ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к мутеинам ИЛ-2, связывающимся с субъединицей α рецептора ИЛ-2, но не имеющим измеримого связывания с субъединицей β рецептора ИЛ-2. Изобретение также относится к композициям, наборам, способам и применению, включающему такие мутеины ИЛ-2.

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

По настоящей заявке испрашивается приоритет по временной заявке США № 63/129712, поданной 23 декабря 2020 года, содержание которой, таким образом, включено в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.

ССЫЛКА НА СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ, ПОДАННЫЙ В ЭЛЕКТРОННОМ ВИДЕ

Список последовательностей к настоящей заявке подан в электронном виде посредством EFS-Web в формате списка последовательностей ASCII с названием файла "25184WOPCT-SEQLIST-21NOV2021.TXT", датой создания 21 ноября 2021 года и размером 132 КБ. Этот список последовательностей, поданный посредством EFS-Web, является частью настоящего описания и включен в него в качестве ссылки в полном объеме.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Биологическая активность интерлейкина-2 (ИЛ-2) опосредована через многосубъединичный комплекс рецептора ИЛ-2 (ИЛ-2R), содержащий две или три полипептидных субъединицы: CD25 (субъединица α ИЛ-2R) повышает аффинность комплекса ИЛ-2R с ИЛ-2, в то время как CD122 (субъединица β ИЛ-2R) и CD132 (субъединица γ ИЛ-2R) необходимы для передачи сигнала. Димерный комплекс ИЛ-2R β/γ и тримерный комплекс ИЛ-2R α/β/γ дифференциально экспрессируются различными подтипами иммунными клетками. Например, высокоаффинный тримерный комплекс ИЛ-2R α/β/γ конститутивно экспрессируется на высоких уровнях регуляторными T-клетками (T_reg) и транзиторно экспрессируется на более низких уровнях эффекторными CD4⁺ T-клетками, в то время как димерный комплекс ИЛ-2R β/γ с умеренной аффинностью экспрессируется, главным образом, на CD8⁺ T-клетках и естественных киллерах (Stauber et al.,(2006) PNAS USA103(8):2788-93; Malek and Castro, (2010) Immunity 33(2):153-165; Ross and Cantrell, (2018) Annu Rev Immunol 36:418-433). Таким образом, мутеины ИЛ-2 со склонностью к связыванию с димерным или тримерным комплексом ИЛ-2R могут активировать разные типы клеток и опосредовать иммунную активацию или супрессию, соответственно. Сохраняется неудовлетворенная потребность в идентификации инновационных мутеинов ИЛ-2, которые более селективно активируют сигналы ИЛ-2R в различных типах клеток для лечения иммуноопосредованных заболеваний, включая биологически оптимизированные мутеины ИЛ-2, селективно связывающиеся с субъединицей α ИЛ-2R, для лечения аутоиммунных и воспалительных заболеваний.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к мутеинам ИЛ-2, связывающимся с субъединицей α рецептора ИЛ-2, но не имеющим измеримое связывание с субъединицей β рецептора ИЛ-2. Настоящее изобретение также относится к способам или применению, включающему такие мутеины ИЛ-2, композициям или наборам, содержащим такие мутеины ИЛ-2, выделенные нуклеиновые кислоты и векторы, содержащие полинуклеотидные последовательности, кодирующие такие мутеины ИЛ-2, клетки (например, клетки-хозяева) содержащий такие выделенные нуклеиновые кислоты или векторы, и способы получения таких мутеинов ИЛ-2.

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к мутеину ИЛ-2, связывающемуся с субъединицей α рецептора ИЛ-2, но не имеющему связывание напрямую с субъединицей β рецептора ИЛ-2.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутеину ИЛ-2, содержащему первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1 или 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 или 2 заменена N, и P в положении 33 SEQ ID NO: 1 или 2 заменена R, где полипептид, необязательно, содержит одну или более дополнительных замен аминокислот относительно SEQ ID NO: 1 или 2. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, и P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, где полипептид, необязательно, содержит одну или более дополнительных замен аминокислот относительно SEQ ID NO: 1. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, и P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, где полипептид, необязательно, содержит одну или более дополнительных замен аминокислот относительно SEQ ID NO: 2.

В конкретных вариантах осуществления описанных выше мутеинов ИЛ-2 одна или более дополнительных замен аминокислот относительно SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 2 выбраны из группы, состоящей из: замены E на S в положении 67, замены V на A в положении 68, замены N на R в положении 70 и замены Q на P в положении 73 SEQ ID NO: 1 или 2.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутеину ИЛ-2, содержащему первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1 или 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 или 2 заменена N, и E в положении 67 SEQ ID NO: 1 или 2 заменена S, где полипептид, необязательно, содержит одну или более дополнительных замен аминокислот относительно SEQ ID NO: 1 или 2. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, и E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S, где полипептид, необязательно, содержит одну или более дополнительных замен аминокислот относительно SEQ ID NO: 1. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, и E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S, где полипептид, необязательно, содержит одну или более дополнительных замен аминокислот относительно SEQ ID NO: 2.

В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутеину ИЛ-2, содержащему первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1 или 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 или 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 или 2 заменена R, и E в положении 67 SEQ ID NO: 1 или 2 заменена S, где полипептид, необязательно, содержит одну или более дополнительных замен аминокислот относительно SEQ ID NO: 1 или 2. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, и E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S, где полипептид, необязательно, содержит одну или более дополнительных замен аминокислот относительно SEQ ID NO: 1.1. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, и E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S, где полипептид, необязательно, содержит одну или более дополнительных замен аминокислот относительно SEQ ID NO: 2.

В других вариантах осуществления мутеинов ИЛ-2 первый полипептид дополнительно содержит замену V на A в положении 68, замену N на R в положении 70 или замену Q на P в положении 73 SEQ ID NO: 1 или 2.

В других вариантах осуществления мутеинов ИЛ-2 первый полипептид дополнительно содержит любые две из трех следующих замен: замену V на A в положении 68, замену N на R в положении 70 или замену Q на P в положении 73 SEQ ID NO: 1 или 2.

В других вариантах осуществления мутеинов ИЛ-2 первый полипептид дополнительно содержит замену V на A в положении 68, замену N на R в положении 70 и замену Q на P в положении 73 SEQ ID NO: 1 или 2.

В некоторых вариантах осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 11. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 12.

В некоторых вариантах осуществления мутеинов ИЛ-2 первый полипептид дополнительно содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, 14 или 15. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15.

В других вариантах осуществления мутеинов ИЛ-2 первый полипептид дополнительно содержит линкер, приведенный в SEQ ID NO: 16. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 16. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 16. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 16.

В различных вариантах осуществления мутеин ИЛ-2 дополнительно содержит второй полипептид. В некоторых вариантах осуществления первый и второй полипептид являются одинаковыми. В других вариантах осуществления первый и второй полипептид не являются одинаковыми.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55.

В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18.

В некоторых вариантах осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид и второй полипептид, где первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В одном из вариантов осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В еще одном варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В одном из вариантов осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 25; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В еще одном варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 26; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 27; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 28; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17.

В некоторых вариантах осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид и второй полипептид, где первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В одном из вариантов осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В еще одном варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В одном из вариантов осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 25; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В еще одном варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 26; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 27; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 28; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55.

В некоторых вариантах осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид и второй полипептид, где первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37 или 38; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В одном из вариантов осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 30; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В еще одном варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 31; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 32; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 33; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В одном из вариантов осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 34; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 35; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В еще одном варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 36; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 37; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 38; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18.

В некоторых вариантах осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид и второй полипептид, где первый и второй полипептиды содержат аминокислотную последовательность, являющуюся одной и той же. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность каждого из первого полипептида и второго полипептида содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53 или 54. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 47. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 48. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 49. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 50. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 51. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 52. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 53. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 54.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей любой из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, и фармацевтически приемлемый носитель.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения ИЛ-2-опосредованного заболевания у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании.

В некоторых вариантах осуществления ИЛ-2-опосредованное заболевание является заболеванием иммунной системы. В других вариантах осуществления ИЛ-2-опосредованное заболевание является аутоиммунным заболеванием.

В некоторых вариантах осуществления заболевание иммунной системы представляет собой ревматоидный артрит, болезнь Крона, псориаз, псориатический артрит, рассеянный склероз, системную красную волчанку (SLE), кожную красную волчанку (CLE), волчаночный нефрит, анкилозирующий спондилит, диабет I типа, синдром Шегрена, язвенный колит, оптикомиелит, целиакию, склеродермию, височный артериит, атопический дерматит, очаговую алопецию, реакцию "трансплантат против хозяина" (РТПХ), аутоиммунный гепатит, первичный склерозирующий холангит или воспалительную миопатию. В одном из вариантов осуществления заболевание иммунной системы представляет собой ревматоидный артрит. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой болезнь Крона. В еще одном варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой псориаз. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой псориатический артрит. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой рассеянный склероз. В одном из вариантов осуществления заболевание иммунной системы представляет собой SLE. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой CLE. В еще одном варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой волчаночный нефрит. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой анкилозирующий спондилит. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой диабет I типа. В одном из вариантов осуществления заболевание иммунной системы представляет собой синдром Шегрена. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой язвенный колит. В еще одном варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой оптикомиелит. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой целиакию. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой склеродермию. В одном из вариантов осуществления заболевание иммунной системы представляет собой височный артериит. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой атопический дерматит. В еще одном варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой очаговую алопецию. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой РТПХ. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой аутоиммунный гепатит. В одном из вариантов осуществления заболевание иммунной системы представляет собой первичный склерозирующий холангит. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой воспалительную миопатию.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу селективной активации регуляторных T-клеток без активации CD8⁺ T-клеток у индивидуума, включающему введение нуждающемуся в этом индивидууму терапевтически эффективного количества любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленный в настоящем описании.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу селективной активации клеток, экспрессирующих субъединицу β рецептора ИЛ-2, но не активации клеток, экспрессирующих субъединица α рецептора ИЛ-2 у индивидуума, включающему введение нуждающемуся в этом индивидууму терапевтически эффективного количества любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании.

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к выделенной нуклеиновой кислоте, содержащей последовательность нуклеотидов, кодирующий любой из различных полипептидов различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании. В одном из вариантов осуществления выделенная нуклеиновая кислота кодирует любой из различных первых полипептидов различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании. В другом варианте осуществления выделенная нуклеиновая кислота кодирует любой из различных вторых полипептидов различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании. В еще одном варианте осуществления выделенная нуклеиновая кислота кодирует любой из различных первых полипептидов и различных вторых полипептидов различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к экспрессирующему вектору, содержащему любой из различных выделенных нуклеиновых кислот, представленных в настоящем описании.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к клетке-хозяину, содержащему любую из различных выделенных нуклеиновых кислот, представленных в настоящем описании, или любой из различных экспрессирующих векторов, представленных в настоящем описании.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу получения любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании. В одном из вариантов осуществления способ включает культивирование любой из различных клеток-хозяев, представленных в настоящем описании, в условиях, в которых экспрессируется мутеин ИЛ-2. В другом варианте осуществления способ включает экспрессию любого из различных экспрессирующих векторов, представленных в настоящем описании в условиях, в которых экспрессируется мутеин ИЛ-2. В еще одном варианте осуществления способ включает экспрессию любого из различных выделенных нуклеиновых кислот, представленных в настоящем описании в условиях, в которых экспрессируется мутеин ИЛ-2.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании, для лечения ИЛ-2-опосредованного заболевания у индивидуума.

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к применению любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании, для лечения ИЛ-2-опосредованного заболевания у индивидуума.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании, для получения лекарственного средства для лечения ИЛ-2-опосредованного заболевания у индивидуума.

В некоторых вариантах осуществления различного применения, представленного в настоящем описании, ИЛ-2-опосредованное заболевание является заболеванием иммунной системы. В других вариантах осуществления различного применения, представленного в настоящем описании, ИЛ-2-опосредованное заболевание является аутоиммунным заболеванием.

В некоторых вариантах осуществления различного применения, представленного в настоящем описании, заболевание иммунной системы представляет собой ревматоидный артрит, болезнь Крона, псориаз, псориатический артрит, рассеянный склероз, системную красную волчанку (SLE), кожную красную волчанку (CLE), волчаночный нефрит, анкилозирующий спондилит, диабет I типа, синдром Шегрена, язвенный колит, оптикомиелит, целиакию, склеродермию, височный артериит, атопический дерматит, очаговую алопецию, реакция "трансплантат против хозяина" (РТПХ), аутоиммунный гепатит, первичный склерозирующий холангит или воспалительную миопатию. В одном из вариантов осуществления заболевание иммунной системы представляет собой ревматоидный артрит. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой болезнь Крона. В еще одном варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой псориаз. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой псориатический артрит. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой рассеянный склероз. В одном из вариантов осуществления заболевание иммунной системы представляет собой SLE. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой CLE. В еще одном варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой волчаночный нефрит. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой анкилозирующий спондилит. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой диабет I типа. В одном из вариантов осуществления заболевание иммунной системы представляет собой синдром Шегрена. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой язвенный колит. В еще одном варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой оптикомиелит. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой целиакию. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой склеродермию. В одном из вариантов осуществления заболевание иммунной системы представляет собой височный артериит. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой атопический дерматит. В еще одном варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой очаговую алопецию. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой РТПХ. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой аутоиммунный гепатит. В одном из вариантов осуществления заболевание иммунной системы представляет собой первичный склерозирующий холангит. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой воспалительную миопатию.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На фиг. 1A-1C показана способность примеров мутеинов ИЛ-2 активировать ответ pSTAT5 в первичных T_reg-клетках человека (CD3⁺CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺) (фиг. 1A), CD8⁺ T-клетках (CD3⁺CD8⁺) (фиг. 1B) или общепринятых CD4⁺ T-клетках (T_conv) (CD3⁺CD4⁺CD25^-FoxP3^-) (фиг. 1C).

На фиг. 2A-2C показана способность других примеров мутеинов ИЛ-2 активировать ответ pSTAT5 в первичных T_reg-клетках человека (CD3⁺CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺) (фиг. 2A), CD8⁺ T-клетках (CD3⁺CD8⁺) (фиг. 2B) или T_conv-клетках (CD3⁺CD4⁺CD25^-FoxP3^-) (фиг. 2C).

На фиг. 3A-3C показана способность других примеров мутеинов ИЛ-2 активировать ответ pSTAT5 в первичных T_reg-клетках человека (CD3⁺CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺) (фиг. 2A), CD8⁺ T-клетках (CD3⁺CD8⁺) (фиг. 2B) или T_conv-клетках (CD3⁺CD4⁺CD25^-FoxP3^-) (фиг. 2C).

На фиг. 4A-4C показана способность примеров мутеинов ИЛ-2 активировать ответ pSTAT5 в первичных T_reg-клетках макака-резуса (CD3⁺CD4⁺CD25⁺CD127^-FoxP3⁺) (фиг. 4A), CD8⁺ T-клетках (CD3⁺CD8⁺) (фиг. 4B) или T_conv-клетках (CD3⁺CD4⁺CD25^-FoxP3^-) (фиг. 4C).

На фиг. 5A-5C показана способность примеров мутеинов ИЛ-2 активировать ответ pSTAT5 в первичных T_reg-клетках макака-резуса (CD3⁺CD4⁺CD25⁺CD127^-FoxP3⁺) (фиг. 5A), CD8⁺ T-клетках (CD3⁺CD8⁺) (фиг. 5B) или T_conv-клетках (CD3⁺CD4⁺CD25^-FoxP3^-) (фиг. 5C).

На фиг. 6A-6D показа экспансия T_reg человека в мышах xeno-РТПХ, которым вводили примеры мутеинов ИЛ-2. На фиг. 6A показаны результаты для 21BMT, на фиг.6B показаны результаты для DNB558, на фиг. 6C показаны результаты для 48BMP, и на фиг. 6D показаны результаты для DNB557. Процент T_reg в CD4⁺ T-клетках человека в селезенках количественно анализировали посредством FACS. Кратное изменение в T_reg вычисляли как (% T_reg в CD4⁺ T-клетках человека у подвергнутой введению мыши/средний % T_reg в CD4⁺ T-клетках человека у группы изотипического контроля). Концентрации мутеинов в крови измеряли ежедневно и строили график с использованием оси Y на правой стороне. * статистически значимые различия по сравнению с изотипическим контролем по результатам 1-стороннего ANOVA с поправкой Шидака на множественность сравнения.

На фиг. 7A-7D показано повышение экспансии CD25 на T_reg человека в модели xeno-РТПХ, которым вводили примеры мутеинов ИЛ-2. Н фиг. 7A показаны результаты для 21BMT, на фиг.7B показаны результаты для DNB558, на фиг.7C показаны результаты для 48BMP, и на фиг. 7D показаны результаты для DNB557. Среднюю интенсивность флуоресценции (MFI) CD25 на CD4⁺ T_reg-клетках человека в селезенке количественно анализировали посредством FACS. Кратное изменение вычисляли как (MFI CD25 на CD4⁺ T_reg-клетках человека у подвергнутой введению мыши/средняя MFI CD25 на CD4⁺ T_reg-клетках человека в группе изотипического контроля). * статистически значимые различия по сравнению с изотипическим контролем по результатам 1-стороннего ANOVA с поправкой Шидака на множественность сравнения.

На фиг. 8A-8D показана концентрация (нМ) с течением времени и кратное изменение относительно базового уровня в T_reg с течением времени по результатам исследования PK/PD, представленного в примерах 8. На фиг. 8A показаны результаты для 21BMT, на фиг. 8B показаны результаты для DNB558, на фиг. 8C показаны результаты для 48BMP, и на фиг. 8D показаны результаты для DNB557.

Фиг. 9A-9D являются неограничивающими схемами, на которых показана ориентация моновалентных и бивалентных мутеинов ИЛ-2. На фиг. 9A показана бивалентная молекула, содержащая мутеин ИЛ-2, связанный на C-конце с N-концом Fc. На фиг. 9B показана моновалентная молекула, содержащая одну цепь с мутеином ИЛ-2, связанным на C-конце с N-концом Fc, и вторая цепь является Fc-частью; две Fc-области сопоставлены с помощью комплементарных мутаций "выступов" и "впадин". На фиг. 9C показана бивалентная молекула, содержащая Fc, связанную на C-конце с N-концом мутеина ИЛ-2. На фиг. 9D показана моновалентная молекула, содержащая Fc, связанную на C-конце с N-концом мутеина ИЛ-2, и вторая цепь является Fc-частью; две Fc-части сопоставлены с помощью комплементарных мутаций "выступов" и "впадин".

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Определение

Для лучшего понимания настоящего изобретения некоторые технические и научные термины конкретно определены ниже. Если конкретно не определено где-либо в настоящем описании, все другие технические и научные термины, используемые в настоящем описании, обладают значением, общепринято понятным специалисту в области, к которой принадлежит настоящее изобретение.

В рамках изобретения, включая формулу изобретения, термины в единственном числе включают соответствующие ссылки на множественное число, если контекст четко не указывает на иное. Аналогично, термины во множественном числе включают соответствующие ссылки на единственное число, если контекст четко не указывает на иное.

Термин "мутеин ИЛ-2" относится к молекуле, содержащей частичную или полноразмерную аминокислотную последовательность ИЛ-2 человека с одной или более заменами, делециями или добавлениями аминокислот. Термин "мутеин ИЛ-2" включает любые слитые белки, белковые конъюгаты или многосубъединичные белки (например, димерные), содержащие частичную или полноразмерную аминокислотную последовательность ИЛ-2 человека с одной или более заменами, делециями или добавлениями аминокислот. В некоторых вариантах осуществления мутеин ИЛ-2 содержит одну частичную или полноразмерную аминокислотную последовательность ИЛ-2 человека с одной или более заменами, делециями или добавлениями аминокислот, и, таким образом, его обозначают как "моновалентный" мутеин ИЛ-2. В некоторых вариантах осуществления мутеин ИЛ-2 содержит две частичные или полноразмерные аминокислотные последовательности ИЛ-2 человека, каждая из которых содержит одну или более замен, делеций или добавлений аминокислот, и, таким образом, его обозначают как "бивалентный" мутеин ИЛ-2. Полноразмерная аминокислотная последовательность ИЛ-2 дикого типа человека приведена в SEQ ID NO: 39. Частичная аминокислотная последовательность ИЛ-2 человек содержит по меньшей мере 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% полноразмерной аминокислотной последовательности ИЛ-2 дикого типа человека, приведенной в SEQ ID NO: 39.

В рамках изобретения каждый конкретный мутеин ИЛ-2, такой как "86BCH", "99BHY", "43BGO", "44BGO", "54BGO", "47BJO", "48BJO", "49BJO", "65BJO", "44BJP", "45BJP", 46BJP" или "47BJP", включает частичную или полноразмерную аминокислотную последовательность ИЛ-2 человека с конкретными заменами, делециями или добавлениями аминокислот, указанными в таблице 1, а также любые слитые белки, белковые конъюгаты или многосубъединичные белки (например, димерные), содержащие частичную или полноразмерную аминокислотную последовательность ИЛ-2 человека с конкретными заменами, делециями или добавлениями аминокислот.

Термин "Fc"-область или -домен относится к фрагменту тяжелой цепи, содержащему домены C_H2 и C_H3 антитела. Антитело может принадлежать к любому классу (например, IgG, IgE, IgM, IgD и IgA) или любому подклассу (например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2) молекулы иммуноглобулина. Две Fc-области или -домена могут образовывать димер посредством двух или более дисульфидных связей и гидрофобных взаимодействий доменов C_H3. "Вариант Fc" содержит одну или более замен, делеций или инсерций аминокислот по сравнению с Fc-областью или -доменом дикого типа.

Термины "связывается" или "связывание" относятся к взаимодействию между молекулами, включающему, например, образование комплекса. Взаимодействия могут являться, например, нековалентными взаимодействиями, включая водородные связи, ионные связи, гидрофобные взаимодействия и/или вандерваальсовы взаимодействия. Комплекс также может включать связывание двух или более молекул, удерживаемых ковалентными или нековалентными связями, взаимодействиями или силами. Если не указано иначе, в рамках изобретения термин "аффинность связывания" относится к характерной аффинности связывания, отражающей взаимодействие 1:1 между членами связывающейся пары (например, мутеином ИЛ-2 и субъединицей рецептора ИЛ-2). Соотношение скорости диссоциации (k_off) и скорости ассоциации (k_on) мутеина ИЛ-2 и субъединицы рецептора ИЛ-2 (k_off/k_on) является "константой диссоциации" (или "равновесной константой диссоциации", что используют взаимозаменяемо) KD, обратно пропорциональной аффинности. Чем ниже значение KD, тем выше аффинность. Значение KD варьируется для разных комплексов мутеина ИЛ-2 и субъединицы рецептора ИЛ-2 и зависит от k_on и k_off. Константа диссоциации KD мутеина ИЛ-2, представленного в настоящем описании, можно определять любым способом, представленным в настоящем описании, или любым другим способом, хорошо известным специалистам в этой области, таким как анализ поверхностного плазмонного резонанса (SPR), включая, в качестве неограничивающих примеров, Biacore и KinExA.

Термин "Введение" в отношении животного, человека, индивидуума, клетки, ткани, органа или биологической жидкости, относится к контакту экзогенного фармацевтического, терапевтического, диагностического средства или композиции с животным, человеком, индивидуумом, клеткой, тканью, органом или биологической жидкостью.

Термин "индивидуум" включает любой организм, предпочтительно - животное, более предпочтительно - млекопитающее (например, человека, крысу, мышь, собаку, кошку или кролика). В предпочтительном варианте осуществления термин "индивидуумы" относится к человеку. "Нуждающийся в этом" индивидуум является индивидуумом, у которого диагностировано, который, как предполагают, имеет или предрасположен к заболеванию или нарушению, опосредованному ИЛ-2, или индивидуумом, для которого желательна профилактика ИЛ-2-опосредованного нарушения.

Термин "эффекторные функции" относится к видам биологической активности, приписываемым Fc-области антитела, которая варьируется с изотипом антитела. Примеры эффекторных функций антител включают: связывание C1q и обусловленную комплементом цитотоксичность (CDC); связывание Fc-рецептора; антителозависимую клеточную цитотоксичность (ADCC); фагоцитоз; отрицательную регуляцию рецепторов поверхности клеток (например, B-клеточного рецептора) и активацию B-клеток.

В рамках изобретения выражения "клетка", "клетка-хозяин", "линия клеток" и "культура клеток" используют взаимозаменяемо, и все такие обозначения включают потомство.

Термины "лечить" или "лечение" означает введение средства, такого как композиция, содержащая любые из мутеинов ИЛ-2 по настоящему изобретению, внутренне или внешне индивидууму или пациенту, имеющему один или более симптомов заболевания или, как предполагают, имеющему заболевание, для которого средство имеет терапевтическую активность. Как правило, средство вводят в количестве, эффективном для облегчения одного или более симптомов заболевания у подвергаемого лечению индивидуума или популяции посредством индуцирования регрессирования или посредством ингибирования, задержки или замедления прогрессирования таких симптомов в любой клинически измеримой степени. Количество средства, эффективное для облегчения любого конкретного симптома заболевания, может варьироваться в зависимости от факторов, таких как состояние заболевания, возраст и масса пациента, и способности лекарственного средства вызывать желаемый ответ у индивидуума. Облегчение симптома заболевания можно оценивать посредством любого клинического измерения, как правило, используемого лечащими врачами или другими специалистами в области здравоохранения для оценки тяжести или статуса прогрессирования этого симптома. Термин дополнительно включает отсрочку развития симптомов, ассоциированных с нарушением и/или, снижение тяжести симптомов такого нарушения. Термины дополнительно включают улучшение существующих неконтролируемых или нежелательных симптомов, профилактику дополнительных симптомов и улучшение или профилактику основополагающих причин таких симптомов. Таким образом, термины означают, что благоприятный результат вызывают у позвоночного с нарушением, заболеванием или симптомом или потенциалом развития такого нарушения, заболевания или симптома.

Термины "предотвращать" и "профилактика" относятся к снижению вероятности дебюта (или рецидивирования) заболевания, нарушения, состояния или ассоциированных с ним симптомов (например, РТПХ, SLE, CLE, рассеянного склероза, язвенного колита или болезни Крона).

Термины "ИЛ-2-опосредованное заболевание", "ИЛ-2-опосредованный нарушение" и "ИЛ-2-опосредованное состояние" используют взаимозаменяемо, и они относятся к любому заболеванию, нарушению или состоянию, полностью или частично вызванному или являющемуся результатом передачи сигнала ИЛ-2, и/или, альтернативно, любому заболеванию, нарушению или состоянию, при котором желательно модулировать передачу сигнала ИЛ-2 систематически или в выбранных типах клеток, тканях или органах.

В рамках изобретения термин "терапевтически эффективное количество" относится к количеству средства (например, мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любого другого средства, представленного в настоящем описании), достаточному для снижения и/или улучшения тяжести и/или длительности указанного заболевания, нарушения или состояния и/или связанного с ним симптома (например, РТПХ, SLE, CLE, рассеянного склероза, язвенного колита или болезни Крона). "Терапевтически эффективное количество" вещества/молекулы/средства по настоящему изобретению (например, мутеина ИЛ-2) может варьироваться в зависимости от таких факторов, как состояние заболевания, возраст, пол и массы индивидуума, и возможности вещества/молекулы/средства вызывать желаемый ответ у индивидуума. Терапевтически эффективное количество включает количество, при котором любые токсические или вредные эффекты вещества/молекулы/средства перевешены терапевтически положительным эффектом. В некоторых вариантах осуществления термин "терапевтически эффективное количество" относится к количеству мутеину ИЛ-2 или другого средства (например, лекарственного средства), эффективному для "лечения" заболевания, нарушения или состояния у индивидуума или млекопитающего.

В рамках изобретения "носители" включают фармацевтически приемлемые носители, эксципиенты или стабилизаторы, нетоксичные для клетки или млекопитающего, подвергаемого их воздействию в используемых дозах и концентрациях. Зачастую физиологически приемлемый носитель является водным pH-забуференным раствором. Примеры физиологически приемлемых носителей включают буферы, такие как фосфат, цитрат и другие органические кислоты; антиоксиданты, включая аскорбиновую кислоту; низкомолекулярный (например, менее приблизительно 10 аминокислотных остатков) полипептид; белки, такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон; аминокислоты, такие как глицин, глутамин, аспарагин, аргинин или лизин; моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая глюкозу, маннозу или декстрины; хелатирующие средства, такие как ЭДТА; сахарные спирты, такие как маннит или сорбит; солеобразующие противоионы, такие как натрий; и/или неионные поверхностно-активные вещества, такие как TWEEN^TM, полиэтиленгликоль (PEG) и Pluronic^TM. Термин "носитель" также может относиться к дилюенту, адъюванту (например, адъюванту Фрейнда (полному или неполному)), эксципиенту или носителю. Такие носители, включая фармацевтические носители, могут являться стерильными жидкостями, такими как вода и масла, включая масла нефтяного, животного, растительного или синтетического происхождения, такие как арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, сезамовое масло и т.п. Вода является примером носителя, если композицию (например, фармацевтическую композицию) вводят внутривенно. Физиологические растворы и водные растворы декстрозы и глицерина также можно использовать в качестве жидких носителей, в частности, для инъецируемых растворов. Подходящие эксципиенты (например, фармацевтические эксципиенты) включают крахмал, глюкозу, лактозу, сахарозу, желатин, солод, рис, муку, мел, силикагель, стеарат натрия, моностеарат глицерина, тальк, хлорид натрия, сухое обезжиренное молоко, глицерин, пропиленгликоль, воду, этанол и т.п. При желании, композиция также может содержать незначительные количества увлажнителей, или эмульгаторов, или pH-буферных средств. Композиции могут иметь форму растворов, суспензий, эмульсий, таблеток, пилюль, капсул, порошков, составов с замедленным высвобождением и т.п. Пероральные композиции, включая составы, могут включать стандартные носители, такие как маннит, лактоза, крахмал, стеарат магния, сахарин натрия, целлюлоза, карбонат магния фармацевтической категории и т.д. Примеры подходящих фармацевтических носителей описаны в Remington and Gennaro, Remington's Pharmaceutical Sciences (18^th ed. 1990). Композиции, включая фармацевтические соединения, могут содержать мутеин ИЛ-2, например, в выделенной или очищенной форме, вместе с подходящим количеством носителей.

В рамках изобретения термин "фармацевтически приемлемый" означает одобренный регуляторным органом федерального или регионального правительства или указанный в Фармакопее США, Европейской фармакопее или других общепризнанных фармакопеях для использования на животных, и более конкретно - на людях.

"Выделенная нуклеиновая кислота" является нуклеиновой кислотой, например, РНК, ДНК или смешанной нуклеиновой кислотой, по существу, отделенной от других геномных последовательностей ДНК, а также белков или комплексов, таких как рибосомы и полимеразы, в природе сопутствующих нативной последовательности. "Выделенная" молекула нуклеиновой кислоты является молекулой, отделенной от других молекул нуклеиновой кислоты, присутствующих в природном источнике молекулы нуклеиновой кислоты. Кроме того, "выделенная" молекула нуклеиновой кислоты, такая как молекула кДНК, может, по существу, не содержать другой клеточный материал или среду для культивирования при получении рекомбинантными способами или, по существу, не содержать химические предшественники или другие химические вещества при химическом синтезе. В конкретном варианте осуществления одну или более молекул нуклеиновой кислоты, кодирующих мутеин ИЛ-2, как представлено в настоящем описании, выделяют или очищают. Термин включает последовательности нуклеиновой кислоты, удаленные из их природной среды, и включает рекомбинантные или клонированные изоляты ДНК и химически синтезированные аналоги или аналоги, биологически синтезированные гетерологичными системами. По существу, чистая молекула может включать выделенные формы молекулы.

Термины "Полинуклеотид" или "нуклеиновая кислота", взаимозаменяемо используемые в настоящем описании, относятся к полимерам нуклеотидов любой длины и включают ДНК и РНК. Нуклеотиды могут являться дезоксирибонуклеотидами, рибонуклеотидами, модифицированными нуклеотидами или основаниями и/или их аналогами или любым субстратом, которые могут встраиваться в полимер с помощью ДНК- или РНК-полимеразы или синтетической реакции. Полинуклеотид может содержать модифицированные нуклеотиды, такие как метилированные нуклеотиды и их аналоги. В рамках изобретения термин "олигонуклеотид" относится к коротким, как правило, одноцепочечным, синтетическим полинуклеотидам, как правило, но необязательно, длиной менее приблизительно 200 нуклеотидов. Термины "олигонуклеотид" и "полинуклеотид" не являются взаимоисключающими. Приведенное выше описание полинуклеотидов в равной степени и полностью подходит для олигонуклеотидов. Клетка, продуцирующая мутеин ИЛ-2 по настоящему изобретению, может включать клетку-хозяина, в которую встроены нуклеиновые кислоты, кодирующие мутеин ИЛ-2. Подходящие клетки-хозяева описаны ниже.

Мутеины ИЛ-2

Изобретение относится к мутеинам ИЛ-2, связывающимся с субъединицей α рецептора ИЛ-2, но не имеющим измеримого связывания с субъединицей β рецептора ИЛ-2.

Различные мутеины ИЛ-2, представленные в настоящем описании, могут являться частичной или полноразмерной молекулой ИЛ-2 человека, содержащей одну или более замен, делеций или добавлений аминокислот относительно референсной аминокислотной последовательности ИЛ-2, например, аминокислотной последовательности дикого типа, приведенной в SEQ ID NO: 39. В некоторых вариантах осуществления частичная или полноразмерная молекула ИЛ-2 человека, содержащая одну или более замен, делеций или добавлений аминокислот, слита с другим полипептидом, таким как Fc-область иммуноглобулина человека (например, IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4). Fc-область может являться Fc дикого типа или вариантом Fc с желаемыми характеристиками или свойствами, такими как модифицированное время полужизни в сыворотке, фиксация комплемента, связывание Fc-рецептора и/или эффекторная функция (например, антигензависимая клеточная цитотоксичность).

В одном из вариантов осуществления Fc-область модифицирована с помощью двух замен аминокислот, L234A и L235A (иногда обозначаемых как мутации "LALA") относительно полипептидной последовательности Fc дикого типа, снижающих/устраняющих эффекторную функцию. В другом варианте осуществления Fc-область модифицирована с помощью трех замен аминокислот, L234A, L235A и D265S, снижающих/устраняющих эффекторную функцию (иногда обозначаемых как мутации "LALADS"). В еще одном варианте осуществления Fc-область модифицирована с помощью трех замен аминокислот, M252Y, S254T и T256E, повышающих время полужизни в сыворотке (иногда обозначаемых как мутации "YTE"). В другом варианте осуществления вариант Fc имеет комбинацию разных мутаций, представленных в настоящем описании, например, мутаций LALA и YTE или мутаций LALADS и YTE. Частичная или полноразмерная молекула ИЛ-2 человека, содержащая одну или более замен, делеций или добавлений, слитая с вариантом Fc, может образовывать гомодимеры с помощью варианта Fc. Такие гомодимеры содержат две мутантные молекулы ИЛ-2 и, таким образом, являются бивалентными мутеинами ИЛ-2. На фиг. 9A и 9C приведена неограничивающая схема бивалентных мутеинов ИЛ-2.

В других вариантах осуществления пара вариантов Fc включает одну Fc-область, содержащую мутацию "выступа" ("Fc с "выступом""), и другую Fc-область, содержащую мутацию "впадины" ("Fc с "впадиной""). Fc с "выступом" и Fc с "впадиной" могут образовывать гетеродимер (иногда обозначаемые как мутации "выступ-во-впадину"). В некоторых вариантах осуществления Fc-область модифицирована с помощью двух замен аминокислот, S354C и T366W (иногда обозначаемых как мутации "выступа"). В других вариантах осуществления Fc-область модифицирована с помощью четырех замен аминокислот, Y349C, T366S, L368A и Y407V (иногда обозначаемых как мутации "впадины"). В некоторых вариантах осуществления Fc-область модифицирована с помощью четырех замен аминокислот, обозначаемых как мутации "впадины", и дополнительно содержит две дополнительные замены аминокислот H435R и Y435F. Частичную или полноразмерную молекулу ИЛ-2 человека, содержащую одну или более замен, делеций или добавлений, можно подвергать слиянию с Fc с "выступом" или Fc с "впадиной". В некоторых вариантах осуществления частичная или полноразмерная молекула ИЛ-2 человека, содержащая одну или более замен, делеций или добавлений, слитая с Fc с "выступом", спарена с Fc с "впадиной" с образованием моновалентного мутеина ИЛ-2. В некоторых вариантах осуществления частичная или полноразмерная молекула ИЛ-2 человека, содержащая одну или более замен, делеций или добавлений, слитая с Fc с "впадиной", спарена с Fc с "выступом" с образованием моновалентного мутеина ИЛ-2. На фиг. 9B и 9D приведена неограничивающая схема моновалентного мутеина ИЛ-2. В других вариантах осуществления частичная или полноразмерная молекула ИЛ-2 человека, содержащая одну или более замен, делеций или добавлений, слита с Fc без "выступа" или "впадины", и Fc-слитая молекула ИЛ-2 может образовывать гомодимерный бивалентный мутеин ИЛ-2 (см., например, фиг. 9A и 9C в качестве неограничивающих примеров бивалентных мутеинов ИЛ-2).

Частичную или полноразмерную молекулу ИЛ-2 человека, содержащую одну или более замен, делеций или добавлений, можно подвергать слиянию с N-концом или C-концом варианта Fc с помощью различных пептидных линкеров между молекулой ИЛ-2 и вариантом Fc. В одном из вариантов осуществления частичную или полноразмерную молекулу ИЛ-2 человека, содержащую одну или более замен, делеций или добавлений, подвергают слиянию с N-концом варианта Fc, и пептидный линкер находится между C-концом молекулы ИЛ-2 и N-концом варианта Fc. В другом варианте осуществления частичную или полноразмерную молекулу ИЛ-2 человека, содержащую одну или более замен, делеций или добавлений, подвергают слиянию с C-концом варианта Fc, и пептидный линкер находится между C-концом варианта Fc и N-концом молекулы ИЛ-2.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутеину ИЛ-2, содержащему первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, 2 или 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1, 2 или 40 заменена N, и P в положении 33 SEQ ID NO: 1, 2 или 40 заменена R. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, и P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, и P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, и P в положении 33 SEQ ID NO: 40 заменена R.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутеину ИЛ-2, содержащему первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, 2 или 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1, 2 или 40 и E в положении 67 SEQ ID NO: 1, 2 или 40 заменена S. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, и E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, и E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, и E в положении 67 SEQ ID NO: 40 заменена S.

В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к мутеину ИЛ-2, содержащему первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, 2 или 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1, 2 или 40 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1, 2 или 40 заменена R, и E в положении 67 SEQ ID NO: 1, 2 или 40 заменена S. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, и E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, и E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 40 заменена R, и E в положении 67 SEQ ID NO: 40 заменена S.

В других вариантах осуществления мутеинов ИЛ-2 первый полипептид дополнительно содержит замену V на A в положении 68, замену N на R в положении 70 или замену Q на P в положении 73 SEQ ID NO: 1, 2 или 40.

В других вариантах осуществления мутеинов ИЛ-2 первый полипептид дополнительно содержит любые две из трех следующих замен: замену V на A в положении 68, замену N на R в положении 70 или замену Q на P в положении 73 SEQ ID NO: 1, 2 или 40.

В других вариантах осуществления мутеинов ИЛ-2 первый полипептид дополнительно содержит замену V на A в положении 68, замену N на R в положении 70 и замену Q на P в положении 73 SEQ ID NO: 1, 2 или 40.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, и V в положении 68 SEQ ID NO: 1 заменена A. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, и N в положении 70 SEQ ID NO: 1 заменена R. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 1 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, V в положении 68 SEQ ID NO: 1 заменена A, и N в положении 70 SEQ ID NO: 1 заменена R. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, V в положении 68 SEQ ID NO: 1 заменена A, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 1 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, N в положении 70 SEQ ID NO: 1 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 1 заменена P. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1 в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, V в положении 68 SEQ ID NO: 1 заменена A, N в положении 70 SEQ ID NO: 1 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 1 заменена P.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, и V в положении 68 SEQ ID NO: 2 заменена A. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, и N в положении 70 SEQ ID NO: 2 заменена R. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 2 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, V в положении 68 SEQ ID NO: 2 заменена A, и N в положении 70 SEQ ID NO: 2 заменена R. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, V в положении 68 SEQ ID NO: 2 заменена A, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 2 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, N в положении 70 SEQ ID NO: 2 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 2 заменена P. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, V в положении 68 SEQ ID NO: 2 заменена A, N в положении 70 SEQ ID NO: 2 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 2 заменена P.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 40 заменена R, и V в положении 68 SEQ ID NO: 40 заменена A. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 40 заменена R, и N в положении 70 SEQ ID NO: 40 заменена R. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 40 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 40 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 40 заменена R, V в положении 68 SEQ ID NO: 40 заменена A, и N в положении 70 SEQ ID NO: 40 заменена R. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 40 заменена R, V в положении 68 SEQ ID NO: 40 заменена A, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 40 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 40 заменена R, N в положении 70 SEQ ID NO: 40 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 40 заменена P. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 40 заменена R, V в положении 68 SEQ ID NO: 40 заменена A, N в положении 70 SEQ ID NO: 40 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 40 заменена P.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1 в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S, и V в положении 68 SEQ ID NO: 1 заменена A. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S, и N в положении 70 SEQ ID NO: 1 заменена R. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 1 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 1 заменена A, и N в положении 70 SEQ ID NO: 1 заменена R. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 1 заменена A, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 1 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S, N в положении 70 SEQ ID NO: 1 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 1 заменена P. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 1 заменена A, N в положении 70 SEQ ID NO: 1 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 1 заменена P.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S, и V в положении 68 SEQ ID NO: 2 заменена A. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S, и N в положении 70 SEQ ID NO: 2 заменена R. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 2 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 2 заменена A, и N в положении 70 SEQ ID NO: 2 заменена R. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 2 заменена A, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 2 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена A, E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S, N в положении 70 SEQ ID NO: 2 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 2 заменена P. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 2 заменена A, N в положении 70 SEQ ID NO: 2 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 2 заменена P.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 40 заменена S, и V в положении 68 SEQ ID NO: 40 заменена A. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 40 заменена S, и N в положении 70 SEQ ID NO: 40 заменена R. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 40 заменена S, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 40 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 40 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 40 заменена A, и N в положении 70 SEQ ID NO: 40 заменена R. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 40 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 40 заменена A, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 40 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 40 заменена S, N в положении 70 SEQ ID NO: 40 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 40 заменена P. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, E в положении 67 SEQ ID NO: 40 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 40 заменена A, N в положении 70 SEQ ID NO: 40 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 40 заменена P.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S, и V в положении 68 SEQ ID NO: 1 заменена A. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S, и N в положении 70 SEQ ID NO: 1 заменена R. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 1 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 1 заменена A, и N в положении 70 SEQ ID NO: 1 заменена R. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 1 заменена A, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 1 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S, N в положении 70 SEQ ID NO: 1 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 1 заменена P. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 1 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 1 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 1 заменена A, N в положении 70 SEQ ID NO: 1 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 1 заменена P.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S, и V в положении 68 SEQ ID NO: 2 заменена A. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена R, и N в положении 70 SEQ ID NO: 2 заменена R. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 2 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 2 заменена A, и N в положении 70 SEQ ID NO: 2 заменена R. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 2 заменена A, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 2 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S, N в положении 70 SEQ ID NO: 2 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 2 заменена P. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 2 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 2 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 2 заменена A, N в положении 70 SEQ ID NO: 2 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 2 заменена P.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 40 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 40 заменена S, и V в положении 68 SEQ ID NO: 40 заменена A. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 40 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 40 заменена S, и N в положении 70 SEQ ID NO: 40. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 40 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 40 заменена S, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 40 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 40 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 40 заменена S, V в положении 68 заменена A, и N в положении 70 SEQ ID NO: 40 заменена R. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 40 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 40 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 40 заменена A, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 40 заменена P. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 40 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 40 заменена S, N в положении 70 SEQ ID NO: 40 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 40 заменена P. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, P в положении 33 SEQ ID NO: 40 заменена R, E в положении 67 SEQ ID NO: 40 заменена S, V в положении 68 SEQ ID NO: 40 заменена A, N в положении 70 SEQ ID NO: 40 заменена R, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 40 заменена P.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 1 заменена N, V в положении 68 SEQ ID NO: 1 заменена A, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 1 заменена P. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 2 заменена N, V в положении 68 SEQ ID NO: 2 заменена A, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 2 заменена P. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 40, в которой D в положении 19 SEQ ID NO: 40 заменена N, V в положении 68 SEQ ID NO: 40 заменена A, и Q в положении 73 SEQ ID NO: 40 заменена P. В некоторых вариантах осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 11. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 12.

В некоторых вариантах осуществления мутеинов ИЛ-2 первый полипептид дополнительно содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, 14 или 15. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 11, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 11, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 11, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15.

В других вариантах осуществления мутеинов ИЛ-2 первый полипептид дополнительно содержит линкер, приведенный в SEQ ID NO: 16, 41 или 42. В одном из вариантов осуществления первый полипептид дополнительно содержит линкер, приведенный в SEQ ID NO: 16. В другом варианте осуществления первый полипептид дополнительно содержит линкер, приведенный в SEQ ID NO: 41. В еще одном варианте осуществления первый полипептид дополнительно содержит линкер, приведенный в SEQ ID NO: 42. В некоторых вариантах осуществления первая аминокислотная последовательность, приведенная в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, подвергнута слиянию с N-концом второй аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 13, 14 или 15, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 16, 41 или 42, находится между C-концом первой аминокислотной последовательности и N-концом второй аминокислотной последовательности. В другом варианте осуществления первая аминокислотная последовательность, приведенная в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, подвергнута слиянию с C-концом второй аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 13, 14 или 15, и пептидный линкер находится между C-концом второй аминокислотной последовательности и N-концом первой аминокислотной последовательности.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 16. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 16. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 16. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 16. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 16. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 16. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 16. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15 и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 16. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 16. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность ИЛ-2 подвергнута слиянию с N-концом аминокислотной последовательности Fc или варианта Fc, и пептидный линкер находится между C-концом ИЛ-2 и N-концом Fc или варианта Fc. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность Fc или варианта Fc подвергнута слиянию с N-концом аминокислотной последовательности ИЛ-2, и пептидный линкер находится между C-концом Fc или варианта Fc, и N-концом аминокислотной последовательности ИЛ-2.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 41. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 41. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 41. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13 и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 41. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 41. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 41. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 41. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 41. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 41. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность ИЛ-2 подвергнута слиянию с N-концом аминокислотной последовательности Fc или варианта Fc, и пептидный линкер находится между C-концом ИЛ-2 и N-концом Fc или варианта Fc. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность Fc или варианта Fc подвергнута слиянию с N-концом аминокислотной последовательности ИЛ-2, и пептидный линкер находится между C-концом Fc или варианта Fc и N-концом аминокислотной последовательности ИЛ-2.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 42. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 42. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 42. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 42. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 42. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 42. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 42. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 42. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, и дополнительно содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкер, приведенный в SEQ ID NO: 42. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность ИЛ-2 подвергнута слиянию с N-концом аминокислотной последовательности Fc или варианта Fc, и пептидный линкер находится между C-концом ИЛ-2 и N-концом Fc или варианта Fc. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность Fc или варианта Fc подвергнута слиянию с N-концом аминокислотной последовательности ИЛ-2, и пептидный линкер находится между C-концом Fc или варианта Fc и N-концом аминокислотной последовательности ИЛ-2.

В различных вариантах осуществления мутеин ИЛ-2 дополнительно содержит второй полипептид. В некоторых вариантах осуществления второй полипептид является таким же, что и первый полипептид. В других вариантах осуществления второй полипептид отличается от первого полипептида. В других вариантах осуществления второй полипептид не содержит частичную или полноразмерную аминокислотную последовательность ИЛ-2.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и второй полипептид, являющийся таким же, как и первый полипептид. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, 41 или 42, и второй полипептид, являющийся таким же, как и первый полипептид. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, являющийся таким же, как и первый полипептид. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 41, и второй полипептид, являющийся таким же, как и первый полипептид. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 42, и второй полипептид, являющийся таким же, как и первый полипептид. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид являющийся таким же, как и первый полипептид. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид являющийся таким же, как и первый полипептид. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, являющийся таким же, как и первый полипептид. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, являющийся таким же, как и первый полипептид. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, являющийся таким же, как и первый полипептид. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, являющийся таким же, как и первый полипептид. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, являющийся таким же, как и первый полипептид. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, являющийся таким же, как и первый полипептид. В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 11, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, являющийся таким же, как и первый полипептид. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, являющийся таким же, как и первый полипептид. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность ИЛ-2 подвергнута слиянию с N-концом аминокислотной последовательностт Fc или вариант Fc, и пептидный линкер находится между C-концом ИЛ-2 и N-концом Fc или варианта Fc. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная последовательность Fc или варианта Fc подвергнута слиянию с N-концом аминокислотной последовательности ИЛ-2, и пептидный линкер находится между C-концом Fc или варианта Fc и N-концом аминокислотной последовательности ИЛ-2.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, 41 или 42, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 41, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 42, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 11, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 12, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В одном из вариантов осуществления первого полипептида аминокислотная последовательность ИЛ-2 подвергнута слиянию с N-концом аминокислотной последовательности Fc или варианта Fc, и пептидный линкер находится между C-концом ИЛ-2 и N-концом Fc или варианта Fc. В другом варианте осуществления первого полипептида аминокислотная последовательность Fc или варианта Fc подвергнута слиянию с N-концом аминокислотной последовательности ИЛ-2, и пептидный линкер находится между C-концом Fc или варианта Fc и N-концом аминокислотной последовательности ИЛ-2.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, 41 или 42, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 41, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 42, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 11, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 12, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В одном из вариантов осуществления первого полипептида аминокислотная последовательность ИЛ-2 подвергнута слиянию с N-концом аминокислотной последовательности Fc или варианта Fc, и пептидный линкер находится между C-концом ИЛ-2 и N-концом Fc или варианта Fc. В другом варианте осуществления первого полипептида аминокислотная последовательность Fc или варианта Fc подвергнута слиянию с N-концом аминокислотной последовательности ИЛ-2, и пептидный линкер находится между C-концом Fc или варианта Fc и N-концом аминокислотной последовательности ИЛ-2.

В одном из вариантов осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, 41 или 42, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 41, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 42, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 11, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В еще одном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В одном из вариантов осуществления первого полипептида аминокислотная последовательность ИЛ-2 подвергнута слиянию с N-концом аминокислотной последовательности Fc или варианта Fc, и пептидный линкер находится между C-концом ИЛ-2 и N-концом Fc или варианта Fc. В другом варианте осуществления первого полипептида аминокислотная последовательность Fc или варианта Fc подвергнута слиянию с N-концом аминокислотной последовательности ИЛ-2, и пептидный линкер находится между C-концом Fc или варианта Fc и N-концом аминокислотной последовательности ИЛ-2. В некоторых вариантах осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид и второй полипептид, где второй полипептид является таким же, что и первый полипептид, где каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53 или 54. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 47. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 48. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 49. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 50. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 51. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 52. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 53. В одном из вариантов осуществления каждый из первого и второго полипептидов содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 54.

В некоторых вариантах осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид и второй полипептид, где первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В одном из вариантов осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В еще одном варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В одном из вариантов осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 25; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В еще одном варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 26; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 27; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 28; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17.

В некоторых вариантах осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид и второй полипептид, где первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В одном из вариантов осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В еще одном варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В одном из вариантов осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 25; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В еще одном варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 26; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 27; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 28; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55.

В некоторых вариантах осуществления мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид и второй полипептид, где первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37 или 38; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В одном из вариантов осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 30; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В еще одном варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 31; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 32; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 33; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В одном из вариантов осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 34; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 35; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В еще одном варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 36; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 37; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В другом варианте осуществления первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 38; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18.

Способы применения мутеинов ИЛ-2

Настоящее изобретение также включает способы применения различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, включая, в качестве неограничивающих примеров, профилактику или лечение ИЛ-2-опосредованного заболевания (например, заболевания иммунной системы), селективную активацию регуляторных T-клеток без активации CD8⁺ T-клеток или селективную активацию клеток, экспрессирующих субъединицу β рецептора ИЛ-2, но не активацию клеток, экспрессирующих субъединицу α рецептора ИЛ-2.

Настоящее изобретение относится к способам лечения ИЛ-2-опосредованного заболевания у индивидуума. В некоторых вариантах осуществления способ включает введение мутеина ИЛ-2, представленного в настоящем описании, индивидууму в терапевтически эффективном количестве для лечения ИЛ-2-опосредованного заболевания. Настоящее изобретение также относится к способам профилактики ИЛ-2-опосредованного заболевания у индивидуума. В некоторых вариантах осуществления способ включает введение мутеина ИЛ-2, представленного в настоящем описании, индивидууму в количестве, эффективном для профилактики ИЛ-2-опосредованного заболевания. В некоторых вариантах осуществления индивидуум имеет ИЛ-2-опосредованное заболевание. В других вариантах осуществления индивидуум имеет риск развития ИЛ-2-опосредованного заболевания.

В некоторых вариантах осуществления различных способов, представленных в настоящем описании, ИЛ-2-опосредованное заболевание является нарушением иммунной системы.

В некоторых вариантах осуществления нарушение иммунной системы является воспалительным заболеванием. В одном из вариантов осуществления воспалительное заболевание является увеитом.

В конкретных вариантах осуществления различных способов, представленных в настоящем описании, нарушение иммунной системы является аутоиммунным заболеванием, таким как ревматоидный артрит, болезнь Крона, псориаз, псориатический артрит, рассеянный склероз, системная красная волчанка, анкилозирующий спондилит, диабет I типа, синдром Шегрена, язвенный колит, оптикомиелит, целиакия, склеродермия и височный артериит. В некоторых вариантах осуществления системная красная волчанка является SLE, CLE или волчаночным нефритом. В одном из вариантов осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой ревматоидный артрит. В другом варианте осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой болезнь Крона. В еще одном варианте осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой псориаз. В другом варианте осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой рассеянный склероз. В другом варианте осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой анкилозирующий спондилит. В еще одном варианте осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой диабет I типа. В другом варианте осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой синдром Шегрена. В дополнительном варианте осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой язвенный колит. В другом варианте осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой оптикомиелит. В еще одном варианте осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой целиакию. В одном из вариантов осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой височный артериит. В другом варианте осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой склеродермию. В одном из вариантов осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой системную красную волчанку. В одном из вариантов осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой SLE. В другом варианте осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой CLE. В другом варианте осуществления аутоиммунное заболевание представляет собой волчаночный нефрит.

В других вариантах осуществления различных способов, представленных в настоящем описании, нарушение иммунной системы является заболеванием с гиперчувствительностью, включая, например, атопический дерматит, васкулит с гиперчувствительностью и аллергию, например, аллергическую астму, аллергический ринит (сенную лихорадку), уртикарию (крапивницу) и анафилаксию. В одном из вариантов осуществления нарушение иммунной системы представляет собой атопический дерматит. В другом варианте осуществления нарушение иммунной системы представляет собой гиперчувствительность васкулит. В еще одном варианте осуществления нарушение иммунной системы представляет собой аллергию. В одном из вариантов осуществления нарушение иммунной системы представляет собой аллергическую астму. В другом варианте осуществления нарушение иммунной системы представляет собой аллергический ринит (сенную лихорадку). В еще одном варианте осуществления нарушение иммунной системы представляет собой уртикарию (крапивницу). В некоторых вариантах осуществления нарушение иммунной системы представляет собой анафилаксию.

В некоторых вариантах осуществления заболевание с гиперчувствительностью представляет собой T-клеточное заболевание с гиперчувствительностью. Термин "T-клеточная гиперчувствительность" при использовании по отношению к нарушению иммунной системы у индивидуума относится к транзиторному или хроническому, аномально высокому уровню эффекторной функции T-клетка. В некоторых вариантах осуществления эффекторная функция T-клеток включает секрецию цитокинов T_H2. Неограничивающие примеры цитокинов T_H2 включают ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-9, ИЛ-13, ИЛ-31 и TSLP. В одном из вариантов осуществления цитокин T_H2 является ИЛ-2. В некоторых вариантах осуществления индивидуум имеет транзиторный или хронический, аномально высокий уровень двух, трех, четырех, пяти, шести, семи, восьми, девяти или десяти разных цитокинов T_H2, одним из которых является ИЛ-2.

В некоторых вариантах осуществления заболевание иммунной системы представляет собой очаговую алопецию, реакцию "трансплантат против хозяина" (РТПХ), аутоиммунный гепатит, первичный склерозирующий холангит или воспалительную миопатию. В одном из вариантов осуществления заболевание иммунной системы представляет собой очаговую алопецию. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой РТПХ. В еще одном варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой аутоиммунный гепатит. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой первичный склерозирующий холангит. В другом варианте осуществления заболевание иммунной системы представляет собой воспалительную миопатию.

Таким образом, в некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения ИЛ-2-опосредованного заболевания у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании.

В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения нарушения иммунной системы у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании.

В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения аутоиммунного заболевания у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании.

В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения воспалительного заболевания у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании.

В другом конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании.

В другом конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании.

В другом конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании.

В другом конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании.

В другом конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37 или 38, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 33, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 34, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и второй полипептид, являющийся таким же, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения РТПХ у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37 или 38, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 33, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 34, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и второй полипептид являющийся таким же, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения SLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37 или 38, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 33, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 34, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и второй полипептид, являющийся таким же, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения CLE у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37 или 38, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 33, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 34, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и второй полипептид, являющийся таким же, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения рассеянного склероза у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37 или 38, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 33, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 34, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и второй полипептид, являющийся таким же, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения язвенного колита у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 или 28, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотная последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37 или 38, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 33, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 34, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18.

В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, и аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и второй полипептид, являющийся таким же, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 или 12, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8, аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13, и линкерную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, являющуюся той же аминокислотной последовательностью, что и первый полипептид. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 45. В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения болезни Крона у индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 или его фармацевтической композиции, где мутеин ИЛ-2 содержит первый полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46, и второй полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 46.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу селективной активации регуляторных T-клеток без активации CD8⁺ T-клеток у индивидуума, включающему введение нуждающемуся в этом индивидууму терапевтически эффективного количества различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления селективную активацию регуляторные T-клетки без активации CD8⁺ T-клеток можно измерять способами in vitro или ex vivo. В конкретном варианте осуществления селективную активацию регуляторных T-клеток без активации CD8⁺ T-клеток можно измерять любыми способами, известными специалисту в этой области, включая, в качестве неограничивающих примеров, анализ STAT5, описанный в примерах, представленных в настоящем описании.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу селективной активации клеток, экспрессирующих субъединицу β рецептора ИЛ-2, но не активации клеток, экспрессирующих субъединицу α рецептора ИЛ-2, у индивидуума, включающему введение нуждающемуся в этом индивидууму терапевтически эффективного количества различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления селективную активацию клеток, экспрессирующих субъединицу β рецептора ИЛ-2, но не активацию клеток, экспрессирующих субъединицу α рецептора ИЛ-2, можно измерять способами in vitro или ex vivo. В конкретном варианте осуществления селективную активацию клеток, экспрессирующих субъединицу β рецептора ИЛ-2, но не активацию клеток, экспрессирующих субъединицу α рецептора ИЛ-2, можно измерять любыми способами, известными специалистам в этой области, включая в качестве неограничивающих примеров анализ pSTAT5, описанный в примерах, представленных в настоящем описании.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании, для лечения ИЛ-2-опосредованного заболевания у индивидуума.

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к применению любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании, для лечения ИЛ-2-опосредованного заболевания у индивидуума.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, или любой из различных фармацевтических композиций, представленных в настоящем описании, для получения лекарственного средства для лечения ИЛ-2-опосредованного заболевания у индивидуума.

При различном применении мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, ИЛ-2-опосредованное заболевание может являться любым нарушением иммунной системы (например, аутоиммунным или воспалительным заболеванием), представленным в настоящем описании.

Нуклеиновые кислоты, экспрессирующие векторы, клетки и способы получения мутеинов ИЛ-2

Настоящее изобретение также относится к выделенным нуклеиновым кислотам и векторам, содержащим полинуклеотидные последовательности, кодирующие такие мутеины ИЛ-2, представленные в настоящем описании, клеткам (например, клеткам-хозяевам), содержащим такие выделенные нуклеиновые кислоты или векторы, и способам получения таких мутеинов ИЛ-2.

В одном из аспектов настоящее изобретение относится к выделенной нуклеиновой кислоте, кодирующей полипептид любого из мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании. В одном из вариантов осуществления выделенная нуклеиновая кислота кодирует любой из различных первых полипептидов различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании. В другом варианте осуществления выделенная нуклеиновая кислота кодирует любой из различных вторых полипептидов различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании. В еще одном варианте осуществления выделенная нуклеиновая кислота кодирует любой из различных первых полипептидов и любого из различных вторых полипептидов различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании. В другом варианте осуществления выделенная нуклеиновая кислота кодирует один или более полипептидов, описанных в таблице 9.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к первой выделенной нуклеиновой кислоте, кодирующей первый полипептид, и второй выделенной нуклеиновой кислоте, кодирующей второй полипептид мутеина ИЛ-2, представленного в настоящем описании.

В другом варианте осуществления выделенные нуклеиновые кислоты дополнительно кодируют сигнальную последовательность.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к экспрессирующему вектору, содержащему одну или более из различных выделенных нуклеиновых кислот, представленных в настоящем описании, где нуклеиновые кислоты функционально связаны с контрольными последовательностями, распознаваемыми клеткой-хозяином, если клетку-хозяина трансфицируют с использованием экспрессирующего вектора.

В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к клетке-хозяину, содержащей одну или более из различных выделенных нуклеиновых кислот или различных экспрессирующих векторов, представленных в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления клетка-хозяин содержит одну или более из различных выделенных нуклеиновых кислот, представленных в настоящем описании. В других вариантах осуществления клетка-хозяин содержит один или более из различных экспрессирующих векторов, представленных в настоящем описании. В других вариантах осуществления клетка-хозяин содержит один из различных экспрессирующих векторов, представленных в настоящем описании, где экспрессирующий вектор содержит одну или более из различных выделенных нуклеиновых кислот, представленных в настоящем описании. В других вариантах осуществления клетка-хозяин содержит первый экспрессирующий вектор, содержащий первую нуклеиновую кислоту, кодирующую первый полипептид, и второй экспрессирующий вектор, содержащий вторую нуклеиновую кислоту, кодирующую второй полипептид мутеина ИЛ-2, представленного в настоящем описании.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу получения любого из различных мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании. В одном из вариантов осуществления способ включает культивирование любого из различных клеток-хозяев, представленных в настоящем описании, в условиях, в которых экспрессируется мутеин ИЛ-2. В другом варианте осуществления способ включает экспрессию любого из различных экспрессирующих векторов, представленных в настоящем описании, в условиях, в которых экспрессируется мутеин ИЛ-2. В еще одном варианте осуществления способ включает экспрессию любой из различных выделенных нуклеиновых кислот, представленных в настоящем описании, в условиях, в которых экспрессируется мутеин ИЛ-2.

В некоторых вариантах осуществления различных способов получения мутеинов ИЛ-2 по изобретению способ дополнительно содержит выделение мутеина ИЛ-2 из клетки-хозяина или среды для культивирования или системы экспрессии in vitro.

Линии клеток млекопитающих, доступные в качестве хозяев для экспрессии мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, хорошо известны в этой области и включают многие иммортализованные линии клеток, доступные в American Type Culture Collection (ATCC). Помимо прочего, они включают клетки яичника китайского хомяка (CHO), NSO, клетки SP2, клетки HeLa, клетки почки новорожденного хомяка (BHK), клетки почки обезьяны (COS), клетки печеночноклеточной карциномы человека (например, Hep G2), клетки A549, клетки 3T3, клетки HEK-293 и ряд других линий клеток. Другими линиями клеток, которыми можно использовать, являются линии клеток насекомых, такие как клетки Sf9, клетки амфибий, бактериальные клетки, растительные клетки и клетки грибов. В геном этих линий клеток можно встраивать различные модификации (например, нокаут глутаминсинтетазы, ауксотрофные мутации и т.д.) для достижения желаемых свойств клеток-хозяев и/или желаемых свойств экспрессируемых мутеинов ИЛ-2.

Если рекомбинантные экспрессирующие векторы, кодирующие мутеин ИЛ-2, встраивают в клетки-хозяева, мутеин ИЛ-2 получают посредством культивирования клеток-хозяев в течение периода времени, достаточного для экспрессии мутеина ИЛ-2 в клетках-хозяевах или, более предпочтительно, секреции мутеина ИЛ-2 в среду для культивирования, в которой выращивают клетки-хозяева.

Мутеины ИЛ-2 можно выделять из среды для культивирования стандартными способами очистки белков.

В основном, гликопротеины, продуцируемые в конкретной линии клеток или трансгенном животном будут иметь профиль гликозилирования, характерный для гликопротеинов, продуцируемых в линии клеток или трансгенном животном. Таким образом, конкретный профиль гликозилирования мутеина ИЛ-2 будет зависеть от конкретной линии клеток или трансгенного животного, используемого для продукции мутеина ИЛ-2. Описания различных мутеинов ИЛ-2 или выделенных нуклеиновых кислот, кодирующих такие мутеины ИЛ-2, не зависит от того, какой профиль гликозилирования мутеины ИЛ-2 могут иметь.

Фармацевтические композиции и введение

В другом аспекте настоящее изобретение относится к композиции, содержащей любой из мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, и фармацевтически приемлемый носитель.

В некоторых вариантах осуществления композиция дополнительно содержит дополнительное средство.

В конкретных вариантах осуществления дополнительное средство является средством, эффективным для лечения того же нарушения, для лечения которого используют мутеины ИЛ-2, представленные в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления дополнительное средство является средством, эффективным для облегчения побочных эффектов мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании.

Для получения фармацевтических или стерильных композиций мутеинов ИЛ-2, представленных в настоящем описании, мутеин ИЛ-2 по изобретению смешивают с фармацевтически приемлемым носителем или эксципиентом. См., например, Remington's Pharmaceutical Sciences и U.S. Pharmacopeia: National Formulary, Mack Publishing Company, Easton, PA (1984).

Составы терапевтических и диагностических средств можно получать посредством смешивания с приемлемыми носителями, эксципиентами или стабилизаторами в форме, например, лиофилизированных порошков, суспензий, водных растворов или суспензий (см., например, Hardman, et al. (2001) Goodman and Gilman’s Pharmacological Basis of Therapeutics, McGraw-Hill, New York, NY; Gennaro (2000) Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott, Williams, and Wilkins, New York, NY; Avis, et al. (eds.) (1993) Pharmaceutical Dosage Forms: Parenteral Medications, Marcel Dekker, NY; Lieberman, et al. (eds.) (1990) Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Marcel Dekker, NY; Lieberman, et al. (eds.) (1990) Pharmaceutical Dosage Forms: Disperse Systems, Marcel Dekker, NY; Weiner and Kotkoskie (2000) Excipient Toxicity и Safety, Marcel Dekker, Inc., New York, NY).

Токсичность и терапевтическая эффективность композиций мутеинов ИЛ-2, вводимых в отдельности или в комбинации с другим средством, можно определять стандартными фармацевтическими способами в культурах клеток или на экспериментальных животных, например, для определения LD₅₀ (дозы, летальной для 50% популяции) и ED₅₀ (дозы, терапевтически эффективной для 50% популяции). Соотношение токсических и терапевтических эффектов дозы представляет собой терапевтический индекс (LD₅₀/ED₅₀). В конкретных аспектах желательными являются антитела, демонстрирующие высокие терапевтические индексы. Данные, полученные в этих анализах культур клеток и исследованиях на животных, можно использовать при составлении диапазона доз для использования на людях. Доза таких соединений предпочтительно находится в диапазоне концентраций в кровотоке, включающих ED₅₀ с небольшой токсичностью или без нее. Доза может варьироваться в этом диапазоне в зависимости от используемой лекарственной формы и пути введения.

В дополнительном варианте осуществления композицию, содержащую мутеин ИЛ-2, представленный в настоящем описании, вводят индивидууму в соответствии с Physicians' Desk Reference 2003 (Thomson Healthcare; 57th edition (1 ноября 2002 года)).

Способ введения мутеинов ИЛ-2 и композиций по изобретению может варьироваться. Подходящие пути введения включают пероральный, ректальный, чрезслизистый, кишечный, парентеральный, внутримышечны, подкожный, интрадермальный, интрамедуллярный, интратекальный, прямой внутрижелудочковый, внутривенный, интраперитонеальный, интраназальный, внутриглазной, ингаляционный, инсуффляционный, топический, кожный, трансдермальный и внутриартериальный.

В конкретных вариантах осуществления мутеин ИЛ-2 по изобретению можно вводить инвазивным путем, например, посредством инъекции. В дополнительных вариантах осуществления мутеин ИЛ-2 или его фармацевтическую композицию вводят внутривенно, подкожно, интратекально, внутримышечно или интрацеребрально. В конкретном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 или его фармацевтическую композицию вводят внутривенно. В другом конкретном варианте осуществления мутеин ИЛ-2 или его фармацевтическую композицию вводят подкожно.

Композиции можно вводить с помощью медицинских устройств, известных в этой области. Например, фармацевтическую композицию по изобретению можно вводить посредством инъекции с помощью гиподермальной игли, включая, например, заранее наполненный шприц или автоинжектор.

Фармацевтические композиции, представленные в настоящем описании, также можно вводить посредством инфузии.

Схема введения зависит от нескольких факторов, включая скорость метаболизма в сыворотке или ткани мутеина ИЛ-2, уровень симптомов, иммуногенность мутеина ИЛ-2 и доступность клеток-мишеней в биологической матрице. Предпочтительно, с помощью схемы введения вводят достаточно мутеина ИЛ-2 для улучшения состояния целевого заболевания при одновременной минимизации нежелательных побочных эффектов. Таким образом, количество биологического средства частично зависит от конкретного мутеина ИЛ-2 и тяжести состояния, подвергаемого лечению. Доступно руководство по выбору подходящих доз (см., например, Wawrzynczak (1996) Antibody Therapy, Bios Scientific Pub. Ltd, Oxfordshire, UK; Kresina (ed.) (1991) Monoclonal Antibodies, Cytokines and Arthritis, Marcel Dekker, New York, NY; Bach (ed.) (1993) Monoclonal Antibodies and Peptide Therapy in Autoimmune Diseases, Marcel Dekker, New York, NY; Baert, et al. (2003) New Engl. J. Med. 348:601-608; Milgrom et al. (1999) New Engl. J. Med. 341:1966-1973; Slamon et al. (2001) New Engl. J. Med. 344:783-792; Beniaminovitz et al. (2000) New Engl. J. Med. 342:613-619; Ghosh et al. (2003) New Engl. J. Med. 348:24-32; Lipsky et al. (2000) New Engl. J. Med. 343:1594-1602).

Определение подходящей дозы осуществляет клиницист, например, с использованием параметров или факторов, которые, как известно или предполагают в этой области, влияют на лечение. В некоторых вариантах осуществления доза начинается с количества, немного меньшего, чем оптимальная доза, и ее повышают с небольшими приращениями до достижения желаемого или оптимального эффекта относительно любых отрицательных побочных эффектов.

Как описано ранее, мутеин ИЛ-2 можно вводить совместно с одним или более дополнительными средствами. Мутеин ИЛ-2 можно связывать со средством (например, в конъюгате) или можно вводить отдельно от средства. В последнем случае (при отдельном введении) мутеин ИЛ-2 можно вводить до, после или одновременно со средством или можно вводить совместно с другими известными способами терапии.

Наборы

Настоящее изобретение также относится к наборам, содержащим мутеин ИЛ-2, представленный в настоящем описании, или его композицию (например, фармацевтическую композицию), упакованную в подходящий упаковочный материал. Набор необязательно включает ярлык или вкладыш в упаковку, включающий описание компонентов или инструкции по использованию in vitro, in vivo или ex vivo его компонентов.

Термин "упаковочный материал" относится к физической структуре, удерживающей компоненты набора. С помощью упаковочного материала можно поддерживать компоненты в стерильности, и его можно получать из материала, общеупотребительного для таких целей (например, бумаги, гофрированной фибры, стекла, пластика, фольги, ампул, флаконов, пробирок и т.д.).

Наборы, представленные в настоящем описании, могут включать ярлыки или вкладыши. Ярлыки или вкладыши включают "печатный материал", например, бумагу или картон, отдельный или прикрепленный к компоненту, набору или упаковочному материалу (например, коробке) или прикрепленный, например, к ампуле, пробирке или флакону, содержащему компонент набора. Ярлыки или вкладыши могут дополнительно включать машиночитаемый носитель, такой как диск (например, жесткий диск, карта памяти, диск памяти), оптический диск, такой как CD- или DVD-ROM/RAM, DVD, MP3, магнитная лента или электрические носители, такие как RAM и ROM, или их гибриды, такие как магнитные/оптические носители, FLASH-носители, или карты памяти. Ярлыки или вкладыши могут включать информацию, где указана информация о производителе, номерах партий, местонахождении производителя и дате.

Наборы, представленные в настоящем описании, могут дополнительно включать другие компоненты. Каждый компонент набора может содержаться в отдельном контейнере, и все из различных контейнеров могут находиться в отдельной упаковке. Наборы также могут быть предназначены для хранения в холоде.

ОБЩИЕ СПОСОБЫ

Стандартные способы молекулярной биологии описаны в Sambrook, Fritsch and Maniatis (1982 & 1989 2^nd Edition, 2001 3^rd Edition) Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Sambrook and Russell (2001) Molecular Cloning, 3^rd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Wu (1993) Recombinant DNA, Vol. 217, Academic Press, San Diego, CA). Стандартные способы также приведены в Ausbel, et al. (2001) Current Protocols in Molecular Biology, Vols.1-4, John Wiley and Sons, Inc. New York, NY, где описано клонирование в бактериальных клетках и мутагенез ДНК (Vol. 1), клонирование в клетках млекопитающих и дрожжах (Vol. 2), гликоконъюгаты и экспрессия белков (Vol. 3) и биоинформатика (Vol. 4).

Описаны способы очистки белков, включая иммунопреципитацию, хроматографию, электрофорез, центрифугирование и кристаллизация (Coligan, et al. (2000) Current Protocols in Protein Science, Vol. 1, John Wiley и Sons, Inc., New York). Описаны химический анализ, химическая модификация, посттрансляционная модификация, продукция слитых белков, гликозилирование белков (см., например, Coligan, et al. (2000) Current Protocols in ProteinScience, Vol. 2, John Wiley and Sons, Inc., New York; Ausubel, et al. (2001) Current Protocols in Molecular Biology, Vol. 3, John Wiley and Sons, Inc., NY, NY, pp. 16,0.5-16,22,17; Sigma-Aldrich, Co. (2001) Products for Life Science Research, St. Louis, MO; pp. 45-89; Amersham Pharmacia Biotech (2001) BioDirectory, Piscataway, N.J., pp. 384-391). Описаны продукция, очистка и фрагментация поликлональных и моноклональных антител (Coligan, et al. (2001) Current Protocols in Immunology, Vol. 1, John Wiley and Sons, Inc., New York; Harlow and Lane (1999) Using Antibodies, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Harlow and Lane, выше). Доступны стандартные способы характеризации взаимодействий лиганд/рецептор (см., например, Coligan, et al. (2001) Current Protocols in Immunology, Vol. 4, John Wiley, Inc., New York).

Доступны способы проточной цитометрии, включая активируемую флуоресценцией сортировку клеток (FACS) (см., например, Owens, et al. (1994) Flow Cytometry Principles for Clinical Laboratory Practice, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ; Givan (2001) Flow Cytometry, 2^nd ed.; Wiley-Liss, Hoboken, NJ; Shapiro (2003) Practical Flow Cytometry, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ). Доступны флуоресцентные реагенты, подходящие для модификации нуклеиновых кислот, включая праймеры и зонды нуклеиновой кислоты, полипептиды, и антитела, для использования, например, в качестве диагностических реагентов (Molecular Probes (2003) Catalogue, Molecular Probes, Inc., Eugene, OR; Sigma-Aldrich (2003) Catalogue, St. Louis, MO).

Описаны стандартные способы гистологии иммунной системы (см., например, Muller-Harmelink (ed.) (1986) Human Thymus: Histopathology and Pathology, Springer Verlag, New York, NY; Hiatt, et al. (2000) Color Atlas of Histology, Lippincott, Williams, and Wilkins, Phila, PA; Louis, et al. (2002) Basic Histology: Text and Atlas, McGraw-Hill, New York, NY).

Доступны пакеты программ и базы данных для определения, например, антигенных фрагментов, лидерных последовательностей, фолдинга белков, функциональных доменов, участков гликозилирования и выравнивания последовательностей (см., например, GenBank, пакет Vector NTI® (Informax, Inc, Bethesda, MD); пакет GCG Wisconsin (Accelrys, Inc., San Diego, CA); DeCypher® (TimeLogic Corp., Crystal Bay, Nevada); Menne, et al.(2000) Bioinformatics 16: 741-742; Menne, et al. (2000) Bioinformatics Applications Note 16:741-742; Wren, et al. (2002) Comput. Methods Programs Biomed. 68:177-181; von Heijne (1983) Eur. J. Biochem. 133:17-21; von Heijne (1986) Nucleic Acids Res. 14:4683-4690).

Пример 1. Клонирование, экспрессия и очистка мутеинов ИЛ-2

Полинуклеотиды, кодирующие различные мутеины ИЛ-2, синтезировали и клонировали в плазмиду PTT5 (Canadian National Research Council). Клетки ExpiCHO или Expi293, выращиваемые в экспрессионной среде Gibco ExpiCHO или Expi293 в суспензии, транзиторно трансфицировали с использованием конструкций PTT5, содержащих полинуклеотидов, кодирующих различные мутеины ИЛ-2, и коммерчески доступного реагента ExpiFectamine и протоколов (Thermo-Fisher). В кратком изложении, клетки трансфицировали в день 0 с использованием 1 мг тотальной ДНК на 1 мл клеток с жизнеспособностью >95%, измеренной с использованием Vi-Cell (Beckman-Coulter). Для экспрессии бивалентных мутеинов ИЛ-2 трансфекцию осуществляли с использованием конструкции PTT5, кодирующей мутеин ИЛ-2, содержащий вариант Fc Fc-1 (SEQ ID NO: 13). В некоторых вариантах осуществления экспрессии моновалентных мутеинов ИЛ-2 первую конструкцию PTT5, кодирующую мутеин ИЛ-2, содержащий вариант Fc Fc-2 (SEQ ID NO: 14), и вторую конструкцию PTT5, кодирующую вариант Fc Fc-4 (SEQ ID NO: 17), использовали для котрансфекции, и соотношение первой конструкции PTT5 и второй конструкции PTT5 составляло 3:1. В других вариантах осуществления экспрессии моновалентных мутеинов ИЛ-2 первую конструкцию PTT5, кодирующую мутеин ИЛ-2, содержащий вариант Fc Fc-3 (SEQ ID NO: 15), и вторую конструкцию PTT5, кодирующую вариант Fc Fc-5 (SEQ ID NO: 18), использовали для котрансфекции, и соотношение первой конструкции PTT5 и второй конструкции PTT5 составляет 3:1. Культуры собирали в день 5 в случае клеток Expi293 и между днем 8 и днем 12 в зависимости от жизнеспособности клеток более 80% в случае клеток ExpiCHO. Моновалентные или бивалентные мутеины ИЛ-2 выделяли из очищенного супернатанта с использованием хроматографии с протеином A (mAbSelect Sure LX, GE Healthcare) с помощью систем AKTA FPLC (GE Healthcare). После нанесения смолу промывали 20 объемами колонки PBS и мутеины ИЛ-2 элюировали с использованием 20 мМ ацетата натрия, pH 3,5. В случае бивалентных мутеинов ИЛ-2 после пропускания через анионообменную смолу (Capto Q, GE Healthcare) после хроматографии с протеином A, как правило, было достаточно для получения белка высокой гомогенности. В случае моновалентных мутеинов ИЛ-2 после исходной очистки с помощью протеина A и пропускания через анионообменную смолу использовали катионообменную хроматографию (Capto S) для отделения желаемого моновалентного гетеродимера мутеина ИЛ-2 от загрязнений, таких как гомодимер варианта Fc, мономер мутеина ИЛ-2 и/или мутеин гомодимера ИЛ-2, для получения более чем на 95% моновалентного гетеродимера. Для разных вариантов необходимые разные условия соли и pH для разделения. В некоторых случаях эксклюзионную хроматографию дополнительно использовали для получения >95% моновалентного гетеродимера.

Пример 2. Определение аффинности связывания мутеинов ИЛ-2 с ИЛ-2Rα или ИЛ-2Rβ человека посредством поверхностного плазмонного резонанса

Анализ поверхностного плазмонного резонанса (SPR) с помощью устройства Biacore T200 (Cytiva) использовали для определения аффинностей связывания мутеинов ИЛ-2 с мечеными полигистидином рецепторами ИЛ-2. Аналитическое программное обеспечение Biacore T200 Evaluation Software использовали для аппроксимации каждой серии титрования к модели связывания 1:1 или равновесной аффинности. Константу скорости ассоциации (k_on, M^-1сек^-1) и константу скорости диссоциации (k_off, сек^-1) определяли для каждого набора титрований и использовали для вычисления константы диссоциации K_D=k_off/k_on каждого мутеина ИЛ-2 с каждым рецептором.

Для измерения аффинности мутеина ИЛ-2-Fc и контрольного слитого белка Fc ИЛ-2 WT с рецептором ИЛ-2 слитый белок ИЛ-2-Fc фиксировали на поверхности с антителом против Fc IgG человека, а затем рецептора ИЛ-2 в качестве аналита. Примеры мутеинов ИЛ-2 86BCH, 43BGO, 44BGO, 47BJO, 48BJO, 49BJO, 65BJO, 44BJP, 45BJP, 46BJP и 47BJP являются моновалентными, в то время как 54BGO является бивалентной версией 43BGO, 48BMP является бивалентной версией 49BJO, и 21BMT является бивалентной версией 65BJO. 86BCH содержит замену T на A, соответствующую положению 3, и замену C на S, соответствующую положению 125 ИЛ-2 дикого типа человека (SEQ ID NO: 39), и его использовали в качестве контроля. Все другие примеры мутеинов ИЛ-2 содержат одни и те же замены T на A и C на S, соответствующие положениям 3 и 125 ИЛ-2 дикого типа человека, соответственно. В таблице 1 приведены замены аминокислот, встроенные в каждый мутеин ИЛ-2. Положения таких замен соответствуют аминокислотной последовательности ИЛ-2 дикого типа человека (SEQ ID NO: 39). Необходимо отметить, что такие замены при описании в отношении SEQ ID NO: 1 или 2 будут отличаться, т.к. каждая из SEQ ID NO: 1 и 2 не содержит первую аминокислоту, обнаруживаемую в аминокислотной последовательности ИЛ-2 дикого типа человека (SEQ ID NO: 39).

Таблица 1. Примеры мутеинов ИЛ-2 и соответствующие замены аминокислот

Мутеин ИЛ-2 Замены по сравнению с ИЛ-2 дикого типа человека (SEQ ID NO: 39) 86BCH или 99BHY T3A C125S 43BGO T3A D20N V69A Q74P C125S 44BGO T3A D20N P34R E68S C125S 54BGO (бивалентный) T3A D20N V69A Q74P C125S 47BJO T3A D20N P34R V69A Q74P C125S 48BJO T3A D20N P34R E68S V69A Q74P C125S 49BJO T3A D20N E68S V69A Q74P C125S 65BJO T3A D20N E68S Q74P C125S 44BJP T3A D20N E68S N71R C125S 45BJP T3A D20N P34R E68S N71R C125S 46BJP T3A D20N E68S N71R Q74P C125S 47BJP T3A D20N P34R E68S V69A N71R Q74P C125S 48BMP (бивалентный) T3A D20N E68S V69A Q74P C125S (те же мутации, что и в 49BJO) 21BMT (бивалентный) T3A D20N E68S Q74P C125S (те же мутации, что и в 65BJO)

Как показано в таблице 2, аффинность связывания контрольного 86BCH (средняя для четырех тестов) к ИЛ-2Rα человека составляла приблизительно 30 нМ, в то время как аффинности других примеров мутеинов ИЛ-2 к ИЛ-2Rα человека находилась в диапазоне от 1,1 нМ до 44 нМ. С другой стороны, аффинность контрольного 86BCH (средняя для четырех тестов) к ИЛ-2Rβ человека составляла приблизительно 1500 нМ, в то время как ни один из других примеров мутеинов ИЛ-2 не демонстрировал детектируемого связывания с ИЛ-2Rβ человека при анализе в количестве 3 мМ.

Таблица 2. Аффинности связывания мутеинов ИЛ-2 с ИЛ-2Rα или ИЛ-2Rβ человека

ИЛ-2 Мутеин KD связывания с ИЛ-2Rα (M) KD связывания с ИЛ-2Rβ (M) 86BCH 3,0E-08±1,0E-08 1,5E-06±2,3E-07 43BGO 1,1E-09 NB¹ 44BGO 1,6E-08 NB 54BGO (бивалентный) 1,9E-09 NB 47BJO 1,8E-09 NB 48BJO 4,0E-09 NB 49BJO 3,9E-09 NB 65BJO 4,1E-08 NB 44BJP 4,4E-08 NB 45BJP 4,2E-08 NB 46BJP 2,8E-08 NB 47BJP 1,8E-09 NB 48BMP 9,8E-09 NB 21BMT 9,7E-08 NB

¹Отсутствие связывания.

Пример 3. Анализ мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) человека pSTAT5

Мутеины ИЛ-2 подготавливали в серийном разведении и 50 мл добавляли на планшет с U-образным дном в двух параллелях. Добавляли 50 мл PBMC (~500 тыс. клеток/объем) и помещали образцы в условия 37°C, 5% CO₂ на 30 минут ("мин"). Добавляли холодный PBS, центрифугировали образцы и удаляли супернатанты. Добавляли буфер для фиксации IC (Invitrogen, кат. № 00-8222-49), смешивали и инкубировали образцы при комнатной температуре в течение 20 мин. Образцы промывали 2 раза буфером для окрашивания FBS (BD кат. № 554656), а затем окрашивали с помощью антител против CD3 (Invitrogen, кат. № 47-0038-42) и против CD56 (Biolegend, кат. № 318334) в течение 30 мин и держали закрытыми на льду. Образцы промывали 2 раза буфером для окрашивания и пермеабилизовали с использованием предварительно охлажденного буфера Perm III (BD, кат. № 558050) в течение 30 мин и держали закрытыми на льду. Затем образцы промывали 2 раза буфером для окрашивания и окрашивали с помощью антител против CD4 (Invitrogen, кат. № 46-0047-42), против CD8 (BD, кат. № 555634), против CD25 (BD, кат. № 335807), против CD127 (Invitrogen, кат. № 12-1278-42), против Y694 pSTAT5 (BD, кат. № 612599) и против FoxP3 (Invitrogen, кат. № 48-4777-42) в течение 1 часа и держали закрытыми на льду. Образцы промывали 2 раза буфером для окрашивания и ресуспендировали в 130 мл. Затем образцы анализировали с помощью проточного цитометра BD Symphony.

Файлы FCS импортировали в FlowJo или FCSExpress. Лимфоциты гейтировали с использованием прямого светорассеяния против бокового светорассеяния. Отдельные клетки гейтировали с использованием площади прямого светорассеяния против высоты прямого светорассеяния и последовательно с помощью высоты прямого светорассеяния против ширины прямого светорассеяния. Таким образом, CD3-отрицательные клетки, экспрессирующие CD56, гейтировали по NK-клеткам (экспрессии pSTAT5, оцениваемой в этих клетках). CD3-положительные клетки субгейтировали как CD4-положительные или CD8-положительные клетки (экспрессия pSTAT5, оцениваемая в этих CD8-положительных клетках). CD4-положительные клетки дополнительно разделяли с использованием экспрессии CD25 и FoxP3, и клетки, являвшиеся CD4-положительными, но двойными отрицательными по CD25 и FoxP3, идентифицировали как T_conv-клетки (экспрессия pSTAT5, оцениваемая в этих клетках). CD4-положительные клетки, являвшиеся двойными положительными по CD25 и FoxP3, идентифицировали как регуляторные T-клетки (экспрессия pSTAT5, оцениваемая в этих клетках). Необработанные образцы использовали в качестве руководства для гейтирования pSTAT5-положительных клеток.

PBMC стимулировали серийными разведениями различными примерами мутеинов ИЛ-2, содержащих вариант Fc. 86BCH или 99BHY использовали в качестве контроля. Единственным различием между 99BHY и 86BCH является то, что в варианте Fc в 99BHY отсутствует C-концевой остаток лизина. Ответы pSTAT5 других примеров мутеинов ИЛ-2 нормализовали по 86BCH или 99BHY с использованием процента положительных pSTAT5 в наиболее высокой концентрации как 100% и отсутствие обработки как 0%. Кривые доза-ответ получали с использованием аппроксимация log(агонист) против ответа - переменный угловой коэффициент (четыре параметра) и вычисляли EC₅₀.

Способность таких мутеинов ИЛ-2 активировать pSTAT5 оценивали в смешанной популяции PBMC от множества доноров с гейтированием по популяциям CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ регуляторных (T_reg) клеток и эффекторных T-клеток, включая CD8⁺ T-клетки и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетки. T_reg-клетки демонстрировали более низкую EC₅₀ ответа pSTAT5 на контроль по сравнению с CD8⁺ T-клетками и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетками, что соответствует более высокой аффинности к тримерному комплексу рецептора ИЛ-2 (ИЛ-2R α/β/γ), экспрессируемому на T_reg-клетках, чем аффинность к димерному комплексу рецептора ИЛ-2 (ИЛ-2R β/γ), экспрессируемому на CD8⁺ T-клетках и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетках (фиг. 1A-1C для 86BCH и фиг. 2A-2C для 99BHY). В отличие от этого, стимуляция PBMC другими примерами мутеинов ИЛ-2 индуцировала фосфорилирование STAT5 селективно в T_reg, но не CD8⁺ и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетках в концентрациях до 1 мкМ (фиг. 1A-1C и фиг. 2A-2C). В соответствии с преимущественной активностью этих мутеинов в отношении компартмента CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ T_reg-клеток, индуцирование фосфорилирования STAT5 в дозах выше 0,1 мкМ являлось минимальным в CD8⁺ T-клетках и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетках по сравнению с контролями (фиг. 1B-1C и фиг. 2B-2C). Эти ответы являлись согласованными у многих доноров (n=7). Эти результаты свидетельствуют о том, что различные примеры мутеинов ИЛ-2 селективно активировали первичные T_reg-клетки человека, но не эффекторные CD8⁺ T-клетки или CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетки.

Значения EC₅₀ примеров мутеинов ИЛ-2 для активации первичных T_reg-клеток человека объединены в таблице 3A ниже.

Таблица 3A. Значения EC₅₀ примеров мутеинов ИЛ-2 при активации первичных T_reg-клеток человека

Мутеин ИЛ-2 EC₅₀ (нМ) Стандартное отклонение (нМ) 43BGO 0,227 0,227 44BGO 1,232 0,893 54BGO (бивалентный) 0,039 0,063 48BJO 0,216 0,229 49BJO 0,441 0,285 65BJO 0,928 1,011 44BJP 0,334 0,271 45BJP 0,465 0,475 46BJP 0,259 0,148 47BJP 0,153 0,178 99BHY 0,003 0,002

Тот же эксперимент, который описан выше, проводили для дополнительных примеров мутеинов ИЛ-2 снова с использованием 99BHY в качестве контроля, как указано в таблице 3B ниже.

Таблица 3B. Значения EC₅₀ дополнительных примеров мутеинов ИЛ-2 при активации первичных T_reg-клеток человека

Мутеин ИЛ-2 EC₅₀ (нМ) Стандартное отклонение (нМ) 99BHY 0,00258 0,00145 DNB558 (моновалентный) 4,5304 3,93733 21BMT (бивалентный) 0,03147 0,0215 DNB557 (моновалентный) 0,97162 1,08037 48BMP (бивалентная) 0,01784 0,00819

DNB558 является моновалентным и имеет те же мутации ИЛ-2, что и 65BJO (также моновалентный) и 21BMT (бивалентный). DNB558 и 65BJO отличаются тем, что 65BJO имеет дополнительные мутации в Fc-области. DNB557 является моновалентным и имеет те же мутации ИЛ-2, что и 49BJO (моновалентный) и 48BMP (бивалентный). DNB557 отличается от 49BJO тем, что 49BJO имеет дополнительные мутации в Fc-области.

Аналогично, T_reg-клетки демонстрировали более низкую EC₅₀ ответа pSTAT5 на контроль по сравнению с CD8⁺ T-клеткам и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клеткам, что соответствует более высокой аффинности к тримерному комплексу рецептора ИЛ-2 (ИЛ-2R α/β/γ), экспрессируемому на T_reg-клетках, чем аффинность к димерному комплексу рецептора ИЛ-2 (ИЛ-2R β/γ), экспрессируемому на CD8⁺ T-клетках и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетках (фиг. 3A для 99BHY). В отличие от этого, стимуляция PBMC дополнительными оцениваемыми примерами мутеинов ИЛ-2 индуцировала фосфорилирование STAT5 селективно в T_reg, но не CD8⁺ и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетках в концентрациях до 1 мкМ (фиг. 3A-3C). В соответствии с преимущественной активностью этих мутеинов в отношении компартмента CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ T_reg-клеток, индукция фосфорилирования STAT5 в дозах выше 0,1 мкМ являлась минимальной в CD8⁺ T-клетках и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетках по сравнению с контролях (фиг. 3B-3C). Эти ответы являлись согласованными у многих доноров (n=7). Эти результаты соответствуют предшествующим результатам и свидетельствуют о том, что различные примеры мутеинов ИЛ-2 селективно активировали T_reg-клетки человека, но не эффекторные CD8⁺ T-клетки или CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетки.

Пример 4. Анализ pSTAT5 в цельной крови макака-резуса

Мутеины ИЛ-2 подготавливали в серийном разведении и добавляли 25 мл в планшет с глубокими лунками в двух параллелях, герметично закрывали и помещали в условия 37°C, 5% CO₂ в течение 30 мин. Добавляли 100 мл цельной крови макака-резуса комнатной температуры и смешивали. Образцы инкубировали при 37°C, 5% CO₂ в течение 20 мин. Клетки окрашивали с помощью антител против CD3 (BD, кат. № 557917), против CD127 (Invitrogen, кат. № 12-1278-42), против CD25 (Invitrogen, кат. № 25-0257-42) и против NKG2A (Miltenyi, кат. № 130-113-565), инкубировали при комнатной температуре в течение 20 мин с острожным встряхиванием и закрывали. Затем клетки лизировали и фиксировали с использованием 1-кратного буфера Lyse/Fix (BD кат. № 558049), тщательно смешивали и инкубировали при комнатной температуре в течение 10 мин и закрывали. Клетки промывали 2 раза буфером для окрашивания FBS (BD, кат. № 554656) и переносили в 96-луночный планшет. Предварительно охлажденный буфер Perm III (BD, кат. № 558050) добавляли к образцам, смешивали, икубировали на льду в течение 30 мин и закрывали. Образцы промывали 2 раза буфером для окрашивания. К образцам добавляли антитела для внутриклеточного окрашивания против FoxP3 (Invitrogen, кат. № 48-4777-42), против pSTAT5 Y694 (BD, кат. № 612599), против CD4 (BD, кат. № 552838) и против CD8 (BD, кат. № 563795), инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре и закрывали. Образцы промывали 2 раза буфером для окрашивания и ресуспендировали в 130 мл. Образцы анализировали с помощью проточного цитометра BD Symphony.

Файлы FCS импортировали в FlowJo. Лимфоциты гейтировали с использованием прямого светорассеяния против бокового светорассеяния. Отдельные клетки гейтировали с использованием площади прямого светорассеяния против высоты прямого светорассеяния. Таким образом, CD3-отрицательные клетки, экспрессирующие NKG2A, гейтировали по NK-клеткам (экспрессии pSTAT5, оцениваемой в этих клетках). CD3-положительные клетки субгейтировали как CD4-положительные или CD8-положительные клетки (экспрессия pSTAT5, оцениваемая в этих CD8-положительных клетках). CD4-положительные клетки дополнительно разделяли с использованием экспрессии CD25 и FoxP3, и клетки, являвшиеся CD4-положительными, но двойными отрицательными по CD25 и FoxP3 идентифицировали как T_conv-клетки (экспрессия pSTAT5, оцениваемая в этих клетках). CD4-положительные клетки дополнительно субгейтировали по CD25 и CD127. Клетки, являвшиеся CD25-положительными и CD127-отрицательными, оценивали на экспрессиб FoxP3 и идентифицировали их как регуляторные T-клетки (экспрессия pSTAT5, оцениваемая в этих клетках). FMO CD25, FoxP3 и pSTAT5 использовали в качестве руководства для гейтирования.

Цельную кровь стимулировали серийными разведениями различных примеров мутеинов ИЛ-2, содержащих вариант Fc. 99BHY использовали в качестве контроля. Ответы pSTAT5 других примеров мутеинов ИЛ-2 нормализовали по 99BHY с использованием процента положительных pSTAT5 при наиболее высокой концентрации как 100% и отсутствие обработки как 0%. Кривые доза-ответ получали с использованием аппроксимации log(агонист) против ответа - переменный угловой коэффициент (четыре параметра) и вычисляли EC₅₀.

Способность таких мутеинов ИЛ-2 активировать pSTAT5 оценивали в матрице с цельной кровью множества макак-резусов с гейтированием по популяциям CD4⁺CD127^-CD25⁺Foxp3⁺ регуляторных (T_reg) клеток и эффекторных T-клеток, включая CD8⁺ T-клетки и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетки. T_reg-клетки демонстрировали более низкую EC₅₀ ответа pSTAT5 на контроль по сравнению с CD8⁺ T-клетками и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетками, что соответствует более высокой аффинности к тримерному комплексу рецептора ИЛ-2 (ИЛ-2R α/β/γ), экспрессируемому на T_reg-клетках, аффинности к димерному комплексу рецептора ИЛ-2 (ИЛ-2R β/γ), экспрессируемому на CD8⁺ T-клетках и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетках (фиг. 3A-3C для 99BHY). В отличие от этого, стимуляция цельной крови другими примерами мутеинов ИЛ-2 индуцировала фосфорилирование STAT5 селективно в T_reg, но не в CD8⁺ и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетках в концентрациях до 3 мкМ (фиг. 4A-4C). В соответствии с преимущественной активностью этих мутеинов в отношении компартмента CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ T_reg-клеток индуцирование фосфорилирования STAT5 в дозах выше 1 мкМ являлось минимальным в CD8⁺ T-клетках и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетках по сравнению с контролем (фиг. 4B-4C). Эти ответы являлись согласованными у многих доноров (n=2). Эти результаты свидетельствуют о том, что различные примеры мутеинов ИЛ-2 селективно активировали первичные T_reg-клетки макак-резусов, но не эффекторные CD8⁺ T-клетки или CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетки.

Значения EC₅₀ примеров мутеинов ИЛ-2 для активации первичных T_reg-клеток макак-резусов объединены в таблице 4A ниже.

Таблица 4A. Значения EC₅₀ примеров мутеинов ИЛ-2 при активации первичных T_reg-клеток макак-резусов

Мутеин ИЛ-2 EC₅₀ (нМ) Стандартное отклонение (нМ) 48BJO 0,165 0,037 49BJO 0,199 0,059 65BJO 0,023 0,007 47BJP 0,224 0,087

Тот же эксперимент, который описан выше, проводили для дополнительных примеров мутеинов ИЛ-2 снова с использованием 99BHY в качестве контроля, как приведено в таблице 4B ниже. DNB558 является моновалентным и имеет те же мутации ИЛ-2, что и 65BJO (также моновалентный) и 21BMT (бивалентная). DNB557 является моновалентным и имеет те же мутации ИЛ-2, что и 49BJO (моновалентный) и 48BMP (бивалентный).

Таблица 4B. Значения EC₅₀ примеров мутеинов ИЛ-2 при активации первичных T_reg-клеток макак-резусов

Мутеин ИЛ-2 EC₅₀ (нМ) Стандартное отклонение (нМ) 99BHY 0,000751 0,000166 DNB558 (моновалентный) 0,069823 0,010048 21BMT (бивалентная) 0,008134 0,007411 DNB557 (моновалентный) 0,6894 0,152767 48BMP (бивалентная) 0,023936 0,020688

Аналогично, T_reg-клетки демонстрировали более низкую EC₅₀ ответа pSTAT5 на контроль по сравнению с CD8⁺ T-клетками и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетками, что соответствует более высокой аффинности к тримерному комплексу рецептора ИЛ-2 (ИЛ-2R α/β/γ), экспрессируемому на T_reg-клетках, чем аффинность к димерному комплексу рецептора ИЛ-2 (ИЛ-2R β/γ), экспрессируемому на CD8⁺ T-клетках и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетках (фиг. 5A для 99BHY). В отличие от этого, стимуляция PBMC дополнительными оцениваемыми примерами мутеинов ИЛ-2 индуцировала фосфорилирование STAT5 селективно в T_reg, но не в CD8⁺и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетках в концентрациях до 1 мкМ (фиг. 5A-5C). В соответствии с преимущественной активностью этих мутеинов в отношении компартмента CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ T_reg-клеток, индукция фосфорилирования STAT5 в дозах выше 0,1 мкМ являлась минимальной в CD8⁺ T-клетках и CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетках по сравнению с контролями (фиг. 5B-5C). Эти ответы являлись согласованными у многих доноров (n=7). Эти результаты соответствуют предшествующим результатам и свидетельствуют о том, что различные примеры мутеинов ИЛ-2 селективно активировали первичные T_reg-клетки человека, но не эффекторные CD8⁺ T-клетки или CD4⁺CD25^-Foxp3^- T-клетки.

Пример 5. Экспансия и активация T_reg-клетки человека в модели ксено-РТПХ

Мутеины оценивали на их способность к экспансии и активации T_reg-клеток человека в модели ксено-РТПХ (реакции трансплантат против хозяина) с использованием мышей huPBMC-NSG. Мышей NSG приобретали в Jackson Laboratory и пересаживали им PMBC человека. Через от четырнадцати до семнадцати дней после пересадки PBMC (мононуклеарных клеток периферической крови) человека мышам вводили одну дозу мутеинов ИЛ-2. Примеры мутеинов ИЛ-2, оцениваемых в этом примере, приведены в таблице 5. Спленоциты мышей профилировали ежедневно в течение пяти дней или восьми дней в некоторых исследованиях посредством анализа FACS (активируемой флуоресценцией сортировки клеток). T_reg-клетки человека в спленоцитах идентифицировали как CD45⁺CD56^-CD3⁺CD4⁺CD127^lowFoxp3⁺ T-клетки человека. Все оцениваемые мутеины повышали экспансию CD4⁺ FoxP3⁺ T_reg человека (фиг. 6A- D).

Поверхностную экспрессию CD25 на T_reg человека количественно анализировали посредством анализа FACS. Все оцениваемые мутеины ИЛ-2 повышали экспрессию CD25 на поверхности T_reg (фиг. 7A-7D).

Таблица 5: Оцениваемые примеры мутеинов ИЛ-2

Мутеин ИЛ-2 Замены по сравнению с ИЛ-2 дикого типа человека (SEQ ID NO: 39) 48BMP (бивалентный) T3A D20N E68S V69A Q74P C125S (те же мутации, что и в 49BJO) 21BMT (бивалентный) T3A D20N E68S Q74P C125S (те же мутации, что и в 65BJO) DNB557 (моновалентный) T3A D20N E68S V69A Q74P C125S DNB558 (моновалентный) T3A D20N E68S Q74P C125S

Пример 6. Профили PF/PK для мутеинов в моновалентном и бивалентном формате у макак-резусов

Оценивали профиль PK/PD некоторых примеров мутеинов ИЛ-2, где мутеины находились в бивалентном и моновалентном формате, после подкожного введения. Дизайн исследования приведен в таблице 6 ниже. В этом исследовании использовали биологически наивных самцов макак-резусов. Использовали 3 животных на группу. Животным вводили в дозу в день 0 и 14 подкожным путем, и объем раствора дозы составляли 1 мл/кг. Продолжительность исследования составляла 28 дней.

Таблица 6.

Группа Мутеин ИЛ-2 Уровень дозы (мкг/кг) 1 48BMP (бивалентный) 900 2 21BMT (бивалентный) 100 3 DNB557 900 4 DNB558 100

Сыворотку для фармакокинетического (PK) исследования (7 аликвот по 100 мкл) получали следующим образом: день 0-1-ая доза: до введения, 15 мин, 2 ч, 6 ч; день 1, день 2, день 3, день 7, день 9; день 14-2-ая доза: до введения, 15 мин, 2 ч, 6 ч; дни 15, 16, 17, 21, 23, 28. Цельную кровь (2 аликвоты) собирали для анализа pSTAT5 и иммунофенотипирования (T_reg, T_conv, CD8⁺, NK-клетки) для фармакодинамического (PD) анализа получали следующим образом:

Панель A: день -5, день 0-1-ая доза: до введения; день 1, день 3, день 4, день 7, день 9; день 14-2-ая доза: до введения; дни 15, 17, 18, 21, 23, 28

Панель B: день -5, день 0-1-ая доза: до введения, 2 ч; день 1, день 2, день 3, день 7, день 9; день 14-2-ая доза: до введения, 2 ч; дни 15, 16, 17, 21, 23, 28

Биохимию сыворотки и CRP (C-реактивный белок) оценивали следующим образом: день -5, день 0-1-ая доза: до введения, 2 ч; день 1, день 7; день 14-2-ая доза: до введения, 2 ч; дни 15, 16, 17, 21, 23, 28. Общий анализ крови проводили следующим образом: день -5, день 0-1-ая доза: до введения; день 1, день 3, день 4, день 7, день 9; день 14-2-ая доза: до введения; дни 15, 17, 18, 21, 23, 28.

Результаты анализа PK/PD после дозы 1 приведены ниже для моновалентных и бивалентных мутеинов (см. таблицы 7A и 7B, соответственно) и на фиг. 8A-8D.

Таблица 7A: Данные для моновалентного NCA после дозы 1

Мутеин Животное Время полужизни (ч) T_max(ч) C_max (нмоль/л) AUC_last (ч*нмоль/л) CL-F-pred (л/ч/кг) MRT_last (ч) DNB558 1 66,2 6 11,1 996 0,00146 86,6 2 101 48 13,5 1920 0,000706 107 3 75 6 11,2 1010 0,00143 81,3 N 3 3 3 3 3 3 Среднее 80,7 20 11,9 1,310 0,0012 91,6 SD 18 24,2 1,34 531 0,000427 13,5 DNB557 4 70 24 57,1 7440 0,00175 85,2 5 70,2 24 54,9 7730 0,00168 96,1 6 71,3 48 64,6 7460 0,00174 85,3 N 3 3 3 3 3 3 Среднее 70,5 32 58,9 7,540 0,00172 88,9 SD 0,71 13,9 5,1 163 3,81E-05 6,28

Таблица 7B: Данные для бивалентного NCA после дозы 1

Мутеин Животное Время полужизни (ч) T_max(ч) C_max (нмоль/л) AUC_last (ч*нмоль/л) CL-F-pred (л/ч/кг) MRT_last (ч) 21BMT 7 38,7 6 2,41 302 0,00401 79 8 41,8 24 2,38 231 0,00525 56,2 9 48,9 6 3,68 329 0,00367 66,3 N 3 3 3 3 3 3 Среднее 43,1 12 2,83 287 0,00431 67,2 SD 5,24 10,4 0,743 50,5 0,000831 11,4 48BMP 10 53,1 6 33,7 820 0,0133 38,9 11 70,8 6 32,5 855 0,0126 50,6 12 74,9 6 39,1 1110 0,00969 44,1 N 3 3 3 3 3 3 Среднее 66,3 6 35,1 929 0,0118 44,5 SD 11,6 0 3,52 158 0,0019 5,87

Кроме того, в таблице 8 приведены различные результаты в отношении PK/PD для примеров мутеинов ИЛ-2, оцениваемых вместе с результатами анализа STAT5 макака-резуса и STAT5 человека. Результаты анализа STAT5 макака-резуса и человека в таблице 8 ниже вычисляли с использованием геометрического среднего.

Таблица 8.

Мутеин Доза (нмоль/кг) STAT5 макака-резуса (нМ) STAT5 человека
(нМ) Кратное изменение T_reg MRT (ч) AUC_T_reg/ AUC_exp AUG_T_reg/ Dose Моновалентный DNB558 1,5 0,066 5,02 11,2 91,6 1,2 1044 Моновалентный DNB557 14,5 0,723 1,12 6,2 88,9 0,1 99 Бивалентный 21BMT 1,2 0,008 0,03 5,8 67,2 3,6 867 Бивалентный 48BMP 11 0,028 0,02 2,8 44,5 0,6 48

Все цитируемые в настоящем описании источники включены в него в качестве ссылок в той же степени, как если бы каждая отдельная публикация, запись в базе данных (например, последовательности GenBank или записи в GeneID), патентная заявка или патент была конкретно и отдельно указана как включенная в качестве ссылки. Это указание о включении в качестве ссылки предусмотрено заявителями в соответствии с 37 C.F.R. §1.57(b)(1), что относится к каждой отдельной публикации записи в базе данных (например, последовательностям GenBank или записям в GeneID), патентной заявке или патенте, каждый из которых четко указан в соответствии с 37 C.F.R. §1.57(b)(2), даже если такое цитирование не является непосредственно смежным для конкретного указания о включении в качестве ссылки. Включение указанных заявлений о включении в качестве ссылки, если они присутствуют, в настоящем описании не ослабляет каким-либо образом это общее указание о включении в качестве ссылки. Цитирование ссылок в настоящем описании не предназначено быть допущением того, что ссылка относится к предшествующему уровню техники, это также не является каким-либо признанием касательно содержания или даты этих публикаций или документов.

Настоящее изобретение по своему объему не ограничено конкретными вариантами осуществления, представленными в настоящем описании. Фактически, различные модификации изобретения, в дополнение к представленным в настоящем описании, будут очевидными специалистам в этой области из изложенного выше описания и сопутствующих чертежей. Такие модификации предназначены для включения в объем формулы изобретения.

Изложенное выше описание считают достаточным, чтобы специалист в этой области мог осуществить настоящее изобретение на практике. Различные модификации по изобретению, в дополнение к приведенным и представленным в настоящем описании, будут очевидными специалистам в этой области из изложенного выше описания и попадут в объем формулы изобретения.

В таблице 9 ниже обобщены все последовательности, представленные в настоящем описании.

Таблица 9. Последовательности, представленные в настоящем описании

SEQ ID NO Описание последовательности Последовательность (белок) 1 Альдеслейкин PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 2 Альдеслейкин_T3A PASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 3 43BGO-ИЛ-2 PASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEALNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 4 44BGO-ИЛ-2 PASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 5 47BJO-ИЛ-2 PASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEALNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 6 48BJO-ИЛ-2 PASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESALNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 7 49BJO-ИЛ-2 PASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESALNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 8 65BJO-ИЛ-2 PASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 9 44BJP-ИЛ-2 PASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLRLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 10 45BJP-ИЛ-2 PASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLRLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 11 46BJP-ИЛ-2 PASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLRLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 12 47BJP-ИЛ-2 PASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESALRLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 13 Fc-1 DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 14 Fc-2 DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 15 Fc-3 DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 16 Линкер-1 GGGGSGGGGS 17 Fc-4 DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 18 Fc-5 DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 19 43BGO с Fc с "выступом" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEALNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 20 44BGO с Fc с "выступом" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 21 47BJO с Fc с "выступом" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEALNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 22 48BJO с Fc с "выступом" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESALNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 23 49BJO с Fc с "выступом" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESALNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 24 65BJO с Fc с "выступом" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 25 44BJP с Fc с "выступом" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLRLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 26 45BJP с Fc с "выступом" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLRLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 27 46BJP с Fc с "выступом" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLRLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 28 47BJP с Fc с "выступом" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESALRLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 29 43BGO с Fc со "впадиной" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEALNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 30 44BGO с Fc со "впадиной" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 31 47BJO с Fc со "впадиной" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEALNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 32 48BJO с Fc со "впадиной" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESALNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 33 49BJO с Fc со "впадиной" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESALNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 34 65BJO с Fc со "впадиной" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 35 44BJP с Fc со "впадиной" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLRLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 36 45BJP с Fc со "впадиной" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLRLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 37 46BJP с Fc со "впадиной" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLRLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 38 47BJP с Fc со "впадиной" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESALRLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 39 Человек дикого типа ИЛ-2 APTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT 40 Человек дикого типа ИЛ-2 без A1 PTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIISTLT 41 Линкер-2 GGGSGGGS 42 Линкер-3 GGGGGSGGGGGS 43 99BHY с Fc с "выступом" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 44 86BCH с Fc с "выступом" DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPCRDELTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 45 21BMT
Те же мутации, что и в 65BJO с линкером и FC-1 DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 46 48BMP
Те же мутации, что и в 49BJO с линкером и Fc-1 DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESALNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 47 FC-1 с линкером и ИЛ-2 43BGO DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEALNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 48 FC-1 с линкером и ИЛ-2 44BGO DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 49 FC-1 с линкером и ИЛ-2 47BJO DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEALNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 50 FC-1 с линкером и 48BJO DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESALNLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 51 FC-1 с линкером и ИЛ-2 44BJP DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLRLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 52 FC-1 с линкером и ИЛ-2 45BJP DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLRLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 53 FC-1 с линкером и ИЛ-2 46BJP DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESVLRLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 54 FC-1 с линкером и ИЛ-2 47BJP DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGGGGGSGGGGSPASSSTKKTQLQLEHLLLNLQMILNGINNYKNRKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLESALRLAPSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFSQSIISTLT 55 Fc-6 DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNRFTQKSLSLSPGK 56 Fc-7 DKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVSVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVCTLPPSRDELTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNRFTQKSLSLSPG

--->

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> Merck Sharp & Dohme Corp.

Alves, Stephen E

Moore, Renee

Azahi, Glareh

Benso, Lia

Cheng, Alan C

Georgiev, Peter

Hall, Brian E.

Zhang-Hoover, Jie

Juan, Veronica M

Sriraman, Venkataraman

Beaumont, Maribel

<120> МУТЕИНЫ ИЛ-2 ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ АУТОИММУННЫХ И ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ

ЗАБОЛЕВАНИЙ

<130> 25184-WO-PCT

<150> 63/129,712

<151> 2020-12-23

<160> 56

<170> PatentIn версии3.5

<210> 1

<211> 132

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Альдеслейкин

<400> 1

Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu

1. 5 10 15

Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn

20 25 30

Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys

35 40 45

Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro

50 55 60

Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg

65 70 75 80

Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys

85 90 95

Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr

100 105 110

Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile

115 120 125

Ser Thr Leu Thr

130

<210> 2

<211> 132

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Альдеслейкин_T3A

<400> 2

Pro Ala Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu

1. 5 10 15

Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn

20 25 30

Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys

35 40 45

Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro

50 55 60

Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg

65 70 75 80

Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys

85 90 95

Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr

100 105 110

Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile

115 120 125

Ser Thr Leu Thr

130

<210> 3

<211> 132

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> ИЛ-2 43BGO

<400> 3

Pro Ala Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu

1. 5 10 15

Leu Leu Asn Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn

20 25 30

Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys

35 40 45

Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro

50 55 60

Leu Glu Glu Ala Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg

65 70 75 80

Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys

85 90 95

Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr

100 105 110

Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile

115 120 125

Ser Thr Leu Thr

130

<210> 4

<211> 132

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> ИЛ-2 44BGO

<400> 4

Pro Ala Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu

1. 5 10 15

Leu Leu Asn Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn

20 25 30

Arg Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys

35 40 45

Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro

50 55 60

Leu Glu Ser Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg

65 70 75 80

Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys

85 90 95

Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr

100 105 110

Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile

115 120 125

Ser Thr Leu Thr

130

<210> 5

<211> 132

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> ИЛ-2 47BJO

<400> 5

Pro Ala Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu

1. 5 10 15

Leu Leu Asn Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn

20 25 30

Arg Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys

35 40 45

Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro

50 55 60

Leu Glu Glu Ala Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg

65 70 75 80

Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys

85 90 95

Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr

100 105 110

Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile

115 120 125

Ser Thr Leu Thr

130

<210> 6

<211> 132

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> ИЛ-2 48BJO

<400> 6

Pro Ala Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu

1. 5 10 15

Leu Leu Asn Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn

20 25 30

Arg Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys

35 40 45

Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro

50 55 60

Leu Glu Ser Ala Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg

65 70 75 80

Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys

85 90 95

Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr

100 105 110

Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile

115 120 125

Ser Thr Leu Thr

130

<210> 7

<211> 132

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> ИЛ-2 49BJO

<400> 7

Pro Ala Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu

1. 5 10 15

Leu Leu Asn Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn

20 25 30

Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys

35 40 45

Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro

50 55 60

Leu Glu Ser Ala Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg

65 70 75 80

Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys

85 90 95

Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr

100 105 110

Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile

115 120 125

Ser Thr Leu Thr

130

<210> 8

<211> 132

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> ИЛ-2 65BJO

<400> 8

Pro Ala Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu

1. 5 10 15

Leu Leu Asn Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn

20 25 30

Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys

35 40 45

Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro

50 55 60

Leu Glu Ser Val Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg

65 70 75 80

Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys

85 90 95

Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr

100 105 110

Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile

115 120 125

Ser Thr Leu Thr

130

<210> 9

<211> 132

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> ИЛ-2 44BJP

<400> 9

Pro Ala Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu

1. 5 10 15

Leu Leu Asn Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn

20 25 30

Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys

35 40 45

Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro

50 55 60

Leu Glu Ser Val Leu Arg Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg

65 70 75 80

Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys

85 90 95

Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr

100 105 110

Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile

115 120 125

Ser Thr Leu Thr

130

<210> 10

<211> 132

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> ИЛ-2 45BJP

<400> 10

Pro Ala Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu

1. 5 10 15

Leu Leu Asn Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn

20 25 30

Arg Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys

35 40 45

Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro

50 55 60

Leu Glu Ser Val Leu Arg Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg

65 70 75 80

Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys

85 90 95

Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr

100 105 110

Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile

115 120 125

Ser Thr Leu Thr

130

<210> 11

<211> 132

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> ИЛ-2 46BJP

<400> 11

Pro Ala Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu

1. 5 10 15

Leu Leu Asn Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn

20 25 30

Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys

35 40 45

Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro

50 55 60

Leu Glu Ser Val Leu Arg Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg

65 70 75 80

Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys

85 90 95

Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr

100 105 110

Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile

115 120 125

Ser Thr Leu Thr

130

<210> 12

<211> 132

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> ИЛ-2 47BJP

<400> 12

Pro Ala Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu

1. 5 10 15

Leu Leu Asn Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn

20 25 30

Arg Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys

35 40 45

Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro

50 55 60

Leu Glu Ser Ala Leu Arg Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg

65 70 75 80

Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys

85 90 95

Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr

100 105 110

Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile

115 120 125

Ser Thr Leu Thr

130

<210> 13

<211> 226

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Fc-1

<400> 13

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly

225

<210> 14

<211> 226

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Fc-2

<400> 14

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly

225

<210> 15

<211> 226

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Fc-3

<400> 15

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly

225

<210> 16

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Линкер-1

<400> 16

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1. 5 10

<210> 17

<211> 227

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Fc-4

<400> 17

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Lys

225

<210> 18

<211> 227

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Fc-5

<400> 18

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Lys

225

<210> 19

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 43BGO с Fc с "выступом"

<400> 19

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Ala

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 20

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 44BGO с Fc с "выступом"

<400> 20

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Arg Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Val

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 21

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 47BJO с Fc с "выступом"

<400> 21

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Arg Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Ala

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 22

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 48BJO с Fc с "выступом"

<400> 22

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Arg Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Ala

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 23

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 49BJO с Fc с "выступом"

<400> 23

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Ala

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 24

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 65BJO с Fc с "выступом"

<400> 24

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Val

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 25

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 44BJP с Fc с "выступом"

<400> 25

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Val

290 295 300

Leu Arg Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 26

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 45BJP с Fc с "выступом"

<400> 26

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Arg Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Val

290 295 300

Leu Arg Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 27

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 46BJP с Fc с "выступом"

<400> 27

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Val

290 295 300

Leu Arg Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 28

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 47BJP с Fc с "выступом"

<400> 28

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Arg Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Ala

290 295 300

Leu Arg Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 29

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 43BGO с Fc со "впадиной"

<400> 29

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Ala

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 30

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 44BGO с Fc со "впадиной"

<400> 30

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Arg Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Val

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 31

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 47BJO с Fc со "впадиной"

<400> 31

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Arg Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Ala

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 32

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 48BJO с Fc со "впадиной"

<400> 32

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Arg Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Ala

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 33

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 49BJO с Fc со "впадиной"

<400> 33

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Ala

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 34

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 65BJO с Fc со "впадиной"

<400> 34

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Val

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 35

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 44BJP с Fc со "впадиной"

<400> 35

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Val

290 295 300

Leu Arg Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 36

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 45BJP с Fc со "впадиной"

<400> 36

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Arg Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Val

290 295 300

Leu Arg Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 37

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 46BJP с Fc со "впадиной"

<400> 37

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Val

290 295 300

Leu Arg Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 38

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 47BJP с Fc со "впадиной"

<400> 38

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Arg Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Ala

290 295 300

Leu Arg Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 39

<211> 133

<212> БЕЛОК

<213> homo sapien

<400> 39

Ala Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His

1. 5 10 15

Leu Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys

20 25 30

Asn Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys

35 40 45

Lys Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys

50 55 60

Pro Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu

65 70 75 80

Arg Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu

85 90 95

Lys Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala

100 105 110

Thr Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile

115 120 125

Ile Ser Thr Leu Thr

130

<210> 40

<211> 132

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 40

Pro Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu

1. 5 10 15

Leu Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn

20 25 30

Pro Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys

35 40 45

Ala Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro

50 55 60

Leu Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg

65 70 75 80

Pro Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys

85 90 95

Gly Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr

100 105 110

Ile Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile Ile

115 120 125

Ser Thr Leu Thr

130

<210> 41

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер-2

<400> 41

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser

1. 5

<210> 42

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер-3

<400> 42

Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Gly Ser

1. 5 10

<210> 43

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 99BHY с Fc с "выступом"

<400> 43

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asp Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Val

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 44

<211> 369

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 86BCH с Fc с "выступом"

<400> 44

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Cys Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Trp Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser

225 230 235 240

Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asp

245 250 255

Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu

260 265 270

Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu

275 280 285

Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu

290 295 300

Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp

305 310 315 320

Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu

325 330 335

Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu

340 345 350

Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu

355 360 365

Thr

<210> 45

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 21BMT

<400> 45

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Val

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 46

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 48BMP

<400> 46

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Ala

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 47

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FC 1, линкер, 43BGO

<400> 47

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Ala

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 48

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FC 1, линкер, 44BGO

<400> 48

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Arg Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Val

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 49

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FC 1, линкер, 47BJO

<400> 49

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Arg Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Glu Ala

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 50

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FC 1, линкер, 49BJO

<400> 50

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Arg Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Ala

290 295 300

Leu Asn Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 51

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FC 1, линкер, 44BJP

<400> 51

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Val

290 295 300

Leu Arg Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 52

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FC 1, линкер, 45BJP

<400> 52

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Arg Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Val

290 295 300

Leu Arg Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 53

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FC 1m, линкер, 46BJP

<400> 53

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Val

290 295 300

Leu Arg Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 54

<211> 368

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FC 1, линкер, 47BJP

<400> 54

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Pro Ala Ser Ser

225 230 235 240

Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu Leu Asn Leu

245 250 255

Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Arg Lys Leu Thr

260 265 270

Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala Thr Glu Leu

275 280 285

Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu Glu Ser Ala

290 295 300

Leu Arg Leu Ala Pro Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro Arg Asp Leu

305 310 315 320

Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly Ser Glu Thr

325 330 335

Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile Val Glu Phe

340 345 350

Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Ser Gln Ser Ile Ile Ser Thr Leu Thr

355 360 365

<210> 55

<211> 227

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Fc-6

<400> 55

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly Lys

225

<210> 56

<211> 226

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Fc-7

<400> 56

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly

1. 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ser Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Cys Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly

225

<---

Изобретения относятся к биотехнологии. Предложены мутеины ИЛ-2, связывающиеся с субъединицей α рецептора ИЛ-2, но не имеющие измеримого связывания с субъединицей β рецептора ИЛ-2. Также предложены выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая мутеин IL-2, экспрессирующий вектор и клетка-хозяин для получения мутеина ИЛ-2, фармацевтическая композиция для лечения ИЛ-2-опосредованного заболевания, способ получения мутеина ИЛ-2, способ лечения ИЛ-2-опосредованного заболевания, способы селективной активации регуляторных T-клеток без активации CD8+ T-клеток или селективной активации клеток, экспрессирующих субъединицу β рецептора ИЛ-2. Выделенный мутеин ИЛ-2 содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, содержащую одну из следующих групп аминокислотных замен: D19N, P33R и E67S; D19N, P33R, V68A и Q73P; D19N, P33R, E67S, V68A и Q73P; D19N, P33R, E67S и N70R; или D19N, P33R, E67S, V68A, N70R и Q73P. Изобретения обеспечивают селективную активацию сигналов ИЛ-2R в различных типах клеток для лечения иммуноопосредованных заболеваний. 15 н. и 13 з.п. ф-лы, 9 ил., 9 табл., 6 пр.

1. Выделенный мутеин ИЛ-2, связывающийся с субъединицей α рецептора ИЛ-2, но не имеющим измеримого связывания с субъединицей β рецептора ИЛ-2, содержащий полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 2, содержащую одну из следующих групп аминокислотных замен:

D19N, P33R и E67S;

D19N, P33R, V68A и Q73P;

D19N, P33R, E67S, V68A и Q73P;

D19N, P33R, E67S и N70R; или

D19N, P33R, E67S, V68A, N70R и Q73P.

2. Выделенный мутеин ИЛ-2, связывающийся с субъединицей α рецептора ИЛ-2, но не имеющим измеримого связывания с субъединицей β рецептора ИЛ-2, содержащий полипептид, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4, 5, 6, 10 или 12.

3. Выделенный мутеин ИЛ-2, связывающийся с субъединицей α рецептора ИЛ-2, но не имеющим измеримого связывания с субъединицей β рецептора ИЛ-2, содержащий первый полипептид и второй полипептид, где первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20, 21, 22, 26 или 28; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17.

4. Мутеин ИЛ-2 по п.3, где первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17.

5. Мутеин ИЛ-2 по п.3, где первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17.

6. Выделенный мутеин ИЛ-2, связывающийся с субъединицей α рецептора ИЛ-2, но не имеющим измеримого связывания с субъединицей β рецептора ИЛ-2, содержащий первый полипептид и второй полипептид, где первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 30, 31, 32, 36 или 38; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18.

7. Мутеин ИЛ-2 по п.6, где первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 31; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18.

8. Мутеин ИЛ-2 по п.6, где первый полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 32; и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18.

9. Выделенный мутеин ИЛ-2, связывающийся с субъединицей α рецептора ИЛ-2, но не имеющим измеримого связывания с субъединицей β рецептора ИЛ-2, содержащий первый полипептид и второй полипептид, где каждый из первого и второго полипептидов содержат ту же аминокислотную последовательность, которая содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 48, 49, 50, 52 или 54.

10. Мутеин ИЛ-2 по п.9, где первый полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 49, и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 49.

11. Мутеин ИЛ-2 по п.9, где первый полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 50, и второй полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 50.

12. Фармацевтическая композиция для лечения ИЛ-2-опосредованного заболевания у индивидуума, содержащая мутеин ИЛ-2 по любому из пп.3-11 и фармацевтически приемлемый носитель.

13. Способ лечения ИЛ-2-опосредованного заболевания у индивидуума, включающий введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 по любому из пп.3-11 или фармацевтической композиции по п.12.

14. Способ по п.13, где ИЛ-2-опосредованное заболевание является аутоиммунным заболеванием.

15. Способ по п.13, где ИЛ-2-опосредованное заболевание представляет собой ревматоидный артрит, болезнь Крона, псориаз, псориатический артрит, рассеянный склероз, системную красную волчанку (SLE), кожную красную волчанку (CLE), волчаночный нефрит, анкилозирующий спондилит, диабет I типа, синдром Шегрена, язвенный колит, оптикомиелит, целиакию, склеродермию, височный артериит, атопический дерматит, очаговую алопецию, реакцию "трансплантат против хозяина" (РТПХ), аутоиммунный гепатит, первичный склерозирующий холангит или воспалительную миопатию.

16. Способ селективной активации регуляторных T-клеток без активации CD8+ T-клеток у нуждающегося в этом индивидуума, включающий введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 по любому из пп.3-11 или фармацевтической композиции по п.12.

17. Способ селективной активации клеток, экспрессирующих субъединицу β рецептора ИЛ-2, но не активации клеток, экспрессирующих субъединицу α рецептора ИЛ-2, у нуждающегося в этом индивидуума, включающий введение индивидууму терапевтически эффективного количества мутеина ИЛ-2 по любому из пп.3-11 или фармацевтической композиции по п.12.

18. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая мутеин IL-2 по любому из пп.1-11.

19. Экспрессирующий вектор, содержащий выделенную нуклеиновую кислоту по п.18.

20. Клетка-хозяин для получения мутеина ИЛ-2, содержащая экспрессирующий вектор по п.19.

21. Способ получения мутеина ИЛ-2, включающий:

(a) культивирование клетки-хозяина по п.27;

(b) экспрессию экспрессирующего вектора по п.26; или

(c) экспрессию выделенной нуклеиновой кислоты по п.25,

в условиях, в которых экспрессируется мутеин ИЛ-2.

22. Применение мутеина ИЛ-2 по любому из пп.3-11 или фармацевтической композиции по п.12 для лечения ИЛ-2-опосредованного заболевания у индивидуума.

23. Применение мутеина ИЛ-2 по любому из пп.3-11 или фармацевтической композиции по п.12 для получения лекарственного средства для лечения ИЛ-2-опосредованного заболевания у индивидуума.

24. Применение по любому из пп.22, 23, где ИЛ-2-опосредованное заболевание является аутоиммунным заболеванием.

25. Применение по любому из пп.22, 23, где ИЛ-2-опосредованное заболевание представляет собой ревматоидный артрит, болезнь Крона, псориаз, псориатический артрит, рассеянный склероз, системную красную волчанку (SLE), кожную красную волчанку (CLE), волчаночный нефрит, анкилозирующий спондилит, диабет I типа, синдром Шегрена, язвенный колит, оптикомиелит, целиакию, склеродермию, височный артериит, атопический дерматит, очаговую алопецию, реакцию "трансплантат против хозяина" (РТПХ), аутоиммунный гепатит, первичный склерозирующий холангит или воспалительную миопатию.

26. Способ по п.15 или применение по п.25, где ИЛ-2-опосредованное заболевание представляет собой SLE.

27. Способ по п.15 или применение по п.25, где ИЛ-2-опосредованное заболевание представляет собой язвенный колит.

28. Способ по п.15 или применение по п.25, где ИЛ-2-опосредованное заболевание представляет собой болезнь Крона.

название	год	авторы	номер документа
СЛИТЫЙ ПОЛИПЕПТИД С ПРОТИВОРАКОВОЙ АКТИВНОСТЬЮ	2016	Хиннер Марлон Бел Айба Рачида Сихам Роте Кристине Ольвилль Шейн Шлоссер Коринна	RU2754466C2
НОВЫЕ ПОЛИПЕПТИДЫ СО СПЕЦИФИЧЕСКИМ СВЯЗЫВАНИЕМ И ПУТИ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ	2015	Хиннер Марлон Виденман Александер Аллерсдорфер Андреа	RU2723034C2
БЕЛКИ, СПЕЦИФИЧНЫЕ В ОТНОШЕНИИ CD137	2016	Хиннер Марлон Роте Кристине Ольвилль Шейн Аллерсдорфер Андреа Бел Айба Рачида Сихам	RU2736312C2
НОВЫЕ БЕЛКИ, СПЕЦИФИЧЕСКИЕ В ОТНОШЕНИИ АНГИОГЕНЕЗА	2016	Бел Айба, Рачида Сихам Аллерсдорфер, Андреа Виденман, Александер Роте, Кристине Ольвилль, Шейн Гилле, Хендрик Одоли, Лоран	RU2720688C2
НОВЫЕ СЛИТЫЕ БЕЛКИ, СПЕЦИФИЧЕСКИЕ В ОТНОШЕНИИ CD137 И GPC3	2020	Бел Айба, Рачида Сихам Боссенмайер, Биргит Жакен, Томас Пепер-Габриэль, Янет Хансбауэр, Эва-Мария Шлоссер, Коринна Ольвилль, Шейн	RU2814653C2
НОВЫЙ СЛИТЫЙ БЕЛОК, СПЕЦИФИЧНЫЙ ДЛЯ CD137 И PD-L1	2019	Павлиду, Марина Паттарини, Лючия Шолер-Даирель, Аликс Роте, Кристина Олвилл, Шейн Бель Айба, Рашида Хиннер, Марлон Пепер, Жанет	RU2818349C2
МУТЕИНЫ ЛИПОКАЛИНА 2 ЧЕЛОВЕКА С АФФИННОСТЬЮ В ОТНОШЕНИИ ГЛИПИКАНА-3 (GPC3)	2016	Хиннер, Марлон Аллерсдорфер, Андреа Бел Айба, Рачида Сихам Алё, Михаэла Виденман, Александер Мачинер, Габриеле Хюльсмейер, Мартин	RU2756318C2
АМИНОАЦИЛ-тРНК-СИНТЕТАЗА ДЛЯ ЭФФЕКТИВНОГО ВВЕДЕНИЯ ПРОИЗВОДНОГО ЛИЗИНА В БЕЛОК	2020	У, Сун Чзан, Чжэньшань Лю, Хуэйлин Чэнь, Вэй	RU2799794C2
ЛЕЧЕНИЕ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОГО НОВООБРАЗОВАНИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ГУМАНИЗИРОВАННОГО ХИМЕРНОГО АНТИГЕННОГО РЕЦЕПТОРА ПРОТИВ ВСМА	2015	Брогдон Дженнифер Чой Юджин Эберсбах Хилмар Гласс Дэвид Хют Хитер Джун Карл Х. Манник Джоан Майлон Майкл С. Мерфи Леон Плиса Габриэла Ричардсон Селеста Руелла Марко Сингх Решма Ван Юнцян У Цилун	RU2751660C2
СЛИТЫЙ БЕЛОК И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ	2020	Лв, Мин Дин, Сяожань Мяо, Шивэй Тань, Бинь Ван, Сюэгун	RU2811120C2

WO 2019125732 A1, 27.06.2019
WO 2005086798 A2, 22.09.2005
WO 2019246404 A1, 26.12.2019
US 10174091 B1, 08.01.2019
Устройство для поворачивания автомобильных прожекторов	1933	Михальский А.М.	SU34326A1

МУТЕИНЫ ИЛ-2 ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ АУТОИММУННЫХ И ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ Российский патент 2025 года по МПК C07K14/55 C07K16/18 C12N15/62 C12N15/63 A61K38/20 A61P37/02

Описание патента на изобретение RU2833295C1

Похожие патенты RU2833295C1

Иллюстрации к изобретению RU 2 833 295 C1

Реферат патента 2025 года МУТЕИНЫ ИЛ-2 ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ АУТОИММУННЫХ И ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Формула изобретения RU 2 833 295 C1

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2025 года RU2833295C1

RU 2 833 295 C1