СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОНЪЮГАТА АНТИТЕЛО-ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО НА ОСНОВЕ ЭРИБУЛИНА Российский патент 2025 года по МПК A61K47/68 C07K5/62 A61K31/357 A61P35/00 

Область техники, к которой относится изобретение

[0001] Настоящее изобретение относится к способу получения конъюгата антитело-лекарственное средство на основе эрибулина.

Уровень техники

[0002] Рак представляет собой одну из основных причин заболевания и смерти, и приблизительно 14000000 новых случаев рака и приблизительно 8200000 смертей от рака были зарегистрированы в 2012 г. Наиболее частыми причинами смерти от рака являются рак легкого (1590000 смертей); рак печени (745000 смертей); рак желудка (723000 смертей); колоректальный рак (694000 смертей); рак молочной железы (521000 смертей) и рак пищевода (400000 смертей). Ожидается, что число новых случаев рака вырастет на приблизительно 70% в течение следующих 20 лет, до приблизительно 22000000 новых случаев рака в год (непатентный литературный источник 1).

[0003] Микротрубочки представляют собой динамические нитевидные белки цитоскелета, связанные с различными клеточными функциями, включая внутриклеточную миграцию и транспорт, передачу клеточных сигналов и поддержание формы клетки. Микротрубочки также играют важную роль в митотическом делении клетки путем образования митотического веретена, которое необходимо для деления хромосомы в две дочерние клетки. Большая часть биологических функций микротрубочек во всех клетках регулируются их динамическими характеристиками полимеризации, которые обусловлены обратимым нековалентным присоединением димеров α- и β-тубулина к обоим концам микротрубочек. Данное динамическое поведение и обусловленный им контроль длины микротрубочек являются жизненно важными для надлежащего функционирования веретена. Даже незначительное изменение динамических характеристик микротрубочек может затрагивать контрольную точку веретена, останавливать прогрессирование клеточного цикла при митозе и затем приводить к гибели клетки (непатентный литературный источник 2). Из-за своей высокой скорости деления раковые клетки в целом являются более чувствительными к соединениям, которые связываются с тубулином и нарушают его нормальное функционирование, по сравнению с нормальными клетками. По этой причине ингибиторы тубулина и другие средства, целенаправленно воздействующие на микротрубочки, стали перспективным классом лекарственных средств для лечения рака (непатентный литературный источник 3).

[0004] Фолатный рецептор альфа (FRA) представляет собой гликофосфатидилинозитол (GPI)-связанный мембранный белок, который связывает фолат. Хотя роль FRA в биологии нормальных тканей и раковых тканей не понятна полностью, FRA сверхэкспрессируется в высокой степени в большом проценте случаев рака яичника эпителиального происхождения (непатентный литературный источник 4), а также в некотором проценте случаев немелкоклеточного рака легкого (непатентный литературный источник 5). FRA также характеризуется ограниченной экспрессией в нормальных тканях. Эти свойства делают FRA привлекательной мишенью для иммунотерапии рака.

[0005] Протоонкогенный рецептор-2 эпидермального фактора роста человека (HER2) кодирует трансмембранный тирозинкиназный рецептор, который принадлежит к семейству рецепторов эпидермального фактора роста человека (непатентный литературный источник 6). Сверхэкспрессия HER2 обеспечивает конститутивную активацию сигнальных путей фактора роста, таких как путь PI3K-AKT-mTOR, и тем самым выступает в качестве онкогенного фактора при нескольких типах рака, включая примерно 20% инвазивных видов рака молочной железы (непатентные литературные источники 7 и 8). Поскольку амплификация HER2 опосредует трансформированный фенотип, HER2 представляет собой другую потенциальную мишень для лечения рака.

Список цитируемой литературы

Патентные литературные источники

[0006]

[Патентный литературный источник 1] WO2017/151979

Непатентные литературные источники

[0007]

[Непатентный литературный источник 1] World Cancer Report 2014

[Непатентный литературный источник 2] Mukhtar et al. (2014) Mol. Cancer Ther. 13:275-84

[Непатентный литературный источник 3] Dumontet and Jordan (2010) Nat. Rev. Drug Discov. 9:790-803

[Непатентный литературный источник 4] O'Shannessy et al. (2013) Int. J. Gynecol. Pathol. 32(3):258-68

[Непатентный литературный источник 5] Christoph et al. (2014) Clin. Lung Cancer 15(5):320-30

[Непатентный литературный источник 6] King et al. (1985) Science 229:974-6

[Непатентный литературный источник 7] Slamon et al. (1989) Science 244:707-12

[Непатентный литературный источник 8] Gajria and Chandarlapaty (2011) Expert Rev. Anticancer Ther. 11:263-75

[Непатентный литературный источник 9] O'Shannessy et al., (2011) Oncotarget 2:1227-43

Сущность изобретения

Техническая задача

[0008] Целью настоящего изобретения является обеспечение способа получения конъюгата антитело-лекарственное средство с высоким выходом и синтетического промежуточного соединения, применимого для данного способа.

Решение задачи

[0009] В настоящем изобретении предусмотрено следующее [1] - [8].

[1] Способ получения конъюгата антитело-лекарственное средство, представленного Формулой (I),

причем в Формуле: Ab представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, D представляет собой эрибулин, m представляет собой целое число от 1 до 10, и p представляет собой целое число от 1 до 8,

при этом способ включает:

стадию 1 получения соединения, представленного Формулой (B), путем осуществления реакции эрибулина или его соли с соединением, представленным Формулой (A),

причем в Формуле: m представляет собой целое число от 1 до 10, и X представляет собой феноксигруппу или нитрофеноксигруппу, и

причем в Формуле: m представляет собой целое число от 1 до 10, и

стадию 2 получения конъюгата антитело-лекарственное средство, представленного Формулой (I), путем осуществления реакции соединения, представленного Формулой (B), с Ab.

[2] Способ в соответствии с [1], в котором Ab содержит (i) домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 1, и домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 6, (ii) вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 23, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 24, (iii) вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 27, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 28, или (iv) домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность представленную под SEQ ID NO: 347, и домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 308.

[3] Способ в соответствии с [1] или [2], в котором p равняется 3 или 4.

[4] Способ в соответствии с любым из [1] - [3], в котором эрибулин или его соль представляют собой эрибулина метансульфонат.

[5] Способ в соответствии с любым из [1] - [4], в котором стадию 1 осуществляют в присутствии основания.

[6] Способ получения соединения, представленного Формулой (B),

причем в Формуле: m представляет собой целое число от 1 до 10,

при этом способ включает:

стадию получения соединения, представленного Формулой (B), путем осуществления реакции эрибулина или его соли с соединением, представленным Формулой (A),

причем в Формуле: m представляет собой целое число от 1 до 10, и X представляет собой феноксигруппу или нитрофеноксигруппу.

[7] Способ в соответствии с [6], в котором стадию осуществляют в присутствии основания.

[8] Соединение, представленное Формулой (A),

причем в Формуле: m представляет собой целое число от 1 до 10, и X представляет собой феноксигруппу или нитрофеноксигруппу.

Полезные эффекты настоящего изобретения

[0010] Настоящее изобретение может обеспечить способ получения конъюгата антитело-лекарственное средство с высоким выходом. Кроме того, настоящее изобретение может обеспечивать синтетическое промежуточное соединение, которое является применимым для получения конъюгата антитело-лекарственное средство с высоким выходом.

Описание вариантов осуществления

[0011] Вариант осуществления настоящего изобретения будет подробно описан ниже.

[0012] Вариант осуществления настоящего изобретения относится к способу получения конъюгата антитело-лекарственное средство, представленного Формулой (I).

[0013] Во-первых, будет описан ADC, представленный Формулой (I).

[0014] ADC может связываться с опухолевыми клетками, интернализоваться ними и уничтожать их (например, опухолевые клетки, экспрессирующие FRA). Кроме того, предпочтительным является то, что фрагмент, представляющий собой антитело (Ab), применяемый в ADC, представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент и целенаправленно воздействует на опухолевые клетки. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит, например:

(a) три CDR тяжелой цепи и три CDR легкой цепи, которые определены согласно системе нумерации Kabat (Kabat, Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1987 и 1991))), три CDR тяжелой цепи, содержащие аминокислотные последовательности определяющей комплементарность области 1 тяжелой цепи (CDR тяжелой цепи), представленной под SEQ ID NO: 2, CDR2 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 3, и CDR3 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 4, и три CDR легкой цепи, содержащие аминокислотные последовательности определяющей комплементарность области 1 легкой цепи (CDR легкой цепи), представленной под SEQ ID NO: 7, CDR2 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 8, и CDR3 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 9; или

(b) три CDR тяжелой цепи и три CDR легкой цепи, которые определены согласно системе нумерации IMGT (Международная иммуногенетическая информационная система (IMGT (зарегистрированное торговое наименование)), три CDR тяжелой цепи, содержащие аминокислотные последовательности CDR1 тяжелой цепи, представленной под SEQ ID NO: 13, CDR2 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 14, и CDR3 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 15, и три CDR легкой цепи, содержащие аминокислотные последовательности CDR1 легкой цепи, представленной под SEQ ID NO: 16, CDR2 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 17, и CDR3 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 18.

[0015] В настоящем описании термины "конъюгат антитело-лекарственное средство", "конъюгат на основе антитела", "конъюгат", "иммуноконъюгат" и "ADC" используются взаимозаменяемо и относятся к соединению или к его производному, которое соединено с антителом (например, антитело к FRA), и определено Формулой I [в Формуле: Ab представляет собой фрагмент, представляющий собой антитело (т. е. представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент), L представляет собой линкерный фрагмент, D представляет собой эрибулин, и p представляет собой число фрагментов, представляющих собой эрибулин, на фрагмент, представляющий собой антитело].

[0016] Термин "антитело" используется в самом широком смысле для обозначения молекулы иммуноглобулина, которая распознает мишень и специфически связывается с ней, такой как белок, полипептид, углевод, полинуклеотид, липид или комбинация вышеуказанных, посредством по меньшей мере одного сайта распознавания антигена в пределах вариабельной области молекулы иммуноглобулина. Тяжелая цепь антитела состоит из вариабельного домена тяжелой цепи (V_H) и константного домена тяжелой цепи (C_H). Легкая цепь антитела состоит из вариабельного домена легкой цепи (V_L) и константного домена легкой цепи (C_L). Для целей настоящей заявки каждый зрелый вариабельный домен тяжелой цепи и легкой цепи содержит три определяющие комплементарность области (CDR1, CDR2 и CDR3) в пределах четырех каркасных областей (FR1, FR2, FR3 и FR4), расположенных от N-конца к C-концу: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 и FR4. "Антитело" может быть встречающимся в природе или сконструированным человеком, таким как моноклональные антитела, полученные с помощью традиционной гибридомной технологии. Термин "антитело" включает в себя полноразмерные моноклональные антитела, полноразмерные поликлональные антитела и одноцепочечные антитела. Кроме того, примеры антигенсвязывающего фрагмента антитела включают в себя Fab, Fab', F(ab')₂ и Fv. Антитело может принадлежать к любому из пяти основных классов иммуноглобулинов: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM или к их подклассам (например, изотипам IgG1, IgG2, IgG3, IgG4). Данный термин дополнительно охватывает антитела человека, химерные антитела, гуманизированные антитела и любую модифицированную молекулу иммуноглобулина, содержащую сайт распознавания антигена, при условии, что они демонстрируют требуемые значения биологической активности.

[0017] Используемый в данном документе термин "моноклональное антитело" означает антитело, полученное из популяции практически однородных антител, что означает то, что отдельные антитела, входящие в состав популяции, являются идентичными, за исключением возможных встречающихся в природе мутаций, которые могут присутствовать в незначительных количествах. Моноклональные антитела являются высокоспецифичными, направленными против одного антигенного эпитопа. В отличие от этого, традиционные препараты (поликлональных) антител, как правило, включают большое разнообразие антител, направленных против (или специфических в отношении) разных эпитопов. Модификатор "моноклональный" указывает на характеристику антитела как полученного из практически однородной популяции антител и не должен рассматриваться как требующий получения антитела с помощью какого-либо конкретного способа. Например, моноклональные антитела, подлежащие применению в соответствии с настоящим изобретением, могут быть получены посредством гибридомного способа, впервые описанного в Kohler et al. (1975) Nature 256:495, или могут быть получены посредством способов рекомбинантной ДНК (см., например, патент США №4816567). Моноклональные антитела также могут быть выделены из фаговых библиотек антител с использованием способов, описанных в Clackson et al. (1991) Nature 352:624-8 и Marks et al. (1991) J. Mol. Biol. 222:581-97, к примеру.

[0018] Моноклональные антитела, описанные в данном документе, в частности, включают "химерные" антитела, в которых часть тяжелой и/или легкой цепей идентична или гомологична соответствующим последовательностям в антителах, полученных от конкретного вида или, принадлежащих к конкретному классу или подклассу антител, при этом остальная часть цепи(-ей) идентична или гомологична соответствующим последовательностям в антителах, полученных от другого вида или принадлежащих к другому классу или подклассу антител, а также фрагменты таких антител, при условии, что они специфически связывают антиген-мишень и/или проявляют требуемую биологическую активность.

[0019] Термин "гомолог" относится к молекуле, которая проявляет гомологию с другой молекулой, например, имеет последовательности химических остатков, которые являются идентичными или аналогичными в соответствующих положениях.

[0020] Используемый в данном документе термин "антитело человека" означает антитело, продуцируемое человеком, или антитело, имеющее аминокислотную последовательность антитела, продуцируемого человеком.

[0021] Используемый в данном документе термин "химерное антитело" означает антитела, в которых аминокислотная последовательность молекулы иммуноглобулина получена от двух или более видов. В некоторых случаях вариабельные домены как тяжелой, так и легкой цепей соответствуют вариабельным доменам антител, полученных от одного вида с требуемой специфичностью, аффинностью и активностью, при этом константные области гомологичны антителам, полученным от другого вида (например, человека), чтобы минимизировать иммунный ответ у последнего вида.

[0022] Используемый в данном документе термин "гуманизированное антитело" означает формы антител, которые содержат последовательности из антител, отличных от антител человека (например, мышиные), а также антитела человека. Такие антитела представляют собой химерные антитела, которые содержат минимальную последовательность, полученную из иммуноглобулина, отличного от иммуноглобулина человека. В целом гуманизированное антитело содержит практически весь из по меньшей мере одного и, как правило, двух вариабельных доменов, в которых все или практически все из гипервариабельных петель соответствуют петлям иммуноглобулина, отличного от иммуноглобулина человека, а все или практически все из каркасных областей (FR) представляют собой каркасные области из последовательности иммуноглобулина человека. Гуманизированное антитело необязательно также содержит по меньшей мере часть константной области (Fc) иммуноглобулина, как правило, часть константной области (Fc) иммуноглобулина человека. Гуманизированное антитело может быть дополнительно модифицировано посредством замены остатков в каркасной области Fv и/или в пределах замененных остатков, отличных от человеческих, для улучшения и оптимизации специфичности, аффинности и/или активности антитела.

[0023] Используемый в данном документе термин "антигенсвязывающий фрагмент" антитела относится к одному или нескольким фрагментам антитела, которые сохраняют способность специфично связываться с антигеном (например, FRA). Антигенсвязывающие фрагменты также преимущественно сохраняют способность к интернализации в клетку, экспрессирующую антиген. В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающие фрагменты также сохраняют иммунную эффекторную активность. Было показано, что фрагменты полноразмерного антитела способны выполнять антигенсвязывающую функцию полноразмерного антитела. Примеры связывающих фрагментов, охватываемых термином "антигенсвязывающий фрагмент" антитела, включают: (i) Fab-фрагмент, одновалентный фрагмент, состоящий из доменов V_L, V_H, C_L и C_H1; (ii) a F(ab')₂-фрагмент, двухвалентный фрагмент, содержащий два Fab-фрагмента, связанных дисульфидным мостиком в шарнирной области; (iii) Fd-фрагмент, состоящий из доменов V_H и C_H1; (iv) Fv-фрагмент, состоящий из доменов V_L и V_H одного плеча антитела; (v) dAb-фрагмент, который содержит один вариабельный домен, например домен V_H (см., например, Ward et al. (1989) Nature 341:544-6; и Winter et al. или WO 90/05144); и (vi) выделенную определяющую комплементарность область (CDR). Кроме того, хотя два домена Fv-фрагмента, V_L и V_H, кодируются отдельными генами, они могут быть соединены с применением рекомбинантных способов с помощью синтетического линкера, который позволяет получать их в виде одной белковой цепи, в которой домены V_L и V_H формируют пару с образованием одновалентных молекул (известных как одноцепочечный Fv (scFv)). См., например, Bird et al. (1988) Science 242:423-6 и Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-83. Подразумевается, что такие одноцепочечные антитела также охватываются термином "антигенсвязывающий фрагмент" антитела, и они известны в уровне техники как иллюстративный тип связывающего фрагмента, который может подвергаться интернализации в клетки после связывания. См., например, Zhu et al. (2010) 9:2131-41; He et al. (2010) J. Nucl. Med. 51:427-32 и Fitting et al. (2015) MAbs 7:390-402. В определенных вариантах осуществления молекулы scFv могут быть включены в слитый белок. Также охватываются другие формы одноцепочечных антител, такие как диатела. Диатела представляют собой биспецифические диатела, в случае которых домены V_H и V_L экспрессируются в виде одной полипептидной цепи, но с применением линкера, который является слишком коротким, чтобы обеспечить формирование пары между двумя областями в одной цепи, что, таким образом, заставляет домены формировать пары с комплементарными областями другой цепи и создавать два антигенсвязывающих сайта (например, см. Holliger et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-8 и Poljak et al. (1994) Structure 2:1121-3). Антигенсвязывающие фрагменты получают с применением традиционных методик, известных специалистам в данной области техники, и антигенсвязывающие фрагменты подвергают скринингу в отношении применимости (например, аффинности связывания, интернализации) таким же образом, что и интактные антитела. Антигенсвязывающие фрагменты можно получать путем расщепления интактного белка, например с помощью протеазы или химического расщепления.

[0024] В настоящем описании антитело или его антигенсвязывающий фрагмент представляет собой интернализующееся антитело или его интернализующийся антигенсвязывающий фрагмент. "Интернализирование", как применяется в данном документе при ссылке на антитело или антигенсвязывающий фрагмент, относится к антителу или антигенсвязывающему фрагменту, которые могут поглощаться через липидную бислойную мембрану клетки во внутренний компартмент (что означает "подвергнуться интернализации") после связывания с клеткой, предпочтительно в компартмент в клетке, в котором происходит деградация, такой как лизосома. Например, интернализующееся антитело к FRA представляет собой антитело, которое может поглощаться в клетку после связывания с FRA на клеточной мембране.

[0025] Применяемый в данном документе термин "фолатный рецептор-альфа" или "FRA" относится к любой нативной форме FRA человека. Термин охватывает полноразмерный FRA (например, эталонную последовательность в NCBI: NP_000793; SEQ ID NO: 19), а также любую Форму FRA человека, которая возникает в результате процессинга в клетке. Этот термин также охватывает встречающиеся в природе варианты FRA, включая без ограничения варианты сплайсинга, аллельные варианты и изоформы. FRA можно выделять из клеток человека или можно получать рекомбинантным путем или с помощью способов синтеза.

[0026] Термин "антитело к FRA" или "антитело, которое специфически связывает FRA" означает любую Форму антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которые специфически связываются с FRA, и охватывает моноклональные антитела (включая полноразмерные моноклональные антитела), поликлональные антитела и биологически функциональные фрагменты антител, при условии, что они специфически связываются с FRA. Предпочтительно антитело к FRA, применяемое в ADC, раскрытое в данном документе, представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент. MORAb-003 представляет собой иллюстративное антитело к FRA человека. Используемые в данном документе термины "специфический", "специфически связывает" относятся к селективному связыванию антитела с эпитопом антигена-мишени. Антитела можно тестировать в отношении специфичности связывания путем сравнения связывания с соответствующим антигеном со связыванием с нерелевантным антигеном или смесью антигенов при определенном наборе условий. Если антитело связывается с соответствующим антигеном с аффинностью, превышающей в по меньшей мере 2, 5, 7 и предпочтительно в 10 раз аффинность к нерелевантному антигену или к смеси антигенов, то считается, что оно является специфическим. В одном варианте осуществления специфическое антитело представляет собой антитело, которое связывается только с FRA-антигеном, но не связывается (или проявляет минимальное связывание) с другими антигенами.

[0027] Используемый в данном документе термин "рецептор 2 эпидермального фактора роста человека", "her2" или "her2/neu", относится к любой нативной форме her2 человека. Термин охватывает полноразмерную последовательность her2 (например, эталонную последовательность в NCBI: NP_004439.2; SEQ ID NO: 21), а также любую Форму her2 человека, которая может возникать в результате процессинга в клетке. Этот термин также охватывает встречающиеся в природе варианты her2, включая без ограничения варианты сплайсинга, аллельные варианты и изоформы. Her2 можно выделять из клеток человека или можно получать рекомбинантным путем или с помощью способов синтеза.

[0028] Термин "антитело к her2" или "антитело, которое специфически связывается с her2" означает любую Форму антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, который специфически связывается с her2 и охватывает моноклональные антитела (включая полноразмерные моноклональные антитела), поликлональные антитела и биологически функциональные фрагменты антител, при условии, что они специфически связываются с her2. В патенте США №5821337 (включенном в данный документ посредством ссылки) представлены иллюстративные her2-связывающие последовательности, включая иллюстративные последовательности антител к her2. Предпочтительно антитело к her2, применяемое в ADC, раскрытых в данном документе, представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент. Трастузумаб представляет собой иллюстративное антитело к her2 человека.

[0029] Термин "эпитоп" относится к части антигена, которую может распознавать антитело и специфически связываться с ней. Если антиген представляет собой полипептид, эпитопы образуются из смежных аминокислот или несмежных аминокислот, приводимых в соприкосновение за счет третичной укладки полипептида. Эпитоп, связываемый антителом, может быть идентифицирован путем применения любой методики картирования эпитопов, известной из уровня техники. Примеры методик картирования эпитопов включают в себя рентгеноструктурную кристаллографию для идентификации эпитопов, осуществляемую путем непосредственной визуализации комплекса антиген-антитело, отслеживание связывания антитела с фрагментами или мутированными вариантами антигена и отслеживание доступа растворителя к разным частям антитела и антигена. Иллюстративные стратегии, применяемые для картирования эпитопов, включают без ограничения олигопептидное сканирование, ограниченный протеолиз, сайт-направленный мутагенез, высокопроизводительное картирование на основе мутагенеза, водород-дейтериевый обмен и масс-спектрометрию (см., например, Gershoni et al. (2007) 21:145-56 и Hager-Braun and Tomer (2005) Expert Rev. Proteomics 2:745-56).

[0030] Для определения антител, совместно связывающих идентичные или перекрывающиеся эпитопы, также можно применять конкурентное связывание и эпитоп-специфическую сортировку. Конкурентное связывание может оцениваться с применением анализа перекрестного блокирования, такого как анализ, описанный в "Antibodies, A Laboratory Manual", Cold Spring Harbor Laboratory, Harlow and Lane (1st edition 1988, 2nd edition 2014). В некоторых вариантах осуществления конкурентное связывание тестируемого антитела или его антигенсвязывающего фрагмента оценивают, когда тестируемое антитело или его антигенсвязывающий фрагмент снижает степень связывания референсного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента с антигеном-мишенью, таким как FRA или her2 (например, связывающего белка, содержащего CDR и/или вариабельные домены, выбранные из идентифицированных в таблицах 2, 4 и 6), на по меньшей мере приблизительно 50% в анализе перекрестного блокирования (например, на 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99%, 99,5% или больше или на любое значение процента в диапазоне представленных значений) и/или наоборот. В некоторых вариантах осуществления конкурентное связывание может быть обусловлено идентичными или подобными (например, частично перекрывающимися) эпитопами или обусловлено стерическим несоответствием, при котором антитела или их антигенсвязывающие фрагменты связываются с близкорасположенными эпитопами. См., например, Tzartos, Methods in Molecular Biology (Morris, ed. (1998) vol. 66, pp. 55-66). В некоторых вариантах осуществления конкурентное связывание можно использовать для сортировки групп связывающих белков, которые имеют аналогичные эпитопы, например эпитопы, которые конкурируют за связывание, могут быть "отсортированы" как группа связывающих белков, которые имеют перекрывающиеся или близкорасположенные эпитопы, при этом белки, которые не конкурируют, могут быть помещены в отдельную группу связывающих белков, которые не имеют перекрывающихся или близкорасположенных эпитопов.

[0031] Термин "k_on" или "k_a" означает константу скорости ассоциации в случае ассоциации антитела с антигеном с образованием комплекса антитело/антиген. Скорость могут определять с применением стандартных анализов, таких как анализ Biacore или ELISA.

[0032] Термин "k_off" или "k_d" означает константу скорости диссоциации в случае диссоциации антитела из комплекса антитело-антиген. Скорость могут определять с применением стандартных анализов, таких как анализ Biacore или ELISA.

[0033] Термин "K_D" означает равновесную константу диссоциации для конкретного взаимодействия антитело-антиген. K_D рассчитывают как k_a/k_d. Скорость могут определять с применением стандартных анализов, таких как анализ Biacore или ELISA.

[0034] Термин "p" или "соотношение антитело:лекарственное средство" относится к числу структурных единиц, содержащих фрагменты, представляющие собой линкеры, и эрибулин, на фрагмент, представляющий собой антитело (Ab) (то есть содержание лекарственного вещества). В некоторых вариантах осуществления p представляет собой целое число от 1 до 10, от 1 до 9, от 1 до 8, от 1 до 7, от 1 до 6, от 1 до 5, от 1 до 4, от 1 до 3 или 1 или 2 и предпочтительно целое число 3 или 4. В композициях, содержащих множественные копии ADC, представленных Формулой I, "p" относится к среднему числу структурных единиц, включая в себя фрагменты, представляющие собой линкеры, и эрибулин на фрагмент, представляющий собой антитело (Ab) (также упоминается, как среднее содержание лекарственного вещества). В случаях, когда p представлено средним значением содержания лекарственного вещества, p может представлять собой число от 3 до 4, от 3,2 до 3,8, от 3,5 до 4,5, от 3,6 до 4,4 или 4.

[0035] В некоторых вариантах осуществления p представляет собой целое число от 1 до 6, от 2 до 5 или 3 или 4. В случаях, когда p представляет собой большее число, количество фрагментов, представляющих собой эрибулин на фрагмент, представляющий собой антитело, повышается. Следовательно, большее число эрибулина может доставляться к клеткам-мишеням с каждым антителом, и его фармакологический эффект может возрастать дополнительно.

[0036] В случаях, когда ADC представляют вне клетки, ADC остается интактным. В случаях, когда ADC подвергается интернализации в клетку (например, раковую клетку), линкерный фрагмент из ADC расщепляется, и эрибулин, находящийся в клетке, высвобождается. Линкерный фрагмент, как правило, является стабильным за пределами клетки Т. е. ADC распознает клетку (например, раковую клетку), которая экспрессирует антиген, специфичный к фрагменту, представляющему собой антитело (Ab), и попадает в клетку. Что касается ADC, который находится в клетке, линкерный фрагмент, который соединяет эрибулин и фрагмент, представляющий собой антитело (Ab), расщепляется так, что эрибулин высвобождается и проявляется фармакологический эффект.

[0037] 1. Фрагмент, представляющий собой антитело (Ab)

Фрагмент, представляющий собой антитело (Ab) в ADC представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, в частности антитело к фолатному рецептору альфа (FRA) или его антигенсвязывающий фрагмент, и может связываться с FRA-экспрессирующей опухолевой клеткой.

[0038] В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент связывается с фолатным рецептором альфа (FRA) и может целенаправленно воздействовать на FRA-экспрессирующую опухолевую клетку. Кроме того, в некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит: (a) три CDR тяжелой цепи (CDR1 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 2, CDR2 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 3, и CDR3 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 4) и три CDR легкой цепи (CDR1 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 7, CDR2 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 8, и CDR3 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 9), которые определены согласно системе нумерации Kabat; или (b) три CDR тяжелой цепи (CDR1 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 13, CDR2 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 14, и CDR3 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 15) и три CDR легкой цепи (CDR1 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 16, CDR2 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 17, и CDR3 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 18), которые определены согласно системе нумерации IMGT. Кроме того, в некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержат каркасные последовательности человека. В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельный домен тяжелой цепи, представленный под SEQ ID NO: 23, и вариабельный домен легкой цепи, представленный под SEQ ID NO: 24. В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержат константный домен тяжелой цепи IgG1 человека и константный домен легкой каппа-цепи Ig. В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающий фрагмент конкурируют за связывание и/или связывается с тем же эпитопом, что и антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, представленный под SEQ ID NO: 23, и вариабельный домен легкой цепи, представленный под SEQ ID NO: 24. В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент связываются с эпитопом, который содержит последовательность аланин-гистидин-лизин-аспарагиновая кислота (Ala-His-Lys-Asp, SEQ ID NO: 345) (непатентный литературный источник 9). В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающий фрагмент связывается с эпитопом, который содержит NTSQEAHKDVSYL (asn-Thr-Ser-Gln-Glu-Ala-His-Lys-Asp-Val-Ser-Tyr-Leu, SEQ ID NO: 346).

[0039] В других вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент связываются с рецептором-2 эпидермального фактора роста человека (her2) и могут целенаправленно воздействовать на her2-экспрессирующие опухолевые клетки. В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит: (a) три CDR тяжелой цепи (CDR1 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 71, CDR2 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 72, и CDR3 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 73) и три CDR легкой цепи (CDR1 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 74, CDR2 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 75, и CDR3 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 76), которые определены согласно системе нумерации Kabat; или (b) три CDR тяжелой цепи (CDR1 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 191, CDR2 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 192, и CDR3 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 193) и три CDR легкой цепи (CDR1 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 194, CDR2 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 195, и CDR3 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 196), которые определены согласно системе нумерации IMGT. Кроме того, в некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержат каркасные последовательности человека. В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельный домен тяжелой цепи, представленный под SEQ ID NO: 27, и вариабельный домен легкой цепи, представленный под SEQ ID NO: 28. В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержат константный домен тяжелой цепи IgG1 человека и константный домен легкой каппа-цепи Ig. В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающий фрагмент конкурируют за связывание и/или связывается с тем же эпитопом, что и антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, представленный под SEQ ID NO: 27, и вариабельный домен легкой цепи, представленный под SEQ ID NO: 28.

[0040] В других вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент связываются с мезотелином (MSLN) и могут целенаправленно воздействовать на MSLN-экспрессирующие опухолевые клетки. В некоторых вариантах осуществления антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит: (a) три CDR тяжелой цепи (CDR1 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 65, CDR2 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 66, и CDR3 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 67) и три CDR легкой цепи (CDR1 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 68, CDR2 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 69, и CDR3 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 70), которые определены согласно системе нумерации Kabat; или (b) три CDR тяжелой цепи (CDR1 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 185, CDR2 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 186, и CDR3 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 187) и три CDR легкой цепи (CDR1 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 188, CDR2 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 189, и CDR3 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 190), которые определены согласно системе нумерации IMGT. В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельный домен тяжелой цепи, представленный под SEQ ID NO: 25, и вариабельный домен легкой цепи, представленный под SEQ ID NO: 26. В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержат константный домен тяжелой цепи IgG1 человека и константный домен легкой каппа-цепи Ig. В некоторых вариантах осуществления антитело или антигенсвязывающий фрагмент конкурируют за связывание и/или связываются с тем же эпитопом, что и антитело, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, представленный под SEQ ID NO: 25, и вариабельный домен легкой цепи, представленный под SEQ ID NO: 26.

[0041] В настоящем варианте осуществления предпочтительный фрагмент, представляющий собой антитело (Ab), представляет собой антитело к фолатному рецептору альфа или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) три CDR тяжелой цепи, содержащие аминокислотные последовательности, представленные под SEQ ID NO: 2 (CDR1 тяжелой цепи), SEQ ID NO: 3 (CDR2 тяжелой цепи) и SEQ ID NO: 4 (CDR3 тяжелой цепи), или три CDR легкой цепи, содержащие аминокислотные последовательности, представленные под SEQ ID NO: 7 (CDR1 легкой цепи), SEQ ID NO: 8 (CDR2 легкой цепи) и SEQ ID NO: 9 (CDR3 легкой цепи), которые определены согласно системе нумерации Kabat; или (b) три CDR тяжелой цепи, содержащие аминокислотные последовательности, представленные под SEQ ID NO: 13 (CDR1 тяжелой цепи), SEQ ID NO: 14 (CDR2 тяжелой цепи) и SEQ ID NO: 15 (CDR3 тяжелой цепи) или три CDR легкой цепи, содержащие аминокислотные последовательности, представленные под SEQ ID NO: 16 (CDR1 легкой цепи), SEQ ID NO: 17 (CDR2 легкой цепи) и SEQ ID NO: 18 (CDR3 легкой цепи), которые определены согласно системе нумерации IMGT. Другой предпочтительный фрагмент, представляющий собой антитело (Ab), представляет собой антитело к рецептору 2 эпидермального фактора роста человека (her2) или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (c) три CDR тяжелой цепи, содержащие аминокислотные последовательности, представленные под SEQ ID NO: 71 (CDR1 тяжелой цепи), SEQ ID NO: 72 (CDR2 тяжелой цепи) и SEQ ID NO: 73 (CDR3 тяжелой цепи), или три CDR легкой цепи, содержащие аминокислотные последовательности, представленные под SEQ ID NO: 74 (CDR1 легкой цепи), SEQ ID NO: 75 (CDR2 легкой цепи) и SEQ ID NO: 76 (CDR3 легкой цепи), которые определены согласно системе нумерации Kabat; или (d) три CDR тяжелой цепи, содержащие аминокислотные последовательности, представленные под SEQ ID NO: 191 (CDR1 тяжелой цепи), SEQ ID NO: 192 (CDR2 тяжелой цепи) и SEQ ID NO: 193 (CDR3 тяжелой цепи) или три CDR легкой цепи, содержащие аминокислотные последовательности, представленные под SEQ ID NO: 194 (CDR1 легкой цепи), SEQ ID NO: 195 (CDR2 легкой цепи) и SEQ ID NO: 196 (CDR3 легкой цепи), которые определены согласно системе нумерации IMGT. Более предпочтительно, что фрагмент, представляющий собой антитело (Ab), представляет собой антитело к фолатному рецептору альфа или его антигенсвязывающий фрагмент.

[0042] Фрагмент, представляющий собой антитело (Ab), содержит любое антитело или антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с антигеном-мишенью на раковой клетке. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент может связываться с антигеном-мишенью с константой диссоциации (K_D), составляющей ≤1 мМ, ≤100 нМ или ≤10 нМ или любое значение в пределах данных значений, измеренной, например, с помощью анализа BIAcore (зарегистрированное торговое наименование). В некоторых вариантах осуществления K_D составляет от 1 пМ до 500 пМ. В некоторых вариантах осуществления K_D составляет от 500 пМ до 1 мкМ, от 1 мкМ до 100 нМ или от 100 мМ до 10 нМ.

[0043] В некоторых вариантах осуществления фрагмент, представляющий собой антитело, представляет собой четырехцепочечное антитело (также называемое иммуноглобулином), содержащее две тяжелые цепи и две легкие цепи. В некоторых вариантах осуществления фрагмент, представляющий собой антитело, представляет собой двухцепочечное полуантитело (одна легкая цепь и одна тяжелая цепь) иммуноглобулина или его антигенсвязывающего фрагмента.

[0044] Аминокислотные последовательности и последовательности нуклеиновых кислот иллюстративных антител согласно настоящему изобретению представлены в таблицах от 1 до 9.

[0045] [Таблица 1]

mAb Класс/Изотип Мишень MORAb-003 гуманизированное фолатный рецептор-альфа человека MORAb-009 мышино-человеческое химерное мезотелин человека Трастузумаб гуманизированное her2/neu человека 33011-xi кроличье-человеческое химерное мезотелин человека 33011-zu гуманизированное мезотелин человека 111B10-xi кроличье-человеческое химерное мезотелин человека 111B10-zu гуманизированное мезотелин человека 201C15-xi кроличье-человеческое химерное мезотелин человека 201C15-zu гуманизированное мезотелин человека 346C6-xi кроличье-человеческое химерное мезотелин человека 346C6-zu гуманизированное мезотелин человека

Аббревиатуры: xi представляет собой химерное антитело, и zu представляет собой гуманизированное антитело.

[0046] Аминокислотные последовательности вариабельных доменов mAb

[Таблица 2]

SEQ ID NO mAb цепь IgG 1 23 MORAb-003 Тяжелая цепь 2 24 MORAb-003 Легкая цепь 3 25 MORAb-009 Тяжелая цепь 4 26 MORAb-009 Легкая цепь 5 27 Трастузумаб Тяжелая цепь 6 28 Трастузумаб Легкая цепь 7 29 33011-xi Тяжелая цепь 8 30 33011-xi Легкая цепь 9 31 33011-zu Тяжелая цепь 10 32 33011-zu Легкая цепь 11 33 111B10-xi Тяжелая цепь 12 34 111B10-xi Легкая цепь 13 35 111B10-zu Тяжелая цепь 14 36 111B10-zu Легкая цепь 15 37 201C15-xi Тяжелая цепь 16 38 201C15-xi Легкая цепь 17 39 201C15-zu Тяжелая цепь 18 40 201C15-zu Легкая цепь 19 41 346C6-xi Тяжелая цепь 20 42 346C6-xi Легкая цепь 21 43 346C6-zu Тяжелая цепь 22 44 346C6-zu Легкая цепь

[0047] Последовательности нуклеиновых кислот, кодирующие вариабельные домены mAb

[Таблица 3]

SEQ ID NO mAb Цепь IgG 1 45 MORAb-003 Тяжелая цепь 2 46 MORAb-003 Легкая цепь 3 47 MORAb-009 Тяжелая цепь 4 48 MORAb-009 Легкая цепь 5 49 33011-xi Тяжелая цепь 6 50 33011-xi Легкая цепь 7 51 33011-zu Тяжелая цепь 8 52 33011-zu Легкая цепь 9 53 111B10-xi Тяжелая цепь 10 54 111B10-xi Легкая цепь 11 55 111B10-zu Тяжелая цепь 12 56 111B10-zu Легкая цепь 13 57 201C15-xi Тяжелая цепь 14 58 201C15-xi Легкая цепь 15 59 201C15-zu Тяжелая цепь 16 60 201C15-zu Легкая цепь 17 61 346C6-xi Тяжелая цепь 18 62 346C6-xi Легкая цепь 19 63 346C6-zu Тяжелая цепь 20 64 346C6-zu Легкая цепь

[0048] Аминокислотные последовательности CDR mAb по Kabat

[Таблица 4]

SEQ ID NO mAb Цепь IgG 1 2 MORAb-003 CDR1 HC 2 3 MORAb-003 CDR2 HC 3 4 MORAb-003 CDR3 HC 4 7 MORAb-003 CDR1 LC 5 8 MORAb-003 CDR2 LC 6 9 MORAb-003 CDR3 LC 7 65 MORAb-009 CDR1 HC 8 66 MORAb-009 CDR2 HC 9 67 MORAb-009 CDR3 HC 10 68 MORAb-009 CDR1 LC 11 69 MORAb-009 CDR2 LC 12 70 MORAb-009 CDR3 LC 13 71 Трастузумаб CDR1 HC 14 72 Трастузумаб CDR2 HC 15 73 Трастузумаб CDR3 HC 16 74 Трастузумаб CDR1 LC 17 75 Трастузумаб CDR2 LC 18 76 Трастузумаб CDR3 LC 19 77 33011-xi CDR1 HC 20 78 33011-xi CDR2 HC 21 79 33011-xi CDR3 HC 22 80 33011-xi CDR1 LC 23 81 33011-xi CDR2 LC 24 82 33011-xi CDR3 LC 25 83 33011-zu CDR1 HC 26 84 33011-zu CDR2 HC 27 85 33011-zu CDR3 HC 28 86 33011-zu CDR1 LC 29 87 33011-zu CDR2 LC 30 88 33011-zu CDR3 LC 31 89 111B10-xi CDR1 HC 32 90 111B10-xi CDR2 HC 33 91 111B10-xi CDR3 HC 34 92 111B10-xi CDR1 LC 35 93 111B10-xi CDR2 LC 36 94 111B10-xi CDR3 LC 37 95 111B10-zu CDR1 HC 38 96 111B10-zu CDR2 HC 39 97 111B10-zu CDR3 HC 40 98 111B10-zu CDR1 LC 41 99 111B10-zu CDR2 LC 42 100 111B10-zu CDR3 LC

[Таблица 4 (продолжение)]

SEQ ID NO mAb Цепь IgG 43 101 201C15-xi CDR1 HC 44 102 201C15-xi CDR2 HC 45 103 201C15-xi CDR3 HC 46 104 201C15-xi CDR1 LC 47 105 201C15-xi CDR2 LC 48 106 201C15-xi CDR3 LC 49 107 201C15-zu CDR1 HC 50 108 201C15-zu CDR2 HC 51 109 201C15-zu CDR3 HC 52 110 201C15-zu CDR1 LC 53 111 201C15-zu CDR2 LC 54 112 201C15-zu CDR3 LC 55 113 346C6-xi CDR1 HC 56 114 346C6-xi CDR2 HC 57 115 346C6-xi CDR3 HC 58 116 346C6-xi CDR1 LC 59 117 346C6-xi CDR2 LC 60 118 346C6-xi CDR3 LC 61 119 346C6-zu CDR1 HC 62 120 346C6-zu CDR2 HC 63 121 346C6-zu CDR3 HC 64 122 346C6-zu CDR1 LC 65 123 346C6-zu CDR2 LC 66 124 346C6-zu CDR3 LC

[0049] Последовательности нуклеиновых кислот, кодирующие CDR mAb по Kabat

[Таблица 5]

SEQ ID NO mAb Цепь IgG 1 125 MORAb-003 CDR1 HC 2 126 MORAb-003 CDR2 HC 3 127 MORAb-003 CDR3 HC 4 128 MORAb-003 CDR1 LC 5 129 MORAb-003 CDR2 LC 6 130 MORAb-003 CDR3 LC 7 131 MORAb-009 CDR1 HC 8 132 MORAb-009 CDR2 HC 9 133 MORAb-009 CDR3 HC 10 134 MORAb-009 CDR1 LC 11 135 MORAb-009 CDR2 LC 12 136 MORAb-009 CDR3 LC 13 137 33011-xi CDR1 HC 14 138 33011-xi CDR2 HC 15 139 33011-xi CDR3 HC 16 140 33011-xi CDR1 LC 17 141 33011-xi CDR2 LC 18 142 33011-xi CDR3 LC 19 143 33011-zu CDR1 HC 20 144 33011-zu CDR2 HC 21 145 33011-zu CDR3 HC 22 146 33011-zu CDR1 LC 23 147 33011-zu CDR2 LC 24 148 33011-zu CDR3 LC 25 149 111B10-xi CDR1 HC 26 150 111B10-xi CDR2 HC 27 151 111B10-xi CDR3 HC 28 152 111B10-xi CDR1 LC 29 153 111B10-xi CDR2 LC 30 154 111B10-xi CDR3 LC 31 155 111B10-zu CDR1 HC 32 156 111B10-zu CDR2 HC 33 157 111B10-zu CDR3 HC 34 158 111B10-zu CDR1 LC 35 159 111B10-zu CDR2 LC 36 160 111B10-zu CDR3 LC

[Таблица 5 (продолжение)]

SEQ ID NO mAb Цепь IgG 37 161 201C15-xi CDR1 HC 38 162 201C15-xi CDR2 HC 39 163 201C15-xi CDR3 HC 40 164 201C15-xi CDR1 LC 41 165 201C15-xi CDR2 LC 42 166 201C15-xi CDR3 LC 43 167 201C15-zu CDR1 HC 44 168 201C15-zu CDR2 HC 45 169 201C15-zu CDR3 HC 46 170 201C15-zu CDR1 LC 47 171 201C15-zu CDR2 LC 48 172 201C15-zu CDR3 LC 49 173 346C6-xi CDR1 HC 50 174 346C6-xi CDR2 HC 51 175 346C6-xi CDR3 HC 52 176 346C6-xi CDR1 LC 53 177 346C6-xi CDR2 LC 54 178 346C6-xi CDR3 LC 55 179 346C6-zu CDR1 HC 56 180 346C6-zu CDR2 HC 57 181 346C6-zu CDR3 HC 58 182 346C6-zu CDR1 LC 59 183 346C6-zu CDR2 LC 60 184 346C6-zu CDR3 LC

[0050] Аминокислотные последовательности CDR mAb по IMGT

[Таблица 6]

SEQ ID NO mAb Цепь IgG 1 13 MORAb-003 CDR1 HC 2 14 MORAb-003 CDR2 HC 3 15 MORAb-003 CDR3 HC 4 16 MORAb-003 CDR1 LC 5 17 MORAb-003 CDR2 LC 6 18 MORAb-003 CDR3 LC 7 185 MORAb-009 CDR1 HC 8 186 MORAb-009 CDR2 HC 9 187 MORAb-009 CDR3 HC 10 188 MORAb-009 CDR1 LC 11 189 MORAb-009 CDR2 LC 12 190 MORAb-009 CDR3 LC 13 191 Трастузумаб CDR1 HC 14 192 Трастузумаб CDR2 HC 15 193 Трастузумаб CDR3 HC 16 194 Трастузумаб CDR1 LC 17 195 Трастузумаб CDR2 LC 18 196 Трастузумаб CDR3 LC 19 197 33011-xi CDR1 HC 20 198 33011-xi CDR2 HC 21 199 33011-xi CDR3 HC 22 200 33011-xi CDR1 LC 23 201 33011-xi CDR2 LC 24 202 33011-xi CDR3 LC 25 203 33011-zu CDR1 HC 26 204 33011-zu CDR2 HC 27 205 33011-zu CDR3 HC 28 206 33011-zu CDR1 LC 29 207 33011-zu CDR2 LC 30 208 33011-zu CDR3 LC 31 209 111B10-xi CDR1 HC 32 210 111B10-xi CDR2 HC 33 211 111B10-xi CDR3 HC 34 212 111B10-xi CDR1 LC 35 213 111B10-xi CDR2 LC 36 214 111B10-xi CDR3 LC 37 215 111B10-zu CDR1 HC 38 216 111B10-zu CDR2 HC 39 217 111B10-zu CDR3 HC 40 218 111B10-zu CDR1 LC 41 219 111B10-zu CDR2 LC 42 220 111B10-zu CDR3 LC

[Таблица 6 (продолжение)]

SEQ ID NO mAb Цепь IgG 43 221 201C15-xi CDR1 HC 44 222 201C15-xi CDR2 HC 45 223 201C15-xi CDR3 HC 46 224 201C15-xi CDR1 LC 47 225 201C15-xi CDR2 LC 48 226 201C15-xi CDR3 LC 49 227 201C15-zu CDR1 HC 50 228 201C15-zu CDR2 HC 51 229 201C15-zu CDR3 HC 52 230 201C15-zu CDR1 LC 53 231 201C15-zu CDR2 LC 54 232 201C15-zu CDR3 LC 55 233 346C6-xi CDR1 HC 56 234 346C6-xi CDR2 HC 57 235 346C6-xi CDR3 HC 58 236 346C6-xi CDR1 LC 59 237 346C6-xi CDR2 LC 60 238 346C6-xi CDR3 LC 61 239 346C6-zu CDR1 HC 62 240 346C6-zu CDR2 HC 63 241 346C6-zu CDR3 HC 64 242 346C6-zu CDR1 LC 65 243 346C6-zu CDR2 LC 66 244 346C6-zu CDR3 LC

[0051] Последовательности нуклеиновых кислот, кодирующие CDR mAb по IMGT

[Таблица 7]

SEQ ID NO mAb Цепь IgG 1 245 MORAb-003 CDR1 HC 2 246 MORAb-003 CDR2 HC 3 247 MORAb-003 CDR3 HC 4 248 MORAb-003 CDR1 LC 5 249 MORAb-003 CDR2 LC 6 250 MORAb-003 CDR3 LC 7 251 MORAb-009 CDR1 HC 8 252 MORAb-009 CDR2 HC 9 253 MORAb-009 CDR3 HC 10 254 MORAb-009 CDR1 LC 11 255 MORAb-009 CDR2 LC 12 256 MORAb-009 CDR3 LC 13 257 33011-xi CDR1 HC 14 258 33011-xi CDR2 HC 15 259 33011-xi CDR3 HC 16 260 33011-xi CDR1 LC 17 261 33011-xi CDR2 LC 18 262 33011-xi CDR3 LC 19 263 33011-zu CDR1 HC 20 264 33011-zu CDR2 HC 21 265 33011-zu CDR3 HC 22 266 33011-zu CDR1 LC 23 267 33011-zu CDR2 LC 24 268 33011-zu CDR3 LC 25 269 111B10-xi CDR1 HC 26 270 111B10-xi CDR2 HC 27 271 111B10-xi CDR3 HC 28 272 111B10-xi CDR1 LC 29 273 111B10-xi CDR2 LC 30 274 111B10-xi CDR3 LC 31 275 111B10-zu CDR1 HC 32 276 111B10-zu CDR2 HC 33 277 111B10-zu CDR3 HC 34 278 111B10-zu CDR1 LC 35 279 111B10-zu CDR2 LC 36 280 111B10-zu CDR3 LC

[Таблица 7 (продолжение)]

SEQ ID NO mAb Цепь IgG 37 281 201C15-xi CDR1 HC 38 282 201C15-xi CDR2 HC 39 283 201C15-xi CDR3 HC 40 284 201C15-xi CDR1 LC 41 285 201C15-xi CDR2 LC 42 286 201C15-xi CDR3 LC 43 287 201C15-zu CDR1 HC 44 288 201C15-zu CDR2 HC 45 289 201C15-zu CDR3 HC 46 290 201C15-zu CDR1 LC 47 291 201C15-zu CDR2 LC 48 292 201C15-zu CDR3 LC 49 293 346C6-xi CDR1 HC 50 294 346C6-xi CDR2 HC 51 295 346C6-xi CDR3 HC 52 296 346C6-xi CDR1 LC 53 297 346C6-xi CDR2 LC 54 298 346C6-xi CDR3 LC 55 299 346C6-zu CDR1 HC 56 300 346C6-zu CDR2 HC 57 301 346C6-zu CDR3 HC 58 302 346C6-zu CDR1 LC 59 303 346C6-zu CDR2 LC 60 304 346C6-zu CDR3 LC

[0052] Аминокислотные последовательности цепей Ig, представляющих собой полноразмерное mAb

[Таблица 8]

SEQ ID NO mAb Цепь IgG 1 1 MORAb-003 Тяжелая цепь 2 6 MORAb-003 Легкая цепь 3 305 MORAb-009 Тяжелая цепь 4 306 MORAb-009 Легкая цепь 5 307 Трастузумаб Тяжелая цепь 6 308 Трастузумаб Легкая цепь 7 309 33011-xi Тяжелая цепь 8 310 33011-xi Легкая цепь 9 311 33011-zu Тяжелая цепь 10 312 33011-zu Легкая цепь 11 313 111B10-xi Тяжелая цепь 12 314 111B10-xi Легкая цепь 13 315 111B10-zu Тяжелая цепь 14 316 111B10-zu Легкая цепь 15 317 201C15-xi Тяжелая цепь 16 318 201C15-xi Легкая цепь 17 319 201C15-zu Тяжелая цепь 18 320 201C15-zu Легкая цепь 19 321 346C6-xi Тяжелая цепь 20 322 346C6-xi Легкая цепь 21 323 346C6-zu Тяжелая цепь 22 324 346C6-zu Легкая цепь 23 347 Трастузумаб Тяжелая цепь

[0053] Последовательности нуклеиновых кислот, кодирующие полноразмерные цепи Ig mAb

[Таблица 9]

SEQ ID NO mAb Цепь IgG 1 325 MORAb-003 Тяжелая цепь 2 326 MORAb-003 Легкая цепь 3 327 MORAb-009 Тяжелая цепь 4 328 MORAb-009 Легкая цепь 5 329 33011-xi Тяжелая цепь 6 330 33011-xi Легкая цепь 7 331 33011-zu Тяжелая цепь 8 332 33011-zu Легкая цепь 9 333 111B10-xi Тяжелая цепь 10 334 111B10-xi Легкая цепь 11 335 111B10-zu Тяжелая цепь 12 336 111B10-zu Легкая цепь 13 337 201C15-xi Тяжелая цепь 14 338 201C15-xi Легкая цепь 15 339 201C15-zu Тяжелая цепь 16 340 201C15-zu Легкая цепь 17 341 346C6-xi Тяжелая цепь 18 342 346C6-xi Легкая цепь 19 343 346C6-zu Тяжелая цепь 20 344 346C6-zu Легкая цепь

Иллюстративные последовательности не содержат лидерные последовательности.

[0054] ADC может содержать любой набор вариабельных доменов тяжелой и легкой цепей, перечисленных в таблицах выше (например, вариабельные домены тяжелой и легкой цепей MORAb-003 или вариабельные домены тяжелой и легкой цепей трастузумаба), или набор из последовательностей шести CDR из набора тяжелой и легкой цепей. В некоторых вариантах осуществления ADC содержит константные области тяжелой и легкой цепей человека или их фрагменты. Например, ADC может содержать константный домен тяжелой цепи IgG человека (например, IgG1) и константный домен легких каппа- или лямбда-цепей человека. Фрагмент, представляющий собой антитело, содержит константную область тяжелой цепи иммуноглобулина G подтипа 1 (IgG1) человека и константную область легкой каппа-цепи Ig человека.

[0055] Раковый антиген-мишень ADC может представлять собой фолатный рецептор-альфа (FRA).

[0056] Антитело к FRA или его антигенсвязывающий фрагмент может содержать три CDR тяжелой цепи (CDR1 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 2, CDR2 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 3, и CDR3 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 4) и три CDR легкой цепи (CDR1 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 7, CDR2 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 8, и CDR3 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 9), которые определены согласно системе нумерации Kabat.

[0057] Кроме того, антитело к FRA или его антигенсвязывающий фрагмент может содержать три CDR тяжелой цепи (CDR1 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 13, CDR2 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 14, и CDR3 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 15) и три CDR легкой цепи (CDR1 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 16, CDR2 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 17, и CDR3 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 18), которые определены согласно системе нумерации IMGT.

[0058] В различных вариантах осуществления антитело к FRA или его антигенсвязывающий фрагмент содержат: вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 23, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 24; или вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 1, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 6. В некоторых вариантах осуществления антитело к FRA или его антигенсвязывающий фрагмент содержат вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 23, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 24, или содержат последовательности, которые на по меньшей мере 95% идентичны вышеописанным последовательностям. В некоторых вариантах осуществления антитело к FRA или его антигенсвязывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи, которая на по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентична SEQ ID NO: 23, и аминокислотную последовательность вариабельного домена легкой цепи, которая на по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентична SEQ ID NO: 24.

[0059] Антитело к FRA может содержать константный домен тяжелой цепи IgG1 человека и константный домен легкой каппа-цепи Ig человека.

[0060] Антитело к FRA содержит аминокислотную последовательность тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 1, или последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична SEQ ID NO: 1, и аминокислотную последовательность легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 6, или последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична SEQ ID NO: 6. В определенных вариантах осуществления антитело содержит аминокислотную последовательность тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 1, и аминокислотную последовательность легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 6, или содержит последовательности, которые на по меньшей мере 95% идентичны вышеописанным последовательностям. В некоторых вариантах осуществления антитело к FRA содержит аминокислотную последовательность тяжелой цепи, которая на по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентична SEQ ID NO: 1 и/или аминокислотную последовательность легкой цепи, которая на по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентична SEQ ID NO: 6. В некоторых вариантах осуществления антитело к FRA содержит тяжелую цепь, кодируемую нуклеотидной последовательностью, представленной под SEQ ID NO: 11 (в том числе нуклеотиды, кодирующие лидерную последовательность) или под SEQ ID NO: 325 (не включая нуклеотиды, кодирующие лидерную последовательность), и легкую цепь, кодируемую нуклеотидом, представленным под SEQ ID NO: 12 (в том числе нуклеотиды, кодирующие лидерную последовательность) или под SEQ ID NO: 326 (не включая нуклеотиды, кодирующие лидерную последовательность). В некоторых вариантах осуществления у аминокислотной последовательности тяжелой цепи отсутствует C-концевой лизин. В различных вариантах осуществления антитело к FRA содержит аминокислотную последовательность антитела, продуцируемого клеточной линией, депонированной в соответствии с условиями Будапештского договора в Американской коллекции типовых культур (ATCC, 10801 Университетский Бульвар, Манассас, штат Вирджиния 20110-2209) 24 апреля 2006 г. под номером доступа PTA-7552, или такие последовательности тяжелой цепи, в которых отсутствует C-концевой лизин. В различных вариантах осуществления антитело к FRA представляет собой MORAb-003 (название согласно USAN: фарлетузумаб) (Ebel et al. (2007) Cancer Immunity 7:6) или его антигенсвязывающий фрагмент.

[0061] Раковый антиген-мишень ADC может представлять собой рецептор 2 эпидермального фактора роста человека (her2).

[0062] Кроме того, антитело к her2 или его антигенсвязывающий фрагмент могут содержать три CDR тяжелой цепи (CDR1 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 71, CDR2 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 72, и CDR3 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 73) и три CDR легкой цепи (CDR1 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 74, CDR2 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 75, и CDR3 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 76), которые определены согласно системе нумерации Kabat.

[0063] Кроме того, антитело к her2 или его антигенсвязывающий фрагмент могут содержать три CDR тяжелой цепи (CDR1 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 191, CDR2 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 192, и CDR3 тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 193) и три CDR легкой цепи (CDR1 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 194, CDR2 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 195, и CDR3 легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 196), которые определены согласно системе нумерации IMGT.

[0064] В различных вариантах осуществления антитело к her2 или его антигенсвязывающий фрагмент содержат: вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 27, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 28; или домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 347, и домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 308. В некоторых вариантах осуществления антитело к her2 или его антигенсвязывающий фрагмент содержат аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 27, и аминокислотную последовательность вариабельного домена легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 28, или содержат последовательности, которые на по меньшей мере 95% идентичны вышеописанным последовательностям. В некоторых вариантах осуществления антитело к her2 или его антигенсвязывающий фрагмент содержат аминокислотную последовательность вариабельного домена тяжелой цепи, которая на по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентична SEQ ID NO: 27 и/или аминокислотную последовательность вариабельного домена легкой цепи, которая на по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентична SEQ ID NO: 28.

[0065] Антитело к her2 может содержать константный домен тяжелой цепи IgG1 человека и константный домен легкой каппа-цепи Ig человека.

[0066] В различных вариантах осуществления антитело к her2 содержит аминокислотную последовательность тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 307, или последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична SEQ ID NO: 307, и аминокислотную последовательность легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 308, или последовательность, которая на по меньшей мере 95% идентична SEQ ID NO: 308. В определенных вариантах осуществления антитело содержит аминокислотную последовательность тяжелой цепи, представленную под SEQ ID NO: 307, и аминокислотную последовательность легкой цепи, представленную под SEQ ID NO: 308, или содержит последовательности, которые на по меньшей мере 95% идентичны вышеописанным последовательностям. В некоторых вариантах осуществления антитело к her2 содержит аминокислотную последовательность тяжелой цепи, которая на по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентична SEQ ID NO: 307 и аминокислотную последовательность легкой цепи, которая на по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентична SEQ ID NO: 308. В различных вариантах осуществления антитело к her2 представляет собой трастузумаб или его антигенсвязывающий фрагмент.

[0067] В различных вариантах осуществления антитело к FRA или его антигенсвязывающий фрагмент содержат три CDR тяжелой цепи и три CDR легкой цепи MORAb-003 или содержат аминокислотные последовательности, полученные путем добавления, делеции или замены одной или меньше, двух или меньше, трех или меньше, четырех или меньше, пяти или меньше или шести или меньше аминокислот в CDR1 тяжелой цепи (SEQ ID NO: 2, определенной согласно системе Kabat или SEQ ID NO: 13, определенной согласно системе IMGT), CDR2 тяжелой цепи (SEQ ID NO: 3, определенной согласно системе Kabat или SEQ ID NO: 14, определенной согласно системе IMGT), CDR3 тяжелой цепи (SEQ ID NO: 4, определенной согласно системе Kabat или SEQ ID NO: 15, определенной согласно системе IMGT), CDR1 легкой цепи (SEQ ID NO: 7, определенной согласно системе Kabat или SEQ ID NO: 16, определенной согласно системе IMGT), CDR2 легкой цепи (SEQ ID NO: 8, определенной согласно системе Kabat или SEQ ID NO: 17, определенной согласно системе IMGT) и CDR3 легкой цепи (SEQ ID NO: 9, определенной согласно системе Kabat, или SEQ ID NO: 18, определенной согласно системе IMGT).

[0068] В других различных вариантах осуществления антитело к her2 или его антигенсвязывающий фрагмент содержат три CDR тяжелой цепи и три CDR легкой цепи трастузумаба или содержат аминокислотные последовательности, полученные путем добавления, делеции или замены одной или меньше, двух или меньше, трех или меньше, четырех или меньше, пяти или меньше или шести или меньше аминокислот в CDR1 тяжелой цепи (SEQ ID NO: 71, определенной согласно системе Kabat или SEQ ID NO: 191, определенной согласно системе IMGT), CDR2 тяжелой цепи (SEQ ID NO: 72, определенной согласно системе Kabat или SEQ ID NO: 192, определенной согласно системе IMGT), CDR3 тяжелой цепи (SEQ ID NO: 73, определенной согласно системе Kabat или SEQ ID NO: 193, определенной согласно системе IMGT), CDR1 легкой цепи (SEQ ID NO: 74, определенной согласно системе Kabat или SEQ ID NO: 194, определенной согласно системе IMGT), CDR2 легкой цепи (SEQ ID NO: 75, определенной согласно системе Kabat или SEQ ID NO: 195, определенной согласно системе IMGT), и CDR3 легкой цепи (SEQ ID NO: 76, определенной согласно системе Kabat или SEQ ID NO: 196, определенной согласно системе IMGT).

[0069] В различных вариантах осуществления замена аминокислоты представляет собой замену одного остатка. Вставка обычно представляет собой вставку от приблизительно 1 до приблизительно 20 аминокислотных остатков, хотя могут допускаться значительно более длинные вставки при условии, что сохраняется биологическая функция (например, связывание с FRA или her2). Делеция обычно представляет собой делецию в диапазоне от приблизительно 1 до приблизительно 20 аминокислотных остатков, хотя в некоторых случаях делеции могут быть намного более длинными. Замены, делеции, вставки или любые их комбинации могут применяться для достижения конечного производного или варианта. Обычно такие изменения выполняют для небольшого числа аминокислот, чтобы свести к минимуму изменение молекулы, в частности иммуногенности и специфичности антигенсвязывающего белка. Однако в некоторых обстоятельствах может допускаться более значительное изменение. Консервативная замена обычно выполняется в соответствии со следующей схемой, изображенной в таблице 10.

[0070] [Таблица 10]

Исходный остаток Иллюстративная замена Ala ··· Ser Arg ··· Lys Asn ··· Gln, His Asp ··· Glu Cys ··· Ser Gln ··· Asn Glu ··· Asp Gly ··· Pro His ··· Asn, Gln Ile ··· Leu, Val Leu ··· Ile, Val Lys ··· Arg, Gln, Glu Met ··· Leu, Ile Phe ··· Met, Leu, Tyr Ser ··· Thr Thr ··· Ser Trp ··· Tyr Tyr ··· Trp, Phe Val ··· Ile, Leu

[0071] Значительное изменение функции или иммунологической идентичности осуществляются путем выбора замены, которая является менее консервативной, чем показанные в таблице 10. Например, можно осуществлять замену, которая в более значительной степени воздействует на структуру полипептидного остова в области изменения, например, структуру α-спирали или β-спирали; заряд или гидрофобность молекулы в сайте-мишени или объем боковой цепи. Замены, которые, как правило, ожидаемо приводят к самым большим изменениям свойств полипептида, являются такими, при которых (a) - (d):

(a) гидрофильный аминокислотный остаток (например, Ser или Thr) заменен гидрофобным аминокислотным остатком (например, Leu, Ile, Phe, Val или Ala);

(b) Cys или Pro заменен любым другим остатком;

(c) аминокислотный остаток с электроположительной боковой цепью (например, Lys, Arg или His) заменен электроотрицательным аминокислотным остатком (например, Gln или Asn); и

(d) остаток с объемной боковой цепью (например, Phe) заменен аминокислотой, не имеющей боковой цепи (например, Gly).

[0072] В различных вариантах осуществления, где в ADC применяются варианты последовательностей антител, варианты, как правило, проявляют такую же качественную биологическую активность и вызывают такой же иммунный ответ, хотя при необходимости также могут быть выбраны варианты для модификации характеристик антигенсвязывающих белков. В качестве альтернативы вариант может быть сконструирован таким образом, чтобы биологическая активность антигенсвязывающего белка изменилась. Например, могут быть изменены или удалены сайты гликозилирования, как обсуждается в данном документе.

[0073] В ADC в соответствии с настоящим вариантом осуществления могут применяться различные антитела для целенаправленного воздействия на раковые клетки. Подходящие антигены, экспрессируемые на опухолевых клетках, но не на здоровых клетках, или экспрессируемые на опухолевых клетках с более высокой частотой, чем на здоровых клетках, известны из уровня техники, как и антитела, направленные против них. Такие антитела можно применять вместе с линкером и эрибулином, раскрытыми в данном документе.

[0074] Фрагмент, представляющий собой антитело, в ADC может представлять собой фрагмент, представляющий собой антитело к FRA, такой как MORAb-003. В некоторых вариантах осуществления линкер и эрибулин в соответствии с настоящим изобретением могут быть неожиданно эффективными в случае нескольких антител, целенаправленно воздействующих на разные опухоли. В случаях, когда фрагмент, представляющий собой антитело, в ADC может представлять собой фрагмент, представляющий собой антитело к FRA, такой как MORAb-003, ADC может обеспечить, в частности, улучшение соотношения лекарственное средство:антитело, целенаправленного воздействия на опухоль, неспецифического цитолиза и эффективности лечения и снижение нецелевого цитолиза. Улучшение эффективности лечения может быть измерено in vitro или in vivo и может предусматривать снижение скорости роста опухоли и/или уменьшение объема опухоли.

[0075] В случаях, когда фрагмент, представляющий собой антитело, в ADC представляет собой фрагмент, представляющий собой антитело к her2, такой как трастузумаб, наблюдаются некоторые или все из благоприятных функциональных свойств. Кроме того, фрагмент, представляющий собой антитело, в ADC может представлять собой фрагмент, представляющий собой антитело к her2, такой как трастузумаб. В случаях, когда фрагмент, представляющий собой антитело, в ADC представляет собой фрагмент, представляющий собой антитело к MSLN, такой как MORAb-009, наблюдаются некоторые или все из благоприятных функциональных свойств.

[0076] В некоторых вариантах осуществления свободные остатки цистеина вводятся в аминокислотную последовательность фрагмента, представляющего собой антитело. Например, можно получить антитела (цистеин-модифицированные антитела), в которых одна или несколько аминокислот в аминокислотной последовательности в исходном антителе заменены цистеином. Например, посредством введения цистеина в фрагмент исходного FAb-антитела может образовываться цистеин-модифицированное Fab-антитело (также называемое "ThioFab"). Подобным образом посредством введения цистеина в исходное моноклонального антитело может образовываться цистеин-модифицированное моноклональное антитело (также называемое "ThioMab"). Мутация в одном сайте приводит к образованию одного модифицированного остатка цистеина в ThioFab, при этом мутация в одном сайте приводит к образованию двух модифицированных остатков цистеина в ThioMab вследствие димерной природы антитела класса IgG. ДНК, кодирующая вариант аминокислотной последовательности исходного полипептида, может быть получена с помощью ряда способов, известных из уровня техники (см., например, способы, описанные в WO2006/034488). Эти способы включают без ограничения получение посредством сайт-направленного (или олигонуклеотид-опосредованного) мутагенеза, ПЦР-мутагенеза и кассетного мутагенеза ранее полученной ДНК, кодирующей полипептид. Варианты рекомбинантных антител также могут быть сконструированы также посредством манипуляции с фрагментами с применением рестрикции или посредством ПЦР с перекрывающимися праймерами с применением синтетических олигонуклеотидов. ADC, представленный Формулой I, содержит без ограничения антитела, которые содержат одну, две, три или четыре модификации цистеина (Lyon et al. (2012) Methods Enzymol. 502:123-38). В некоторых вариантах осуществления, когда один или несколько свободных остатков цистеина уже присутствуют во фрагменте антитела, существующие свободные остатки цистеина можно использовать для конъюгации фрагмента антитела с эрибулином без применения модифицирования.

[0077] 2. Линкерный фрагмент

Линкерный фрагмент в настоящем варианте осуществления имеет следующую химическую структуру и состоит из пяти звеньев, включая в себя малеимидное звено (Mal), оксиэтиленовое звено (PEG), звено в виде пропионовой кислоты (PA), аминокислотное звено (Val-Cit) и саморасщепляющееся звено (pAB: п-аминобензилоксикарбонил), начиная от стороны, смежной с фрагментом, представляющим собой антитело.

[0078] Линкерный фрагмент является стабильным вне клетки в достаточной степени, чтобы быть терапевтически эффективным. В некоторых вариантах осуществления линкерный фрагмент является стабильным вне клетки в достаточной степени, так что ADC остается интактным, когда он находится во внеклеточных условиях (например, до транспорта или доставки в клетку). Термин "интактный", применяемый в контексте ADC, означает, что фрагмент, представляющий собой антитело, остается присоединенным к эрибулину. Применяемый в данном документе термин "стабильный" в контексте ADC означает, что 20% или меньше, приблизительно 15% или меньше, приблизительно 10% или меньше, приблизительно 5% или меньше, приблизительно 3% или меньше или приблизительно 1% или меньше линкеров (или любой процент в пределах приведенных значений) в образце ADC является расщепленным (или, в случае всего ADC, не является интактным иным образом), если ADC находится во внеклеточных условиях.

[0079] Является ли линкерный фрагмент стабильным вне клетки, можно определить, например, путем помещения ADC в плазму крови на предварительно заданный период времени (например, 2, 4, 6, 8, 16 или 24 часа) и затем количественного определения количества свободного фрагмента лекарственного средства, присутствующего в плазме крови. Стабильность может обеспечивать для ADC время для локализации опухолевых клеток для целенаправленного воздействия и предотвращать преждевременное высвобождение лекарственного средства, что может снижать терапевтический индекс ADC при неизбирательном повреждении как нормальных, так и опухолевых тканей. Линкерный фрагмент, является стабильным за пределами клетки-мишени и обеспечивает высвобождение эрибулина из ADC внутри клетки таким образом, что эрибулин может связываться с его мишенью (например, с микротрубочками). Таким образом, линкерный фрагмент согласно настоящему варианту осуществления: (i) поддерживает свойства специфического связывания фрагмента, представляющего собой антитело; (ii) обеспечивает доставку, например внутриклеточную доставку, эрибулина за счет стабильного связывания с фрагментом, представляющим собой антитело; (iii) сохраняет стабильность и интактность до тех пор, пока ADC не будет транспортирован или доставлен к своему сайту-мишени; и (iv) обеспечивает терапевтический эффект, например цитотоксический эффект, эрибулина после расщепления.

[0080] Линкер может расщепляться во внутриклеточных условиях таким образом, что расщепление линкера достаточным образом высвобождает эрибулин из фрагмента, представляющего собой антитело, во внутриклеточной среде, чтобы активировать эрибулин и/или сделать лекарственное средство терапевтически эффективным. В некоторых вариантах осуществления эрибулин не отщепляется от фрагмента, представляющего собой антитело, до тех пор, пока ADC не попадет в клетку, которая экспрессирует антиген, специфический для фрагмента ADC, представляющего собой антитело, и эрибулин отщепляется от фрагмента, представляющего собой антитело, после попадания в клетку. В некоторых вариантах осуществления линкер содержит расщепляемый фрагмент, который расположен таким образом, что ни одна из частей линкера или фрагмента, представляющего собой антитело, не остается связанной с эрибулином после расщепления.

[0081] Линкерный фрагмент содержит аминокислотное звено валин-цитруллин (Val-Cit). Аминокислотное звено валин-цитруллин (Val-Cit) является расщепляемым под действием расщепляющего средства (например, внутриклеточного фермента пептидазы или протеазы), которое присутствует во внутриклеточной среде (например, в пределах лизосомы, или эндосомы, или кавеолы). Пептидаза, такая как катепсин (например, катепсин B, C, F, H, K, L, O, S, V, X или W), может расщеплять последовательность валин-цитруллин (Val-Cit) или последовательность аланин-аланин-аспарагин (Ala-Ala-Asn) (см., например, Dubowchik (2002) Bioconjugate Chem. 13: 855-69). Линкерный фрагмент расщепляется ферментом в клетке-мишени таким образом, что ADC разделяется на часть, представляющую собой антитело, и на часть, представляющую собой эрибулин. ADC, который содержит Val-Cit, обеспечивает повышенную стабильность, снижение нецелевого цитолиза, усиление целевого цитолиза, более низкие уровни агрегации и/или более высокое содержание лекарственного вещества по сравнению с ADC, который содержит альтернативное аминокислотное звено (например, Gly-Gly).

[0082] Цитруллин и эрибулин соединены с помощью п-аминобензилоксикарбонила (pAB). В частности, аминогруппа п-аминобензилоксикарбонила образует амидную связь с цитруллином, а карбонильная группа ковалентно связывается с первичным амином (C-35 амин) в составе эрибулина. П-аминобензилоксикарбонил является саморасщепляющимся. Не ограничиваясь теорией, считается, что саморасщепление pAB включает в себя самопроизвольную реакцию 1,6-элиминирования (Jain et al. (2015) Pharm. Res. 32:3526-40). В случаях, когда линкерный фрагмент (например, Val-Cit) в ADC расщепляется в клетке-мишени, из-за саморасщепления саморасщепляющегося звена (pAB) немодифицированный эрибулин может высвобождаться без избыточных функциональных групп остающихся в фрагменте, представляющем собой эрибулин.

[0083] Саморасщепляющиеся химические структуры известны из уровня техники и могут быть легко выбраны для ADC в соответствии с настоящим изобретением. В различных вариантах осуществления спейсерное звено, связывающее расщепляемый фрагмент в линкере к фрагменту, представляющему собой лекарственное средство (например, эрибулин), является саморасщепляющимся и подвергается саморасщеплению одновременно с или непосредственно до/после расщепления расщепляемого фрагмента во внутриклеточных условиях.

[0084] С другой стороны, малеимидное звено (Mal), оксиэтиленовое звено (PEG) и звено в виде пропионовой кислоты (PA) расположены между валином и антителом Ab. α,β-ненасыщенный карбонил в малеимиде является реакционноспособным в отношении остатка цистеина (в частности, сульфгидрильной группы (-SH)) в антителе и влияет на способность связываться линкерного фрагмента и эрибулина с антителом. Линкерный фрагмент содержит малеимидное звено и связан с антителом с помощью малеимидного звена. В результате: можно дополнительно улучшить содержание лекарственного вещества в антителе (p: количество фрагментов, представляющих собой эрибулин на фрагмент, представляющий собой антитело).

[0085] Оксиэтиленовое звено (PEG) представляет собой звено, состоящее из одной или нескольких оксиэтиленовых групп, и является в значительной степени гидрофильным. Эрибулин можно применять для снижения степени, с которой эрибулин может быть выведен из резистентных раковых клеток посредством белка множественной лекарственной устойчивости (MDR) или функционально сходных транспортеров. В некоторых вариантах осуществления линкерный фрагмент представляет собой более короткий PEG-линкер и обеспечивает улучшенную стабильность и пониженную агрегацию слишком длинных PEG-линкеров. В Формуле (I) количество оксиэтиленовых групп обозначено посредством m, и m представляет собой целое число от 1 до 10. Предпочтительно m равняется 2. В случаях, когда m представляет собой целое число менее 2, длина линкерного фрагмента снижена, и может демонстрироваться более низкий уровень агрегации и/или более высокое содержание лекарственного вещества по сравнению с ADC содержащим более длинный линкерный фрагмент (например, m равняется 8).

[0086] В некоторых вариантах осуществления ADC, содержащий расщепляемый пептидный фрагмент, демонстрирует более низкие уровни агрегации, улучшенное соотношение антитело:лекарственное средство, повышенный целевой цитолиз раковых клеток, пониженный нецелевой цитолиз нераковых клеток и/или более высокое содержание лекарственного вещества (p) по сравнению с ADC, который содержит альтернативный расщепляемый фрагмент. В некоторых вариантах осуществления добавление расщепляемого фрагмента повышает цитотоксичность и/или активность относительно нерасщепляемого линкера. В некоторых вариантах осуществления может наблюдаться повышенная активность и/или цитотоксичность при раке, при котором антиген экспрессируется на умеренных уровнях, на который целенаправленно воздействует фрагмент ADC, представляющий собой антитело (например, умеренная экспрессия FRA). В некоторых вариантах осуществления расщепляемый пептидный фрагмент может расщепляться ферментом, а линкер представляет собой расщепляемый ферментом линкер. В некоторых вариантах осуществления фрагмент представляет собой катепсин, а линкер представляет собой расщепляемый катепсином линкер. В определенных вариантах осуществления расщепляемый ферментом линкер (например, расщепляемый катепсином линкер) проявляет одно или несколько улучшенных свойств, упомянутых выше, по сравнению с альтернативным механизмом расщепления.

[0087] Кроме того, линкерный фрагмент может влиять на физико-химические свойства ADC. Поскольку многие цитотоксические средства являются гидрофобными по природе, связывание их с антителом с дополнительным гидрофобным фрагментом может приводить к агрегации. Агрегаты ADC являются нерастворимыми и зачастую ограничивают достижимое содержание лекарственного вещества на антителе, что может отрицательно воздействовать на активность ADC. Белковые агрегаты биологических веществ, в целом также связывались с повышенной иммуногенностью. Линкер в соответствии с настоящим вариантом осуществления обеспечивает получение ADC с низкими уровнями агрегации и требуемыми уровнями содержания лекарственного вещества.

[0088] В различных вариантах осуществления линкер предназначен для облегчения интернализации в клетку, расщепления после интернализации в клетку и неспецифического цитолиза (цитолиза соседних клеток) посредством и диффузии линкера-эрибулина и/или эрибулина отдельно в соседние клетки. В некоторых вариантах осуществления разработан линкер для минимизации расщепления во внеклеточной среде и, таким образом, снижения токсичности в отношении нецелевой ткани (например, ткани, не являющейся раковой), при этом он сохраняет способность к связыванию ADC с тканью-мишенью и к неспецифическому цитолизу раковой ткани, которая не экспрессирует антиген, на который целенаправленно воздействует фрагмент ADC, представляющий собой антитело, но которая окружает раковую ткань-мишень, экспрессирующую данный антиген. Линкерный фрагмент в соответствии с настоящим вариантом осуществления особенно эффективен в обеспечении этих функциональных свойств, например при соединении фрагмента, представляющего собой антитело к FRA, такого как MORAb-003, и фрагмента, представляющего собой лекарственное средство, такого как эрибулин. В некоторых вариантах осуществления могут также наблюдаться по меньшей мере некоторые из этих функциональных свойств без фрагмента, представляющего собой антитело к FRA, и/или без MORAb-003. Линкерный фрагмент в соответствии с настоящим вариантом осуществления эффективен в обеспечении некоторых или всех из этих функциональных свойств, например, при соединении фрагмента, представляющего собой антитело к her2, такого как трастузумаб, и фрагмента, представляющего собой лекарственное средство, такого как эрибулин.

[0089] Было обнаружено, что ADC демонстрирует конкретную комбинацию необходимых свойств, в частности при соединении к антителу к FRA, такому как MORAb-003, или его антигенсвязывающему фрагменту. Такие свойства включают без ограничения эффективные уровни содержания лекарственного вещества (p ≥ приблизительно 4), низкие уровни агрегации, стабильность при условиях хранения или при нахождении в кровотоке в организме (например, стабильность в сыворотке крови), сохранение аффинности в отношении клеток, экспрессирующих мишень, сравнимой с аффинностью неконъюгированного антитела, сильную цитотоксичность в отношении клеток, экспрессирующих мишень, низкие уровни нецелевого цитолиза, высокие уровни неспецифического цитолиза и/или эффективную противораковую активность in vivo, причем все из вышеперечисленных - по сравнению с ADC, в которых применяются другие фрагменты, представляющие собой линкер-эрибулин и/или антитело.

[0090] 3. Эрибулин

Термин "эрибулин", применяемый в данном документе, относится к синтетическому аналогу галихондрина В, макроциклическому соединению, которое первоначально было выделено из морской губки Halichondria okadais. Эрибулин является ингибитором динамики микротрубочек, который, как считается, связывает тубулин и вызывает остановку клеточного цикла в фазе G2/M путем ингибирования сборки митотического веретена. Термин "эрибулина мезилат" относится к мезилатной соли эрибулина, которая поступает в продажу под торговым названием Halaven (товарный знак). В ADC в соответствии с настоящим вариантом осуществления, эрибулин связывается с линкером ADC посредством первичной аминогруппы эрибулина.

[0091] 4. Конъюгат антитело-лекарственное средство (ADC)

В ADC в соответствии с настоящим вариантом осуществления эрибулин связывается с фрагментом, представляющим собой антитело, с помощью вышеописанного линкерного фрагмента. Фрагмент, представляющий собой антитело, может представлять собой, например, антитело к FRA, антитело к мезотелину, антитело к her2, такое как трастузумаб.

[0092] ADC в соответствии с настоящим вариантом осуществления способен селективно доставлять эффективную дозу цитотоксического или цитостатического средства к раковым клеткам или к опухолевой ткани. Было обнаружено, что представленный ADC характеризуется сильной цитотоксической и/или цитостатической активностью в отношении клеток, экспрессирующих соответствующий антиген-мишень (например, FRA или her2). В некоторых вариантах осуществления цитотоксическая и/или цитостатическая активность ADC зависит от уровня экспрессии антигена-мишени в клетке. В некоторых вариантах осуществления ADC в соответствии с настоящим изобретением особенно эффективен в уничтожении раковых клеток, экспрессирующих антиген-мишень на умеренном уровне, по сравнению с раковыми клетками, экспрессирующими тот же антиген на низком уровне.

[0093] Термин "рак" относится к физиологическому состоянию у млекопитающих, при котором популяция клеток характеризуется нерегулируемым клеточным ростом. Примеры рака включают без ограничения карциному, лимфому, бластому, саркому и лейкоз. Более конкретные примеры таких видов рака включают плоскоклеточный рак, мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточный рак легкого, аденокарциному легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак брюшной полости, печеночноклеточный рак, рак желудочно-кишечного тракта, рак поджелудочной железы, глиобластому, рак шейки матки, рак яичника, рак печени, рак мочевого пузыря, гепатому, рак молочной железы (например, трижды негативный рак молочной железы), остеосаркому, меланому, рак толстой кишки, колоректальный рак, рак эндометрия (например, серозный) или рак матки, карциному слюнной железы, рак почки, рак печени, рак предстательной железы, рак вульвы, рак щитовидной железы, гепатокарциному и некоторые типы рака головы и шеи. Трижды негативный рак молочной железы относится к раку молочной железы с отсутствием экспрессии генов эстрогенового рецептора (ER), прогестеронового рецептора (PR) или Her2/neu.

[0094] Термин "опухоль" означает любую массу ткани, которая образуется в результате избыточного роста или пролиферации клеток, либо доброкачественной, либо злокачественной, включая предраковые поражения.

[0095] Термины "раковая клетка" и "опухолевая клетка" относятся к отдельным клеткам или к общей популяции клеток, происходящих из опухоли, включая как неканцерогенные клетки, так и раковые стволовые клетки. Применяемый в данном документе термин "опухолевая клетка" будет модифицирован с помощью термина "неканцерогенная", когда он относится исключительно к тем опухолевым клеткам, у которых отсутствует способность обновляться и дифференцироваться, чтобы отличать эти опухолевые клетки от раковых стволовых клеток.

[0096] Иллюстративные виды рака, при которых экспрессия FRA-происходит на высоком уровне, включают без ограничения рак яичника (например, серозный рак яичника, светлоклеточный рак яичника), карциноид легкого, трижды негативный рак молочной железы, рак эндометрия и немелкоклеточный рак легкого (например, аденокарциному). Иллюстративные виды рака, при которых экспрессия FRA-происходит на умеренном уровне, включают без ограничения рак желудка и колоректальный рак. Иллюстративные виды рака, при которых экспрессия FRA происходит на низком уровне, включают без ограничения меланому и лимфому. Иллюстративные виды рака, при которых экспрессия her2 происходит на высоком уровне, включают без ограничения рак молочной железы, рак желудка, рак пищевода, рак яичника и рак эндометрия. Иллюстративные виды рака, при которых экспрессия her2 происходит на умеренном уровне, включают без ограничения рак легкого и рак мочевого пузыря.

[0097] Используемый в данном документе термин "подавлять" или "подавление" означает уменьшение на измеряемое количество и может включать, но не обязательно, полное предотвращение или подавление.

[0098] "Эффективное количество" ADC, которое раскрыто в данном документе, представляет собой количество, достаточное для выполнения конкретно заявленной цели, например для получения терапевтического эффекта после введения, такого как снижение скорости роста опухоли или объема опухоли, уменьшение степени проявления симптома рака или некоторые другие показатели эффективности лечения. Эффективное количество можно определять традиционным образом с учетом поставленной цели. Термин "терапевтически эффективное количество" относится к количеству ADC, эффективному для лечения заболевания или нарушения у субъекта. В случае рака терапевтически эффективное количество ADC может снижать количество раковых клеток, уменьшать размер опухоли, подавлять (например, замедлять или останавливать) метастазирование опухоли, подавлять (например, замедлять или останавливать) рост опухоли и/или облегчать один или несколько симптомов. "Профилактически эффективное количество" означает количество, при необходимых дозах и в течение необходимых периодов времени эффективное в достижении требуемого профилактического результата. Как правило, поскольку профилактическую дозу используют у субъектов до проявления заболевания или на более ранней стадии заболевания, профилактически эффективное количество будет меньшим терапевтически эффективного количества.

[0099] Используемые в данном документе "лечить" или "терапевтический" и грамматически родственные термины означают любое улучшение любого последствия заболевания, такое как продление выживания, меньшая заболеваемость и/или уменьшение побочных эффектов, которые являются побочными продуктами альтернативного терапевтического способа воздействия. Из уровня техники легко понять, что полное устранение заболевания предпочтительно, хоть и не является требованием для лечебного действия. Применяемые в данном документе "лечение" или "лечить" относятся к введению описанного ADC субъекту, например пациенту. Лечение может представлять собой излечение, заживление, смягчение, ослабление, изменение, устранение, облегчение, временное ослабление, улучшение или воздействие на нарушение, симптомы нарушения или предрасположенность к нарушению, например раку.

[0100] В некоторых вариантах осуществления применяют меченый ADC. Подходящие "метки" включают радионуклиды, ферменты, субстраты, кофакторы, ингибиторы, флуоресцентные фрагменты, хемилюминесцентные фрагменты, магнитные частицы и т. п.

[0101] Под применяемым в данном документе "белком" подразумевают по меньшей мере две ковалентно связанные аминокислоты. Термин охватывает полипептиды, олигопептиды и пептиды. В некоторых вариантах осуществления две или более ковалентно связанные аминокислоты связаны посредством пептидной связи. Белок может быть составлен из встречающихся в природе аминокислот и пептидных связей, например, когда белок получают рекомбинантным образом с применением систем экспрессии и клеток-хозяев. В качестве альтернативы белок может содержать синтетические аминокислоты (например, гомофенилаланин, цитруллин, орнитин и норлейцин) или пептидомиметические структуры, т. е. "аналоги пептидов или белков", такие как пептоиды. Пептоиды представляют собой иллюстративный класс пептидомиметиков, боковые цепи которых прикреплены к атому азота пептидного остова, а не к α-атомам углерода (как они расположены в аминокислотах), и характеризуются иным расположением водородных связей и конформационными характеристиками по сравнению с пептидами (см., например, Simon et al. (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:9367). В связи с этим пептоиды могут быть устойчивыми к протеолизу или к другим физиологическим условиям или условиям хранения и быть эффективными при проникновении через клеточные мембраны. Такие синтетические аминокислоты можно включать, в частности, когда антитело синтезируется in vitro с помощью общепринятых способов, широко известных из уровня техники. Кроме того, может применяться любая комбинация пептидомиметических, синтетических и встречающихся в природе остатков/структур. "Аминокислота" также содержит иминокислотные остатки, такие как пролин и гидроксипролин. "R-группа" или "боковая цепь" аминокислоты могут находиться в одной из (L)- или (S)-конфигурации. В конкретном варианте осуществления аминокислоты находятся в (L)- или (S)-конфигурации.

[0102] "Рекомбинантный белок" представляет собой белок, полученный с применением рекомбинантных методик с применением любых методик и способов, известных из уровня техники, т. е. вследствие экспрессии рекомбинантной нуклеиновой кислоты. Способы и методики получения рекомбинантных белков широко известны из уровня техники.

[0103] "Выделенный" белок не сопровождается по меньшей мере некоторой частью материала, с которым он в норме ассоциирован в природном состоянии, например, составляет по меньшей мере приблизительно 5% или по меньшей мере приблизительно 50% по весу от общего белка в указанном образце. Известно, что выделенный белок может составлять от 5% до 99,9% по весу от общего содержания белка в зависимости от обстоятельств. Например, белок может продуцироваться в значительно более высокой концентрации при применении индуцибельного промотора или промотора, обеспечивающего высокий уровень экспрессии, за счет чего белок продуцируется с повышенными уровнями концентрации. Определение включает продуцирование антитела в самых разнообразных организмах и/или клетках-хозяевах, которые известны из уровня техники.

[0104] В случае аминокислотных последовательностей идентичность и/или сходство последовательности могут быть определены с применением стандартных методик, известных из уровня техники, включая без ограничения алгоритм локальной идентичности последовательностей из Smith and Waterman (1981) Adv. Appl. Math. 2:482, алгоритм выравнивания идентичности последовательностей из Needleman and Wunsch (1970) J. моль. Biol. 48:443, способ поиска подобия из Pearson и Lipman (1988) Proc. Nat. Acad. Sci. USA 85:2444, компьютеризированные реализации этих алгоритмов (GAP, BESTFIT, FASTA и TFASTA в программном пакете Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer Group, 575 Science Drive, Медисон, штат Висконсин, США), программу Best Fit sequence, описанную Devereux et al. (1984) Nucl. Acid Res. 12:387-95, например, с использованием настроек по умолчанию или путем проверки. Процент идентичности можно рассчитывать со ссылкой на "Current Methods in Sequence Comparison and Analysis", Macromolecule Sequencing and Synthesis, Selected Methods and Applications, стр. 127-149 (1988), Alan R. Liss, Inc) или рассчитывают предпочтительно с помощью Fast DB на основе следующих параметров.

Штраф за несовпадение: 1

Штраф за введение гэпа: 1

Штраф за удлинение гэпа: 0,33

Штраф за соединение: 30

[0105] Примером применимого алгоритма является PILEUP. PILEUP создает выравнивание множественных последовательностей из группы родственных последовательностей с применением прогрессивных попарных выравниваний. Он также может строить дерево, показывающее кластеризующие взаимосвязи, применяемые для создания выравнивания. PILEUP использует упрощение способа прогрессивного выравнивания из Feng & Doolittle (1987) J моль Evol. Evol. 35:351-60; причем способ подобен способу, описанному в работе Higgins and Sharp (1989) CABIOS 5:151-3. Применимые параметры в PILEUP включают штраф за введение гэпа по умолчанию - 3,00, штраф за удлинение гэпа по умолчанию - 0,10 и оцениваемые концевые гэпы.

[0106] Другим примером применимого алгоритма является алгоритм BLAST, описанный в Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-10; Altschul et al. (1997) Остатки нуклеиновых кислот. 25:3389-402 и Karin et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:5873-87. Особенно применимой программой BLAST является программа WU-BLAST-2, которую получили из Altschul et al. (1996) Methods in Enzymology 266:460-80. WU-BLAST-2 применяет несколько параметров поиска, большинство из которых установлены как значения по умолчанию. Регулируемые параметры установлены на следующие значения: длина перекрывания=l, доля перекрывания=0,125, пороговая длина слова (T)=II. Параметры HSP S и HSP S2 представляют собой динамические значения и устанавливаются программой самостоятельно в зависимости от состава специфический последовательности и состава специфический базы данных, относительно которой производится поиск представляющей интерес последовательности; однако значения можно корректировать для повышения чувствительности.

[0107] Дополнительным применимым алгоритмом является BLAST с введением гэпов, сообщаемый в работе Altschul et al. (1993) Nucl. Acid Res. 25:3389-402. BLAST с введением гэпов применяет матрицу замен BLOSUM-62; пороговый параметр T, установленный на 9; метод "двух совпадений" для запуска продлений без гэпов, штраф за удлинение гэпов на k составляет 10+k; Xu установлен на 16, и Xg установлен на 40 для стадии поиска в базе данных и на 67 для стадии вывода результатов алгоритмов. Выравнивания с введением гэпов запускаются при показателе, соответствующем приблизительно 22 битам.

[0108] Обычно гомология аминокислот, сходство или идентичность между белками, раскрытыми в данном документе, и их вариантами, включая варианты FRA, варианты her2, варианты последовательностей тубулина и варианты вариабельных доменов антител (включая отдельные варианты CDR), составляет по меньшей мере 80% с последовательностями, изображенными в данном документе, и, что более типично, предусматривается предпочтительно возрастающая гомология или идентичность по меньшей мере 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% и почти 100% или 100%.

[0109] Аналогичным образом, "процент (%) идентичности последовательности нуклеиновой кислоты" в отношении последовательности нуклеиновой кислоты антител и других белков, идентифицированных в данном документе, определяется как процент нуклеотидных остатков в кандидатной последовательности, которые идентичны нуклеотидным остаткам в кодирующей последовательности антигенсвязывающего белка. В специфическом способе используется модуль BLASTN из WU-BLAST-2, установленный на параметры по умолчанию, при этом длина перекрывания и доля перекрывания установлены на 1 и 0,125 соответственно.

[0110] Поскольку сайт или область введения вариации аминокислотной последовательности предварительно определены, то мутацию саму по себе не нужно предварительно определять. Например, чтобы оптимизировать свойства мутации в заданном сайте, в кодоне- или области-мишени можно выполнять случайный мутагенез, а экспрессированные варианты CDR антигенсвязывающих белков подвергать скринингу в отношении оптимальной комбинации требуемой активности. Широко известны методики получения мутаций, представляющих собой замены в предварительно определенных сайтах в ДНК с известной последовательностью, например мутагенез с праймером MI3 и ПЦР-мутагенез.

[0111] Далее в данном документе будет описан способ получения ADC, представленного Формулой (I), в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения.

[0112] Вариант осуществления настоящего изобретения относится к способу получения конъюгата антитело-лекарственное средство (ADC), представленного Формулой (I), и включает следующие стадии 1 и 2.

[причем в Формуле:

Ab представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент,

D представляет собой эрибулин,

m представляет собой целое число от 1 до 10, и

p представляет собой целое число от 1 до 8]

Стадия 1: стадия получения соединения, представленного Формулой (B), путем осуществления реакции эрибулина или его соли с соединением, представленным Формулой (A),

[причем в Формуле: m представляет собой целое число от 1 до 10, и X представляет собой феноксигруппу или нитрофеноксигруппу.]

[причем в Формуле: m представляет собой целое число от 1 до 10]

Стадия 2: стадия получения конъюгата антитело-лекарственное средство, представленного Формулой (I), путем осуществления реакции соединения, представленного Формулой (B), с Ab.

[0113] Стадия 1 представляет собой стадию получения соединения, представленного Формулой (B), путем осуществления реакции эрибулина или его соли с соединением, представленным Формулой (A).

[0114] Эрибулин может представлять собой как свободную Форму эрибулина, так и соль эрибулина. Примеры соли эрибулина включают в себя эрибулин мезилат. Количество применяемого эрибулина или его соли может составлять от 1 до 1000 г или может составлять от 10 до 300 г в пересчете на свободную Форму эрибулина.

[0115] Соединение, представленное Формулой (A), представляет собой соединение, соответствующее линкерному фрагменту, в ADC, является реакционно-способным в отношении антитела в терминальной малеимидной структуре и является реакционноспособным в отношении эрибулина в терминале X на противоположной стороне. X представляет собой феноксигруппу или нитрофеноксигруппу. Нитрофеноксигруппа может представлять собой любую из о-нитрофеноксигруппы, м-нитрофеноксигруппы и п-нитрофеноксигруппы. В случаях, когда X представляет собой феноксигруппу или нитрофеноксигруппу, X является реакционноспособным в отношении первичной аминогруппы на конце эрибулина. Соединение, представленное Формулой (A), может быть получено с помощью способа, приведенного ниже.

[0116] Количество применяемого соединения, представленного Формулой (A), может составлять от 0,5 до 2,0 моль, от 0,6 до 3,0 моль, от 1,0 до 2,0 моль или от 1,3 до 1,8 моль на 1 моль эрибулина.

[0117] На стадии 1 может применяться основание. Основание не ограничено, при условии, что оно не ингибирует реакцию эрибулина и соединения, представленного Формулой (A), при этом примеры основания включают третичный амин, такой как триэтиламин или N,N-диизопропилэтиламин, и азотсодержащее ароматическое соединение, такое как пиридин или 2,6-лутидин. Количество применяемого основания может составлять от 0,5 до 3,0 моль, от 1,0 до 2,0 моль или от 1,1 до 1,5 моль на 1 моль эрибулина.

[0118] Стадию 1 можно выполнять при отсутствии растворителя или в растворителе, и предпочтительно ее осуществляют в растворителе. Растворитель не ограничен, при условии, что он не ингибирует реакцию эрибулина и соединения, представленного Формулой (A), при этом примеры растворителя включают N,N-диметилформамид (DMF), диметилсульфоксид (DMSO), N-метилпирролидон (NMP) и пиридин. Количество применяемого растворителя может составлять от 5 до 20 мл или от 6 до 15 мл на 1 г эрибулина.

[0119] Температура реакции на стадии 1 не ограничена, при условии, что это температура, при которой протекает реакция эрибулина и соединения, представленного Формулой (A). Температура реакции может представлять собой комнатную температуру или составлять от 20°C до 25°C.

[0120] Для ускорения реакции на стадии 1 может применяться ускоритель, такой как 4-диметиламинопиридин. Количество применяемого ускорителя может составлять от 0,01 до 0,8 г или от 0,1 до 0,3 г на 1 моль эрибулина.

[0121] Далее в данном документе будет описан пример способа очистки. Однако способ очистки не ограничен данным примером, и очистку можно выполнять с применением известного в химии способа. После завершения реакции со стадии 1 реакционную смесь можно очищать на колонке с обращенной фазой. Колонка с обращенной фазой представляет собой, например, колонку, в которой силикагель с октадецильной группой (C18) применяют как наполнитель. Реакционную смесь помещают на верхнюю часть колонки с обращенной фазой и экстрагируют полярным растворителем, таким как ацетонитрил или вода. Необязательно предпочтительно, что уксусную кислоту или подобную применяют так, чтобы pH экстрагируемого растворителя был кислым. Метиленхлорид добавляют к полученному экстракту и полученное соединение, представленное Формулой (B), переносят в метиленхлоридный слой (органический слой). В ходе экстракции необязательно pH можно корректировать водным раствором бикарбоната натрия. Полученный органический слой может быть нейтрализован с помощью остаточной кислоты, такой как водный раствор бикарбоната натрия. Полученный органический слой концентрируют при пониженном давлении для растворения остатка в метиленхлориде, метаноле, или подобном и раствор добавляют по каплям в пентан. В результате соединение, представленное Формулой (B), осаждается. Полученное твердое вещество промывают пентаном и высушивают при пониженном давлении. В результате получают необходимое соединение.

[0122] Стадия 2 представляет собой стадию получения конъюгата антитело-лекарственное средство, представленного Формулой (I), путем осуществления реакции соединения, представленного Формулой (B), с Ab. Цистеиновый остаток в фрагменте, представляющем собой антитело (Ab), подвергается сопряженному присоединению по Михаэлю с малеимидной структурой в соединении, представленном Формулой (B), с образованием между ними ковалентной связи. Множество соединений, представленных Формулой (B), могут связываться с одним фрагментом, представляющим собой антитело Ab. Число образованных связей соответствует p в Формуле (A).

[0123] Количество применяемого соединения, представленного Формулой (B), может составлять от 1,0 до 8,0 моль или от 3,0 до 5,0 моль на фрагмент, представляющий собой антитело Ab.

[0124] Как правило, стадию 2 проводят в буферном растворе. Буферный раствор не ограничен, при условии, что он не модифицирует подлежащее применению антитело Ab и не ингибирует связывание с соединением, представленным Формулой (B). Буферный раствор может представлять собой фосфатный буферный раствор, боратный буферный раствор, буферный раствор, содержащий трис(гидроксиметил)аминометан, буферный раствор, содержащий этилендиаминтетрауксусную кислоту, или любую их комбинацию. pH буферного раствора предпочтительно составляет от 6,0 до 8,0 и более предпочтительно от 6,5 до 7,5.

[0125] На стадии 2 в буферный раствор может быть добавлен полярный органический растворитель. Полярный органический растворитель не ограничен, при условии, что он может быть смешан с буферным раствором, и способен увеличить растворимость соединения, представленного Формулой (B). Например, раствор, в котором соединение, представленное Формулой (B), растворено в полярном органическом растворителе, может быть добавлен к буферному раствору, в котором растворено антитело Ab.

[0126] Примеры полярного органического растворителя включают N,N-диметилформамид, N,N-диметилацетамид и диметилсульфоксид. Количество применяемого органического растворителя может составлять от 60 до 300 мл, от 110 до 240 мл, от 130 до 210 мл, или от 140 до 180 мл на 1 мг соединения, представленного Формулой (B).

[0127] Температура реакции на стадии 2 не ограничена, при условии, что это температура, при которой протекает реакция соединения, представленного Формулой (B), и антитела Ab. Температура реакции может представлять собой комнатную температуру или составлять от 20°C до 25°C.

[0128] Более конкретно температура реакции является следующей. Во-первых, антитело Ab фильтруют сквозь фильтр (проницаемая мембрана) и растворяют путем добавления к нему буферного раствора. Путем добавления TCEP-HCl (трис(2-карбоксиэтил)фосфингидрохлорид) к полученному раствору для частичного восстановления в молекуле антитела расщепляется дисульфидная связь с образованием сульфгидрильной группы. Затем добавляют соединение, представленное Формулой (B), или раствор, в котором соединение, представленное Формулой (B), растворяют в полярном органическом растворителе так, что соединение, представленное Формулой (B), и антитело связываются друг с другом. После завершения реакции 2, например, можно добавить N-ацетилцистеин. N-ацетилцистеин вызывает реакцию с оставшимся соединением, представленным Формулой (B), и также вызывает реакцию с сульфгидрильной группой, образованной частичным восстановлением.

[0129] Далее в данном документе будет описан пример способа очистки. Однако способ очистки не ограничен данным примером, и очистку можно выполнять с применением известного в химии способа. После завершения реакции буферный раствор в реакционном растворе заменяют другим буферным раствором с применением фильтрации с тангенциальным потоком (TFF). Затем добавляют водный раствор лимонной кислоты, фильтруют сквозь фильтр и очищают буферным раствором.

[0130] В данном документе будет описан способ получения соединения, представленного Формулой (A). Соединение, представленное Формулой (A), можно получить, например, из соединения, представленного Формулой (1), и соединения, представленного Формулой (2), за две стадии, как показано ниже.

[0131] Стадия 3 представляет собой стадию активации карбоксигруппы соединения, представленного Формулой (1), и конденсирования соединения, представленного Формулой (1), с соединением, представленным Формулой (2). Соединение, представленное Формулой (3), получают путем конденсации соединения, представленного Формулой (1), и соединения, представленного Формулой (2).

[0132] Соединение, представленное Формулой (1), доступно в Tokyo Chemical Industry Co., Ltd. под торговым названием "Mal-PEG₂-acid" (код по каталогу: M3203). Кроме того, соединение, представленное Формулой (1), может быть получено известным в органической химии способом с применением трет-бутилакрилата и т.п. с полиэтиленгликолем соответствующей длины в качестве исходного материала.

[0133] Количество применяемого соединения, представленного Формулой (1), может составлять от 1,0 до 1,5 моль или от 1,1 до 2,0 моль на 1 моль соединения, представленного Формулой (2).

[0134] Соединение, представленное Формулой (2), доступно от Tokyo Chemical Industry Co., Ltd. под торговым названием "Fmoc-Val-Cit-PAB-OH" (код по каталогу: F1223). Кроме того, соединение, представленное Формулой (2), может быть получено известным в органической химии способом с применением N-Fmoc-цитруллина, п-аминобензилового спирта и N-Fmoc-валина. "Fmoc" представляет собой защитную группу для аминогруппы и представляет собой 9-флуоренилметилоксикарбонильную группу.

[0135] Предпочтительно, чтобы стадию 3 проводили в присутствии конденсирующего средства. Конденсирующее средство не ограничено, при условии, что оно ускоряет реакцию конденсации карбоновой кислоты и первичного амина, и примеры конденсирующего средства включают дициклогексилкарбодиимид (DCC), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид и 4-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-ил)-4-метилморфолиниум хлорид (DMT-MM).

[0136] Количество применяемого конденсирующего средства может составлять от 1,0 до 2,0 моль или от 1,3 до 1,5 моль на 1 моль соединения, представленного Формулой (1).

[0137] На стадии 3 может применяться основание. Основание не ограничено, при условии, что оно не ингибирует реакцию соединения, представленного Формулой (1), и соединения, представленного Формулой (2), и примеры основания включают третичный амин, такой как триэтиламин или N,N-диизопропилэтиламин, и азотсодержащее ароматическое соединение, такое как пиридин или 2,6-лутидин. Количество применяемого основания может быть от 0,5 до 2,0 моль, от 1,0 до 1,5 моль или от 1,1 до 1,3 моль на 1 моль соединения, представленного Формулой (1).

[0138] Стадию 3 можно выполнять при отсутствии растворителя или в растворителе, и предпочтительно ее осуществляют в растворителе. Растворитель не ограничен, при условии, что он не ингибирует реакцию соединения, представленного Формулой (1), и соединения, представленного Формулой (2), и примеры растворителя включают N,N-диметилформамид (DMF), тетрагидрофуран (THF), метанол (MeOH) и смешанный из них растворитель. Количество применяемого растворителя может составлять от 10 до 40 мл или от 20 до 30 мл на 1 г соединения, представленного Формулой (1).

[0139] Температура реакции на стадии 3 не ограничена, при условии, что это температура, при которой протекает реакция соединения, представленного Формулой (1), и соединения, представленного Формулой (2). Температура реакции может представлять собой комнатную температуру или составлять от 15°C до 35°C.

[0140] Стадия 4 представляет собой стадию получения соединения, представленного Формулой (A), путем ацилирования гидроксильной группы в соединении, представленном Формулой (3), с применением ацилирующего средства.

[0141] Количество применяемого соединения, представленного Формулой (3), может быть соответствующим образом выбрано в зависимости от реакции. Например, количество применяемого соединения, представленного Формулой (3), может составлять от 10 до 500 г или от 100 до 300 г.

[0142] Примеры ацилирующего средства включают дифенилкарбонат, бис(4-нитрофенил)карбонат, бис(2-нитрофенил)карбонат, бис(3-нитрофенил)карбонат, фенилхлорформиат, 4-нитрофенилхлорформиат, 2-нитрофенилхлорформиат и 3-нитрофенилхлорформиат. Часть ацилирующего средства соответствует X в Формуле (A) и вид ацилирующего средства может быть выбран в зависимости от выбора требуемой X-группы.

[0143] Количество применяемого ацилирующего средства может составлять от 1,0 до 5,0 моль или от 2,0 до 4,0 моль на 1 моль соединения, представленного Формулой (3).

[0144] Стадию 4 можно выполнять при отсутствии растворителя или в растворителе, и предпочтительно ее осуществляют в растворителе. Растворитель не ограничен, при условии, что он не ингибирует реакцию ацилирования соединения, представленного Формулой (3), и примеры растворителя включают N,N-диметилформамид (DMF), N,N-диметилацетамид, толуол, диметилсульфоксид (DMSO) и N,N-диметилацетамид (DMA). Количество применяемого растворителя может составлять от 5 до 20 мл или от 6 до 15 мл на 1 г соединения, представленного Формулой (3).

[0145] Температура реакции на стадии 4 не ограничена при условии, что это температура, при которой протекает реакция ацилирования соединения, представленного Формулой (3). Температура реакции может представлять собой комнатную температуру или составлять от 20°C до 25°C.

Примеры

[0146] Далее в данном документе настоящее изобретение будет подробно описано с помощью примеров получения и сравнительных примеров получения.

Аббревиатуры, используемые в примерах, используются так же, как они описаны в уровне техники, и они, например, представлены далее.

DIPEA: N,N-диизопропилэтиламин

DMA: N,N-диметилацетамид

DMF: N,N-диметилформамид

DMT-MM: 4-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-ил)-4-метилморфолиния хлорид

EDTA: этилендиаминтетрауксусная кислота

THF: тетрагидрофуран

[0147] <Пример получения 1>

(11S,14S)-14-[3-(Карбамоиламино)пропил]-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-N-[4-(гидроксиметил)фенил]-9,12-диоксо-11-(пропан-2-ил)-3,6-диокса-10,13-диазапентадекан-15-амид

[0148] Смесь (2S)-2-{[(2S)-2-амино-3-метилбутаноил]амино}-5-(карбамоиламино)-N-[4-(гидроксиметил)фенил]пентанамида (184 г), 3-{2-[2-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)этокси]этокси}пропановой кислоты (150 г), DMT-MM (174 г), метанола (2,76 л) и THF (2,76 л) перемешивали в атмосфере азота при температуре от 15°C до 35°C в течение 24 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и к ней добавляли ацетонитрил. Осажденный осадок фильтровали и дополнительно промывали ацетонитрилом. Полученное твердое вещество смешивали с ацетонитрилом и фильтровали с получением твердого вещества. Полученное твердое вещество высушивали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (267 г, выход 89%).

[0149] <Пример получения 2>

(4-{[(11S,14S)-14-[3-(Карбамоиламино)пропил]-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-9,12,15-триоксо-11-(пропан-2-ил)-3,6-диокса-10,13-диазапентадекан-15-ил]амино}фенил)метил=4-нитрофенил=карбонат

[0150] Смесь указанного в примерах получения соединения 1 (250 г), бис(4-нитрофенил)карбоната (615 г), DIPEA (157 г) и DMF (5,0 л) перемешивали в атмосфере азота при температуре от 15°C до 35°C в течение 3 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и очищали на силикагелевой колонке (метиленхлорид/ацетон) и фракцию, включая указанное в заголовке соединение, концентрировали при пониженном давлении. В результате указанное в заголовке соединение (162 г, выход 51%) получали в виде твердого вещества.

[0151] <Пример получения 3>

(4-{[(11S,14S)-14-[3-(Карбамоиламино)пропил]-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-9,12,15-триоксо-11-(пропан-2-ил)-3,6-диокса-10,13-диазапентадекан-15-ил]амино}фенил)метил={(2S)-2-гидрокси-3-[(2R,3R,3aS,7R,8aS,9S,10aR,11S,12R,13aR,13bS,15S,18S,21S,24S,26R,28R,29aS)-3-метокси-26-метил-20,27-диметилиденгексакозагидро-11,15:18,21:24,28-триэпокси-7,9-этано-12,15-метано-9H,15H-фуро[3,2-i]фуро[2',3':5,6]пирано[4,3-b][1,4]диоксациклопентакозин-5(4H)-он-2-ил]пропил}карбамат

[0152] Смесь эрибулина мезилата (93 г), DIPEA (26 мл), соединения, полученного в примере получения 2 (116 г), и DMF (930 мл) перемешивали в атмосфере азота при температуре от 20°C до 25°C в течение 20 часов. Реакционную смесь очищали на колонке с обращенной фазой (торговое название; Kromasil C18) (ацетонитрил/вода/уксусная кислота), и фракцию, включая указанное в заголовке соединение, экстрагировали с метиленхлоридом. Затем органический слой промывали водным раствором бикарбоната натрия и водой и затем концентрировали при пониженном давлении. Концентрированный остаток растворяли в смешанном растворителе из метиленхлорида, метанола и уксусной кислоты и раствор добавляли по каплям в пентан. Осажденный осадок фильтровали и полученное твердое вещество промывали пентаном и высушивали при пониженном давлении. В результате получали указанное в заголовке соединение (109,6 г, выход 71%).

¹H-ЯМР (400 МГц, CD₃OD): δ (ppm) 7,59 (d, J=8,4 Гц, 2H), 7,31 (d, J=8,4 Гц, 2H), 6,81 (s, 2H), 5,13 (s, 1H), 5,06 (d, J=12,4 Гц, 1H), 5,02 (s, 1H), 5,01 (d, J=12,4 Гц, 1H), 4,87 (s, 1H), 4,82 (s, 1H), 4,71 (t, J=4,0 Гц, 1H), 4,61 (t, J=4,4 Гц, 1H), 4,50 (dd, J=5,2, 9,2 Гц, 1H), 4,47 (d, J=10,8 Гц, 1H), 4,32-4,27 (m, 2H), 4,19 (dd, J=6,8, 11,6 Гц, 1H), 4,13-4,07 (m, 2H), 3,98 (t, J=10,4 Гц,1H), 3,88-3,82 (m, 3H), 3,76-3,64 (m, 6H), 3,62-3,51 (m, 6H), 3,38 (s, 3H), 3,22-3,08 (m, 4H), 2,93 (dd, J=2,4, 9,6 Гц, 1H), 2,92-2,84 (m, 1H), 2,76-2,63 (m, 2H), 2,52 (t, J=6,0 Гц, 2H), 2,44-2,29 (m, 5H), 2,21-1,97 (m, 8H), 1,93-1,83 (m, 3H), 1,80-1,66 (m, 5H), 1,66-1,28 (m, 10H), 1,11 (d, J=6,4 Гц, 3H), 1,07-1,01 (m, 1H), 0,99 (d, J=6,8 Гц, 3H), 0,97 (d, J=6,4 Гц, 3H).

LCMS (M+H): масса/заряд 1374,9

[0153] <Сравнительный пример получения 1>

[0154] <Сравнительный пример получения 1-1>

4-{[(2S)-5-(Карбамоиламино)-2-{[(2S)-2-{[(9H-флуорен-9-илметокси)карбонил]амино}3-метилбутаноил]амино}пентаноил]амино}бензил={(2S)-2-гидрокси-3-[(2R,3R,3aS,7R,8aS,9S,10aR,11S,12R,13aR,13bS,15S,18S,21S,24S,26R,28R,29aS)-3-метокси-26-метил-20,27-диметилиденгексакосагидро-11,15:18,21:24,28-триэпокси-7,9-этано-12,15-метано-9H,15H-фуро[3,2-i]фуро[2',3':5,6]пирано[4,3-b][1,4]диоксациклопентакозин-5(4H)-он-2-ил]пропил}карбамат

[0155] Смесь эрибулина мезилата (93 г), DIPEA (25 мл), 4-{[(2S)-5-(карбамоиламино)-2-{[(2S)-2-{[(9H-флуорен-9-илметокси)карбонил]амино}3-метилбутаноил]амино}пентаноил]амино}бензил=4-нитрофенилкарбоната (103,6 г) и DMF (930 мл) перемешивали в атмосфере азота при температуре от 20°C до 25°C в течение 16 часов.

[0156] <Сравнительный пример получения 1-2>

4-{[(2S)-2-{[(2S)-2-Амино-3-метилбутаноил]амино}-5-(карбамоиламино)пентаноил]амино}бензил={(2S)-2-гидрокси-3-[(2R,3R,3aS,7R,8aS,9S,10aR,11S,12R,13aR,13bS,15S,18S,21S,24S,26R,28R,29aS)-3-метокси-26-метил-20,27-диметилиденгексакозагидро-11,15:18,21:24,28-триэпокси-7,9-этано-12,15-метано-9H,15H-фуро[3,2-i]фуро[2',3':5,6]пирано[4,3-b][1,4]диоксациклопентакосин-5(4H)-он-2-ил]пропил}карбамат

[0157] Диэтиламин (234 мл) добавляли в реакционную смесь и ее перемешивали при температуре от 20°C до 25°C в течение 0,5 часа. Этилацетат и хлористоводородную кислоту добавляли в реакционную смесь и водный слой промывали гептаном. Метилтетрагидрофуран и водный раствор карбоната калия, хлорида натрия добавляли в водный слой, и органический слой промывали водным раствором хлорида натрия. Органический слой высушивали сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении.

¹H-ЯМР (400 МГц, CD₃OD): δ (ppm) 7,56 (d, J=8,4 Гц, 2H), 7,32 (d, J=8,4 Гц, 2H), 5,14 (s, 1H), 5,06 (d, J=12,4 Гц, 1H), 5,03 (s, 1H), 5,01 (d, J=12,4 Гц, 1H), 4,87 (s, 1H), 4,83 (s, 1H), 4,71 (t, J=4,4 Гц, 1H), 4,62 (t, J=4,4 Гц, 1H), 4,57 (dd, J=4,8, 8,8 Гц, 1H), 4,47 (d, J=10,8 Гц, 1H), 4,32-4,27 (m, 2H), 4,18 (dd, J=4,8, 6,4 Гц, 1H), 4,13-4,07 (m, 2H), 3,98 (t, J=10,4 Гц, 1H), 3,88-3,82 (m, 3H), 3,76-3,70 (m, 4H), 3,60 (d, J=6,0 Гц, 1H), 3,38 (s, 3H), 3,26-3,10 (m, 3H), 2,93 (dd, J =2,0, 11,2 Гц, 1H), 2,91-2,84 (m, 1H), 2,75-2,64 (m, 2H), 2,44-2,29 (m, 5H), 2,21-1,97 (m, 8H), 1,93-1,83 (m, 3H), 1,79-1,72 (m, 5H), 1,68-1,29 (m, 8H), 1,11 (d, J=6,8 Гц, 3H), 1,07-1,01 (m, 1H), 1,06 (d, J=7,2 Гц, 3H), 1,02 (d, J=7,2 Гц, 3H)

LCMS (M+H): масса/заряд 1135,7

[0158] <Сравнительный Пример получения 1-3>

(4-{[(11S,14S)-14-[3-(Карбамоиламино)пропил]-1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-9,12,15-триоксо-11-(пропан-2-ил)-3,6-диокса-10,13-диазапентадекан-15-ил]амино}фенил)метил={(2S)-2-гидрокси-3-[(2R,3R,3aS,7R,8aS,9S,10aR,11S,12R,13aR,13bS,15S,18S,21S,24S,26R,28R,29aS)-3-метокси-26-метил-20,27-диметилиденгексакозагидро-11,15:18,21:24,28-триэпокси-7,9-этано-12,15-метано-9H,15H-фуро[3,2-i]фуро[2',3':5,6]пирано[4,3-b][1,4]диоксациклопентакозин-5(4H)-он-2-ил]пропил}карбамат

[0159] 41-[2-(2-{3-[(2,5-Диоксопирролидин-1-ил)окси]-3-оксопропокси}этокси)этил]-1H-пиррол-2,5-дион (47,9 г), DIPEA (20 мл) и DMF (913 мл) добавляли в концентрированный остаток, полученный в сравнительном примере получения 1-2 и перемешивали при температуре от 20°C до 25°C в течение 3 часов.

Реакционную смесь очищали на колонке с обращенной фазой (торговое название; SILMERCK 10013) (ацетонитрил/вода/уксусная кислота) и фракцию, содержащую указанное в заголовке соединение, экстрагировали с метиленхлоридом. Органический слой промывали водным раствором бикарбоната натрия и водой и затем концентрировали при пониженном давлении. Концентрированный остаток растворяли в метиленхлориде, метаноле и уксусной кислоте и раствор добавляли по каплям в пентан. В результате профильтровали осажденный осадок. Полученное твердое вещество промывали пентаном и высушивали при пониженном давлении. В результате получали указанное в заголовке соединение (88,1 г, выход 57% в три стадии).

[0160] <Пример получения 4>

1493 мл буферного водного раствора для разведения (10 ммоль/л тринатрия фосфата, 100 ммоль/л хлорида натрия, 3 вес./об. % сахарозы и pH 6,5) и 1098 мл буферного раствора для корректировки pH (0,25 моль/л трис(гидроксиметил)аминометана гидрохлорид, 20 ммоль/л EDTA, pH 7,7) добавляли к 7854 мл MORAb-003-содержащему буферному водному раствору (26,6 мг/мл MORAb-003, 10 ммоль/л тринатрия фосфата, 100 ммоль/л хлорида натрия, 3 вес./об. % сахарозы и pH 6,5). Водный раствор трис(2-карбоксиэтил)фосфина (10 ммоль/л, 311 г) добавляли при температуре 20°C и перемешивали в течение 2,5 часов.

DMA-раствор соединения, полученного в примере получения 3 (8,37 ммоль/л, 809 мл) добавляли и перемешивали в течение 0,5 часа. Водный раствор N-ацетилцистеина (30 ммоль/л, 452 г) добавили для остановки реакции и перемешивали в течение 0,5 часа. Конъюгат антитело-лекарственное средство (ADC) очищали путем диафильтрации при следующих условиях.

(Условия Очистки)

Фильтр (проницаемая мембрана): Pellicon 3 (1,14 м², 30 кДа x1, 0,57 м², 30 кДа x1)

TMP (трансмембранный перепад давления): 15 фунтов на квадратный дюйм

Дополнительный буферный раствор: 25 ммоль/л водного раствора лимонной кислоты (pH 6,3)

Температура: от 17,0°C до 23,0°C

Проникновение: 163,2 кг

[0161] Путем добавления 25 ммоль/л водного раствора лимонной кислоты (3013 г, pH 6,3) и 5668 г буферного водного раствора для создания условий (25 ммоль/л лимонной кислоты, 1 моль/л сахарозы, 0,24 вес./об. %, Полисорбат 80, pH 6,3), получали водный раствор ADC (концентрация белка: 10,6 мг/мл, общий вес: 20,9 кг, содержание ADC: 213,430 г, выход 99%). Затем водный раствор ADC подвергали стерильной фильтрации (Millipore Durapore PVDF).

[Перечень последовательностей]

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> Eisai R&D Management

<120> СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОНЪЮГАТА АНТИТЕЛО-ЛЕКАРСТВЕННОЕ

СРЕДСТВО НА ОСНОВЕ ЭРИБУЛИНА

<130> FP20-0574-00

<160> 347

<170> PatentIn версия 3.5

<210> 1

<211> 449

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь MORAb-003

<400> 1

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ser Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Gly Tyr

20 25 30

Gly Leu Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Met Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Ala Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Phe

65 70 75 80

Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Asp Asp Pro Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Pro Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

Lys

<210> 2

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи MORAb-003

<400> 2

Gly Tyr Gly Leu Ser

1 5

<210> 3

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи MORAb-003

<400> 3

Met Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 4

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи MORAb-003

<400> 4

His Gly Asp Asp Pro Ala Trp Phe Ala Tyr

1 5 10

<210> 5

<211> 468

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотная последовательность тяжелой цепи

полноразмерного белка-предшественника MORAb-003

<400> 5

Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly

1 5 10 15

Val His Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln

20 25 30

Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ser Ala Ser Gly Phe Thr Phe

35 40 45

Ser Gly Tyr Gly Leu Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu

50 55 60

Glu Trp Val Ala Met Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala

65 70 75 80

Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Ala Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn

85 90 95

Thr Leu Phe Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Gly Val

100 105 110

Tyr Phe Cys Ala Arg His Gly Asp Asp Pro Ala Trp Phe Ala Tyr Trp

115 120 125

Gly Gln Gly Thr Pro Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

130 135 140

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

145 150 155 160

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

165 170 175

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

180 185 190

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

195 200 205

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

210 215 220

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

225 230 235 240

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

245 250 255

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

260 265 270

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

275 280 285

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

290 295 300

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

305 310 315 320

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

325 330 335

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

340 345 350

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

355 360 365

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

370 375 380

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

385 390 395 400

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

405 410 415

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

420 425 430

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

435 440 445

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

450 455 460

Ser Pro Gly Lys

465

<210> 6

<211> 217

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легка цепь MORAb-003

<400> 6

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Val Ser Ser Ser Ile Ser Ser Asn

20 25 30

Asn Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Trp

35 40 45

Ile Tyr Gly Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln

65 70 75 80

Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Tyr Pro

85 90 95

Tyr Met Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr

100 105 110

Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu

115 120 125

Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro

130 135 140

Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly

145 150 155 160

Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr

165 170 175

Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His

180 185 190

Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val

195 200 205

Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 7

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи MORAb-003

<400> 7

Ser Val Ser Ser Ser Ile Ser Ser Asn Asn Leu His

1 5 10

<210> 8

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи MORAb-003

<400> 8

Gly Thr Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 9

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи MORAb-003

<400> 9

Gln Gln Trp Ser Ser Tyr Pro Tyr Met Tyr Thr

1 5 10

<210> 10

<211> 236

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотная последовательность легкой цепи

полноразмерного белка-предшественника MORAb-003

<400> 10

Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly

1 5 10 15

Val His Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala

20 25 30

Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Val Ser Ser Ser Ile

35 40 45

Ser Ser Asn Asn Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro

50 55 60

Lys Pro Trp Ile Tyr Gly Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser

65 70 75 80

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser

85 90 95

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser

100 105 110

Ser Tyr Pro Tyr Met Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile

115 120 125

Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp

130 135 140

Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn

145 150 155 160

Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu

165 170 175

Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp

180 185 190

Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr

195 200 205

Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser

210 215 220

Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

225 230 235

<210> 11

<211> 1407

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотиды тяжелой цепи MORAb-003

<400> 11

atgggatgga gctgtatcat cctcttcttg gtagcaacag ctacaggtgt ccactccgag 60

gtccaactgg tggagagcgg tggaggtgtt gtgcaacctg gccggtccct gcgcctgtcc 120

tgctccgcat ctggcttcac cttcagcggc tatgggttgt cttgggtgag acaggcacct 180

ggaaaaggtc ttgagtgggt tgcaatgatt agtagtggtg gtagttatac ctactatgca 240

gacagtgtga agggtagatt tgcaatatcg cgagacaacg ccaagaacac attgttcctg 300

caaatggaca gcctgagacc cgaagacacc ggggtctatt tttgtgcaag acatggggac 360

gatcccgcct ggttcgctta ttggggccaa gggaccccgg tcaccgtctc ctcagcctcc 420

accaagggcc catcggtctt ccccctggca ccctcctcca agagcacctc tgggggcaca 480

gcggccctgg gctgcctggt caaggactac ttccccgaac cggtgacggt gtcgtggaac 540

tcaggcgccc tgaccagcgg cgtgcacacc ttcccggctg tcctacagtc ctcaggactc 600

tactccctca gcagcgtggt gaccgtgccc tccagcagct tgggcaccca gacctacatc 660

tgcaacgtga atcacaagcc cagcaacacc aaggtggaca agaaagttga gcccaaatct 720

tgtgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg gggaccgtca 780

gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc 840

acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg 900

gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg 960

taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac 1020

aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 1080

aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccggga tgagctgacc 1140

aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 1200

gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac 1260

tccgacggct ccttcttctt atattcaaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag 1320

gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 1380

agcctctccc tgtctcccgg gaaatga 1407

<210> 12

<211> 711

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Нуклеотиды легкой цепи MORAb-003

<400> 12

atgggatgga gctgtatcat cctcttcttg gtagcaacag ctacaggtgt ccactccgac 60

atccagctga cccagagccc aagcagcctg agcgccagcg tgggtgacag agtgaccatc 120

acctgtagtg tcagctcaag tataagttcc aacaacttgc actggtacca gcagaagcca 180

ggtaaggctc caaagccatg gatctacggc acatccaacc tggcttctgg tgtgccaagc 240

agattcagcg gtagcggtag cggtaccgac tacaccttca ccatcagcag cctccagcca 300

gaggacatcg ccacctacta ctgccaacag tggagtagtt acccgtacat gtacacgttc 360

ggccaaggga ccaaggtgga aatcaaacga actgtggctg caccatctgt cttcatcttc 420

ccgccatctg atgagcagtt gaaatctgga actgcctctg ttgtgtgcct gctgaataac 480

ttctatccca gagaggccaa agtacagtgg aaggtggata acgccctcca atcgggtaac 540

tcccaggaga gtgtcacaga gcaggacagc aaggacagca cctacagcct cagcagcacc 600

ctgacgctga gcaaagcaga ctacgagaaa cacaaagtct acgcctgcga agtcacccat 660

cagggcctga gctcgcccgt cacaaagagc ttcaacaggg gagagtgtta a 711

<210> 13

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи MORAb-003; IMGT

<400> 13

Gly Phe Thr Phe Ser Gly Tyr Gly

1 5

<210> 14

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи MORAb-003; IMGT

<400> 14

Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr

1 5

<210> 15

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи MORAb-003; IMGT

<400> 15

Ala Arg His Gly Asp Asp Pro Ala Trp Phe Ala Tyr

1 5 10

<210> 16

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи MORAb-003; IMGT

<400> 16

Ser Ser Ile Ser Ser Asn Asn

1 5

<210> 17

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи MORAb-003; IMGT

<400> 17

Gly Thr Ser

1

<210> 18

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи MORAb-003; IMGT

<400> 18

Gln Gln Trp Ser Ser Tyr Pro Tyr Met Tyr Thr

1 5 10

<210> 19

<211> 257

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 19

Met Ala Gln Arg Met Thr Thr Gln Leu Leu Leu Leu Leu Val Trp Val

1 5 10 15

Ala Val Val Gly Glu Ala Gln Thr Arg Ile Ala Trp Ala Arg Thr Glu

20 25 30

Leu Leu Asn Val Cys Met Asn Ala Lys His His Lys Glu Lys Pro Gly

35 40 45

Pro Glu Asp Lys Leu His Glu Gln Cys Arg Pro Trp Arg Lys Asn Ala

50 55 60

Cys Cys Ser Thr Asn Thr Ser Gln Glu Ala His Lys Asp Val Ser Tyr

65 70 75 80

Leu Tyr Arg Phe Asn Trp Asn His Cys Gly Glu Met Ala Pro Ala Cys

85 90 95

Lys Arg His Phe Ile Gln Asp Thr Cys Leu Tyr Glu Cys Ser Pro Asn

100 105 110

Leu Gly Pro Trp Ile Gln Gln Val Asp Gln Ser Trp Arg Lys Glu Arg

115 120 125

Val Leu Asn Val Pro Leu Cys Lys Glu Asp Cys Glu Gln Trp Trp Glu

130 135 140

Asp Cys Arg Thr Ser Tyr Thr Cys Lys Ser Asn Trp His Lys Gly Trp

145 150 155 160

Asn Trp Thr Ser Gly Phe Asn Lys Cys Ala Val Gly Ala Ala Cys Gln

165 170 175

Pro Phe His Phe Tyr Phe Pro Thr Pro Thr Val Leu Cys Asn Glu Ile

180 185 190

Trp Thr His Ser Tyr Lys Val Ser Asn Tyr Ser Arg Gly Ser Gly Arg

195 200 205

Cys Ile Gln Met Trp Phe Asp Pro Ala Gln Gly Asn Pro Asn Glu Glu

210 215 220

Val Ala Arg Phe Tyr Ala Ala Ala Met Ser Gly Ala Gly Pro Trp Ala

225 230 235 240

Ala Trp Pro Phe Leu Leu Ser Leu Ala Leu Met Leu Leu Trp Leu Leu

245 250 255

Ser

<210> 20

<211> 982

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 20

cattccttgg tgccactgac cacagctctt tcttcaggga cagacatggc tcagcggatg 60

acaacacagc tgctgctcct tctagtgtgg gtggctgtag taggggaggc tcagacaagg 120

attgcatggg ccaggactga gcttctcaat gtctgcatga acgccaagca ccacaaggaa 180

aagccaggcc ccgaggacaa gttgcatgag cagtgtcgac cctggaggaa gaatgcctgc 240

tgttctacca acaccagcca ggaagcccat aaggatgttt cctacctata tagattcaac 300

tggaaccact gtggagagat ggcacctgcc tgcaaacggc atttcatcca ggacacctgc 360

ctctacgagt gctcccccaa cttggggccc tggatccagc aggtggatca gagctggcgc 420

aaagagcggg tactgaacgt gcccctgtgc aaagaggact gtgagcaatg gtgggaagat 480

tgtcgcacct cctacacctg caagagcaac tggcacaagg gctggaactg gacttcaggg 540

tttaacaagt gcgcagtggg agctgcctgc caacctttcc atttctactt ccccacaccc 600

actgttctgt gcaatgaaat ctggactcac tcctacaagg tcagcaacta cagccgaggg 660

agtggccgct gcatccagat gtggttcgac ccagcccagg gcaaccccaa tgaggaggtg 720

gcgaggttct atgctgcagc catgagtggg gctgggccct gggcagcctg gcctttcctg 780

cttagcctgg ccctaatgct gctgtggctg ctcagctgac ctccttttac cttctgatac 840

ctggaaatcc ctgccctgtt cagccccaca gctcccaact atttggttcc tgctccatgg 900

tcgggcctct gacagccact ttgaataaac cagacaccgc acatgtgtct tgagaattat 960

ttggaaaaaa aaaaaaaaaa aa 982

<210> 21

<211> 1255

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 21

Met Glu Leu Ala Ala Leu Cys Arg Trp Gly Leu Leu Leu Ala Leu Leu

1 5 10 15

Pro Pro Gly Ala Ala Ser Thr Gln Val Cys Thr Gly Thr Asp Met Lys

20 25 30

Leu Arg Leu Pro Ala Ser Pro Glu Thr His Leu Asp Met Leu Arg His

35 40 45

Leu Tyr Gln Gly Cys Gln Val Val Gln Gly Asn Leu Glu Leu Thr Tyr

50 55 60

Leu Pro Thr Asn Ala Ser Leu Ser Phe Leu Gln Asp Ile Gln Glu Val

65 70 75 80

Gln Gly Tyr Val Leu Ile Ala His Asn Gln Val Arg Gln Val Pro Leu

85 90 95

Gln Arg Leu Arg Ile Val Arg Gly Thr Gln Leu Phe Glu Asp Asn Tyr

100 105 110

Ala Leu Ala Val Leu Asp Asn Gly Asp Pro Leu Asn Asn Thr Thr Pro

115 120 125

Val Thr Gly Ala Ser Pro Gly Gly Leu Arg Glu Leu Gln Leu Arg Ser

130 135 140

Leu Thr Glu Ile Leu Lys Gly Gly Val Leu Ile Gln Arg Asn Pro Gln

145 150 155 160

Leu Cys Tyr Gln Asp Thr Ile Leu Trp Lys Asp Ile Phe His Lys Asn

165 170 175

Asn Gln Leu Ala Leu Thr Leu Ile Asp Thr Asn Arg Ser Arg Ala Cys

180 185 190

His Pro Cys Ser Pro Met Cys Lys Gly Ser Arg Cys Trp Gly Glu Ser

195 200 205

Ser Glu Asp Cys Gln Ser Leu Thr Arg Thr Val Cys Ala Gly Gly Cys

210 215 220

Ala Arg Cys Lys Gly Pro Leu Pro Thr Asp Cys Cys His Glu Gln Cys

225 230 235 240

Ala Ala Gly Cys Thr Gly Pro Lys His Ser Asp Cys Leu Ala Cys Leu

245 250 255

His Phe Asn His Ser Gly Ile Cys Glu Leu His Cys Pro Ala Leu Val

260 265 270

Thr Tyr Asn Thr Asp Thr Phe Glu Ser Met Pro Asn Pro Glu Gly Arg

275 280 285

Tyr Thr Phe Gly Ala Ser Cys Val Thr Ala Cys Pro Tyr Asn Tyr Leu

290 295 300

Ser Thr Asp Val Gly Ser Cys Thr Leu Val Cys Pro Leu His Asn Gln

305 310 315 320

Glu Val Thr Ala Glu Asp Gly Thr Gln Arg Cys Glu Lys Cys Ser Lys

325 330 335

Pro Cys Ala Arg Val Cys Tyr Gly Leu Gly Met Glu His Leu Arg Glu

340 345 350

Val Arg Ala Val Thr Ser Ala Asn Ile Gln Glu Phe Ala Gly Cys Lys

355 360 365

Lys Ile Phe Gly Ser Leu Ala Phe Leu Pro Glu Ser Phe Asp Gly Asp

370 375 380

Pro Ala Ser Asn Thr Ala Pro Leu Gln Pro Glu Gln Leu Gln Val Phe

385 390 395 400

Glu Thr Leu Glu Glu Ile Thr Gly Tyr Leu Tyr Ile Ser Ala Trp Pro

405 410 415

Asp Ser Leu Pro Asp Leu Ser Val Phe Gln Asn Leu Gln Val Ile Arg

420 425 430

Gly Arg Ile Leu His Asn Gly Ala Tyr Ser Leu Thr Leu Gln Gly Leu

435 440 445

Gly Ile Ser Trp Leu Gly Leu Arg Ser Leu Arg Glu Leu Gly Ser Gly

450 455 460

Leu Ala Leu Ile His His Asn Thr His Leu Cys Phe Val His Thr Val

465 470 475 480

Pro Trp Asp Gln Leu Phe Arg Asn Pro His Gln Ala Leu Leu His Thr

485 490 495

Ala Asn Arg Pro Glu Asp Glu Cys Val Gly Glu Gly Leu Ala Cys His

500 505 510

Gln Leu Cys Ala Arg Gly His Cys Trp Gly Pro Gly Pro Thr Gln Cys

515 520 525

Val Asn Cys Ser Gln Phe Leu Arg Gly Gln Glu Cys Val Glu Glu Cys

530 535 540

Arg Val Leu Gln Gly Leu Pro Arg Glu Tyr Val Asn Ala Arg His Cys

545 550 555 560

Leu Pro Cys His Pro Glu Cys Gln Pro Gln Asn Gly Ser Val Thr Cys

565 570 575

Phe Gly Pro Glu Ala Asp Gln Cys Val Ala Cys Ala His Tyr Lys Asp

580 585 590

Pro Pro Phe Cys Val Ala Arg Cys Pro Ser Gly Val Lys Pro Asp Leu

595 600 605

Ser Tyr Met Pro Ile Trp Lys Phe Pro Asp Glu Glu Gly Ala Cys Gln

610 615 620

Pro Cys Pro Ile Asn Cys Thr His Ser Cys Val Asp Leu Asp Asp Lys

625 630 635 640

Gly Cys Pro Ala Glu Gln Arg Ala Ser Pro Leu Thr Ser Ile Ile Ser

645 650 655

Ala Val Val Gly Ile Leu Leu Val Val Val Leu Gly Val Val Phe Gly

660 665 670

Ile Leu Ile Lys Arg Arg Gln Gln Lys Ile Arg Lys Tyr Thr Met Arg

675 680 685

Arg Leu Leu Gln Glu Thr Glu Leu Val Glu Pro Leu Thr Pro Ser Gly

690 695 700

Ala Met Pro Asn Gln Ala Gln Met Arg Ile Leu Lys Glu Thr Glu Leu

705 710 715 720

Arg Lys Val Lys Val Leu Gly Ser Gly Ala Phe Gly Thr Val Tyr Lys

725 730 735

Gly Ile Trp Ile Pro Asp Gly Glu Asn Val Lys Ile Pro Val Ala Ile

740 745 750

Lys Val Leu Arg Glu Asn Thr Ser Pro Lys Ala Asn Lys Glu Ile Leu

755 760 765

Asp Glu Ala Tyr Val Met Ala Gly Val Gly Ser Pro Tyr Val Ser Arg

770 775 780

Leu Leu Gly Ile Cys Leu Thr Ser Thr Val Gln Leu Val Thr Gln Leu

785 790 795 800

Met Pro Tyr Gly Cys Leu Leu Asp His Val Arg Glu Asn Arg Gly Arg

805 810 815

Leu Gly Ser Gln Asp Leu Leu Asn Trp Cys Met Gln Ile Ala Lys Gly

820 825 830

Met Ser Tyr Leu Glu Asp Val Arg Leu Val His Arg Asp Leu Ala Ala

835 840 845

Arg Asn Val Leu Val Lys Ser Pro Asn His Val Lys Ile Thr Asp Phe

850 855 860

Gly Leu Ala Arg Leu Leu Asp Ile Asp Glu Thr Glu Tyr His Ala Asp

865 870 875 880

Gly Gly Lys Val Pro Ile Lys Trp Met Ala Leu Glu Ser Ile Leu Arg

885 890 895

Arg Arg Phe Thr His Gln Ser Asp Val Trp Ser Tyr Gly Val Thr Val

900 905 910

Trp Glu Leu Met Thr Phe Gly Ala Lys Pro Tyr Asp Gly Ile Pro Ala

915 920 925

Arg Glu Ile Pro Asp Leu Leu Glu Lys Gly Glu Arg Leu Pro Gln Pro

930 935 940

Pro Ile Cys Thr Ile Asp Val Tyr Met Ile Met Val Lys Cys Trp Met

945 950 955 960

Ile Asp Ser Glu Cys Arg Pro Arg Phe Arg Glu Leu Val Ser Glu Phe

965 970 975

Ser Arg Met Ala Arg Asp Pro Gln Arg Phe Val Val Ile Gln Asn Glu

980 985 990

Asp Leu Gly Pro Ala Ser Pro Leu Asp Ser Thr Phe Tyr Arg Ser Leu

995 1000 1005

Leu Glu Asp Asp Asp Met Gly Asp Leu Val Asp Ala Glu Glu Tyr

1010 1015 1020

Leu Val Pro Gln Gln Gly Phe Phe Cys Pro Asp Pro Ala Pro Gly

1025 1030 1035

Ala Gly Gly Met Val His His Arg His Arg Ser Ser Ser Thr Arg

1040 1045 1050

Ser Gly Gly Gly Asp Leu Thr Leu Gly Leu Glu Pro Ser Glu Glu

1055 1060 1065

Glu Ala Pro Arg Ser Pro Leu Ala Pro Ser Glu Gly Ala Gly Ser

1070 1075 1080

Asp Val Phe Asp Gly Asp Leu Gly Met Gly Ala Ala Lys Gly Leu

1085 1090 1095

Gln Ser Leu Pro Thr His Asp Pro Ser Pro Leu Gln Arg Tyr Ser

1100 1105 1110

Glu Asp Pro Thr Val Pro Leu Pro Ser Glu Thr Asp Gly Tyr Val

1115 1120 1125

Ala Pro Leu Thr Cys Ser Pro Gln Pro Glu Tyr Val Asn Gln Pro

1130 1135 1140

Asp Val Arg Pro Gln Pro Pro Ser Pro Arg Glu Gly Pro Leu Pro

1145 1150 1155

Ala Ala Arg Pro Ala Gly Ala Thr Leu Glu Arg Pro Lys Thr Leu

1160 1165 1170

Ser Pro Gly Lys Asn Gly Val Val Lys Asp Val Phe Ala Phe Gly

1175 1180 1185

Gly Ala Val Glu Asn Pro Glu Tyr Leu Thr Pro Gln Gly Gly Ala

1190 1195 1200

Ala Pro Gln Pro His Pro Pro Pro Ala Phe Ser Pro Ala Phe Asp

1205 1210 1215

Asn Leu Tyr Tyr Trp Asp Gln Asp Pro Pro Glu Arg Gly Ala Pro

1220 1225 1230

Pro Ser Thr Phe Lys Gly Thr Pro Thr Ala Glu Asn Pro Glu Tyr

1235 1240 1245

Leu Gly Leu Asp Val Pro Val

1250 1255

<210> 22

<211> 3768

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 22

atggagctgg cggccttgtg ccgctggggg ctcctcctcg ccctcttgcc ccccggagcc 60

gcgagcaccc aagtgtgcac cggcacagac atgaagctgc ggctccctgc cagtcccgag 120

acccacctgg acatgctccg ccacctctac cagggctgcc aggtggtgca gggaaacctg 180

gaactcacct acctgcccac caatgccagc ctgtccttcc tgcaggatat ccaggaggtg 240

cagggctacg tgctcatcgc tcacaaccaa gtgaggcagg tcccactgca gaggctgcgg 300

attgtgcgag gcacccagct ctttgaggac aactatgccc tggccgtgct agacaatgga 360

gacccgctga acaataccac ccctgtcaca ggggcctccc caggaggcct gcgggagctg 420

cagcttcgaa gcctcacaga gatcttgaaa ggaggggtct tgatccagcg gaacccccag 480

ctctgctacc aggacacgat tttgtggaag gacatcttcc acaagaacaa ccagctggct 540

ctcacactga tagacaccaa ccgctctcgg gcctgccacc cctgttctcc gatgtgtaag 600

ggctcccgct gctggggaga gagttctgag gattgtcaga gcctgacgcg cactgtctgt 660

gccggtggct gtgcccgctg caaggggcca ctgcccactg actgctgcca tgagcagtgt 720

gctgccggct gcacgggccc caagcactct gactgcctgg cctgcctcca cttcaaccac 780

agtggcatct gtgagctgca ctgcccagcc ctggtcacct acaacacaga cacgtttgag 840

tccatgccca atcccgaggg ccggtataca ttcggcgcca gctgtgtgac tgcctgtccc 900

tacaactacc tttctacgga cgtgggatcc tgcaccctcg tctgccccct gcacaaccaa 960

gaggtgacag cagaggatgg aacacagcgg tgtgagaagt gcagcaagcc ctgtgcccga 1020

gtgtgctatg gtctgggcat ggagcacttg cgagaggtga gggcagttac cagtgccaat 1080

atccaggagt ttgctggctg caagaagatc tttgggagcc tggcatttct gccggagagc 1140

tttgatgggg acccagcctc caacactgcc ccgctccagc cagagcagct ccaagtgttt 1200

gagactctgg aagagatcac aggttaccta tacatctcag catggccgga cagcctgcct 1260

gacctcagcg tcttccagaa cctgcaagta atccggggac gaattctgca caatggcgcc 1320

tactcgctga ccctgcaagg gctgggcatc agctggctgg ggctgcgctc actgagggaa 1380

ctgggcagtg gactggccct catccaccat aacacccacc tctgcttcgt gcacacggtg 1440

ccctgggacc agctctttcg gaacccgcac caagctctgc tccacactgc caaccggcca 1500

gaggacgagt gtgtgggcga gggcctggcc tgccaccagc tgtgcgcccg agggcactgc 1560

tggggtccag ggcccaccca gtgtgtcaac tgcagccagt tccttcgggg ccaggagtgc 1620

gtggaggaat gccgagtact gcaggggctc cccagggagt atgtgaatgc caggcactgt 1680

ttgccgtgcc accctgagtg tcagccccag aatggctcag tgacctgttt tggaccggag 1740

gctgaccagt gtgtggcctg tgcccactat aaggaccctc ccttctgcgt ggcccgctgc 1800

cccagcggtg tgaaacctga cctctcctac atgcccatct ggaagtttcc agatgaggag 1860

ggcgcatgcc agccttgccc catcaactgc acccactcct gtgtggacct ggatgacaag 1920

ggctgccccg ccgagcagag agccagccct ctgacgtcca tcatctctgc ggtggttggc 1980

attctgctgg tcgtggtctt gggggtggtc tttgggatcc tcatcaagcg acggcagcag 2040

aagatccgga agtacacgat gcggagactg ctgcaggaaa cggagctggt ggagccgctg 2100

acacctagcg gagcgatgcc caaccaggcg cagatgcgga tcctgaaaga gacggagctg 2160

aggaaggtga aggtgcttgg atctggcgct tttggcacag tctacaaggg catctggatc 2220

cctgatgggg agaatgtgaa aattccagtg gccatcaaag tgttgaggga aaacacatcc 2280

cccaaagcca acaaagaaat cttagacgaa gcatacgtga tggctggtgt gggctcccca 2340

tatgtctccc gccttctggg catctgcctg acatccacgg tgcagctggt gacacagctt 2400

atgccctatg gctgcctctt agaccatgtc cgggaaaacc gcggacgcct gggctcccag 2460

gacctgctga actggtgtat gcagattgcc aaggggatga gctacctgga ggatgtgcgg 2520

ctcgtacaca gggacttggc cgctcggaac gtgctggtca agagtcccaa ccatgtcaaa 2580

attacagact tcgggctggc tcggctgctg gacattgacg agacagagta ccatgcagat 2640

gggggcaagg tgcccatcaa gtggatggcg ctggagtcca ttctccgccg gcggttcacc 2700

caccagagtg atgtgtggag ttatggtgtg actgtgtggg agctgatgac ttttggggcc 2760

aaaccttacg atgggatccc agcccgggag atccctgacc tgctggaaaa gggggagcgg 2820

ctgccccagc cccccatctg caccattgat gtctacatga tcatggtcaa atgttggatg 2880

attgactctg aatgtcggcc aagattccgg gagttggtgt ctgaattctc ccgcatggcc 2940

agggaccccc agcgctttgt ggtcatccag aatgaggact tgggcccagc cagtcccttg 3000

gacagcacct tctaccgctc actgctggag gacgatgaca tgggggacct ggtggatgct 3060

gaggagtatc tggtacccca gcagggcttc ttctgtccag accctgcccc gggcgctggg 3120

ggcatggtcc accacaggca ccgcagctca tctaccagga gtggcggtgg ggacctgaca 3180

ctagggctgg agccctctga agaggaggcc cccaggtctc cactggcacc ctccgaaggg 3240

gctggctccg atgtatttga tggtgacctg ggaatggggg cagccaaggg gctgcaaagc 3300

ctccccacac atgaccccag ccctctacag cggtacagtg aggaccccac agtacccctg 3360

ccctctgaga ctgatggcta cgttgccccc ctgacctgca gcccccagcc tgaatatgtg 3420

aaccagccag atgttcggcc ccagccccct tcgccccgag agggccctct gcctgctgcc 3480

cgacctgctg gtgccactct ggaaaggccc aagactctct ccccagggaa gaatggggtc 3540

gtcaaagacg tttttgcctt tgggggtgcc gtggagaacc ccgagtactt gacaccccag 3600

ggaggagctg cccctcagcc ccaccctcct cctgccttca gcccagcctt cgacaacctc 3660

tattactggg accaggaccc accagagcgg ggggctccac ccagcacctt caaagggaca 3720

cctacggcag agaacccaga gtacctgggt ctggacgtgc cagtgtga 3768

<210> 23

<211> 119

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь MORAb-003 (таблица 2)

<400> 23

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ser Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Gly Tyr

20 25 30

Gly Leu Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Met Ile Ser Ser Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Ala Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Phe

65 70 75 80

Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Gly Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg His Gly Asp Asp Pro Ala Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Pro Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 24

<211> 110

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь MORAb-003 (таблица 2)

<400> 24

Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Val Ser Ser Ser Ile Ser Ser Asn

20 25 30

Asn Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Pro Trp

35 40 45

Ile Tyr Gly Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln

65 70 75 80

Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Tyr Pro

85 90 95

Tyr Met Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 25

<211> 119

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь MORAb-009 (таблица 2)

<400> 25

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Glu Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Thr Met Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Leu Ile Thr Pro Tyr Asn Gly Ala Ser Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Arg Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Asp Leu Leu Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Gly Tyr Asp Gly Arg Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Ser Gly

100 105 110

Thr Pro Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 26

<211> 106

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь MORAb-009 (таблица 2)

<400> 26

Asp Ile Glu Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Thr Ser Pro Lys Arg Trp Ile Tyr

35 40 45

Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Gly Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Asn Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Val Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Asp Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Lys His Pro Leu Thr

85 90 95

Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 27

<211> 120

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь трастузумаба

<400> 27

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr

20 25 30

Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 28

<211> 107

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь трастузумаба

<400> 28

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 29

<211> 123

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 33011-xi

<400> 29

Gln Ser Val Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro

1 5 10 15

Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Ile Ser Leu Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Gly

35 40 45

Ile Ile Asn Gly Gly Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly

50 55 60

Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile Thr

65 70 75 80

Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Gly Ile

85 90 95

Gln His Gly Gly Gly Asn Ser Asp Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Leu

100 105 110

Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 30

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 33011-xi

<400> 30

Glu Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Ser Ser Val Ser Ala Ala Val Gly

1 5 10 15

Asp Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Val

20 25 30

Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Leu Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Arg Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu Glu Cys

65 70 75 80

Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Thr Asn Tyr Gly Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Asn Tyr Gly Phe Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys

100 105 110

<210> 31

<211> 126

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 33011-zu

<400> 31

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ile Ser Leu Ser Ser Asp

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile

35 40 45

Gly Ile Ile Asn Gly Gly Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg His Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Gly Ile Gln His Gly Gly Gly Asn Ser Asp Tyr Tyr Tyr Tyr Gly

100 105 110

Met Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 32

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 33011-zu

<400> 32

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Val

20 25 30

Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Leu Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Cys

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Thr Asn Tyr Gly Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Asn Tyr Gly Phe Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 33

<211> 118

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 111B10-xi

<400> 33

Gln Ser Val Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro

1 5 10 15

Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Asn Asn Tyr Ala

20 25 30

Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

35 40 45

Ser Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ala Phe Tyr Ala Asn Trp Ala Lys Gly

50 55 60

Arg Phe Thr Ile Ser Arg Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Met Thr

65 70 75 80

Ser Leu Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Gly Arg Asn Gly

85 90 95

Gly Gly Ser Tyr Ile Phe Tyr Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 34

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 111B10-xi

<400> 34

Ala Phe Glu Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Val Glu Ala Ala Val Gly

1 5 10 15

Gly Thr Ile Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ser Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Ser Ser Arg Phe Lys Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu Glu Cys

65 70 75 80

Ala Asp Ala Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Ser Tyr Tyr Asp Ile Gly Thr

85 90 95

Ser Thr Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys

100 105

<210> 35

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 111B10-zu

<400> 35

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Asn Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Ser Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ala Phe Tyr Ala Asn Trp Ala Lys

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Gly Gly Gly Ser Tyr Ile Phe Tyr Tyr Phe Asp Leu Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 36

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 111B10-zu

<400> 36

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ser Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Cys

65 70 75 80

Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Tyr Asp Ile Gly Thr

85 90 95

Ser Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 37

<211> 114

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 201C15-xi

<400> 37

Gln Ser Val Lys Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro

1 5 10 15

Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Ile Asp Leu Ser Ser Tyr Ala

20 25 30

Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Gly

35 40 45

Thr Ile Asn Ile Gly Gly Arg Val Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly

50 55 60

Arg Phe Thr Ile Ser Arg Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ala Pro

65 70 75 80

Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Tyr Tyr

85 90 95

Asn Gly Gly Ser Tyr Asp Ile Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val

100 105 110

Ser Leu

<210> 38

<211> 110

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 201C15-xi

<400> 38

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Ala Ser Ala Ser Glu Pro Val Gly

1 5 10 15

Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Glu Ser Ile Tyr Arg Val

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Thr Ser Thr Leu Ala Ser Gly Ala Pro Ser Arg Phe Lys Gly

50 55 60

Ser Gly Tyr Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val Gln Cys

65 70 75 80

Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gly Gly Tyr Tyr Ala Asp Ser

85 90 95

Tyr Gly Ile Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys

100 105 110

<210> 39

<211> 117

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 201C15-zu

<400> 39

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ser Ala Ser Gly Ile Asp Leu Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Met Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile

35 40 45

Gly Thr Ile Asn Ile Gly Gly Arg Val Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Tyr Tyr Asn Gly Gly Ser Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 40

<211> 110

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 201C15-zu

<400> 40

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Glu Ser Ile Tyr Arg Val

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Thr Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Cys

65 70 75 80

Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gly Gly Tyr Tyr Ala Asp Ser

85 90 95

Tyr Gly Ile Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 41

<211> 122

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 346C6-xi

<400> 41

Gln Ser Val Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Lys Pro Asp Glu Ser

1 5 10 15

Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr Ala

20 25 30

Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Glu Gly Leu Glu Trp Ile Gly

35 40 45

Thr Ile Ser Thr Gly Gly Ile Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly

50 55 60

Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile Thr

65 70 75 80

Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Gly Gly

85 90 95

Tyr Ala Ala Ser Ser Ala Tyr Tyr Leu Pro Tyr Tyr Phe Asp Leu Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 42

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 346C6-xi

<400> 42

Ala Ala Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Pro Val Ser Ala Ala Val Gly

1 5 10 15

Gly Thr Val Thr Ile Ser Cys Gln Ser Ser Gln Ser Val Tyr Asn Asn

20 25 30

Asn Asn Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu

35 40 45

Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val

65 70 75 80

Gln Cys Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Gly Cys Asp Asp

85 90 95

Asp Ala Asp Thr Phe Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys

100 105 110

<210> 43

<211> 125

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 346C6-zu

<400> 43

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Thr Ile Ser Thr Gly Gly Ile Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Gly Gly Tyr Ala Ala Ser Ser Ala Tyr Tyr Leu Pro Tyr Tyr Phe

100 105 110

Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120 125

<210> 44

<211> 112

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 346C6-zu

<400> 44

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser Gln Ser Val Tyr Asn Asn

20 25 30

Asn Asn Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu

35 40 45

Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu

65 70 75 80

Gln Cys Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Gly Cys Asp Asp

85 90 95

Asp Ala Asp Thr Phe Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 45

<211> 357

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь MORAb-003 (таблица 3)

<400> 45

gaggtccaac tggtggagag cggtggaggt gttgtgcaac ctggccggtc cctgcgcctg 60

tcctgctccg catctggctt caccttcagc ggctatgggt tgtcttgggt gagacaggca 120

cctggaaaag gtcttgagtg ggttgcaatg attagtagtg gtggtagtta tacctactat 180

gcagacagtg tgaagggtag atttgcaata tcgcgagaca acgccaagaa cacattgttc 240

ctgcaaatgg acagcctgag acccgaagac accggggtct atttttgtgc aagacatggg 300

gacgatcccg cctggttcgc ttattggggc caagggaccc cggtcaccgt ctcctca 357

<210> 46

<211> 330

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь MORAb-003 (таблица 3)

<400> 46

gacatccagc tgacccagag cccaagcagc ctgagcgcca gcgtgggtga cagagtgacc 60

atcacctgta gtgtcagctc aagtataagt tccaacaact tgcactggta ccagcagaag 120

ccaggtaagg ctccaaagcc atggatctac ggcacatcca acctggcttc tggtgtgcca 180

agcagattca gcggtagcgg tagcggtacc gactacacct tcaccatcag cagcctccag 240

ccagaggaca tcgccaccta ctactgccaa cagtggagta gttacccgta catgtacacg 300

ttcggccaag ggaccaaggt ggaaatcaaa 330

<210> 47

<211> 357

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь MORAb-009 (таблица 3)

<400> 47

caggtacaac tgcagcagtc tgggcctgag ctggagaagc ctggcgcttc agtgaagata 60

tcctgcaagg cttctggtta ctcattcact ggctacacca tgaactgggt gaagcagagc 120

catggaaaga gccttgagtg gattggactt attactcctt acaatggtgc ttctagctac 180

aaccagaagt tcaggggcaa ggccacatta actgtagaca agtcatccag cacagcctac 240

atggacctcc tcagtctgac atctgaagac tctgcagtct atttctgtgc aagggggggt 300

tacgacggga ggggttttga ctactgggga tccgggaccc cggtcaccgt ctcctca 357

<210> 48

<211> 318

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь MORAb-009 (таблица 3)

<400> 48

gacatcgagc tcactcagtc tccagcaatc atgtctgcat ctccagggga gaaggtcacc 60

atgacctgca gtgccagctc aagtgtaagt tacatgcact ggtaccagca gaagtcaggc 120

acctccccca aaagatggat ttatgacaca tccaaactgg cttctggagt cccaggtcgc 180

ttcagtggca gtgggtctgg aaactcttac tctctcacaa tcagcagcgt ggaggctgaa 240

gatgatgcaa cttattactg ccagcagtgg agtaagcacc ctctcacgtt cggatccggg 300

accaaggtgg aaatcaaa 318

<210> 49

<211> 369

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 33011-xi (таблица 3)

<400> 49

cagtcggtgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60

tgcaccgtct ctggaatctc cctcagtagc gatgcaataa gctgggtccg ccaggctcca 120

gggaaggggc tcgaatacat cggaatcatt aatggtggtg gtaacacata ctacgcgagc 180

tgggcgaaag gccgattcac catctccaaa acctcgacca cggtggatct gaaaatcacc 240

agtccgacaa ccgaggacac ggccacctat ttctgtgcca gaggcattca acatggtggt 300

ggtaatagtg attattatta ttacggcatg gacctctggg gcccaggcac cctggtcact 360

gtctcttca 369

<210> 50

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 33011-xi (таблица 3)

<400> 50

gaagtgttga tgacccagac tccatcctcc gtgtctgcag ctgtgggaga cacagtcacc 60

atcaagtgcc aggccagtca gagcattagt agtgtcttgt cctggtatca gcagaaacca 120

gggcagcctc ccaagctcct gatctatctg gcatccactc tggcatctgg ggtcccatcg 180

cggttcagcg gcagtagatc tgggacagag ttcactctca ccatcagcga cctggagtgt 240

gacgatgctg ccacttacta ctgtcaaacc aattatggta ctagtagtag taattatggt 300

tttgctttcg gcggagggac cgaggtggtc gtcaaa 336

<210> 51

<211> 378

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 33011-zu (таблица 3)

<400> 51

gaagtccaac tggtggaaag cgggggagga ctggtgcagc cgggcggatc cctccggctg 60

tcatgtgctg catcgggaat ttccctctcc tccgacgcga ttagctgggt cagacaggcc 120

cccggaaagg ggctggagta catcggtatc atcaacggcg gcggaaacac ctactacgcc 180

tcctgggcca agggccgctt caccatctcg cggcataatt ccaagaacac tctgtacttg 240

caaatgaact ccctgagggc cgaggacacc gccgtgtact actgcgcgcg cggcatccag 300

cacggtggtg gaaacagcga ctactactac tatgggatgg atctgtgggg ccagggaact 360

cttgtgaccg tgtcgtca 378

<210> 52

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 33011-zu (таблица 3)

<400> 52

gacattcaga tgacccagtc cccaagctcg ctgtccgcct ccgtgggcga ccgcgtgacc 60

atcacgtgcc aggcgtccca gtcaattagc agcgtgctct cctggtacca acagaagccg 120

gggaaagcac ccaagctgct gatctacttg gcctccactc tggcctcggg agtgccttca 180

cggttctccg gatcgggatc tggtactgat ttcaccctca ccatctcgag ccttcagtgc 240

gaggacatcg ctacttacta ttgtcaaacc aactacggaa cctccagctc caactacggc 300

tttgccttcg gtggcgggac caaggtcgaa atcaaa 336

<210> 53

<211> 354

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 111B10-xi (таблица 3)

<400> 53

cagtcggtgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60

tgcacagtct ctggattctc cctcaataac tatgcaatga gctgggtccg ccaggctcca 120

gggaaggggc tggaatggat cggatccatt agtactggtg gtctcgcatt ctacgcgaac 180

tgggcaaaag gccgattcac catctccaga acctcgacca cggtggatct gaaaatgacc 240

agtctgacaa ccgaggacac ggccacctat ttctgtggca gaaatggtgg tggtagttat 300

attttctatt attttgactt gtggggccaa ggcaccctcg tcactgtctc ttca 354

<210> 54

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 111B10-xi (таблица 3)

<400> 54

gcattcgaat tgacccagac tccatcctcc gtggaggcag ctgtgggagg cacaatcacc 60

atcaagtgcc aggccagtca gagcattagt agttacttat cctggtatca gcagaaacca 120

gggcagcctc ccaagctcct gatctattct gcatccactc tggcatctgg ggtctcatcg 180

cggttcaaag gcagtggatc tgggacagag tacactctca ccatcagcga cctggagtgt 240

gccgatgctg ccacttactt ctgtcaaagc tattatgata ttggtactag tactttcggc 300

ggagggaccg aggtggtcgt caaa 324

<210> 55

<211> 363

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 111B10-zu (таблица 3)

<400> 55

gaagtgcagc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagc ctggcggatc tctgagactg 60

tcttgtgccg cctccggctt ctccctgaac aactacgcca tgtcctgggt gcgacaggcc 120

cctggcaaag gcctggaatg gatcggctcc atcagcacag gcggcctggc cttctacgcc 180

aattgggcca agggccggtt caccatcagc cgggacaact ccaagaacac cctgtacctc 240

cagatgaact ccctgcgggc cgaggacacc gccgtgtact actgtgccag aaacggcgga 300

ggctcctaca tcttctacta cttcgacctg tggggccagg gcaccctcgt gacagtgtca 360

tct 363

<210> 56

<211> 324

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 111B10-zu (таблица 3)

<400> 56

gatattcaga tgacccagtc cccctccagc ctgtccgctt ctgtgggcga cagagtgacc 60

atcacctgtc aggcctccca gtccatctcc tcctacctgt cctggtatca gcagaagccc 120

ggcaaggccc ccaagctgct gatctactct gcctccacac tggcctccgg cgtgccctct 180

agattctccg gctctggctc tggcaccgac tttaccctga ccatcagctc cctccagtgc 240

gaggatgccg ccacctacta ctgccagtcc tactacgaca tcggcacctc caccttcggc 300

ggaggcacca aggtggaaat caaa 324

<210> 57

<211> 342

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 201C15-xi (таблица 3)

<400> 57

cagtcagtga aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60

tgcacagtct ctggaatcga cctcagtagc tatgcaatgg gctggttccg ccaggctcca 120

gggaaggggc tggaatacat cggaaccatt aatattggtg gtcgcgtata ttacgcgagc 180

tgggcaaaag gccgattcac catctccaga acctcgacca cggtggatct gaaagcgccc 240

agtctgacag ccgaggacac ggccacctat ttctgtgcca gatattataa tggtggtagt 300

tatgacatct ggggcccagg caccctggtc accgtctctt ta 342

<210> 58

<211> 330

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 201C15-xi (таблица 3)

<400> 58

gatgttgtga tgacccagac tccagcctcc gcgtctgaac ctgtgggagg cacagtcacc 60

atcaagtgcc aggccagtga gagcatttat cgcgtattgg cctggtatca gcagaaacca 120

gggcagcctc ccaagctcct gatctatgat acatccactc tggcatctgg ggccccatcg 180

cggttcaaag gcagtggata tgggacagag ttcactctca ccatcagcgg cgtgcagtgt 240

gaagatgctg ccacttacta ctgtcaaggc ggttattatg ctgatagtta tggtattgct 300

ttcggcggag ggaccgaggt ggtggtcaaa 330

<210> 59

<211> 351

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 201C15-zu (таблица 3)

<400> 59

caggtgcagc tggtggaatc tggcggagga ctggtgcagc ctggcggctc tctgagactg 60

tcctgttccg cctccggaat cgacctgtcc tcctacgcta tgggctgggt gcgacaggct 120

cctggcaagg gcctggagta catcggcacc atcaacatcg gcggcagagt gtactacgcc 180

tcctgggcca agggccggtt caccatctcc agagacaact ccaagaacac cctgtacctc 240

cagatgaact ccctgcgggc cgaggacacc gccgtgtact actgcgcccg gtactacaac 300

ggcggctcct acgatatctg gggccagggc acactcgtga ccgtgtcctc t 351

<210> 60

<211> 330

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 201C15-zu (таблица 3)

<400> 60

gatatccaga tgacccagtc cccctccacc ctgtctgcct ctgtgggcga cagagtgacc 60

atcacctgtc aggcctccga gtccatctac cgggtgctgg cctggtatca gcagaagcct 120

ggcaaggccc ccaagctgct gatctacgac accagcacac tggcctccgg cgtgccctct 180

agattctccg gctctggctc tggcaccgag tttaccctga ccatctccag cctccagtgc 240

gacgacgccg ccacctacta ttgtcagggc ggctactacg ccgactccta cggaatcgct 300

ttcggcggag gcaccaaggt ggaaatcaaa 330

<210> 61

<211> 366

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 346C6-xi (таблица 3)

<400> 61

cagtcggtgg aggagtccgg cggtcgcctg gtaaagcctg acgaatccct gacactcacc 60

tgcacagcct ctggattctc cctcagtagt tatgcaatga tctgggtccg ccaggctcca 120

ggggaggggc tggaatggat cggaaccatt agtactggtg gtatcacata ctacgcgagc 180

tgggcgaaag gccgattcac catctccaaa acctcgacca cggtggatct gaaaatcacc 240

agtccgacaa ccgaggacac ggccacctat ttctgtgcca gagggggata tgctgctagt 300

agtgcttatt atctcccgta ctactttgac ttgtggggcc aagggaccct ggtcaccgtc 360

tcctca 366

<210> 62

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 346C6-xi (таблица 3)

<400> 62

gcagccgtgc tgacccagac accatcaccc gtgtctgcag ctgtgggagg cacagtcacc 60

atcagttgcc agtccagtca gagtgtttat aataataaca acttagcctg gtttcagcag 120

aaacccgggc agcctcccaa gcttctgatc tatctggcat ccactctggc atctggggtc 180

ccatcacggt tcagcggcag tggatctggg acacagttca ctctcaccat cagcggcgtg 240

cagtgtgacg atgctgccac ttattactgt ctaggtggtt gtgatgatga tgctgatact 300

tttgctttcg gcggagggac tgaggtggtg gtcaaa 336

<210> 63

<211> 375

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 346C6-zu (таблица 3)

<400> 63

gaagtgcagc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagc ctggcggatc tctgagactg 60

tcttgtgccg cctccggctt ctccctgtcc tcctacgcta tgatctgggt gcgacaggcc 120

cctggcaagg gcctggaatg gatcggcacc atctctaccg gcggaattac ctactacgcc 180

tcctgggcca agggccggtt caccatctcc agagacaact ccaagaacac cctgtacctc 240

cagatgaact ccctgcgggc cgaggacacc gccgtgtact attgtgctag aggcggctac 300

gccgccagct ccgcttacta cctgccctac tacttcgacc tgtggggcca gggcaccctc 360

gtgacagtgt catct 375

<210> 64

<211> 336

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 346C6-zu (таблица 3)

<400> 64

gatattcaga tgacccagtc cccctccagc ctgtccgctt ctgtgggcga cagagtgacc 60

atcacctgtc agtcctccca gtccgtgtat aacaacaaca acctggcctg gtatcagcag 120

aaacccggca aggtgcccaa gctgctgatc tacctggcct ccacactggc ctctggcgtg 180

ccctctagat tctccggctc tggctctggc accgacttta ccctgaccat cagctccctc 240

cagtgcgagg atgccgccac ctactattgc ctgggcggct gcgacgacga cgccgatacc 300

tttgcttttg gcggaggcac caaggtggaa atcaaa 336

<210> 65

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи MORAb-009 (таблица 4)

<400> 65

Gly Tyr Thr Met Asn

1 5

<210> 66

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи MORAb-009 (таблица 4)

<400> 66

Leu Ile Thr Pro Tyr Asn Gly Ala Ser Ser Tyr Asn Gln Lys Phe Arg

1 5 10 15

Gly

<210> 67

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи MORAb-009 (таблица 4)

<400> 67

Gly Gly Tyr Asp Gly Arg Gly Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 68

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи MORAb-009 (таблица 4)

<400> 68

Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met His

1 5 10

<210> 69

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи MORAb-009 (таблица 4)

<400> 69

Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser

1 5

<210> 70

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи MORAb-009 (таблица 4)

<400> 70

Gln Gln Trp Ser Lys His Pro Leu Thr

1 5

<210> 71

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи трастузумаба (таблица 4)

<400> 71

Asp Thr Tyr Ile His

1 5

<210> 72

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи трастузумаба (таблица 4)

<400> 72

Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 73

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи трастузумаба (таблица 4)

<400> 73

Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 74

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи трастузумаба (таблица 4)

<400> 74

Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala Val Ala

1 5 10

<210> 75

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи трастузумаба (таблица 4)

<400> 75

Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser

1 5

<210> 76

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи трастузумаба (таблица 4)

<400> 76

Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro Thr

1 5

<210> 77

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 33011-xi (таблица 4)

<400> 77

Ser Asp Ala Ile Ser

1 5

<210> 78

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 33011-xi (таблица 4)

<400> 78

Ile Ile Asn Gly Gly Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly

1 5 10 15

<210> 79

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 33011-xi (таблица 4)

<400> 79

Gly Ile Gln His Gly Gly Gly Asn Ser Asp Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met

1 5 10 15

Asp Leu

<210> 80

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 33011-xi (таблица 4)

<400> 80

Gln Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Val Leu Ser

1 5 10

<210> 81

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 33011-xi (таблица 4)

<400> 81

Leu Ala Ser Thr Leu Ala Ser

1 5

<210> 82

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 33011-xi (таблица 4)

<400> 82

Gln Thr Asn Tyr Gly Thr Ser Ser Ser Asn Tyr Gly Phe Ala

1 5 10

<210> 83

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 33011-zu (таблица 4)

<400> 83

Ser Asp Ala Ile Ser

1 5

<210> 84

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 33011-zu (таблица 4)

<400> 84

Ile Ile Asn Gly Gly Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly

1 5 10 15

<210> 85

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 33011-zu (таблица 4)

<400> 85

Gly Ile Gln His Gly Gly Gly Asn Ser Asp Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met

1 5 10 15

Asp Leu

<210> 86

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 33011-zu (таблица 4)

<400> 86

Gln Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Val Leu Ser

1 5 10

<210> 87

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 33011-zu (таблица 4)

<400> 87

Leu Ala Ser Thr Leu Ala Ser

1 5

<210> 88

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 33011-zu (таблица 4)

<400> 88

Gln Thr Asn Tyr Gly Thr Ser Ser Ser Asn Tyr Gly Phe Ala

1 5 10

<210> 89

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 111B10-xi (таблица 4)

<400> 89

Asn Tyr Ala Met Ser

1 5

<210> 90

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 111B10-xi (таблица 4)

<400> 90

Ser Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ala Phe Tyr Ala Asn Trp Ala Lys Gly

1 5 10 15

<210> 91

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 111B10-xi (таблица 4)

<400> 91

Asn Gly Gly Gly Ser Tyr Ile Phe Tyr Tyr Phe Asp Leu

1 5 10

<210> 92

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 111B10-xi (таблица 4)

<400> 92

Gln Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Ser

1 5 10

<210> 93

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 111B10-xi (таблица 4)

<400> 93

Ser Ala Ser Thr Leu Ala Ser

1 5

<210> 94

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 111B10-xi (таблица 4)

<400> 94

Gln Ser Tyr Tyr Asp Ile Gly Thr Ser Thr

1 5 10

<210> 95

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 111B10-zu (таблица 4)

<400> 95

Asn Tyr Ala Met Ser

1 5

<210> 96

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 111B10-zu (таблица 4)

<400> 96

Ser Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ala Phe Tyr Ala Asn Trp Ala Lys Gly

1 5 10 15

<210> 97

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 111B10-zu (таблица 4)

<400> 97

Asn Gly Gly Gly Ser Tyr Ile Phe Tyr Tyr Phe Asp Leu

1 5 10

<210> 98

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 111B10-zu (таблица 4)

<400> 98

Gln Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Ser

1 5 10

<210> 99

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 111B10-zu (таблица 4)

<400> 99

Ser Ala Ser Thr Leu Ala Ser

1 5

<210> 100

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 111B10-zu (таблица 4)

<400> 100

Gln Ser Tyr Tyr Asp Ile Gly Thr Ser Thr

1 5 10

<210> 101

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 201C15-xi (таблица 4)

<400> 101

Ser Tyr Ala Met Gly

1 5

<210> 102

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 201C15-xi (таблица 4)

<400> 102

Thr Ile Asn Ile Gly Gly Arg Val Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly

1 5 10 15

<210> 103

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 201C15-xi (таблица 4)

<400> 103

Tyr Tyr Asn Gly Gly Ser Tyr Asp Ile

1 5

<210> 104

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 201C15-xi (таблица 4)

<400> 104

Gln Ala Ser Glu Ser Ile Tyr Arg Val Leu Ala

1 5 10

<210> 105

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 201C15-xi (таблица 4)

<400> 105

Asp Thr Ser Thr Leu Ala Ser

1 5

<210> 106

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 201C15-xi (таблица 4)

<400> 106

Gln Gly Gly Tyr Tyr Ala Asp Ser Tyr Gly Ile Ala

1 5 10

<210> 107

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 201C15-zu (таблица 4)

<400> 107

Ser Tyr Ala Met Gly

1 5

<210> 108

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 201C15-zu (таблица 4)

<400> 108

Thr Ile Asn Ile Gly Gly Arg Val Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly

1 5 10 15

<210> 109

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 201C15-zu (таблица 4)

<400> 109

Tyr Tyr Asn Gly Gly Ser Tyr Asp Ile

1 5

<210> 110

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 201C15-zu (таблица 4)

<400> 110

Gln Ala Ser Glu Ser Ile Tyr Arg Val Leu Ala

1 5 10

<210> 111

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 201C15-zu (таблица 4)

<400> 111

Asp Thr Ser Thr Leu Ala Ser

1 5

<210> 112

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 201C15-zu (таблица 4)

<400> 112

Gln Gly Gly Tyr Tyr Ala Asp Ser Tyr Gly Ile Ala

1 5 10

<210> 113

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 346C6-xi (таблица 4)

<400> 113

Ser Tyr Ala Met Ile

1 5

<210> 114

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 346C6-xi (таблица 4)

<400> 114

Thr Ile Ser Thr Gly Gly Ile Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly

1 5 10 15

<210> 115

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 346C6-xi (таблица 4)

<400> 115

Gly Gly Tyr Ala Ala Ser Ser Ala Tyr Tyr Leu Pro Tyr Tyr Phe Asp

1 5 10 15

Leu

<210> 116

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 346C6-xi (таблица 4)

<400> 116

Gln Ser Ser Gln Ser Val Tyr Asn Asn Asn Asn Leu Ala

1 5 10

<210> 117

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 346C6-xi (таблица 4)

<400> 117

Leu Ala Ser Thr Leu Ala Ser

1 5

<210> 118

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 346C6-xi (таблица 4)

<400> 118

Leu Gly Gly Cys Asp Asp Asp Ala Asp Thr Phe Ala

1 5 10

<210> 119

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 346C6-zu (таблица 4)

<400> 119

Ser Tyr Ala Met Ile

1 5

<210> 120

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 346C6-zu (таблица 4)

<400> 120

Thr Ile Ser Thr Gly Gly Ile Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly

1 5 10 15

<210> 121

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 346C6-zu (таблица 4)

<400> 121

Gly Gly Tyr Ala Ala Ser Ser Ala Tyr Tyr Leu Pro Tyr Tyr Phe Asp

1 5 10 15

Leu

<210> 122

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 346C6-zu (таблица 4)

<400> 122

Gln Ser Ser Gln Ser Val Tyr Asn Asn Asn Asn Leu Ala

1 5 10

<210> 123

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 346C6-zu (таблица 4)

<400> 123

Leu Ala Ser Thr Leu Ala Ser

1 5

<210> 124

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 346C6-zu (таблица 4)

<400> 124

Leu Gly Gly Cys Asp Asp Asp Ala Asp Thr Phe Ala

1 5 10

<210> 125

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи MORAb-003 (таблица 5)

<400> 125

ggctatgggt tgtct 15

<210> 126

<211> 51

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи MORAb-003 (таблица 5)

<400> 126

atgattagta gtggtggtag ttatacctac tatgcagaca gtgtgaaggg t 51

<210> 127

<211> 30

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи MORAb-003 (таблица 5)

<400> 127

catggggacg atcccgcctg gttcgcttat 30

<210> 128

<211> 36

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи MORAb-003 (таблица 5)

<400> 128

agtgtcagct caagtataag ttccaacaac ttgcac 36

<210> 129

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи MORAb-003 (таблица 5)

<400> 129

ggcacatcca acctggcttc t 21

<210> 130

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи MORAb-003 (таблица 5)

<400> 130

caacagtgga gtagttaccc gtacatgtac acg 33

<210> 131

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи MORAb-009 (таблица 5)

<400> 131

ggctacacca tgaac 15

<210> 132

<211> 51

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи MORAb-009 (таблица 5)

<400> 132

cttattactc cttacaatgg tgcttctagc tacaaccaga agttcagggg c 51

<210> 133

<211> 30

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи MORAb-009 (таблица 5)

<400> 133

gggggttacg acgggagggg ttttgactac 30

<210> 134

<211> 30

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи MORAb-009 (таблица 5)

<400> 134

agtgccagct caagtgtaag ttacatgcac 30

<210> 135

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи MORAb-009 (таблица 5)

<400> 135

gacacatcca aactggcttc t 21

<210> 136

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи MORAb-009 (таблица 5)

<400> 136

cagcagtgga gtaagcaccc tctcacg 27

<210> 137

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 33011-xi (таблица 5)

<400> 137

agcgatgcaa taagc 15

<210> 138

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 33011-xi (таблица 5)

<400> 138

atcattaatg gtggtggtaa cacatactac gcgagctggg cgaaaggc 48

<210> 139

<211> 54

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 33011-xi (таблица 5)

<400> 139

ggcattcaac atggtggtgg taatagtgat tattattatt acggcatgga cctc 54

<210> 140

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 33011-xi (таблица 5)

<400> 140

caggccagtc agagcattag tagtgtcttg tcc 33

<210> 141

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 33011-xi (таблица 5)

<400> 141

ctggcatcca ctctggcatc t 21

<210> 142

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 33011-xi (таблица 5)

<400> 142

caaaccaatt atggtactag tagtagtaat tatggttttg ct 42

<210> 143

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 33011-zu (таблица 5)

<400> 143

tccgacgcga ttagc 15

<210> 144

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 33011-zu (таблица 5)

<400> 144

atcatcaacg gcggcggaaa cacctactac gcctcctggg ccaagggc 48

<210> 145

<211> 54

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 33011-zu (таблица 5)

<400> 145

ggcatccagc acggtggtgg aaacagcgac tactactact atgggatgga tctg 54

<210> 146

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 33011-zu (таблица 5)

<400> 146

caggcgtccc agtcaattag cagcgtgctc tcc 33

<210> 147

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 33011-zu (таблица 5)

<400> 147

ttggcctcca ctctggcctc g 21

<210> 148

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 33011-zu (таблица 5)

<400> 148

caaaccaact acggaacctc cagctccaac tacggctttg cc 42

<210> 149

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 111B10-xi (таблица 5)

<400> 149

aactatgcaa tgagc 15

<210> 150

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 111B10-xi (таблица 5)

<400> 150

tccattagta ctggtggtct cgcattctac gcgaactggg caaaaggc 48

<210> 151

<211> 39

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 111B10-xi (таблица 5)

<400> 151

aatggtggtg gtagttatat tttctattat tttgacttg 39

<210> 152

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 111B10-xi (таблица 5)

<400> 152

caggccagtc agagcattag tagttactta tcc 33

<210> 153

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 111B10-xi (таблица 5)

<400> 153

tctgcatcca ctctggcatc t 21

<210> 154

<211> 30

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 111B10-xi (таблица 5)

<400> 154

caaagctatt atgatattgg tactagtact 30

<210> 155

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 111B10-zu (таблица 5)

<400> 155

aactacgcca tgtcc 15

<210> 156

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 111B10-zu (таблица 5)

<400> 156

tccatcagca caggcggcct ggccttctac gccaattggg ccaagggc 48

<210> 157

<211> 39

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 111B10-zu (таблица 5)

<400> 157

aacggcggag gctcctacat cttctactac ttcgacctg 39

<210> 158

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 111B10-zu (таблица 5)

<400> 158

caggcctccc agtccatctc ctcctacctg tcc 33

<210> 159

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 111B10-zu (таблица 5)

<400> 159

tctgcctcca cactggcctc c 21

<210> 160

<211> 30

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 111B10-zu (таблица 5)

<400> 160

cagtcctact acgacatcgg cacctccacc 30

<210> 161

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 201C15-xi (таблица 5)

<400> 161

agctatgcaa tgggc 15

<210> 162

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 201C15-xi (таблица 5)

<400> 162

accattaata ttggtggtcg cgtatattac gcgagctggg caaaaggc 48

<210> 163

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 201C15-xi (таблица 5)

<400> 163

tattataatg gtggtagtta tgacatc 27

<210> 164

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 201C15-xi (таблица 5)

<400> 164

caggccagtg agagcattta tcgcgtattg gcc 33

<210> 165

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 201C15-xi (таблица 5)

<400> 165

gatacatcca ctctggcatc t 21

<210> 166

<211> 36

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 201C15-xi (таблица 5)

<400> 166

caaggcggtt attatgctga tagttatggt attgct 36

<210> 167

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 201C15-zu (таблица 5)

<400> 167

tcctacgcta tgggc 15

<210> 168

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 201C15-zu (таблица 5)

<400> 168

accatcaaca tcggcggcag agtgtactac gcctcctggg ccaagggc 48

<210> 169

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 201C15-zu (таблица 5)

<400> 169

tactacaacg gcggctccta cgatatc 27

<210> 170

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 201C15-zu (таблица 5)

<400> 170

caggcctccg agtccatcta ccgggtgctg gcc 33

<210> 171

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 201C15-zu (таблица 5)

<400> 171

gacaccagca cactggcctc c 21

<210> 172

<211> 36

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 201C15-zu (таблица 5)

<400> 172

cagggcggct actacgccga ctcctacgga atcgct 36

<210> 173

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 346C6-xi (таблица 5)

<400> 173

agttatgcaa tgatc 15

<210> 174

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 346C6-xi (таблица 5)

<400> 174

accattagta ctggtggtat cacatactac gcgagctggg cgaaaggc 48

<210> 175

<211> 51

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 346C6-xi (таблица 5)

<400> 175

gggggatatg ctgctagtag tgcttattat ctcccgtact actttgactt g 51

<210> 176

<211> 39

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 346C6-xi (таблица 5)

<400> 176

cagtcctccc agtccgtgta taacaacaac aacctggcc 39

<210> 177

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 346C6-xi (таблица 5)

<400> 177

ctggcatcca ctctggcatc t 21

<210> 178

<211> 36

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 346C6-xi (таблица 5)

<400> 178

ctaggtggtt gtgatgatga tgctgatact tttgct 36

<210> 179

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 346C6-zu (таблица 5)

<400> 179

tcctacgcta tgatc 15

<210> 180

<211> 48

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 346C6-zu (таблица 5)

<400> 180

accatctcta ccggcggaat tacctactac gcctcctggg ccaagggc 48

<210> 181

<211> 51

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 346C6-zu (таблица 5)

<400> 181

ggcggctacg ccgccagctc cgcttactac ctgccctact acttcgacct g 51

<210> 182

<211> 39

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 346C6-zu (таблица 5)

<400> 182

cagtcctccc agtccgtgta taacaacaac aacctggcc 39

<210> 183

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 346C6-zu (таблица 5)

<400> 183

ctggcctcca cactggcctc t 21

<210> 184

<211> 36

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 346C6-zu (таблица 5)

<400> 184

ctgggcggct gcgacgacga cgccgatacc tttgct 36

<210> 185

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи MORAb-009 (таблица 6)

<400> 185

Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr Thr

1 5

<210> 186

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи MORAb-009 (таблица 6)

<400> 186

Ile Thr Pro Tyr Asn Gly Ala Ser

1 5

<210> 187

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи MORAb-009 (таблица 6)

<400> 187

Ala Arg Gly Gly Tyr Asp Gly Arg Gly Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 188

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи MORAb-009 (таблица 6)

<400> 188

Ser Ser Val Ser Tyr

1 5

<210> 189

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи MORAb-009 (таблица 6)

<400> 189

Asp Thr Ser

1

<210> 190

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи MORAb-009 (таблица 6)

<400> 190

Gln Gln Trp Ser Lys His Pro Leu Thr

1 5

<210> 191

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи трастузумаба (таблица 6)

<400> 191

Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr Tyr

1 5

<210> 192

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи трастузумаба (таблица 6)

<400> 192

Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr

1 5

<210> 193

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи трастузумаба (таблица 6)

<400> 193

Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 194

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи трастузумаба (таблица 6)

<400> 194

Gln Asp Val Asn Thr Ala

1 5

<210> 195

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи трастузумаба (таблица 6)

<400> 195

Ser Ala Ser

1

<210> 196

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи трастузумаба (таблица 6)

<400> 196

Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro Thr

1 5

<210> 197

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 33011-xi (таблица 6)

<400> 197

Gly Ile Ser Leu Ser Ser Asp Ala

1 5

<210> 198

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 33011-xi (таблица 6)

<400> 198

Ile Asn Gly Gly Gly Asn Thr

1 5

<210> 199

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 33011-xi (таблица 6)

<400> 199

Ala Arg Gly Ile Gln His Gly Gly Gly Asn Ser Asp Tyr Tyr Tyr Tyr

1 5 10 15

Gly Met Asp Leu

20

<210> 200

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 33011-xi (таблица 6)

<400> 200

Gln Ser Ile Ser Ser Val

1 5

<210> 201

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 33011-xi (таблица 6)

<400> 201

Leu Ala Ser

1

<210> 202

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 33011-xi (таблица 6)

<400> 202

Gln Thr Asn Tyr Gly Thr Ser Ser Ser Asn Tyr Gly Phe Ala

1 5 10

<210> 203

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 33011-zu (таблица 6)

<400> 203

Gly Ile Ser Leu Ser Ser Asp Ala

1 5

<210> 204

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 33011-zu (таблица 6)

<400> 204

Ile Asn Gly Gly Gly Asn Thr

1 5

<210> 205

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 33011-zu (таблица 6)

<400> 205

Ala Arg Gly Ile Gln His Gly Gly Gly Asn Ser Asp Tyr Tyr Tyr Tyr

1 5 10 15

Gly Met Asp Leu

20

<210> 206

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 33011-zu (таблица 6)

<400> 206

Gln Ser Ile Ser Ser Val

1 5

<210> 207

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 33011-zu (таблица 6)

<400> 207

Leu Ala Ser

1

<210> 208

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 33011-zu (таблица 6)

<400> 208

Gln Thr Asn Tyr Gly Thr Ser Ser Ser Asn Tyr Gly Phe Ala

1 5 10

<210> 209

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 111B10-xi (таблица 6)

<400> 209

Gly Phe Ser Leu Asn Asn Tyr Ala

1 5

<210> 210

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 111B10-xi (таблица 6)

<400> 210

Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ala

1 5

<210> 211

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 111B10-xi (таблица 6)

<400> 211

Gly Arg Asn Gly Gly Gly Ser Tyr Ile Phe Tyr Tyr Phe Asp Leu

1 5 10 15

<210> 212

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 111B10-xi (таблица 6)

<400> 212

Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

1 5

<210> 213

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 111B10-xi (таблица 6)

<400> 213

Ser Ala Ser

1

<210> 214

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 111B10-xi (таблица 6)

<400> 214

Gln Ser Tyr Tyr Asp Ile Gly Thr Ser Thr

1 5 10

<210> 215

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 111B10-zu (таблица 6)

<400> 215

Gly Phe Ser Leu Asn Asn Tyr Ala

1 5

<210> 216

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 111B10-zu (таблица 6)

<400> 216

Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ala

1 5

<210> 217

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 111B10-zu (таблица 6)

<400> 217

Ala Arg Asn Gly Gly Gly Ser Tyr Ile Phe Tyr Tyr Phe Asp Leu

1 5 10 15

<210> 218

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 111B10-zu (таблица 6)

<400> 218

Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

1 5

<210> 219

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 111B10-zu (таблица 6)

<400> 219

Ser Ala Ser

1

<210> 220

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 111B10-zu (таблица 6)

<400> 220

Gln Ser Tyr Tyr Asp Ile Gly Thr Ser Thr

1 5 10

<210> 221

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 201C15-xi (таблица 6)

<400> 221

Gly Ile Asp Leu Ser Ser Tyr Ala

1 5

<210> 222

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 201C15-xi (таблица 6)

<400> 222

Ile Asn Ile Gly Gly Arg Val

1 5

<210> 223

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 201C15-xi (таблица 6)

<400> 223

Ala Arg Tyr Tyr Asn Gly Gly Ser Tyr Asp Ile

1 5 10

<210> 224

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 201C15-xi (таблица 6)

<400> 224

Glu Ser Ile Tyr Arg Val

1 5

<210> 225

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 201C15-xi (таблица 6)

<400> 225

Asp Thr Ser

1

<210> 226

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 201C15-xi (таблица 6)

<400> 226

Gln Gly Gly Tyr Tyr Ala Asp Ser Tyr Gly Ile Ala

1 5 10

<210> 227

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 201C15-zu (таблица 6)

<400> 227

Gly Ile Asp Leu Ser Ser Tyr Ala

1 5

<210> 228

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 201C15-zu (таблица 6)

<400> 228

Ile Asn Ile Gly Gly Arg Val

1 5

<210> 229

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 201C15-zu (таблица 6)

<400> 229

Ala Arg Tyr Tyr Asn Gly Gly Ser Tyr Asp Ile

1 5 10

<210> 230

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 201C15-zu (таблица 6)

<400> 230

Glu Ser Ile Tyr Arg Val

1 5

<210> 231

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 201C15-zu (таблица 6)

<400> 231

Asp Thr Ser

1

<210> 232

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 201C15-zu (таблица 6)

<400> 232

Gln Gly Gly Tyr Tyr Ala Asp Ser Tyr Gly Ile Ala

1 5 10

<210> 233

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 346C6-xi (таблица 6)

<400> 233

Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr Ala

1 5

<210> 234

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 346C6-xi (таблица 6)

<400> 234

Ile Ser Thr Gly Gly Ile Thr

1 5

<210> 235

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 346C6-xi (таблица 6)

<400> 235

Ala Arg Gly Gly Tyr Ala Ala Ser Ser Ala Tyr Tyr Leu Pro Tyr Tyr

1 5 10 15

Phe Asp Leu

<210> 236

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 346C6-xi (таблица 6)

<400> 236

Gln Ser Val Tyr Asn Asn Asn Asn

1 5

<210> 237

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 346C6-xi (таблица 6)

<400> 237

Leu Ala Ser

1

<210> 238

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 346C6-xi (таблица 6)

<400> 238

Leu Gly Gly Cys Asp Asp Asp Ala Asp Thr Phe Ala

1 5 10

<210> 239

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 346C6-zu (таблица 6)

<400> 239

Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr Ala

1 5

<210> 240

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 346C6-zu (таблица 6)

<400> 240

Ile Ser Thr Gly Gly Ile Thr

1 5

<210> 241

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 346C6-zu (таблица 6)

<400> 241

Ala Arg Gly Gly Tyr Ala Ala Ser Ser Ala Tyr Tyr Leu Pro Tyr Tyr

1 5 10 15

Phe Asp Leu

<210> 242

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 346C6-zu (таблица 6)

<400> 242

Gln Ser Val Tyr Asn Asn Asn Asn

1 5

<210> 243

<211> 3

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 346C6-zu (таблица 6)

<400> 243

Leu Ala Ser

1

<210> 244

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 346C6-zu (таблица 6)

<400> 244

Leu Gly Gly Cys Asp Asp Asp Ala Asp Thr Phe Ala

1 5 10

<210> 245

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи MORAb-003 (таблица 7)

<400> 245

ggcttcacct tcagcggcta tggg 24

<210> 246

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи MORAb-003 (таблица 7)

<400> 246

attagtagtg gtggtagtta tacc 24

<210> 247

<211> 36

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи MORAb-003 (таблица 7)

<400> 247

gcaagacatg gggacgatcc cgcctggttc gcttat 36

<210> 248

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи MORAb-003 (таблица 7)

<400> 248

tcaagtataa gttccaacaa c 21

<210> 249

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи MORAb-003 (таблица 7)

<400> 249

ggcacatcc 9

<210> 250

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи MORAb-003 (таблица 7)

<400> 250

caacagtgga gtagttaccc gtacatgtac acg 33

<210> 251

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи MORAb-009 (таблица 7)

<400> 251

ggttactcat tcactggcta cacc 24

<210> 252

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи MORAb-009 (таблица 7)

<400> 252

attactcctt acaatggtgc ttct 24

<210> 253

<211> 36

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи MORAb-009 (таблица 7)

<400> 253

gcaagggggg gttacgacgg gaggggtttt gactac 36

<210> 254

<211> 15

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи MORAb-009 (таблица 7)

<400> 254

tcaagtgtaa gttac 15

<210> 255

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи MORAb-009 (таблица 7)

<400> 255

gacacatcc 9

<210> 256

<211> 27

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи MORAb-009 (таблица 7)

<400> 256

cagcagtgga gtaagcaccc tctcacg 27

<210> 257

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 33011-xi (таблица 7)

<400> 257

ggaatctccc tcagtagcga tgca 24

<210> 258

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 33011-xi (таблица 7)

<400> 258

attaatggtg gtggtaacac a 21

<210> 259

<211> 60

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 33011-xi (таблица 7)

<400> 259

gccagaggca ttcaacatgg tggtggtaat agtgattatt attattacgg catggacctc 60

<210> 260

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 33011-xi (таблица 7)

<400> 260

cagagcatta gtagtgtc 18

<210> 261

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 33011-xi (таблица 7)

<400> 261

ctggcatct 9

<210> 262

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 33011-xi (таблица 7)

<400> 262

caaaccaatt atggtactag tagtagtaat tatggttttg ct 42

<210> 263

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 33011-zu (таблица 7)

<400> 263

ggaatttccc tctcctccga cgcg 24

<210> 264

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 33011-zu (таблица 7)

<400> 264

atcaacggcg gcggaaacac c 21

<210> 265

<211> 60

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 33011-zu (таблица 7)

<400> 265

gcgcgcggca tccagcacgg tggtggaaac agcgactact actactatgg gatggatctg 60

<210> 266

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 33011-zu (таблица 7)

<400> 266

cagtcaatta gcagcgtg 18

<210> 267

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 33011-zu (таблица 7)

<400> 267

ttggcctcc 9

<210> 268

<211> 42

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 33011-zu (таблица 7)

<400> 268

caaaccaact acggaacctc cagctccaac tacggctttg cc 42

<210> 269

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 111B10-xi (таблица 7)

<400> 269

ggattctccc tcaataacta tgca 24

<210> 270

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 111B10-xi (таблица 7)

<400> 270

attagtactg gtggtctcgc a 21

<210> 271

<211> 45

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 111B10-xi (таблица 7)

<400> 271

ggcagaaatg gtggtggtag ttatattttc tattattttg acttg 45

<210> 272

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 111B10-xi (таблица 7)

<400> 272

cagagcatta gtagttac 18

<210> 273

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 111B10-xi (таблица 7)

<400> 273

tctgcatcc 9

<210> 274

<211> 30

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 111B10-xi (таблица 7)

<400> 274

caaagctatt atgatattgg tactagtact 30

<210> 275

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 111B10-zu (таблица 7)

<400> 275

ggcttctccc tgaacaacta cgcc 24

<210> 276

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 111B10-zu (таблица 7)

<400> 276

atcagcacag gcggcctggc c 21

<210> 277

<211> 45

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 111B10-zu (таблица 7)

<400> 277

gccagaaacg gcggaggctc ctacatcttc tactacttcg acctg 45

<210> 278

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 111B10-zu (таблица 7)

<400> 278

cagtccatct cctcctac 18

<210> 279

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 111B10-zu (таблица 7)

<400> 279

tctgcctcc 9

<210> 280

<211> 30

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 111B10-zu (таблица 7)

<400> 280

cagtcctact acgacatcgg cacctccacc 30

<210> 281

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 201C15-xi (таблица 7)

<400> 281

ggaatcgacc tcagtagcta tgca 24

<210> 282

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 201C15-xi (таблица 7)

<400> 282

attaatattg gtggtcgcgt a 21

<210> 283

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 201C15-xi (таблица 7)

<400> 283

gccagatatt ataatggtgg tagttatgac atc 33

<210> 284

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 201C15-xi (таблица 7)

<400> 284

gagagcattt atcgcgta 18

<210> 285

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 201C15-xi (таблица 7)

<400> 285

gatacatcc 9

<210> 286

<211> 36

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 201C15-xi (таблица 7)

<400> 286

caaggcggtt attatgctga tagttatggt attgct 36

<210> 287

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 201C15-zu (таблица 7)

<400> 287

ggaatcgacc tgtcctccta cgct 24

<210> 288

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 201C15-zu (таблица 7)

<400> 288

atcaacatcg gcggcagagt g 21

<210> 289

<211> 33

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 201C15-zu (таблица 7)

<400> 289

gcccggtact acaacggcgg ctcctacgat atc 33

<210> 290

<211> 18

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 201C15-zu (таблица 7)

<400> 290

gagtccatct accgggtg 18

<210> 291

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 201C15-zu (таблица 7)

<400> 291

gacaccagc 9

<210> 292

<211> 36

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 201C15-zu (таблица 7)

<400> 292

cagggcggct actacgccga ctcctacgga atcgct 36

<210> 293

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 346C6-xi (таблица 7)

<400> 293

ggattctccc tcagtagtta tgca 24

<210> 294

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 346C6-xi (таблица 7)

<400> 294

attagtactg gtggtatcac a 21

<210> 295

<211> 57

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 346C6-xi (таблица 7)

<400> 295

gccagagggg gatatgctgc tagtagtgct tattatctcc cgtactactt tgacttg 57

<210> 296

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 346C6-xi (таблица 7)

<400> 296

cagagtgttt ataataataa caac 24

<210> 297

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 346C6-xi (таблица 7)

<400> 297

ctggcatcc 9

<210> 298

<211> 36

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 346C6-xi (таблица 7)

<400> 298

ctaggtggtt gtgatgatga tgctgatact tttgct 36

<210> 299

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 тяжелой цепи 346C6-zu (таблица 7)

<400> 299

ggcttctccc tgtcctccta cgct 24

<210> 300

<211> 21

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 тяжелой цепи 346C6-zu (таблица 7)

<400> 300

atctctaccg gcggaattac c 21

<210> 301

<211> 57

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 тяжелой цепи 346C6-zu (таблица 7)

<400> 301

gctagaggcg gctacgccgc cagctccgct tactacctgc cctactactt cgacctg 57

<210> 302

<211> 24

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 легкой цепи 346C6-zu (таблица 7)

<400> 302

cagtccgtgt ataacaacaa caac 24

<210> 303

<211> 9

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 легкой цепи 346C6-zu (таблица 7)

<400> 303

ctggcctcc 9

<210> 304

<211> 36

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 легкой цепи 346C6-zu (таблица 7)

<400> 304

ctgggcggct gcgacgacga cgccgatacc tttgct 36

<210> 305

<211> 449

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь MORAb-009 (таблица 8)

<400> 305

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Glu Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Thr Met Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Leu Ile Thr Pro Tyr Asn Gly Ala Ser Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Arg Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Asp Leu Leu Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Gly Tyr Asp Gly Arg Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Ser Gly

100 105 110

Thr Pro Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

115 120 125

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

130 135 140

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

145 150 155 160

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

165 170 175

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

180 185 190

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

195 200 205

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

210 215 220

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

225 230 235 240

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

245 250 255

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

260 265 270

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

275 280 285

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

290 295 300

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

305 310 315 320

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

325 330 335

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

340 345 350

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

355 360 365

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

370 375 380

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

385 390 395 400

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

405 410 415

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

420 425 430

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

435 440 445

Lys

<210> 306

<211> 213

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь MORAb-009 (таблица 8)

<400> 306

Asp Ile Glu Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Ala Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Thr Ser Pro Lys Arg Trp Ile Tyr

35 40 45

Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Gly Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Asn Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Val Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Asp Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Lys His Pro Leu Thr

85 90 95

Phe Gly Ser Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro

100 105 110

Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr

115 120 125

Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys

130 135 140

Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu

145 150 155 160

Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser

165 170 175

Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala

180 185 190

Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe

195 200 205

Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 307

<211> 451

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь трастузумаба (таблица 8)

<400> 307

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr

20 25 30

Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Pro Lys Ser Cys

210 215 220

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

225 230 235 240

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 250 255

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

260 265 270

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

275 280 285

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

290 295 300

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

305 310 315 320

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

325 330 335

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

340 345 350

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

355 360 365

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

370 375 380

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

385 390 395 400

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

405 410 415

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

420 425 430

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

435 440 445

Pro Gly Lys

450

<210> 308

<211> 214

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь трастузумаба (таблица 8)

<400> 308

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala

20 25 30

Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ser Ala Ser Phe Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln His Tyr Thr Thr Pro Pro

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 309

<211> 453

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 33011-xi (таблица 8)

<400> 309

Gln Ser Val Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro

1 5 10 15

Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Ile Ser Leu Ser Ser Asp Ala

20 25 30

Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Gly

35 40 45

Ile Ile Asn Gly Gly Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly

50 55 60

Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile Thr

65 70 75 80

Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Gly Ile

85 90 95

Gln His Gly Gly Gly Asn Ser Asp Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Leu

100 105 110

Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly

115 120 125

Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly

130 135 140

Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val

145 150 155 160

Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe

165 170 175

Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val

180 185 190

Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val

195 200 205

Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys

210 215 220

Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu

225 230 235 240

Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr

245 250 255

Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

260 265 270

Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val

275 280 285

Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser

290 295 300

Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu

305 310 315 320

Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala

325 330 335

Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro

340 345 350

Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln

355 360 365

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala

370 375 380

Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr

385 390 395 400

Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu

405 410 415

Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser

420 425 430

Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser

435 440 445

Leu Ser Pro Gly Lys

450

<210> 310

<211> 219

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 33011-xi (таблица 8)

<400> 310

Glu Val Leu Met Thr Gln Thr Pro Ser Ser Val Ser Ala Ala Val Gly

1 5 10 15

Asp Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Val

20 25 30

Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Leu Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Arg Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu Glu Cys

65 70 75 80

Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Thr Asn Tyr Gly Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Asn Tyr Gly Phe Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 311

<211> 456

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 33011-zu (таблица 8)

<400> 311

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Ile Ser Leu Ser Ser Asp

20 25 30

Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile

35 40 45

Gly Ile Ile Asn Gly Gly Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg His Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Gly Ile Gln His Gly Gly Gly Asn Ser Asp Tyr Tyr Tyr Tyr Gly

100 105 110

Met Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser

115 120 125

Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr

130 135 140

Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro

145 150 155 160

Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val

165 170 175

His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser

180 185 190

Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile

195 200 205

Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val

210 215 220

Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala

225 230 235 240

Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro

245 250 255

Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val

260 265 270

Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val

275 280 285

Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln

290 295 300

Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln

305 310 315 320

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala

325 330 335

Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro

340 345 350

Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr

355 360 365

Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser

370 375 380

Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr

385 390 395 400

Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr

405 410 415

Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe

420 425 430

Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys

435 440 445

Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

450 455

<210> 312

<211> 219

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 33011-zu (таблица 8)

<400> 312

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Val

20 25 30

Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Leu Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Cys

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Thr Asn Tyr Gly Thr Ser Ser

85 90 95

Ser Asn Tyr Gly Phe Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 313

<211> 448

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 111B10-xi (таблица 8)

<400> 313

Gln Ser Val Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro

1 5 10 15

Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Asn Asn Tyr Ala

20 25 30

Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly

35 40 45

Ser Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ala Phe Tyr Ala Asn Trp Ala Lys Gly

50 55 60

Arg Phe Thr Ile Ser Arg Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Met Thr

65 70 75 80

Ser Leu Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Gly Arg Asn Gly

85 90 95

Gly Gly Ser Tyr Ile Phe Tyr Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro

115 120 125

Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly

130 135 140

Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn

145 150 155 160

Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln

165 170 175

Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser

180 185 190

Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser

195 200 205

Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr

210 215 220

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

225 230 235 240

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

245 250 255

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

260 265 270

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

275 280 285

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

290 295 300

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

325 330 335

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

340 345 350

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

355 360 365

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

370 375 380

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp

385 390 395 400

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser

405 410 415

Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

420 425 430

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 314

<211> 215

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 111B10-xi (таблица 8)

<400> 314

Ala Phe Glu Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Val Glu Ala Ala Val Gly

1 5 10 15

Gly Thr Ile Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ser Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Ser Ser Arg Phe Lys Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu Glu Cys

65 70 75 80

Ala Asp Ala Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Ser Tyr Tyr Asp Ile Gly Thr

85 90 95

Ser Thr Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg Thr Val Ala

100 105 110

Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser

115 120 125

Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu

130 135 140

Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser

145 150 155 160

Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu

165 170 175

Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val

180 185 190

Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys

195 200 205

Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 315

<211> 451

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 111B10-zu (таблица 8)

<400> 315

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Asn Asn Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Ser Ile Ser Thr Gly Gly Leu Ala Phe Tyr Ala Asn Trp Ala Lys

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Gly Gly Gly Ser Tyr Ile Phe Tyr Tyr Phe Asp Leu Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser

115 120 125

Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala

130 135 140

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val

145 150 155 160

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala

165 170 175

Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val

180 185 190

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His

195 200 205

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys

210 215 220

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

225 230 235 240

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 250 255

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

260 265 270

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

275 280 285

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

290 295 300

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

305 310 315 320

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

325 330 335

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

340 345 350

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

355 360 365

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

370 375 380

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

385 390 395 400

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

405 410 415

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

420 425 430

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

435 440 445

Pro Gly Lys

450

<210> 316

<211> 215

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 111B10-zu (таблица 8)

<400> 316

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr

20 25 30

Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Ser Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Cys

65 70 75 80

Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Tyr Asp Ile Gly Thr

85 90 95

Ser Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala

100 105 110

Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser

115 120 125

Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu

130 135 140

Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser

145 150 155 160

Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu

165 170 175

Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val

180 185 190

Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys

195 200 205

Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 317

<211> 444

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 201C15-xi (таблица 8)

<400> 317

Gln Ser Val Lys Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro

1 5 10 15

Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Ile Asp Leu Ser Ser Tyr Ala

20 25 30

Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Gly

35 40 45

Thr Ile Asn Ile Gly Gly Arg Val Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly

50 55 60

Arg Phe Thr Ile Ser Arg Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ala Pro

65 70 75 80

Ser Leu Thr Ala Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Tyr Tyr

85 90 95

Asn Gly Gly Ser Tyr Asp Ile Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val

100 105 110

Ser Leu Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser

115 120 125

Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys

130 135 140

Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu

145 150 155 160

Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu

165 170 175

Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr

180 185 190

Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val

195 200 205

Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro

210 215 220

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe

225 230 235 240

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val

245 250 255

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe

260 265 270

Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro

275 280 285

Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr

290 295 300

Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val

305 310 315 320

Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala

325 330 335

Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg

340 345 350

Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

355 360 365

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro

370 375 380

Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser

385 390 395 400

Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln

405 410 415

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His

420 425 430

Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440

<210> 318

<211> 217

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 201C15-xi (таблица 8)

<400> 318

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Ala Ser Ala Ser Glu Pro Val Gly

1 5 10 15

Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Glu Ser Ile Tyr Arg Val

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Thr Ser Thr Leu Ala Ser Gly Ala Pro Ser Arg Phe Lys Gly

50 55 60

Ser Gly Tyr Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val Gln Cys

65 70 75 80

Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gly Gly Tyr Tyr Ala Asp Ser

85 90 95

Tyr Gly Ile Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg Thr

100 105 110

Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu

115 120 125

Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro

130 135 140

Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly

145 150 155 160

Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr

165 170 175

Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His

180 185 190

Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val

195 200 205

Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 319

<211> 447

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 201C15-zu (таблица 8)

<400> 319

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ser Ala Ser Gly Ile Asp Leu Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Met Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile

35 40 45

Gly Thr Ile Asn Ile Gly Gly Arg Val Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Tyr Tyr Asn Gly Gly Ser Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu

115 120 125

Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys

130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser

145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser

165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser

180 185 190

Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn

195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His

210 215 220

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val

225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu

260 265 270

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile

325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

340 345 350

Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn

370 375 380

Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser

385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

405 410 415

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu

420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 320

<211> 217

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 201C15-zu (таблица 8)

<400> 320

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Glu Ser Ile Tyr Arg Val

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Asp Thr Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Cys

65 70 75 80

Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gly Gly Tyr Tyr Ala Asp Ser

85 90 95

Tyr Gly Ile Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr

100 105 110

Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu

115 120 125

Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro

130 135 140

Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly

145 150 155 160

Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr

165 170 175

Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His

180 185 190

Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val

195 200 205

Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 321

<211> 452

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 346C6-xi (таблица 8)

<400> 321

Gln Ser Val Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Lys Pro Asp Glu Ser

1 5 10 15

Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr Ala

20 25 30

Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Glu Gly Leu Glu Trp Ile Gly

35 40 45

Thr Ile Ser Thr Gly Gly Ile Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly

50 55 60

Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile Thr

65 70 75 80

Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Gly Gly

85 90 95

Tyr Ala Ala Ser Ser Ala Tyr Tyr Leu Pro Tyr Tyr Phe Asp Leu Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro

115 120 125

Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr

130 135 140

Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr

145 150 155 160

Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro

165 170 175

Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr

180 185 190

Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn

195 200 205

His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser

210 215 220

Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

225 230 235 240

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

245 250 255

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

260 265 270

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

275 280 285

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

290 295 300

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

305 310 315 320

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

325 330 335

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

340 345 350

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

355 360 365

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

370 375 380

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

385 390 395 400

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

405 410 415

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

420 425 430

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

435 440 445

Ser Pro Gly Lys

450

<210> 322

<211> 219

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 346C6-xi (таблица 8)

<400> 322

Ala Ala Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Pro Val Ser Ala Ala Val Gly

1 5 10 15

Gly Thr Val Thr Ile Ser Cys Gln Ser Ser Gln Ser Val Tyr Asn Asn

20 25 30

Asn Asn Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu

35 40 45

Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val

65 70 75 80

Gln Cys Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Gly Cys Asp Asp

85 90 95

Asp Ala Asp Thr Phe Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 323

<211> 455

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 346C6-zu (таблица 8)

<400> 323

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Thr Ile Ser Thr Gly Gly Ile Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys

50 55 60

Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu

65 70 75 80

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Gly Gly Tyr Ala Ala Ser Ser Ala Tyr Tyr Leu Pro Tyr Tyr Phe

100 105 110

Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr

115 120 125

Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser

130 135 140

Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu

145 150 155 160

Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His

165 170 175

Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser

180 185 190

Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys

195 200 205

Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu

210 215 220

Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro

225 230 235 240

Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys

245 250 255

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val

260 265 270

Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp

275 280 285

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr

290 295 300

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp

305 310 315 320

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu

325 330 335

Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

340 345 350

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys

355 360 365

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp

370 375 380

Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

385 390 395 400

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

405 410 415

Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser

420 425 430

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

435 440 445

Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

450 455

<210> 324

<211> 219

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 346C6-zu (таблица 8)

<400> 324

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser Gln Ser Val Tyr Asn Asn

20 25 30

Asn Asn Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu

35 40 45

Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu

65 70 75 80

Gln Cys Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Gly Cys Asp Asp

85 90 95

Asp Ala Asp Thr Phe Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105 110

Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu

115 120 125

Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe

130 135 140

Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln

145 150 155 160

Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser

165 170 175

Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu

180 185 190

Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser

195 200 205

Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210 215

<210> 325

<211> 1350

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь MORAb-003 (таблица 9)

<400> 325

gaggtccaac tggtggagag cggtggaggt gttgtgcaac ctggccggtc cctgcgcctg 60

tcctgctccg catctggctt caccttcagc ggctatgggt tgtcttgggt gagacaggca 120

cctggaaaag gtcttgagtg ggttgcaatg attagtagtg gtggtagtta tacctactat 180

gcagacagtg tgaagggtag atttgcaata tcgcgagaca acgccaagaa cacattgttc 240

ctgcaaatgg acagcctgag acccgaagac accggggtct atttttgtgc aagacatggg 300

gacgatcccg cctggttcgc ttattggggc caagggaccc cggtcaccgt ctcctcagcc 360

tccaccaagg gcccatcggt cttccccctg gcaccctcct ccaagagcac ctctgggggc 420

acagcggccc tgggctgcct ggtcaaggac tacttccccg aaccggtgac ggtgtcgtgg 480

aactcaggcg ccctgaccag cggcgtgcac accttcccgg ctgtcctaca gtcctcagga 540

ctctactccc tcagcagcgt ggtgaccgtg ccctccagca gcttgggcac ccagacctac 600

atctgcaacg tgaatcacaa gcccagcaac accaaggtgg acaagaaagt tgagcccaaa 660

tcttgtgaca aaactcacac atgcccaccg tgcccagcac ctgaactcct ggggggaccg 720

tcagtcttcc tcttcccccc aaaacccaag gacaccctca tgatctcccg gacccctgag 780

gtcacatgcg tggtggtgga cgtgagccac gaagaccctg aggtcaagtt caactggtac 840

gtggacggcg tggaggtgca taatgccaag acaaagccgc gggaggagca gtacaacagc 900

acgtaccgtg tggtcagcgt cctcaccgtc ctgcaccagg actggctgaa tggcaaggag 960

tacaagtgca aggtctccaa caaagccctc ccagccccca tcgagaaaac catctccaaa 1020

gccaaagggc agccccgaga accacaggtg tacaccctgc ccccatcccg ggatgagctg 1080

accaagaacc aggtcagcct gacctgcctg gtcaaaggct tctatcccag cgacatcgcc 1140

gtggagtggg agagcaatgg gcagccggag aacaactaca agaccacgcc tcccgtgctg 1200

gactccgacg gctccttctt cttatattca aagctcaccg tggacaagag caggtggcag 1260

caggggaacg tcttctcatg ctccgtgatg catgaggctc tgcacaacca ctacacgcag 1320

aagagcctct ccctgtctcc cgggaaatga 1350

<210> 326

<211> 654

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь MORAb-003 (таблица 9)

<400> 326

gacatccagc tgacccagag cccaagcagc ctgagcgcca gcgtgggtga cagagtgacc 60

atcacctgta gtgtcagctc aagtataagt tccaacaact tgcactggta ccagcagaag 120

ccaggtaagg ctccaaagcc atggatctac ggcacatcca acctggcttc tggtgtgcca 180

agcagattca gcggtagcgg tagcggtacc gactacacct tcaccatcag cagcctccag 240

ccagaggaca tcgccaccta ctactgccaa cagtggagta gttacccgta catgtacacg 300

ttcggccaag ggaccaaggt ggaaatcaaa cgaactgtgg ctgcaccatc tgtcttcatc 360

ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat 420

aacttctatc ccagagaggc caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt 480

aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc 540

accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc 600

catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca ggggagagtg ttaa 654

<210> 327

<211> 1350

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь MORAb-009 (таблица 9)

<400> 327

caggtacaac tgcagcagtc tgggcctgag ctggagaagc ctggcgcttc agtgaagata 60

tcctgcaagg cttctggtta ctcattcact ggctacacca tgaactgggt gaagcagagc 120

catggaaaga gccttgagtg gattggactt attactcctt acaatggtgc ttctagctac 180

aaccagaagt tcaggggcaa ggccacatta actgtagaca agtcatccag cacagcctac 240

atggacctcc tcagtctgac atctgaagac tctgcagtct atttctgtgc aagggggggt 300

tacgacggga ggggttttga ctactgggga tccgggaccc cggtcaccgt ctcctcagcc 360

tccaccaagg gcccatcggt cttccccctg gcaccctcct ccaagagcac ctctgggggc 420

acagcggccc tgggctgcct ggtcaaggac tacttccccg aaccggtgac ggtgtcgtgg 480

aactcaggcg ccctgaccag cggcgtgcac accttcccgg ctgtcctaca gtcctcagga 540

ctctactccc tcagcagcgt ggtgaccgtg ccctccagca gcttgggcac ccagacctac 600

atctgcaacg tgaatcacaa gcccagcaac accaaggtgg acaagaaagt tgagcccaaa 660

tcttgtgaca aaactcacac atgcccaccg tgcccagcac ctgaactcct ggggggaccg 720

tcagtcttcc tcttcccccc aaaacccaag gacaccctca tgatctcccg gacccctgag 780

gtcacatgcg tggtggtgga cgtgagccac gaagaccctg aggtcaagtt caactggtac 840

gtggacggcg tggaggtgca taatgccaag acaaagccgc gggaggagca gtacaacagc 900

acgtaccgtg tggtcagcgt cctcaccgtc ctgcaccagg actggctgaa tggcaaggag 960

tacaagtgca aggtctccaa caaagccctc ccagccccca tcgagaaaac catctccaaa 1020

gccaaagggc agccccgaga accacaggtg tacaccctgc ccccatcccg ggatgagctg 1080

accaagaacc aggtcagcct gacctgcctg gtcaaaggct tctatcccag cgacatcgcc 1140

gtggagtggg agagcaatgg gcagccggag aacaactaca agaccacgcc tcccgtgctg 1200

gactccgacg gctccttctt cctctacagc aagctcaccg tggacaagag caggtggcag 1260

caggggaacg tcttctcatg ctccgtgatg catgaggctc tgcacaacca ctacacgcag 1320

aagagcctct ccctgtctcc cgggaaatga 1350

<210> 328

<211> 642

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь MORAb-009 (таблица 9)

<400> 328

gacatcgagc tcactcagtc tccagcaatc atgtctgcat ctccagggga gaaggtcacc 60

atgacctgca gtgccagctc aagtgtaagt tacatgcact ggtaccagca gaagtcaggc 120

acctccccca aaagatggat ttatgacaca tccaaactgg cttctggagt cccaggtcgc 180

ttcagtggca gtgggtctgg aaactcttac tctctcacaa tcagcagcgt ggaggctgaa 240

gatgatgcaa cttattactg ccagcagtgg agtaagcacc ctctcacgtt cggatccggg 300

accaaggtgg aaatcaaacg aactgtggct gcaccatctg tcttcatctt cccgccatct 360

gatgagcagt tgaaatctgg aactgcctct gttgtgtgcc tgctgaataa cttctatccc 420

agagaggcca aagtacagtg gaaggtggat aacgccctcc aatcgggtaa ctcccaggag 480

agtgtcacag agcaggacag caaggacagc acctacagcc tcagcagcac cctgacgctg 540

agcaaagcag actacgagaa acacaaagtc tacgcctgcg aagtcaccca tcagggcctg 600

agctcgcccg tcacaaagag cttcaacagg ggagagtgtt aa 642

<210> 329

<211> 1362

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 33011-xi (таблица 9)

<400> 329

cagtcggtgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60

tgcaccgtct ctggaatctc cctcagtagc gatgcaataa gctgggtccg ccaggctcca 120

gggaaggggc tcgaatacat cggaatcatt aatggtggtg gtaacacata ctacgcgagc 180

tgggcgaaag gccgattcac catctccaaa acctcgacca cggtggatct gaaaatcacc 240

agtccgacaa ccgaggacac ggccacctat ttctgtgcca gaggcattca acatggtggt 300

ggtaatagtg attattatta ttacggcatg gacctctggg gcccaggcac cctggtcact 360

gtctcttcag catccaccaa gggcccatcg gtcttccccc tggcaccctc ctccaagagc 420

acctctgggg gcacagcggc cctgggctgc ctggtcaagg actacttccc cgaaccggtg 480

acggtgtcgt ggaactcagg cgccctgacc agcggcgtgc acaccttccc ggctgtccta 540

cagtcctcag gactctactc cctcagcagc gtggtgaccg tgccctccag cagcttgggc 600

acccagacct acatctgcaa cgtgaatcac aagcccagca acaccaaggt ggacaagaaa 660

gttgagccca aatcttgtga caaaactcac acatgcccac cgtgcccagc acctgaactc 720

ctggggggac cgtcagtctt cctcttcccc ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc 780

cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg gacgtgagcc acgaagaccc tgaggtcaag 840

ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag 900

cagtacaaca gcacgtaccg tgtggtcagc gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg 960

aatggcaagg agtacaagtg caaggtctcc aacaaagccc tcccagcccc catcgagaaa 1020

accatctcca aagccaaagg gcagccccga gaaccacagg tgtacaccct gcccccatcc 1080

cgggatgagc tgaccaagaa ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcaaagg cttctatccc 1140

agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat gggcagccgg agaacaacta caagaccacg 1200

cctcccgtgc tggactccga cggctccttc ttcttatatt caaagctcac cgtggacaag 1260

agcaggtggc agcaggggaa cgtcttctca tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac 1320

cactacacgc agaagagcct ctccctgtct cccgggaaat ga 1362

<210> 330

<211> 660

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 33011-xi (таблица 9)

<400> 330

gaagtgttga tgacccagac tccatcctcc gtgtctgcag ctgtgggaga cacagtcacc 60

atcaagtgcc aggccagtca gagcattagt agtgtcttgt cctggtatca gcagaaacca 120

gggcagcctc ccaagctcct gatctatctg gcatccactc tggcatctgg ggtcccatcg 180

cggttcagcg gcagtagatc tgggacagag ttcactctca ccatcagcga cctggagtgt 240

gacgatgctg ccacttacta ctgtcaaacc aattatggta ctagtagtag taattatggt 300

tttgctttcg gcggagggac cgaggtggtc gtcaaacgaa ctgtggctgc accatctgtc 360

ttcatcttcc cgccatctga tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg 420

ctgaataact tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 480

tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac ctacagcctc 540

agcagcaccc tgacgctgag caaagcagac tacgagaaac acaaagtcta cgcctgcgaa 600

gtcacccatc agggcctgag ctcgcccgtc acaaagagct tcaacagggg agagtgttga 660

<210> 331

<211> 1371

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 33011-zu (таблица 9)

<400> 331

gaagtccaac tggtggaaag cgggggagga ctggtgcagc cgggcggatc cctccggctg 60

tcatgtgctg catcgggaat ttccctctcc tccgacgcga ttagctgggt cagacaggcc 120

cccggaaagg ggctggagta catcggtatc atcaacggcg gcggaaacac ctactacgcc 180

tcctgggcca agggccgctt caccatctcg cggcataatt ccaagaacac tctgtacttg 240

caaatgaact ccctgagggc cgaggacacc gccgtgtact actgcgcgcg cggcatccag 300

cacggtggtg gaaacagcga ctactactac tatgggatgg atctgtgggg ccagggaact 360

cttgtgaccg tgtcgtcagc atccaccaag ggcccatcgg tcttccccct ggcaccctcc 420

tccaagagca cctctggggg cacagcggcc ctgggctgcc tggtcaagga ctacttcccc 480

gaaccggtga cggtgtcgtg gaactcaggc gccctgacca gcggcgtgca caccttcccg 540

gctgtcctac agtcctcagg actctactcc ctcagcagcg tggtgaccgt gccctccagc 600

agcttgggca cccagaccta catctgcaac gtgaatcaca agcccagcaa caccaaggtg 660

gacaagaaag ttgagcccaa atcttgtgac aaaactcaca catgcccacc gtgcccagca 720

cctgaactcc tggggggacc gtcagtcttc ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc 780

atgatctccc ggacccctga ggtcacatgc gtggtggtgg acgtgagcca cgaagaccct 840

gaggtcaagt tcaactggta cgtggacggc gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg 900

cgggaggagc agtacaacag cacgtaccgt gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag 960

gactggctga atggcaagga gtacaagtgc aaggtctcca acaaagccct cccagccccc 1020

atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg 1080

cccccatccc gggatgagct gaccaagaac caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc 1140

ttctatccca gcgacatcgc cgtggagtgg gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac 1200

aagaccacgc ctcccgtgct ggactccgac ggctccttct tcttatattc aaagctcacc 1260

gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct 1320

ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc tccctgtctc ccgggaaatg a 1371

<210> 332

<211> 660

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 33011-zu (таблица 9)

<400> 332

gacattcaga tgacccagtc cccaagctcg ctgtccgcct ccgtgggcga ccgcgtgacc 60

atcacgtgcc aggcgtccca gtcaattagc agcgtgctct cctggtacca acagaagccg 120

gggaaagcac ccaagctgct gatctacttg gcctccactc tggcctcggg agtgccttca 180

cggttctccg gatcgggatc tggtactgat ttcaccctca ccatctcgag ccttcagtgc 240

gaggacatcg ctacttacta ttgtcaaacc aactacggaa cctccagctc caactacggc 300

tttgccttcg gtggcgggac caaggtcgaa atcaaacgaa ctgtggctgc accatctgtc 360

ttcatcttcc cgccatctga tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg 420

ctgaataact tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 480

tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac ctacagcctc 540

agcagcaccc tgacgctgag caaagcagac tacgagaaac acaaagtcta cgcctgcgaa 600

gtcacccatc agggcctgag ctcgcccgtc acaaagagct tcaacagggg agagtgttga 660

<210> 333

<211> 1347

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 111B10-xi (таблица 9)

<400> 333

cagtcggtgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60

tgcacagtct ctggattctc cctcaataac tatgcaatga gctgggtccg ccaggctcca 120

gggaaggggc tggaatggat cggatccatt agtactggtg gtctcgcatt ctacgcgaac 180

tgggcaaaag gccgattcac catctccaga acctcgacca cggtggatct gaaaatgacc 240

agtctgacaa ccgaggacac ggccacctat ttctgtggca gaaatggtgg tggtagttat 300

attttctatt attttgactt gtggggccaa ggcaccctcg tcactgtctc ttcagcatcc 360

accaagggcc catcggtctt ccccctggca ccctcctcca agagcacctc tgggggcaca 420

gcggccctgg gctgcctggt caaggactac ttccccgaac cggtgacggt gtcgtggaac 480

tcaggcgccc tgaccagcgg cgtgcacacc ttcccggctg tcctacagtc ctcaggactc 540

tactccctca gcagcgtggt gaccgtgccc tccagcagct tgggcaccca gacctacatc 600

tgcaacgtga atcacaagcc cagcaacacc aaggtggaca agaaagttga gcccaaatct 660

tgtgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg gggaccgtca 720

gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc 780

acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg 840

gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg 900

taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac 960

aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 1020

aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccggga tgagctgacc 1080

aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 1140

gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac 1200

tccgacggct ccttcttctt atattcaaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag 1260

gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 1320

agcctctccc tgtctcccgg gaaatga 1347

<210> 334

<211> 648

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 111B10-xi (таблица 9)

<400> 334

gcattcgaat tgacccagac tccatcctcc gtggaggcag ctgtgggagg cacaatcacc 60

atcaagtgcc aggccagtca gagcattagt agttacttat cctggtatca gcagaaacca 120

gggcagcctc ccaagctcct gatctattct gcatccactc tggcatctgg ggtctcatcg 180

cggttcaaag gcagtggatc tgggacagag tacactctca ccatcagcga cctggagtgt 240

gccgatgctg ccacttactt ctgtcaaagc tattatgata ttggtactag tactttcggc 300

ggagggaccg aggtggtcgt caaacgaact gtggctgcac catctgtctt catcttcccg 360

ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc 420

tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc 480

caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg 540

acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag 600

ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttga 648

<210> 335

<211> 1356

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 111B10-zu (таблица 9)

<400> 335

gaagtgcagc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagc ctggcggatc tctgagactg 60

tcttgtgccg cctccggctt ctccctgaac aactacgcca tgtcctgggt gcgacaggcc 120

cctggcaaag gcctggaatg gatcggctcc atcagcacag gcggcctggc cttctacgcc 180

aattgggcca agggccggtt caccatcagc cgggacaact ccaagaacac cctgtacctc 240

cagatgaact ccctgcgggc cgaggacacc gccgtgtact actgtgccag aaacggcgga 300

ggctcctaca tcttctacta cttcgacctg tggggccagg gcaccctcgt gacagtgtca 360

tctgcatcca ccaagggccc atcggtcttc cccctggcac cctcctccaa gagcacctct 420

gggggcacag cggccctggg ctgcctggtc aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg 480

tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc 540

tcaggactct actccctcag cagcgtggtg accgtgccct ccagcagctt gggcacccag 600

acctacatct gcaacgtgaa tcacaagccc agcaacacca aggtggacaa gaaagttgag 660

cccaaatctt gtgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagcacctga actcctgggg 720

ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc 780

cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac 840

tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac 900

aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc 960

aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc 1020

tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat 1080

gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac 1140

atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc 1200

gtgctggact ccgacggctc cttcttctta tattcaaagc tcaccgtgga caagagcagg 1260

tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac 1320

acgcagaaga gcctctccct gtctcccggg aaatga 1356

<210> 336

<211> 648

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 111B10-zu (таблица 9)

<400> 336

gatattcaga tgacccagtc cccctccagc ctgtccgctt ctgtgggcga cagagtgacc 60

atcacctgtc aggcctccca gtccatctcc tcctacctgt cctggtatca gcagaagccc 120

ggcaaggccc ccaagctgct gatctactct gcctccacac tggcctccgg cgtgccctct 180

agattctccg gctctggctc tggcaccgac tttaccctga ccatcagctc cctccagtgc 240

gaggatgccg ccacctacta ctgccagtcc tactacgaca tcggcacctc caccttcggc 300

ggaggcacca aggtggaaat caaacgaact gtggctgcac catctgtctt catcttcccg 360

ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc 420

tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc 480

caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg 540

acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag 600

ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttga 648

<210> 337

<211> 1335

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 201C15-xi (таблица 9)

<400> 337

cagtcagtga aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60

tgcacagtct ctggaatcga cctcagtagc tatgcaatgg gctggttccg ccaggctcca 120

gggaaggggc tggaatacat cggaaccatt aatattggtg gtcgcgtata ttacgcgagc 180

tgggcaaaag gccgattcac catctccaga acctcgacca cggtggatct gaaagcgccc 240

agtctgacag ccgaggacac ggccacctat ttctgtgcca gatattataa tggtggtagt 300

tatgacatct ggggcccagg caccctggtc accgtctctt tagcatccac caagggccca 360

tcggtcttcc ccctggcacc ctcctccaag agcacctctg ggggcacagc ggccctgggc 420

tgcctggtca aggactactt ccccgaaccg gtgacggtgt cgtggaactc aggcgccctg 480

accagcggcg tgcacacctt cccggctgtc ctacagtcct caggactcta ctccctcagc 540

agcgtggtga ccgtgccctc cagcagcttg ggcacccaga cctacatctg caacgtgaat 600

cacaagccca gcaacaccaa ggtggacaag aaagttgagc ccaaatcttg tgacaaaact 660

cacacatgcc caccgtgccc agcacctgaa ctcctggggg gaccgtcagt cttcctcttc 720

cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc tcccggaccc ctgaggtcac atgcgtggtg 780

gtggacgtga gccacgaaga ccctgaggtc aagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag 840

gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag gagcagtaca acagcacgta ccgtgtggtc 900

agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg ctgaatggca aggagtacaa gtgcaaggtc 960

tccaacaaag ccctcccagc ccccatcgag aaaaccatct ccaaagccaa agggcagccc 1020

cgagaaccac aggtgtacac cctgccccca tcccgggatg agctgaccaa gaaccaggtc 1080

agcctgacct gcctggtcaa aggcttctat cccagcgaca tcgccgtgga gtgggagagc 1140

aatgggcagc cggagaacaa ctacaagacc acgcctcccg tgctggactc cgacggctcc 1200

ttcttcttat attcaaagct caccgtggac aagagcaggt ggcagcaggg gaacgtcttc 1260

tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac aaccactaca cgcagaagag cctctccctg 1320

tctcccggga aatga 1335

<210> 338

<211> 654

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 201C15-xi (таблица 9)

<400> 338

gatgttgtga tgacccagac tccagcctcc gcgtctgaac ctgtgggagg cacagtcacc 60

atcaagtgcc aggccagtga gagcatttat cgcgtattgg cctggtatca gcagaaacca 120

gggcagcctc ccaagctcct gatctatgat acatccactc tggcatctgg ggccccatcg 180

cggttcaaag gcagtggata tgggacagag ttcactctca ccatcagcgg cgtgcagtgt 240

gaagatgctg ccacttacta ctgtcaaggc ggttattatg ctgatagtta tggtattgct 300

ttcggcggag ggaccgaggt ggtggtcaaa cgaactgtgg ctgcaccatc tgtcttcatc 360

ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat 420

aacttctatc ccagagaggc caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt 480

aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc 540

accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc 600

catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca ggggagagtg ttga 654

<210> 339

<211> 1344

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 201C15-zu (таблица 9)

<400> 339

caggtgcagc tggtggaatc tggcggagga ctggtgcagc ctggcggctc tctgagactg 60

tcctgttccg cctccggaat cgacctgtcc tcctacgcta tgggctgggt gcgacaggct 120

cctggcaagg gcctggagta catcggcacc atcaacatcg gcggcagagt gtactacgcc 180

tcctgggcca agggccggtt caccatctcc agagacaact ccaagaacac cctgtacctc 240

cagatgaact ccctgcgggc cgaggacacc gccgtgtact actgcgcccg gtactacaac 300

ggcggctcct acgatatctg gggccagggc acactcgtga ccgtgtcctc tgcatccacc 360

aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420

gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480

ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540

tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600

aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga aagttgagcc caaatcttgt 660

gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gcacctgaac tcctgggggg accgtcagtc 720

ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca 780

tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac 840

ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac 900

cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag 960

tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 1020

gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgggatga gctgaccaag 1080

aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag 1140

tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 1200

gacggctcct tcttcttata ttcaaagctc accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg 1260

aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc 1320

ctctccctgt ctcccgggaa atga 1344

<210> 340

<211> 654

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 201C15-zu (таблица 9)

<400> 340

gatatccaga tgacccagtc cccctccacc ctgtctgcct ctgtgggcga cagagtgacc 60

atcacctgtc aggcctccga gtccatctac cgggtgctgg cctggtatca gcagaagcct 120

ggcaaggccc ccaagctgct gatctacgac accagcacac tggcctccgg cgtgccctct 180

agattctccg gctctggctc tggcaccgag tttaccctga ccatctccag cctccagtgc 240

gacgacgccg ccacctacta ttgtcagggc ggctactacg ccgactccta cggaatcgct 300

ttcggcggag gcaccaaggt ggaaatcaaa cgaactgtgg ctgcaccatc tgtcttcatc 360

ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat 420

aacttctatc ccagagaggc caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt 480

aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc 540

accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc 600

catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca ggggagagtg ttga 654

<210> 341

<211> 1359

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 346C6-xi (таблица 9)

<400> 341

cagtcggtgg aggagtccgg cggtcgcctg gtaaagcctg acgaatccct gacactcacc 60

tgcacagcct ctggattctc cctcagtagt tatgcaatga tctgggtccg ccaggctcca 120

ggggaggggc tggaatggat cggaaccatt agtactggtg gtatcacata ctacgcgagc 180

tgggcgaaag gccgattcac catctccaaa acctcgacca cggtggatct gaaaatcacc 240

agtccgacaa ccgaggacac ggccacctat ttctgtgcca gagggggata tgctgctagt 300

agtgcttatt atctcccgta ctactttgac ttgtggggcc aagggaccct ggtcaccgtc 360

tcctcagcat ccaccaaggg cccatcggtc ttccccctgg caccctcctc caagagcacc 420

tctgggggca cagcggccct gggctgcctg gtcaaggact acttccccga accggtgacg 480

gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag 540

tcctcaggac tctactccct cagcagcgtg gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacc 600

cagacctaca tctgcaacgt gaatcacaag cccagcaaca ccaaggtgga caagaaagtt 660

gagcccaaat cttgtgacaa aactcacaca tgcccaccgt gcccagcacc tgaactcctg 720

gggggaccgt cagtcttcct cttcccccca aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg 780

acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc 840

aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag 900

tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat 960

ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc 1020

atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccgg 1080

gatgagctga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagc 1140

gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgcct 1200

cccgtgctgg actccgacgg ctccttcttc ttatattcaa agctcaccgt ggacaagagc 1260

aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac 1320

tacacgcaga agagcctctc cctgtctccc gggaaatga 1359

<210> 342

<211> 660

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 346C6-xi (таблица 9)

<400> 342

gcagccgtgc tgacccagac accatcaccc gtgtctgcag ctgtgggagg cacagtcacc 60

atcagttgcc agtccagtca gagtgtttat aataataaca acttagcctg gtttcagcag 120

aaacccgggc agcctcccaa gcttctgatc tatctggcat ccactctggc atctggggtc 180

ccatcacggt tcagcggcag tggatctggg acacagttca ctctcaccat cagcggcgtg 240

cagtgtgacg atgctgccac ttattactgt ctaggtggtt gtgatgatga tgctgatact 300

tttgctttcg gcggagggac tgaggtggtg gtcaaacgaa ctgtggctgc accatctgtc 360

ttcatcttcc cgccatctga tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg 420

ctgaataact tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 480

tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac ctacagcctc 540

agcagcaccc tgacgctgag caaagcagac tacgagaaac acaaagtcta cgcctgcgaa 600

gtcacccatc agggcctgag ctcgcccgtc acaaagagct tcaacagggg agagtgttga 660

<210> 343

<211> 1368

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь 346C6-zu (таблица 9)

<400> 343

gaagtgcagc tggtggaatc tggcggcgga ctggtgcagc ctggcggatc tctgagactg 60

tcttgtgccg cctccggctt ctccctgtcc tcctacgcta tgatctgggt gcgacaggcc 120

cctggcaagg gcctggaatg gatcggcacc atctctaccg gcggaattac ctactacgcc 180

tcctgggcca agggccggtt caccatctcc agagacaact ccaagaacac cctgtacctc 240

cagatgaact ccctgcgggc cgaggacacc gccgtgtact attgtgctag aggcggctac 300

gccgccagct ccgcttacta cctgccctac tacttcgacc tgtggggcca gggcaccctc 360

gtgacagtgt catctgcatc caccaagggc ccatcggtct tccccctggc accctcctcc 420

aagagcacct ctgggggcac agcggccctg ggctgcctgg tcaaggacta cttccccgaa 480

ccggtgacgg tgtcgtggaa ctcaggcgcc ctgaccagcg gcgtgcacac cttcccggct 540

gtcctacagt cctcaggact ctactccctc agcagcgtgg tgaccgtgcc ctccagcagc 600

ttgggcaccc agacctacat ctgcaacgtg aatcacaagc ccagcaacac caaggtggac 660

aagaaagttg agcccaaatc ttgtgacaaa actcacacat gcccaccgtg cccagcacct 720

gaactcctgg ggggaccgtc agtcttcctc ttccccccaa aacccaagga caccctcatg 780

atctcccgga cccctgaggt cacatgcgtg gtggtggacg tgagccacga agaccctgag 840

gtcaagttca actggtacgt ggacggcgtg gaggtgcata atgccaagac aaagccgcgg 900

gaggagcagt acaacagcac gtaccgtgtg gtcagcgtcc tcaccgtcct gcaccaggac 960

tggctgaatg gcaaggagta caagtgcaag gtctccaaca aagccctccc agcccccatc 1020

gagaaaacca tctccaaagc caaagggcag ccccgagaac cacaggtgta caccctgccc 1080

ccatcccggg atgagctgac caagaaccag gtcagcctga cctgcctggt caaaggcttc 1140

tatcccagcg acatcgccgt ggagtgggag agcaatgggc agccggagaa caactacaag 1200

accacgcctc ccgtgctgga ctccgacggc tccttcttct tatattcaaa gctcaccgtg 1260

gacaagagca ggtggcagca ggggaacgtc ttctcatgct ccgtgatgca tgaggctctg 1320

cacaaccact acacgcagaa gagcctctcc ctgtctcccg ggaaatga 1368

<210> 344

<211> 660

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Легкая цепь 346C6-zu (таблица 9)

<400> 344

gatattcaga tgacccagtc cccctccagc ctgtccgctt ctgtgggcga cagagtgacc 60

atcacctgtc agtcctccca gtccgtgtat aacaacaaca acctggcctg gtatcagcag 120

aaacccggca aggtgcccaa gctgctgatc tacctggcct ccacactggc ctctggcgtg 180

ccctctagat tctccggctc tggctctggc accgacttta ccctgaccat cagctccctc 240

cagtgcgagg atgccgccac ctactattgc ctgggcggct gcgacgacga cgccgatacc 300

tttgcttttg gcggaggcac caaggtggaa atcaaacgaa ctgtggctgc accatctgtc 360

ttcatcttcc cgccatctga tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg 420

ctgaataact tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 480

tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac ctacagcctc 540

agcagcaccc tgacgctgag caaagcagac tacgagaaac acaaagtcta cgcctgcgaa 600

gtcacccatc agggcctgag ctcgcccgtc acaaagagct tcaacagggg agagtgttga 660

<210> 345

<211> 4

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пример эпитопа 1

<400> 345

Ala His Lys Asp

1

<210> 346

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пример эпитопа 2

<400> 346

Asn Thr Ser Gln Glu Ala His Lys Asp Val Ser Tyr Leu

1 5 10

<210> 347

<211> 449

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Тяжелая цепь трастузумаба

<400> 347

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Thr

20 25 30

Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Arg Ile Tyr Pro Thr Asn Gly Tyr Thr Arg Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ser Arg Trp Gly Gly Asp Gly Phe Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val

115 120 125

Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala

130 135 140

Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser

145 150 155 160

Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val

165 170 175

Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro

180 185 190

Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys

195 200 205

Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp

210 215 220

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly

225 230 235 240

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

245 250 255

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu

260 265 270

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His

275 280 285

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg

290 295 300

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys

305 310 315 320

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu

325 330 335

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

340 345 350

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

355 360 365

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

370 375 380

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

385 390 395 400

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

405 410 415

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His

420 425 430

Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro

435 440 445

Gly

<---

Изобретение относится к способу получения конъюгата антитело-лекарственное средство, представленного Формулой (I), где Ab представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент; D представляет собой эрибулин; m представляет собой целое число 1-10; и p представляет собой целое число 1-8, причем указанный способ включает: (i) осуществление реакции соединения Формулы (1), где m в Формуле (1) представляет собой целое число от 1 до 10, с соединением Формулы (2) для получения соединения Формулы (3), (ii) ацилирование гидроксильной группы в соединении Формулы (3) с использованием ацилирующего средства, и где ацилирующее средство включает феноксигруппу или нитрофеноксигруппу, получая таким образом соединение, представленное Формулой (A), (iii) осуществление реакции эрибулина или его соли с соединением, представленным Формулой (A) для получения соединения, представленного Формулой (B), (iv) осуществление реакции соединения, представленного Формулой (B), с антителом или его антигенсвязывающим фрагментом для получения конъюгата антитело-лекарственное средство, представленного Формулой (I). Способ обеспечивает получение конъюгата антитело-лекарственное средство с высоким выходом. 2 н. и 8 з.п. ф-лы, 10 табл., 4 пр.

Формула (I):

Формула (1):

Формула (2):

Формула (3):

Формула (A):

1. Способ получения соединения, представленного Формулой (B),

где m в Формуле (B) представляет собой целое число от 1 до 10, где способ включает:

(i) осуществление реакции соединения Формулы (1):

где m в Формуле (1) представляет собой целое число от 1 до 10, с соединением Формулы (2):

с получением соединения Формулы (3):

;

(ii) ацилирование гидроксильной группы в соединении Формулы (3) с использованием ацилирующего средства, где m в Формуле (3) представляет собой целое число от 1 до 10, и где ацилирующее средство включает феноксигруппу или нитрофеноксигруппу, получая таким образом соединение, представленное Формулой (A),

где m в Формуле (A) представляет собой целое число от 1 до 10, и X в Формуле (A) представляет собой феноксигруппу или нитрофеноксигруппу; и

(iii) осуществление реакции соединения Формулы (A) с эрибулином или его солью, получая таким образом соединение, представленное Формулой (B).

2. Способ по п. 1, в котором эрибулин или его соль представляет собой эрибулина метансульфонат.

3. Способ по п. 1, в котором стадия осуществления реакции соединения Формулы (A) с эрибулином или его солью, осуществляют в присутствии основания.

4. Способ по п. 3, в котором основание включает: третичный амин, необязательно триэтиламин или N,N-диизопропилэтиламин, или азотсодержащее ароматическое соединение, необязательно пиридин или 2,6-лутидин.

5. Способ по п. 1, в котором ацилирующее средство включает: дифенилкарбонат, бис(4-нитрофенил)карбонат, бис(2-нитрофенил)карбонат, бис(3-нитрофенил)карбонат, фенилхлорформиат, 4-нитрофенилхлорформиат, 2-нитрофенилхлорформиат или 3-нитрофенилхлорформиат.

6. Способ получения конъюгата антитело-лекарственное средство, представленного Формулой (I),

где Ab представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент,

D представляет собой эрибулин,

m представляет собой целое число от 1 до 10, и

p представляет собой целое число от 1 до 8,

где способ включает:

(i) осуществление реакции соединения Формулы (1):

где m в Формуле (1) представляет собой целое число от 1 до 10, с соединением Формулы (2):

для получения соединения Формулы (3):

,

(ii) ацилирование гидроксильной группы в соединении Формулы (3) с использованием ацилирующего средства, где m в Формуле (3) представляет собой целое число от 1 до 10, и где ацилирующее средство включает феноксигруппу или нитрофеноксигруппу, получая таким образом соединение, представленное Формулой (A),

где m в Формуле (A) представляет собой целое число от 1 до 10, и X в Формуле (A) представляет собой феноксигруппу или нитрофеноксигруппу;

(iii) осуществление реакции эрибулина или его соли с соединением, представленным Формулой (A) для получения соединения, представленного Формулой (B),

где m в Формуле (B) представляет собой целое число от 1 до 10, и

(iv) осуществление реакции соединения, представленного Формулой (B), с антителом или его антигенсвязывающим фрагментом для получения конъюгата антитело-лекарственное средство, представленного Формулой (I).

7. Способ по п. 6, в котором:

(A) Ab включает антитело или антигенсвязывающий фрагмент, который связывается с фолатным рецептором альфа (FRA), где антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит:

(i) три последовательности CDR тяжелой цепи, представленные SEQ ID NO: 2 (HCDR1), SEQ ID NO: 3 (HCDR2) и SEQ ID NO: 4 (HCDR3), и три последовательности CDR легкой цепи, представленные SEQ ID NO: 7 (LCDR1), SEQ ID NO: 8 (LCDR2) и SEQ ID NO: 9 (LCDR3), которые определены согласно системе нумерации Kabat,

(ii) три последовательности CDR тяжелой цепи, представленные SEQ ID NO: 13 (HCDR1), SEQ ID NO: 14 (HCDR2) и SEQ ID NO: 15 (HCDR3), и три последовательности CDR легкой цепи, представленные SEQ ID NO: 16 (LCDR1), SEQ ID NO: 17 (LCDR2) и SEQ ID NO: 18 (LCDR3), которые определены согласно системе нумерации IMGT,

(iii) домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 1, и домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 6, или

(iv) вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 23, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 24;

(B) Ab включает антитело или антигенсвязывающий фрагмент, который связывается с рецептором-2 эпидермального фактора роста человека (HER2), где антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит:

(v) три последовательности CDR тяжелой цепи, представленные SEQ ID NO: 71 (HCDR1), SEQ ID NO: 72 (HCDR2) и SEQ ID NO: 73 (HCDR3), и три последовательности CDR легкой цепи, представленные SEQ ID NO: 74 (LCDR1), SEQ ID NO: 75 (LCDR2) и SEQ ID NO: 76 (LCDR3), которые определены согласно системе нумерации Kabat,

(vi) три последовательности CDR тяжелой цепи, представленные SEQ ID NO: 191 (HCDR1), SEQ ID NO: 192 (HCDR2) и SEQ ID NO: 193 (HCDR3), и три последовательности CDR легкой цепи, представленные SEQ ID NO: 194 (LCDR1), SEQ ID NO: 195 (LCDR2) и SEQ ID NO: 196 (LCDR3), которые определены согласно системе нумерации IMGT,

(vii) вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 27, и вариабельный домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 28, или

(viii) домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 307 или 347, и домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную под SEQ ID NO: 308; или

(C) Ab включает антитело или антигенсвязывающий фрагмент, который связывается с мезотелином, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит:

(ix) три последовательности CDR тяжелой цепи, представленные SEQ ID NO: 65 (HCDR1), SEQ ID NO: 66 (HCDR2) и SEQ ID NO: 67 (HCDR3), и три последовательности CDR легкой цепи, представленные SEQ ID NO: 68 (LCDR1), SEQ ID NO: 69 (LCDR2) и SEQ ID NO: 70 (LCDR3), которые определены согласно системе нумерации Kabat,

(x) три последовательности CDR тяжелой цепи, представленные SEQ ID NO: 185 (HCDR1), SEQ ID NO: 186 (HCDR2) и SEQ ID NO: 187 (HCDR3), и три последовательности CDR легкой цепи, представленные SEQ ID NO: 188 (LCDR1), SEQ ID NO: 189 (LCDR2) и SEQ ID NO: 190 (LCDR3), которые определены согласно системе нумерации IMGT,

(xi) вариабельный домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную SEQ ID NO: 25, и вариабельный домен легкой цепи, представленный SEQ ID NO: 26, или

(xii) домен тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную SEQ ID NO: 305, и домен легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, представленную SEQ ID NO: 306.

8. Способ по п. 6, где p равняется 3 или 4.

9. Способ по п. 6, где эрибулин или его соль представляет собой эрибулина метансульфонат.

10. Способ по п. 6, в котором ацилирующее средство включает: дифенилкарбонат, бис(4-нитрофенил)карбонат, бис(2-нитрофенил)карбонат, бис(3-нитрофенил)карбонат, фенилхлорформиат, 4-нитрофенилхлорформиат, 2-нитрофенилхлорформиат или 3-нитрофенилхлорформиат.