КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ РАКА ПЕЧЕНИ Российский патент 2023 года по МПК A61K35/763 A61K39/395 A61P35/00 C07K16/28 

Родственная заявка

[001] Согласно настоящей заявке испрашивается приоритет в соответствии с предварительной заявкой на выдачу патента США №62/578071, поданной 27 октября 2017 г., которая полностью включена в настоящий документ посредством ссылки.

Область техники, к которой относится настоящее изобретение

[002] Настоящее изобретение относится к области противораковых терапевтических средств. В частности, настоящее изобретение относится к лечению первичного или вторичного рака печени с использованием комбинированной терапии, содержащей пембролизумаб, вариант пембролизумаба и/или его антигенсвязывающий фрагмент и талимоген лагерпарепвек.

Уровень техники изобретения

[003] Первичный рак печени во всем мире представляет собой шестой наиболее часто встречающийся рак (6% всех случаев рака) и вторую по значимости причину смерти от рака (9% всех случаев смерти от рака) (World Cancer Report (2014) World Health Organization. Главы 1.1. и 5.6., ISBN 9283204298). В 2012 году первичный рак печени поразил 782000 человек, а 810500 смертей были вызваны первичным раком печени в 2015 году (GBD 2015: Mortality and Causes of Death Collaborators, Lancet. 388 (10053): 1459-1544). Пятилетняя выживаемость при первичном раке печени в США составляет 18% (Cancer Stat Facts: Liver and Intrahepatic Bile Duct Cancer (URL: seer.cancer.gov/statfacts/html/livibd.html)).

[004] Многие раковые заболевания, обнаруженные в печени, не являются истинными злокачественными опухолями печени, но являются вторичными злокачественными опухолями печени, возникшими в других участках организма, которые распространились на печень (т.е. метастазы). Часто местом происхождения является желудочно-кишечный тракт, поскольку печень находится вблизи многих из этих метаболически активных, хорошо снабжаемых кровью органов вблизи кровеносных сосудов и лимфатических узлов (например, рак поджелудочной железы, рак желудка, рак толстой кишки и карциноидные опухоли, главным образом аппендикса). Вторичный рак печени может также возникать из метастатического рака молочной железы, яичника, легкого, почки и предстательной железы.

[005] В настоящей области техники существует явная потребность в новых способах и композициях для лечения первичного и вторичного рака печени.

Сущность изобретения

[006] Настоящее раскрытие частично основано на открытии того, что комбинированная терапия, включающая в себя пембролизумаб, вариант пембролизумаба и/или его антигенсвязывающий фрагмент и талимоген лагерпарепвек, является применимой для лечения рака, выбранного из группы, состоящей из следующего: гепатоцеллюлярная карцинома, аденокарцинома молочной железы, колоректальная колоректальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная плоскоклеточная карцинома, меланома (включая в себя увеальную меланому), немелкоклеточный рак легкого и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома.

[007] Кроме того, настоящее раскрытие частично основано на открытии того, что комбинированная терапия, включающая в себя пембролизумаб, вариант пембролизумаба и/или его антигенсвязывающий фрагмент и талимоген лагерпарепвек, является применимой при лечении форм рака, таких как первичный и вторичный рак печени.

[008] Согласно одному аспекту предусмотрен способ лечения рака у субъекта, причем указанный способ предусматривает введение указанному субъекту талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента, причем указанный рак выбран из группы, состоящей из следующего: гепатоцеллюлярная карцинома, аденокарцинома молочной железы, колоректальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная плоскоклеточная карцинома, меланома (включая в себя увеальную меланому), немелкоклеточный рак легкого и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома.

[009] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту интратуморально и/или пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят субъекту системно. Согласно другим иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту перед или после введения пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента. Согласно другим иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту перед введением пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента.

[010] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами. Согласно другим иллюстративным вариантам осуществления пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами. Согласно другим иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами, и при этом пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят последовательно и одновременно с одной или более вторичными дозами талимогена лагерпарепвека.

[011] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят интратуморально и при этом пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят системно. Согласно другим иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек и пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят интратуморально.

[012] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления уменьшение размера инъецированной опухоли происходит после введения талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента.

[013] Согласно другому аспекту предусмотрен способ лечения первичного или вторичного рака печени у субъекта, предусматривающий введение талимогена лагерпарепвека субъекту и введение пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента субъекту.

[014] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления первичный рак печени представляет собой первичную гепатоцеллюлярную карциному, и/или вторичный рак печени представляет собой метастаз рака, выбранного из группы, состоящей из следующего: гепатоцеллюлярная карцинома, аденокарцинома молочной железы, колоректальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная плоскоклеточная карцинома, меланома (включая в себя увеальную меланому), немелкоклеточный рак легкого и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома.

[015] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту интратуморально и/или пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят субъекту системно. Согласно другим иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту перед или после введения пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента. Согласно другим иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту перед введением пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента.

[016] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами. Согласно другим иллюстративным вариантам осуществления пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами. Согласно другим иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами и при этом пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят последовательно и одновременно с одной или более вторичными дозами талимогена лагерпарепвека.

[017] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят интратуморально и при этом пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят системно. Согласно другим иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек и пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят интратуморально.

[018] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления уменьшение размера инъецированной опухоли происходит после введения талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента.

[019] Согласно другому аспекту предусмотрен способ лечения рака у субъекта, который плохо отвечает на стандартную системную противораковую терапию, причем указанный способ предусматривает введение указанному субъекту талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента, причем стандартная системная противораковая терапия не включает в себя комбинированную терапию талимогеном лагерпарепвеком / пембролизумабом, и при этом указанный рак выбран из группы, состоящей из следующего: гепатоцеллюлярная карцинома, аденокарцинома молочной железы, колоректальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная плоскоклеточная карцинома, меланома (включая в себя увеальную меланому), немелкоклеточный рак легкого и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома.

[020] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту интратуморально и/или вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят субъекту системно.

[021] Согласно другому аспекту предусмотрен способ лечения первичного или вторичного рака печени у субъекта, который плохо отвечает на стандартную системную противораковую терапию, причем указанный способ предусматривает введение указанному субъекту талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента, причем стандартная системная противораковая терапия не включает в себя комбинированную терапию талимогеном лагерпарепвеком / пембролизумабом.

[022] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления первичный рак печени представляет собой первичную гепатоцеллюлярную карциному, или вторичный рак печени представляет собой метастаз рака, выбранного из группы, состоящей из следующего: гепатоцеллюлярная карцинома, аденокарцинома молочной железы, колоректальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная плоскоклеточная карцинома, меланома (включая в себя увеальную меланому), немелкоклеточный рак легкого и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома.

[023] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту интратуморально и/или вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят субъекту системно.

[024] Согласно другому аспекту предусмотрен способ лечения рака у субъекта, характеризующегося прогрессированием в течение стандартной системной противораковой терапии, причем указанный способ предусматривает введение указанному субъекту талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента, причем стандартная системная противораковая терапия не включает в себя комбинированную терапию талимогеном лагерпарепвеком / пембролизумабом, и при этом указанный рак выбран из группы, состоящей из следующего: гепатоцеллюлярная карцинома, аденокарцинома молочной железы, колоректальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная плоскоклеточная карцинома, меланома (включая в себя увеальную меланому), немелкоклеточный рак легкого и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома.

[025] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту интратуморально и/или пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят субъекту системно.

[026] Согласно другому аспекту предусмотрен способ лечения первичного или вторичного рака печени у субъекта, характеризующегося прогрессированием в течение стандартной системной противораковой терапии, причем указанный способ предусматривает введение указанному субъекту талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента, причем стандартная системная противораковая терапия не включает в себя комбинированную терапию талимогеном лагерпарепвеком / пембролизумабом.

[027] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления первичный рак печени представляет собой первичную гепатоцеллюлярную карциному, или вторичный рак печени представляет собой метастаз рака, выбранного из группы, состоящей из следующего: гепатоцеллюлярная карцинома, аденокарцинома молочной железы, колоректальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная плоскоклеточная карцинома, меланома (включая в себя увеальную меланому), немелкоклеточный рак легкого и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома.

[028] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту интратуморально и/или пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят субъекту системно.

[029] Согласно другому аспекту предусмотрен способ лечения рака у субъекта, который является резистентным к стандартной системной противораковой терапии, причем указанный способ предусматривает введение указанному субъекту талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента, причем стандартная системная противораковая терапия не включает в себя комбинированную терапию талимогеном лагерпарепвеком / пембролизумабом, и при этом указанный рак выбран из группы, состоящей из следующего: гепатоцеллюлярная карцинома, аденокарцинома молочной железы, колоректальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная плоскоклеточная карцинома, меланома (включая в себя увеальную меланому), немелкоклеточный рак легкого и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома.

[030] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту интратуморально и/или пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят субъекту системно.

[031] Согласно другому аспекту предусмотрен способ лечения первичного или вторичного рака печени у субъекта, который является резистентным к стандартной системной противораковой терапии, причем указанный способ предусматривает введение указанному субъекту талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента, причем стандартная системная противораковая терапия не включает в себя комбинированную терапию талимогеном лагерпарепвеком / пембролизумабом.

[032] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления первичный рак печени представляет собой первичную гепатоцеллюлярную карциному, или вторичный рак печени представляет собой метастаз рака, выбранного из группы, состоящей из следующего: гепатоцеллюлярная карцинома, аденокарцинома молочной железы, колоректальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная плоскоклеточная карцинома, меланома (включая в себя увеальную меланому), немелкоклеточный рак легкого и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома.

[033] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту интратуморально и/или пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят субъекту системно.

[034] Согласно другому аспекту предусмотрен способ лечения рака у субъекта, причем указанный способ предусматривает введение указанному субъекту талимогена лагерпарепвека интратуморально в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами, и пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент системно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами.

[035] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления вторичные дозы вводят каждые три недели (Q3W). Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в день 1 недели 1 и вторичную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в день 1 недели 4, в день 1 недели 7 и Q3W после этого. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в день 1 недели 4 и вторичную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в день 1 недели 7 и Q3W после этого.

[036] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в дозе, составляющей 10⁶ бляшкообразующих единиц (БОЕ)/мл, и вторичные дозы талимогена лагерпарепвека вводят в дозе, составляющей 10⁷ или 10⁸ БОЕ/мл.

[037] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальная доза и вторичные дозы составляют вплоть до около 4 мл или около 8 мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления каждая из начальной дозы и/или вторичных доз составляет вплоть до около 4 мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления каждая из начальной дозы и/или вторичных доз составляет вплоть до около 8 мл.

[038] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в дозе, составляющей около 200 мг, и вторичные дозы пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в дозе, составляющей около 200 мг.

[039] Согласно другому аспекту предусмотрен способ лечения первичного или вторичного рака печени у субъекта, причем указанный способ предусматривает введение указанному субъекту талимогена лагерпарепвека интратуморально в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами и пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента системно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами.

[040] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления вторичные дозы вводят каждые три недели (Q3W). Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в день 1 недели 1 и вторичную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в день 1 недели 4, в день 1 недели 7 и Q3W после этого. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в день 1 недели 4 и вторичную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в день 1 недели 7 и Q3W после этого.

[041] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в дозе, составляющей 10⁶ бляшкообразующих единиц (БОЕ)/мл, и вторичные дозы талимогена лагерпарепвека вводят в дозе, составляющей 10⁷ или 10⁸ БОЕ/мл.

[042] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальная доза и вторичные дозы составляют вплоть до около 4 мл или около 8 мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления каждая из начальной дозы и/или вторичных доз составляет вплоть до около 4 мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления каждая из начальной дозы и/или вторичных доз составляет вплоть до около 8 мл.

[043] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в дозе, составляющей около 200 мг, и вторичные дозы пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в дозе, составляющей около 200 мг.

[044] Согласно другому аспекту талимоген лагерпарепвек предусмотрен для применения при лечении рака у субъекта в комбинации с пембролизумабом, вариантом пембролизумаба или его антигенсвязывающим фрагментом, причем указанный рак выбран из группы, состоящей из следующего: гепатоцеллюлярная карцинома, аденокарцинома молочной железы, колоректальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная плоскоклеточная карцинома, меланома (включая в себя увеальную меланому), немелкоклеточный рак легкого и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома.

[045] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту интратуморально. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят субъекту системно. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту перед или после введения пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту перед введением пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента.

[046] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления уменьшение размера инъецированной опухоли происходит после введения талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента.

[047] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами и при этом пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят последовательно и одновременно с одной или более вторичными дозами талимогена лагерпарепвека. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят интратуморально и при этом пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят системно. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек и пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят интратуморально.

[048] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления вторичные дозы вводят Q3W. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в день 1 недели 1 и вторичную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в день 1 недели 4, в день 1 недели 7 и Q3W после этого. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в день 1 недели 4 и вторичную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в день 1 недели 7 и Q3W после этого.

[049] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в дозе, составляющей 10⁶ БОЕ/мл, и вторичные дозы талимогена лагерпарепвека вводят в дозе, составляющей 10⁷ или 10⁸ БОЕ/мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальная доза и вторичные дозы составляют вплоть до около 4 мл или около 8 мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления каждая из начальной дозы и/или вторичных доз составляет вплоть до около 4 мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления каждая из начальной дозы и/или вторичных доз составляет вплоть до около 8 мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в дозе, составляющей около 200 мг, и вторичные дозы пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в дозе, составляющей около 200 мг.

[050] Согласно другому аспекту пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент предусмотрен для применения при лечении рака у субъекта в комбинации с талимогеном лагерпарепвеком, причем указанный рак выбран из группы, состоящей из следующего: гепатоцеллюлярная карцинома, аденокарцинома молочной железы, колоректальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная плоскоклеточная карцинома, меланома (включая в себя увеальную меланому), немелкоклеточный рак легкого и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома.

[051] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту интратуморально. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят субъекту системно. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту перед или после введения пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту перед введением пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента.

[052] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления уменьшение размера инъецированной опухоли происходит после введения талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента.

[053] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами и при этом пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят последовательно и одновременно с одной или более вторичными дозами талимогена лагерпарепвека. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят интратуморально и при этом пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят системно. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек и пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят интратуморально.

[054] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления вторичные дозы вводят Q3W. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в день 1 недели 1 и вторичную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в день 1 недели 4, в день 1 недели 7 и Q3W после этого. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в день 1 недели 4 и вторичную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в день 1 недели 7 и Q3W после этого.

[055] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в дозе, составляющей 10^ БОЕ/мл, и вторичные дозы талимогена лагерпарепвека вводят в дозе, составляющей l(f или 10^ БОЕ/мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальная доза и вторичные дозы составляют вплоть до около 4 мл или около 8 мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления каждая из начальной дозы и/или вторичных доз составляет вплоть до около 4 мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления каждая из начальной дозы и/или вторичных доз составляет вплоть до около 8 мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в дозе, составляющей около 200 мг, и вторичные дозы пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в дозе, составляющей около 200 мг.

[056] Согласно другому аспекту талимоген лагерпарепвек предусмотрен для применения при лечении первичного или вторичного рака печени у субъекта в комбинации с пембролизумабом, вариантом пембролизумаба или его антигенсвязывающим фрагментом.

[057] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления первичный рак печени представляет собой НСС, или вторичный рак печени представляет собой метастаз рака, выбранного из группы, состоящей из следующего: гепатоцеллюлярная карцинома, аденокарцинома молочной железы, колоректальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная плоскоклеточная карцинома, меланома (включая в себя увеальную меланому), немелкоклеточный рак легкого и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома.

[058] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту интратуморально. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят субъекту системно. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту перед или после введения пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту перед введением пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента.

[059] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления уменьшение размера инъецированной опухоли происходит после введения талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента.

[060] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами, и при этом пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят последовательно и одновременно с одной или более вторичными дозами талимогена лагерпарепвека. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят интратуморально и при этом пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят системно. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек и пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят интратуморально.

[061] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления вторичные дозы вводят Q3W. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в день 1 недели 1 и вторичную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в день 1 недели 4, в день 1 недели 7 и Q3W после этого. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в день 1 недели 4 и вторичную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в день 1 недели 7 и Q3W после этого.

[062] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в дозе, составляющей 10⁶ БОЕ/мл, и вторичные дозы талимогена лагерпарепвека вводят в дозе, составляющей 10⁷ или 10⁸ БОЕ/мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальная доза и вторичные дозы составляют вплоть до около 4 мл или около 8 мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления каждая из начальной дозы и/или вторичных доз составляет вплоть до около 4 мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления каждая из начальной дозы и/или вторичных доз составляет вплоть до около 8 мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в дозе, составляющей около 200 мг, и вторичные дозы пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в дозе, составляющей около 200 мг.

[063] Согласно другому аспекту пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент предусмотрен для применения при лечении первичного или вторичного рака печени у субъекта в комбинации с талимогеном лагерпарепвеком.

[064] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления первичный рак печени представляет собой НСС, или вторичный рак печени представляет собой метастаз рака, выбранного из группы, состоящей из следующего: гепатоцеллюлярная карцинома, аденокарцинома молочной железы, колоректальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная плоскоклеточная карцинома, меланома (включая в себя увеальную меланому), немелкоклеточный рак легкого и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома.

[065] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту интратуморально. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят субъекту системно. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту перед или после введения пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят субъекту перед введением пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента.

[066] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления уменьшение размера инъецированной опухоли происходит после введения талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента.

[067] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят последовательно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами, и при этом пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят последовательно и одновременно с одной или более вторичными дозами талимогена лагерпарепвека. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят интратуморально и при этом пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят системно. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек и пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят интратуморально.

[068] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления вторичные дозы вводят Q3W. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в день 1 недели 1 и вторичную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в день 1 недели 4, в день 1 недели 7 и Q3W после этого. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в день 1 недели 4 и вторичную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в день 1 недели 7 и Q3W после этого.

[069] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в дозе, составляющей 10⁶ БОЕ/мл, и вторичные дозы талимогена лагерпарепвека вводят в дозе, составляющей 10⁷ или 10⁸ БОЕ/мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальная доза и вторичные дозы составляют вплоть до около 4 мл или около 8 мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления каждая из начальной дозы и/или вторичных доз составляет вплоть до около 4 мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления каждая из начальной дозы и/или вторичных доз составляет вплоть до около 8 мл. Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления начальную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в дозе, составляющей около 200 мг, и вторичные дозы пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента вводят в дозе, составляющей около 200 мг.

[070] Приведенное выше краткое описание настоящего раскрытия не является ограничивающим, и другие признаки и преимущества раскрытых биомаркеров и способов будут очевидны из следующих графических материалов, подробного описания настоящего раскрытия, примера и формулы изобретения.

Краткое описание графических материалов

[071] На фигуре 1 изображены дизайн исследования и схема лечения для части 1, группы А, показаны когорты монотерапии с помощью талимогена лагерпарепвека и когорты комбинированной терапии с помощью талимогена лагерпарепвека вместе с пембролизумабом. DLT = ограничивающая дозу токсичность; НСС = гепатоцеллюлярная карцинома; МТС = максимально переносимая концентрация; MTV = максимально переносимый объем; БОЕ (PFU) = бляшкообразующая единица; T-VEC = талимоген лагерпарепвек. Первая концентрация дозы талимогена лагерпарепвека всегда составляет 10⁶ БОЕ/мл. ^bКогорта 4 будет открыта только при соблюдении одного из следующих условий: 1) DLT ≥ 33% в когорте 2 или 2) DLT ≥ 33% в когорте 3 и доза части 2 для талимогена лагерпарепвека еще не определена, или 3) DLT ≥ 33% в когорте 3 и концентрация части 2 для талимогена лагерпарепвека определена как равная 10⁷ БОЕ/мл. ^cMTV, определенный по получавшим монотерапию когортам, если таковые имеются, можно использовать в части 2. ^dЕсли как когорты 3 или 4, так и получавшие комбинацию когорты (5 или 6) открыты в одном учреждении для субъектов с опухолевой нагрузкой, которые могут получить 8 мл, включение в когорту 3 или 4 должно быть строго предпочтительным, пока не будет определен MTV в монотерапии. ^eКогорта 1 группы В будет инициирована только после того, как безопасность была установлена в когорте 1 группы А.

[072] На фигуре 2 изображены дизайн исследования и схема лечения для части 1, группы В, показаны когорты монотерапии с помощью талимогена лагерпарепвека и когорты комбинированной терапии с помощью талимогена лагерпарепвека вместе с пембролизумабом. DLT = ограничивающая дозу токсичность; НСС = гепатоцеллюлярная карцинома; МТС = максимально переносимая концентрация; MTV = максимально переносимый объем; БОЕ (PFU) = бляшкообразующая единица; T-VEC = талимоген лагерпарепвек. Первая концентрация дозы талимогена лагерпарепвека всегда составляет 10⁶ БОЕ/мл. ^bКогорта 4 будет открыта только при соблюдении одного из следующих условий: 1) DLT ≥ 33% в когорте 2 или 2) DLT ≥ 33% в когорте 3 и доза части 2 для талимогена лагерпарепвека еще не определена, или 3) DLT ≥ 33% в когорте 3 и концентрация части 2 для талимогена лагерпарепвека определена как равная 10⁷ БОЕ/мл. ^cMTV, определенный по получавшим монотерапию когортам, если таковые имеются, можно использовать в части 2. ^dЕсли как когорты 3 или 4, так и получавшие комбинацию когорты (5 или 6) открыты в одном учреждении для субъектов с опухолевой нагрузкой, которые могут получить 8 мл, включение в когорту 3 или 4 должно быть строго предпочтительным, пока не будет определен MTV в монотерапии. ^Когорта 1 группы В будет инициирована только после того, как безопасность была установлена в когорте 1 группы А.

[073] На фигуре 3 изображены дизайн исследования и схема лечения для части 2 для оценки эффективности комбинированной терапии при семи типах опухолей: первичная гепатоцеллюлярная карцинома (НСС); аденокарцинома молочной железы (ВС) с метастазами в печень; колоректальная аденокарцинома (CRC) с метастазами в печень; гастроэзофагеальный рак (GEC) (аденокарцинома или плоскоклеточная карцинома) с метастазами в печень; меланома с метастазами в печень; немелкоклеточный рак легкого (NSCLC) с метастазами в печень; и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома (RCC) с метастазами в печень. МТС = максимально переносимая концентрация; MTV = максимально переносимый объем; NSCLC = немелкоклеточный рак легкого; RCC = светлоклеточная почечно-клеточная карцинома; T-VEC = талимоген лагерпарепвек.

Подробное описание иллюстративных вариантов осуществления

[074] Чтобы изобретение было более понятным, определенные технические и научные термины конкретно определены ниже. Если специально не определено где-либо еще в настоящем документе, все другие технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют значение, общепринятое для специалиста в настоящей области техники, к которой относится настоящее изобретение.

[075] Используемые в настоящем документе, включая прилагаемую формулу изобретения, формы единственного числа слов включают в себя соответствующие им ссылки на форму множественного числа, если контекст явно не предписывает иное.

[076] «Около» при использовании для модификации численно определенного параметра (например, дозировки пембролизумаба, варианта пембролизумаба и/или его антигенсвязывающего фрагмента или талимогена лагерпарепвека, или продолжительности лечения с помощью пембролизумаба, варианта пембролизумаба и/или его антигенсвязывающего фрагмента или талимогена лагерпарепвека) означает, что параметр может варьироваться на 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9% или 10% выше или ниже указанного числового значения этого параметра.

[077] «Введение» и «лечение», как оно применяется по отношению к животному, человеку, экспериментальному субъекту, клетке, ткани, органу или биологической жидкости, относится к контакту экзогенного фармацевтического, терапевтического, диагностического средства или композиции с животным, человеком, субъектом, клеткой, тканью, органом или биологической жидкостью. Лечение клетки включает в себя контакт реагента с клеткой, а также контакт реагента с жидкостью, где жидкость контактирует с клеткой. Термин «введение» и «лечение» также означает лечение in vitro и ex vivo, например, клетки, реагентом, диагностическим, связывающим соединением или другой клеткой.

[078] Используемый в настоящем документе термин «антитело» относится к любой форме антитела, которая проявляет требуемую биологическую или связывающую активность. Таким образом, он используется в самом широком смысле и конкретно охватывает без ограничения моноклональные антитела (включая в себя полноразмерные моноклональные антитела), поликлональные антитела, мультиспецифические антитела (например, биспецифические антитела), гуманизированные антитела, полностью человеческие антитела, химерные антитела и верблюжьи однодоменные антитела. «Исходные антитела» представляют собой антитела, полученные путем воздействия на иммунную систему антигена перед модификацией антител для предполагаемого использования, такого как гуманизация антитела для применения в качестве терапевтического средства для человека.

[079] Как правило, структурная единица основного антитела содержит тетрамер. Каждый тетрамер включает в себя две идентичные пары полипептидных цепей, причем каждая пара содержит одну «легкую» (около 25 кДа) и одну «тяжелую» цепь (около 50-70 кДа). Аминоконцевая часть каждой цепи включает в себя вариабельную область, составляющую в длину около от 100 до 110 или более аминокислот, в первую очередь ответственную за распознавание антигена. Карбоксиконцевая часть тяжелой цепи может определять константную область, в первую очередь ответственную за эффекторную функцию. Как правило, легкие цепи человека классифицируют как легкие цепи каппа и лямбда. Кроме того, тяжелые цепи человека, как правило, классифицируют как мю, дельта, гамма, альфа или эпсилон и определяют изотип антитела как IgM, IgD, IgG, IgA и IgE соответственно. В пределах легкой и тяжелой цепей вариабельные и константные области соединены областью «J», составляющей около 12 или более аминокислот, причем тяжелая цепь также включает в себя область «D» из еще около 10 аминокислот. См. в целом, Fundamental Immunology Ch. 7 (Paul, W., ed., 2-е изд. Raven Press, N Y. (1989)).

[080] Вариабельные области каждой пары легкая/тяжелая цепь образуют сайт связывания антитела. Таким образом, как правило, интактное антитело содержит два сайта связывания. За исключением бифункциональных или биспецифических антител, два сайта связывания, как правило, являются одинаковыми.

[081] Используемые в настоящем документе термины «вариабельные области» или «V-область» означают сегмент цепей IgG, который является вариабельным по последовательности между различными антителами. Он продолжается до остатка 109 согласно нумерации Kabat в легкой цепи и 113 в тяжелой цепи.

[082] Как правило, вариабельные домены как тяжелой, так и легкой цепей содержат три гипервариабельные области, также называемые определяющими комплементарность областями (CDR), которые расположены в относительно консервативных каркасных областях (FR). CDR, как правило, выровнены по каркасным областям, что позволяет связываться с конкретным эпитопом. Как правило, от N-конца к С-концу вариабельные домены как легкой, так и тяжелой цепей содержат FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 и FR4. Отнесение аминокислот к каждому домену, как правило, соответствует определениям согласно Sequences of Proteins of Immunological Interest, Kabat, et al.; National Institutes of Health, Bethesda, Md.; 5-е изд.; NIH Publ. No. 91-3242 (1991); Kabat (1978) Adv. Prot. Chem. 32:1-75; Kabat, et al., (1977) J. Biol. Chem. 252:6609-6616; Chothia et al., (1987) J Mol. Biol. 196:901-917 или Chothia et al., (1989) Nature 342:878-883.

[083] Используемый в настоящем документе термин «гипервариабельная область» относится к аминокислотным остаткам антитела, которые отвечают за связывание антигена. Гипервариабельная область содержит аминокислотные остатки из CDR (т.е. LCDR1, LCDR2 и LCDR3 в вариабельном домене легкой цепи и HCDR1, HCDR2 и HCDR3 в вариабельном домене тяжелой цепи). См. Kabat et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5-е изд. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (определение областей CDR антитела по последовательности); см. также Chothia and Lesk (1987) J. Mol. Biol. 196: 901-917 (определение областей CDR антитела по структуре).

[084] Используемый в настоящем документе, если не указано иное, термин «фрагмент антитела» или «антигенсвязывающий фрагмент» относится к антигенсвязывающим фрагментам антител, т.е. к фрагментам антител, которые сохраняют способность специфически связываться с антигеном, связанным полноразмерным антителом, например, к фрагментам, которые сохраняют одну или более областей CDR. Примеры связывающих фрагментов антител включают в себя без ограничения фрагменты Fab, Fab', F(ab')2 и Fv; димеры; линейные антитела; молекулы одноцепочечных антител, например sc-Fv; нанотела и мультиспецифические антитела, образованные из фрагментов антител.

[085] Антитело, которое «специфически связывается» с указанным белком-мишенью, представляет собой антитело, которое проявляет преимущественное связывание с этой мишенью по сравнению с другими белками, но эта специфичность не требует абсолютной специфичности связывания. Антитело считается «специфическим» в отношении своей предусмотренной мишени, если его связывание является определяющим для присутствия целевого белка в образце, например, без получения нежелательных результатов, таких как ложноположительные результаты. Антитела или их связывающие фрагменты, применимые в настоящем изобретении, будут связываться с целевым белком с аффинностью, которая по меньшей мере в два раза больше, предпочтительно по меньшей мере в десять раз больше, более предпочтительно по меньшей мере в 20 раз больше и наиболее предпочтительно по меньшей мере в 100 раз больше, чем аффинность по отношению к нецелевым белкам. Согласно тому, как используется в настоящем документе, считается, что антитело специфически связывается с полипептидом, содержащим данную аминокислотную последовательность, например, аминокислотную последовательность зрелой молекулы PD-1 человека или PD-L1 человека, если он связывается с полипептидами, содержащими эту последовательность, но не связывается с белками, в которых эта последовательность отсутствует.

[086] «Химерное антитело» относится к антителу, в котором часть тяжелой и/или легкой цепи является идентичной или гомологичной соответствующим последовательностям в антителе, происходящем из определенного вида (например, человека), или принадлежащем конкретному классу или подклассу антител, в то время как остаток цепи(ей) является идентичным или гомологичным соответствующим последовательностям в антителе, происходящем из другого вида (например, мыши) или принадлежащем к другому классу или подклассу антитела, а также фрагментам таких антител, при условии, что они проявляют требуемую биологическую активность.

[087] «Антитело человека» относится к антителу, которое содержит только последовательности белка иммуноглобулина человека. Антитело человека может содержать мышиные углеводные цепи, если оно продуцируется в организме мыши, в клетке мыши или в гибридоме, полученной из клетки мыши. Аналогично, «антитело мыши» или «антитело крысы» относится к антителу, которое содержит только последовательности иммуноглобулина мыши или крысы соответственно.

[088] «Гуманизированное антитело» относится к формам антител, которые содержат последовательности из не относящихся к человеку антител (например, мышиных), а также антител человека. Такие антитела содержат минимальную последовательность, полученную из не относящегося к человеку иммуноглобулина. В общем, гуманизированное антитело будет содержать по существу все, по меньшей мере один и, как правило, два вариабельных домена, в которых все или по существу все гипервариабельные петли соответствуют таковым у не относящегося к человеку иммуноглобулина, и все или по существу все области FR являются областями FR последовательности иммуноглобулина человека. Гуманизированное антитело необязательно также будет включать в себя по меньшей мере часть константной области иммуноглобулина (Fc), как правило, часть константной области иммуноглобулина человека. Префикс «hum», «hu» или «h» добавляют к обозначениям клонов антител, когда необходимо отличить гуманизированные антитела от исходных антител грызунов. Гуманизированные формы антител грызунов, как правило, содержат те же последовательности CDR исходных антител грызунов, хотя некоторые аминокислотные замены могут быть включены для увеличения аффинности, увеличения стабильности гуманизированного антитела или по другим причинам.

[089] «Биотерапевтическое средство» означает биологическую молекулу, такую как антитело, которая блокирует передачу сигналов лиганда/рецептора любым биологическим путем, который поддерживает сохранение и/или рост опухоли или подавляет противоопухолевый иммунный ответ.

[090] Термины «рак», «раковый» или «злокачественный» относятся или описывают физиологическое состояние у млекопитающих, которое, как правило, характеризуется нерегулируемым ростом клеток. Примерами конкретных форм рака печени, которые реагируют на комбинированную терапию талимогеном лагерпарепвеком / пембролизумабом, являются формы первичного рака печени и формы вторичного рака печени, вызванные метастазированием не первичного рака печени.

[091] Первичные формы рака печени включают в себя без ограничения следующее: гепатоцеллюлярная карцинома (НСС), рак желчных протоков, фиброламеллярная НСС, гемангиосаркома, ангиосаркома и гепатобластома. Согласно конкретному варианту осуществления первичная опухоль печени представляет собой НСС.

[092] Вторичные формы рака печени вызваны метастазированием одного или более типов рака, которые включают в себя без ограничения следующее: гепатоцеллюлярная карцинома, рак молочной железы (например, рак молочной железы, положительный в отношении эндокринных рецепторов (ER+), НЕК2-положительный (HER2+) рак молочной железы, трижды отрицательный рак молочной железы, трижды положительный рак молочной железы и тому подобное), рак толстой кишки, колоректальный рак, рак почки, рак пищевода, рак легкого (например, немелкоклеточный рак легкого, мелкоклеточный рак легкого), меланома (включая в себя увеальную меланому), рак яичника, рак матки, рак поджелудочной железы и рак желудка. Согласно конкретному варианту осуществления вторичная опухоль печени вызвана метастазированием гепатоцеллюлярной карциномы, аденокарциномы молочной железы (ВС), колоректальной аденокарциномы (CRC), гастроэзофагеальной аденокарциномы (GEC), плоскоклеточной карциномы (SCC) GEC, меланомы (включая в себя увеальную меланому), немелкоклеточного рака легкого (NSCLC) или светлоклеточной почечно-клеточной карциномы (RCC).

[093] Используемый в настоящем документе термин «CDR» означает определяющую(ие) комплементарность область(и) в вариабельной области иммуноглобулина, определенную(ые) с использованием системы нумерации Kabat, если не указано иное.

[094] «Химиотерапевтическое средство» представляет собой химическое соединение, применимое для лечения рака. Классы химиотерапевтических средств включают в себя без ограничения следующее: алкилирующие средства, антиметаболиты, ингибиторы киназы, растительные алкалоиды, представляющие собой веретенный яд, цитотоксические/противоопухолевые антибиотики, ингибиторы топоизомеразы, фотосенсибилизаторы, антиэстрогены и селективные модуляторы рецепторов эстрогена (SERM), антипрогестероны, супрессоры рецепторов эстрогена (ERD), антагонисты рецепторов эстрогена, агонисты релизинг-фактора лютеинизирующего гормона, антиандрогены, ингибиторы ароматазы, ингибиторы EGFR, ингибиторы VEGF, антисмысловые олигонуклеотиды, которые ингибируют экспрессию генов, участвующих в патологической пролиферации клеток или опухолевом росте. Химиотерапевтические средства, применимые в способах лечения согласно настоящему изобретению, включают в себя цитостатические и/или цитотоксические средства.

[095] Используемый в настоящем документе термин «Chothia» означает систему нумерации антител, описанную в Al-Lazikani et al., JMB 273:927-948 (1997), которая включена в настоящий документ посредством ссылки.

[096] Термин «консервативно модифицированные варианты» или «консервативная замена» относится к заменам аминокислот в белке другими аминокислотами, характеризующимися сходными характеристиками (например, заряд, размер боковой цепи, гидрофобность/гидрофильность, конформация и жесткость основной цепи и т.д.) таким образом, что изменения часто могут осуществляться без изменения (или существенного изменения) биологической активности или другого требуемого свойства белка, такого как аффинность и/или специфичность в отношении антигена. Специалистам в настоящей области техники понятно, что, как правило, единичные аминокислотные замены в несущественных областях полипептида существенно не изменяют биологическую активность (см., например, Watson et al. (1987), Molecular Biology of the Gene, Benjamin/Cummings Pub. Co., p. 224 (4-е изд.)). Кроме того, замены структурно или функционально сходных аминокислот с меньшей вероятностью нарушают биологическую активность.

[097] «Содержащий» или варианты, такие как «содержат», «содержит» или «состоит из», используют во всем настоящем описании и формуле изобретения во всеобъемлющем смысле, т.е. для указания наличия заявленных признаков, но не для исключения присутствия или добавления дополнительных признаков, которые могут существенно улучшить работу или применимость любого из вариантов осуществления настоящего изобретения, если контекст не требует иного из-за ясной терминологии или необходимого подразумеваемого положения.

[098] «Состоит по существу из» и варианты, такие как «состоят по существу из» или «состоящий по существу из», используемые во всем настоящем описании и формуле изобретения, указывают на включение любых перечисленных элементов или группы элементов и необязательное включение других элементов, аналогичных или отличающихся от перечисленных элементов, которые существенно не изменяют основные или новые свойства указанной схемы введения доз, способа или композиции. В качестве неограничивающего примера, если показатель генной сигнатуры определен как суммарный показатель экспрессии РНК для набора генов, который состоит из указанного перечня генов, специалисту в настоящей области техники будет понятно, что этот показатель генной сигнатуры может включать в себя уровень экспрессии РНК, определяемый для одного или более дополнительных генов, предпочтительно не более трех дополнительных генов, если такое включение не оказывает существенного влияния на способность прогнозирования.

[099] Используемый в настоящем документе термин «каркасная область» или «FR» означает вариабельные области иммуноглобулина за исключением областей CDR.

[0100] «Гомология» относится к сходству последовательностей между двумя полипептидными последовательностями, когда они оптимально выровнены. Когда положение в обеих из двух сравниваемых последовательностей занято одной и той же мономерной субъединицей аминокислоты, например, если положение в CDR легкой цепи двух разных Ab занято аланином, то эти два Ab являются гомологичными в этом положении. Процентное отношение гомологии представляет собой количество гомологичных положений, общих для двух последовательностей, деленное на общее количество сравниваемых положений × 100. Например, если 8 из 10 положений в двух последовательностях совпадают или являются гомологичными, когда последовательности оптимально выровнены, то эти две последовательности являются на 80% гомологичными. Как правило, сравнение проводят, когда две последовательности выровнены для получения максимального процентного отношения гомологии. Например, сравнение можно выполнить с помощью алгоритма BLAST, в котором параметры алгоритма выбирают так, чтобы обеспечить наибольшее совпадение между соответствующими последовательностями по всей длине соответствующих эталонных последовательностей.

[0101] Следующие ссылки относятся к алгоритмам BLAST, часто используемым для анализа последовательностей: алгоритмы BLAST: Altschul, S.F., et al., (1990) J. Mol. Biol. 215:403-410; Gish, W., et al., (1993) Nature Genet. 3:266-272; Madden, T. L., et al., (1996) Meth. Enzymol. 266:131-141; Altschul, S. F., et al., (1997) Nucleic Acids Res. 25:3389-3402; Zhang, J., et al., (1997) Genome Res. 7:649-656; Wootton, J.C., et al., (1993) Comput. Chem. 17:149-163; Hancock, J.M. et al., (1994) Comput. Appl. Biosci. 10:67-70; Системы оценки выравнивания в баллах: Dayhoff, М.О., et al., "A model of evolutionary change in proteins." в Atlas of Protein Sequence and Structure, (1978) vol. 5, suppl. 3. M.O. Dayhoff (ed.), pp. 345-352, Natl. Biomed. Res. Found., Washington, DC; Schwartz, R.M., et al., "Matrices for detecting distant relationships." в Atlas of Protein Sequence and Structure, (1978) vol. 5, suppl. 3. M.O. Dayhoff (ed), pp. 353-358, Natl. Biomed. Res. Found., Washington, D.C.; Altschul, S.F., (1991) J. Mol. Biol. 219:555-565; States, D.J., et al., (1991) Methods 3:66-70; Henikoff, S., et al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:10915-10919; Altschul, S.F., et al., (1993) J. Mol. Evol. 36:290-300; Статистический анализ выравнивания: Karlin, S., et al., (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:2264-2268; Karlin, S., et al., (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:5873-5877; Dembo, A., et al., (1994) Ann. Prob. 22:2022-2039; и Altschul, S.F. "Evaluating the statistical significance of multiple distinct local alignments." в Theoretical and Computational Methods in Genome Research (S. Suhai, ed), (1997) pp. 1-14, Plenum, N.Y.

[0102] «Выделенное антитело» и «выделенный фрагмент антитела» относится к состоянию очистки и в таком контексте означает, что указанная молекула по существу не содержит других биологических молекул, таких как нуклеиновые кислоты, белки, липиды, углеводы или другой материал, такой как клеточный дебрис и среды для выращивания. Как правило, термин «выделенный» не предназначен для обозначения полного отсутствия такого материала или отсутствия воды, буферов или солей, если они не присутствуют в количествах, которые по существу мешают экспериментальному или терапевтическому применению связывающего соединения, как описано в настоящем документе.

[0103] Используемый в настоящем документе термин «Kabat» означает систему выравнивания и нумерации иммуноглобулинов, впервые разработанную Elvin A. Kabat ((1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5-е изд. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md).

[0104] Используемый в настоящем документе термин «моноклональное антитело», или «mAb», или «Mab» относится к популяции по существу гомогенных антител, т.е. молекулы антитела, составляющие эту популяцию, идентичны по аминокислотной последовательности, за исключением возможных встречающихся в природе мутаций, которые могут присутствовать в незначительных количествах. Напротив, препараты обычных (поликлональных) антител, как правило, включают в себя множество различных антител с разными аминокислотными последовательностями в своих вариабельных доменах, особенно в своих CDR, которые часто являются специфическими в отношении разных эпитопов. Модификатор «моноклональный» указывает на характер антитела, получаемого из по существу гомогенной популяции антител, и его не следует истолковывать как требующее получения антитела каким-либо конкретным способом. Например, моноклональные антитела, используемые в соответствии с настоящим изобретением, можно получить гибридомным способом, впервые описанным Kohler et al. (1975) Nature 256: 495, или можно получить с помощью способов рекомбинантной ДНК (см., например, патент США №4816567). «Моноклональные антитела» также можно выделить из фаговых библиотек антител с использованием методик, описанных, например, в Clackson et al. (1991) Nature 352: 624-628 и Marks et al. (1991) J. Mol. Biol. 222: 581-597. См. также Presta (2005) J. Allergy Clin. Immunol. 116: 731.

[0105] «Интерферон гамма» и «IFNy» (также называемый иммунным интерфероном или интерфероном II типа) относится к плейотропному цитокину, участвующему в регуляции почти всех фаз иммунных и воспалительных реакций, включая в себя активацию, рост и дифференцировку Т-клеток, В-клеток, макрофагов, NK-клеток и других типов клеток, таких как эндотелиальные клетки и фибробласты. IFNγ усиливает экспрессию МНС на антигенпрезентирующих клетках, а также играет важную роль в активации лимфоцитов для усиления противоопухолевых эффектов.

[0106] IFNγ может способствовать сдерживанию прогрессирования и роста опухоли путем увеличения презентации опухолевого антигена опухолеспецифическим Т-клеткам и увеличения восприимчивости к цитотоксичности NK. Помимо стимулирования иммунного ответа на опухоль, IFN-γ также может индуцировать экспрессию факторов, подавляющих опухоль.

[0107] Используемый в настоящем документе термин «генетически модифицированный онколитический вирус» относится к онколитическому вирусу, который был модифицирован по сравнению с версией вируса дикого типа, как правило, для удаления и/или вставки одного или более генов. Предпочтительным генетически модифицированным онколитическим вирусом согласно настоящему изобретению является талимоген лагерпарепвек, также известный как FMLYGIC^® (INN = талимоген лагерпарепвек), генетически сконструированный вирус герпеса, который коммерчески доступен от Amgen Inc. (Thousand Oaks, CA). Талимоген лагерпарепвек описан, например, в международной патентной публикации WO 2014036412, полностью включенной в настоящий документ посредством ссылки для всех целей.

[0108] Талимоген лагерпарепвек, HSV-1 (штамм JS1) ICP34.5-/ICP47-/hGM-CSF (ранее известный как OncoVex^GM-CSF), представляет собой онколитическую иммунотерапию, вводимую интратуморально, включающую в себя иммунноусиленный HSV-1, который селективно реплицируется при солидных опухолях. (Lui et al., Gene Therapy, 10: 292-303, 2003; патент США №7223593 и патент США №7537924.) HSV-1 был получен из штамма JS1, депонированного в европейской коллекции клеточных культур (ЕСААС) под регистрационным номером 01010209. У талимогена лагерпарепвека вирусные гены HSV-1, кодирующие ICP34.5, были функционально удалены. Функциональная делеция ICP34.5, которая действует как фактор вирулентности во время инфекции HSV, ограничивает репликацию в неделящихся клетках и делает вирус непатогенным. Кроме того, в талимогене лагерпарепвеке функционально удален вирусный ген HSV-1, кодирующий ICP47 (который блокирует презентацию вирусного антигена молекулам основного комплекса гистосовместимости класса I и II). Функциональная делеция ICP47 также приводит к более ранней экспрессии US 11, гена, который способствует росту вируса в опухолевых клетках без снижения селективности опухоли. Наконец, кодирующая последовательность GM-CSF человека, цитокина, участвующего в стимуляции иммунных ответов, была вставлена в вирусный геном талимогена лагерпарепвека. Вставка гена, кодирующего GM-CSF человека, такова, что она заменяет почти весь ген ICP34.5, гарантируя, что любое потенциальное событие рекомбинации между талимогеном лагерпарепвеком и вирусом дикого типа может привести только к деактивированному, непатогенному вирусу и не может привести к генерации вируса дикого типа, несущего ген GM-CSF человека. Ген тимидинкиназы (ТК) HSV остается интактным в талимогене лагерпарепвеке, что делает вирус чувствительным к антивирусным средствам, таким как ацикловир. Таким образом, ацикловир можно использовать для блокирования репликации талимогена лагерпарепвека, если это необходимо.

[0109] В предшествующей фазе 3 клинического испытания интратуморальная инъекция талимогена лагерпарепвека в метастазы меланомы улучшила частоту долговременного ответа по сравнению с подкожным GM-CSF у пациентов с прогрессирующей меланомой (Andtbacka et al. (2015). Talimogene Laherparepvec Improves Durable Response Rate in Patients With Advanced Melanoma. J Clin Oncol 33, 2780-2788). Многообещающая противоопухолевая активность была также продемонстрирована, когда талимоген лагерпарепвек вводили вместе с ингибитором контрольных точек иммунного ответа ипилимумабом, который блокирует белок 4, ассоциированный с цитотоксическими Т-лимфоцитами (CTLA-4) (Chesney, J., Collichio, F., Andtbacka, R.H., Puzanov, I., Glaspy, J.A., Milhem, M., Hamid, O., Cranmer, L., Saenger, Y., Ross, M., et al. (2016). Interim safety and efficacy of a randomized (1:1), open-label phase 2 study of talimogene laherparepvec (T) and ipilimumab (I) vs I alone in unresected, stage IIIB- IV melanoma. Ann Oncol 27 (6), 379-400; Puzanov, I., Milhem, M.M., Minor, D., Hamid, O., Li, A., Chen, L., Chastain, M., Gorski, K.S., Anderson, A., Chou, J., et al. (2016). Talimogene Laherparepvec in Combination With Ipilimumab in Previously Untreated, Unresectable Stage IIIB-IV Melanoma. J Clin Oncol 34, 2619-2626).

[0110] Талимоген лагерпарепвек (FMLYGIC®) был одобрен в качестве монотерапевтического средства для лечения метастатической меланомы в США, Евросоюзе и Австралии в 2015 году. В OPTiM - многоцентровом клиническом исследовании фазы 3, в которое были включены пациенты с метастатической меланомой, которая не могла быть хирургически удалена, пациенты, которые получали талимоген лагерпарепвек, значительно чаще испытывали длительный ответ по сравнению с пациентами, получавшими терапию сравнения, GM-CSF. (Andtbacka RHI, et al., J. Clin. Oncol., 33: 2780-2788 (2015)).

[0111] Кроме того, безопасность HSV с функционально удаленным ICP34.5 была показана в многочисленных клинических исследованиях (MacKie et al, Lancet 357: 525-526, 2001; Markert et al, Gene Ther 7: 867-874, 2000; Rampling et al, Gene Ther 7:859-866, 2000; Sundaresan et al, J. Virol 74: 3822-3841, 2000; Hunter et al, J Virol Aug; 73(8): 6319-6326, 1999).

[0112] Талимоген лагерпарепвек производит прямой онколитический эффект посредством репликации вируса в опухоли и индукции противоопухолевого иммунного ответа, усиленного локальной экспрессией GM-CSF. Предполагаемые клинические эффекты включают в себя без ограничения разрушение инъецированных опухолей; уничтожение локальных, локально-региональных и отдаленных неинъецированных опухолей; снижение развития новых метастазов; снижение скорости общего прогрессирования; и пролонгированную общую выживаемость.

[0113] Талимоген лагерпарепвек был протестирован на эффективность в различных моделях опухолей на мышах in virto (клеточная линия) и in vivo, и было показано, что он уничтожает опухоли или существенно ингибирует их рост в дозах, сравнимых с дозами, используемыми в клинических исследованиях. Неклиническая оценка также подтвердила, что GM-CSF усиливает генерируемый иммунный ответ, усиливая реакции как инъецированных, так и неинъецированных опухолей, и что повышенные поверхностные уровни молекул МНС класса I возникают в результате делеции ICP47. Талимоген лагерпарепвек вводили нормальным мышам и мышам с опухолями для оценки его безопасности. В целом, вирус хорошо переносится, и дозы вплоть до 1×10⁸ БОЕ/доза не дают никаких признаков опасения в отношении безопасности. (См., например, Liu et al., Gene Ther 10: 292-303, 2003).

[0114] Клинические исследования проводили или проводят при нескольких прогрессирующих типах опухолей (прогрессирующие солидные опухоли, меланома, плоскоклеточный рак головы и шеи и рак поджелудочной железы) с более чем 400 субъектами, которых лечили с помощью талимогена лагерпарепвека (см., например, Hu et al., Clin Can Res 12: 6737-6747, 2006; Harrington et al., J Clin Oncol. 27(15a): аннотация 6018, 2009; Kaufman et al., Ann Surgic Oncol. 17: 718-730, 2010; Kaufman and Bines, Future Oncol. 6(6): 941-949, 2010).

[0115] Термин «комбинированная терапия талимогеном лагерпарепвеком / пембролизумабом» относится к применению как талимогена лагерпарепвека, так и пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента для лечения рака, например первичного рака печени и/или вторичного рака печени. Введение талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента (т.е. комбинированная терапия талимогеном лагерпарепвеком / пембролизумабом) может происходить одновременно (т.е. в одном и том же лекарственном средстве), параллельно (т.е. в отдельных лекарственных средствах, вводимых в одно и то же время в любом порядке) или последовательно в любом порядке, как описано далее в настоящем документе.

[0116] «Олигонуклеотид» относится к нуклеиновой кислоте, которая, как правило, составляет от 5 до 100 смежных оснований в длину, и чаще всего 10-50, 10-40, 10-30, 10-25, 10-20, 15-50, 15-40, 15-30, 15-25, 15-20, 20-50, 20-40, 20-30 или 20-25 смежных оснований в длину.

[0117] «Пациент» или «субъект» относится к любому отдельному субъекту, для которого требуется терапия или который участвует в клиническом испытании, эпидемиологическом исследовании или используется в качестве контроля, включая в себя людей, не являющихся людьми приматов, ветеринарных пациентов - млекопитающих, таких как крупный рогатый скот, лошади, собаки, кошки и тому подобное, и животных для исследований, таких как не являющиеся человеком приматы, крысы, мыши, собаки, кролики и тому подобное

[0118] Пембролизумаб представляет собой гуманизированное моноклональное антитело, которое связывается с PD-1 и блокирует его. Пембролизумаб работает за счет повышения способности иммунной системы организма выявлять и бороться с опухолевыми клетками, блокируя взаимодействие между PD-1 и его лигандами, PD-L1 и PD-L2, тем самым активируя Т-лимфоциты, которые могут поражать как опухолевые клетки, так и здоровые клетки.

[0119] Известно, что с помощью монотерапии пембролизумабом лечат меланому, немелкоклеточный рак легкого и плоскоклеточный рак головы и шеи у пораженных индивидуумов, характеризующихся более высокой плотностью базовой инфильтрации CD8+ Т-клеток, генной сигнатурой IFNγ и экспрессией PD-L1, чем уровни, обнаруженные у не отвечающих на терапию индивидуумов.

[0120] Используемый в настоящем документе термин «пембролизумаб» относится к коммерчески доступному моноклональному антителу под панентованным названием KEYTRUDA® (Merck Sharp & Dohme Corp., Whitehouse Station, NJ), описанному в международной патентной публикации WO 2016196173 и патентах США №№8354509 и 8900587, которые полностью включены в настоящий документ посредством ссылки для всех целей, а также их вариантам и антигенсвязывающим фрагментам. Пембролизумаб был одобрен FDA США для лечения определенных пациентов с меланомой, немелкоклеточным раком легкого, плоскоклеточным раком головы и шеи, классической лимфомой Ходжкина, переходно-клеточной карциномой, раком с высокой микросателлитной нестабильностью, раком шейки матки, первичной медиастинальной В-клеточной лимфомой и раком желудка. Пембролизумаб может характеризоваться одной или любой комбинацией домена тяжелой цепи, домена легкой цепи, вариабельного домена тяжелой цепи, вариабельного домена легкой цепи, определяющих комплементарность последовательностей тяжелой цепи и определяющих комплементарность последовательностей легкой цепи, как описано ниже.

[0121] Пембролизумаб может содержать последовательность тяжелой цепи, представленную как (SEQ ID NO: 1), и последовательность легкой цепи, представленную как (SEQ ID NO: 2).

[0122] Пембролизумаб может содержать последовательность вариабельного (VH) домена тяжелой цепи, представленную как (SEQ ID NO: 3), и вариабельный (VL) домен легкой цепи, представленный как (SEQ ID NO: 4).

[0123] Пембролизумаб может содержать следующие определяющие комплементарность области тяжелой цепи (HCDR): NYYMY (HCDR1, SEQ ID NO: 5); GINPSNGGTNFN (HCDR2, SEQ ID NO: 6) и RDYRFDMGFDY (HCDR3, SEQ ID NO: 7)

[0124] Пембролизумаб может содержать следующие определяющие комплементарность области легкой цепи (LCDR): RASKGVSTSGYSYLH (LCDR1, SEQ ID NO: 8); LASYLES (LCDR2, SEQ ID NO: 9) и QHSRDLPLT (LCDR3, SEQ ID NO: 10).

[0125] Согласно определенным вариантам осуществления предусмотрен пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие CDR тяжелой цепи согласно SEQ ID NO: 5, 6 и 7 и CDR легкой цепи согласно SEQ ID NO: 8, 9 и 10.

[0126] Согласно другим вариантам осуществления предусмотрен пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие последовательности CDR тяжелой цепи и легкой цепи из пары последовательностей VH/VL согласно SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4.

[0127] Согласно другим предпочтительным вариантам осуществления предусмотрен пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 3 или ее вариант, и/или вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 4 или ее вариант. Согласно другим вариантам осуществления вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность по меньшей мере с 80% гомологией или идентичностью последовательности (например, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99%) по отношению к SEQ ID NO: 3, и/или вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность по меньшей мере с 80% гомологией или идентичностью последовательности (например, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99%) по отношению к SEQ ID NO: 4.

[0128] Используемый в настоящем документе «вариант последовательности вариабельной области тяжелой цепи» представляет собой последовательность, которая является идентичной эталонной последовательности, за исключением того, что она содержит вплоть до 17 консервативных аминокислотных замен в каркасной области (т.е. за пределами CDR), и предпочтительно содержит менее десяти, девяти, восьми, семи, шести или пяти консервативных аминокислотных замен в каркасной области. Используемый в настоящем документе «вариант последовательности вариабельной области легкой цепи» представляет собой последовательность, которая является идентичной эталонной последовательности, за исключением того, что она содержит вплоть до пяти консервативных аминокислотных замен в каркасной области (т.е. за пределами CDR), и предпочтительно содержит менее четырех, трех или двух консервативных аминокислотных замен в каркасной области.

[0129] Согласно другим вариантам осуществления предусмотрен пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие тяжелую цепь, содержащую SEQ ID NO: 1, или ее вариант и/или легкую цепь, содержащую SEQ ID NO: 2 или ее вариант. Согласно другим вариантам осуществления вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность по меньшей мере с 80% гомологией или идентичностью последовательности (например, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99%) по отношению к SEQ ID NO: 1 и/или легкую цепь, содержащую последовательность по меньшей мере с 80% гомологией или идентичностью последовательности (например, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99%) по отношению к SEQ ID NO: 2.

[0130] Используемый в настоящем документе «вариант пембролизумаба» относится к моноклональному антителу, которое содержит последовательности тяжелой цепи и легкой цепи, которые являются идентичными последовательностям пембролизумаба, за исключением того, что оно содержит вплоть до пяти консервативных аминокислотных замен в каркасной области (т.е. за пределами CDR), и предпочтительно содержит менее четырех, трех или двух консервативных аминокислотных замен в каркасной области, и содержит вплоть до 17 консервативных аминокислотных замен в каркасной области (т.е. за пределами CDR), и предпочтительно содержит менее десяти, девяти, восьми, семи, шести или пяти консервативных аминокислотных замен в каркасной области, и предпочтительно содержит менее четырех, трех или двух консервативных аминокислотных замен в каркасной области. Иными словами, пембролизумаб и вариант пембролизумаба содержат идентичные последовательности CDR, но отличаются друг от друга из-за наличия консервативной аминокислотной замены в не более чем трех или шести других положениях в их полноразмерных последовательностях легкой и тяжелой цепей, соответственно. Вариант пембролизумаба по существу такой же или лучше, чем пембролизумаб, в отношении следующих свойств: аффинность связывания с PD-1 и нейтрализующий эффект in vivo.

[0131] Согласно определенным вариантам осуществления предусмотрены биологические аналоги пембролизумаба. Согласно определенным вариантам осуществления термин «биоподобный» используют таким образом, который согласуется с рабочим определением, опубликованным Управлением по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных препаратов США, которое определяет биоподобный продукт как продукт, «очень похожий» на эталонный продукт (несмотря на незначительные различия в клинически неактивных компонентах). На практике не может быть никаких клинически значимых различий между эталонным продуктом и биоподобным продуктом с точки зрения безопасности, чистоты и эффективности (Закон о здравоохранении (PHS) §262). Согласно определенным вариантам осуществления проводят двойное слепое сравнительное фармакокинетическое (РК) перекрестное исследование в однократной дозе для сравнения пембролизумаба с кандидатным биоподобным антителом для определения сопоставимой биодоступности. Согласно другим вариантам осуществления определение «биоподобный» согласуется с определением, используемым регулирующим органом за пределами США.

[0132] Используемый в настоящем документе термин «эталонный продукт» используют для обозначения коммерчески доступного пембролизумаба.

[0133] Используемый в настоящем документе термин «критерии ответа RECIST 1.1» означает определения, изложенные в Eisenhauer et al., Е.А. et al., Eur. J Cancer 45: 228-247 (2009) для целевых поражений или нецелевых поражений, в зависимости от ситуации, в зависимости от контекста, в котором измеряют ответ.

[0134] «Образец», когда он относится к опухоли или любому другому биологическому материалу, указанному в настоящем документе, означает образец, который был удален из организма субъекта.

[0135] Термин «устойчивый ответ» означает устойчивый терапевтический эффект после прекращения лечения с помощью терапевтического средства или комбинированной терапии, как описано в настоящем документе. Согласно некоторым вариантам осуществления устойчивый ответ характеризуется продолжительностью, которая является по меньшей мере такой же, как продолжительность лечения или по меньшей мере в 1,5, 2,0, 2,5 или 3 раза больше, чем продолжительность лечения.

[0136] «Стандартная системная противораковая терапия» относится к принятым с медицинской точки зрения диагностическим и лечебным процессам, которым клиницист следует в отношении конкретного рака у конкретного пациента, которые могут включать в себя один или более видов биологической терапии (например, виды иммунотерапии) и/или один или более видов цитотоксической химиотерапии, которые могут быть уже известны специалисту в настоящей области техники. Используемый в настоящем документе термин «стандартная системная противораковая терапия» не включает в себя комбинированную терапию талимогеном лагерпарепвеком / пембролизумабом.

[0137] «Срез ткани» относится к одной части или участку образца ткани, например, к тонкому срезу ткани, вырезанному из образца нормальной ткани или опухоли.

[0138] Используемый в настоящем документе термин «лечить» или «лечение» первичного или вторичного рака печени означает введение пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента и талимогена лагерпарепвека субъекту, у которого диагностирован первичный или вторичный рак печени, для достижения при по меньшей мере одного положительного терапевтического эффекта, такого как, например, снижение количества раковых клеток, уменьшение размера опухоли, снижение скорости инфильтрации раковых клеток в периферические органы или снижение скорости метастазирования или роста опухоли.

[0139] Положительные терапевтические эффекты при раке можно измерить рядом способов (см., W.A. Weber, J. Null. Med. 50:1S-10S (2009); Eisenhauer et al., ранее). Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления ответ на пембролизумаб, вариант пембролизумаба и/или его антигенсвязывающий фрагмент и/или талимоген лагерпарепвек оценивают с использованием критериев RECIST 1.1. Согласно некоторым вариантам осуществления лечение, достигаемое терапевтически эффективным количеством, представляет собой любое из частичного ответа (PR), полного ответа (CR), выживаемости без прогрессирования (PFS), выживаемости без заболевания (DFS), объективного ответа (OR) или общей выживаемости (OS). Описанная в настоящем документе схема введения доз терапии, которая является эффективной для лечения пациента с первичным или вторичным раком печени, может варьироваться в зависимости от таких факторов, как состояние заболевания, возраст и масса тела пациента, а также от способности терапии вызывать противораковый ответ у субъекта. Хотя вариант осуществления способа лечения, лекарственных средств и применений согласно настоящему изобретению может не быть эффективным в достижении положительного терапевтического эффекта у каждого субъекта, он должен являться таковым у статистически значимого числа субъектов, что определяется любым статистическим тестом, известным в настоящей области техники, таким как t-критерий Стьюдента, критерий хи-квадрат, U-критерий по Манну и Уитни, критерий Краскела-Уоллиса (Н-критерий), критерий Джонкхиера-Терпстра и критерий Уилкоксона.

[0140] «Опухоль», как это термин применяется к субъекту, у которого диагностирован или который предположительно характеризуется наличием первичного или вторичного рака печени, относится к злокачественному или потенциально злокачественному новообразованию или массе ткани любого размера. Солидная опухоль представляет собой аномальный рост или массу ткани, которая, как правило, не содержит кист или жидких областей. Различные типы солидных опухолей названы по типу клеток, которые их формируют. Примерами солидных опухолей являются саркомы, карциномы и лимфомы. Лейкозы (формы рака крови), как правило, не образуют солидных опухолей (National Cancer Institute, Dictionary of Cancer Terms).

[0141] «Опухолевая нагрузка», также называемая «опухолевой массой», относится к общему количеству опухолевого материала, распределенного по всему организму. Опухолевая нагрузка относится к общему количеству раковых клеток или к общему размеру опухоли(ей) в организме, включая в себя лимфатические узлы и костный мозг. Опухолевую нагрузку можно определить различными способами, известными в настоящей области техники, такими как, например, измерение размеров опухоли(ей) при удалении из организма субъекта, например, с использованием штангенциркуля, или в организме с использованием методов визуализации, например, УЗИ, сканирование костей, компьютерная томография (КТ) или магнитно-резонансная томография (МРТ).

[0142] Термин «размер опухоли» относится к общему размеру опухоли, который можно измерить как длину и ширину опухоли. Размер опухоли можно определить различными способами, известными в настоящей области техники, такими как, например, путем измерения размеров опухоли(ей) после удаления из организма субъекта, например, с использованием штангенциркуля, или в организме с использованием методов визуализации, например, сканирование кости, УЗИ, компьютерная томография или МРТ.

Способы, применения и лекарственные средства

[0143] Согласно одному аспекту настоящее изобретение относится к способу лечения рака у индивидуума, предусматривающему введение индивидууму комбинированной терапии, которая содержит пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент и талимоген лагерпарепвек.

[0144] Комбинированная терапия также может содержать одно или более дополнительных терапевтических средств. Дополнительное терапевтическое средство может представлять собой, например, химиотерапевтическое средство, биотерапевтическое средство, иммуногенное средство (например, аттенуированные раковые клетки, опухолевые антигены, антигенпрезентирующие клетки, такие как дендритные клетки, в которые ввели опухолевые антигены или нуклеиновые кислоты, иммуностимулирующие цитокины (например, IL-2, IFN-2, GM-CSF) и клетки, трансфицированные генами, кодирующими иммунные стимулирующие цитокины, такие как без ограничения GM-CSF. Конкретная дозировка и схема введения доз дополнительного терапевтического средства могут дополнительно варьироваться, и оптимальную дозу, схему введения доз и способ введения будут определять на основе конкретного терапевтического средства, которое используют.

[0145] Примеры химиотерапевтических средств включают в себя следующее: алкилирующие средства, такие как тиотепа и циклосфосфамид; алкилсульфонаты, такие как бусульфан, импросульфан и пипосульфан; азиридины, такие как бензодопа, карбоквон, метуредопа и уредопа; этиленимины и метиламеламины, включая в себя алтретамин, триэтиленмеламин, триэтиленфосфорамид, триэтилентиофосфорамид и триметилоломеламин; ацетогенины (особенно буллатацин и буллатацинон); камптотецин (включая в себя синтетический аналог топотекан); бриостатин; каллистатин; СС-1065 (включая в себя его синтетические аналоги адозелезин, карзелезин и бизелезин); криптофицины (в частности криптофицин 1 и криптофицин 8); доластатин; дуокармицин (включая в себя синтетические аналоги KW-2189 и СВ1-ТМ1); элеутеробин; панкратистатин; саркодиктиин; спонгистатин; азотистые иприты, такие как хлорамбуцил, хлорнафазин, холофосфамид, эстрамустин, ифосфамид, мехлорэтамин, гидрохлорид оксида мехлорэтамина, мелфалан, новэмбихин, фенестерин, преднимустин, трофосфамид, урамустин; нитрозомочевины, такие как кармустин, хлорозотоцин, фотемустин, ломустин, нимустин, ранимустин; антибиотики, такие как энедииновые антибиотики (например, калихеамицин, в частности калихеамицин гаммаП и калихеамицин омега ll, см., например, Agnew, Chem Intl. Ed. Engl., 33: 183-186 (1994); динемицин, включая в себя динемицин А; бифосфонаты, такие как клодронат; эсперамицин; а также хромофор неокарциностатина и родственные хромофоры хромопротеиновых энедииновых антибиотиков), аклациномизины, актиномицин, аутрамицин, азасерин, блеомицины, кактиномицин, карабицин, каминомицин, карцинофилин, хромомицины, дактиномицин, даунорубицин, деторубицин, 6-диазо-5-оксо-L-норлейцин, доксорубицин (включая в себя морфолинодоксорубицин, цианоморфолинодоксорубицин, 2-пирролинодоксорубицин и дезоксидоксорубицин), эпирубицин, эзорубицин, идарубицин, марцелломицин, митомицины, такие как митомицин С, микофеноловая кислота, ногаламицин, оливомицины, пепломицин, потфиромицин, пуромицин, квеламицин, родорубицин, стрептонигрин, стрептозоцин, туберцидин, убенимекс, зиностатин, зорубицин; антиметаболиты, такие как метотрексат и 5-фторурацил (5-FU); аналоги фолиевой кислоты, такие как деноптерин, метотрексат, птероптерин, триметрексат; аналоги пурина, такие как флударабин, 6-меркаптопурин, тиамиприн, тиогуанин; аналоги пиримидина, такие как анцитабин, азацитидин, 6-азауридин, кармофур, цитарабин, дидезоксиуридин, доксифлуридин, эноцитабин, флоксуридин; андрогены, такие как калустерон, пропионат дромостанолона, эпитиостанол, мепитиостан, тестолактон; средства, подавляющие функции надпочечников, такие как аминоглютетимид, митотан, трилостан; пополнитель фолиевой кислоты, такой как фролиновая кислота; ацеглатон; гликозид альдофосфамида; аминолевулиновая кислота; энилурацил; амсакрин; бестрабуцил; бисантрен; эдатраксат; дефофамин; демеколцин; диазиквон; элформитин; ацетат эллиптиния; эпотилон; этоглуцид; нитрат галлия; гидроксимочевина; лентинан; лонидамин; майтанзиноиды, такие как майтанзин и ансамитоцины; митогуазон; митоксантрон; мопидамол; нитракрин; пентостатин; фенамет; пирарубицин; лозоксантрон; подофиллиновая кислота; 2-этилгидразид; прокарбазин; разоксан; ризоксин; сизофуран; спирогерманий; тенуазоновая кислота; триазиквон; 2,2',2''-трихлортриэтиламин; трихотецены (в частности токсин Т-2, верракурин А, роридин А и ангуидин); уретан; виндезин; дакарбазин; манномустин; митобронитол; митолактол; пипоброман; гацитозин; арабинозид («Ara-С»); циклофосфамид; тиотепа; таксоиды, например, паклитаксел и доксетаксел; хлорамбуцил; гемцитабин; 6-тиогуанин; меркаптопурин; метотрексат; аналоги платины, такие как цисплатин и карбоплатин; винбластин; платина; этопозид (VP-16); ифосфамид; митоксантрон; винкристин; винорелбин; новантрон; тенипозид; эдатрексат; дауномицин; аминоптерин; кселода; ибандронат; СРТ-11; ингибитор топоизомеразы RFS 2000; дифторметилорнитин (DMFO); ретиноиды, такие как ретиноевая кислота; капецитабин; и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из вышеуказанных средств. Кроме того, предусмотрены противогормональные средства, которые действуют, регулируя или ингибируя действие гормонов на опухоли, такие как антиэстрогены и селективные модуляторы рецепторов эстрогена (SERM), включая в себя, например, тамоксифен, ралоксифен, дролоксифен, 4-гидрокситамоксифен, триоксифен, кеоксифен, LYI 17018, онапристон и торемифен (Fareston); ингибиторы ароматазы, которые ингибируют фермент ароматазу, которая регулирует продукцию эстрогена в надпочечниках, такие как, например, 4(5)-имидазолы, аминоглутетимид, ацетат мегестрола, эксеместан, форместан, фадрозол, ворозол, летрозол и анастрозол; и антиандрогены, такие как флутамид, нилутамид, бикалутамид, лейпролид и гозерелин; и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из вышеуказанных средств.

[0146] Каждое терапевтическое средство в комбинированной терапии согласно настоящему изобретению можно вводить либо отдельно, либо в лекарственном средстве (которое в настоящем документе также называется фармацевтическая композиция), которое содержит терапевтическое средство и один или более фармацевтически приемлемых носителей, вспомогательных веществ и разбавителей, согласно стандартной фармацевтической практике.

[0147] Каждое терапевтическое средство в комбинированной терапии согласно настоящему изобретению можно вводить одновременно (т.е. в одном и том же лекарственном средстве), параллельно (т.е. в отдельных лекарственных средствах, вводимых один за другим в любом порядке) или последовательно в любом порядке. Последовательное введение является особенно применимым, когда терапевтические средства в комбинированной терапии находятся в разных лекарственных формах (одно средство представляет собой таблетку или капсулу, а другое средство представляет собой стерильную жидкость) и/или их вводят по разным схемам введения доз, например химиотерапевтическое средство, которое вводят по меньшей мере ежедневно, и биотерапевтическое средство, которое вводят реже, например, один раз в неделю, один раз каждые две недели или один раз каждые три недели, и/или вводят в разные части тела, например, одно терапевтическое средство вводят интратуморально и одно терапевтическое средство вводят системно.

[0148] Согласно конкретным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят до введения пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента. Согласно другим вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят после введения пембролизумаба, варианта пембролизумаба или его антигенсвязывающего фрагмента. Согласно другим вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят параллельно с пембролизумабом, вариантом пембролизумаба или его антигенсвязывающим фрагментом.

[0149] Согласно некоторым вариантам осуществления по меньшей мере одно из терапевтических средств в комбинированной терапии вводят с использованием той же схемы введения (дозы, частоты и продолжительности лечения), которую, как правило, используют, когда средство используют в качестве монотерапии для лечения того же рака. Согласно другим вариантам осуществления пациент получает меньшее общее количество по меньшей мере одного из терапевтических средств в комбинированной терапии, чем когда средство используют в качестве монотерапии, например, меньшие дозы, менее частые дозы и/или более короткая продолжительность лечения.

[0150] Согласно определенным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят интратуморально. Согласно определенным вариантам осуществления пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент вводят парентерально.

[0151] Комбинированную терапию согласно настоящему изобретению можно использовать перед или после операции для удаления опухоли и можно использовать перед, во время или после лучевой терапии.

[0152] Согласно некоторым вариантам осуществления комбинированную терапию согласно настоящему изобретению вводят пациенту, который ранее не получал лечение биотерапевтическим или химиотерапевтическим средством, т.е. является интактным в отношении лечения рака. Согласно другим вариантам осуществления комбинированную терапию вводят пациенту, которому не удалось достичь устойчивого ответа после предшествующей терапии (например, после неудачной или неэффективной терапии с помощью системной противораковой терапии, которая не является комбинированной терапией талимогеном лагерпарепвеком / пембролизумабом), т.е. получавшему противораковую терапию.

[0153] Комбинированную терапию согласно настоящему изобретению, как правило, используют для лечения опухоли, которая является достаточно большой, чтобы ее можно было обнаружить путем пальпации или методами визуализации, хорошо известными в настоящей области техники, такими как МРТ, УЗИ или КАТ (компьютерная аксиальная томография)-сканирование.

[0154] Выбор схемы введения доз (также называемой в настоящем документ схемой лечения) для комбинированной терапии согласно настоящему изобретению зависит от нескольких факторов, включая в себя скорость циркуляции средства в сыворотке или ткани, уровень симптомов, иммуногенность средства и доступность целевых клеток, тканей или органов у человека, которого лечат. Предпочтительно схема введения доз максимизирует количество каждого терапевтического средства, доставляемого пациенту, в соответствии с приемлемым уровнем побочных эффектов. Соответственно, количество дозы и частота введения каждого биотерапевтического и химиотерапевтического средства в комбинации частично зависят от конкретного терапевтического средства, тяжести рака, подлежащего лечению, и характеристик пациента. Руководства по выбору подходящих доз антител, цитокинов и малых молекул являются доступными. См., например, Wawrzynczak (1996) Antibody Therapy, Bios Scientific Pub. Ltd, Oxfordshire, UK; Kresina (ed.) (1991) Monoclonal Antibodies, Cytokines and Arthritis, Marcel Dekker, New York, NY; Bach (ed.) (1993) Monoclonal Antibodies and Peptide Therapy in Autoimmune Diseases, Marcel Dekker, New York, NY; Baert et al. (2003) New Engl. J. Med. 348:601-608; Milgrom et al. (1999) New Engl. J. Med. 341: 1966-1973; Slamon et al. (2001) New Engl. J. Med. 344:783-792; Beniaminovitz et al. (2000) New Engl. J. Med. 342:613-619; Ghosh et al. (2003) New Engl. J. Med. 348:24-32; Lipsky et al. (2000) New Engl. J. Med. 343: 1594-1602; Physicians' Desk Reference 2003 (Physicians' Desk Reference, 57-е изд.); Medical Economics Company; ISBN: 1563634457; 57-е изд. (ноябрь 2002). Определение подходящей схемы введения доз может быть сделано клиницистом, например, с использованием параметров или факторов, которые, как известно или предполагается в настоящей области техники, воздействуют на лечение или прогнозируется, что влияют на лечение, и будет зависеть, например, от истории болезни пациента (например, предыдущей терапии), типа и стадии рака, подлежащего лечению, и биомаркеров ответа на одно или более терапевтических средств в комбинированной терапии. Оптимальную дозу для пембролизумаба в сочетании с талимогеном лагерпарепвеком можно определить путем эскалации дозы или деэскалации дозы одного или обоих из этих средств.

[0155] Настоящее изобретение также относится к лекарственному средству, которое содержит пембролизумаб, вариант пембролизумаба и/или его антигенсвязывающий фрагмент, как описано выше, и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество для применения в комбинации с талимогеном лагерпарепвеком для лечения первичной гепатоцеллюлярной карциномы и/или вторичного рака печени, такого как метастаз рака, выбранного из группы, состоящей из следующего: гепатоцеллюлярная карцинома, аденокарцинома молочной железы, колоректальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная плоскоклеточная карцинома, меланома (включая в себя увеальную меланому), немелкоклеточный рак легкого и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома.

[0156] Согласно некоторым вариантам осуществления лекарственное средство, содержащее пембролизумаб, вариант пембролизумаба и/или его антигенсвязывающий фрагмент, может быть предусмотрено в виде жидкой композиции или получено путем разведения лиофилизированного порошка стерильной водой для инъекций перед применением. В международной патентной публикации WO 2012/135408 описано получение жидких и лиофилизированных лекарственных средств, содержащих пембролизумаб, которые подходят для использования согласно настоящему изобретению. Согласно некоторым вариантам осуществления лекарственное средство, содержащее пембролизумаб, предусмотрено в стеклянном флаконе, который содержит около 100 мг пембролизумаба в 4 мл раствора. Каждый 1 мл раствора содержит 25 мг пембролизумаба и составлен в следующем: L-гистидин (1,55 мг), полисорбат 80 (0,2 мг), сахароза (70 мг) и вода для инъекций, USP. Раствор требует разбавления для в/в инфузии.

[0157] Биотерапевтические средства в комбинированной терапии согласно настоящему изобретению можно вводить путем непрерывной инфузии или с помощью доз с интервалами, составляющими, например, ежедневно, через день, три раза в неделю или один раз в неделю, один раз каждые две недели, один раз каждые три недели, один раз каждый месяц, один раз в два месяца и т.д. Общая недельная доза, как правило, составляет по меньшей мере 0,05 мкг/кг, 0,2 мкг/кг, 0,5 мкг/кг, 1 мкг/кг, 10 мкг/кг, 100 мкг/кг, 0,2 мг/кг, 1,0 мг/кг, 2,0 мг/кг, 10 мг/кг, 25 мг/кг, 50 мг/кг массы тела или больше. См., например, Yang et al. (2003) New Engl. J. Med. 349:427-434; Herold et al. (2002) New Engl. J. Med. 346: 1692-1698; Liu et al. (1999) J. Neurol. Neurosurg. Psych. 67:451-456; Portielji et al. (20003) Cancer Immunol. Immunother. 52: 133-144.

[0158] Согласно определенным вариантам осуществления, в которых используют пембролизумаб, вариант пембролизумаба и/или его антигенсвязывающий фрагмент, схема введения доз будет предусматривать введение пембролизумаба, варианта пембролизумаба и/или его антигенсвязывающего фрагмента в дозе, составляющей 1, 2, 3, 5 или 10 мг/кг, с интервалами, составляющими около 14 дней (± 2 дня) или около 21 дня (± 2 дня) или около 30 дней (± 2 дня) на протяжении всего курса лечения. Согласно предпочтительному варианту осуществления пембролизумаб, вариант пембролизумаба или его антигенсвязывающий фрагмент используют в дозе, составляющей 200 мг (фиксированная) каждые 3 недели.

[0159] Согласно другим вариантам осуществления, в которых используют пембролизумаб, вариант пембролизумаба и/или его антигенсвязывающий фрагмент в комбинированной терапии, схема введения доз будет предусматривать введение пембролизумаба, варианта пембролизумаба и/или его антигенсвязывающего фрагмента в дозе, составляющей от около 0,005 мг/кг до около 10 мг/кг с эскалацией дозы у одного и того же пациента. Согласно другим вариантам осуществления с эскалацией дозы интервал между дозами будет постепенно сокращаться, например, около 30 дней (± 3 дня) между первой и второй дозой, около 21 дня (± 3 дня) между второй и третьей дозами. Согласно определенным вариантам осуществления интервал между дозами будет составлять около 21 день (± 3 дня) для доз, следующих за второй дозой.

[0160] Согласно определенным вариантам осуществления субъекту будут вводить парентеральную дозу, например, внутривенную (в/в) инфузию, лекарственного средства, содержащего любое из пембролизумаба, варианта пембролизумаба и/или его антигенсвязывающего фрагмента.

[0161] Согласно предпочтительному варианту осуществления настоящего изобретения пембролизумаб, вариант пембролизумаба и/или его антигенсвязывающий фрагмент вводят в жидком лекарственном средстве в дозе, выбранной из группы, состоящей из 1 мг/кг каждые две недели (Q2W) или каждые 14 дней (Q14D), 2 мг/кг Q2W или Q14D, 3 мг/кг Q2W или Q14D, 5 мг/кг Q2W или Q14D, 10 мг Q2W или Q14D, 1 мг/кг каждые три недели (Q3W) или каждые 21 день (Q21D), 2 мг/кг Q3W или Q21D, 3 мг/кг Q3W или Q21D, 5 мг/кг Q3W или Q21D, 10 мг Q3W или Q21D, и представляющие собой постоянную дозу эквиваленты любой из этих доз, т.е. такие как 200 мг Q3W или Q21D.

[0162] Согласно некоторым вариантам осуществления пембролизумаб, вариант пембролизумаба и/или его антигенсвязывающий фрагмент предусмотрен в дозировке, составляющей около 10 мг, около 20 мг, около 30 мг, около 40 мг, около 50 мг, около 60 мг, около 70 мг, около 80 мг, около 90 мг, около 100 мг, около 110 мг, около 120 мг, около 130 мг, около 140 мг, около 150 мг, около 160 мг, около 170 мг, около 180 мг, около 190 мг, около 200 мг, около 210 мг, около 220 мг, около 230 мг, около 240 мг, около 250 мг, около 260 мг, около 270 мг, около 280 мг, около 290 мг, около 300 мг, около 310 мг, около 320 мг, около 330 мг, около 340 мг, около 350 мг, около 360 мг, около 370 мг, около 380 мг, около 390 мг или около 400 мг.

[0163] Согласно определенным иллюстративным вариантам осуществления пембролизумаб, вариант пембролизумаба и/или его антигенсвязывающий фрагмент предусмотрен в дозировке, составляющей около 200 мг.Согласно другим иллюстративным вариантам осуществления пембролизумаб, вариант пембролизумаба и/или его антигенсвязывающий фрагмент предусмотрен в виде жидкого лекарственного средства, которое содержит 25 мг/мл пембролизумаба, 7% (масс./об.) сахарозы, 0,02% (масс/об.) полисорбата 80 в 10 мМ гистидиновом буфере с рН 5,5.

[0164] Согласно некоторым вариантам осуществления выбранную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба и/или его антигенсвязывающего фрагмента вводят с помощью в/в инфузии. Согласно одному варианту осуществления выбранную дозу пембролизумаба, варианта пембролизумаба и/или его антигенсвязывающего фрагмент вводят с помощью в/в инфузии в течение периода времени, составляющего 25-40 минут или около 30 минут.

[0165] Настоящее изобретение также относится к лекарственному средству, которое содержит талимоген лагерпарепвек и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, для применения в комбинации с пембролизумабом для лечения следующего: первичная гепатоцеллюлярная карцинома и/или вторичный рак печени, такой как метастаз рака, выбранного из группы, состоящей из следующего: гепатоцеллюлярная карцинома, аденокарцинома молочной железы, колоректальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная аденокарцинома, гастроэзофагеальная плоскоклеточная карцинома, меланома (включая в себя увеальную меланому), немелкоклеточный рак легкого и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома. Талимоген лагерпарепвек можно суспендировать в физиологическом буфере для интратуморальной инъекции.

[0166] Согласно определенным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек предусмотрен в концентрации, составляющей около 10³ бляшкообразующих единиц/мл (БОЕ/мл), около 10⁴ БОЕ/мл, около 10⁵ БОЕ/мл, около 10⁶ БОЕ/мл, около 10⁷ БОЕ/мл, около 10⁸ БОЕ/мл, около 10⁹ БОЕ/мл или около 10¹⁰ БОЕ/мл. Согласно конкретным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек предусмотрен в концентрации, составляющей около 10⁶ БОЕ/мл, около 10⁷ БОЕ/мл или около 10⁸ БОЕ/мл.

[0167] Согласно определенным вариантам осуществления талимоген лагерпарепвек вводят с помощью интратуморальной инъекции в инъецированные опухоли в дозе, составляющей вплоть до около 4,0 мл, около 5,0 мл, около 6,0 мл, около 7,0 мл или около 8 мл 10⁶ БОЕ/мл в день 1 недели 1, с последующей дозой, составляющей вплоть до около 4,0 мл, около 5,0 мл, около 6,0 мл, около 7,0 мл или около 8 мл 10⁷ или 10⁸ БОЕ/мл в день 1 недель 4 и 7, и каждые 3 недели (± 3 дня) после этого. Рекомендуемый объем талимогена лагерпарепвека для введения в виде инъекции в опухоль(и) зависит от размера опухоли(ей) и будет очевидным для специалиста в настоящей области техники на основании раскрытия, представленного в настоящем документе, с учетом знаний в настоящей области техники.

[0168] Все целесообразно инъецируемые поражения следует подвергать инъекции с максимальным объемом дозировки, доступным в индивидуальном случае введения дозы. В каждый день лечения рекомендуется следующая приоритетность инъекций: любая новая опухоль для инъекций, появившаяся после последней инъекции; по размеру опухоли, начиная с самой большой опухоли; любая(ые) ранее неинъецируемая(ые) опухоль(и), которая(ые) сейчас подвергается(ются) инъекции. Композиции могут содержать одно или более веществ, выбранных из группы, состоящей из буфера, антиоксиданта, такого как аскорбиновая кислота, полипептид с низкой молекулярной массой (например, такой как те, которые содержат менее 10 аминокислот), белок, аминокислота, углевод такие как глюкоза, сахароза или декстрины, хелатирующее средство, такое как EDTA, глутатион, стабилизатор и вспомогательное вещество. Нейтральный забуференный физиологический раствор или физиологический раствор, смешанный со специфическим сывороточным альбумином, являются примерами подходящих разбавителей. В соответствии с соответствующими отраслевыми стандартами также можно добавить консерванты, такие как бензиловый спирт. Композиция может быть составлена в виде лиофилизата с использованием подходящих растворов вспомогательного вещества (например, сахарозы) в качестве разбавителей. Подходящие компоненты являются нетоксичными для реципиентов в используемых дозировках и концентрациях.

[0169] Согласно некоторым вариантам осуществления пациента выбирают для лечения с помощью комбинированной терапии согласно настоящему изобретению, если пациент: (1) характеризуется наличием гистологически или цитологически подтвержденной ВС, CRC, GEC (аденокарцинома или SCC), меланомы (включая в себя увеальную меланому), NSCLC или RCC с метастазами в печень; (2) получил по меньшей мере одну стандартную системную противораковую терапию для лечения своего местно-распространенного или метастатического заболевания; и (3) характеризуется наличием измеримых опухолей печени, которые подходят для инъекций.

[0170] Согласно другим вариантам осуществления пациента выбирают для лечения с помощью комбинированной терапии согласно настоящему изобретению, если пациент: (1) характеризуется наличием НСС с известным прогрессированием заболевания; и (2) характеризуется наличием измеримых опухолей печени, которые подходят для инъекций.

[0171] Описанные в настоящем документе лекарственные средства могут быть предоставлены в виде набора, который содержит первый контейнер и второй контейнер и вкладыш в упаковку. Первый контейнер содержит по меньшей мере одну дозу лекарственного средства, содержащего пембролизумаб, вариант пембролизумаба и/или его антигенсвязывающий фрагмент, а второй контейнер содержит по меньшей мере одну дозу талимогена лагерпарепвека. Набор может необязательно содержать вкладыш в упаковку или этикетку, которая включает в себя инструкции по лечению пациента от рака с использованием лекарственных средств. Первый и второй контейнеры могут быть представлены в одинаковых или разных формах (например, флаконы, шприцы и бутылки) и/или могут быть изготовлены их одинаковых или разных материалов (например, пластик или стекло). Набор может дополнительно содержать другие материалы, которые могут являться применимыми для введения лекарственных средств, такие как разбавители, фильтры, пакеты и системы для внутривенного вливания, иглы и шприцы. Согласно некоторым предпочтительным вариантам осуществления набора в инструкциях указано, что лекарственные средства предназначены для применения при лечении пациента с первичным или вторичным раком печени.

Фармацевтические композиции

[0172] Настоящее изобретение к применению вышеописанных средств для профилактического и/или терапевтического лечения, как описано ниже. Соответственно, пембролизумаб, вариант пембролизумаба и/или его антигенсвязывающий фрагмент и/или талимоген лагерпарепвек согласно настоящему изобретению можно включить в фармацевтические композиции, подходящие для введения. Такие композиции, как правило, содержат пембролизумаб, вариант пембролизумаба и/или его антигенсвязывающий фрагмент или талимоген лагерпарепвек и фармацевтически приемлемый носитель. Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин «фармацевтически приемлемый носитель» обозначает любые и все растворители, дисперсионные среды, оболочки, антибактериальные и противогрибковые средства, изотонические и задерживающие абсорбцию средства и тому подобное, совместимые с фармацевтическим введением. Использование таких сред и средств для фармацевтически активных веществ хорошо известно в настоящей области техники. За исключением случаев, когда какая-либо общепринятая несущая среда или средство несовместимы с активным соединением, предусмотрено их применение в композициях. Дополнительные активные соединения также могут быть включены в композиции.

[0173] Фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению составлена так, чтобы она была совместима с предполагаемым путем введения. Примеры путей введения включают в себя парентеральное, например, внутривенное, внутрикожное, подкожное, внутрибрюшинное, внутримышечное, трансдермальное (местное) и трансмукозальное введение. Растворы или суспензии, используемые для парентерального, внутрикожного или подкожного применения, могут включать в себя следующие компоненты: стерильный разбавитель, такой как вода для инъекций, физиологический раствор, жирные масла, полиэтиленгликоли, глицерин, пропиленгликоль или другие синтетические растворители; антибактериальные средства, такие как бензиловый спирт или метилпарабены; антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота или бисульфит натрия; хелатирующие средства, такие как этилендиаминтетрауксусная кислота; буферы, такие как ацетаты, цитраты или фосфаты, и средства для регулирования тоничности, такие как хлорид натрия или декстроза. рН можно регулировать кислотами или основаниями, такими как соляная кислота или гидроксид натрия. Парентеральный препарат может быть заключен в ампулы, одноразовые шприцы или флаконы с множественными дозами, сделанные из стекла или пластика.

[0174] Фармацевтические композиции, подходящие для инъекционного применения, включают в себя стерильные водные растворы (если они растворимы в воде) или дисперсии и стерильные порошки для немедленного получения стерильных инъекционных растворов или дисперсии. Для внутривенного, IS, ICV и/или IT введения подходящие носители включают в себя физиологический солевой раствор, бактериостатическую воду, Cremophor ELTM (BASF, Parsippany, N.J.) или физиологический раствор с фосфатным буфером (PBS). Во всех случаях композиция должна быть стерильной и должна быть жидкой до такой степени, чтобы ее можно было легко вводить в шприц. Она должна являться стабильной в условиях производства и хранения и должна быть защищена от загрязняющего действия микроорганизмов, таких как бактерии и грибы. Носителем может являться растворитель или дисперсионная среда, содержащая, например, воду, этанол, многоатомный спирт (например, глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль и тому подобное) и их подходящие смеси. Надлежащая текучесть может поддерживаться, например, путем использования оболочки, такой как лецитин, путем поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсии и путем использования поверхностно-активных веществ. Предотвращение действия микроорганизмов может быть достигнуто с помощью различных антибактериальных и противогрибковых средств, например, парабенов, хлорбутанола, фенола, аскорбиновой кислоты, тиомерсала и тому подобного. Во многих случаях будет предпочтительно включать в композицию изотонические средства, например сахара, многоатомные спирты, такие как маннит, сорбит, хлорид натрия. Пролонгированная абсорбция инъекционных композиций может быть достигнута включением в композицию средства, которое задерживает абсорбцию, например моностеарата алюминия и желатина.

[0175] Особенно целесообразно составлять парентеральные композиции в единичной лекарственной форме для простоты введения и единообразия дозировки. Используемая в настоящем документе единичная лекарственная форма относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичных доз для субъекта, подлежащего лечению; каждая единица содержит заданное количество активного соединения, рассчитанное для получения требуемого терапевтического эффекта, в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем. Технические характеристики единичных лекарственных форм согласно настоящему изобретению продиктованы и напрямую зависят от уникальных характеристик активного соединения и конкретного терапевтического эффекта, который должен быть достигнут, а также от ограничений, присущих области получения такого активного соединения для лечения индивидуума.

[0176] Фармацевтические композиции могут быть включены в контейнер, упаковку или дозатор вместе с необязательными инструкциями для введения.

[0177] Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению можно вводить несколькими способами в зависимости от того, желательна ли местная или системная терапия, и от области, подлежащей лечению. Введение может являться интратуморальным или парентеральным. Парентеральное введение включает в себя внутривенное капельное введение, подкожную, внутрибрюшинную или внутримышечную инъекцию, интратекальное или внутрижелудочковое введение.

[0178] Кроме того, можно включать основания, такие как цитрат натрия, аскорбат натрия и т.п.; цитрат натрия является предпочтительным.

[0179] Согласно одному варианту осуществления единичные дозы или измеренные дозы композиции, которая включает в себя пембролизумаб, вариант пембролизумаба и/или его антигенсвязывающий фрагмент или талимоген лагерпарепвек, дозируют с помощью имплантированного устройства. Устройство может включать в себя датчик, который контролирует параметр в организме субъекта. Например, устройство может включать в себя насос, такой как осмотический насос и, необязательно, связанные с ним электронные компоненты.

[0180] Специалистам в настоящей области техники будет очевидно, что другие подходящие модификации и адаптации способов, описанных в настоящем документе, могут быть выполнены с использованием подходящих эквивалентов, не выходя за пределы объема вариантов осуществления, раскрытых в настоящем документе. Теперь, имея подробное описание определенных вариантов осуществления, они станут более понятны со ссылкой на следующий пример, который включен только в целях иллюстрации и не предназначен для ограничения. Все патенты, заявки на выдачу патентов и ссылки, описанные в настоящем документе, полностью включены посредством ссылки для всех целей.

ПРИМЕР

Пример 1. Многоцентровое открытое испытание для оценки безопасности внутрипеченочной инъекции талимогена лагерпарепвека в опухоли печени в комбинации с системно вводимым пембролизумабом

[0181] Провели испытание фазы 1b/2 на пациентах с первичной гепатоцеллюлярной карциномой (НСС) или метастазами в печень (не-НСС), сочетающее интратуморальную инъекцию талимогена лагерпарепвека с системным введением антитела к PD-1 пембролизумаба.

Первичные цели

[0182] Первичная цель части 1 состоит в том, чтобы оценить максимальный переносимый объем и концентрацию, оцениваемые по частоте ограничивающих дозу токсичностей (DLT), внутрипеченочной инъекции талимогена лагерпарепвека в опухоли печени отдельно и максимально переносимой концентрации внутрипеченочной инъекции талимогена лагерпарепвека в опухоли печени в сочетании с системным внутривенным (в/в) введением пембролизумаба, отдельно, у субъектов с метастазами в печень (не-НСС) и у субъектов с первичной НСС. Первичными целями части 2 является оценка эффективности и безопасности, оцениваемая по частоте объективных ответов (ORR) и частоте возникновения DLT у субъекта, соответственно, для внутрипеченочной инъекции талимогена лагерпарепвека в комбинации с системным внутривенным введением пембролизумаба отдельно для каждого типа не-НСС опухоли (аденокарцинома молочной железы (ВС), колоректальная аденокарцинома (CRC), гастроэзофагеальный рак (GEC; аденокарцинома или плоскоклеточная карцинома (SCC)), меланома (такая меланома кожи или увеальная меланома), немелкоклеточный рак легкого (NLC) и светлоклеточная почечно-клеточная карцинома (RCC)) с метастазами в печень, а также для первичной ННС.

Вторичные цели

[0183] Вторичные цели исследования являются следующими:

А Эффективность

Часть 1:

[0184] Оценить эффективность отдельно с помощью монотерапии в сравнении с комбинацией с когортами, объединенными для опухолей не-НСС и НСС, по следующим оценкам: ORR, наилучший общий ответ (BOR), частота долговременного ответа (DRR), длительность ответа (DOR), ответ в инъецированных и неинъецированных поражениях, частота контроля заболеваний (DCR), выживаемость без прогрессирования (PFS) и общая выживаемость (OS).

Часть 2:

[0185] Оценить эффективность в отдельных типах опухолей в группах не-НСС и НСС, по следующим оценкам: BOR, DRR, DOR, ответ в инъецированных и неинъецированных поражениях, DCR, PFS и OS по типу первичной опухоли.

В. Безопасность (части 1 и 2)

[0186] Оценить безопасность в каждой группе монотерапии и комбинации в обеих группах части 1, оцениваемых по частоте возникновения у субъекта возникающих при лечении и связанных с лечением нежелательных явлений. Оценить безопасность отдельно для каждого типа опухоли в части 2, оцениваемую по частоте возникновения у субъекта возникающих при лечении и связанных с лечением нежелательных явлений. Оценить частоту встречаемости обнаруживаемой ДНК талимогена лагерпарепвека в крови и моче. Оценить частоту выведения ДНК талимогена лагерпарепвека из крови и мочи. Оценить скорость обнаружения (на образец) и частоту встречаемости (на субъект) ДНК талимогена лагерпарепвека и вируса талимогена лагерпарепвека на поверхности места инъекции талимогена лагерпарепвека, на внешней стороне окклюзионной повязки и слизистой оболочки полости рта. Оценить частоту обнаружения ДНК талимогена лагерпарепвека в поражениях, предположительно герпетического происхождения.

Первичная конечная точка

Часть 1:

[0187] Оценивают частоту возникновения у субъекта DLT с внутрипеченочной инъекцией талимогена лагерпарепвека в опухолях печени отдельно и в комбинации с системным внутривенным введением пембролизумаба отдельно у субъектов с первичными опухолями не-НСС и НСС.

Часть 2:

[0188] ORR в соответствии с модифицированными иммуноопосредованными критериями ответа, имитирующими критерии оценки ответа в солидных опухолях версии 1.1 (irRC RECIST), с внутрипеченочной инъекцией талимогена лагерпарепвека в опухолях печени в комбинации с системным внутривенным введением пембролизумаба отдельно по типу опухоли (ВС, CRC, GEC, меланома, NSCLC, RCC и НСС). Оценивают частоту встречаемости DLT по каждому типу опухоли.

Вторичные конечные точки

Эффективность (часть 1):

[0189] ORR, BOR, DRR, DOR, ответы оценивают в инъецированных и неинъецированных поражениях. DCR, PFS и OS оценивают отдельно для опухолей не-НСС и НСС у субъектов, получающих монотерапию талимогеном лагерпарепвеком или комбинированную терапию талимогеном лагерпарепвеком / пембролизумабом.

Эффективность (часть 2):

[0190] BOR, DRR, DOR, ответ в инъецированных и неинъецированных поражениях, DCR, PFS и OS по типу первичной опухоли (ВС, CRC, GEC, меланома, NSCLC, RCC и НСС)

Безопасность (части 1 и 2):

[0191] Частоту возникновения у субъекта связанных с лечением и возникающих при лечении нежелательных явлений оценивают для когорт, получающих монотерапию и комбинацию в обеих группах в части 1 и для каждого типа опухоли отдельно в части 2.

[0192] Измеряют частоту встречаемости обнаруживаемой ДНК талимогена лагерпарепвека в крови и моче. Кроме того, измеряют частоту выведения ДНК талимогена лагерпарепвека из крови и мочи. Частоту встречаемости у субъекта и частоту обнаружения ДНК и вируса талимогена лагерпарепвека в образце определяются на поверхности места инъекции, на внешней стороне окклюзионной повязки и на слизистой оболочке полости рта. Выполняют обнаружение частоты встречаемости ДНК талимогена лагерпарепвека в поражениях, предположительно герпетического происхождения.

Дизайн исследования

[0193] Это многоцентровое открытое испытание фазы 1b/2 для оценки безопасности талимогена лагерпарепвека, введенного с помощью инъекции внутрипеченочно в опухоли печени, с известным прогрессированием отдельно и в комбинации с системным внутривенным введением пембролизумаба у субъектов с не-НСС метастазами в печень из ВС, CRC, GEC, меланомы, NSCLC, RCC и субъектов с НСС. Исследование состоит из 2 частей и 2 групп, а часть 2 включает в себя 2 стадии.

[0194] Цель части 1 состоит в том, чтобы оценить безопасность внутрипеченочной инъекции талимогена лагерпарепвека в опухоли печени отдельно и в комбинации с системно вводимым пембролизумабом для когорт не-НСС (группа А) и НСС (группа В) отдельно (таблица 1). В когортах монотерапии (когорты 1-4) безопасность введения увеличивающейся концентрации (10⁷ бляшкообразующих единиц (БОЕ)/мл или 10⁸ БОЕ/мл) и объемов (максимум до 4 мл или 8 мл) талимогена лагерпарепвека будут определять с использованием стандартного дизайна 3+3. Начальная концентрация талимогена лагерпарепвека во всех когортах всегда составляет 10⁶ БОЕ/мл. Когорта 1 группы В будет инициирована только после того, как безопасность была установлена в когорте 1 группы А.

[0195] Получающие комбинацию когорты (когорты 5 и 6) в части 1 будут определять безопасность внутрипеченочной инъекции талимогена лагерпарепвека в концентрации 10⁷ БОЕ/мл или 10⁸ БОЕ/мл последовательно (объем до 4 мл для обеих доз) в комбинации с системным внутривенным введением пембролизумаба (200 мг) (таблица 1). Модифицированный интервал вероятности токсичности (mTPI) будут использовать для определения безопасности в получающих комбинацию когортах.

[0196] Таблица 1. Обобщенные данные когорт части 1. DLT: токсичность, ограничивающая дозу; n/a = не применимо; БОЕ: бляшкообразующая единица. ^aКогорта будет открыта только при соблюдении одного из следующих условий: 1) DLT ≥ 33% в когорте 2; 2) DLT ≥ 33% в когорте 3 и дозе части 2 для талимогена лагерпарепвека еще не определена; или 3) DLT ≥ 33% в концентрации когорты 3 и части 2 для талимогена лагерпарепвека определяется как 10⁷ БОЕ/мл.

[0197] Как только максимальная переносимая концентрация (МТС) определена из когорт 5 и 6, часть 2 будет открыта для оценки эффективности и безопасности комбинированного лечения при соответствующих типах опухолей (шесть типов опухолей не-НСС в группе А и опухоли НСС тип в группе В) с помощью максимально переносимой концентрации (МТС) талимогена лагерпарепвека, как определено из когорт 5 и 6, в комбинации с системным введением пембролизумаба. Время открытия части 2 для не-НСС (группа А) и для НСС (группа В) будет основано на том, когда будет определена МТС для талимогена лагерпарепвека (получающие комбинацию когорты) для соответствующих групп. Талимоген лагерпарепвек будут использовать в максимальном объеме, составляющем 4 мл (или до 8 мл, если безопасность введения 8 мл установлена из получающих монотерапию когорт 3 и 4 во время открытия части 2). Если безопасность введения вплоть до 8 мл из когорт монотерапии не установлена во время открытия части 2, вновь зачисленным субъектам в части 2 будет разрешено получать максимум до 8 мл, если и когда безопасность введения 8 мл в монотерапии установлена.

[0198] Часть 2 состоит из двухстадийного дизайна для оценки эффективности и безопасности талимогена лагерпарепвека в комбинации с системным введением пембролизумаба. Эффективность и безопасность будут оценивать в каждом из шести типов не-НСС опухолей из группы А отдельно. Аналогичным образом, эффективность и безопасность комбинированного лечения будут определять для субъектов с НСС группы В. Первичный анализ эффективности будет включать в себя субъектов, которые получают любой объем талимогена лагерпарепвека.

Размер образца:

[0199] Ожидается, что общее число субъектов, которые будут участвовать в части 1 и части 2 исследования, составляет приблизительно от 3 до 244 субъектов (приблизительно от 3 до 104 субъектов в части 1; приблизительно от 70 до 147 субъектов в части 2). Эта оценка включает в себя приблизительно 147 субъектов с полным набором анализов, которые получают комбинированное лечение в частях 1 и 2, и до 48 поддающихся оценке DLT субъектов из когорт монотерапии части 1. Эффективность части 2 будет охватывать всех получивших лечение субъектов; следовательно, субъекты, в отношении которых нельзя оценить ограничивающую токсичность дозу, не будут заменены в части 2

Обобщенные данные критериев включения субъектов

Ключевые критерии включения:

[0200] Возраст субъектов должен составлять ≥ 18 лет на момент информированного согласия. Они должны иметь гистологически или цитологически подтвержденную ВС, CRC, GEC, меланому, NSCLC или RCC с метастазами в печень или НСС. Пациенты, характеризующиеся наличием не-НСС, должны получить по меньшей мере 1 предшествующую стандартную системную противораковую терапию для лечения их местно-распространенного или метастатического заболевания. Нет необходимости в том, чтобы для получающих комбинацию когорт (когорты 5 и 6 в части 1) и части 2 субъекты с метастатической меланомой или NSCLC получали предшествующую терапию. Субъекты должны характеризоваться наличием измеримых опухолей печени, подходящих для инъекций. Показатель общего состояния Восточной кооперативной онкологической группы (ECOG) должен составлять 0 или 1, а ожидаемая продолжительность жизни должна составлять приблизительно 5 месяцев и более. Необходима адекватная гематологическая функция, функция почек, печени и системы свертывания крови. Тесты функции печени могут быть слегка отклоняющимися от нормы, но в пределах параметров, определенных в Разделе 4.1.1. Балл согласно шкале тяжести печеночной недостаточности согласно классификации Child в модификации Pugh должен составлять от А до В7.

Ключевые критерии исключения:

[0201] Субъекты не должны быть кандидатами на операцию на печени или местно-регионарную терапию опухолей печени с помощью направленной на излечение или запланированной системной противораковой терапии. Опухоли печени, по оценкам, не должны охватывать более приблизительно одной трети печени. Направленная на опухоль печени терапия, операция на печени, терапия на основе антител или иммунотерапия не должны проводиться за <28 дней, химиотерапия за <21 день, а нацеленная низкомолекулярная терапия или гормональная терапия за <14 дней до включения в испытание. Субъекты не должны иметь либо метастаз центральной нервной системы (ЦНС), либо карциноматозный менингит, либо, если присутствует метастаз ЦНС, должны характеризоваться наличием стабильных получающих лечение церебральных метастазов из ВС, NSCLC, RCC, CRC или меланомы. Субъекты не должны характеризоваться наличием симптоматического аутоиммунного заболевания или характеризоваться подавленным иммунитетом. У них не должно быть трансплантации солидного органа в истории. Для не-НСС не должно быть острой или хронической инфекции вируса гепатита В (HBV) или вируса гепатита С (HCV). Для НСС с предшествующей инфекцией гепатита В и/или С вирусная нагрузка HBV и/или HCV с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (кПЦР) должна быть не обнаруживаемой, и они не должны проходить недавнее лечение в пределах 12 недель в отношении HBV или HCV с помощью определенных противовирусных средств. Не должно быть макроскопической внутрисосудистой инвазии опухолей в основную воротную вену, печеночную вену или полую вену. Субъекты не должны: иметь активные герпетические поражения кожи или предшествующие осложнения герпетической инфекции (например, герпетический кератит или энцефалит); нуждаться в лечении антигерпетическим лекарственным средством; получить прививку живого вируса в пределах 30 дней от начала запланированного лечения; пройти предыдущую терапию с помощью талимогена лагерпарепвека, онколитических вирусов или противоопухолевой вакцины. Они не должны нуждаться в сопутствующем лечении варфарином. Субъекты, входящие в когорту комбинированного лечения, не должны иметь: истории или свидетельств психиатрического расстройства, алкогольной или наркотической зависимости или любого другого клинически значимого расстройства; токсические эффекты самой последней предшествующей химиотерапии, не устраненные до 1 степени или ниже (за исключением алопеции); получили переливание продуктов крови в течение 28 дней до зачисления в исследование; или ожидали другой терапии рака во время исследования, за исключением локального облучения в области кости или другого метастаза для паллиативного лечения. Мужчины-субъекты с репродуктивным потенциалом в комбинированном лечении должны быть готовы использовать приемлемые методы эффективной контрацепции во время лечения и в течение 4 месяцев после последней дозы пембролизумаба.

[0202] Талимоген лагерпарепвек будут вводить путем инъекции с визуальным контролем (либо с помощью ультразвука (УЗИ), либо компьютерной томографии (КТ)) только в инъецированные поражения печени. Концентрации и объемы доз будут определять во время эскалации дозы в части 1. Начальная концентрация для всех субъектов будет составлять 10⁶ БОЕ/мл. Через двадцать один (+ 3) день, вводят или 10⁷ или 10⁸ БОЕ/мл. Последующие дозы будут вводить каждые 21 день (Q21D; ± 3 дня) после этого. Объем будет составлять вплоть до 4 мл или 8 мл. Можно вводить до 6 доз талимогена лагерпарепвека (включая в себя дозу 10⁶ БОЕ/мл), и существует возможность для продолжения приема до 6 дополнительных доз Q21D (±3 дня). Талимоген лагерпарепвек будут вводить в концентрациях, составляющих или 10⁶ БОЕ/мл или 10⁸ БОЕ/мл.

Пембролизумаб

[0203] Пембролизумаб в дозе, составляющей 200 мг, будут вводить каждые 3 недели (Q3W; ± 3 дня) с использованием 30-минутной в/в инфузии. Когда талимоген лагерпарепвек и пембролизумаб вводят в один и тот же день, талимоген лагерпарепвек следует вводить первым, если это возможно.

[0204] Субъекты могут получать вплоть до 35 циклов (приблизительно 24 месяца) с помощью пембролизумаба. В течение этого времени субъекты могут продолжать испытание до возникновения прогрессирующего заболевания (PD) в соответствии с модифицированным IRRC-RECIST, неприемлемой токсичности, отзыва согласия, решения врача прекратить терапию для субъекта или решения спонсора прекратить исследование. Прекращение лечения может быть рассмотрено для субъектов, которые получили подтвержденный полный ответ (CR), которые получили по меньшей мере 8 циклов (24 недели) пембролизумаба и получили по меньшей мере 2 цикла пембролизумаба после даты, когда был признан исходный CR.

Процедуры

Специфические в отношении заболевания оценки:

Проводят следующие специфические в отношении заболевания оценки: (1) биопсия опухоли печени, если она еще не выполнена в качестве стандарта медицинской помощи; (2) рентгенографическая оценка опухоли; (3) документирование сопутствующих лекарственных средств; и (4) обзор нежелательных явлений, связанных с заболеванием явлений и серьезных нежелательных явлений.

Группа изобретений относится к области медицины, а именно к онкологии и терапии, и предназначена для лечения рака печени. Применяют талимоген лагерпарепвек для лечения субъекта, имеющего рак печени, который плохо отвечает на стандартную системную противораковую терапию, характеризуется прогрессированием в течение стандартной системной противораковой терапии и/или является резистентным к стандартной системной противораковой терапии, причем талимоген лагерпарепвек вводят субъекту в комбинации с пембролизумабом. Также представлено применение пембролизумаба для лечения субъекта, имеющего рак печени, который плохо отвечает на стандартную системную противораковую терапию, характеризуется прогрессированием в течение стандартной системной противораковой терапии и/или является резистентным к стандартной системной противораковой терапии, причем пембролизумаб вводят субъекту в комбинации с талимогеном лагерпарепвеком. В других воплощениях обеспечиваются применение талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба в комбинации для лечения субъекта, имеющего рак печени, который плохо отвечает на стандартную системную противораковую терапию, характеризуется прогрессированием в течение стандартной системной противораковой терапии и/или является резистентным к стандартной системной противораковой терапии; применение талимогена лагерпарепвека для лечения субъекта, имеющего рак печени, которому не удалось достичь устойчивого ответа после предшествующей терапии пембролизумабом, причем талимоген лагерпарепвек вводят субъекту в комбинации с пембролизумабом; применение пембролизумаба для лечения субъекта, имеющего рак печени, которому не удалось достичь устойчивого ответа после предшествующей терапии пембролизумабом, причем пембролизумаб вводят субъекту в комбинации с талимогеном лагерпарепвеком; а также применение талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба в комбинации для лечения субъекта, имеющего рак печени, которому не удалось достичь устойчивого ответа после предшествующей терапии пембролизумабом. Использование группы изобретений позволяет повысить эффективность лечения рака печени. 6 н. и 16 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 1 пр.

1. Применение талимогена лагерпарепвека для лечения субъекта, имеющего рак печени, который плохо отвечает на стандартную системную противораковую терапию, характеризуется прогрессированием в течение стандартной системной противораковой терапии и/или является резистентным к стандартной системной противораковой терапии, причем талимоген лагерпарепвек вводят субъекту в комбинации с пембролизумабом.

2. Применение пембролизумаба, для лечения субъекта, имеющего рак печени, который плохо отвечает на стандартную системную противораковую терапию, характеризуется прогрессированием в течение стандартной системной противораковой терапии и/или является резистентным к стандартной системной противораковой терапии, причем пембролизумаб вводят субъекту в комбинации с талимогеном лагерпарепвеком.

3. Применение талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба для лечения субъекта, имеющего рак печени, который плохо отвечает на стандартную системную противораковую терапию, характеризуется прогрессированием в течение стандартной системной противораковой терапии и/или является резистентным к стандартной системной противораковой терапии, причем талимоген лагерпарепвек и пембролизумаб вводят субъекту в комбинации.

4. Применение талимогена лагерпарепвека для лечения субъекта, имеющего рак печени, которому не удалось достичь устойчивого ответа после предшествующей терапии пембролизумабом, причем талимоген лагерпарепвек вводят субъекту в комбинации с пембролизумабом.

5. Применение пембролизумаба для лечения субъекта, имеющего рак печени, которому не удалось достичь устойчивого ответа после предшествующей терапии пембролизумабом, причем пембролизумаб вводят субъекту в комбинации с талимогеном лагерпарепвеком.

6. Применение талимогена лагерпарепвека и пембролизумаба для лечения субъекта, имеющего рак печени, которому не удалось достичь устойчивого ответа после предшествующей терапии пембролизумабом, причем талимоген лагерпарепвек и пембролизумаб вводят субъекту в комбинации.

7. Применение по любому из пп. 1-6, в котором талимоген лагерпарепвек вводят субъекту интратуморально.

8. Применение по любому из пп. 1-7, в котором пембролизумаб вводят субъекту системно.

9. Применение по любому из пп. 1-8, в котором талимоген лагерпарепвек и пембролизумаб вводят субъекту после операции для удаления опухоли.

10. Применение по любому из пп. 1-9, в котором талимоген лагерпарепвек и пембролизумаб вводят субъекту перед, во время или после лучевой терапии.

11. Применение по любому из пп. 1-10, при котором рак печени представляет собой первичный рак печени.

12. Применение по п. 11, где первичный рак печени представляет собой гепатоцеллюлярную карциному (HCC).

13. Применение по любому из пп. 1-10, рак печени представляет собой вторичный рак печени, необязательно где вторичный рак печени представляет собой метастазы в печени, не относящиеся к ГЦК, развившиеся из аденокарциномы молочной железы, колоректальной аденокарциномы, гастроэзофагеальной аденокарциномы, гастроэзофагеальной плоскоклеточной карциномы, меланомы, немелкоклеточного рака легкого и/или светлоклеточной почечно-клеточной карциномы .

14. Применение по любому из пп. 1-13, в котором талимоген лагерпарепвек вводят интратуморально в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами; и пембролизумаб вводят системно в качестве начальной дозы с последующей одной или более вторичными дозами.

15. Применение по п. 14, в котором пембролизумаб вводят в начальной дозе, составляющей около 200 мг, с последующей одной или более вторичными дозами, составляющими около 200 мг, один раз каждые три недели.

16. Применение по п. 15, в котором начальную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в дозе, составляющей 10⁶ бляшкообразующих единиц (БОЕ/мл), и одна или более вторичных доз талимогена лагерпарепвека вводят в дозе, составляющей 10⁷ или 10⁸ БОЕ/мл.

17. Применение по п. 16, в котором начальную дозу талимогена лагерпарепвека вводят в день 1 недели 1 и одну или более вторичных доз талимогена лагерпарепвека вводят в день 1 недели 4, в день 1 недели 7 и каждые три недели (Q3W) после этого.

18. Применение по п. 17, в котором начальную дозу пембролизумаба вводят в день 1 недели 4 и одну или более вторичных доз пембролизумаба вводят в день 1 недели 7 и каждые три недели (Q3W) после этого.

19. Применение по любому из пп. 1-16, в котором талимоген лагерпарепвек вводят перед введением пембролизумаба.

20. Применение по любому из пп. 1-16, в котором талимоген лагерпарепвек вводят после введения пембролизумаба.

21. Применение по любому из пп. 1-16, в котором талимоген лагерпарепвек вводят параллельно с пембролизумабом.

22. Применение по любому из пп. 1-21, где у субъекта имеется измеримая опухоль печени, которая подходит для инъекции.