ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет по предварительной заявке на патент США № 62/831572, поданной 9 апреля 2019 г., и заявке на европейский патент № EP 19306261.9, поданной 2 октября 2019 г., описания каждой из которых полностью включены в настоящий документ посредством ссылки.

ПРЕДСТАВЛЕНИЕ ПЕРЕЧНЯ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ В ТЕКСТОВОМ ФАЙЛЕ В ФОРМАТЕ ASCII

[0002] Содержание нижеследующего представленного текстового файла в формате ASCII включено в данный документ посредством ссылки в его полном объеме: машиночитаемая форма (CRF) перечня последовательностей (название файла: 183952032040SEQLIST.TXT, дата составления: 6 апреля, 2020 г., размер: 526 КБ).

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

[0003] Настоящее изобретение относится к триспецифическим и/или тривалентным связывающим белкам, содержащим четыре полипептидные цепи, которые образуют три антигенсвязывающих участка, которые специфически связывают один или несколько белков-мишеней, где первая пара полипептидов, образующих связывающий белок, содержит двойные вариабельные домены, характеризующиеся перекрестной ориентацией. Настоящее изобретение также относится к способам получения триспецифических и/или тривалентных связывающих белков и вариантам применения таких связывающих белков.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0004] Биотерапевтические средства на основе моноклональных антител стали важным направлением в разработке новых лекарственных средств. Технология моноклональных антител предлагает специфическое нацеливание на конкретную популяцию клеток, точную доставку в них сигналов и/или полезной нагрузки и обеспечивает длительный биологический эффект посредством функций, опосредованных Fc-фрагментом. Усилия, предпринятые в области конструирования антител, позволили разработать биспецифические антитела, в которых объединены специфичности двух моноклональных антител, для различных вариантов применения в биологических целях, расширив сферу разработки лекарственных средств на основе антител. Недавно открытые нейтрализующие антитела с улучшенной широтой спектра действия и активностью могут обеспечить больше возможных вариантов разработки биотерапевтических средств для лечения комплексных заболеваний, таких как рак, артрит и/или воспалительные заболевания.

[0005] Иммуноонкология представляет собой многообещающий развивающийся терапевтический подход для управления ходом заболевания при раке. Иммунная система представляет собой первую линию защиты от развития и прогрессирования рака. В настоящее время существует множество доказательств того, что Т-клетки способны контролировать рост опухоли и продлевать время выживания пациентов, страдающих раком, как на ранних, так и на поздних стадиях заболевания. Однако Т-клетки, специфичные в отношении опухолей, могут быть ограничены во многих отношениях, что не позволяет им контролировать заболевание.

[0006] Как часть адаптивного иммунитета человека, Т-клеточный иммунитет играет решающую роль в контроле вирусной инфекции и рака, возможно, устраняя инфицированные клетки и злокачественные клетки, что приводит к освобождению от вирусной инфекции или излечению от рака. При хронических инфекционных заболеваниях, таких как инфекция, вызванная вирусом герпеса (HSV, CMV, EBV и т. д.), HIV и HBV, вирусы сохраняют свою устойчивость у людей с помощью различных механизмов, включая подавление иммунитета, истощение Т-клеток и установление латентного периода. Тем не менее, вирусная инфекция обычно индуцирует вирусный антигенспецифический иммунитет, включающий антигенспецифические CD8 Т-клетки, которые могут легко распознавать инфицированные клетки для контроля или уничтожения посредством высвобождения цитокинов или процессов уничтожения, опосредованных цитотоксическими Т-клетками (CTL).

[0007] Таким образом, активация и/или амплификация вирусных антигенспецифических Т-клеток in vivo и/или ex vivo может обеспечить терапевтические стратегии против хронических вирусных инфекций.

[0008] Все приведенные в данном документе ссылочные материалы, в том числе заявки на патенты, патентные публикации и номера доступа в UniProtKB/Swiss-Prot, включены в данный документ посредством ссылки в их полном объеме, как если бы каждый отдельный ссылочный материал был специально и отдельно указан для включения в качестве ссылки.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0009] Для удовлетворения этих и других потребностей в данном документе предусмотрены триспецифические связывающие белки (например, антитела), которые образуют три антигенсвязывающих участка. Данные связывающие белки могут специфически связывать одну, две или три антигенные мишени или белка-мишени, таких как CD28, CD3 и опухолевый белок-мишень. Некоторые опухоли экспрессируют специфические антигены. Например, амплификацию и сверхэкспрессию HER2 можно обнаружить в молекулярных подтипах рака молочной железы, а также при карциномах желудка, яичника, легкого и предстательной железы. Для оптимальной активации Т-клеток необходимы два фактора: 1. распознавание антигена и 2. костимуляция. При использовании триспецифических связывающих HER2/CD28xCD3 белков, описанных в данном документе, сигнал 1 обеспечивается CD3-связывающим участком-агонистом, а сигнал 2 обеспечивается CD28-связывающим участком-агонистом. Триспецифический связывающий белок осуществляет рекрутинг Т-клеток к опухоли посредством связывающего участка для HER2, CD38 или связывающего участка, распознающего другой опухолевый белок-мишень, и активирует привлеченные Т-клетки посредством CD3- и CD28-связывающих участков. Происходящая в результате активация индуцирует потенциал иммунных клеток в отношении уничтожения близлежащих опухолевых клеток. Кроме того, описаны CD3-связывающие участки, характеризующиеся высокой аффинностью связывания с полипептидами CD3 человека и устраненными потенциальными недостатками при их получении (например, участками дезамидирования).

[0010] В данном документе дополнительно предусмотрены триспецифические антитела к CD38/CD28xCD3, которые разрабатывали и оценивали в отношении их способности активировать Т-клетки и последующую пролиферацию и/или амплификацию антигенспецифических Т-клеток. Эти триспецифические Ab могут эффективно расширять популяции CD4 и CD8 эффекторных клеток и клеток памяти, в том числе антигенспецифических CD8 центральных T-клеток памяти и эффекторных клеток памяти in vitro. В частности, продемонстрировали in vitro размножение специфических в отношении CMV, EBV, HIV-1, вируса гриппа CD8 центральных клеток памяти и эффекторных клеток памяти. Триспецифические антитела к CD38/CD28xCD3, описываемые в данном документе, демонстрировали новые свойства путем вовлечения CD3/CD28/CD38 с обеспечением пути передачи сигнала для стимуляции и размножения Т-клеток, что может обеспечить эффективную стратегию лечения хронических инфекционных заболеваний, таких как инфекции, вызванные HSV, CMV, EBV, HIV-1 и HBV.

[0011] Для удовлетворения этих и других потребностей в данном документе предусмотрены связывающие белки, которые связывают полипептиды CD38 (например, полипептиды CD38 человека и макака-крабоеда), включая моноспецифические, биспецифические или триспецифические связывающие белки с по меньшей мере одним антигенсвязывающим участком, который связывает полипептид CD38. Преимущественно такие связывающие белки характеризуются способностью к рекрутингу Т-клеток в непосредственной близости от раковых клеток с последующей активацией Т-клеток и стимуляцией уничтожения посредством активированных Т-клеток соседних раковых клеток с помощью механизма гранзим/перфорин, обеспечивая таким образом другой механизм действия для противоопухолевой активности антител к CD38, таких как DARZALEX® (даратумумаб). Более того, способность связывать полипептиды CD38 как человека, так и макака-крабоеда обеспечивает возможность простого тестирования связывающих белков в доклинических токсикологических исследованиях, например для оценки их профилей безопасности с целью последующего клинического применения.

[0012] В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены связывающие белки, содержащие четыре полипептидные цепи, которые образуют три антигенсвязывающих участка, где первая полипептидная цепь содержит структуру, представленную формулой:

V_L2-L₁-V_L1-L₂-C_L [I];

и вторая полипептидная цепь содержит структуру, представленную формулой:

V_H1-L₃-V_H2-L₄-C_H1-шарнир-C_H2-C_H3 [II];

и третья полипептидная цепь содержит структуру, представленную формулой:

V_H3-C_H1-шарнир-C_H2-C_H3 [III];

и четвертая полипептидная цепь содержит структуру, представленную формулой:

V_L3-C_L[IV];

где

V_L1 представляет собой первый вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина;

V_L2 представляет собой второй вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина;

V_L3 представляет собой третий вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина;

V_H1 представляет собой первый вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина;

V_H2 представляет собой второй вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина;

V_H3 представляет собой третий вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина;

C_L представляет собой константный домен легкой цепи иммуноглобулина;

C_H1 представляет собой константный домен C_H1 тяжелой цепи иммуноглобулина;

C_H2 представляет собой константный домен C_H2 тяжелой цепи иммуноглобулина;

C_H3 представляет собой константный домен C_H3 тяжелой цепи иммуноглобулина;

шарнир представляет собой шарнирную область иммуноглобулина, соединяющую домены C_H1 и C_H2; и

L₁, L₂, L₃ и L₄ представляют собой аминокислотные линкеры,

где полипептид формулы I и полипептид формулы II образуют кроссоверную пару легкая цепь-тяжелая цепь, и

где V_H1 и V_L1 образуют первый антигенсвязывающий участок;

где V_H2 и V_L2 образуют второй антигенсвязывающий участок, который связывает полипептид CD3, где домен V_H2 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFTFTKAW (SEQ ID NO:55), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IKDKSNSYAT (SEQ ID NO:56), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность RGVYYALSPFDY (SEQ ID NO:57), и домен V_L2 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QSLVHX₁NX₂X₃TY, где X₁ представляет собой E или Q, X₂ представляет собой A или L, и X₃ представляет собой Q, R или F (SEQ ID NO:180), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность KVS (SEQ ID NO:64), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность GQGTQYPFT (SEQ ID NO:65); и

где V_H3 и V_L3 образуют третий антигенсвязывающий участок.

[0013] В некоторых вариантах осуществления первый связывающий участок связывает полипептид CD28. В некоторых вариантах осуществления домен V_H1 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GYTFTSYY (SEQ ID NO:49), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPGNVNT (SEQ ID NO:50), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность TRSHYGLDWNFDV (SEQ ID NO:51), и домен V_L1 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QNIYVW (SEQ ID NO:52), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность KAS (SEQ ID NO:53), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQGQTYPY (SEQ ID NO:54). В некоторых вариантах осуществления домен V_H1 содержит аминокислотную последовательность qvqlvqsgaevvkpgasvkvsckasgytftsyyihwvrqapgqglewigsiypgnvntnyaqkfqgratltvdtsistaymelsrlrsddtavyyctrshygldwnfdvwgkgttvtvss (SEQ ID NO:91), и/или домен V_L1 содержит аминокислотную последовательность diqmtqspsslsasvgdrvtitcqasqniyvwlnwyqqkpgkapklliykasnlhtgvpsrfsgsgsgtdftltisslqpediatyycqqgqtypytfgqgtkleik (SEQ ID NO:92).

[0014] В некоторых вариантах осуществления последовательность CDR-L1 домена V_L2 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из QSLVHQNAQTY (SEQ ID NO:59), QSLVHENLQTY (SEQ ID NO:60), QSLVHENLFTY (SEQ ID NO:61) и QSLVHENLRTY (SEQ ID NO:62). В некоторых вариантах осуществления связывающий белок по настоящему изобретению содержит антигенсвязывающий участок, содержащий вариабельный домен тяжелой цепи (VH) антитела, содержащий последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFTFTKAW (SEQ ID NO:55), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IKDKSNSYAT (SEQ ID NO:56), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность RGVYYALSPFDY (SEQ ID NO:57); и/или вариабельный домен легкой цепи (VL) антитела, содержащий последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QSLVHQNAQTY (SEQ ID NO:59), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность KVS (SEQ ID NO:64), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность GQGTQYPFT (SEQ ID NO:65). В некоторых вариантах осуществления связывающий белок по настоящему изобретению содержит антигенсвязывающий участок, содержащий вариабельный домен тяжелой цепи (VH) антитела, содержащий последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFTFTKAW (SEQ ID NO:55), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IKDKSNSYAT (SEQ ID NO:56), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность RGVYYALSPFDY (SEQ ID NO:57); и/или вариабельный домен легкой цепи (VL) антитела, содержащий последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QSLVHENLQTY (SEQ ID NO:60), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность KVS (SEQ ID NO:64), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность GQGTQYPFT (SEQ ID NO:65). В некоторых вариантах осуществления связывающий белок по настоящему изобретению содержит антигенсвязывающий участок, содержащий вариабельный домен тяжелой цепи (VH) антитела, содержащий последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFTFTKAW (SEQ ID NO:55), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IKDKSNSYAT (SEQ ID NO:56), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность RGVYYALSPFDY (SEQ ID NO:57); и/или вариабельный домен легкой цепи (VL) антитела, содержащий последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QSLVHENLFTY (SEQ ID NO:61), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность KVS (SEQ ID NO:64), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность GQGTQYPFT (SEQ ID NO:65). В некоторых вариантах осуществления связывающий белок по настоящему изобретению содержит антигенсвязывающий участок, содержащий вариабельный домен тяжелой цепи (VH) антитела, содержащий последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFTFTKAW (SEQ ID NO:55), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IKDKSNSYAT (SEQ ID NO:56), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность RGVYYALSPFDY (SEQ ID NO:57); и/или вариабельный домен легкой цепи (VL) антитела, содержащий последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QSLVHENLRTY (SEQ ID NO:62), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность KVS (SEQ ID NO:64), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность GQGTQYPFT (SEQ ID NO:65). В некоторых вариантах осуществления домен V_H2 содержит аминокислотную последовательность qvqlvesgggvvqpgrslrlscaasgftftkawmhwvrqapgkqlewvaqikdksnsyatyyadsvkgrftisrddskntlylqmnslraedtavyycrgvyyalspfdywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:93), и/или домен V_L2 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из divmtqtplslsvtpgqpasisckssqslvhqnaqtylswylqkpgqspqsliykvsnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkisrveaedvgvyycgqgtqypftfgsgtkveik (SEQ ID NO:95), divmtqtplslsvtpgqpasisckssqslvhenlqtylswylqkpgqspqsliykvsnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkisrveaedvgvyycgqgtqypftfgsgtkveik (SEQ ID NO:96), divmtqtplslsvtpgqpasisckssqslvhenlftylswylqkpgqspqsliykvsnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkisrveaedvgvyycgqgtqypftfgsgtkveik (SEQ ID NO:97), и divmtqtplslsvtpgqpasisckssqslvhenlrtylswylqkpgqspqsliykvsnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkisrveaedvgvyycgqgtqypftfgsgtkveik (SEQ ID NO:98). В некоторых вариантах осуществления домен V_H2 содержит аминокислотную последовательность qvqlvesgggvvqpgrslrlscaasgftftkawmhwvrqapgkqlewvaqikdksnsyatyyadsvkgrftisrddskntlylqmnslraedtavyycrgvyyalspfdywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:93) или qvqlvesgggvvqpgrslrlscaasgftftkawmhwvrqapgkqlewvaqikdksnsyatyyassvkgrftisrddskntlylqmnslraedtavyycrgvyyalspfdywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:302),, и/или домен V_L2 содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из divmtqtplslsvtpgqpasisckssqslvhqnaqtylswylqkpgqspqsliykvsnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkisrveaedvgvyycgqgtqypftfgsgtkveik (SEQ ID NO:95), divmtqtplslsvtpgqpasisckssqslvhenlqtylswylqkpgqspqsliykvsnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkisrveaedvgvyycgqgtqypftfgsgtkveik (SEQ ID NO:96), divmtqtplslsvtpgqpasisckssqslvhenlftylswylqkpgqspqsliykvsnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkisrveaedvgvyycgqgtqypftfgsgtkveik (SEQ ID NO:97), и divmtqtplslsvtpgqpasisckssqslvhenlrtylswylqkpgqspqsliykvsnrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkisrveaedvgvyycgqgtqypftfgsgtkveik (SEQ ID NO:98). В некоторых вариантах осуществления связывающий белок по настоящему изобретению содержит антигенсвязывающий участок, содержащий вариабельный домен тяжелой цепи (VH) антитела, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:93, и/или вариабельный домен легкой цепи (VL) антитела, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:95. В некоторых вариантах осуществления связывающий белок по настоящему изобретению содержит антигенсвязывающий участок, содержащий вариабельный домен тяжелой цепи (VH) антитела, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:302, и/или вариабельный домен легкой цепи (VL) антитела, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:95. В некоторых вариантах осуществления связывающий белок по настоящему изобретению содержит антигенсвязывающий участок, содержащий вариабельный домен тяжелой цепи (VH) антитела, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:93, и/или вариабельный домен легкой цепи (VL) антитела, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:96. В некоторых вариантах осуществления связывающий белок по настоящему изобретению содержит антигенсвязывающий участок, содержащий вариабельный домен тяжелой цепи (VH) антитела, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:93, и/или вариабельный домен легкой цепи (VL) антитела, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:97. В некоторых вариантах осуществления связывающий белок по настоящему изобретению содержит антигенсвязывающий участок, содержащий вариабельный домен тяжелой цепи (VH) антитела, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:93, и/или вариабельный домен легкой цепи (VL) антитела, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:98.

[0015] В некоторых вариантах осуществления третий антигенсвязывающий участок связывает опухолевый белок-мишень. В некоторых вариантах осуществления опухолевый белок-мишень представляет собой полипептид CD38 (например, полипептид CD38 человека). В некоторых вариантах осуществления опухолевый белок-мишень представляет собой полипептид HER2 (например, полипептид HER2 человека). В некоторых вариантах осуществления опухолевый белок-мишень по настоящему изобретению включает без ограничения A2AR, APRIL, ATPDазу, BAFF, BAFFR, BCMA, BlyS, BTK, BTLA, B7DC, B7H1, B7H4 (также известный как VTCN1), B7H5, B7H6, B7H7, B7RP1, B7-4, C3, C5, CCL2 (также известный как MCP-1), CCL3 (также известный как MIP-1a), CCL4 (также известный как MIP-1b), CCL5 (также известный как RANTES), CCL7 (также известный как MCP-3), CCL8 (также известный как mcp-2), CCL11 (также известный как эотаксин), CCL15 (также известный как MIP-1d), CCL17 (также известный как TARC), CCL19 (также известный как MIP-3b), CCL20 (также известный как MIP-3a), CCL21 (также известный как MIP-2), CCL24 (также известный как MPIF-2/эотаксин-2), CCL25 (также известный как TECK), CCL26 (также известный как эотаксин-3), CCR3, CCR4, CD3, CD19, CD20, CD23 (также известный как FCER2, рецептор IgE), CD24, CD27, CD28, CD38, CD39, CD40, CD70, CD80 (также известный как B7-1), CD86 (также известный как B7-2), CD122, CD137 (также известный как 41BB), CD137L, CD152 (также известный как CTLA4), CD154 (также известный как CD40L), CD160, CD272, CD273 (также известный как PDL2), CD274 (также известный как PDL1), CD275 (также известный как B7H2), CD276 (также известный как B7H3), CD278 (также известный как ICOS), CD279 (также известный как PD-1), CDH1 (также известный как E-кадгерин), хитиназу, CLEC9, CLEC91, CRTH2, CSF-1 (также известный как M-CSF), CSF-2 (также известный как GM-CSF), CSF-3 (также известный как GCSF), CX3CL1 (также известный как SCYD1), CXCL12 (также известный как SDF1), CXCL13, CXCR3, DNGR-1, эктонуклеозидтрифосфатдифосфогидролазу 1, EGFR, ENTPD1, FCER1A, FCER1, FLAP, FOLH1, Gi24, GITR, GITRL, GM-CSF, Her2, HHLA2, HMGB1, HVEM, ICOSLG, IDO, IFNα, IgE, IGF1R, IL2R бета, IL1, IL1A, IL1B, IL1F10, IL2, IL4, IL4Ra, IL5, IL5R, IL6, IL7, IL7Ra, IL8, IL9, IL9R, IL10, rhIL10, IL12, IL13, IL13Ra1, IL13Ra2, IL15, IL17, IL17Rb (также известный как рецептор IL25), IL18, IL22, IL23, IL25, IL27, IL33, IL35, ITGB4 (также известный как интегрин b4), ITK, KIR, LAG3, LAMP1, лептин, LPFS2, молекулы MHC класса II, MUC-1, NCR3LG1, NKG2D, NTPDазу-1, OX40, OX40L, PD-1H, тромбоцитарный рецептор, PROM1, S152, SISP1, SLC, SPG64, ST2 (также известный как рецептор IL33), STEAP2, Syk-киназу, TACI, TDO, T14, TIGIT, TIM3, TLR, TLR2, TLR4, TLR5, TLR9, TMEF1, TNFa, TNFRSF7, Tp55, TREM1, TSLP (также известный как корецептор IL7Ra), TSLPR, TWEAK, VEGF, VISTA, Vstm3, WUCAM и XCR1 (также известный как GPR5/CCXCR1). В некоторых вариантах осуществления одна или несколько из указанных выше антигенных мишеней представляют собой антигенные мишени человека.

[0016] В некоторых вариантах осуществления третий антигенсвязывающий участок связывает полипептид CD38 человека. В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GYTFTSYA (SEQ ID NO:13), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPGQGGT (SEQ ID NO:14), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARTGGLRRAYFTY (SEQ ID NO:15), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QSVSSYGQGF (SEQ ID NO:16), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность GAS (SEQ ID NO:17), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQNKEDPWT (SEQ ID NO:18). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GYTLTEFS (SEQ ID NO:19), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность FDPEDGET (SEQ ID NO:20), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность TTGRFFDWF (SEQ ID NO:21), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QSVISRF (SEQ ID NO:22), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность GAS (SEQ ID NO:23), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQDSNLPIT (SEQ ID NO:24). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GYAFTTYL (SEQ ID NO:25), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность INPGSGST (SEQ ID NO:26), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARYAYGY (SEQ ID NO:27), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QNVGTA (SEQ ID NO:28), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SAS (SEQ ID NO:29), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQYSTYPFT (SEQ ID NO:30). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GYSFTNYA (SEQ ID NO:31), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность ISPYYGDT (SEQ ID NO:32), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARRFEGFYYSMDY (SEQ ID NO:33), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QSLVHSNGNTY (SEQ ID NO:34), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность KVS (SEQ ID NO:35), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SQSTHVPLT (SEQ ID NO:36).

[0017] В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFTFSSYG (SEQ ID NO:37), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IWYDGSNK (SEQ ID NO:38), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARDPGLRYFDGGMDV (SEQ ID NO:39), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QGISSY (SEQ ID NO:40), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность AAS (SEQ ID NO:41), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQLNSFPYT (SEQ ID NO:42). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFTFSSYG (SEQ ID NO:43), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IWYDGSNK (SEQ ID NO:44), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность ARMFRGAFDY (SEQ ID NO:45), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QGIRND (SEQ ID NO:46), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность AAS (SEQ ID NO:47), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность LQDYIYYPT (SEQ ID NO:48). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность Qvqlvqsgaevvkpgasvkvsckasgytftsyamhwvkeapgqrlewigyiypgqggtnynqkfqgratltadtsastaymelsslrsedtavyfcartgglrrayftywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:79), и/или домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность Divltqspatlslspgeratiscrasqsvssygqgfmhwyqqkpgqpprlliygassratgiparfsgsgsgtdftltisplepedfavyycqqnkedpwtfgggtkleik (SEQ ID NO:80). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность qvqlvqsgaevkkpgasvkvsckvsgytltefsihwvrqapgqglewmggfdpedgetiyaqkfqgrvimtedtstdtaymemnslrsedtaiyycttgrffdwfwgqgtlvtvss (SEQ ID NO:81), и/или домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность eiiltqspailslspgeratlscrasqsvisrflswyqvkpglaprlliygastratgipvrfsgsgsgtdfsltisslqpedcavyycqqdsnlpitfgqgtrleik (SEQ ID NO:82). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность qvqlvqsgaevkkpgasvkvsckasgyafttylvewirqrpgqglewmgvinpgsgstnyaqkfqgrvtmtvdrssttaymelsrlrsddtavyycaryaygywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:83), и/или домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqnvgtavawyqqkpgkspkqliysasnrytgvpsrfsgsgsgtdftltisslqpedlatyycqqystypftfgqgtkleik (SEQ ID NO:84). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность qvqlvesgggvvqpgrslrlscaasgftfssygmywvrqapgkglewvaviwydgsnkyyadsvkgrftisrdnskntlylqmnslraedtavyhcardpglryfdggmdvwgqgttvtvss (SEQ ID NO:87), и/или домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность diqltqspsflsasvgdrvtitcrasqgissylawyqqkpgkapkllifaastlhsgvpsrfsgsgsgteftltisslqpedfatyycqqlnsfpytfgqgtkleik (SEQ ID NO:88). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность qvqlvesgggvvqpgrslrlscaasgftfssygmhwvrqapgkglewvaviwydgsnkyyadsvkgrftisgdnskntlylqmnslraedtavyycarmfrgafdywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:89), и/или домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность aiqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqgirndlgwyqqkpgkapklliyaasslqsgvpsrfsgsgsgtdftltisglqpedsatyyclqdyiyyptfgqgtkveik (SEQ ID NO:90). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность qvqlvqsgaevkkpgasvkvsckasgysftnyavhwvrqapgqglewmgvispyygdttyaqkfqgrvtmtvdkssstaymelsrlrsddtavyycarrfegfyysmdywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:85), и/или домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность dvvmtqsplslpvtlgqpasiscrpsqslvhsngntylnwyqqrpgqspklliykvskrfsgvpdrfsgsgsgtdftlkisrveaedvgvyycsqsthvpltfgggtkveik (SEQ ID NO:86).

[0018] В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:156 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:156; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:157 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:157; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:158 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:158; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:159 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:159. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:160 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:160; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:161 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:161; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:162 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:162; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:163 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:163. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:164 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:164; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:165 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:165; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:166 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:166; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:167 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:167. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:168 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:168; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:169 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:169; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:170 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:170; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:171 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:171. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:172 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:172; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:173 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:173; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:174 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:174; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:175 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:175. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:176 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:176; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:177 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:177; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:178 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:178; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:179 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:179. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:181 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:181; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:182 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:182; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:183 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:183; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:184 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:184. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:185 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:185; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:186 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:186; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:187 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:187; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:188 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:188.

[0019] В некоторых вариантах осуществления третий антигенсвязывающий участок связывает полипептид HER2 человека. В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFNIKDTY (SEQ ID NO:1) или GFNIRDTY (SEQ ID NO:2), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPTNGYT (SEQ ID NO:3), IYPTQGYT (SEQ ID NO:4) или IYPTNAYT (SEQ ID NO:5), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SRWGGDGFYAMDY (SEQ ID NO:6), SRWGGEGFYAMDY (SEQ ID NO:7) или SRWGGSGFYAMDY (SEQ ID NO:8), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QDVNTA (SEQ ID NO:9) или QDVQTA (SEQ ID NO:10), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SAS (SEQ ID NO:11), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQHYTTP (SEQ ID NO:12). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFNIKDTY (SEQ ID NO:1), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPTNGYT (SEQ ID NO:3), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SRWGGDGFYAMDY (SEQ ID NO:6), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QDVNTA (SEQ ID NO:9), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SAS (SEQ ID NO:11), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQHYTTP (SEQ ID NO:12). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFNIRDTY (SEQ ID NO:2), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPTQGYT (SEQ ID NO:4), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SRWGGEGFYAMDY (SEQ ID NO:7), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QDVNTA (SEQ ID NO:9), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SAS (SEQ ID NO:11), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQHYTTP (SEQ ID NO:12). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFNIRDTY (SEQ ID NO:2), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPTNAYT (SEQ ID NO:5), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SRWGGSGFYAMDY (SEQ ID NO:8), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QDVNTA (SEQ ID NO:9), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SAS (SEQ ID NO:11), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQHYTTP (SEQ ID NO:12). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFNIRDTY (SEQ ID NO:2), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPTQGYT (SEQ ID NO:4), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SRWGGSGFYAMDY (SEQ ID NO:8), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QDVNTA (SEQ ID NO:9), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SAS (SEQ ID NO:11), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQHYTTP (SEQ ID NO:12). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFNIRDTY (SEQ ID NO:2), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPTNAYT (SEQ ID NO:5), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SRWGGEGFYAMDY (SEQ ID NO:7), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QDVNTA (SEQ ID NO:9), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SAS (SEQ ID NO:11), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQHYTTP (SEQ ID NO:12). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит последовательность CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность GFNIKDTY (SEQ ID NO:1), последовательность CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность IYPTNGYT (SEQ ID NO:3), и последовательность CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SRWGGDGFYAMDY (SEQ ID NO:6), и домен V_L3 содержит последовательность CDR-L1, содержащую аминокислотную последовательность QDVQTA (SEQ ID NO:10), последовательность CDR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SAS (SEQ ID NO:11), и последовательность CDR-L3, содержащую аминокислотную последовательность QQHYTTP (SEQ ID NO:12). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность evqlvesggglvqpggslrlscaasgfnikdtyihwvrqapgkglewvariyptngytryadsvkgrftisadtskntaylqmnslraedtavyycsrwggdgfyamdywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:72), Evqlvesggglvqpggslrlscaasgfnirdtyihwvrqapgkglewvariyptqgytryadsvkgrftisadtskntaylqmnslraedtavyycsrwggegfyamdywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:73), evqlvesggglvqpggslrlscaasgfnirdtyihwvrqapgkglewvariyptqgytryadsvkgrftisadtskntaylqmnslraedtavyycsrwggsgfyamdywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:74), evqlvesggglvqpggslrlscaasgfnirdtyihwvrqapgkglewvariyptnaytryadsvkgrftisadtskntaylqmnslraedtavyycsrwggsgfyamdywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:75), или evqlvesggglvqpggslrlscaasgfnirdtyihwvrqapgkglewvariyptnaytryadsvkgrftisadtskntaylqmnslraedtavyycsrwggegfyamdywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:76), и/или домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdvntavawyqqkpgkapklliysasflysgvpsrfsgsrsgtdftltisslqpedfatyycqqhyttpptfgqgtkveik (SEQ ID NO:77) или diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdvqtavawyqqkpgkapklliysasflysgvpsrfsgsrsgtdftltisslqpedfatyycqqhyttpptfgqgtkveik (SEQ ID NO:78). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность evqlvesggglvqpggslrlscaasgfnikdtyihwvrqapgkglewvariyptngytryadsvkgrftisadtskntaylqmnslraedtavyycsrwggdgfyamdywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:72), и/или домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdvntavawyqqkpgkapklliysasflysgvpsrfsgsrsgtdftltisslqpedfatyycqqhyttpptfgqgtkveik (SEQ ID NO:77). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность Evqlvesggglvqpggslrlscaasgfnirdtyihwvrqapgkglewvariyptqgytryadsvkgrftisadtskntaylqmnslraedtavyycsrwggegfyamdywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:73), и/или домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdvntavawyqqkpgkapklliysasflysgvpsrfsgsrsgtdftltisslqpedfatyycqqhyttpptfgqgtkveik (SEQ ID NO:77). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность evqlvesggglvqpggslrlscaasgfnirdtyihwvrqapgkglewvariyptnaytryadsvkgrftisadtskntaylqmnslraedtavyycsrwggsgfyamdywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:75), и/или домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdvntavawyqqkpgkapklliysasflysgvpsrfsgsrsgtdftltisslqpedfatyycqqhyttpptfgqgtkveik (SEQ ID NO:77). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность evqlvesggglvqpggslrlscaasgfnirdtyihwvrqapgkglewvariyptqgytryadsvkgrftisadtskntaylqmnslraedtavyycsrwggsgfyamdywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:74), и/или домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdvntavawyqqkpgkapklliysasflysgvpsrfsgsrsgtdftltisslqpedfatyycqqhyttpptfgqgtkveik (SEQ ID NO:77). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность evqlvesggglvqpggslrlscaasgfnirdtyihwvrqapgkglewvariyptnaytryadsvkgrftisadtskntaylqmnslraedtavyycsrwggegfyamdywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:76), и/или домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdvntavawyqqkpgkapklliysasflysgvpsrfsgsrsgtdftltisslqpedfatyycqqhyttpptfgqgtkveik (SEQ ID NO:77). В некоторых вариантах осуществления домен V_H3 содержит аминокислотную последовательность evqlvesggglvqpggslrlscaasgfnikdtyihwvrqapgkglewvariyptngytryadsvkgrftisadtskntaylqmnslraedtavyycsrwggdgfyamdywgqgtlvtvss (SEQ ID NO:72), и/или домен V_L3 содержит аминокислотную последовательность diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdvqtavawyqqkpgkapklliysasflysgvpsrfsgsrsgtdftltisslqpedfatyycqqhyttpptfgqgtkveik (SEQ ID NO:78).

[0020] В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:100 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:100; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:101 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:101; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:102 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:102; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:103 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:103. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:104 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:104; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:105 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:105; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:106 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:106; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:107 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:107. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:112 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:112; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:113 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:113; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:114 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:114; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:115 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:115. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:116 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:116; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:117 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:117; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:118 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:118; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:119 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:119. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:120 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:120; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:121 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:121; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:122 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:122; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:123 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:123. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:124 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:124; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:125 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:125; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:126 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:126; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:127 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:127. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:128 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:128; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:129 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:129; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:130 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:130; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:131 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:131. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:132 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:132; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:133 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:133; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:134 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:134; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:135 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:135. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:136 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:136; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:137 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:137; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:138 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:138; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:139 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:139. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:140 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:140; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:141 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:141; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:142 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:142; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:143 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:143. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:144 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:144; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:145 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:145; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:146 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:146; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:147 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:147. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:148 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:148; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:149 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:149; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:150 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:150; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:151 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:151. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:152 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:152; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:153 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:153; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:154 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:154; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:155 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:155. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:286 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:286; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:287 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:287; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:288 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:288; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:289 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:289. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:290 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:290; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:291 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:291; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:292 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:292; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:293 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:293. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:294 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:294; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:295 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:295; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:296 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:296; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:297 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:297. В некоторых вариантах осуществления первая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:298 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:298; вторая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:299 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:299; третья полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:300 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:300; и четвертая полипептидная цепь содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO:301 или аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична аминокислотной последовательности под SEQ ID NO:301.

[0021] В некоторых вариантах осуществления, которые могут представлять собой объединение любых других вариантов осуществления, описанных в данном документе, по меньшей мере один из L₁, L₂, L₃ или L₄ независимо имеет длину, составляющую 0 аминокислот. В некоторых вариантах осуществления каждый из L₁, L₂, L₃ и L₄ независимо имеет длину, составляющую ноль аминокислот, или содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из GGGGSGGGGS (SEQ ID NO:69), GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 70), S, RT, TKGPS (SEQ ID NO: 68), GQPKAAP (SEQ ID NO: 67) и GGSGSSGSGG (SEQ ID NO: 71). В некоторых вариантах осуществления каждый из L₁, L₂, L₃ и L₄ независимо содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из GGGGSGGGGS (SEQ ID NO:69), GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO:70), S, RT, TKGPS (SEQ ID NO:68), GQPKAAP (SEQ ID NO: 67) и GGSGSSGSGG (SEQ ID NO:71). В некоторых вариантах осуществления L₁ содержит последовательность GQPKAAP (SEQ ID NO: 67), L₂ содержит последовательность TKGPS (SEQ ID NO:68), L₃ содержит последовательность S, и L₄ содержит последовательность RT. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере один из L₁, L₂, L₃ или L₄ содержит последовательность DKTHT (SEQ ID NO:66). В некоторых вариантах осуществления L₁, L₂, L₃ и L₄ содержат последовательность DKTHT (SEQ ID NO:66).

[0022] В некоторых вариантах осуществления, которые могут представлять собой объединение любых других вариантов осуществления, описанных в данном документе, домены шарнир-C_H2-C_H3 второй и третьей полипептидных цепей представляют собой домены шарнир-IgG4-C_H2-C_H3 человека, и при этом каждый из доменов шарнир-C_H2-C_H3 содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 234 и 235 IgG4 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой F234A и L235A. В некоторых вариантах осуществления домены шарнир-C_H2-C_H3 второй и третьей полипептидных цепей представляют собой домены шарнир-IgG4-C_H2-C_H3 человека, и при этом каждый из доменов шарнир-C_H2-C_H3 содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 233-236 IgG4 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой E233P, F234V, L235A и делецию в положении 236 В некоторых вариантах осуществления домены шарнир-C_H2-C_H3 второй и третьей полипептидных цепей представляют собой домены шарнир-IgG4-C_H2-C_H3 человека, и при этом каждый из доменов шарнир-C_H2-C_H3 содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 228 и 409 IgG4 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой S228P и R409K. В некоторых вариантах осуществления домены шарнир-C_H2-C_H3 второй и третьей полипептидных цепей представляют собой домены шарнир-IgG1-C_H2-C_H3 человека, и при этом каждый из доменов шарнир-C_H2-C_H3 содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 234, 235 и 329 IgG1 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой L234A, L235A и P329A. В некоторых вариантах осуществления домены шарнир-C_H2-C_H3 второй и третьей полипептидных цепей представляют собой домены шарнир-IgG1-C_H2-C_H3 человека, и при этом каждый из доменов шарнир-C_H2-C_H3 содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 298, 299 и 300 IgG1 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой S298N, T299A и Y300S. В некоторых вариантах осуществления домен шарнир-C_H2-C_H3 второй полипептидной цепи содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 349, 366, 368 и 407 IgG1 или IgG4 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой Y349C, T366S, L368A и Y407V; и где домен шарнир-C_H2-C_H3 третьей полипептидной цепи содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 354 и 366 IgG1 или IgG4 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой S354C и T366W. В некоторых вариантах осуществления домен шарнир-C_H2-C_H3 второй полипептидной цепи содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 354 и 366 IgG1 или IgG4 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой S354C и T366W; и где домен шарнир-C_H2-C_H3 третьей полипептидной цепи содержит аминокислотные замены в положениях, соответствующих положениям 349, 366, 368 и 407 IgG1 или IgG4 человека в соответствии с EU-индексом, где аминокислотные замены представляют собой Y349C, T366S, L368A и Y407V.

[0023] В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены выделенные молекулы нуклеиновой кислоты, содержащие нуклеотидную последовательность, кодирующую связывающий белок по любому из вышеуказанных вариантов осуществления. В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены векторы экспрессии, содержащие молекулу нуклеиновой кислоты по любому из вышеуказанных вариантов осуществления. В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены выделенные клетки-хозяева, содержащие молекулу нуклеиновой кислоты по любому из вышеуказанных вариантов осуществления или вектор экспрессии по любому из вышеуказанных вариантов осуществления. В некоторых вариантах осуществления клетка-хозяин представляет собой клетку млекопитающего или насекомого.

[0024] В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены фармацевтические композиции, содержащие связывающий белок по любому из вышеуказанных вариантов осуществления и фармацевтически приемлемый носитель.

[0025] В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены способы предупреждения и/или лечения рака у пациента, включающие введение пациенту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного связывающего белка или фармацевтической композиции по любому из вышеуказанных вариантов осуществления. В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены связывающий белок или фармацевтическая композиция в соответствии с любым из указанных выше вариантов осуществления для применения в способе предупреждения и/или лечения рака у пациента, где способ включает введение пациенту терапевтически эффективного количества связывающего белка или фармацевтической композиции. В некоторых вариантах осуществления в данном документе предусмотрены связывающий белок или фармацевтическая композиция в соответствии с любым из указанных выше вариантов осуществления для применения в производстве лекарственного препарата для предупреждения и/или лечения рака у пациента.

[0026] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере один связывающий белок вводят совместно с химиотерапевтическим средством. В некоторых вариантах осуществления пациент представляет собой человека.

[0027] В некоторых вариантах осуществления третий антигенсвязывающий участок связывает полипептид CD38 человека, и при этом раковые клетки индивидуума или пациента экспрессируют CD38. В некоторых вариантах осуществления рак представляет собой множественную миелому. В некоторых вариантах осуществления рак представляет собой острый миелоидный лейкоз (AML), острый лимфобластный лейкоз (ALL), хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL) или B-клеточную лимфому. В некоторых вариантах осуществления перед введением связывающего белка пациента подвергали лечению даратумумабом без периода вымывания.

[0028] В некоторых вариантах осуществления третий антигенсвязывающий участок связывает полипептид HER2 человека, и при этом раковые клетки индивидуума или пациента экспрессируют HER2. В некоторых вариантах осуществления рак представляет собой рак молочной железы, рак толстой кишки, рак желудка или немелкоклеточный рак легкого (NSCLC).

[0029] В некоторых вариантах осуществления в данном документе представлен способ размножения специфических в отношении вируса Т-клеток памяти, предусматривающий приведение специфической в отношении вируса Т-клетки памяти в контакт со связывающим белком, где связывающий белок содержит четыре полипептидные цепи, которые образуют три антигенсвязывающих участка, где первая полипептидная цепь содержит структуру, представленную формулой:

V_L2-L₁-V_L1-L₂-C_L [I],