкер с N-концевым остатком полипептида, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5. В особом варианте осуществления C-концевой остаток полипептида, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, слит либо непосредственно, либо через линкер с N-концевым остатком полипептида, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином. В особом варианте осуществления полипептид, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:1-12 и их фрагментов; и полипептид, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:22-34 и их фрагментов. В особом варианте осуществления полипептид, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:11, и полипептид, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:26. В особом варианте осуществления слитые белки, описанные в настоящей заявке, дополнительно включают пептидный линкер, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:102 или 103. В особом варианте осуществления слитый белок включает последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:96-101. В особом варианте осуществления слитый белок состоит из последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:96-101. В особом варианте осуществления слитый белок состоит из полипептидной последовательности SEQ ID NO:96. В особом варианте осуществления полипептид, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, включает три определяющие комплементарность области CDR1, CDR2 и CDR3, где CDR1 включает любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:13-17, CDR2 включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18 или 19, и CDR3 включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:20 или 21. В особом варианте осуществления полипептид, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, включает три определяющие комплементарность области CDR1, CDR2 и CDR3, где CDR1 включает любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:35-43, CDR2 включает любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:44-51, и CDR3 включает любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:52-63. В некоторых вариантах осуществления антиген-связывающие домены, описанные в настоящей заявке, могут быть сконструированы или далее разработаны так, чтобы связывать антиген pH-зависимым образом, например, с высокой аффинностью к антигену при высоком pH и с более низкой аффинностью связывания с антигеном при более низком pH, или наоборот.
В одном варианте осуществления изобретение направлено на фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество слитого белка, описанного в настоящей заявке, и фармацевтически приемлемый носитель. В особом варианте осуществления фармацевтические композиции могут содержать агент, который разрушает или инактивирует гиалуронан, например гиалуронидазу или рекомбинантную гиалуронидазу.
В одном варианте осуществления изобретение направлено на выделенную молекулу нуклеиновой кислоты, включающую нуклеотидную последовательность, кодирующую слитый белок, описанный в настоящей заявке. Молекула нуклеиновой кислоты может представлять собой, например, вектор экспрессии. Изобретение направлено на клетки-хозяева (например, клетки яичников китайского хомячка (CHO), клетки HEK293, клетки Pichia pastoris, клетки млекопитающих, клетки дрожжей, клетки растений) и системы экспрессии, которые включают или используют нуклеиновые кислоты, которые кодируют слитые белки, описанные в настоящей заявке.
В одном варианте осуществления изобретение направлено на сконструированный полипептид, который связывается с человеческим компонентом комплемента C5, где сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:1-12 и их фрагментов. В особом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична (например, на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, или 99% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:1-12. Например, в одном варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:1, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:2, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:3, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:4 или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:5, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:6, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:7, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:8, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:9, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:10, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:11, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:12, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%.
В другом варианте осуществления обеспечивается сконструированный полипептид, который связывается с человеческим компонентом комплемента C5, где сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:1-12 и их фрагментов. Например, в одном варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:1. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:2. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:3. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:4. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:5. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:6. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:7. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:8. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:9. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:10. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:11. в другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:12.
В одном варианте осуществления изобретение направлено на сконструированный полипептид, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, где полипептид включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:22-34 и их фрагментов. В особом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична (например, на 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, или 99% идентична) любой из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:22-34. Например, в одном варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:22, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:23, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:24, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:25, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:26, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:27, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:28, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:29, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:30, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:31, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:32, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:33, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:34, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%.
В другом варианте осуществления сконструированный полипептид, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:22-34 и их фрагментов. Например, в одном варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:22. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:23. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:24. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:25. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:26. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:27. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:28. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:29. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:30. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:31. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:32. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:33. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:34.
В особом варианте осуществления сконструированный полипептид, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, включает три определяющие комплементарность области CDR1, CDR2 и CDR3, где CDR1 включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:35-43, CDR2 включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:44-51, и CDR3 включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:52-63. В особом варианте осуществления полипептид специфически связывается с тем же эпитопом на человеческом сывороточном альбумине, что и Alb1.
В одном варианте осуществления изобретение направлено на способ получения слитого белка, описанного в настоящей заявке, включающий экспрессию в клетке-хозяине по меньшей мере одной молекулы нуклеиновой кислоты, включающей нуклеотидную последовательность, кодирующую слитый белок.
В одном варианте осуществления изобретение направлено на терапевтический набор, включающий: (a) контейнер, включающий этикетку; и (b) композицию, включающую слитый белок, описанный в настоящей заявке; где этикетка указывает, что композиция предназначена для введения пациенту, имеющему, или у которого подозревается, комплемент-опосредованное расстройство. Набор необязательно может включать агент, который разрушает или инактивирует гиалуронан, например, гиалуронидазу или рекомбинантную гиалуронидазу.
В одном варианте осуществления изобретение направлено на способ лечения пациента, имеющего комплемент-опосредованное расстройство, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества слитого белка, описанного в настоящей заявке. В особом варианте осуществления комплемент-опосредованное расстройство выбрано из группы, состоящей из следующих расстройств: ревматоидный артрит; люпус-нефрит; астма; ишемическое-реперфузионное повреждение; атипичный гемолитико-уремический синдром; болезнь плотного осадка; пароксизмальная ночная гемоглобинурия; дегенерация желтого пятна; синдром гемолиза, повышения уровня печеночных ферментов и низкого уровня тромбоцитов (HELLP); синдром Гийена-Барре; синдром CHAPLE; тяжелая миастения; оптиконевромиелит; тромботическая микроангиопатия после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (post-HSCT-TMA); TMA после трансплантации костного мозга (post-BMT TMA); болезнь Дегоса; болезнь Гоше; гломерулонефрит; тромботическая тромбоцитопеническая пурпура (TTP); спонтанная потеря плода; малоиммунный васкулит; буллезный эпидермолиз; рекуррентная потеря плода; рассеянный склероз (MS); травматическое повреждение головного мозга; и повреждение в результате инфаркта миокарда, сердечно-легочного шунтирования и гемодиализа.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Фиг. 1A и 1B показывают результаты анализа классического пути комплемента (CCP) методом гемолиза для анти-C5 VHH доменов.
Фиг. 2 показывает результаты анализа высвобождения C5a для анти-C5 VHH доменов.
Фиг. 3A-3D показывают результаты анализа CCP методом гемолиза для биспецифических слитых белков.
Фиг. 4 показывает результаты анализа CCP методом Wieslab для биспецифических слитых белков.
Фиг. 5 показывает результаты анализа высвобождения C5a для биспецифических слитых белков.
Фиг. 6A и 6B показывают результаты основанного на ЖХ-МС количественного анализа, демонстрирующие фармакокинетику биспецифических слитых белков.
Фиг. 7A-7D показывают Biacore сенсограммы, показывающие связывание FcRn при pH 6,0 в HBS-EP буфере с HSA с насыщением без VHH домена (контроль, Фиг. 7A), MSA21 (Фиг. 7B), HAS040 (Фиг. 7C) или HAS041 (Фиг. 7D).
Фиг. 8A-8D показывают Biacore сенсограммы, показывающие связывание альбумина VHH доменами HAS020, HAS040, HAS041 и HAS044 в конкуренции с Alb1 VHH.
Фиг. 9A и 9B показывают способность различных биспецифических слитых белков ингибировать гемолиз.
Фиг. 10 показывает, что CRL0952 (SEQ ID NO:96) функционально является чрезвычайно схожим с CRL0500 в предотвращении гемолиза. CRL0500 представляет собой биспецифический C5- и альбумин-связывающий слитый белок с (G4S)3 (SEQ ID NO:106) линкером.
Фиг. 11A-11D показывают pH-зависимое связывание гистидин-замещенных слитых белков.
Фиг. 12A и 12B показывают pH-зависимое связывание гистидин-замещенных слитых белков.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
Настоящее раскрытие представляет сконструированные полипептиды, которые специфически связываются с сывороточным альбумином или компонентом комплемента C5, при этом сконструированные полипептиды могут представлять собой, например, однодоменные антитела (sdAb) или вариабельные домены иммуноглобулинов (IgG). В некоторых вариантах осуществления сконструированные полипептиды не снижают существенным образом или не ингибируют связывание сывороточного альбумина с FcRn или не уменьшают существенным образом период полужизни сывороточного альбумина. Настоящее раскрытие также представляет слитые белки, включающие сконструированные полипептиды, при этом слитые белки могут представлять собой, например, мультивалентные и мультиспецифические слитые белки. Настоящее раскрытие также представляет молекулы нуклеиновых кислот, которые кодируют сконструированные полипептиды или слитые белки, и способы получения таких сконструированных полипептидов или слитых белков. Настоящее раскрытие также представляет фармацевтические композиции, которые включают сконструированные полипептиды или слитые белки, и способы лечения с использованием таких сконструированных полипептидов или слитых белков.
Стандартные методы рекомбинантной ДНК используются для конструирования полинуклеотидов, кодирующих сконструированные полипептиды или слитые белки по настоящему изобретению, включения таких полинуклеотидов в рекомбинантные экспрессирующие векторы и введения таких векторов в клетки-хозяева для продуцирования сконструированных полипептидов или слитых белков по изобретению. См., например, Sambrook et al., 2001, Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 3rd ed.). Если не представлены конкретные определения, номенклатура, а также лабораторные процедуры и методы, используемые в связи с аналитической химией, синтетической органической химией и медицинской и фармацевтической химией, являются такими, которые известны и широко используются в данной области. Аналогичным образом, традиционные методы можно использовать для процедур химического синтеза, химических анализов, получения фармацевтических композиций, формулирования, доставки и лечения пациентов.
Определения
В контексте настоящего раскрытия следующие термины, если не указано иное, следует понимать как имеющие следующие значения. Если контекст не требует иного, термины в единственном числе включают множественное число, а термины во множественном числе включают единственное число.
В контексте настоящего раскрытия термин “связывающийся домен” относится к части белка или антитела, которая включает аминокислотные остатки, которые взаимодействуют с антигеном. Связывающиеся домены включают, но не ограничиваются этим, антитела (например, полноразмерные антитела), а также их антигенсвязывающие части. Связывающийся домен придает связывающему агенту его специфичность и аффинность к антигену. Термин также охватывает любой белок, имеющий связывающийся домен, который гомологичен или в значительной степени гомологичен иммуноглобулин-связывающему домену.
Термин “антитело” в контексте настоящего раскрытия включает полные антитела и любой их антигенсвязывающий фрагмент (то есть “антигенсвязывающую часть”) или одноцепочечный вариант. “Антитело” в одном предпочтительном варианте осуществления относится к гликопротеину, включающему по меньшей мере две тяжелые (Н) цепи и две легкие (L) цепи, связанные между собой дисульфидными связями, или его антигенсвязывающей части. Каждая тяжелая цепь состоит из вариабельной области тяжелой цепи (сокращенно обозначенной как VH) и константной области тяжелой цепи. Константная область тяжелой цепи состоит из трех доменов, CH1, CH2 и CH3. Каждая легкая цепь состоит из вариабельной области легкой цепи (сокращенно обозначенной как VL) и константной области легкой цепи. Константная область легкой цепи состоит из одного домена CL. Области VH и VL можно далее подразделить на области гипервариабельности, называемые определяющими комплементарность областями (CDR), чередующиеся с областями, которые являются более консервативными, называемыми каркасными областями (FR). Каждая VH и VL состоит из трех CDR и четырех FR, расположенных от амино-конца к карбокси-концу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Вариабельные области тяжелой и легкой цепей содержат связывающийся домен, который взаимодействует с антигеном. Константные области антител могут опосредовать связывание иммуноглобулина с тканями или факторами хозяина, включая различные клетки иммунной системы (например, эффекторные клетки) и первый компонент (Clq) классической системы комплемента.
Термин “антигенсвязывающий фрагмент” антитела (или просто “фрагмент антитела”), в контексте настоящей заявки, относится к одному или нескольким фрагментам или частям антитела, которые сохраняют способность специфически связываться с антигеном. Такие "фрагменты" имеют, например, от около 8 до около 1500 аминокислот в длину, подходяще от около 8 до около 745 аминокислот в длину, подходяще от около 8 до около 300, например от около 8 до около 200 аминокислот или от около 10 до около 50 или 100 аминокислот в длину. Было показано, что антигенсвязывающая функция антитела может осуществляться фрагментами полноразмерного антитела. Примеры связывающихся фрагментов, охватываемых термином “антигенсвязывающий фрагмент” антитела, включают (i) Fab фрагмент, одновалентный фрагмент, состоящий из VL, VH, CL и CH1 доменов; (ii) F(ab')2 фрагмент, двухвалентный фрагмент, включающий два Fab фрагмента, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области; (iii) Fd фрагмент, состоящий из VH и CH1 доменов; (iv) Fv фрагмент, состоящий из VL и VH доменов одного плеча антитела, (v) dAb фрагмент (Ward et al., (1989) Nature 341:544-546), который состоит из VH домена; и (vi) выделенную определяющую комплементарность область (CDR) или (vii) комбинацию двух или более выделенных CDR, которые необязательно моегут быть соединены синтетическим линкером. Кроме того, хотя два домена Fv фрагмента, VL и VH, кодируются отдельными генами, их можно соединить, с использованием рекомбинантных методов, синтетическим линкером, который обеспечивает возможность их получения в виде одной белковой цепи, в которой VL и VH области спариваются с образованием одновалентных молекул (известны как одноцепочечный Fv (sFv); см., например, Bird et al. (1988) Science 242:423-426; и Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883). Такие одноцепочечные антитела также охватываеются термином “антигенсвязывающий фрагмент” антитела. Эти фрагменты антител получают с использованием традиционных методов, известных специалистам в данной области, и фрагменты скринируют на применимость таким же способом, как и интактные антитела. Антигенсвязывающие части можно получить методами рекомбинантной ДНК или путем ферментативного или химического расщепления интактных иммуноглобулинов.
Термин “рекомбинантное человеческое антитело,” в контексте настоящей заявки, включает все человеческие антитела, которые получены, экспрессированы, созданы или выделены рекомбинантными методами, такие как (a) антитела, выделенные у животного (например, мыши), которое является трансгенным или трансхромосомным для генов иммуноглобулина человека, или гибридома, полученная из них, (b) антитела, выделенные из клетки-хозяина, трансформированной для экспрессии антитела, например, из трансфектомы, (c) антитела, выделенные из комбинаторной библиотеки рекомбинантных человеческих антител, и (d) антитела, которые получены, экспрессированы, созданы или выделены любыми другими способами, которые включают сплайсинг последовательностей генов иммуноглобулина человека с другими последовательностями ДНК. Такие рекомбинантные человеческие антитела включают вариабельные и константные области, которые используют определенные последовательности иммуноглобулинов зародышевой линии человека, кодируются генами зародышевой линии, но включают последующие перестройки и мутации, которые происходят, например, в процессе созревания антитела. Как известно в данной области техники (см., например, Lonberg (2005) Nature Biotech. 23(9):1117-1125), вариабельная область содержит антигенсвязывающий домен, который кодируется различными генами, которые перестраиваются для образования антитела, специфического к чужеродному антигену. В дополнение перестройке, вариабельная область может быть далее модифицирована множественными изменениями отдельных аминокислот (указаны как соматическая мутация или гипермутация) для повышения аффинности антитела к чужеродному антигену. Константная область будет меняться в дальнейшем в ответ на антиген (т.е. переключение изотипа). Поэтому перестроенные и соматически мутированные молекулы нуклеиновых кислот, которые кодируют полипептиды легких цепей и тяжелых цепей иммуноглобулинов, в ответ на антиген могут не иметь идентичность последовательности с исходными молекулами нуклеиновых кислот, но вместо этого будут по существу идентичными или схожими (т.е. имеют идентичность по меньшей мере 80%).
Термин "человеческое антитело" в контексте настоящей заявки относится к иммуноглобулину (Ig), который используется, например, иммунной системой для связывания и нейтрализации патогенов. Термин включает антитела, имеющие вариабельные и константные области, по существу соответствующие Ig последовательностям зародышевой линии человека. В некоторых вариантах осуществления человеческие антитела продуцируются у млекопитающих, не являющихся человеком, включая, но не ограничиваясь этим, грызунов, таких как мыши и крысы, и лагоморфов, таких как кролики. В других вариантах осуществления человеческие антитела продуцируются в гибридомных клетках. В других вариантах осуществления человеческие антитела продуцируются рекомбинантно. В контексте настоящей заявки человеческие антитела включают все или часть антитела, включая, например, тяжелые и легкие цепи, вариабельные области, константные области, протеолитические фрагменты, определяющие комплементарность области (CDR) и другие функциональные фрагменты.
В контексте настоящей заявки "биологически активный фрагмент" относится к части молекулы, например, гена, кодирующей последовательность, мРНК, полипептида или белка, которая имеет желаемую длину или биологическую функцию. Биологически активный фрагмент белка, например, может представлять собой фрагмент полноразмерного белка, который сохраняет одну или несколько биологических активностей этого белка. Биологически активный фрагмент мРНК, например, может представлять собой фрагмент, который, когда он транслируется, экспрессирует биологически активный фрагмент белка. Кроме того, биологически активный фрагмент мРНК может содержать укороченные варианты некодирующих последовательностей, например, регуляторных последовательностей, UTR и т.д. Как правило, фрагмент фермента или сигнальной молекулы может представлять собой, например, ту часть(части) молекулы, которая сохраняет ее сигнальную или ферментативную активность. Например, фрагмент гена или кодирующей последовательности может представлять собой ту часть гена или кодирующей последовательности, которая продуцирует фрагмент продукта экспрессии. Фрагмент необязательно должен быть определен функционально, так как он может также относиться к части молекулы, которая не является целой молекулой, но имеет некоторую желаемую характеристику или длину (например, рестрикционные фрагменты, протеолитический фрагмент белка, фрагменты амплификации и т.д.).
Обычные или традиционные антитела млекопитающих включают тетрамер, который обычно состоит из двух идентичных пар полипептидных цепей, каждая из которых имеет одну полноразмерную "легкую" цепь (обычно имеющую молекулярную массу около 25 кДа) и одну полноразмерную "тяжелую" цепь (обычно имеющую молекулярную массу около 50-70 кДа). Термины "тяжелая цепь" и "легкая цепь" в контексте настоящей заявки относятся к любому Ig полипептиду, имеющему достаточную последовательность вариабельного домена для придания специфичности к антигену-мишени. N-концевая часть каждой легкой и тяжелой цепи обычно включает вариабельный домен из примерно 100-110 или более аминокислот, который обычно отвечает за распознавание антигена. С-концевая часть каждой цепи обычно определяет константный домен, отвечающий за эффекторную функцию. Таким образом, в природном антителе полноразмерный полипептид тяжелой цепи Ig включает вариабельный домен (VH или VH) и три константных домена (CH1 или CH1, CH2 или CH2 и CH3 или CH3), где VH домен находится на N-конце полипептида, а CH3 домен находится на C-конце, и полноразмерный полипептид легкой цепи Ig включает вариабельный домен (VL или VL) и константный домен (CL или CL), где VL домен находится на N-конце полипептида, а CL домен находится на С-конце.
В полноразмерных легких и тяжелых цепях вариабельные и константные домены обычно соединены "J"-областью из примерно 12 или более аминокислот, при этом тяжелая цепь также включает "D" -область еще из около 10 аминокислот. Вариабельные области каждой пары легкой/тяжелой цепи обычно образуют сайт связывания антигена. Вариабельные домены природных антител обычно имеют одинаковую общую структуру из относительно консервативных каркасных областей (FR), соединенных тремя гипервариабельными областями, называемыми CDR. CDR из двух цепей каждой пары обычно выровнены посредством каркасных областей, что позволяет связываться с конкретным эпитопом. От N-конца к C-концу вариабельные домены как легкой, так и тяжелой цепи типично включают домены FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 и FR4.
Термины "по существу чистый" или "по существу очищенный", в контексте настоящей заявки, относятся к соединению или виду, который является преобладающим видом, присутствующим в композиции (т.е., на молярной основе, он является преобладающим по сравнению с любыми другими отдельными видами в композиции). По существу очищенная фракция, например, может представлять собой композицию, в которой преобладающий вид составляет по меньшей мере около 50% (в молярном отношении) от всех присутствующих макромолекулярных частиц. Например, по существу чистая композиция может включать преобладающий вид, который составляет более примерно 80%, 85%, 90%, 95% или 99% от всех макромолярных видов, присутствующих в композиции. В других вариантах осуществления преобладающий вид может быть очищен по существу до гомогенности (загрязняющие виды не могут быть обнаружены в композиции обычными способами детекции), где композиция состоит по существу из одного макромолекулярного вида.
Термины "антиген" или "антиген-мишень" в контексте настоящей заявки относятся к молекуле или части молекулы, которая может связываться антителом, одним или несколькими связывающими доменами Ig или другим иммунологически связывающим фрагментом, включая, например, сконструированные полипептиды или слитые белки, раскрытые в настоящей заявке. Антиген может использоваться у животного для продуцирования антител, способных связываться с эпитопом этого антигена. Антиген может иметь один или несколько эпитопов.
Термин "эпитоп" или "антигенная детерминанта" относится к сайту на антигене, с которым специфически связывается иммуноглобулин или антитело. Эпитопы могут быть образованы как из смежных аминокислот, так и из несмежных аминокислот, объединенных в результате третичной укладки белка. Эпитопы, образованные из смежных аминокислот, как правило, сохраняются при воздействии денатурирующих растворителей, тогда как эпитопы, образованные третичной укладкой, обычно теряются при обработке денатурирующими растворителями. Эпитоп обычно включает по меньшей мере 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 аминокислот в уникальной пространственной конформации. Способы определения того, какие эпитопы связываются данным антителом (т.е. картирование эпитопов), хорошо известны в данной области и включают, например, методы иммуноблоттинга и иммунопреципитации, в которых перекрывающиеся или смежные пептиды из антигена испытывают на реакционную способность с данным антителом. Методы определения пространственной конформации эпитопов включают методы, используемые в данной области техники, и методы, описанные в настоящей заявке, например, рентгеновскую кристаллографию и двумерный ядерный магнитный резонанс (см., например, Epitope Mapping Protocols in Methods in Molecular Biology, Vol. 66, G. E. Morris, Ed. (1996)).
Термины "активность", "биологическая активность" или "биологическое свойство", используемые в отношении сконструированных полипептидов или слитых белков по изобретению, включают, но не ограничиваются этим, аффинность и специфичность в отношении эпитопа, способность антагонизировать активность антигена-мишени, стабильность in vivo сконструированных полипептидов или слитых белков по настоящему изобретению и иммуногенные свойства сконструированных полипептидов или слитых белков по настоящему изобретению. Другие идентифицируемые биологические свойства включают, например, перекрестную реактивность (например, с не-человеческими гомологами антигена-мишени или с другими антигенами-мишенями или тканями в целом) и способность сохранять высокие уровни экспрессии белка в клетках млекопитающих.
Антитело, иммуноглобулин или иммунологически функциональный фрагмент иммуноглобулина, или сконструированные полипептиды или слитые белки, раскрытые в настоящей заявке, указываются как "специфически" связывающие антиген, когда молекула предпочтительно распознает свой антиген-мишень в комплексной смеси белков и/или макромолекул. Термин "специфически связывается" в контексте настоящей заявки относится к способности антитела, иммуноглобулина или иммунологически функционального фрагмента иммуноглобулина, или сконструированного полипептида или слитого белка по изобретению связываться с антигеном, содержащим эпитоп, с KD по меньшей мере около 10-6 M, 10-7 M, 10-8 M, 10-9 M, 10-10 M, 10-11 M, 10-12 M или более, и/или связываться с эпитопом с аффинностью, которая по меньшей мере в два раза больше, чем его аффинность к неспецифическому антигену.
Термин "KD" в контексте настоящей заявки, относится к константе диссоциации взаимодействия между антителом, иммуноглобулином или иммунологически функциональным фрагментом иммуноглобулина, или сконструированным полипептидом, или слитым белком, раскрытыми в настоящей заявке, и антигеном-мишенью. Когда сконструированный полипептид или слитый белок по изобретению включает последовательность одновалентного Ig, последовательность одновалентного Ig предпочтительно связывается с целевым антигеном, например, с KD l0-5-10-12 M или меньше, или 10-7-10-12 M или меньше, или 10-3-10-12 M, и/или с аффинностью связывания по меньшей мере 107 M-1, по меньшей мере 108 M-1, по меньшей мере 109 M-1 или по меньшей мере 1012 M-1. Как правило, считается, что KD значение больше чем 10-4 M указывает на неспецифическое связывание. В некоторых вариантах осуществления последовательность одновалентного Ig сконструированного полипептида или слитого белка по изобретению связывается с целевым антигеном с аффинностью меньше чем 500 мМ, меньше чем 200 нМ, меньше чем 10 нМ или меньше чем 500 пМ.
KD можно определить способами, известными в данной области техники, включая, например, поверхностный плазмонный резонанс (SPR). Как правило, в SPR анализе измеряют в реальном времени связывающие взаимодействия между лигандом (целевой антиген на биосенсорной матрице) и аналитом с использованием, например, системы BIAcore (Pharmacia Biosensor; Piscataway, NJ). SPR анализ также можно осуществить путем иммобилизации аналита и презентации лиганда. Специфическое связывание сконструированного полипептида или слитого белка по изобретению с антигеном или антигенной детерминантой также можно определить любым подходящящим способом, известным в данной области техники, включая, например, анализ Скэтчарда и/или конкурентные анализы связывания, такие как радиоиммуноанализы (RIA), иммуноферментные анализы (EIA) и конкурентные сэндвич-анализы.
Термин "биспецифический" относится к слитому белку по изобретению, который способен связывать два антигена. Термин "мультивалентный слитый белок" означает слитый белок, включающий два или более антигенсвязывающих сайтов.
Термин "мультиспецифический слитый белок" относится к слитому белку по изобретению, который способен связывать две или более родственные или неродственные мишени.
В контексте настоящей заявки термин "слитый с" относится к полипептиду, полученному путем объединения более чем одной последовательности, типично путем клонирования одной последовательности, например кодирующей последовательности, в вектор экспрессии в рамке с одной или несколькими вторыми кодирующими последовательностями таким образом, чтобы две (или более) кодирующие последовательности транскрибировались и транслировались в один непрерывный полипептид. В дополнение к получению с использованием рекомбинантной технологии, части полипептида могут быть "слиты" друг с другом посредством химической реакции или с использованием других способов, известных в данной области для получения специально разработанных полипептидов.
В контексте настоящей заявки термин "вектор" относится к любой молекуле (например, нуклеиновой кислоте, плазмиде или вирусу), которая используется для передачи кодирующей информации системе экспрессии (например, клетке-хозяину или системе экспрессии in vitro). Одним типом вектора является "плазмида", которая относится к кольцевой двухцепочечной молекуле ДНК (дцДНК), в которую могут быть встроены дополнительные сегменты ДНК. Другим типом вектора является вирусный вектор, в котором дополнительные фрагменты ДНК могут быть встроены в вирусный геном. Некоторые векторы способны к автономной репликации в клетке-хозяине, в которую они введены (например, бактериальные векторы, имеющие бактериальный источник репликации, и эписомальные векторы млекопитающих). Другие векторы (например, неэпизомальные векторы млекопитающих) могут быть интегрированы в геном клетки-хозяина при введении в клетку-хозяина и, таким образом, реплицируются вместе с геномом-хозяином. Кроме того, некоторые векторы способны направлять экспрессию кодирующих последовательностей, с которыми они функционально связаны. Такие векторы указаны в настоящей заявке как "векторы экспрессии".
В контексте настоящей заявки термин "функционально связанный" относится к расположению фланкирующих последовательностей, в котором фланкирующие последовательности сконфигурированы или собраны для выполнения желаемой функции. Таким образом, фланкирующая последовательность, функционально связанная с кодирующей последовательностью, может быть способна влиять на репликацию, транскрипцию и/или трансляцию кодирующей последовательности. Кодирующая последовательность функционально связана с промотором, например, когда промотор способен направлять транскрипцию этой кодирующей последовательности. Фланкирующая последовательность не должна быть обязательно смежной с кодирующей последовательностью, чтобы считаться функционально связанной, при условии, что она функционирует должным образом.
В контексте настоящей заявки термин "клетка-хозяин" относится к клетке, в которую был введен вектор экспрессии. Предполагается, что клетка-хозяин относится не только к конкретной клетке субъекта, но также к потомству такой клетки. Поскольку некоторые модификации могут происходить в последующих поколениях из-за мутации или влияния окружающей среды, такое потомство может фактически не быть идентичным родительской клетке, но такие клетки все же включены в объем термина "клетка-хозяин", как он используется в настоящей заявке. Для экспрессии сконструированных полипептидов или слитых белков по настоящему изобретению можно использовать широкое разнообразие систем экспрессии клеток-хозяев, включая бактериальные, дрожжевые, бакуловирусные системы экспрессии и системы экспрессии млекопитающих (а также системы экспрессии на основе фагового дисплея).
Термин "природный", в контексте настоящей заявки и в применении к конкретной молекуле, относится к молекуле, которая присутствует в природе и с которой человек не осуществлял никаких манипуляций. Аналогично, термин "не встречающийся в природе" в контексте настоящей заявки относится к молекуле, которая не обнаружена в природе или которая была модифицирована или искусственно синтезирована.
Термин "сконструированный", в контексте настоящей заявки и в применении к конкретной молекуле, относится к молекуле, такой как, например полипептид, которая была модифицирована или подвергнут манипуляциям, например, путем мутации, усечения, делеции, замены, добавления, конъюгации или другим способом изменения первичной последовательности, химической или трехмерной структуры, химической сигнатуры, фолдинга, состояния гликозилирования или любого другого свойства молекулы, таким образом, молекула отличается от природного аналога.
В контексте настоящей заявки термин "пациент" включает субъектов людей и животных.
"Расстройство" представляет собой любое состояние, для которого будет полезно лечение с использованием сконструированных полипептидов или слитых белков по изобретению. "Расстройство" и "состояние" используются в настоящей заявке взаимозаменяемо.
Термин "комплемент-опосредованное расстройство", в контексте настоящей заявки, относится к расстройству, вызванному непосредственно или опосредованно нарушением регуляции пути комплемента, например активацией или супрессией пути комплемента, или к расстройству, которое опосредовано, прямо или косвенно, одним или несколькими компонентами пути комплемента, или продуктом, генерируемым посредством пути комплемента. Термин также относится к расстройству, которое усугубляется одним или несколькими компонентами пути комплемента или продуктом, генерируемым посредством пути комплемента.
В контексте настоящей заявки термины "лечение" или "лечить" относятся как к терапевтическому лечению, так и к профилактическим или превентивным мерам. Нуждающиеся в лечении, включают тех, у кого есть расстройство, а также тех, кто подвержен риску расстройства, или тех, у кого расстройство нужно предотвратить.
В контексте настоящей заявки термин "терапевтически эффективное" количество, например гибридного белка или сконструированного полипептида, описанных в настоящей заявке, представляет собой количество, которое при введении приводит к уменьшению тяжести симптомов заболевания (например, уменьшению симптомов расстройств, связанных с комплемент-опосредованным расстройством, увеличению частоты и продолжительности периодов без симптомов заболевания, или предотвращению нарушения или нетрудоспособности из-за заболевания. В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество терапевтического средства, описанного в настоящей заявке, может включать количество (или различные количества в случае многократного введения), которое уменьшает гемолиз или улучшает симптомы комплемент-опосредованного расстройства.
Термины "фармацевтическая композиция" или "терапевтическая композиция" в контексте настоящей заявки относятся к соединению или композиции, способной индуцировать желаемый терапевтический эффект при введении пациенту.
В контексте настоящей заявки термин "фармацевтически приемлемый носитель" или "физиологически приемлемый носитель" относится к одному или нескольким веществам в композиции, подходящим для осуществления или улучшения доставки сконструированных полипептидов или слитых белков по изобретению.
Термин "терапевтически эффективное количество", используемый в отношении фармацевтической композиции, включающей один или несколько сконструированных полипептидов или слитых белков по изобретению, относится к количеству или дозировке, достаточным для получения желаемого терапевтического результата. Более конкретно, терапевтически эффективное количество представляет собой количество одного или нескольких сконструированных полипептидов или слитых белков по изобретению, достаточное для ингибирования, на некоторый период времени, одного или нескольких клинически определяемых патологических процессов, связанных с состоянием, которое лечат, например, комплемент-опосредованного расстройства. Терапевтически эффективное количество может варьироваться в зависимости от конкретного сконструированного полипептида или слитого белка, который используется, и зависит от множества факторов и условий, связанных с пациентом, которого лечат, и тяжести расстройства.
Система комплемента
Система комплемента действует совместно с другими иммунологическими системами организма для защиты от проникновения клеточных и вирусных патогенов. Существует не менее 25 белков комплемента, которые представляют собой комплексную совокупность белков плазмы и мембранных кофакторов. Белки плазмы составляют около 10% глобулинов в сыворотке позвоночных. Компоненты комплемента достигают своих иммунных защитных функций путем взаимодействия в серии сложных, но точных ферментативных процессов расщепления и мембранного связывания. Возникающий в результате каскад комплемента приводит к продукции продуктов с опсонической, иммунорегуляторной и литической функциями.
Каскад комплемента может развиваться через классический путь (CP), лектиновый путь или альтернативный путь (AP). Лектиновый путь обычно инициируется связыванием манноза-связывающего лектина (MBL) с субстратами с высоким содержанием маннозы. АР может быть антитело-независимым и инициироваться определенными молекулами на поверхностях патогена. CP обычно инициируется распознаванием, и связыванием, антителом антигенного сайта на клетке-мишени. Эти пути сходятся на С3 конвертазе-, где компонент комплемента С3 расщепляется активной протеазой с образованием C3a и C3b.
Спонтанный гидролиз компонента C3 комплемента, который широко присутствует в плазменной фракции крови, также может привести к инициации конвертазы AP C3. Этот процесс, известный как "движение по инерции", происходит посредством самопроизвольного расщепления тиоэфирной связи в С3 с образованием С3i или С3 (Н20). Движение по инерции облегчается наличием поверхностей, которые поддерживают связывание активированного C3 и/или имеют нейтральные или положительные характеристики заряда (например, поверхности бактериальных клеток). Образование C3 (H20) обеспечивает связывание Фактора B белков плазмы, что, в свою очередь, позволяет Фактору D расщеплять Фактор B на Ba и Bb. Bb фрагмент остается связанным с C3 с образованием комплекса, содержащего C3 (H20)Bb - "жидкофазной" или "инициирующей" конвертазы C3. Хотя она продуцируется только в небольших количествах, жидкофазная конвертаза С3 может расщеплять множество белков С3 на С3а и С3b и приводит к образованию С3b и его последующему ковалентному связыванию с поверхностью (например, бактериальной поверхностью). Фактор B, связанный с поверхностно-связанным C3b, расщепляется Фактором D с образованием связанного на поверхности конвертазного комплекса AP C3, содержащего C3b, Bb.
Конвертаза AP C5 ((C3b) 2, Bb) образуется при добавлении второго мономера C3b к конвертазе AP C3. Роль второй молекулы C3b состоит в том, чтобы связывать C5 и представлять его для расщепления посредством Bb. AP C3 и C5 конвертазы стабилизируются добавлением тримерного белка пропердина. Связывание с пропердином, однако, не требуется для образования функционирующего альтернативного пути С3 или С5 конвертазы.
Конвертаза CP C3 образуется при взаимодействии компонента комплемента C1, который представляет собой комплекс C1q, C1r и C1s, с антителом, которое связано с антигеном-мишенью (например, микробным антигеном). Связывание C1q части C1 с комплексом антиген-антитело вызывает конформационное изменение в C1, которое активирует C1r. Активный C1r затем расщепляет C1-ассоциированный C1s с образованием активной сериновой протеазы. Активный C1s расщепляет компонент C4 комплемента на C4b и C4a. Подобно C3b, вновь образованный фрагмент C4b содержит высокореактивный тиол, который легко образует амидные или сложноэфирные связи с подходящими молекулами на целевой поверхности (например, на поверхности микробных клеток). C1s также расщепляет компонент комплемента C2 на C2b и C2a. Комплекс, образованный C4b и C2a, представляет собой конвертазу CP C3, которая способна к процессированию C3 на C3a и C3b. Конвертаза СР С5 (C4b, C2a, C3b) образуется при добавлении мономера С3b к конвертазе СР С3
В дополнение к роли в C3 и C5 конвертазах, C3b также функционирует как опсонин благодаря взаимодействию с рецепторами комплемента, присутствующими на поверхностях антиген-презентирующих клеток, таких как макрофаги и дендритные клетки. Опсоническая функция C3b обычно считается одной из наиболее важных противоинфекционных функций системы комплемента. Пациенты с генетическими повреждениями, которые блокируют функцию C3b, имеют предрасположенность к инфекциям, вызываемым широким спектром патогенных организмов, в то время как пациенты с повреждениями позже в каскадной последовательности комплемента, то есть пациенты с повреждениями, которые блокируют функции C5, оказались более предрасположенными только к Neisseria инфекции, к тому же только несколько более предрасположенными.
AP и CP C5 конвертазы расщепляют C5 на C5a и C5b. Расщепление С5 высвобождает С5а, сильный анафилатоксин и хемотаксический фактор, и С5b, который делает возможным образование литического терминального комплекса комплемента, С5b 9. С5b объединяется с С6, С7 и С8 с образованием комплекса С5b 8 на поверхности клетки-мишени. При связывании нескольких C9 молекул образуется мембранно-атакующий комплекс (MAC, C5b-9, терминальный комплекс комплемента ("TCC")). Когда достаточное количество MAC встраивается в мембраны клеток-мишеней, создаваемые ими отверстия (MAC поры) опосредуют быстрый осмотический лизис клеток-мишеней.
В то время как правильно функционирующая система комплемента обеспечивает надежную защиту от микробных инфекций, неправильная регуляция или активация путей комплемента вовлечена в патогенез различных расстройств, включая, например, ревматоидный артрит (RA); люпус-нефрит; астму; ишемическое-реперфузионное повреждение; атипичный гемолитико-уремический синдром (aHUS); болезнь плотного осадка (DDD); пароксизмальную ночную гемоглобинурию (PNH); дегенерацию желтого пятна (например, возрастную дегенерацию желтого пятна (AMD)); синдром гемолиза, повышения уровня печеночных ферментов и низкого уровня тромбоцитов (HELLP); синдром Гийена-Барре (GBS); энтеропатию с потерей белка (например, синдром CHAPLE); тяжелую миастению (MG); оптиконевромиелит (NMO); тромботическую микроангиопатию после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (post-HSCT-TMA); TMA после трансплантации костного мозга (post-BMT TMA); болезнь Дегоса; болезнь Гоше; гломерулонефрит; тромботическую тромбоцитопеническую пурпуру (TTP); спонтанную потерю плода; малоиммунный васкулит; буллезный эпидермолиз; рекуррентную потерю плода; рассеянный склероз (MS); травматическое повреждение головного мозга; и повреждение в результате инфаркта миокарда, сердечно-легочного шунтирования и гемодиализа (Holers, V., Immunol. Rev., 223:300-16, 2008). Было продемонстрировано, что даун-регуляция активации комплемента является эффективной в лечении некоторых признаков заболеваний в ряде животных моделей (Rother, R. et al., Nat. Biotechnol., 25:1256-64, 2007; Wang, Y. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 93:8563-8, 1996; Wang, Y. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 92:8955-9, 1995; Rinder, C. et al., J. Clin. Invest., 96:1564-72, 1995; Kroshus, T. et al., Transplantation, 60:1194-202, 1995; Homeister, J. et al., J. Immunol., 150:1055-64, 1993; Weisman, H. et al., Science, 249:146-51, 1990; Amsterdam, E. et al., Am. J. Physiol., 268:H448-57, 1995; и Rabinovici, R. et al., J. Immunol., 149:1744-50, 1992).
Человеческий сывороточный альбумин и неонатальный Fc-рецептор
Были описаны полипептиды, которые могут связываться с человеческим сывороточным альбумином (HSA), для увеличения времени полужизни терапевтически релевантных белков (WO 91/01743, WO 01/45746 и WO 02/076489). Однако описанные пептидные фрагменты имеют бактериальное или синтетическое происхождение, что не является предпочтительным для применения в лечении человека. В WO 04/041865 описаны однодоменные антитела (sdAb или Нанотела®), направленные против сывороточного альбумина (и, в частности, против HSA), которые могут быть связаны с другими белками (такими как один или несколько других sdAb, направленных против желаемой мишени), чтобы увеличить период полужизни белка.
Неонатальный Fc-рецептор (FcRn), также называемый "рецептором Брамбелла", вовлечен в пролонгирование периода жизни альбумина в кровотоке (Chaudhury, C. et al., J. Exp. Med., 3: 315 22, 2003). FcRn представляет собой интегральный мембранный гликопротеин, состоящий из растворимой легкой цепи, состоящей из β2 микроглобулина (β2m), нековалентно связанной с α-цепью 43 кДа с тремя внеклеточными доменами, трансмембранной областью и цитоплазматическим хвостом из приблизительно 50 аминокислот. Цитоплазматический хвост содержит динуклеотидный мотив, связанный с сигналом эндоцитоза, участвующий в интернализации рецептора. α-Цепь является членом неклассического семейства белков MHC I. Ассоциация β2m с α-цепью является критической для правильной укладки FcRn и выхода из эндоплазматического ретикулума для направления на эндосомы и клеточную поверхность.
Общая структура FcRn аналогична структуре молекул класса I. Области α-1 и α-2 напоминают платформу, состоящую из восьми антипараллельных нитей, образующих один β-лист, увенчанный двумя антипараллельными α-спиралями, сильно напоминающими пептидную щель в молекулах MHC I. Вследствие полного изменения положения спирали α-1 и изгиба С-концевой части спирали α-2 из-за разрыва спирали, вызванного присутствием Pro162, спирали FcRn находятся близко друг к другу, мешая пептидному связыванию. Боковая цепь Arg164 FcRn также мешает потенциальному взаимодействию пептидного N-конца с карманом MHC. Кроме того, солевой мостик и гидрофобное взаимодействие между спиралями α-1 и α-2 также могут способствовать закрытию бороздки. Поэтому FcRn не участвует в презентации антигена, и пептидная щель пуста.
FcRn связывает и транспортирует IgG через синцитиотрофобласт плаценты от материнского кровообращения к кровообращению плода и защищает IgG от деградации у взрослых. В дополнение к гомеостазу, FcRn контролирует трансцитоз IgG в тканях. FcRn локализован в эпителиальных клетках, эндотелиальных клетках и гепатоцитах.
HSA связывает FcRn с образованием тримолекулярного комплекса с IgG. Как альбумин, так и IgG некооперативно связываются с разными сайтами на FcRn. Связывание человеческого FcRn с сефароза-HSA и сефарозна-hIgG является рН-зависимым, являясь максимальным при рН 5 и необнаружимым при рН 7 - рН 8. Наблюдение, что FcRn связывается с альбумином таким же рН-зависимым образом, как и IgG, предполагает, что механизм, посредством которого альбумин взаимодействует с FcRn и, таким образом, защищен от деградации, является таким же механизмом, как у IgG, и опосредуется через также рН-чувствительное взаимодействие с FcRn. При использовании поверхностного плазмонного резонанса для измерения способности отдельных HSA доменов связывать иммобилизованный растворимый hFcRn было показано, что FcRn и альбумин взаимодействует через D III домен альбумина pH-зависимым образом на сайте, отличном от сайта связывания IgG (Chaudhury C. et al., Biochemistry, 45: 4983-90, 2006).
Сконструированные полипептиды специфически связываются с комплементом C5 или сывороточным альбумином
В настоящей заявке описаны сконструированные полипептиды, включающие Ig последовательности, например, последовательности вариабельного домена Ig, которые могут связываться или иным образом вступать в ассоциацию с компонентом С5 комплемента или сывороточным альбумином. Сконструированные полипептиды, описанные в настоящей заявке, могут специфически связываться с сывороточным альбумином таким образом, что, когда сконструированный полипептид связан с молекулой сывороточного альбумина или иным образом ассоциирован с ней, связывание молекулы сывороточного альбумина с FcRn существенно не снижается и не ингибируется по сравнению со связыванием молекулы сывороточного альбумина с FcRn, когда полипептид не связан с ней. В этом варианте осуществления "существенно не снижается или не ингибируется" означает, что аффинность связывания для сывороточного альбумина с FcRn (как измерено с использованием подходящего анализа, такого как, например SPR) не снижается больше чем на 50% или больше чем на 30%, или больше чем на 10%, или больше чем на 5%, или вообще не снижается. В этом варианте осуществления "существенно не снижается или не ингибируется" также означает, что период полужизни молекулы сывороточного альбумина существенно не уменьшается. В частности, сконструированные полипептиды могут связываться с аминокислотными остатками сывороточного альбумина, которые не участвуют в связывании сывороточного альбумина с FcRn. Более конкретно, сконструированные полипептиды могут связываться с аминокислотными остатками или последовательностями сывороточного альбумина, которые не образуют часть домена III сывороточного альбумина, например сконструированные полипептиды, которые способны связываться с аминокислотными остатками или последовательностями сывороточного альбумина, которые образуют часть домена I и/или домена II.
В некоторых вариантах осуществления сконструированные полипептиды представляют собой sdAb или являются подходящими для использования в качестве sdAb, и как таковые могут представлять собой последовательность вариабельного домена тяжелой цепи или последовательность вариабельного домена легкой цепи, а в некоторых вариантах осуществления последовательности вариабельных доменов тяжелых цепей антитела только из тяжелых цепей. В случаях, когда сконструированные полипептиды представляют собой последовательности одного домена, вариабельного домена тяжелой цепи, из антитела, содержащего только тяжелые цепи, такие последовательности могут быть указаны как VHH или VHH антитела, фрагменты VHH или VHH антител, или VHH или VHH домены.
"Антитело из тяжелых цепей" относится к антителу, которое состоит из двух тяжелых цепей и не имеет двух легких цепей, присутствующих в обычных антителах. Верблюды (члены биологического семейства Camelidae, единственного ныне живущего семейства в подотряде Tylopoda; существующие верблюды включают одногорбых верблюдов, двугорбых верблюдов, диких или одичавших верблюдов, лам, альпак, викуньев и гуанако) являются единственными млекопитающими с одноцепочечными VHH антителами, Около 50% антител у верблюдов представляют собой антитела из тяжелых цепей, а остальные 50% относятся к обычному или традиционному типу антител млекопитающих с тяжелыми/легкими цепями.
"VHH домен" относится к вариабельным доменам, присутствующим в природных антителах, содержащих только тяжелые цепи, чтобы отличить его от вариабельных доменов тяжелой цепи, которые присутствуют в обычных четырехцепочечных антителах (указанных как "VH домены"), и от вариабельных доменов легкой цепи, которые присутствуют в обычных четырехцепочечных антителах (указанных как "VL домены")
VHH домены имеют ряд уникальных структурных характеристик и функциональных свойств, которые делают выделенные VHH домены (а также sdAb, которые основаны на VHH доменах и имеют такие же структурные характеристики и функциональные свойства, как у природных VHH доменов) и белки, содержащие VHH домены, весьма полезными для использования в качестве функциональных антигенсвязывающих доменов или белков. Например, VHH домены, которые связываются с антигеном без присутствия VL, и sdAb могут функционировать как одна, относительно небольшая, функциональная антигенсвязывающая структурная единица, домен или белок. Небольшой размер этих молекул отличает VHH домены от VH и VL доменов обычных четырехцепочечных антител. Использование VHH доменов и sdAb в качестве отдельных антигенсвязывающих белков или в качестве антигенсвязывающих доменов (например, как части более крупного белка или полипептида) дает ряд существенных преимуществ по сравнению с использованием обычных VH и VL доменов, а также scFv или обычных фрагментов антител (таких как Fab или F(ab')2 фрагменты). Например, для связывания антигена с высокой аффинностью и высокой селективностью требуется только один домен, поэтому нет необходимости иметь два отдельных домена или гарантировать, что эти два домена присутствуют в определенной пространственной конформации и конфигурации (например, с использованием специальных линкеров, как с scFv). VHH домены и sdAb также могут быть экспрессированы из одного гена и не требуют посттрансляционной укладки или модификаций. VHH домены и sdAb легко можно сконструировать в мультивалентные и мультиспецифические форматы. VHH домены и sdAb также хорошо растворимы и не имеют тенденции к агрегации (Ward, E. et al., Nature, 341:544-6, 1989) и они очень устойчивы к нагреванию, pH, протеазам и другим денатурирующим агентам или условиям (Ewert, S. et al., Biochemistry, 41: 3628-36, 2002). Способы получения VHH доменов и sdAb относительно просты и дешевы, даже в масштабе, необходимом для производства. Например, VHH домены, sdAb и полипептиды, содержащие VHH домены или sdAb, можно получить с использованием микробной ферментации с использованием способов, известных в данной области техники, и не для этого требуются системы экспрессии млекопитающих, как, например, с обычными фрагментами антител. VHH домены и sdAb относительно малы (приблизительно в 15 кДа или в 10 раз меньше, чем обычный IgG) по сравнению с обычными четырехцепочечными антителами и их антигенсвязывающими фрагментами и поэтому демонстрируют более высокое проникновение в ткани (включая, но не ограничиваясь этим, солидные опухоли и другие плотные ткани), чем обычные четырехцепочечные антитела и их антигенсвязывающие фрагменты. VHH домены и sdAb могут проявлять так называемые "связывающие полость" свойства (например, из-за их удлиненной CDR3 петли) и могут достигать мишеней и эпитопов, недоступных для обычных четырехцепочечных антител и их антигенсвязывающих фрагментов. Было показано, например, что VHH домены и sdAb могут ингибировать ферменты (WO 97/49805; Transue, T. et al., Proteins, 32:515-22, 1998; Lauwereys, M. et al., EMBO J. 17:3512-20, 1998)
В контексте настоящей заявки термин "однодоменное антитело" или "sdAb" представляет собой антитело или его фрагмент, состоящий из одного мономерного вариабельного домена антитела. Оно не ограничивается конкретным биологическим источником или конкретным способом получения. sdAb может быть получено, например, путем (1) выделения VHH домена природного антитела, содержащего только тяжелые цепи; (2) экспрессии нуклеотидной последовательности, кодирующей природный VHH домен; (3) "гуманизации" природного VHH домена или экспрессии нуклеиновой кислоты, кодирующей такой гуманизированный VHH домен; (4) "камелизации" природного VH домена животного любого вида, в частности млекопитающего, такого как человек, или экспрессии нуклеиновой кислоты, кодирующей такой камелизированный VH домен; (5) "камелизации" "доменного антитела" ("Dab") или экспрессии нуклеиновой кислоты, кодирующей такой камелизированный VH домен; (6) использования синтетических или полусинтетических методов для получения сконструированных полипептидов или слитых белков; (7) получения нуклеиновой кислоты, кодирующей sdAb, с использованием методов синтеза нуклеиновых кислот, с последующей экспрессией полученной таким образом нуклеиновой кислоты; и/или (8) любой комбинации вышеперечисленных.
Сконструированные полипептиды или слитые белки, описанные в настоящей заявке, могут включать, например, аминокислотные последовательности природных VHH доменов, которые были "гуманизированы", например, путем замены одного или нескольких аминокислотных остатков в аминокислотной последовательности природного VHH одним или несколькими аминокислотными остатками, которые встречаются в соответствующих положениях в человеческом VH домене.
Сконструированные полипептиды или слитые белки, описанные в настоящей заявке, могут включать, например, аминокислотные последовательности природных VH доменов, которые были "камелизированы", т.е. путем замены одного или нескольких аминокислотных остатков в аминокислотной последовательности природного VH домена одним или несколькими аминокислотными остатками, которые находятся в соответствующих положениях в VHH домене, например, верблюжьего антитела. Это можно осуществить способом, известным в данной области техники. Такая камелизация может преимущественно происходить в положениях аминокислот, которые присутствуют на границе раздела VH-VL и в так называемых "уникальных остатках верблюдовых" (WO 94/04678). VH домен или последовательность, которая используется в качестве родительской последовательности или исходного материала для генерирования или конструирования камелизированной последовательности, может представлять собой, например, VH последовательность млекопитающего, а в некоторых вариантах осуществления VH последовательность человека. Следует отметить, однако, что такие камелизированные последовательности могут быть получены любым подходящим способом, известным в данной области, и, таким образом, строго не ограничиваются полипептидами, которые были получены с использованием полипептида, который включает природный родительский VH домен.
Как "гуманизацию", так и "камелизацию" можно осуществить путем обеспечения нуклеотидной последовательности, которая кодирует природный VHH домен или VH домен, соответственно, и затем изменения способом, известным специалистам в данной области техники, одного или нескольких кодонов в нуклеотидной последовательности таким образом, чтобы новая нуклеотидная последовательность кодировала гуманизированную или камелизированную последовательность, соответственно. Кроме того, на основе аминокислотной последовательности или нуклеотидной последовательности природного VHH домена или VH домена можно разработать и синтезировать de novo нуклеотидную последовательность, кодирующую желаемую гуманизированную или камелизированную последовательность, с использованием методов синтеза нуклеиновых кислот, известных в данной области техники, после чего полученную таким образом нуклеотидную последовательность можно экспрессировать способом, известным в данной области техники.
В некоторых вариантах осуществления изобретение обеспечивает сконструированный полипептид, который специфически связывается с тем же эпитопом на человеческом C5, что и экулизумаб, или который связывается с эпитопом на C5, который препятствует расщеплению C5 на C5a и C5b. В некоторых вариантах осуществления изобретение обеспечивает сконструированный полипептид, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, где полипептид включает любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:1-12 или ее фрагмент. В других вариантах осуществления изобретение обеспечивает сконструированный полипептид, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, где полипептид включает аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична любой из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:1-12. В других вариантах осуществления изобретение обеспечивает сконструированный полипептид, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, где полипептид включает аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична, по меньшей мере на 96% идентична, по меньшей мере на 97% идентична, по меньшей мере на 98% идентична или по меньшей мере на 99% идентична любой из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:1-12. Например, в одном варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:1, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:2, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:3, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:4, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:5, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:6, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:7, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:8, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:9, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:10, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:11, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:12, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%.
В другом варианте осуществления обеспечивается сконструированный полипептид, который связывается с человеческим компонентом комплемента C5, где сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:1-12 и их фрагментов. Например, в одном варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:1. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:2. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:3. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:4. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:5. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:6. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:7. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:8. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:9. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:10. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:11. в другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:12.
В другом варианте осуществления изобретение обеспечивает сконструированный полипептид, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, где полипептид включает три определяющие комплементарность области CDR1, CDR2 и CDR3, где CDR1 включает любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:13-17 или последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична SEQ ID NO:13-17; CDR2 включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18 или 19 или последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична SEQ ID NO:18 или 19; и CDR3 включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO:20 или 21 или последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична SEQ ID NO:20 или 21.
В других вариантах осуществления изобретение обеспечивает сконструированный полипептид, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, где полипептид включает любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:22-34 или ее фрагмент. В других вариантах осуществления изобретение обеспечивает сконструированный полипептид, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, где полипептид включает аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична любой из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:22-34. В других вариантах осуществления изобретение обеспечивает сконструированный полипептид, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, где полипептид включает аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична, по меньшей мере на 96% идентична, по меньшей мере на 97% идентична, по меньшей мере на 98% идентична или по меньшей мере на 99% идентична любой из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:22-34. Например, в одном варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:22, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:23, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:24, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:25, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:26, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:27, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:28, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:29, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:30, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:31, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:32, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:33, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:34, или последовательность, которая идентична ей по меньшей мере на 90%.
В другом варианте осуществления сконструированный полипептид, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, состоит из аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO:22-34 и их фрагментов. Например, в одном варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:22. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:23. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:24. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:25. в другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:26. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:27. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:28. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:29. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:30. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:31. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:32. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:33. В другом варианте осуществления сконструированный полипептид состоит из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO:34.
В другом варианте осуществления изобретение обеспечивает сконструированный полипептид, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, где полипептид включает три определяющие комплементарность области CDR1, CDR2 и CDR3, где CDR1 включает любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:35-43 или последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична SEQ ID No:35-43; CDR2 включает любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:44-51 или последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична SEQ ID No:44-51; и CDR3 включает любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:52-63 или последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична SEQ ID No:52-63.
Сконструированный полипептид, раскрытый в настоящей заявке, может специфически связываться, например, с тем же эпитопом на человеческом сывороточном альбумине, что и Alb1 (AVQLVESGGG LVQPGNSLRL SCAASGFTFR SFGMSWVRQA PGKEPEWVSS ISGSGSDTLY ADSVKGRFTI SRDNAKTTLY LQMNSLKPED TAVYYCTIGG SLSRSSQGTQ VTVSS; SEQ ID NO:149). В других вариантах осуществления сконструированный полипептид конкурентно ингибирует связывание Alb1 с человеческим сывороточным альбумином.
Когда сконструированный полипептид включает Ig, подходящий фрагмент Ig, такой как вариабельный домен Ig, также можно использовать вместо полного Ig.
Способы идентификации CDR из данного вариабельного домена иммуноглобулина известны в данной области техники (Wu, T. & Kabat, E., J. Exp. Med., 132:211-50, 1970; Clothia, C. et al., Nature, 342:877-83, 1989; Al-Lazikani, B. et al., J. Mol. Biol., 273:927-48, 1997; и Ofran, Y. et al., J. Immunol., 181:6230-35, 2008).
Слитые белки, которые специфически связываются с компонентом комплемента C5 и сывороточным альбумином
В настоящей заявке описаны слитые белки, которые включают сконструированные полипептиды, которые специфически связываются с альбумином и компонентом комплемента C5, при этом сконструированные полипептиды слиты непосредственно или связаны через один или несколько подходящих линкеров или спейсеров. Термин "пептидный линкер" в контексте настоящей заявки относится к одному или нескольким аминокислотным остаткам, встроенным или включенным между сконструированными полипептидами слитого белка(белков). Пептидный линкер может быть, например, встроен или включен в переходном положении между сконструированными полипептидами слитого белка на уровне последовательности. Идентичность и последовательность аминокислотных остатков в линкере может варьироваться в зависимости от желательной вторичной структуры. Например, глицин, серин и аланин полезны для линкеров, имеющих максимальную гибкость. Любой аминокислотный остаток может считаться линкером в комбинации с одним или несколькими другими аминокислотными остатками, которые могут быть такими же или отличными от первого аминокислотного остатка, для создания 
пептидных линкеров, если это необходимо в зависимости от желательных свойств. В других вариантах осуществления линкер представляет собой GGGGAGGGGAGGGGS (SEQ ID NO:102). В других вариантах осуществления линкер представляет собой GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO:103). Дополнительные пептидные линкеры, подходящие для создания слитых белков, описанных в настоящей заявке, включают, например, G4S (SEQ ID NO:104), (G4S)2 (SEQ ID NO:105), (G4S)3 (SEQ ID NO:106), (G4S)4 (SEQ ID NO:107), (G4S)5 (SEQ ID NO:108), (G4S)6 (SEQ ID NO:109), (EAAAK)3 (SEQ ID NO:110), PAPAP (SEQ ID NO:111), G4SPAPAP (SEQ ID NO:112), PAPAPG4S (SEQ ID NO:113), GSTSGKSSEGKG (SEQ ID NO:114), (GGGDS)2 (SEQ ID NO:115), (GGGES)2 (SEQ ID NO:116), GGGDSGGGGS (SEQ ID NO:117), GGGASGGGGS (SEQ ID NO:118), GGGESGGGGS (SEQ ID NO:119), ASTKGP (SEQ ID NO:120), ASTKGPSVFPLAP (SEQ ID NO:121), G3P (SEQ ID NO:122), G7P (SEQ ID NO:123), PAPNLLGGP (SEQ ID NO:124), G6 (SEQ ID NO:125), G12 (SEQ ID NO:126), APELPGGP (SEQ ID NO:127), SEPQPQPG (SEQ ID NO:128), (G3S2)3 (SEQ ID NO:129), GGGGGGGGGSGGGS (SEQ ID NO:130), GGGGSGGGGGGGGGS (SEQ ID NO:131), (GGSSS)3 (SEQ ID NO:132), (GS4)3 (SEQ ID NO:133), G4A(G4S)2 (SEQ ID NO:134), G4SG4AG4S (SEQ ID NO:135), G3AS(G4S)2 (SEQ ID NO:136), G4SG3ASG4S (SEQ ID NO:137), G4SAG3SG4S (SEQ ID NO:138), (G4S)2AG3S (SEQ ID NO:139), G4SAG3SAG3S (SEQ ID NO:140), G4D(G4S)2 (SEQ ID NO:141), G4SG4DG4S (SEQ ID NO:142), (G4D)2G4S (SEQ ID NO:143), G4E(G4S)2 (SEQ ID NO:144), G4SG4EG4S (SEQ ID NO:145) и (G4E)2G4S (SEQ ID NO:146). Специалист в данной области может выбрать линкер, например, для уменьшения или устранения посттрансляционной модификации, например гликозилирования, например ксилозилирования. В некоторых вариантах осуществления слитый белок включает по меньшей мере два sdAb, Dab, VHH антитела, VHH фрагмента антитела или их комбинацию, где по меньшей мере один из sdAb, Dab, VHH антитела или VHH фрагментов антитела направлен против альбумина, а один из sdAb, Dab, VHH антитела или VHH фрагментов антитела направлен против компонента комплемента C5, чтобы, таким образом, получить слитый белок, который является мультивалентным или мультиспецифическим. Связывающие домены или фрагменты могут быть направлены, например, против HSA, сывороточного альбумина яванского макака, человеческого C5 и/или C5 яванского макака.
В некоторых вариантах осуществления C-концевой остаток альбумин-связывающего домена слитого белка может быть слит либо непосредственно, либо через пептид с N-концевым остатком домена, связывающего C5-компонент комплемента. В других вариантах осуществления C-концевой остаток домена, связывающего C5-компонент комплемента, слитого белка может быть слит либо непосредственно, либо через пептид с N-концевым остатком альбумин-связывающего домена.
В некоторых вариантах осуществления слитый белок включает полипептид, связывающийся с компонентом C5 системы комплемента, включающий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1-12 или ее фрагмент; и полипептид, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, может включать аминокислотную последовательность SEQ ID NO:22-34 или ее фрагмент. В некоторых вариантах осуществления первый полипептид происходит из аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO:1-12, а второй полипептид происходит из аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO:22-34. Человеческий домен, связывающий C5-компонент комплемента, может включать, например, аминокислотную последовательность SEQ ID NO:5 или 11, а альбумин-связывающий домен может включать, например аминокислотную последовательность SEQ ID NO:26. В другом варианте осуществления изобретение обеспечивает слитый белок, имеющий любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:64-95. В другом варианте осуществления изобретение обеспечивает слитый белок, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:93. В другом варианте осуществления изобретение обеспечивает слитый белок, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:77. В другом варианте осуществления изобретение обеспечивает слитый белок, имеющий любую из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO:96-101.
Слитые белки, раскрытые в настоящей заявке, можно получить путем экспрессии в клетке-хозяине по меньшей мере одной молекулы нуклеиновой кислоты, включающей нуклеотидную последовательность, кодирующую слитый белок. Клетки-хозяева могут быть клетками млекопитающих, клетками растительного или микробного происхождения. В дополнение к известным клеткам-хозяевам млекопитающих можно использовать дрожжевые клетки-хозяева, например Pichia pastoris, Saccharomyces cerevisiae, и/или растительные клетки-хозяева.
Терапевтические композиции, включающие полипептиды, которые специфически связываются с C5-компонентом комплемента или сывороточным альбумином, или их слитые белки, и их введение
В другом варианте осуществления изобретение обеспечивает сконструированные полипептиды, включающие или состоящие из аминокислотной последовательности, раскрытой в настоящей заявке. В другом варианте осуществления изобретение обеспечивает слитые белки и мультивалентные и мультиспецифические слитые белки, включающие или состоящие из по меньшей мере одного сконструированного полипептида по изобретению, который связан с по меньшей мере одним терапевтическим или нацеливающим фрагментом, необязательно через один или несколько подходящих линкеров или спейсеров.
Изобретение также относится к терапевтическим применениям сконструированных полипептидов по изобретению или слитых белков и мультивалентных и мультиспецифических слитых белков, включающих или состоящих из таких сконструированных полипептидов, или к фармацевтическим композициям, включающим такие сконструированные полипептиды, слитые белки или мультивалентные и мультиспецифические слитые белки.
В некоторых вариантах осуществления терапевтический или нацеливающий фрагмент может включать, например, по меньшей мере один sdAb, Dab, VHH или их фрагмент(фрагменты). В некоторых вариантах осуществления, сконструированный полипептид по изобретению представляет собой мультивалентный и/или мультиспецифический слитый белок, включающий по меньшей мере два sdAb, Dab, VHH антитела, VHH фрагмента антитела или их комбинацию(комбинации).
В некоторых вариантах осуществления сконструированные полипептиды, слитые белки или мультивалентные и мультиспецифические слитые белки показывают аффинность к HSA, которая выше, чем аффинность к мышиному сывороточному альбумину. В некоторых вариантах осуществления сконструированные полипептиды, слитые белки или мультивалентные и мультиспецифические слитые белки показывают аффинность к сывороточному альбумину яванского макака, которая выше, чем аффинность к мышиному сывороточному альбумину. В других вариантах осуществления сконструированные полипептиды, слитые белки, или мультивалентные и мультиспецифические слитые белки показывают аффинность к HSA, которая выше, чем аффинность к сывороточному альбумину яванского макака.
В некоторых вариантах осуществления сконструированные полипептиды, слитые белки, или мультивалентные и мультиспецифические слитые белки показывают аффинность к человеческому C5, которая выше, чем аффинность к мышиному C5. В некоторых вариантах осуществления сконструированные полипептиды, слитые белки или мультивалентные и мультиспецифические слитые белки показывают аффинность к C5 яванского макака, которая выше, чем аффинность к мышиному C5. В других вариантах осуществления сконструированные полипептиды, слитые белки или мультивалентные и мультиспецифические слитые белки показывают аффинность к человеческому C5, которая выше, чем аффинность к C5 яванского макака.
Сконструированные полипептиды, слитые белки или мультивалентные и мультиспецифические слитые белки, описанные в настоящей заявке, могут демонстрировать, например, улучшенные терапевтические свойства, включая, например, повышенную эффективность, биодоступность, период полужизни или другие терапевтически желаемые свойства, по сравнению с терапевтическими препаратами на основе антител или другими терапевтическими средствами. В одном варианте осуществления слитый белок по изобретению включает по меньшей мере один сконструированный полипептид, раскрытый в настоящей заявке, и по меньшей мере один терапевтический или нацеливающий фрагмент. В таких слитых белках слитый белок может демонстрировать, например, больший период полужизни по сравнению с терапевтическим связывающим доменом в отдельности. Как правило, такие слитые белки имеют период полужизни, который по меньшей мере в 1,5 раза или по меньшей мере в 2 раза, или по меньшей мере в 5 раз, или по меньшей мере в 10 раз, или более чем в 20 раз больше, чем период полужизни соответствующего терапевтического или нацеливающего фрагмента в отдельности. В некоторых вариантах осуществления слитый белок по изобретению имеет период полужизни, который увеличен больше чем на 1 час, больше чем на 2 часа, больше чем на 6 часов или более чем на 12 часов по сравнению с периодом полужизни соответствующего терапевтического или нацеливающего фрагмента. В других вариантах осуществления слитый белок имеет период полужизни, который больше 1 часа, больше 2 часов, больше 6 часов, больше 12 часов, около одного дня, около двух дней, около одной недели, около двух недель, около трех недель или не больше 2 месяцев.
Термин "период полужизни" в контексте настоящей заявки относится к времени, необходимому для уменьшения концентрации в сыворотке сконструированного полипептида, слитого белка или мультивалентного и мультиспецифического слитого белка на 50% in vivo, в результате, например, разрушения молекулы и/или клиренса или секвестрации молекулы посредством физиологических механизмов. Способы осуществления фармакокинетического анализа и определения периода полужизни известны специалистам в данной области техники.
См. общее описание мультивалентных и мультиспецифических слитых белков, содержащих одно или несколько VHH антител, и их получение (Els Conrath, K. et al., J. Biol. Chem., 276:7346-50, 2001; Muyldermans, S., J. Biotechnol., 74:277-302 2001; Международные публикации №№. WO 96/34103, WO 99/23221 и WO 04/041865).
Сконструированные полипептиды, слитые белки и мультивалентные и мультиспецифические слитые белки, раскрытые в настоящей заявке, могут экспрессироваться или находиться в ассоциации с конструкциями, которые включают, например, один или несколько элементов, таких как векторы экспрессии (WO 04/041862).
Сконструированные полипептиды, слитые белки и мультивалентные и мультиспецифические слитые белки, раскрытые в настоящей заявке, могут экспрессироваться, например, в выделенных клетках-хозяевах, включающих молекулы нуклеиновых кислот, которые кодируют сконструированные полипептиды, слитые белки и мультивалентные и мультиспецифические слитые белки, раскрытые в настоящей заявке. Подходящие клетки-хозяева включают, но не ограничиваются этим, клетки млекопитающих и дрожжей.
Терапевтические или фармацевтические композиции, раскрытые в настоящей заявке, могут включать терапевтически эффективное количество одного или нескольких сконструированных полипептидов, слитых белков или многовалентных и мультиспецифических слитых белков, описанных в настоящей заявке, в смеси с фармацевтически или физиологически приемлемым агентом, используемым для формулирования композиции, выбранным в соответствии со способом введения. Приемлемые вещества, используемые для формулирования композиций, предпочтительно являются нетоксичными для реципиентов в используемых дозировках и концентрациях.
Приемлемые вещества для формулирования композиций можно использовать для модификации, поддержания или сохранения, например, pH, осмолярности, вязкости, прозрачности, цвета, изотоничности, запаха, стерильности, стабильности, скорости растворения или высвобождения, адсорбции или проникновения композиции. Приемлемые вещества для формулирования композиций включают, но не ограничиваются этим, аминокислоты (такие как глицин, глутамин, аспарагин, аргинин или лизин), противомикробные средства, антиоксиданты (такие как аскорбиновая кислота, сульфит натрия или гидросульфит натрия), буферы (такие как борат, бикарбонат, трис-HCl, цитраты, фосфаты или другие органические кислоты), объемообразующие агенты (такие как маннит или глицин), хелатообразующие агенты (такие как этилендиаминтетрауксусная кислота (EDTA), комплексообразующие агенты (такие как кофеин, поливинилпирролидон, бета-циклодекстрин или гидроксипропил-бета-циклодекстрин), наполнители, моносахариды, дисахариды и другие углеводы (такие как глюкоза, манноза или декстрины), белки (такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины), красители, ароматизаторы и разбавители, эмульгаторы, гидрофильные полимеры (такие как поливинилпирролидон), низкомолекулярные полипептиды, солеобразующие противоионы (такие как натрий), консерванты (такие как бензалконий хлорид, бензойная кислота, салициловая кислота, тимеросал, фенетиловый спирт, метилпарабен, пропилпарабен, хлоргексидин, сорбиновая кислота или пероксид водорода), растворители (такие как глицерин, пропиленгликоль или полиэтиленгликоль), сахарные спирты (такие как маннит или сорбит), суспендирующие агенты, поверхностно-активные вещества или смачивающие вещества (такие как плуроники; ПЭГ; сложные эфиры сорбитана; полисорбаты, такие как полисорбат 20 или полисорбат 80; тритон; трометамин; лецитин; холестерин или тилоксапал), агенты, улучшающие стабильность (такие как сахароза или сорбит), агенты, повышающие тоничность (такие как галогениды щелочных металлов, предпочтительно хлорид натрия или калия, или сорбит, маннит), носители для доставки, разбавители, эксципиенты и/или фармацевтические адъюванты для регулирования рН (см., например, Remington's Pharmaceutical Sciences (18th Ed., A.R. Gennaro, ed., Mack Publishing Company 1990) и последующие издания, которые включены в настоящую заявку посредством ссылки).
Специалист в данной области может разработать фармацевтическую композицию, включающую сконструированные полипептиды, слитые белки или многовалентные и мультиспецифические слитые белки, раскрытые в настоящей заявке, в зависимости, например, от предполагаемого пути введения, формата доставки и желаемой дозировки.
Поскольку сконструированные полипептиды, слитые белки и многовалентные и мультиспецифические слитые белки, раскрытые в настоящей заявке, могут демонстрировать, например, увеличенный период полужизни, их в некоторых вариантах осуществления можно вводить так, чтобы они поступали в кровоток. Как таковые, их можно вводить любым подходящим способом, например внутривенно, подкожно, посредством инъекции или инфузии, или любым другим подходящим способом, который позволяет сконструированным полипептидам, слитым белкам или мультивалентным и мультиспецифическим слитым белкам поступать в кровоток. Получение таких фармацевтических композиций известно специалистам в данной области.
Любой из сконструированных полипептидов, слитых белков и мультивалентных и мультиспецифичных слитых белков, раскрытых в настоящей заявке, можно вводить в комбинации с дополнительной терапией, то есть в комбинации с другими средствами. Используемый термин “совместно вводимый” включает любое или все из одновременного, раздельного или последовательного введения сконструированных полипептидов, слитых белков и мультивалентных и мультиспецифичных слитых белков, описанных в настоящей заявке, с адъювантами и другими агентами, включая введение в качестве части схемы лечения.
Фармацевтические композиции, описанные в настоящей заявке, могут включать один или несколько агентов для улучшения, например, доставки терапевтического средства. Дополнительные средства можно вводить совместно, например, в виде инъекций. Вещества, которые разлагают гиалуронан, например, могут быть включены в фармацевтические композиции, описанные в настоящей заявке, или такие вещества можно вводить совместно с фармацевтическими композициями, описанными в настоящей заявке, для облегчения, например, диспергирования и абсорбции терапевтических средств, описанных в настоящей заявке, после введения. Примером такого вещества является рекомбинантная гиалуронидаза.
Фармацевтические композиции также могут быть выбраны для парентеральной доставки. Альтернативно, композиции могут быть выбраны для ингаляции или для доставки через пищеварительный тракт, например пероральным путем. Получение таких фармацевтических композиций известно специалистам в данной области.
Дополнительные фармацевтические композиции будут очевидны для специалистов в данной области, в том числе композиции, включающие композиции с пролонгированной доставкой или композиции с контролируемой доставкой. Способы получения композиций с пролонгированной доставкой или с контролируемой доставкой с использованием, например, липосомных носителей, биоразлагаемых микрочастиц или пористых шариков, а также депо-инъекций известны специалистам в данной области.
Изобретение также охватывает терапевтические наборы, включающие сконструированные полипептиды, слитые белки и мультивалентные и мультиспецифические слитые белки, раскрытые в настоящей заявке. В некоторых вариантах осуществления наборы включают первый контейнер, содержащий сухой белок, а также второй контейнер, содержащий водную композицию. В других вариантах осуществления наборы включают однокамерные и многокамерные предварительно заполненные шприцы (например, шприцы с жидкостью и шприцы с лиофилизатом).
Изобретение также охватывает изделие, включающее контейнер, содержащий этикетку и композицию, включающую сконструированные полипептиды, слитые белки и мультивалентные и мультиспецифические слитые белки, раскрытые в настоящей заявке, где этикетка указывает, что композиция предназначена для введения пациенту, имеющему, или у которого подозревается, комплемент-опосредованное расстройство.
В одном варианте осуществления изобретение обеспечивает способ профилактики и/или лечения по меньшей мере одного заболевания, состояния или расстройства, которое можно предотвратить или лечить с использованием сконструированного полипептида, слитого белка или мультивалентного и мультиспецифического слитого белка, раскрытых в настоящей заявке, при этом способ включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически или фармацевтически эффективного количества сконструированного полипептида, слитого белка или мультивалентного и мультиспецифического слитого белка, раскрытого в настоящей заявке. В конкретных вариантах осуществления расстройство представляет собой комплемент-опосредованное расстройство, такое как, например, ревматоидный артрит (RA); люпус-нефрит; астма; ишемическое-реперфузионное повреждение; атипичный гемолитико-уремический синдром (aHUS); болезнь плотного осадка (DDD); пароксизмальная ночная гемоглобинурия (PNH); дегенерация желтого пятна (например, возрастная дегенерация желтого пятна (AMD); синдром гемолиза, повышения уровня печеночных ферментов и низкого уровня тромбоцитов (HELLP); синдром Гийена-Барре (GBS); синдром CHAPLE; тяжелая миастения (MG); оптиконевромиелит (NMO); тромботическая микроангиопатия после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (post-HSCT-TMA); TMA после трансплантации костного мозга (post-BMT TMA); болезнь Дегоса; болезнь Гоше; гломерулонефрит; тромботическая тромбоцитопеническая пурпура (TTP); спонтанная потеря плода; малоиммунный васкулит; буллезный эпидермолиз; рекуррентная потеря плода; рассеянный склероз (MS); травматическое повреждение головного мозга; и повреждение в результате инфаркта миокарда, сердечно-легочного шунтирования и гемодиализа.
Эффективное количество фармацевтической композиции, описанной в настоящей заявке, для терапевтического применения будет зависеть, например, от терапевтического контекста и целей. Специалист в данной области поймет, что подходящий уровень дозировки для лечения будет варьироваться в зависимости, отчасти, от доставляемой молекулы, показания, для которого применяется композиция, пути введения и размера (массы тела, поверхности тела или размера органа) и состояния (возраста и общего состояния здоровья) пациента.
ПРИМЕРЫ
Примеры, представленные ниже, иллюстрируют конкретные варианты осуществления и различные применения изобретения. Они представлены только в целях объяснения, и не должны рассматриваться как каким-либо образом ограничивающие объем изобретения.
Пример 1. Иммунизация лам и конструирование фаговой библиотеки анти-C5 VHH
Иммунизацию лам осуществляли начиная с первичной инъекции, с последующими вторичными бустер-инъекциями. Вкратце, первичную иммунизацию начинали с 500 мкг человеческого C5-белка системы комплемента с последующими 500 мкг бустер-инъекциями антигена человеческого C5-белка системы комплемента, вводимыми на неделе 2 (бустер-инъекция 1), неделе 4 (бустер-инъекция 2), неделе 8 (бустер-инъекция 3) и неделе 12 (бустер-инъекция 4). Титры в сыворотке измеряли методом ELISA, и было найдено, что титры после бустер-инъекции 3 являются самыми высокими, в 10 раз выше сигнала до иммунизации, при 1:1000000 разведении. Мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC) выделяли из образцов крови после бустер-инъекции 3. Жизнеспособность клеток составила 98%, как было определено методом окрашивания трипановым синим. Клетки лизировали в лизирующем буфере для выделения РНК сразу после выделения PBMC. Тотальную РНК выделяли из PBMС и синтезировали кДНК с использованием специфических праймеров для тяжелых цепей ламы. VHH фрагменты (тяжелые цепи только) отделяли от VH (обычная тяжелая цепь) фрагментов методом гель-электрофореза. VHH фрагменты клонировали в pADL-10b (Antibody Design Labs, San Diego, CA) и библиотеку ДНК трансформировали в TG1 клетки. 114 колоний рандомизированно секвенировали и получали 101 (89%) подходящую последовательность. Библиотеку соскребали и суспендировали в 25% глицерине, затем хранили при -80C.
Пример 2. пэннинг и скрининг библиотеки фагового дисплея на анти-C5 VHH домены
TG1 клетки, содержащие библиотеку VHH доменов против человеческого C5-белка системы комплемента, выращивали до логарифмической фазы (OD600=0,4-0,8) при 37°С в среде 2×YT, содержащей 100 мкг/мл карбенициллина и 2% глюкозы. Клетки инфицировали хелперным фагом M13K07 с и без встряхивания при 37°C в течение 30 минут. Инфицированные клетки осаждали при 4000 × g в течение 10 минут и ресуспендировали в среде 2×YT, содержащей 100 мкг/мл карбенициллина, 50 мкг/мл канамицина и 1 мМ IPTG, и бактериофаг размножали путем выращивания в течение ночи при 30°С и 250 об/мин. Выращенную в течение ночи культуру центрифугировали при 9000 × g в течение 10 минут при 4°С и фаг осаждали, используя 1/5 объема раствора ПЭГ-NaCl [20% полиэтиленгликоля 6000, 1,5 М NaCl] путем инкубации в течение 1 часа на льду. Фаговые частицы осаждали центрифугированием при 9000 × g в течение 15 минут при 4°С и супернатант отбрасывали. Фаговые частицы ресуспендировали в блокирующем буфере SuperBlock и клеточный дебрис осаждали центрифугированием в течение 10 минут при 7500 × g в микроцентрифужной пробирке. Супернатант, содержащий фаговые частицы, переносили в новую пробирку, и фаг снова осаждали, как описано выше. Концентрированные фаговые частицы подвергали нагреванию в течение 1 часа при 70°C и титр фага до и после нагревания определяли путем инфицирования клеток TG1 в логарифмической фазе с последующим посевом на чашки с 2 × YT-агаром с 100 мкг/мл карбенициллина 50 мкг/мл канамицина и 2% глюкозы.
Стратегия выбора библиотеки включала выбор с использованием биотинилированного C5-белка комплемента яванского макака (cyno) и конкуренцию с молярно эквивалентным небиотинилированным человеческим C5-белком системы комплемента с получением соответствующих по аффинности анти-C5 VHH доменов с реактивностью в отношении обоих человеческого и cyno видов. Библиотеку фагового дисплея VHH подвергали стадии де-селекции против Dynabeads® M-280 стрептавидина в течение 1 часа при комнатной температуре. Отсеянные фаговые частицы, отбирали на сопоставимую аффинность к человеческому и cyno C5 путем инкубации в эквимолярном растворе биотинилированного cyno C5 и небиотинилированного человеческого C5 с Dynabeads® M-280 Стрептавидином в течение 30 минут при комнатной температуре. После 5 циклов промывки при помощи PBST и PBS фаг элюировали из шариков с использованием 0,1 M глицина (pH 2,2) с 1 мг/мл BSA. Элюированный супернатант нейтрализовали при помощи 1 M Tris pH 8,0. TG1 клетки в log-фазе инфицировали нейтрализованным фагом и высевали на 2YTCG среду для измерения выходного титра. Выходной и входной титры сравнивали для расчета отношения обогащения; более высокое отношение говорит об успешном выделении C5-специфических клонов.
Индивидуальные клоны выбирали, инокулировали в 96-луночный планшет с глубокими лунками в 2×YT среду с 100 мг/мл карбенициллина и 2% глюкозы и выращивали до log-фазы. Клетки инфицировали M13K07 и культивировали в течение ночи при 30°C для продукции фаговых частиц, отображающих индивидуальные VHH домены, в культуральном супернатанте. Фаговый ELISA скрининг четырех 96-луночных планшетов с человеческим C5, захваченным на стрептавидин-покрытых планшетах, предполагал ~60% положительных клонов. Было отобрано 72 уникальных клонов из общего количества 76 клонов в качестве репрезентативных на основании анализа последовательности CDR H3. Последовательности этих репрезентативных VHH клонов представлены в Таблице 1. В целях клонирования, N- и C-концевые аминокислоты модифицировали для соответствия N- и C-концевым аминокислотам VH-3 зародышевой линии человека.
Аминокислотные последовательности, подходящие для использования в сконструированных полипептидах по изобретению, включают аминокислотные последовательности, раскрытые в Таблицах 1, или их фрагменты.
Репрезентативные анти-C5 VHH домены ламы, и связывается или нет каждый клон с человеческим C5-белком системы комплемента (hC5) и/или cyno C5-белком системы комплемента (cC5)
Пример 3. Клонирование и экспрессия анти-C5 VHH доменов
Репрезентативные анти-C5 VHH домены субклонировали в вектор экспрессии млекопитающего и экспрессировали в виде VHH-His-tag слияний в Expi293F клетках. Культуральные супернатанты собирали, когда жизнеспособность клеток падала до 50-60%. Супернатанты анализировали методом SDS-PAGE в восстанавливающих условиях с последующим окрашиванием кумасси бриллиантовым синим. Уровни экспрессии рассчитывали с использованием биослойной интерферометрии на устройстве Octet (ForteBio Inc.). His-меченные VHH домены очищали аффинной хроматографией на иммобилизованных ионах металла (IMAC) на AKTA (GE Healthcare) из культуральных супернатантов.
Пример 4. Анализ связывания и функциональный анализ анти-C5 VHH доменов
Анализ связывания с компонентом C5 комплемента. Репрезентативные анти-C5 VHH домены секвенировали, охарактеризовывали и оценивали на связывание с C5-белком человека, яванского макака (cyno) и мыши с использованием биослойной интерферометрии на устройстве Octet (ForteBio Inc.). Клеточные культуральные супернатанты из экспрессированных VHH-His доменов нормализовали до концентрации 20 мг/мл в 2× буфере для кинетического анализа и загружали на наконечники anti-penta-HIS (HIS1K) биосенсора (ForteBio Inc.) в течение 300 секунд до полной пропитки наконечников сенсора. На пропитанные наконечники затем воздействовали раствором, содержащим 50 нМ растворимого C5 (человека, cyno или мыши) в 2× буфере для кинетического анализа, при воздействии каждого раствора в течение 600 секунд в отдельных экспериментах, и диссоциацию отслеживали в течение 600 секунд в 2× буфере для кинетического анализа. VHH домены, которые показали связывание с человеческим (hC5) или cyno C5 (cC5), помечены знаком '+' в Таблице 1.
Анализы гемолиза на антагонизм C5. Методом гемолиза измеряют высвобождение гемоглобина из сенсибилизированных эритроцитов цыпленка, лизированных при воздействии Классический Путь Комплемента (CCP)-активированной сыворотки. His-меченные VHH домены экспрессировали в клетках Expi293. Предварительные анализы использовали для выбора функциональных анти-C5 VHH доменов, которые очищали при помощи IMAC. Десять очищенных VHH доменов анализировали на их способность ингибировать CCP-опосредованный гемолиз сенсибилизированных эритроцитов цыпленка при различных концентрациях.
Отсутствие антитела и 20 мМ EDTA использовали в качестве контролей с полным лизисом и отсутствием лизиса для анализа, соответственно. Десять VHH доменов и контрольные анти-C5 IgG (обозначены как h5G1.1, BNJ441 и Ec-CHO) при различных концентрациях (32 мг/мл - 0,5 мг/мл) предварительно инкубировали с 20% нормальной человеческой сывороткой (NHS) в 0,1 мл желатин-веронал буферного солевого раствора (GVB++, cat #B100, Comptech) в течение 30 минут при комнатной температуре. 400 мл эритроцитов цыпленка (Lampire Biologicals, cat# 7201403) промывали четыре раза 1 мл GVB++, и сенсибилизированные cRBC получали путем инкубации 5 × 107 клеток/мл с 1:500 (об./об.) разведением кроличьего-анти-куриного IgG (cat # 203-4139, Rockland) и инкубировали при 4°C в течение 15 минут. Клетки промывали два раза GVB++ и ресуспендировали в конечном объеме 3,6 мл GVB++. 30 мл сенсибилизированных cRBC (2,5 × 106 клеток) добавляли к предварительно инкубированной человеческой сыворотке и антителам и инкубировали при 37°C в течение 30 минут. Клетки осаждали центрифугированием при 1700 × g в течение 3 минут при 4°C и супернатант (85 мл) переносили в новый плоскодонный 96-луночный планшет. Поглощение измеряли при 415 нм. Процент лизиса рассчитывали для каждого VHH домена и контрольных антител следующим образом:
((A415образец - A415 отсутствие лизиса)/(A415полный лизис - A415 отсутствие лизиса)) × 100
где A415образец означает поглощение при 415 нм для образца антитела, A415отсутствие лизиса означает поглощение при 415 нм для контроля с отсутствием лизиса (20 мМ EDTA), и A415 полный лизис означает поглощение при 415 нм для контроля с полным лизисом. Результаты показаны на Фиг. 1.
Идентификация VHH доменов, которые ингибируют высвобождение C5a. Расщепление человеческого C5-белка (например, высвобождение C5a посредством C5 конвертазы альтернативного пути активации комплемента, осажденной на CAP-активаторе Зимозане) измеряли с использованием иммуноанализа на основе Meso Scale Discovery (MSD). Анти-C5 VHH домены экспрессировали и очищали, как описано в предыдущем разделе, и анализировали на их способность блокировать расщепление человеческого C5-белка путем измерения количества высвобожденного hC5a. Оптимальную концентрацию для образца VHH домена определяли в пилотных экспериментах. Образцы VHH доменов и контрольные антитела (h5G1.1, N19/8, BNJ441 и Ec-CHO) добавляли к человеческому C5-белку (конечная концентрация 25 нМ) (CompTech Inc.) в GVB++ буфере, содержащем 1% желатина и 2,5 мМ NiCl, в течение 30 минут при 37°C и хранили при 4°C до последующего использования. Обеспечивающий высокое связывание 96-луночный планшет MSD покрывали анти-C5a антителом при 2 мг/мл в BupH фосфатно-солевом буферном растворе (ThermoFisher) и инкубировали в течение 1 часа. Зимозан затем добавляли к NHS в равной пропорции для активации альтернативного пути активации комплемента. Эту смесь зимозан-NHS затем добавляли к предварительно инкубированному VHH-hC5 раствору и инкубировали при 37°C. Реакцию останавливали в разных точках времени (0, 30, 60 и 90 минут) путем добавления futhan-EDTA. Планшет центрифугировали при 3600 об/мин в течение 2 минут и супернатант переносили в новый полипропиленовый планшет. Блокатор A добавляли в течение 1 часа при комнатной температуре для блокирования неспецифического связывания с покрытым MSD планшетом. MSD планшет промывали и добавляли супернатант из образцов, указанных выше. Этот планшет инкубировали при комнатной температуре в течение 15 минут. Получали смесь антитела для детекции биотин-Ab2942 (Abcam) при 1 мг/мл и стрептавидин-конъюгированной сульфо-метки при 0,5 мг/мл и затем добавляли в каждую лунку и инкубировали при комнатной температуре в течение 30 минут. MSD 2× буфер считывания добавляли в каждую лунку и измеряли электро-хемилюминесцентный сигнал. Необработанные данные анализировали с использованием программного обеспечения MSD. Результаты этого эксперимента показаны на Фиг. 2.
LCP0115, LCP0146, LCP0295, LCP0296, LCP0297 и LCP0302 ингибировали высвобождение C5a и были использованы для дальнейшей характеризации.
Пример 5. Анализ аффинности анти-C5 VHH доменов методом Biacore
Анти-C5 VHH домены распределяли в соответствии с приоритетом на основании перекрестной реактивности относительно cyno C5, и восемь очищенных анти-C5 VHH доменов подвергали анализу аффинности на системе Biacore. Кинетические параметры для связывания с C5 человека и cyno для первоначальных восьми кандидатов показаны в Таблице 2. Из восьми проанализированных на аффинность кандидатов были выбраны пять анти-C5 доменов (LCP0115, LCP0143, LCP0146, LCP0296, и LCP0302) и расположены в соответствии с приоритетом для гуманизации и последующего анализа на основании сопоставимой аффинности к C5 человека и cyno.
Результаты Biacore анализа VHH доменов
Пример 6. Гуманизация анти-C5 VHH доменов
Пять приоритетных анти-C5 VHH доменов (LCP0115, LCP0143, LCP0146, LCP0296 и LCP0302) были гуманизированы путем CDR прививки на зародышевые линии человека с последовательностью, сходной с последовательностью ламы. CDR были основаны на более высоком охвате аминокислот среди IMGT и Kabat определений. Обратные мутации к уникальным остаткам FR2 ламы осуществляли для поддержания стабильности VHH домена. Гуманизированные варианты экспрессировали в клетках Expi293 и испытывали на связывание с C5 человека с использованием биослойной интерферометрии.
Последующие обратные мутации до исходных остатков ламы вводили в выбранные каркасы для нескольких вариантов для улучшения их аффинности к человеческому С5. Конструкции экспрессировали в клетках HEK293F и оценивали на связывание методом биослойной интерферометрии. В некоторых вариантах были осуществлены дополнительные мутации для дальнейшей оптимизации их аффинности, и N-концы были гуманизированы до EVQLV (SEQ ID NO: 147; где необходимо), а С-концы были гуманизированы до WGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 148; где необходимо). Полученные анти-C5 VHH кандидаты, распределенные в соответствии с приоритетом, показаны в Таблице 3 ниже. CDR этих кандидатов показаны в таблице 4.
Гуманизированные анти-C5 VHH домены-кандидаты
ID NO:
CDR гуманизированных анти-C5 VHH доменов-кандидатов
[SEQ ID NO:]
[SEQ ID NO:]
[SEQ ID NO:]
LCP0179
LCP0182
LCP0187
LCP0188
LCP0195
LCP0197
LCP0199
LCP0203
CRL0960
CRL0961
CRL0962
CRL0972
CRL0973
CRL0974
LCP0180
LCP0183
LCP0184
LCP0207
LCP0208
LCP0209
LCP0212
LCP0181
LCP0185
LCP0186
CRL0305
CRL0726
CRL0728
CRL0730
CRL0731
CRL0963
CRL0964
CRL0965
CRL0975
CRL0976
CRL0977
[264]
[266]
[268]
CRL0727
CRL0729
CRL0732
CRL0733
CRL0966
CRL0967
CRL0968
CRL0978
CRL0979
CRL0980
[265]
[267]
[269]
Обратные мутации до исходных остатков ламы вводили в выбранные каркасы из процедур оценки гуманизации для улучшения аффинности выбранных вариантов. Последовательности обратно мутированных вариантов показаны в Таблице 5. Конструкции экспрессировали в HEK293F клетках и оценивали на связывание методом биослойной интерферометрии.
Анти-C5 VHH гуманизированные варианты с обратными мутациями
ID NO
Пример 7. Выделение VHH доменов, связывающихся с человеческим сывороточным альбумином
Альбумин является белком, в большом количестве присутствующим в сыворотке крови, и имеет достаточную молекулярную массу, чтобы избежать удаления фильтрацией через клубочковый фильтрующий барьер. Удаление альбумина из сыворотки путем внутриклеточной деградации ингибируется взаимодействием FcRn с альбумином, которое происходит при низких значениях pH. Это взаимодействие приводит к переносу комплекса альбумин-FcRn обратно в плазматическую мембрану, где альбумин высвобождается обратно в кровь в условиях более нейтрального рН крови.
Обзор процесса генерирования анти-HSA VHH
Библиотеку фагового дисплея анти-HSA VHH со смещенной иммунной активностью получали из В-клеток иммунизированной ламы для анти-C5 VHH доменов и для анти-HSA VHH доменов. После получения конечных титров больше чем 1000000 относительно HSA, PBMC собирали, выделяли РНК и генетически изолировали области VHH. Как подробно описано для анти-С5 VHH доменов в примерах 2-4, эти последовательности анти-HSA VHH клонировали в фагмиду слияния pIII с получением библиотеки из 6 × 108 независимых клонов. Стандартные процедуры пэннинга библиотеки фагового дисплея использовали для выбора VHH доменов, реактивных в отношении HSA и CSA (сывороточный альбумин яванского макака). Результаты трех раундов пэннинга анализировали методом ELISA и секвенирования по Сэнгеру. Параллельно использовали секвенирование следующего поколения (NGS) для изучения популяций последовательностей в исходной библиотеке или последовательностей, пополненных путем пэннинга. В общей сложности ~1000 клонов были выделены и проанализированы с использованием этих методов.
Иммунизация лам и конструирование VHH фаговой библиотеки. Ламу иммунизировали HSA. Первичная иммунизация состояла из 500 мкг антигена, смешанного с полным адъювантом Фрейнда. Стимулирующие иммунизации 500 мкг антигена в неполном адъюванте Фрейнда осуществляли через 2 недели, 4 недели, 8 недель и 12 недель. Сывороточные титры контролировали с использованием кровопусканий примерно через 2 недели после каждой бустер-инъекци. Пробы кровопусканий анализировали методом ELISA для определения титра иммунного ответа. Сывороточный титр анти-HSA определяли при сигнале в 20 раз выше, чем до иммунизации, для 1:100000 разведения, поэтому 500 мл крови обрабатывали с получением ~7 × 108 PBMC для выделения РНК и получения библиотеки. Тотальную РНК из PBMC очищали экстракцией с использованием фенола/хлороформа, с последующей очисткой на спин-колонке с диоксидом кремния, и тотальную РНК элюировали водой, не содержащей РНКазу. Качество РНК оценивали путем определения отношения OD260/280 и методом электрофореза на агарозном геле. кДНК синтезировали с использованием специфических обратных праймеров тяжелых цепей ламы. VHH (тяжелые цепи только) фрагменты отделяли VH (обычная тяжелая цепь) фрагментов методом гель-электрофореза.
VHH фрагменты модифицировали SfiI сайтами и клонировали в pADL-10b, и ДНК библиотеку трансформировали в TG1 клетки. В общей сложности получали 6 × 108 независимых клонов для библиотеки. Все клоны собирали и хранили в 25% глицерине при -80°C до использования. Качество библиотеки подтверждали путем анализа 105 клонов на присутствие вставки с подходящей рамкой считывания, уникальностью и присутствием последовательностей праймеров.
Пэннинг и скрининг библиотеки фагового дисплея.
Аликвоту исходного раствора в глицерине библиотеки анти-HSA VHH, включающего 3,75 × 1010 клеток, культивировали в 2×YT среде, дополненной 2% глюкозы и 100 мг/мл карбенициллина. Клетки выращивали при 37°C при встряхивании при ~250 об/мин до достижения OD600 ~0,6. Хелперный фаг добавляли при множественности заражения (MOI) 20 и культуру инкубировали в течение 30 минут без втряхивания, с последующей инкубацией в течение 30 минут при встряхивании при 37°C. Клетки собирали и ресуспендировали в 2×YT среде, дополненной 25 мг/мл Карбенициллина, 50 мг/мл канамицина и 200 мМ IPTG. Культуры втряхивали в течение ночи при 30°C и 250 об/мин. Среду очищали центрифугированием, фаги осаждали путем добавления 1/4 объема 10% PEG-8000/2,5 M NaCl и инкубации на льду в течение 30 минут. Фаги осаждали центрифугированием при 7500 об/мин в течение 15 минут при 4°C в роторе SLA3000. Клеточный осадок ресуспендировали в Superblock (Thermo Scientific, 37515).
Аликвоту фагов отсеивали с использованием M280 Стрептавидиновых шариков (Life Technologies, 11205D) в течение 30 минут при комнатной температуре, шарики удаляли с использованием магнита, и фаг-содержащий супернатант переносили в новую пробирку Эппендорфа. Фаги дополняли 10 мкг биотинилированного HSA, инкубировали при вращении при комнатной температуре в течение 30 минут, затем добавляли M280 стрептавидиновые шарики для иммобилизации биотинилированного HSA. Шарики промывали 11 раз промывочным буфером PBS/0,05% Tween, элюировали раствором 0,1 M глицина pH 2,7, затем элюирующий буфер нейтрализовали раствором 1 M Tris pH 9,0. Элюированные фаги сохраняли в TG1 клетках в log-фазе и продукты выделяли на 250 см × 250 см лотки с LB Карбенициллина, 2% глюкозы. Титры определяли путем серийного разведения аликвоты полученных фагов. Второй раунд пэннинга осуществляли по существу как описано выше, используя аликвоту продукта первого раунда и 5 мкг биотинилированного HSA для селекций.
Для скрининга клонов на реактивность в отношении HSA отдельные клоны отбирали в 96-луночные планшеты, культивировали в объеме 250 мл 2×YT, дополненной 100 мг/мл Карбенициллина и 2% глюкозы, в течение ночи при 37°C. Каждую лунку субкультивировали путем переноса 5 мл плотной культуры после культивирования в течение ночи в 250 мл свежей среды. Аликвоту брали для анализа последовательности с амплификацией по типу катящегося кольца для определения кодируемой вставки. Клетки выращивали до OD600 ~0,6, затем дополняли хелперным фагом M13 при MOI 20 в течение одного часа. Клетки собирали центрифугированием и среду заменяли на средой 2×YT по 250 мл на лунку, дополненной 100 мг/мл Карбенициллина и 50 мг/мл канамицина. Планшеты затем инкубировали в течение ночи при 30°C при встряхивании при 250 об/мин. Среду очищали центрифугированием с получением фаг-содержащих супернатантов для использования в анализах ELISA.
Для анализа ELISA покрытые стрептавидином предварительно блокированные 96-луночные планшеты (Pierce, 15500) инкубировали с has-Биотином при 2 мг/мл в течение 30 минут при комнатной температуре при встряхивании. Планшеты промывали и затем блокирование повторяли в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты снова промывали и добавляли 50 мл очищенного супернатанта в течение 30 минут при комнатной температуре. Планшеты промывали три раза, затем инкубировали с анти-M13 HRP антителом (GE Healthcare, Cat # 27-9421-01) в блокирующем буфере в течение 30 минут при комнатной температуре. Планшеты промывали четыре раза, затем добавляли реагент 1-й стадии Ultra TMB-ELISA (Thermo Scientific, Cat # 34029), происходило проявление цвета, и реакцию останавливали с использованием стоп-растворов 2 M серной кислоты. OD450 значения определяли с использованием планшет-ридера iMark BioRad.
NGS использовали для исследования популяций последовательностей в исходной библиотеке или последовательностей, пополненных путем пэннинга. Для NGS, фагмидную ДНК выделяли из продуктов, являющихся результатом раунда 1 пэннинга и раунда 2 пэннинга исходной библиотеки. VHH кассету высвобождали из фагмиды путем расщепления рестриктазами, VHH-кодирующие полосы выделяли методом электрофореза на агарозном геле и ДНК очищали с использованием аффинных колонок для очистки ДНК. Эту ДНК использовали для получения библиотеки и анализа на MiSeq 2×300 платформе.
Пример 8. Экспрессия и очистка VHH доменов, связывающихся с HSA
VHH последовательности, выбранные с использованием описанных выше методов, синтезировали с N-концевыми сигнальными пептидами и C-концевыми 6× His-метками (SEQ ID NO: 324) и клонировали в экспрессирующую конструкцию млекопитающего. Описанный в публикации MSA21 VHH домен (Международная публикация № WO 2004/062551 A2) и генетически модифицировалиые варианты индивидуальных клонов (дегликозилированные или гуманизированные) получали путем синтеза GeneBlocks (Integrated DNA Technologies) и клонирования в стандартный вектор экспрессии млекопитающего. Эти конструкции трансфицировали в 293expi клетки и супернатант собирали через 96 часов после трансфекции. Супернатанты диализировали против PBS и VHH-His белки очищали с использованием стандартных хроматографических методов. Очищенные белки подвергали буферному обмену в PBS и количественному анализу с использованием OD и коэффициента экстинкции.
Пример 9. Характеризация иммобилизованных VHH доменов, связывающихся с растворимым HSA, CSA и мышиным сывороточным альбумином
Были созданы экспрессирующие векторы млекопитающих для 112 VHH последовательностей и белка, продуцируемого в 293 expi системе экспрессии. VHH последовательности сначала анализировали методом SDS-PAGE и кумасси окрашиванием для определения приблизительной концентрации по сравнению с известным стандартом. Концентрации в супернатанте затем нормализовали и подвергали биослойной интерферометрии на Octet HTX (Pall/ForteBio). Penta-His сенсоры подвергали воздействию буфера для кинетического анализа в течение 60 секунд для установления начальных показателей. На сенсоры затем нагружали VHH-His-содержащие супернатанты в течение 300 секунд, затем устанавливали вторые начальные показатели в буфере для кинетического анализа в течение 120 секунд. Наконечники затем инкубировали с 100 нМ HSA или CSA в буфере для кинетического анализа в течение 600 секунд и диссоциацию измеряли еще в течение 600 секунд.
Из проанализированных 112 VHH доменов, 12 доменов продемонстрировали связывание с биотинилированным HSA, и три клона (HAS040, HAS041 и HAS042) взаимодействовали как с биотинилированным CSA, так и с биотинилированным HSA. Пследовательности этих 12 анти-HSA VHH доменов, включая один или несколько их гуманизированных вариантов, показаны в Таблице 6, а CDR этих анти-HSA VHH доменов показаны в Таблице 7.
Последовательности для анти-альбуминовых VHH доменов
Последовательности CDR для анти-альбуминовых VHH доменов
[SEQ ID NO:]
[SEQ ID NO:]
[SEQ ID NO:]
Пример 10. Определение кинетики связывания с альбумином на системе Biacore
Кинетику связывания VHH доменов HAS040 и HAS041 с HSA или CSA определяли с использованием SPR на устройстве Biacore 3000. Биотинилированный альбумин захватывали на CAP чипе, пропитанном Biotin CAPture реагентом, содержащим дезоксирибоолигонуклеотиды (получены от GE Healthcare). Концентрации очищенных VHH доменов вводили в течение 5 минут при скорости потока 50 мл/мин. Оценивали три концентрации на VHH домен. Обеспечивали возможность диссоциации связанного аналита в течение 600 секунд. Поверхность чипа восстанавливали после каждой концентрации инжектированием раствора 6 M гуанидина HCl/0,25 M NaOH в течение 2 минут при 10 мл/мин. Кинетику определяли при pH 7,4 и pH 6,0 в HBS-EP буфере с использованием 1:1 модели Ленгмюра (локальное значение Rmax и постоянное RI) и вычитания контроля дважды (вычитание цикла концентрации буфера из цикла концентрации образца и вычитание параллельной контрольной проточной ячейки). VHH домен MSA21 (Международная публикация № WO 2004/062551 A2) (последовательность:
получали и использовали в качестве сравнительного в этих анализах.
Результаты этого анализа показаны в Таблице 8. Аффинности связывания наблюдали в диапазоне 0,3-5 нМ, и это говорит о том, что HAS040 и HAS041 домены имеют достаточную аффинность как при pH 6, так и при pH 7,4, чтобы способствовать продлению периода полужизни. Кроме того, эти VHH домены продемонстрировали связывание с CSA и HSA с очень схожими аффинностями, подтверждая предсказательный характер исследований продления периода полужизни для их осуществления на приматах.
Результаты Biacore анализа анти-альбуминовых VHH доменов
Пример 11. Демонстрация неконкурентного связывания альбумина посредством VHH и FcRn
Рециклирование альбумина из эндоциклических везикул опосредовано взаимодействием с FcRn. Поэтому необходимо было определить будет ли VHH препятствовать взаимодействию HSA и FcRn. Чтобы определить связываются или нет VHH домены HAS040 и HAS041 с тем же эпитопом, что и FcRn, связывание FcRn с HSA, который был насыщен анти-HSA VHH доменами, анализировали на устройстве Biacore 3000 при pH 6,0 в HBS-EP буфере. HSA непосредственно иммобилизовывали на CM5 чипе для достижения целевой плотности 250 RUs (резонансных единиц) с использованием иммобилизации по аминогруппе. VHH домены разводили до примерно 1-10 мг/мл и вводили до достижения насыщения (3 минут при 50 мл/мин). Одну концентрацию FcRn инжектировали по поверхности HSA:VHH для анализа кинетики в течение 5 минут при 50 мл/мин. Обеспечивали возможность диссоциации в течение 180 секунд перед восстановлением. Поверхность чипа восстанавливали, инжектируя 20 мл 25 мМ NaOH при 100 мл/мин. Кинетику определяли с использованием 1:1 модели Ленгмюра (локальное значение Rmax и постоянное RI) и вычитания контроля дважды (вычитание цикла концентрации буфера из цикла концентрации образца и вычитание параллельной контрольной проточной ячейки).
Результаты показаны на Фиг. 7. На Фиг. 7A непосредственное взаимодействие FcRn с HSA-насыщенной поверхностью приводило к разнице в ответе 30 RUs. Подобные RUs были получены, когда 400 нМ FcRn инжектировали по поверхности, насыщенной комплексами HSA с MSA21 (ADL021) (Фиг. 7B), HAS040 (Фиг. 7C) или HAS041 (Фиг. 7D). На основании этих данных, HAS040 и HAS041 не препятствуют связыванию FcRn и, как ожидается, будут рециркулированы из эндосомы посредством взаимодействия альбумина с FcRn.
Пример 12. Генерирование анти-C5 и анти-альбуминовых биспецифических слитых белков
Анти-C5 VHH домены соединяли путем слияния с анти-альбуминовым доменом с образованием биспецифических молекул. Оценивали четыре разных длины линкера (G4S)3, (G4S)4, (G4S)5 и (G4S)6 и две разные ориентации (N-концевая или C-концевая) анти-альбуминового домена. Конструкции экспрессировали в HEK293F клетках и очищали с использованием аффинной хроматографии с белком A. Очищенные слитые молекулы оценивали в экспериментах на системе Biacore. Человеческий C5 биотинилировали и иммобилизовывали на biacore чипе, очищенные биспецифические молекулы инжектировали для пропитки чипа с последующим введением трех разных концентраций человеческого сывороточного альбумина для получения кинетических характеристик. Измеренную аффинность к человеческому сывороточному альбумину использовали в качестве приблизительного значения для сравнения разных длин линкера. В качестве оптимальной длины линкера была выбрана (G4S)3 для синтеза биспецифических слитых молекул. N-концевые или C-концевые анти-альбуминовые слияния также оценивали в этом же эксперименте. Различные ориентации были найдены оптимальными для различных анти-C5 VHH доменов. N- против C-концевой ориентации конструкций определены ниже в названии конструкции в Таблице 9, где (C5/HSA) указывает, что анти-C5 домен расположен в направлении к N-концу относительно анти-HSA домена. Подобным образом, (HSA/C5) указывает, что анти-HSA домен расположен в направлении к N-концу относительно анти-C5 домена.
После выбора оптимальной длины линкера был получен ряд различных биспецифических слитых молекул с гуманизированными анти-C5 VHH доменами, слитыми с двумя разными анти-альбуминовыми доменами (показаны в Таблице 8). Эти конструкции экспрессировали в Expi293 клетках и очищали с использованием хроматографии с белком A. Очищенные биспецифические слитые белки испытывали в анализах гемолиза, и результаты показаны на Фиг. 3A и 3B.
Анти-C5/анти-альбуминовые слитые белки
ID NO:
(HSA/C5)
(HSA/C5)
(HSA/C5)
(HSA/C5)
(HSA/C5)
(HSA/C5)
(HSA/C5)
(HSA/C5)
(HSA/C5)
(HSA/C5)
(HSA/C5)
(HSA/C5)
(C5/HSA)
(C5/HSA)
(C5/HSA)
(C5/HSA)
(C5/HSA)
(C5/HSA)
(C5/HSA)
(C5/HSA)
(C5/HSA)
(C5/HSA)
(C5/HSA)
(C5/HSA)
(C5/HSA)
(C5/HSA)
(HSA/C5)
(HSA/C5)
(HSA/C5)
(HSA/C5)
(HSA/C5)
(HSA/C5)
Четыре биспецифические молекулы CRL0483, CRL0484, CRL0499 и CRL0500 распределяли в соответствии с приоритетом на основании анализов связывания и функциональности. Данные аффинности, определенной на системе Biacore, для связывания с человеческим C5 для CRL0483, CRL0484, CRL0499 и CRL0500 показаны в Таблице 10, а оценки функциональности показаны на Фиг. 3, 4 и 5. Эти четыре биспецифические молекулы оценивали в in vivo фармакокинетических исследованиях на яванских макаках.
Полученные на системе Biacore данные распределенных по приоритетам слитых молекул при pH 7,4 и pH 6,0
(1/Ms)
(1/s)
(M)
Пример 13. Фармакокинетический (PK) анализ биспецифических слитых белков
Очищенные белки вводили в дозе 10 мг/кг либо внутривенно, либо подкожно яванским макакам. Использовали по три обезьяны на дозовую группу на исследуемый препарат. Фармакокинетические свойства биспецифических молекул измеряли в количественном анализе на основе ЖХ-МС с использованием сигнатурных пептидов для каждой конструкции. PK профиль показан на Фиг. 6, и параметры описаны в Таблице 11.
PK параметры у яванских макак после 10 мг/кг исследуемых препаратов
Также были получены варианты линкерных последовательностей для биспецифических слитых белков. Последовательности, включающие эти варианты линкерных последовательностей, показаны в Таблице 12.
Последовательности анти-C5/анти-альбуминовых биспецифических молекул с различными линкерами
Пример 14. Изменяющиеся последовательности пептидных линкеров
Конструкции получали с использованием HAS042 (SEQ ID NO:26) альбумин-связывающего домена и CRL0305 (SEQ ID NO:11) гуманизированного анти-C5 VHH. Конструкции, которые были оценены, представлены в Таблице 13.
Линкеры, используемые для получения слитых белков
с человеческим C5 и человеческим альбумином
Экспрессировали 26 конструкций, перечисленных в Таблице 13, и слитые белки оценивали на связывание с человеческим C5 и альбумином (Таблица 13- Octet связывание), образование агрегатов, гидрофобность (HIC HPLC) и гликозилирование (масс-спектрометрия с электрораспылением). Для octet-анализа биотинилированный человеческий C5 захватывали на CAP чипе с последующей инжекцией испытываемой биспецифической молекулы. Затем инжектировали различные концентрации альбумина. Кинетику определяли при pH 7,4 (Biacore 3000). Все биспецифические молекулы связывались как с C5, так и с альбумином, при этом каждая имела одинаковую аффинность к альбумину (5-6 нМ).
Биспецифические слитые белки испытывали на их способность ингибировать гемолиз в in vitro анализе гемолиза. Данные показаны в Фиг. 9A и 9B.
Таблица 14 показывает кинетику связывания для CRL0500 и CRL0952, связывающихся с C5 человека (hC5) и C5 яванского макака (cC5).
Кинетика связывания биспецифических молекул с C5
Таблица 15 показывает кинетику связывания для CRL0500 и CRL0952, связывающихся с Plasbumin® и альбумином яванского макака.
Кинетика связывания биспецифических молекул с альбумином
Пример 15. pH-зависимое связывание анти-C5 VHH доменов
Сканирование на гистидин осуществляли по всем CDR для анти-C5 VHH доменов LCP0115, LCP0143, LCP0146 и LCP0302. Отдельные гистидиновые замены были получены в каждом положении в CDRs (показаны жирным шрифтом, подчеркнутый текст). Варианты трансфицировали в Expi293 клеточную культуру и оценивали на pH-зависимое связывание при pH 7,4, 6,0 и 5,5. Некоторые варианты из каждого антитела показали pH-зависимое связывание. Эти варианты перечислены в Таблице 16, и их pH-зависимая реакция связывания проиллюстрирована на Фиг. 11A-D.
Предгуманизированные сканированные гистидиновые варианты анти-C5 VHH доменов
ID NO
Одиночные гистидиновые мутации, идентифицированные для pH-зависимого связывания, объединяли для усиления pH-чувствительности. Последовательности этих вариантов показаны в Таблице 17. Эти варианты оценивали методом биослойной интерферометрии на pH-зависимое связывание, и результаты показаны на Фиг. 12A и 12B.
Пример 16. Получение анти-C5 и анти-альбуминовых биспецифических слитых молекул
Анти-C5 VHH домены сливали с анти-альбуминовым доменом для получения биспецифических молекул. Оценивали четыре разных длины линкера (G4S)3, (G4S)4, (G4S)5 и (G4S)6 и две разные ориентации (N-концевая или C-концевая) анти-альбуминового домена. Последовательности полученных молекул показаны в Таблице 18. Конструкции экспрессировали в HEK293F клетках и очищали с использованием аффинной хроматографии с белком A. Очищенные слитые молекулы оценивали в экспериментах на системе Biacore. Человеческий C5 биотинилировали и иммобилизовывали на biacore чипе, очищенные биспецифические молекулы инжектировали для насыщения чипа с последующим введением трех разных концентраций человеческого сывороточного альбумина для получения кинетических характеристик. Измеренную аффинность к человеческому сывороточному альбумину использовали в качестве приблизительного значения для сравнения разных длин линкера. В качестве оптимальной длины линкера была выбрана (G4S)3 для синтеза биспецифических слитых молекул. N-концевые или C-концевые анти-альбуминовые слияния также оценивали в этом же эксперименте. Различные ориентации были найдены оптимальными для различных анти-C5 VHH доменов.
Последовательности вариантов анти-C5/анти-альбуминовых биспецифических молекул с разной длиной линкера и ориентацией
ID NO
Был получен ряд различных биспецифических слитых молекул с гуманизированными анти-C5 VHH доменами с или без pH-зависимого связывания. Осуществляли слияние анти-C5 VHH доменов с двумя разными анти-альбуминовыми доменами для получения биспецифических молекул (показаны в Таблице 9). Эти конструкции экспрессировали в HEK293F клетках и очищали с использованием хроматографии с белком A. Очищенные биспецифические конструкции испытывали в анализах гемолиза, и результаты показаны на Фиг. 3A-D.
Четыре биспецифические молекулы CRL0483, CRL0484, CRL0499 и CRL0500 распределяли по приоритетам на основании анализов связывания и функциональности. Данные аффинности, определенной на системе Biacore, для связывания с человеческим C5 для CRL0483, CRL0484, CRL0499 и CRL0500 показаны в Таблице 10, а оценки функциональности показаны на Фиг. 5, 6 и 7. Эти четыре биспецифические молекулы оценивали в in vivo фармакокинетических исследованиях на яванских макаках.
Пример 17. Фармакокинетический анализ биспецифических слитых молекул
Очищенные белки вводили яванским макакам в дозе 10 мг/кг либо внутривенно, либо подкожно. Использовали по три обезьяны на дозовую группу на исследуемый препарат. Фармакокинетические свойства биспецифических молекул измеряли в количественном анализе на основе ЖХ-МС с использованием сигнатурных пептидов, специфических для каждой конструкции. PK профиль показан на Фиг. 6А и 6В, и параметры описаны в Таблице 20.
PK параметры у яванских макак после 10 мг/кг исследуемых препаратов
Хотя в настоящем раскрытии описаны различные варианты осуществления изобретения, специалистам в данной области техники должно быть понятно, что возможны его вариации и модификации. Следовательно, предполагается, что прилагаемая формула изобретения охватывает все такие эквивалентные варианты. Кроме того, заголовки разделов, используемые в настоящей заявке, предназначены только для организационных целей и не должны рассматриваться как ограничивающие описанное изобретение.
Каждый вариант осуществления, описанный в настоящей заявке, может быть объединен с любым другим вариантом осуществления или вариантами осуществления, если явно не указано иное. В частности, любой признак или вариант осуществления, указанный как предпочтительный или выгодный, может быть объединен с любым другим признаком или признаками или вариантом или вариантами осуществления, указанными как предпочтительные или выгодные, если явно не указано иное.
Все ссылки, цитируемые в настоящей заявке, специально включены в настоящую заявку посредством ссылки.
--->
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> Alexion Pharmaceuticals, Inc.
<120> ПОЛИПЕПТИДЫ, КОТОРЫЕ СВЯЗЫВАЮТСЯ С КОМПОНЕНТОМ КОМПЛЕМЕНТА C5 ИЛИ
СЫВОРОТОЧНЫМ АЛЬБУМИНОМ, И ИХ БЕЛКИ СЛИЯНИЯ
<130> 51196-005RU2
<150> US 62/531,215
<151> 2017-07-11
<160> 327
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 1
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Asn Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 2
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 2
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 3
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 3
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Met Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 4
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 4
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 5
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 5
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asp
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 6
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 6
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 7
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 7
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Ser Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 8
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 8
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ala Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
65 70 75 80
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 9
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 9
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg His Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 10
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 10
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala His Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 11
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 11
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala His Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Asn Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 12
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 12
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg His His Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 13
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 13
Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala
1 5 10
<210> 14
<211> 14
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 14
Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly
1 5 10
<210> 15
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 15
Gly Arg His Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala
1 5 10
<210> 16
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 16
Gly Arg Ala His Ser Asp Tyr Ala Met Ala
1 5 10
<210> 17
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 17
Gly Arg His His Ser Asp Tyr Ala Met Ala
1 5 10
<210> 18
<211> 17
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 18
Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Arg
1 5 10 15
Gly
<210> 19
<211> 16
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 19
Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly
1 5 10 15
<210> 20
<211> 19
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 20
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
1 5 10 15
Tyr Asp Tyr
<210> 21
<211> 22
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 21
Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu Val Pro Gln
1 5 10 15
Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr
20
<210> 22
<211> 127
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 22
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Gly Ser Asp
20 25 30
Ala Ala Gly Trp Phe Arg Gln Ala Ser Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Trp Ser Gly Gly Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ser Asp Asn Val Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Thr Gly Asn Arg Tyr Ser Asp Tyr Arg Ile Ser Leu Val Thr Pro
100 105 110
Ser Gln Tyr Glu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser
115 120 125
<210> 23
<211> 124
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 23
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Gly Ser Gly His Ser Phe Ser Thr Tyr
20 25 30
Thr Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Glu Glu Arg Lys Phe Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Trp Ser Gly Glu Val Thr Leu Tyr Gly Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Arg Lys Lys Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met His Ser Leu Lys Pro Glu Asp Ser Ala Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Lys Arg Gly Gly Arg Pro Thr Asp Ser Ser Asp Asp Tyr Phe
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 24
<211> 123
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 24
Gln Val Gln Leu Asn Glu Ser Gly Gly Gly Met Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Ile Asn Trp Asn Lys Thr Thr Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Glu Tyr Ala Lys Asn Thr Val Ala Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Ile Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Glu Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 25
<211> 123
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 25
Gln Val Gln Leu Ile Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Gly Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Ile Asn Trp Asn Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Val Ala Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 26
<211> 123
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 26
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 27
<211> 123
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 27
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Ile Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Arg Val Ser Thr Ile Ala Gly Asp Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Ser Tyr Asn Val Arg Leu Val Thr Gly Glu Ala Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Glu Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 28
<211> 123
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 28
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Ile Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Arg Val Ser Thr Ile Ala Gly Asp Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Ser Tyr Asn Val Arg Leu Gly Thr Gly Glu Ala Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Glu Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 29
<211> 123
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 29
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ile Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Ala Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Arg Val Ser Thr Ile Ala Gly Asp Thr Asp Tyr Ala Asn Ala Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Glu Ser Tyr Asn Val Arg Leu Val Thr Gly Glu Ala Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Glu Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 30
<211> 127
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 30
Gln Val Arg Leu Ala Glu Ser Gly Gly Gly Arg Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Asn Asp
20 25 30
Ala Ala Gly Trp Phe Arg Glu Ala Ser Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Trp Ser Gly Asn Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Glu Asp Asn Val Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Thr Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Gly Asn Arg Tyr Ser Asp Tyr Arg Ile Ser Leu Val Thr Pro
100 105 110
Arg Leu Tyr Glu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
115 120 125
<210> 31
<211> 127
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 31
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Asp
20 25 30
Ala Ala Gly Trp Phe Arg Gln Ala Ser Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Ile Ser Trp Ser Gly Asn Tyr Thr Tyr Ser Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ser Asp Asn Val Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Leu Cys
85 90 95
Ala Ala Gly Asn Arg Tyr Ser Asp Tyr Arg Ile Ser Leu Val Thr Pro
100 105 110
Ser Gln Tyr Glu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
115 120 125
<210> 32
<211> 127
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 32
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Gly Ser Asp
20 25 30
Ala Ala Gly Trp Phe Arg Gln Ala Ser Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Trp Ser Gly Gly Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Gly
50 55 60
Thr Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ser Asp Asn Val Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Thr Gly Asn Arg Asp Ser Asp Tyr Arg Ile Ser Leu Val Thr Pro
100 105 110
Ser Gln Tyr Glu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
115 120 125
<210> 33
<211> 127
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 33
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Gly Ser Asp
20 25 30
Ala Ala Gly Trp Phe Arg Gln Ala Ser Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Trp Ser Gly Gly Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Gly
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ser Asp Asn Val Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Thr Gly Asn Arg Tyr Ser Asp Tyr Arg Ile Ser Leu Val Thr Pro
100 105 110
Ser Gln Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
115 120 125
<210> 34
<211> 127
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 34
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Gly Ser Asp
20 25 30
Ala Ala Gly Trp Phe Arg Gln Ala Ser Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Trp Ser Gly Gly Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ser Ser Ser Asp Asn Val Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Thr Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Thr Val Asn Arg Tyr Ser Asp Tyr Arg Ile Ser Leu Val Thr Pro
100 105 110
Ser Gln Tyr Glu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
115 120 125
<210> 35
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 35
Gly Arg Thr Phe Gly Ser Asp Ala
1 5
<210> 36
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 36
Gly His Ser Phe Ser Thr Tyr Thr
1 5
<210> 37
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 37
Gly Arg Thr Val Ser Asn Tyr Ala
1 5
<210> 38
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 38
Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr Ala
1 5
<210> 39
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 39
Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr Ala
1 5
<210> 40
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 40
Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Ala
1 5
<210> 41
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 41
Gly Arg Thr Phe Ser Asn Asp Ala
1 5
<210> 42
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 42
Gly Arg Thr Phe Ser Ser Asp Ala
1 5
<210> 43
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 43
Gly Arg Thr Phe Gly Ser Asp Ala
1 5
<210> 44
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 44
Ile Ser Trp Ser Gly Gly Tyr Thr
1 5
<210> 45
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 45
Ile Ser Trp Ser Gly Glu Val Thr
1 5
<210> 46
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 46
Ile Asn Trp Asn Lys Thr Thr Thr
1 5
<210> 47
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 47
Ile Asn Trp Asn Lys Thr Ala Thr
1 5
<210> 48
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 48
Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr
1 5
<210> 49
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 49
Val Ser Thr Ile Ala Gly Asp Thr
1 5
<210> 50
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 50
Ile Ser Trp Ser Gly Asn Tyr Thr
1 5
<210> 51
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 51
Ile Ser Trp Ser Gly Gly Tyr Thr
1 5
<210> 52
<211> 21
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 52
Ala Thr Gly Asn Arg Tyr Ser Asp Tyr Arg Ile Ser Leu Val Thr Pro
1 5 10 15
Ser Gln Tyr Glu Tyr
20
<210> 53
<211> 17
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 53
Ala Ala Lys Arg Gly Gly Arg Pro Thr Asp Ser Ser Asp Asp Tyr Phe
1 5 10 15
Tyr
<210> 54
<211> 17
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 54
Ala Ala Val Phe Arg Ile Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Glu Tyr Asp
1 5 10 15
Tyr
<210> 55
<211> 17
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 55
Ala Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp
1 5 10 15
Tyr
<210> 56
<211> 16
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 56
Ala Ala Asp Ser Tyr Asn Val Arg Leu Val Thr Gly Glu Ala Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 57
<211> 16
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 57
Ala Ala Asp Ser Tyr Asn Val Arg Leu Gly Thr Gly Glu Ala Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 58
<211> 16
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 58
Ala Ala Glu Ser Tyr Asn Val Arg Leu Val Thr Gly Glu Ala Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 59
<211> 21
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 59
Ala Ala Gly Asn Arg Tyr Ser Asp Tyr Arg Ile Ser Leu Val Thr Pro
1 5 10 15
Arg Leu Tyr Glu Tyr
20
<210> 60
<211> 21
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 60
Ala Ala Gly Asn Arg Tyr Ser Asp Tyr Arg Ile Ser Leu Val Thr Pro
1 5 10 15
Ser Gln Tyr Glu Tyr
20
<210> 61
<211> 21
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 61
Ala Thr Gly Asn Arg Asp Ser Asp Tyr Arg Ile Ser Leu Val Thr Pro
1 5 10 15
Ser Gln Tyr Glu Tyr
20
<210> 62
<211> 21
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 62
Ala Thr Gly Asn Arg Tyr Ser Asp Tyr Arg Ile Ser Leu Val Thr Pro
1 5 10 15
Ser Gln Tyr Asp Tyr
20
<210> 63
<211> 21
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 63
Ala Thr Val Asn Arg Tyr Ser Asp Tyr Arg Ile Ser Leu Val Thr Pro
1 5 10 15
Ser Gln Tyr Glu Tyr
20
<210> 64
<211> 256
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 64
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
130 135 140
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg His Phe Ser
145 150 155 160
Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu
165 170 175
Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp
180 185 190
Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr
195 200 205
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
210 215 220
Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser
225 230 235 240
Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250 255
<210> 65
<211> 256
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 65
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
130 135 140
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala His Ser
145 150 155 160
Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu
165 170 175
Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp
180 185 190
Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr
195 200 205
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
210 215 220
Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser
225 230 235 240
Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250 255
<210> 66
<211> 256
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 66
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
130 135 140
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg His His Ser
145 150 155 160
Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu
165 170 175
Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp
180 185 190
Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr
195 200 205
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
210 215 220
Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser
225 230 235 240
Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250 255
<210> 67
<211> 256
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 67
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
130 135 140
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg His Phe Ser
145 150 155 160
Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu
165 170 175
Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp
180 185 190
Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
195 200 205
Met Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
210 215 220
Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser
225 230 235 240
Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250 255
<210> 68
<211> 256
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 68
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
130 135 140
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala His Ser
145 150 155 160
Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu
165 170 175
Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp
180 185 190
Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
195 200 205
Met Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
210 215 220
Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser
225 230 235 240
Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250 255
<210> 69
<211> 256
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 69
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
130 135 140
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg His His Ser
145 150 155 160
Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu
165 170 175
Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp
180 185 190
Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
195 200 205
Met Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
210 215 220
Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser
225 230 235 240
Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250 255
<210> 70
<211> 264
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 70
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
145 150 155 160
Ala Ala Ser Gly Arg His Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg
165 170 175
Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser
180 185 190
Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile
195 200 205
Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
210 215 220
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln
225 230 235 240
Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln
245 250 255
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 71
<211> 264
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 71
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
145 150 155 160
Ala Ala Ser Gly Arg Ala His Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg
165 170 175
Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser
180 185 190
Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile
195 200 205
Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
210 215 220
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln
225 230 235 240
Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln
245 250 255
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 72
<211> 264
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 72
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
145 150 155 160
Ala Ala Ser Gly Arg His His Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg
165 170 175
Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser
180 185 190
Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile
195 200 205
Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
210 215 220
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln
225 230 235 240
Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln
245 250 255
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 73
<211> 264
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 73
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
145 150 155 160
Ala Ala Ser Gly Arg His Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg
165 170 175
Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser
180 185 190
Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile
195 200 205
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Met Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
210 215 220
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln
225 230 235 240
Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln
245 250 255
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 74
<211> 264
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 74
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
145 150 155 160
Ala Ala Ser Gly Arg Ala His Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg
165 170 175
Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser
180 185 190
Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile
195 200 205
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Met Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
210 215 220
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln
225 230 235 240
Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln
245 250 255
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 75
<211> 264
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 75
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
145 150 155 160
Ala Ala Ser Gly Arg His His Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg
165 170 175
Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser
180 185 190
Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile
195 200 205
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Met Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
210 215 220
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln
225 230 235 240
Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln
245 250 255
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 76
<211> 262
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 76
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asp
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
145 150 155 160
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
165 170 175
Arg Ser Phe Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro
180 185 190
Glu Trp Val Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala
195 200 205
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
210 215 220
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val
225 230 235 240
Tyr Tyr Cys Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr
245 250 255
Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 77
<211> 270
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 77
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asp
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys
145 150 155 160
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val
165 170 175
Ser Asn Tyr Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg
180 185 190
Glu Phe Val Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp
195 200 205
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser
210 215 220
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
225 230 235 240
Tyr Cys Ala Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp
245 250 255
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265 270
<210> 78
<211> 262
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 78
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
145 150 155 160
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
165 170 175
Arg Ser Phe Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro
180 185 190
Glu Trp Val Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala
195 200 205
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
210 215 220
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val
225 230 235 240
Tyr Tyr Cys Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr
245 250 255
Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 79
<211> 270
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 79
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys
145 150 155 160
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val
165 170 175
Ser Asn Tyr Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg
180 185 190
Glu Phe Val Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp
195 200 205
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser
210 215 220
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
225 230 235 240
Tyr Cys Ala Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp
245 250 255
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265 270
<210> 80
<211> 262
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 80
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Ser Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
145 150 155 160
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
165 170 175
Arg Ser Phe Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro
180 185 190
Glu Trp Val Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala
195 200 205
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
210 215 220
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val
225 230 235 240
Tyr Tyr Cys Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr
245 250 255
Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 81
<211> 270
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 81
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Ser Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys
145 150 155 160
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val
165 170 175
Ser Asn Tyr Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg
180 185 190
Glu Phe Val Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp
195 200 205
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser
210 215 220
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
225 230 235 240
Tyr Cys Ala Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp
245 250 255
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265 270
<210> 82
<211> 262
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 82
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ala Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
65 70 75 80
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
145 150 155 160
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
165 170 175
Arg Ser Phe Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro
180 185 190
Glu Trp Val Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala
195 200 205
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
210 215 220
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val
225 230 235 240
Tyr Tyr Cys Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr
245 250 255
Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 83
<211> 270
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 83
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ala Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
65 70 75 80
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys
145 150 155 160
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val
165 170 175
Ser Asn Tyr Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg
180 185 190
Glu Phe Val Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp
195 200 205
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser
210 215 220
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
225 230 235 240
Tyr Cys Ala Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp
245 250 255
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265 270
<210> 84
<211> 256
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 84
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
130 135 140
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser
145 150 155 160
Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu
165 170 175
Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp
180 185 190
Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Asn Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
195 200 205
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
210 215 220
Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser
225 230 235 240
Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250 255
<210> 85
<211> 264
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 85
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
145 150 155 160
Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg
165 170 175
Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser
180 185 190
Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Asn
195 200 205
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
210 215 220
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln
225 230 235 240
Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln
245 250 255
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 86
<211> 256
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 86
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
130 135 140
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser
145 150 155 160
Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu
165 170 175
Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp
180 185 190
Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr
195 200 205
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
210 215 220
Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser
225 230 235 240
Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250 255
<210> 87
<211> 264
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 87
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
145 150 155 160
Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg
165 170 175
Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser
180 185 190
Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile
195 200 205
Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
210 215 220
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln
225 230 235 240
Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln
245 250 255
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 88
<211> 256
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 88
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
130 135 140
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser
145 150 155 160
Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu
165 170 175
Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp
180 185 190
Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
195 200 205
Met Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
210 215 220
Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser
225 230 235 240
Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250 255
<210> 89
<211> 264
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 89
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
145 150 155 160
Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg
165 170 175
Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser
180 185 190
Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile
195 200 205
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Met Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
210 215 220
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln
225 230 235 240
Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln
245 250 255
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 90
<211> 256
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 90
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
130 135 140
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser
145 150 155 160
Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu
165 170 175
Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp
180 185 190
Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
195 200 205
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
210 215 220
Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser
225 230 235 240
Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250 255
<210> 91
<211> 264
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 91
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
145 150 155 160
Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg
165 170 175
Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser
180 185 190
Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile
195 200 205
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
210 215 220
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln
225 230 235 240
Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln
245 250 255
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 92
<211> 256
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 92
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
130 135 140
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala His Ser
145 150 155 160
Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu
165 170 175
Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp
180 185 190
Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Asn Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
195 200 205
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
210 215 220
Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser
225 230 235 240
Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250 255
<210> 93
<211> 264
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 93
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
145 150 155 160
Ala Ala Ser Gly Arg Ala His Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg
165 170 175
Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser
180 185 190
Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Asn
195 200 205
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
210 215 220
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln
225 230 235 240
Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln
245 250 255
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 94
<211> 256
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 94
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
130 135 140
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala His Ser
145 150 155 160
Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu
165 170 175
Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp
180 185 190
Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
195 200 205
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
210 215 220
Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser
225 230 235 240
Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250 255
<210> 95
<211> 264
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 95
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
145 150 155 160
Ala Ala Ser Gly Arg Ala His Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg
165 170 175
Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser
180 185 190
Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile
195 200 205
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
210 215 220
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln
225 230 235 240
Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln
245 250 255
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 96
<211> 264
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 96
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ala
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
145 150 155 160
Ala Ala Ser Gly Arg Ala His Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg
165 170 175
Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser
180 185 190
Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Asn
195 200 205
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
210 215 220
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln
225 230 235 240
Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln
245 250 255
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 97
<211> 270
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 97
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asp
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys
145 150 155 160
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val
165 170 175
Ser Asn Tyr Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg
180 185 190
Glu Phe Val Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp
195 200 205
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser
210 215 220
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
225 230 235 240
Tyr Cys Ala Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp
245 250 255
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265 270
<210> 98
<211> 266
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 98
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Ala Gly Asp
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Pro Val Gly Thr Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Trp Gly Gly Met Trp Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Asp Lys Asn Ala Val Tyr
65 70 75 80
Leu Arg Met Asn Ser Leu Asn Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Gly Arg Gly Arg Met Tyr Arg Gly Ile Gly Asn Ser Leu Ala Gln Pro
100 105 110
Lys Ser Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ser Glu
130 135 140
Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly Ser
145 150 155 160
Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr Ala
165 170 175
Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val Ser
180 185 190
Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly
195 200 205
Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln
210 215 220
Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala
225 230 235 240
Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr Trp
245 250 255
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265
<210> 99
<211> 270
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 99
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Ala Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu
35 40 45
Arg Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Thr Leu Ser Ala
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asp
65 70 75 80
Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Trp Pro Tyr Gly Ser Asn Arg Gly Glu
100 105 110
Val Pro Thr Glu Asn Glu Tyr Gly His Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys
145 150 155 160
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val
165 170 175
Ser Asn Tyr Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg
180 185 190
Glu Phe Val Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp
195 200 205
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser
210 215 220
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
225 230 235 240
Tyr Cys Ala Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp
245 250 255
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265 270
<210> 100
<211> 266
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 100
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ala
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Ala Gly Asp Ser Leu Thr Leu Thr Cys
145 150 155 160
Thr Ala Pro Val Gly Thr Ile Ser Asp Tyr Gly Met Gly Trp Phe Arg
165 170 175
Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val Ala Ser Ile Ser Trp Gly
180 185 190
Gly Met Trp Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
195 200 205
Ser Arg Asp Asn Asp Lys Asn Ala Val Tyr Leu Arg Met Asn Ser Leu
210 215 220
Asn Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Gly Arg Gly Arg Met Tyr
225 230 235 240
Arg Gly Ile Gly Asn Ser Leu Ala Gln Pro Lys Ser Tyr Gly Tyr Trp
245 250 255
Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
260 265
<210> 101
<211> 270
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 101
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Val Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Ala Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Ile Asn Trp Gln Lys Thr Ala Thr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Val Phe Arg Val Val Ala Pro Lys Thr Gln Tyr Asp Tyr Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ala
115 120 125
Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu
130 135 140
Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
145 150 155 160
Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile Leu Ser Ala Tyr Ala Val
165 170 175
Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val Ser Thr
180 185 190
Ile Thr Ser Gly Gly Ser Thr Leu Ser Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg
195 200 205
Phe Thr Leu Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asp Thr Val Tyr Leu Gln Met
210 215 220
Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Val Arg
225 230 235 240
Thr Trp Pro Tyr Gly Ser Asn Arg Gly Glu Val Pro Thr Glu Asn Glu
245 250 255
Tyr Gly His Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
260 265 270
<210> 102
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 102
Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 103
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 103
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 104
<211> 5
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 104
Gly Gly Gly Gly Ser
1 5
<210> 105
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 105
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10
<210> 106
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 106
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 107
<211> 20
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 107
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser
20
<210> 108
<211> 25
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 108
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
20 25
<210> 109
<211> 30
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 109
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
20 25 30
<210> 110
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 110
Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys
1 5 10 15
<210> 111
<211> 5
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 111
Pro Ala Pro Ala Pro
1 5
<210> 112
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 112
Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Pro Ala Pro
1 5 10
<210> 113
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 113
Pro Ala Pro Ala Pro Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10
<210> 114
<211> 12
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 114
Gly Ser Thr Ser Gly Lys Ser Ser Glu Gly Lys Gly
1 5 10
<210> 115
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 115
Gly Gly Gly Asp Ser Gly Gly Gly Asp Ser
1 5 10
<210> 116
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 116
Gly Gly Gly Glu Ser Gly Gly Gly Glu Ser
1 5 10
<210> 117
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 117
Gly Gly Gly Asp Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10
<210> 118
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 118
Gly Gly Gly Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10
<210> 119
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 119
Gly Gly Gly Glu Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10
<210> 120
<211> 6
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 120
Ala Ser Thr Lys Gly Pro
1 5
<210> 121
<211> 13
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 121
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro
1 5 10
<210> 122
<211> 4
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 122
Gly Gly Gly Pro
1
<210> 123
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 123
Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Pro
1 5
<210> 124
<211> 9
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 124
Pro Ala Pro Asn Leu Leu Gly Gly Pro
1 5
<210> 125
<211> 6
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 125
Gly Gly Gly Gly Gly Gly
1 5
<210> 126
<211> 12
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 126
Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly
1 5 10
<210> 127
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 127
Ala Pro Glu Leu Pro Gly Gly Pro
1 5
<210> 128
<211> 8
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 128
Ser Glu Pro Gln Pro Gln Pro Gly
1 5
<210> 129
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 129
Gly Gly Gly Ser Ser Gly Gly Gly Ser Ser Gly Gly Gly Ser Ser
1 5 10 15
<210> 130
<211> 14
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 130
Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser
1 5 10
<210> 131
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 131
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 132
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 132
Gly Gly Ser Ser Ser Gly Gly Ser Ser Ser Gly Gly Ser Ser Ser
1 5 10 15
<210> 133
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 133
Gly Ser Ser Ser Ser Gly Ser Ser Ser Ser Gly Ser Ser Ser Ser
1 5 10 15
<210> 134
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 134
Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 135
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 135
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 136
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 136
Gly Gly Gly Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 137
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 137
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ala Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 138
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 138
Gly Gly Gly Gly Ser Ala Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 139
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 139
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 140
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 140
Gly Gly Gly Gly Ser Ala Gly Gly Gly Ser Ala Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 141
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 141
Gly Gly Gly Gly Asp Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 142
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 142
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Asp Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 143
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 143
Gly Gly Gly Gly Asp Gly Gly Gly Gly Asp Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 144
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 144
Gly Gly Gly Gly Glu Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 145
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 145
Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Glu Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 146
<211> 15
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 146
Gly Gly Gly Gly Glu Gly Gly Gly Gly Glu Gly Gly Gly Gly Ser
1 5 10 15
<210> 147
<211> 5
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 147
Glu Val Gln Leu Val
1 5
<210> 148
<211> 11
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 148
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
1 5 10
<210> 149
<211> 115
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 149
Ala Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Asn
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Thr Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Gln Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser
115
<210> 150
<211> 114
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 150
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Thr Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Thr Ser Gly Ser Asp Phe Ser
20 25 30
Gly Lys Lys Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Asn Gly Arg Glu
35 40 45
Phe Val Ala Ile Ile Phe Ser Asn Lys Val Thr Asp Tyr Ala Asp Ser
50 55 60
Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Lys Thr Val
65 70 75 80
Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Thr Pro Thr Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys His Asp Gln Glu Ile Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val
100 105 110
Ser Ser
<210> 151
<211> 122
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 151
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Thr Ser Val Val Ile Asn
20 25 30
Ser Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Thr Ile Asp Leu Ser Gly Thr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Ala Gln
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Leu Asn Leu Val
65 70 75 80
Tyr Leu Gln Met Asn Asn Leu Asn Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Asn Ala Leu Leu Ser Arg Ala Val Ser Gly Ser Tyr Val Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 152
<211> 118
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 152
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ser Arg Ile Gly Thr Ile Ser Asn Ile
20 25 30
Asp Leu Met Asn Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Phe
35 40 45
Val Ala Ser Leu Gln Ser Asn Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Asn Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
His Ala Leu Leu Pro Arg Ser Pro Tyr Asn Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Gln Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 153
<211> 116
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 153
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Ser Ile Ile Pro Asn Ile Tyr
20 25 30
Ala Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Ser Ile Glu Asn Gly Leu Pro Ala Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Phe Leu
65 70 75 80
Gln Met His Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Tyr
85 90 95
Ala Phe Arg Pro Gly Val Pro Thr Thr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 154
<211> 116
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 154
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Ile Ser Ala Ile Asn
20 25 30
Ala Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Asp Ile Thr Arg Ala Gly Val Ser Asp Tyr Ala Asp Ala Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Phe Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Asp Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asp
85 90 95
Ala Leu Leu Ile Ala Gly Gly Val Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 155
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 155
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Arg Thr Ile Ser Thr Thr
20 25 30
Val Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Val His Trp Gly Asp Gly Asn Thr Val Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Leu Asn Tyr Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ser Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Pro Pro Thr Tyr Val Gly Thr Ser Arg Asn Ser Arg Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 156
<211> 125
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 156
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Val Ser Gly Arg Ala Ile Asp Arg Asn
20 25 30
Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Ser Val
35 40 45
Ala Ala Ile Ser Ala Ser Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Ser Asp Ser Val
50 55 60
Thr Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Thr Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Gly Ser Arg Gly Ser Trp Tyr Leu Phe Asp Arg Arg Glu Tyr
100 105 110
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 157
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 157
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Thr Cys Thr Ala Ser Glu Thr Ser Phe Asp Ile Asn
20 25 30
Val Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Ile Ile Thr Ala Ser Gly Asn Thr Glu Tyr Ala Asp Ser Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Thr Lys Asn Thr Val Ala Met
65 70 75 80
Gln Met Asn Asn Leu Lys Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Tyr
85 90 95
Val Leu Leu Ser Gly Ala Val Ser Gly Val Tyr Ala His Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 158
<211> 130
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 158
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Asp Ser Arg Tyr
20 25 30
Ala Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Leu Met
35 40 45
Ala Ala Ile Ser Trp Ser Gly Arg Pro Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Ser
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Tyr Lys Arg Leu Pro Ala Trp Tyr Thr Gly Ser Ala Tyr Tyr Ser
100 105 110
Gln Glu Ser Glu Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val
115 120 125
Ser Ser
130
<210> 159
<211> 118
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 159
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ser Arg Ile Gly Thr Ile Ser Asn Ile
20 25 30
Asp Leu Met Asn Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Phe
35 40 45
Val Ala Ser Leu Gln Ser Thr Gly Thr Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Asn Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
His Ala Leu Ile Pro Arg Ser Pro Tyr Asn Val Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Gln Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 160
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 160
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Arg Thr Ile Ser Thr Thr
20 25 30
Val Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Asp His Trp Gly Asp Ala Gly Thr Val Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Tyr Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ser Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Pro Pro Thr Tyr Val Gly Thr Ser Arg Asp Ser Arg Ala
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 161
<211> 117
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 161
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Glu Ser Ile Ser Ser Asp Ser
20 25 30
Pro Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Met Val
35 40 45
Ala Arg Ile Leu Pro Ile Gly Pro Pro Asp Tyr Ala Asp Ala Val Lys
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Ile Ser Arg Glu Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Leu Leu His Leu Pro Ser Gly Leu Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 162
<211> 109
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 162
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Arg Ser Ile Ser Ser Ala Met
20 25 30
Asn Trp Tyr Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val Ala Leu
35 40 45
Ile Thr Arg Gly Phe Asn Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg
50 55 60
Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met
65 70 75 80
Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Asn Ser Leu
85 90 95
Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
100 105
<210> 163
<211> 124
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 163
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Asp Ser Met Trp
20 25 30
Ser Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Ile Ser Trp Ser Val Gly Thr Tyr Tyr Glu Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Leu Ser Arg Asp Asp Asp Lys Asp Thr Ala Tyr Leu
65 70 75 80
Glu Met Ser Asp Leu Lys Leu Glu Asp Thr Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Ser Thr Arg His Gly Thr Asn Leu Val Leu Pro Arg Asp Tyr Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 164
<211> 118
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 164
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ser Arg Ile Gly Thr Ile Ser Asn Ile
20 25 30
Asp Leu Met Asn Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Phe
35 40 45
Val Ala Ser Leu Gln Ser Thr Gly Thr Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Asn Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
His Ala Leu Leu Pro Arg Ser Pro Tyr Asn Ala Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Gln Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 165
<211> 116
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 165
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ile Ile Pro Asn Ile Tyr
20 25 30
Ala Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Ser Ile Glu Asn Gly Gly Ser Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Thr Val Phe Leu
65 70 75 80
Gln Met His Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Tyr
85 90 95
Ala Phe Arg Pro Gly Val Pro Thr Asp Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 166
<211> 118
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 166
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Arg Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Ala Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Gly Thr Ile Tyr Trp Ser Thr Gly Arg Ser Tyr Tyr Gly Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Gly Asp Asn Ala Lys Asn Thr Ile His
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Gly Pro Glu Asn Ser Ala Phe Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Gln Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 167
<211> 124
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 167
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Thr Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Asp Phe Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Trp Ser Gly Gly Ile Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Glu Gly Arg Phe Ser Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Met Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Thr Glu Leu Arg Thr Trp Ser Arg Gln Thr Phe Glu Tyr Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 168
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 168
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Arg Thr Ile Ser Thr Thr
20 25 30
Val Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Val His Trp Gly Asp Glu Ser Thr Val Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Tyr Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ser Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Pro Pro Thr Tyr Val Gly Ser Ser Arg Ser Ser Arg Ala
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 169
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 169
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Val Ser Gly Ser Ile Leu Asp Ile Asn
20 25 30
Val Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Arg Ile Thr Ser Gly Gly Asp Ile Asp Tyr Ala Asp Pro Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Thr Asn Gly Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Ala Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Val Leu Leu Ser Arg Ser Ser Ala Gly Arg Tyr Thr His Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 170
<211> 112
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 170
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Pro Phe Ser Leu Tyr
20 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Glu Lys Gln Arg Glu Ser Val
35 40 45
Ala Ile Ile Thr Gln Ser Gly Ser Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg
85 90 95
Leu Val Gly Val Thr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
100 105 110
<210> 171
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 171
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Ile Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Ile Ser Arg Thr Gly Gln Thr Thr His Tyr Ala Asp Ser Ile
50 55 60
Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln
65 70 75 80
Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala
85 90 95
Arg Thr Gly Gly Pro Ile Tyr Gly Ser Glu Tyr His Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 172
<211> 124
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 172
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Pro Phe Ser Ser Leu
20 25 30
Thr Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Thr Thr Ser Trp Ser Gly Asp Ile Lys Tyr Tyr Ala Asp Phe Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Met Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Thr Leu Leu Arg Thr Trp Ser Arg Gln Thr Asn Glu Tyr Glu
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 173
<211> 118
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 173
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ser Arg Ile Gly Thr Ile Ser Asn Ile
20 25 30
Asp Leu Met Asn Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Phe
35 40 45
Val Ala Ser Leu Gln Ser Thr Gly Thr Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Asn Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
His Ala Leu Leu Pro Arg Ser Pro Tyr Asn Val Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Gln Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 174
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 174
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Arg Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asp
65 70 75 80
Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 175
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 175
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Pro Glu Thr Gly Ala Thr Ile Asn
20 25 30
Val Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Arg Val Ala Ile Asp Asn Asn Thr Asp Tyr Ala Asp His Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Thr Lys Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Asn Leu Lys Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Val Leu Leu Ser Arg Gln Ile Ser Gly Ser Tyr Gly His Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 176
<211> 133
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 176
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Ala Met Ser Gly Gly Thr Arg Pro Phe Glu
20 25 30
Asp Tyr Val Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Thr Gly Lys Glu Arg Glu
35 40 45
Phe Val Ala Thr Ile Thr Trp Met Gly Glu Thr Thr Tyr Tyr Lys Asp
50 55 60
Ser Val Asn Gly Arg Phe Ala Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Thr
65 70 75 80
Val Ala Leu Gln Met Asn Ser Leu Glu Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Phe Cys Ala Ala His Ser Arg Ser Ser Phe Ser Thr Ser Gly Gly Arg
100 105 110
Tyr Asn Pro Arg Pro Thr Glu Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln
115 120 125
Val Thr Val Ser Ser
130
<210> 177
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 177
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Arg Thr Ile Ser Thr Thr
20 25 30
Val Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Val His Trp Gly Asp Glu Gly Thr Val Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ala Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ser Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Lys Pro Pro Thr Tyr Val Gly Thr Ser Arg Ser Ser Arg Ala
100 105 110
Tyr Val Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 178
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 178
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Asp
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Gly Phe Ser Ile Asn
20 25 30
Val Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Asp Leu Val
35 40 45
Ala Ser Met Thr Ile Gly Gly Arg Thr Asn Tyr Lys Asp Ser Leu Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Thr Lys Asn Thr Ala Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Tyr
85 90 95
Ala Leu Leu Asp Arg Gly Ile Gly Gly Asn Tyr Val Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 179
<211> 125
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 179
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Asp Phe Leu
35 40 45
Ala Arg Ile Gly Lys Ser Gly Ile Gly Lys Ser Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Asn Leu Lys Leu Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Arg Asp Ile Ala Tyr Asp Ala Arg Leu Thr Ala Glu Tyr
100 105 110
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 180
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 180
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Arg Thr Ile Ser Thr Thr
20 25 30
Val Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Val His Trp Gly Asp Glu Ser Thr Val Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Tyr Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Pro Pro Thr Tyr Val Gly Thr Ser Arg Ser Ser Arg Ala
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 181
<211> 123
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 181
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Ala Ser Glu Thr Ile Val
20 25 30
Ser Ile Asn Asp Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg
35 40 45
Glu Leu Val Ala Ser Ile Thr Ile His Asn Asn Arg Asp Tyr Ala Asp
50 55 60
Ser Ala Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Thr Lys Asn Thr
65 70 75 80
Val Tyr Leu Gln Met Thr His Leu Lys Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Thr Val Leu Leu Ser Arg Ala Leu Ser Gly Ser Tyr Arg Phe
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 182
<211> 123
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 182
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Gly Ser Glu Thr Ser Gly Thr Ile Phe
20 25 30
Asn Ile Asn Val Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg
35 40 45
Glu Leu Val Ala Ile Met Asp Ile Gly Gly Thr Thr Asp Tyr Ala Asp
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr
65 70 75 80
Val Tyr Val Gln Met Asn Asn Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Tyr Cys Ala Leu Asp Arg Ala Val Ala Gly Arg Tyr Thr Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 183
<211> 124
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 183
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Ile Ser Leu Asn Asp Tyr
20 25 30
Asn Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Asp Arg Glu Ile Val
35 40 45
Ala Ala Leu Ser Arg Arg Ser His Gly Ile Tyr Gln Ser Asp Ser Val
50 55 60
Lys Tyr Arg Phe Ser Ile Ser Arg Asp Asn Thr Lys Asn Met Val Ser
65 70 75 80
Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Gly Asp Pro Tyr Phe Thr Gly Arg Asp Met Asn Pro Glu
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 184
<211> 124
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 184
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Ser Gly Gly Arg Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Ala Trp Phe Arg Gln Gly Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Arg Ile Ser Gly Asn Gly Arg Gly Thr Gln Tyr Thr Asp Ser Val
50 55 60
Ser Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn Asp Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Asp Leu Lys Val Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Ser Gly Pro Ser Ser Phe Asn Glu Gly Ser Val Tyr Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 185
<211> 113
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 185
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ser Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Val Leu Ser Gly Ser Ile Phe Ser Ser Asn
20 25 30
Thr Met Gly Trp His Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ile Thr Thr Ser Gly Gly Thr Thr Lys Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Arg Met Asn Asn Leu Lys Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Phe Cys Tyr
85 90 95
Ala Ser Leu Ala Gly Ile Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
100 105 110
Ser
<210> 186
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 186
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Pro Glu Thr Glu Ala Thr Tyr Asn
20 25 30
Val Met Gly Trp Tyr Arg Arg Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Thr Met Thr Ile Asp Tyr Asn Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Thr Lys Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Asn Leu Arg Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Arg
85 90 95
Val Asp Leu Ser Arg Gln Ile Ser Gly Ser Tyr Asn Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 187
<211> 125
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 187
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ile Ser Gly Phe Ala Phe Thr Asp Val
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Ser Gly Ser Ser Ile Thr Thr Tyr Ser Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Gly Arg Tyr Tyr Cys Thr Gly Leu Gly Cys His Pro Arg Arg Asp Ser
100 105 110
Ala Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 188
<211> 127
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 188
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gly Phe Thr Tyr Ser Thr Ala
20 25 30
Ala Met Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Ser Leu Gly Ser Asp Arg Lys Ser Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Phe Ile Ser Asn Arg Trp Ser Arg Asp Val His Ala Pro Ser
100 105 110
Asp Phe Gly Ser Arg Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 189
<211> 122
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 189
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Pro Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Phe Gly Phe Thr Phe Asp Asn Tyr
20 25 30
Ala Ile Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 45
Ser Cys Leu Ser Thr Asn Asp Gly Glu Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ser Asp His Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Ala Glu Gly Ser Trp Cys His Lys Tyr Glu Tyr Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 190
<211> 125
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 190
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Ser Asp Leu Tyr
20 25 30
Val Val Gly Trp Phe Arg Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Ala Trp Thr Gly Asp Ala Ser Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ala Arg Asp Asn Ala Glu Asn Arg Ile Asp
65 70 75 80
Leu Gln Met Thr Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Ser Arg Ala Arg Phe Glu Arg Gln Arg Tyr Asn Asp Met
100 105 110
Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 191
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 191
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ile Ala Ser Val Thr Ile Ala Asp Ile Asn
20 25 30
Val Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ser Ile Pro Thr Thr Gly Asp Lys Asn Tyr Ala Glu Ser Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Gln Asn Thr Val Ala Met
65 70 75 80
Gln Met Asn Asn Leu Lys Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Tyr
85 90 95
Val Leu Leu Ser Arg Ala Val Ser Gly Ser Tyr Gly His Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 192
<211> 123
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 192
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Val Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Ile Val Asp Ile Lys
20 25 30
Val Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Asn Glu Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Leu Ile Asn Asp Ala Asp Asp Ser Glu Tyr Ser Pro Ser Met Arg
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Ala Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Asp Arg Asp Ser Ser Trp Phe Lys Ser Pro Tyr Ile Pro Gly Ser
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 193
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 193
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Pro Glu Met Gly Ala Thr Ile Asn
20 25 30
Val Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Arg Leu Pro Leu Asp Asn Asn Ile Asp Tyr Gly Asp Phe Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ile Thr Arg Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Asn Leu Lys Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Val Leu Leu Ser Arg Gln Ile Asn Gly Ala Tyr Val His Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 194
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 194
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ile Asp Gly Asp Ile Asn
20 25 30
Val Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Ser Ile Thr Ile Gly Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ala Arg Asp Asn Ala Lys Asn Arg Met Ser Leu
65 70 75 80
Glu Met Asn Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Thr Leu Leu Ser Arg Val His Asp Gly Gln Tyr Val Phe Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 195
<211> 125
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 195
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Glu Asp Ala Phe Lys Thr Asp
20 25 30
Thr Leu Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Glu Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Phe Val Trp Ala Gly Gly Pro Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Met Asp Glu Asp Arg Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Ala Ser Leu Ser Arg Leu Arg Val Gly Glu Ile Thr Pro Arg His Met
100 105 110
Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 196
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 196
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Asn Ser Lys Asp Asn Ala Lys Asn Arg Met Ser
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 197
<211> 124
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 197
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Ser Ser
20 25 30
Asn Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Glu Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Thr Ala Ile Asp Trp Ser Gly Gly Arg Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asp Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Gln Gly Ser Gly Leu Asp Trp Gly Tyr Pro Trp Thr Tyr Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 198
<211> 115
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 198
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Thr Ser Gly Ser Val Leu Asn Ile Asp
20 25 30
Ser Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Glu Met Leu Trp Gly Gly Thr Lys Asn Tyr Gly Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gly Asp Ala Asp Trp Gly Thr Glu Leu Gln
65 70 75 80
Met Ser Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn Ala
85 90 95
Val Gly Arg Gly Phe Arg Asp Ala Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser
115
<210> 199
<211> 116
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 199
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Ser Gly Phe Gly Ile Leu
20 25 30
Asp Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Ser Arg Arg Glu Leu Val
35 40 45
Gly Tyr Val Thr Arg Asp Gly Thr Thr Asn Tyr Gly Asn Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Ser Ile Ile Ser Glu Asp Ile Thr Lys Asn Thr Val Ile Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys Thr
85 90 95
Ala Gly Leu Thr Asn Gln Pro Arg Ala Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 200
<211> 119
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 200
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Val Ser Ser Ile Asn
20 25 30
Val Met Gly Trp Tyr Arg Gln Thr Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Ala Ile Asn Arg Gly Gly Ser Thr Asn Val Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Ala Glu Pro Tyr Gly Leu Asp Trp Arg Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 201
<211> 129
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 201
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Glu Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Gly Thr Asp Ser Ile Tyr
20 25 30
Gln Met Gly Trp Phe Arg Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Ile Asn Trp Asn Tyr Gly Gly Ala Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Lys Ala Lys Asn Ile Gly Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Ser Gln Thr Ser Val Asp Ala Phe Ser Val Pro Ile Thr Thr
100 105 110
Ala Arg Arg Tyr Gln Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
115 120 125
Ser
<210> 202
<211> 118
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 202
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Arg Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Gly Thr Ile Tyr Trp Ser Thr Gly Arg Ser Tyr Tyr Gly Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Gly Asp Asn Ala Lys Asn Thr Ile His
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Gly Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Gly Pro Glu Met Ser Ala Phe Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Gln Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 203
<211> 127
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 203
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Leu Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Ile Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 45
Ser Cys Ile Ser Ser Ser Asp Gly Ser Thr Tyr Tyr Gly Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Met Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Gly Thr Pro Leu Ser Ser Tyr Tyr Gly Ser Cys Leu Asp Tyr
100 105 110
Asp Met Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 204
<211> 124
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 204
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Val Thr Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Gly Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Glu Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Arg Ile Ser Ser Asn Gly Arg Arg Thr Glu Tyr Ala Asp Gly Val
50 55 60
Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Gly Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Ala Gly Pro Ser Gly Phe His Glu Gln Ser Ile Tyr Asp
100 105 110
Asp Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 205
<211> 123
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 205
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Arg Ser Ile Ser Thr Tyr
20 25 30
Val Ala Gly Trp Phe Arg Gln Gly Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Leu Ile Ser Arg Gly Gly Gly Asp Ile Gln Tyr Ser Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ala Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ser Leu Asp Ala Ser Phe Gly Ser Arg Leu Val Ser Arg Trp Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 206
<211> 128
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 206
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Ala Gly Asp
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Pro Val Gly Thr Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Trp Gly Gly Met Trp Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Asp Lys Asn Ala Val Tyr
65 70 75 80
Leu Arg Met Asn Ser Leu Asn Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Gly Arg Gly Arg Met Tyr Arg Gly Ile Gly Asn Ser Leu Ala Gln Pro
100 105 110
Lys Ser Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 207
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 207
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Ser Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Ile Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 45
Ser Cys Ile Gly Ser Gly Asp Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Ser Glu Asn Ala Lys Lys Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Gly Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Leu Tyr Pro Pro Ala Asp Tyr Ala Leu Asp His Thr Trp
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 208
<211> 113
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 208
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Val Ser Gly Ser Arg Phe Ser Leu Asp
20 25 30
Thr Val Gly Trp His His Gln Ala Pro Gly Lys Leu Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Arg Ile Arg Asp Asp Gly Asp Thr Met Tyr Val Ala Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asp Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Tyr
85 90 95
Phe Ser Arg Asn Gly Ala Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
100 105 110
Ser
<210> 209
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 209
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Gly Ala Ser Gly Arg Ile Ser Asp Ile Asn
20 25 30
Val Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Met Val
35 40 45
Ala Asp Ile Asp Ile Arg Gly Tyr Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala Glu Thr Met Tyr Leu Glu
65 70 75 80
Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Arg Cys Asn Ala
85 90 95
Leu Thr Ser Arg Asp Trp Gly Thr Gly Lys Tyr Val Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 210
<211> 111
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 210
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Gln Val Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Phe Pro Gly Ser Met Ser Ser Arg Asn
20 25 30
Ser Val Asn Trp Tyr Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gln Arg Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Ser Val Ser Gly Phe Thr Gln Tyr Ala Asp Ser Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ser Ala Lys Asn Thr Val His Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Tyr Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
100 105 110
<210> 211
<211> 113
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 211
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Arg Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ala Gly Thr Asp Ile Asn Ile Val
20 25 30
Thr Val Gly Trp His Arg Gln Ala Pro Gly Lys His Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Thr Ile Val Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Pro Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Tyr Ala Thr Ser Ile Gly Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser
100 105 110
Ser
<210> 212
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 212
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Ala Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu
35 40 45
Arg Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Thr Leu Ser Ala
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asp
65 70 75 80
Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Trp Pro Tyr Gly Ser Asn Arg Gly Glu
100 105 110
Val Pro Thr Glu Asn Glu Tyr Gly His Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 213
<211> 118
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 213
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Asn Val Arg Ser Ile Phe
20 25 30
Thr Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Ser Ala Ala Lys Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ala Lys Ala Ile Val Ser Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Lys
85 90 95
Thr Asp Gly Arg Pro Trp Phe Ser Glu Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Gln Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 214
<211> 111
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 214
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Val Gly Asp
1 5 10 15
Ser Met Arg Leu Ser Cys Ala Val Phe Gly Asn Ile Phe Thr Arg Asp
20 25 30
Pro Val Met Trp Phe Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gln Arg Glu Trp Val
35 40 45
Ala Thr Ile Thr Pro Ser Gly Phe Ala Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Tyr Ala Ala Asn Asn Thr Val His Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Phe Cys Asn
85 90 95
Phe Gly Thr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
100 105 110
<210> 215
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 215
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Lys Gly Ala Phe Asn Ile Asn
20 25 30
Val Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Arg Val Ala Leu Gly Gly Thr Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asn Asn Ala Gln Asp Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Val Leu Leu Asp Arg Gly Val Arg Gly Ser Tyr Ala Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 216
<211> 122
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 216
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Tyr Ser Ser Tyr
20 25 30
Val Ile Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ser Ile Arg Trp Ala Gly Gly Asp Ser His Tyr Gln Glu Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Ser Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ala Arg Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Gly Ala Ala Pro Val Pro Gly Gln Ser Tyr Glu Trp Ser Ser Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 217
<211> 121
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 217
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Ser Ala Phe Tyr Val Gly
20 25 30
Pro Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Ser Val
35 40 45
Ala Ser Ile Thr Lys Gly Gly Ile Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Asp Val Tyr Val Cys Asn
85 90 95
Ala Arg Val Lys Leu Gln Glu Asp Arg Leu Phe Arg Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 218
<211> 116
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 218
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Met Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Val Ser Gly Ala Ser Gly Asn Ile Asp
20 25 30
Phe Val Thr Val Gly Trp His Arg Gln Ala Pro Gly Lys His Arg Glu
35 40 45
Met Val Ala Val Ile Thr Gly Asp Gly Thr Arg Asn Tyr Arg Asp Ser
50 55 60
Val Lys Gly Arg Phe Ser Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Ile
65 70 75 80
Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
85 90 95
Cys Tyr Met Ser Asn Pro Ile Ser Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 219
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 219
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Arg Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Arg Thr Leu Ser Ser Phe
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Glu Lys Pro Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ala Ile Thr Trp Gly Gln Gly Gly Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ile Val Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Asp Leu Lys Pro Asp Asp Thr Gly Leu Tyr Phe Cys
85 90 95
Val Ser Ala Pro His Phe His Glu Ala Phe Pro Ser Arg Pro Pro Ala
100 105 110
Tyr Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 220
<211> 122
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 220
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Tyr Gly Ser Tyr
20 25 30
Val Ile Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ser Ile Arg Trp Ala Gly Gly Asp Ser His Tyr Gly Asp Pro Leu
50 55 60
Lys Gly Arg Ser Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Ala Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Gly Ala Ala Pro Val Pro Gly Ser Ser Tyr Glu Trp Thr Asn Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 221
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 221
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Ile Ser Ser Val Asn
20 25 30
Thr Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Phe Ile Thr Ser Gly Asp Asp Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Met Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val
85 90 95
Ala Thr Leu Gly Arg Ser Ser Ser Gly Thr Tyr Thr Tyr Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 222
<211> 127
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 222
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Leu Arg Thr Leu Asp Asn Tyr
20 25 30
Gly Val Gly Trp Phe Arg Gln Thr Pro Gly Arg Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ala Val Ser Trp Asn Gly Asp Arg Thr Tyr Tyr Gln Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Glu Tyr Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asp Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Val Asn Met Tyr Gly Ser Thr Phe Pro Gly Leu Ser Val Glu Ser
100 105 110
His Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 223
<211> 117
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 223
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ser Ile Phe Ser Ile Asn
20 25 30
Ala Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Gln Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Asp Ile Thr Lys Asn Asp Ile Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ala Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Asp Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr
85 90 95
Ala Ala Leu Ser Arg His Pro Tyr Arg Ser Trp Gly Gln Gly Thr Gln
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 224
<211> 122
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 224
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ala Gly Arg Ser Leu Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Ile Ile Trp Phe Arg Gln Pro Pro Gly Lys Glu Tyr Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ser Ile Arg Trp Asn Thr Gly Ser Thr Thr Tyr Gly Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Trp Cys
85 90 95
Ala Ala Gly Leu His Leu Thr Pro Thr Ser Arg Thr Tyr Asn Tyr Arg
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 225
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 225
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Pro Glu Thr Ile Phe Thr Ile Asn
20 25 30
Ser Met Gly Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Phe Ile Asn Leu Asp Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Glu Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asp Asn Leu Lys Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Val Leu Leu Ser Arg Ala Ile Ser Gly Ser Tyr Val His Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 226
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 226
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
35 40 45
Leu Glu Ala Val Ala Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
65 70 75 80
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 227
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 227
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Glu Met Gly Ala Thr Ile Asn
20 25 30
Val Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Ala Val
35 40 45
Ala Arg Leu Pro Leu Asp Asn Asn Ile Asp Tyr Gly Asp Phe Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Val Leu Leu Ser Arg Gln Ile Asn Gly Ala Tyr Val His Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 228
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 228
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Ala Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 229
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 229
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
35 40 45
Arg Glu Phe Val Ala Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
65 70 75 80
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 230
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 230
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Pro Glu Met Gly Ala Thr Ile Asn
20 25 30
Val Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Arg Leu Pro Leu Asp Asn Asn Ile Asp Tyr Gly Asp Phe Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Val Leu Leu Ser Arg Gln Ile Asn Gly Ala Tyr Val His Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 231
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 231
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 232
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 232
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Arg Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 233
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 233
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 234
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 234
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Glu Met Gly Ala Thr Ile Asn
20 25 30
Val Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ser Arg Leu Pro Leu Asp Asn Asn Ile Asp Tyr Gly Asp Phe Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Val Leu Leu Ser Arg Gln Ile Asn Gly Ala Tyr Val His Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 235
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 235
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Glu Met Gly Ala Thr Ile Asn
20 25 30
Val Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Leu Val
35 40 45
Ser Arg Leu Pro Leu Asp Asn Asn Ile Asp Tyr Gly Asp Phe Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Val Leu Leu Ser Arg Gln Ile Asn Gly Ala Tyr Val His Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 236
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 236
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 237
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 237
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val
35 40 45
Ser Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 238
<211> 128
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 238
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Gly Thr Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Ala Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Trp Gly Gly Met Trp Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Gly Arg Gly Arg Met Tyr Arg Gly Ile Gly Asn Ser Leu Ala Gln Pro
100 105 110
Lys Ser Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 239
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 239
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Ala Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
35 40 45
Leu Glu Ala Val Ala Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Thr Leu Ser Ala
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
65 70 75 80
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Trp Pro Tyr Gly Ser Asn Arg Gly Glu
100 105 110
Val Pro Thr Glu Asn Glu Tyr Gly His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 240
<211> 128
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 240
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Gly Thr Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Trp Gly Gly Met Trp Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Gly Arg Gly Arg Met Tyr Arg Gly Ile Gly Asn Ser Leu Ala Gln Pro
100 105 110
Lys Ser Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 241
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 241
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Ala Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu
35 40 45
Arg Glu Phe Val Ala Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Thr Leu Ser Ala
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
65 70 75 80
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Trp Pro Tyr Gly Ser Asn Arg Gly Glu
100 105 110
Val Pro Thr Glu Asn Glu Tyr Gly His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 242
<211> 128
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 242
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Gly Thr Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Trp Gly Gly Met Trp Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Gly Arg Gly Arg Met Tyr Arg Gly Ile Gly Asn Ser Leu Ala Gln Pro
100 105 110
Lys Ser Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 243
<211> 128
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 243
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Gly Thr Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Trp Gly Gly Met Trp Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Gly Arg Gly Arg Met Tyr Arg Gly Ile Gly Asn Ser Leu Ala Gln Pro
100 105 110
Lys Ser Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 244
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 244
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Ala Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu
35 40 45
Arg Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Thr Leu Ser Ala
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
65 70 75 80
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Trp Pro Tyr Gly Ser Asn Arg Gly Glu
100 105 110
Val Pro Thr Glu Asn Glu Tyr Gly His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 245
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 245
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Ala Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Thr Leu Ser Ala
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
65 70 75 80
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Trp Pro Tyr Gly Ser Asn Arg Gly Glu
100 105 110
Val Pro Thr Glu Asn Glu Tyr Gly His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 246
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 246
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Tyr Thr Glu Asn Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp
65 70 75 80
Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu
85 90 95
Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser
100 105 110
Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 247
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 247
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Met
35 40 45
Gly Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Tyr Thr Glu Asn Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp
65 70 75 80
Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu
85 90 95
Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser
100 105 110
Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 248
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 248
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Phe Met
35 40 45
Gly Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Tyr Thr Glu Asn Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp
65 70 75 80
Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu
85 90 95
Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser
100 105 110
Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 249
<211> 137
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 249
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Val Gly Thr Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ser Ile Ser Trp Gly Gly Met Trp Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Tyr Thr Glu Asn Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp
65 70 75 80
Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu
85 90 95
Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Arg Gly Arg Met Tyr Arg
100 105 110
Gly Ile Gly Asn Ser Leu Ala Gln Pro Lys Ser Tyr Gly Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
130 135
<210> 250
<211> 137
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 250
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Val Gly Thr Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Met
35 40 45
Gly Ser Ile Ser Trp Gly Gly Met Trp Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Tyr Thr Glu Asn Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp
65 70 75 80
Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu
85 90 95
Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Arg Gly Arg Met Tyr Arg
100 105 110
Gly Ile Gly Asn Ser Leu Ala Gln Pro Lys Ser Tyr Gly Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
130 135
<210> 251
<211> 137
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 251
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Val Gly Thr Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Phe Met
35 40 45
Gly Ser Ile Ser Trp Gly Gly Met Trp Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Tyr Thr Glu Asn Phe Lys Asp Arg Val Thr Met Thr Arg Asp
65 70 75 80
Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu
85 90 95
Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Arg Gly Arg Met Tyr Arg
100 105 110
Gly Ile Gly Asn Ser Leu Ala Gln Pro Lys Ser Tyr Gly Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
130 135
<210> 252
<211> 141
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 252
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Ala Tyr Ala Val Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
35 40 45
Leu Glu Trp Met Gly Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Thr Leu Ser Ala
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Tyr Thr Glu Asn Phe Lys Asp Arg Val Thr Met
65 70 75 80
Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu
85 90 95
Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ala Val Arg Thr
100 105 110
Trp Pro Tyr Gly Ser Asn Arg Gly Glu Val Pro Thr Glu Asn Glu Tyr
115 120 125
Gly His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 253
<211> 141
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 253
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Ala Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu
35 40 45
Arg Glu Phe Met Gly Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Thr Leu Ser Ala
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Tyr Thr Glu Asn Phe Lys Asp Arg Val Thr Met
65 70 75 80
Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu
85 90 95
Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ala Val Arg Thr
100 105 110
Trp Pro Tyr Gly Ser Asn Arg Gly Glu Val Pro Thr Glu Asn Glu Tyr
115 120 125
Gly His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 254
<211> 141
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 254
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Ala Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Met Gly Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Thr Leu Ser Ala
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Tyr Thr Glu Asn Phe Lys Asp Arg Val Thr Met
65 70 75 80
Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu
85 90 95
Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ala Val Arg Thr
100 105 110
Trp Pro Tyr Gly Ser Asn Arg Gly Glu Val Pro Thr Glu Asn Glu Tyr
115 120 125
Gly His Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 255
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 255
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Arg Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Phe Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr His Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 256
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 256
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 257
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 257
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Val Val Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 258
<211> 128
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 258
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Gly Thr Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Trp Gly Gly Met Trp Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Gly Arg Gly Arg Met Tyr Arg Gly Ile Gly Asn Ser Leu Ala Gln Pro
100 105 110
Lys Ser Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 259
<211> 128
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 259
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Gly Thr Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe His Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Trp Gly Gly Met Trp Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn Ser Arg Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Thr Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Gly Arg Gly Arg Met Tyr Arg Gly Ile Gly Asn Ser Leu Ala Gln Pro
100 105 110
Lys Ser Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 260
<211> 128
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 260
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Val Gly Thr Ile Ser Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Ser Ile Ser Trp Gly Gly Met Trp Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Gly Arg Gly Arg Met Tyr Arg Gly Ile Gly Asn Ser Leu Ala Gln Pro
100 105 110
Lys Ser Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 261
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 261
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Ala Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu
35 40 45
Arg Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Thr Leu Ser Ala
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Trp Pro Tyr Gly Ser Asn Arg Gly Glu
100 105 110
Val Pro Thr Glu Asn Glu Tyr Gly His Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 262
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 262
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Ala Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu
35 40 45
Arg Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Thr Leu Ser Ala
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
65 70 75 80
Thr Leu Tyr Val Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Trp Pro Tyr Gly Ser Asn Arg Gly Glu
100 105 110
Val Pro Thr Glu Asn Glu Tyr Gly His Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 263
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 263
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Ala Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu
35 40 45
Arg Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Thr Leu Ser Ala
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Thr Glu Asp Thr Ala Leu
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Trp Pro Tyr Gly Ser Asn Arg Gly Glu
100 105 110
Val Pro Thr Glu Asn Glu Tyr Gly His Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 264
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 264
Val Gly Thr Ile Ser Asp Tyr Gly Met Gly
1 5 10
<210> 265
<211> 14
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 265
Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile Leu Ser Ala Tyr Ala Val Gly
1 5 10
<210> 266
<211> 17
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 266
Ser Ile Ser Trp Gly Gly Met Trp Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 267
<211> 16
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 267
Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Thr Leu Ser Ala Asp Ser Val Lys Gly
1 5 10 15
<210> 268
<211> 21
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 268
Gly Arg Gly Arg Met Tyr Arg Gly Ile Gly Asn Ser Leu Ala Gln Pro
1 5 10 15
Lys Ser Tyr Gly Tyr
20
<210> 269
<211> 22
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 269
Ala Val Arg Thr Trp Pro Tyr Gly Ser Asn Arg Gly Glu Val Pro Thr
1 5 10 15
Glu Asn Glu Tyr Gly His
20
<210> 270
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 270
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 271
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 271
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 272
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 272
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 273
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 273
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 274
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 274
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 275
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 275
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 276
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 276
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 277
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 277
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Arg Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 278
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 278
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Ser
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 279
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 279
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 280
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 280
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 281
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 281
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Arg Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asp
65 70 75 80
Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys His Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 282
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 282
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Arg Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asp
65 70 75 80
Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg His Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 283
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 283
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Pro Glu Met Gly Ala Thr Ile Asn
20 25 30
Val Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Arg Leu Pro His Asp Asn Asn Ile Asp Tyr Gly Asp Phe Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ile Thr Arg Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Asn Leu Lys Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Val Leu Leu Ser Arg Gln Ile Asn Gly Ala Tyr Val His Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 284
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 284
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Pro Glu Met Gly Ala Thr Ile Asn
20 25 30
Val Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Arg Leu Pro Leu His Asn Asn Ile Asp Tyr Gly Asp Phe Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ile Thr Arg Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Asn Leu Lys Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Val Leu Leu Ser Arg Gln Ile Asn Gly Ala Tyr Val His Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 285
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 285
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Pro Glu Met Gly Ala Thr Ile Asn
20 25 30
Val Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Arg Leu Pro Leu Asp Asn Asn Ile Asp Tyr Gly Asp Phe Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ile Thr Arg Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Asn Leu Lys Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys His
85 90 95
Val Leu Leu Ser Arg Gln Ile Asn Gly Ala Tyr Val His Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 286
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 286
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Pro Glu Met Gly Ala Thr Ile Asn
20 25 30
Val Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Arg Leu Pro Leu Asp Asn Asn Ile Asp Tyr Gly Asp Phe Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ile Thr Arg Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Asn Leu Lys Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Val His Leu Ser Arg Gln Ile Asn Gly Ala Tyr Val His Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 287
<211> 120
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 287
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Pro Glu Met Gly Ala Thr Ile Asn
20 25 30
Val Met Ala Trp Tyr Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gln Arg Glu Leu Val
35 40 45
Ala Arg Leu Pro Leu Asp Asn Asn Ile Asp Tyr Gly Asp Phe Ala Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Ile Thr Arg Asn Thr Val Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Asn Leu Lys Pro Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Asn
85 90 95
Val Leu Leu Ser Arg Gln Ile Asn Gly Ala His Val His Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 288
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 288
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg His Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Asn Ser Lys Asp Asn Ala Lys Asn Arg Met Ser
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 289
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 289
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala His Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Asn Ser Lys Asp Asn Ala Lys Asn Arg Met Ser
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 290
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 290
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr His Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Asn Ser Lys Asp Asn Ala Lys Asn Arg Met Ser
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 291
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 291
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Asn Ser Lys Asp Asn Ala Lys Asn Arg Met Ser
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln His Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 292
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 292
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser His Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu
35 40 45
Arg Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Thr Leu Ser Ala
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Leu Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asp
65 70 75 80
Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Trp Pro Tyr Gly Ser Asn Arg Gly Glu
100 105 110
Val Pro Thr Glu Asn Glu Tyr Gly His Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 293
<211> 132
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 293
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg His Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser
130
<210> 294
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 294
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr His Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 295
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 295
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln His Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 296
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 296
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala His Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr His Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 297
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 297
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr His Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln His Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 298
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 298
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg His Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr His Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 299
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 299
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg His Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln His Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 300
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 300
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala His Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln His Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 301
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 301
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg His His Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr His Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 302
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 302
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg His His Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln His Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 303
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 303
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala His Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr His Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln His Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 304
<211> 126
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 304
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg His Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr His Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln His Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 305
<211> 262
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 305
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
145 150 155 160
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe
165 170 175
Arg Ser Phe Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro
180 185 190
Glu Trp Val Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala
195 200 205
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn
210 215 220
Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val
225 230 235 240
Tyr Tyr Cys Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr
245 250 255
Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 306
<211> 267
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 306
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly
145 150 155 160
Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala
165 170 175
Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala
180 185 190
Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser
195 200 205
Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg
210 215 220
Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro
225 230 235 240
Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg
245 250 255
Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265
<210> 307
<211> 272
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 307
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln
145 150 155 160
Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg
165 170 175
Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe Gly Met Ser
180 185 190
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val Ser Ser Ile
195 200 205
Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg
210 215 220
Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met
225 230 235 240
Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Ile Gly
245 250 255
Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265 270
<210> 308
<211> 277
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 308
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile
20 25 30
Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly
35 40 45
Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr
50 55 60
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn
65 70 75 80
Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val
85 90 95
Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu
100 105 110
Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
145 150 155 160
Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
165 170 175
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg
180 185 190
Ser Phe Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu
195 200 205
Trp Val Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp
210 215 220
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
225 230 235 240
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr
245 250 255
Tyr Cys Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu
260 265 270
Val Thr Val Ser Ser
275
<210> 309
<211> 262
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 309
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
130 135 140
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser
145 150 155 160
Gly Ile Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly
165 170 175
Lys Gly Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile
180 185 190
Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala
195 200 205
Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr
210 215 220
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu
225 230 235 240
Gly Glu Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
245 250 255
Leu Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 310
<211> 267
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 310
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
145 150 155 160
Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe
165 170 175
Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser
180 185 190
Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
195 200 205
Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu
210 215 220
Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg
225 230 235 240
Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr
245 250 255
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265
<210> 311
<211> 272
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 311
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu
130 135 140
Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu
145 150 155 160
Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly Ile Leu Ser Pro Tyr
165 170 175
Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Phe Val
180 185 190
Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr Thr Asp Ser Val Lys
195 200 205
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu
210 215 220
Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
225 230 235 240
Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly Glu Val Pro Gln Glu
245 250 255
Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265 270
<210> 312
<211> 277
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 312
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
130 135 140
Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly
145 150 155 160
Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Thr Phe Ser Gly
165 170 175
Ile Leu Ser Pro Tyr Ala Val Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys
180 185 190
Gly Leu Glu Phe Val Ser Thr Ile Thr Ser Gly Gly Ser Ala Ile Tyr
195 200 205
Thr Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys
210 215 220
Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala
225 230 235 240
Val Tyr Tyr Cys Ala Val Arg Thr Arg Arg Tyr Gly Ser Asn Leu Gly
245 250 255
Glu Val Pro Gln Glu Asn Glu Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
260 265 270
Val Thr Val Ser Ser
275
<210> 313
<211> 256
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 313
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln
130 135 140
Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg
145 150 155 160
Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe Gly Met Ser
165 170 175
Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val Ser Ser Ile
180 185 190
Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg
195 200 205
Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met
210 215 220
Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Ile Gly
225 230 235 240
Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250 255
<210> 314
<211> 261
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 314
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
130 135 140
Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
145 150 155 160
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg
165 170 175
Ser Phe Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu
180 185 190
Trp Val Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp
195 200 205
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
210 215 220
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr
225 230 235 240
Tyr Cys Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu
245 250 255
Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 315
<211> 266
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 315
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
130 135 140
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly
145 150 155 160
Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
165 170 175
Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro
180 185 190
Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp
195 200 205
Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp
210 215 220
Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu
225 230 235 240
Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser
245 250 255
Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265
<210> 316
<211> 270
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 316
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser
100 105 110
Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
130 135 140
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu
145 150 155 160
Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu
165 170 175
Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe Gly Met Ser Trp
180 185 190
Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val Ser Ser Ile Ser
195 200 205
Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe
210 215 220
Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser
225 230 235 240
Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Ile Gly Gly Ser
245 250 255
Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265 270
<210> 317
<211> 256
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 317
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
130 135 140
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser
145 150 155 160
Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu
165 170 175
Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp
180 185 190
Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
195 200 205
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
210 215 220
Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser
225 230 235 240
Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
245 250 255
<210> 318
<211> 261
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 318
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly
130 135 140
Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser
145 150 155 160
Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro
165 170 175
Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp
180 185 190
Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp
195 200 205
Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu
210 215 220
Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr
225 230 235 240
Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
245 250 255
Val Thr Val Ser Ser
260
<210> 319
<211> 266
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 319
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Glu Val Gln Leu
130 135 140
Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu
145 150 155 160
Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp
165 170 175
Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe Val Ala Gly Ile Gly
180 185 190
Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe
195 200 205
Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn
210 215 220
Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Gln
225 230 235 240
Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp Ser Tyr Asp Tyr Trp
245 250 255
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265
<210> 320
<211> 271
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 320
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Ser Phe
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Ser Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Thr Ile Gly Gly Ser Leu Ser Arg Ser Ser Gln Gly Thr Leu Val Thr
100 105 110
Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly
115 120 125
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
130 135 140
Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly
145 150 155 160
Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Arg Ala Phe Ser Asp
165 170 175
Tyr Ala Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Gln Glu Arg Glu Phe
180 185 190
Val Ala Gly Ile Gly Trp Ser Gly Gly Asp Thr Leu Tyr Ala Asp Ser
195 200 205
Val Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu
210 215 220
Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr
225 230 235 240
Cys Ala Ala Arg Gln Gly Gln Tyr Ile Tyr Ser Ser Met Arg Ser Asp
245 250 255
Ser Tyr Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
260 265 270
<210> 321
<211> 9
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 321
Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Pro
1 5
<210> 322
<211> 117
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 322
Leu Glu Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro
1 5 10 15
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser
20 25 30
Arg Phe Gly Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Val Glu
35 40 45
Trp Val Ser Gly Ile Ser Ser Leu Gly Asp Ser Thr Leu Tyr Ala Asp
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Thr Ile Gly Gly Ser Leu Asn Pro Gly Gly Gln Gly Thr Gln
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 323
<211> 7
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 323
Pro Asn Leu Leu Gly Gly Pro
1 5
<210> 324
<211> 6
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 324
His His His His His His
1 5
<210> 325
<211> 16
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 325
Arg Leu Pro Leu Asp Asn Asn Ile Asp Tyr Gly Asp Phe Ala Lys Gly
1 5 10 15
<210> 326
<211> 14
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 326
Asn Val Leu Leu Ser Arg Gln Ile Asn Gly Ala Tyr Val His
1 5 10
<210> 327
<211> 10
<212> Белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Синтетическая конструкция
<400> 327
Glu Met Gly Ala Thr Ile Asn Val Met Ala
1 5 10
<---
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| АНТИТЕЛА, КОТОРЫЕ СВЯЗЫВАЮТ ОПУХОЛЕВУЮ ТКАНЬ, ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ | 2020 |
|
RU2806915C2 |
| МОЛЕКУЛЫ, НАЦЕЛЕННЫЕ НА СИСТЕМУ СЕКРЕЦИИ ТИПА III | 2016 |
|
RU2759949C2 |
| ПОЛИВАЛЕНТНЫЕ И ПОЛИСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ОХ40-СВЯЗЫВАЮЩИЕ СЛИТЫЕ БЕЛКИ | 2017 |
|
RU2773052C2 |
| CD47-АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩАЯ ЕДИНИЦА И ЕЕ ПРИМЕНЕНИЕ | 2018 |
|
RU2780859C2 |
| ХИМЕРНЫЕ АНТИГЕННЫЕ РЕЦЕПТОРЫ, НАЦЕЛЕННЫЕ НА ПОДОБНЫЙ FC-РЕЦЕПТОРУ БЕЛОК 5, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ | 2015 |
|
RU2779747C2 |
| ХИМЕРНЫЕ АНТИГЕННЫЕ РЕЦЕПТОРЫ И СВЯЗЫВАЮЩИЕ АГЕНТЫ, НАЦЕЛЕННЫЕ НА DLL3 | 2020 |
|
RU2822366C2 |
| БЕЛОК, СВЯЗЫВАЮЩИЙСЯ С NKG2D, CD16 И С ОПУХОЛЕСПЕЦИФИЧЕСКИМ АНТИГЕНОМ | 2018 |
|
RU2788531C2 |
| ПОЛИВАЛЕТНЫЕ И ПОЛИСПЕЦИФИЧНЫЕ GITR-СВЯЗЫВАЮЩИЕ СЛИТЫЕ БЕЛКИ | 2016 |
|
RU2753439C2 |
| БЕЛОК, СВЯЗЫВАЮЩИЙСЯ С NKG2D, CD16 И С ОПУХОЛЕСПЕЦИФИЧЕСКИМ АНТИГЕНОМ | 2018 |
|
RU2826991C2 |
| ПОЛИСПЕЦИФИЧЕСКИЕ СВЯЗЫВАЮЩИЕ БЕЛКИ, НАЦЕЛЕННЫЕ НА CAIX, ANO1, МЕЗОТЕЛИН, TROP2, СEA ИЛИ КЛАУДИН-18.2 | 2018 |
|
RU2792671C2 |
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к слитым белкам на основе специфически связывающихся с человеческим компонентом комплемента C5 полипептидов, и может быть использовано в медицине для лечения пациента с компонент комплемента С5-опосредованным расстройством. Предложены слитые белки, которые включают сконструированный полипептид, содержащий VHH домен, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, и сконструированный полипептид, содержащий VHH домен, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, слитые непосредственно, либо через линкер. Изобретение обеспечивает получение слитого белка, включающего сконструированные полипептиды, которые специфически связываются с человеческими компонентом комплемента C5 и сывороточным альбумином, соответственно, без снижения связывания сывороточного альбумина с FcRn или без уменьшения периода полужизни сывороточного альбумина. 13 н. и 9 з.п. ф-лы, 12 ил., 20 табл., 17 пр.
1. Слитый белок для лечения пациента с компонент комплемента С5-опосредованным расстройством, где слитый белок включает сконструированный полипептид, содержащий VHH домен, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, и сконструированный полипептид, содержащий VHH домен, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, где сконструированный полипептид, содержащий VHH домен, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, слит со сконструированным полипептидом, содержащим VHH домен, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, либо непосредственно, либо через пептидный линкер; где домен VHH, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, содержит три определяющие комплементарность области (CDR) со следующими последовательностями:
a) CDR1, содержащая аминокислотную последовательность GRAHSDYAMA (SEQ ID NO: 16);
b) CDR2, содержащая аминокислотную последовательность GIGWSGGDTLYADSVRG (SEQ ID NO: 18); и
c) CDR3, содержащая аминокислотную последовательность AARQGQYIYSSMRSDSYDY (SEQ ID NO: 20);
где домен VHH, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, содержит три CDR со следующими последовательностями:
a) CDR1, содержащая аминокислотную последовательность GRPVSNYA (SEQ ID NO: 38);
b) CDR2, содержащая аминокислотную последовательность INWQKTAT (SEQ ID NO: 48); и
c) CDR3, содержащая аминокислотную последовательность AAVFRVVAPKTQYDYDY (SEQ ID NO: 55);
где пептидный линкер содержит последовательность:
a) GGGGAGGGGAGGGGS (SEQ ID NO: 102); или
b) GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 103);
и где С-концевой остаток полипептида, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, слит либо непосредственно, либо через линкер с N-концевым остатком полипептида, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, или C-концевой остаток полипептида, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, слит либо непосредственно, либо через линкер с N-концевым остатком полипептида, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином.
2. Слитый белок по п. 1, где C-концевой остаток полипептида, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, слит либо непосредственно, либо через линкер с N-концевым остатком полипептида, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5.
3. Слитый белок по п. 1, где C-концевой остаток полипептида, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, слит либо непосредственно, либо через линкер с N-концевым остатком полипептида, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином.
4. Слитый белок для лечения пациента с компонент комплемента С5-опосредованным расстройством, где слитый белок включает сконструированный полипептид, содержащий VHH домен, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, и сконструированный полипептид, содержащий VHH домен, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, где сконструированный полипептид, содержащий VHH домен, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, слит со сконструированным полипептидом, содержащим VHH домен, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, либо непосредственно, либо через пептидный линкер,
где полипептид, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:1-12 и их антигенсвязывающих фрагментов; и полипептид, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:22-34 и их антигенсвязывающих фрагментов;
где пептидный линкер содержит последовательность:
a) GGGGAGGGGAGGGGS (SEQ ID NO: 102); или
b) GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 103);
и где С-концевой остаток полипептида, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, слит либо непосредственно, либо через линкер с N-концевым остатком полипептида, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, или C-концевой остаток полипептида, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, слит либо непосредственно, либо через линкер с N-концевым остатком полипептида, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином.
5. Слитый белок по п. 1, где полипептид, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, а полипептид, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26.
6. Слитый белок по п. 5, дополнительно включающий пептидный линкер, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 103.
7. Слитый белок по п. 5, дополнительно включающий пептидный линкер, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 102.
8. Слитый белок для лечения пациента с компонент комплемента С5-опосредованным расстройством, где слитый белок включает последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 96-101.
9. Слитый белок по п. 8, где слитый белок состоит из полипептида SEQ ID NO: 96.
10. Слитый белок по п. 1, где любой или оба полипептида, которые связываются с человеческим компонентом комплемента C5 или альбумином, связываются pH-зависимым образом.
11. Фармацевтическая композиция для лечения пациента с компонент комплемента С5-опосредованным расстройством, включающая терапевтически эффективное количество слитого белка по любому из пп. 1-10 и фармацевтически приемлемый носитель.
12. Фармацевтическая композиция для лечения пациента с компонент комплемента С5-опосредованным расстройством, включающая терапевтически эффективное количество слитого белка, где слитый белок включает сконструированный полипептид, содержащий VHH домен, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, и сконструированный полипептид, содержащий VHH домен, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, где сконструированный полипептид, содержащий VHH домен, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, слит со сконструированным полипептидом, содержащим VHH домен, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, либо непосредственно, либо через пептидный линкер; где домен VHH, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, содержит три определяющие комплементарность области (CDR) со следующими последовательностями:
a) CDR1, содержащая аминокислотную последовательность GRAHSDYAMA (SEQ ID NO: 16);
b) CDR2, содержащая аминокислотную последовательность GIGWSGGDTLYADSVRG (SEQ ID NO: 18); и
c) CDR3, содержащая аминокислотную последовательность AARQGQYIYSSMRSDSYDY (SEQ ID NO: 20);
где домен VHH, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, содержит три CDR со следующими последовательностями:
a) CDR1, содержащая аминокислотную последовательность GRPVSNYA (SEQ ID NO: 38);
b) CDR2, содержащая аминокислотную последовательность INWQKTAT (SEQ ID NO: 48); и
c) CDR3, содержащая аминокислотную последовательность AAVFRVVAPKTQYDYDY (SEQ ID NO: 55);
где пептидный линкер содержит последовательность:
a) GGGGAGGGGAGGGGS (SEQ ID NO: 102); или
b) GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 103);
и где С-концевой остаток полипептида, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, слит либо непосредственно, либо через линкер с N-концевым остатком полипептида, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, или C-концевой остаток полипептида, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, слит либо непосредственно, либо через линкер с N-концевым остатком полипептида, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином; и
где фармацевтическая композиция дополнительно включает гиалуронидазу и фармацевтически приемлемый носитель.
13. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты для экспрессии слитого белка по любому из пп. 1-10, включающая нуклеотидную последовательность, кодирующую слитый белок по любому из пп. 1-10.
14. Вектор экспрессии, включающий молекулу нуклеиновой кислоты по п. 13.
15. Выделенная клетка-хозяин для экспрессии слитого белка по любому из пп. 1-10, включающая молекулу нуклеиновой кислоты по п. 13.
16. Выделенная клетка-хозяин для экспрессии слитого белка по любому из пп. 1-10, включающая вектор экспрессии по п. 14.
17. Выделенная клетка-хозяин по п. 16, где клетка-хозяин представляет собой клетку млекопитающего или клетку дрожжей.
18. Способ получения слитого белка по любому из пп. 1-10, включающий экспрессию в клетке-хозяине по меньшей мере одной молекулы нуклеиновой кислоты, включающей нуклеотидную последовательность, кодирующую указанный слитый белок.
19. Терапевтический набор для лечения пациента с компонент комплемента С5-опосредованным расстройством, включающий:
(a) контейнер, включающий этикетку; и
(b) композицию, включающую слитый белок по любому из пп. 1-10;
где этикетка указывает, что композиция предназначена для введения пациенту, имеющему, или у которого подозревается, компонент комплемента С5-опосредованное расстройство.
20. Терапевтический набор для лечения пациента с компонент комплемента С5-опосредованным расстройством, включающий:
(a) контейнер, включающий этикетку; и
(b) композицию, включающую слитый белок для лечения пациента с компонент комплемента С5-опосредованным расстройством, где слитый белок включает сконструированный полипептид, содержащий VHH домен, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, и сконструированный полипептид, содержащий VHH домен, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, где сконструированный полипептид, содержащий VHH домен, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, слит со сконструированным полипептидом, содержащим VHH домен, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, либо непосредственно, либо через пептидный линкер; где домен VHH, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, содержит три определяющие комплементарность области (CDR) со следующими последовательностями:
i) CDR1, содержащая аминокислотную последовательность GRAHSDYAMA (SEQ ID NO: 16);
ii) CDR2, содержащая аминокислотную последовательность GIGWSGGDTLYADSVRG (SEQ ID NO: 18); и
iii) CDR3, содержащая аминокислотную последовательность AARQGQYIYSSMRSDSYDY (SEQ ID NO: 20);
где домен VHH, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, содержит три CDR со следующими последовательностями:
i) CDR1, содержащая аминокислотную последовательность GRPVSNYA (SEQ ID NO: 38);
ii) CDR2, содержащая аминокислотную последовательность INWQKTAT (SEQ ID NO: 48); и
iii) CDR3, содержащая аминокислотную последовательность AAVFRVVAPKTQYDYDY (SEQ ID NO: 55);
где пептидный линкер содержит последовательность:
i) GGGGAGGGGAGGGGS (SEQ ID NO: 102); или
ii) GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 103);
и где С-концевой остаток полипептида, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином, слит либо непосредственно, либо через линкер с N-концевым остатком полипептида, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, или C-концевой остаток полипептида, который специфически связывается с человеческим компонентом комплемента C5, слит либо непосредственно, либо через линкер с N-концевым остатком полипептида, который специфически связывается с человеческим сывороточным альбумином; и
(c) гиалуронидазу;
где этикетка указывает, что композиция предназначена для введения пациенту, имеющему, или у которого подозревается, компонент комплемента С5-опосредованное расстройство.
21. Способ лечения пациента, имеющего компонент комплемента C5-опосредованное расстройство, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества слитого белка по любому из пп. 1-10.
22. Способ по п. 21, где компонент комплемента C5-опосредованное расстройство выбрано из группы, состоящей из следующих: ревматоидный артрит; люпус-нефрит; астма; ишемическое-реперфузионное повреждение; атипичный гемолитико-уремический синдром; болезнь плотного осадка; пароксизмальная ночная гемоглобинурия; дегенерация желтого пятна; синдром гемолиза, повышения уровня печеночных ферментов и низкого уровня тромбоцитов (HELLP); синдром Гийена-Барре; синдром CHAPLE; тяжелая миастения; оптиконевромиелит; тромботическая микроангиопатия после трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (post-HSCT-TMA); TMA после трансплантации костного мозга (post-BMT TMA); болезнь Дегоса; болезнь Гоше; гломерулонефрит; тромботическая тромбоцитопеническая пурпура (TTP); спонтанная потеря плода; малоиммунный васкулит; буллезный эпидермолиз; рекуррентная потеря плода; рассеянный склероз (MS); травматическое повреждение головного мозга; и повреждение в результате инфаркта миокарда, сердечно-легочного шунтирования и гемодиализа.
| WO 2013126006 A1, 29.08.2013, WO 2015028558 A1, 05.03.2015, WO 2010151526 А1, 29.12.2010, ROTHER R | |||
| P | |||
| et al., Discovery and development of the complement inhibitor eculizumab for the treatment of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria, NATURE BIOTECHNOLOGY, 2007, v | |||
| Видоизменение пишущей машины для тюркско-арабского шрифта | 1923 |
|
SU25A1 |
| Походная разборная печь для варки пищи и печения хлеба | 1920 |
|
SU11A1 |
