Способ получения производных цефалоспорина или их солей с щелочными металлами Советский патент 1983 года по МПК C07D501/06 A61K31/546 C07D501/36 

R - амино- или карбоксигруппа или карбамоил, или их солей с щелочными металлами, заключащемуся в том, что соединени формулы 1 HZ... А N I I lY п 2 3 -If л / ,„ где R имеет указанные значения, подвергают взаимодействию с кислото фopмvлы ,Rii«i . Т с-соон II ч (111) в форме син-изомера, где RI и R2 имеют указанные,,выше зн чения, приведенные для R и R2, кро ме атома водорода, или с ее реакцио носпособным производным, в раствори теле в присутствии основания и, в случае необходимости, в присутствии конденсирующего агента, при охлажде НИИ или при комнатной температуре и в случае необходимости, удаляют защитные группы, если они имеются и, в случае необходимости, превращают полученный в свободном состоянии прод т в соль щелочного металла ил целевой продукт, полученный в виде соли щелочного металла, переводят в свободную кислоту. В соединении формулы II свободны карбоксигруппы могут быть защищены, в случае необходимости, до проведения реакции. Примерами защищающих групп являются трет-бутил, бензгидрил, п-метоксибензил, п-нитробензил тритил или триалкилсилил. Затем защитные группы могут быть удалены в конце реакции, например, путем мягкого кислотного гидролиза или катал тическим гидрированием. Реакционноспособным производным соединения формулы III является, на пример, его галоидангидрид, ангидри смешанный ангидрид, азид, реакциониоспособный эфир-или соль, например образованная щелочным металлом или щелочноземельным металлом,аммиаком или органическим основанием. Реакционноспособным эфиром может быть, например, п-нитрофениловый эфир, 2, -динитрофениловый эфир, пентахлорфениловый эфир, N-оксисукцинимидный эфир или N-оксифтальимидный эфир. Соединения настоящего изобретения обладают высокой противомикроЬн эй активностью как в организме животных, так и людей не только против грамположительных и грамотрицательных бактерий, обычно восприимчивых к цефалоспоринам, например стафилококков, стрептококков, диплококков KEebsieEЕа, EscherichiacoEi, Proteus mirabihs, SaEmoneEEa, ShigeEia, Haemophi-, Eus и Neisseria, но также против сильных, производящих бета-лактамазу грамотрицательных микроорганизмов, например KfebsieZEa aerogenes 1082Е, Escherichia coPi Tern, Enterobacter cloacae P-99, индол-положительного Proteus и т.п., a также против штаммов Pseudomonas aeruginosa, которые обычно стойки по отношению к боль шинству цефалоспоринов. Поэтому эти соединения особенно пригодны для лечения инфекций, вызванных грамотрицательными бактериями, например заболеваний мочевого тракта и респираторного тракта. Активность соединений, полученных по предложенному способу, как против бактерий, обычно восприимчивых к цефалоспоринам, так и против производящих бета-лактамазу выше, чем активность цефазолина и цефуроксима. Например, соединение 3- Г(8-амино-6-тетразоло- 1,5 ЬЗпиридазинил)-тиoмeтил -7-L2(2-амино- -тиазолил)-2-метоксииминоацетамидоЗ-3 цефем-4-карбоновая кислота (син-изомер) (F СЕ 20127) приблизительно в 2 раза более активно, чем цефазолин, против стрептококков и приблизительно в 30 более активно, чем цефазолин и цефуроксим, против большинства грамотрицательных бактерий, Кроме того, соединение F СЕ 20127 приблизительно в 20-60 раз более активно, чем цефуроксим, против некоторых производителей бета-лактамазы, таких как KlebsieHa aerogenes 1082 Е, Enterobacter cloacae Р99, Escherichia coli Tern. Соединение F CE 20127 было также испытано на ряде 10 штаммов Pseudomonas aeruginosa, k штаммов Proteus vufgaris и штаммов Proteus morganii, было найдено, что оно в несколько раз

активнее, чем цефазолин и цефуроксим, .

Соединение 3 1(8-карбокси-6:-тетразоло П,5-Ь пиридазинил)-тиометилЗ-7-{J2- (2-амино- -тиазолйл)-2-метокс ининоацетамидо -3-цефем- -карбоновая кислота (син-изомер.) (Г СЕ ZOjSS) приблизительно в 5 разг активнее цефазолина против стрептококков и приблизительно в 32 активней цефазолина и в 0 раз активнее цефуроксима против большинства грамотрицательйых бактерий. Против Enterobacter aerogenes АТСС 8308, Enterobacter cloacae 1321 E, $а топеПа typht Watson и ShIgeEla Sonoei ATCC 11060 соединение F CE 20485 в раз активнее цефазолина и в . 50-100 раз активнее цефуроксима.

Кроме того, соединение F СЕ по крайней мере в 100-500 раз активнее цефазолина и цефуроксима против Proteus vulgaris Х20 и Proteus mirabiEis ATCC 9921. Кроме того, соединение ,F СЕ 20А85 показало значительную активность вне организма против Pseudomonas aeruginosa G и Bacteroides fragi is УР1 9032.

Другим-важным свойством соединения F СН 20485 является очень длительный период полураспада плазмы в организме мышей (около 90 мин) и крыс (около 100 мин) после внутривенного введения, в то время, как период полураспада плазмы при введении цефазолина составляет соответственно 16 и 20 мин. Следовательно, соединение F СЕ показало высокую активность при испытаниях в организме, например,, на мышах, заражённых микроорганизмами EscherlchJa coEi G, KEebsietEa pneumoniae ATCC 10031 , Proteus mirabitls ATCC 9921, Escherichia Tern, Haemophi2us influenzae, SaEmoheE2a typhi Watson и Proteus vutgarls X20, это соединение было в 20-200 раз более активным, чем цефазолин.

Токсичность соединений по изобретению совершенно незначительна- Например, приблизительная острая токсичность () соединений F СЁ t0127 и F СЕ 20.485 для мышей, найденная по единичному внутривенному введению возрастающих дозировок и измеренная на седьмые сутки такого лечения, была выше 2000 мг/кг. Аналогичной активностью и токсичностью

обладают и другие соединения по изобретению.

Следовательно соединения изобретения являются полезными при лечении инфекций, вызванных либо грамположительными, либо грамотрицательнымимикроорганизмами, такими как заболевания респираторного тракта, например бронхиты, бронхопневмония, плеврит; гепатобиллиарные и брюшныеЗаболевания, например холецистит, перитонит; заражения крови и сердечно-сосудистой системы,например септицемия заражения мочевого тракта, например пиелонефрит, цистит; обстетрикальная и гинекологическая инфекции, например цервицит, эндометрит; инфекции уха, горла и носа, например отит, синузит, паротит. Соединения по изобретению могут, назначаться или людям или животным в виде различных дозировок, например, перорально ё форме таблеток, капсул, капель и.пи сиропов; рёактально в виде суппозиториев парэнтерально, например внутривенно или внутримышечно (в виде растворов или суспензий), причем внутривенное введение является предпочтительным на стадии возникновения; путем ингалции в виде аэрозолей или растворов для распыления; интравагинально, например бужированием, или местно в виде примочек, кремов и мазей.

Фармацевтические или ветеринарные композиции, содержащие соединения по изобретению в сочетании с фармацевтически или ветеринарно приемлемым эксцепиентом, получают, использу традиционные эксцепиенты, обычно носители и/или разбавители, используемые для других цефалоспоринов. Общепринятыми носителями или разбавителями являются, например, вода, желатина, лактоза, крахмал, стеарат магния, тальк, растите.льные масла,, целлюлоза и т.п. Суточные дозировки в пределах 1-100 мг на 1 кг веса тела могут использоваться для различных видов животных, причем точная дозировка зависит от возраста, веса и состояния излечиваемого существа и от частоты и пути введения. Предпочтительным способом введения соединений изобретения является парэнтеральный; в этом случае соединения могут вводиться взрослым людям в количестве 100-200 кг в дозе предпочтительно 150 мг I- раза в ,

сутки растворенными в соответствующем растворителе, например стерильной воде или растворе хлористоводородного лидокаина для внутримышечны инъекций или стерильной воде, физио логических солевых растворах, растворе декстрозы или внутривенных жидкостях или электролитах для внутривенных инъекций.

Кроме того, соединения могут использоваться в качестве противомикробных агентов в профилактических целях, например при очистке, или в виде композиций, дезинфицирующих поверхность, например, при концентрациях приблизительно 0,2-1 от веса такой композиции, смешанной, суспендированной или растворенной в традиционных инертных сухих или водных носителях для использования путем промывания или опрыскивания. Кроме того, они полезны в качестве питательных добавок к пище животных.

Ниже приведены примеры, иллйстрирующие изобретение.

Оценка температур плавления в не которых случаях является затруднитеной, так как эти соединения имеют тенденцию удерживать растворитель.

СпектрыИК записывали в твердой фазе (КВг) или в масле Нуджол на спетрофотометре Перкин-Эльмер 125 Уф-спектры - в буферном фосфатном растворе при рН J, или в расворе NaHCOa на приборе Бауш-Ломб.

Спектры ЯМР записывали на приборе Брукер НХ-90 (90 МГц) для конечных продуктов и на приборе Перкин-Эльмер R-24B (60 МГц) для промежуточных веществ в растворе ДМСО (диметилсульфоксида) или CDCf , используя в качестве внутреннего стандарта тетраметилсилан.

П р и м ер 1. 3-С(8-Амино-6-тетразолор ,5-Ь -пиридазинил)-тиометил -7-Е2-(2 амино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетамидоЗ-З-цефем-4-карбоновая кислота (син-изомер).

Перемешиваемый раствор безводного хлбристогр метилена (.70 мл), содержа щий 2-(2-тритиламино-4-тиазолил)-2-метокскиминоацетоуксусную кислоту (син-изомер) (4, г, 0,01 моль) и триэтиламин ( мл, 10 ммоль), охлаждают до О С. и по частям добавляют пятихлористый фосфор (2,08 г, 10 ммоль). После перемешивания в течение 10 мин при и 1 ч при комнатной температуре смесь выпаривают при пониженном давлении, растворяют в смеси ацетона и бензола, снова выпаривают, для того чтобы удалить следы оксихлорида фосфора, и растворяют в 50 мл безводного ацетона, Затем фильтрацией удаляют хлористоводородный триэтиламин. Полученный таким образом ацетоновый раствор 2-(2-тритиламино- -тиазолил)-2-метоксииминоацетилхлорида добавляют по . каплям к тщательно перемешиваемому охлаждаемому льдом раствору 6-амино 3 f (8-амино-6-тетразоло 1,5 bJ-пиридазинил)-тиометилЗ 3 цефем-4-карбоновой кислоты (3,8 г, 10 ммоль бикарбоната натрия (0,8 г) и триэтиламина (2,82 мл) в смеси воды и ацетона (75 мл : 50 мл). Суспензии перемешивают в течение 1/2 ч при 0-5С и затем 1,5 ч при комнатной температуре, растворяют в 500 мл этилацетата, промывают водной хлористоводородной кислотой (50 мл), затем водным раствором хлористого натрия (100 мл), высушивают сульфатом натрия и выпаривают досуха. Остаток перемешивают в 5 мл хлористого метилена, затем добавляют 50 мл этилацетата и 50 мл диэтилового эфи-ра.. Образовавшийся осадок собирают, растворяют в теплом хлористом метилене (30 мл), охлаждают и обрабатывают при перемешивании с диэтиловым эфиром (100 мл). После 20 мин перемешивания отфильтровывают белое твердое вещество, промывают эфиром и высушивают, получая таким образом , fЗ г 3 (8-амино-6-тетразоло l ,5 -Ь пиридазинил)-тиометил -7 1.2- (2-тритиламино- -тиазолил)-2-метоксииминоацетамидоД-З-цефем- -карбоновуюкислоту (син-изомер) в виде белого порошка.

Упомянутое выше соединение(2,0 г) по частям добавляют к перемешиваемому горячему (55С) раствору муравьиной кислоты (13 мл) в 13 мл воды. Продолжают перемешивание и нагревание при той же температуре в течение 25 мин и затем отфильтровывают твердое вещество из охлажденной смеси. Твердое.вещество растирают в порошок в 90%-ной муравьиной кислоте (19 мл) затем добавляют 2 мл воды и отфильтровывают чистый трифенилметанол.

Подкисленные маточные растворы объединяют и выпаривают, получая осадок. После полного удаления воды и муравьиной кислоты с последующим растиранием в порошок с безводным этанолом получают твердое вещество (1,225 г). Неочищенный продукт суспенДируют в воде (70 мл) и добавляю достаточное количество NaHCO-j, чтоб получить раствор. Значение рН раств ра понижают до 2,0 добавляя 2 н. соляную кислоту и спустя 20 мин вып ший в осадок продукт собирают, тщательно промывают водой и высушивают в течение 18 ч при 75 С. Таким обра зом, получают 1,-13 г целевого проду та, который разлагается без плавлегния при температуре выше 225°С. Найдено,о: С 37,90; Н 3. N 26,78; S 16,83 Вычислено,: С 38,53; Н З-. N 27,33; S 17,07 ИК-спектр (см-), (КВг) : 33203180 NIH, 1520 - CONH (втор.амид), 1030 (-N-0-CH), 1760 (беталактам)} ЯМР, 100 МГц (DMCO - dg); млн.д. 3,7 .(2Н, дубл. -2-CH,i), J 17 Гц, 3,88 (ЗН, с., -ОСИ); 4,3б (2Н, д., 3-CH.S) J 13 Гц, 5,20 (IN, д., 6-Н) J 5 Гц; 5,83 (1Н, д., 7-Н) J 5 Гц + 8 Гц; 6,41 (1Н, с., 7-Н в пиридазиновом кольце); 6,82 (1Н, с,, 5-Н в тиазо овом кольце); 6,807,80 (2Н, шир., с., NH в тиазолово кольце), 8,02 (2Н, шир., с., -МНз. в пиридазиновом кольце); 9,б9 (1Н, д., -CONH) J 8 Гц. Используя этот метод, получают 3 Г(8-карбокси-6-тетразоло 1,5-bJ пиридазинил)-тиометилЗ-7-С2-(2-амин -4-тиазолил)-2-оксииминоацетамидоЗ-З-цефем-4-карбоновую кислоту (синизомер). Найдено,I: С 39,71; Н 3,06; N 22,88; S 15,82 ЧоН й оОтЗз Вычислено,%: С 39,J60; Н 2,99; N 23,09; S 15,86 ИК-спектр (КВг) (см): 17757С (бета-лактам) ; 1715 С О (карбоновая кислота); 1660-CONH (втор, амид.). ЯМР-спектр,100 МГц, (DMSO - d) (сГ. млн.доли): 1,26 (ЗН, t, 3,73 (2Н, dd, 2-CHi), Ц,22 (2Н, q, -0-СН2.СН,,) i,52 (2Н, dd, 3-СН,), . 5,18 (1Н, d, 6Н), 5,82 (1Н, dd, 7-Н 6,82 (1Н, S, 5-Н на тиазольном коль Це), 7,30 (2Н, широк. S -NHj, на тиазольном кольце), 8,02 (1Н, S, 7-Н на пиридазиновом кольце), 9,7 (1Н, , -CONH). Пример 2.3- С(8-Аминокарбоил-6-тетразоло 1,5-ЬЗпиридазинил)-тиометил -7- 2-(2-амино-4-тиазолил)2-метоксииминоацётамидоЗ-3 цефем-«-карбоновую кислоту (син-изомер) получают путем взаимодействия 2-(2тритиламино- -тиазолил)-2-метокси- миноуксусной кислоты с 7 амино-3-Ц8-аминокарбонил-6-тетразолоу,5-ь1 пиридазинил)-тиометилЗ-3 Цефем- - . -карбоновой кислотой, применяя не ТОД11КУ, описанную в пример1е 1; т. пл. 220С (разл.). Найдено,%: С. 38,71; Н 2,9б; N 25,81; S 16,01 Вычислено,%: С 38,57; Н 2,89; N 26,ОЙ; S 16,26 Тонкослойная хроматография (ТСХ): СНСе : Me ОН : НСООН : : : 75 : 20 : 20. Rf Q,k27-Амино-З- С8-аминокарбонил-6-тетразоло О , 5-ЬЗпиридазинил) -тио-. метил -3-цефем-4-карбоно8ую кислоту, используемую в качестве исходного вещества,, получают следующим образом. 6-Хлор-8-аминокарбонилтетразоло (1,5-Ь)пиридазин. К охлаждаемому льдом раствору 3-гидразино-4-аминокарбонил-6-хлорпиридазина (+,2 г, 0,024 моль) в. уксусной кислоте по каплям добавляют раствор нитрита натрия (1,55 г) в 10 мл воды. После перемешивания в течение 1 ч при 5-10 С выпавший осадок фильтруют, кристаллизуют из воды, снова фильтруют и высушивают в вакууме при , получая 3,44 г (77,5%) указанного выше соединения, т.пл. (разл.). Найдено,: С 30,11; Н 1,44; N 42,00; се 17,69. С Hj CENgO Вычислено,%; С 30,24; Н 1,52; N 42,32; се 17,85. 6-Меркапто-8-аминокарбонилтетразоло(1,5-Ь)пиридазин. , X . К перемешиваемому раствору NaSH-H O (10 г, 0,135 моль) в 150 мл воды добавляют 10 г (0,05 моль) 6-хлор-8-аминокарбонилтетраз.оло(1,5-Ь)пиридазина и смесь тщательно перемешивают 90 мин. После охлаждения при 0°С реакционную смесь подкисляют 11-1 соляной кислотой. После охлаждения в течение 1 ч при отбирают твердое вещество, промывают небольшим количеством холодной воды. Получают указанное выше соединение, т.пл. 185 1874 (разл), ИК-спектр (нуджол): SH см - С О 1675 см- . тех в СНСг,: : СН,,ОН J НСООН 1бО : 70 : 30 чистый продукт. УФ-спектр (буфер фосфатный, РН 7,):ЛдАакс 262; 8l8 Найдено,: С 30,б5; Н 2,00; N ,53; S 16,16. .C5-H4Nf,OS Вычислено,%: С 30,60; Н 2,05; N 2, 16,347-Амино-З- 1(8-карбокси-6-тетразоло .азолоС1,5-Ь -пиридазинил)-тиометил -З-цефем-4-карбоновая кислота. К горячему раствору (50-55с) 6-меркапто-8-аминокарбонилтетразоло 1,5-Ь пиридазина (2 г, 10 ммоль) и 2,8 г бикарбоната натрия в 90 мл фосфатного буфера (рН 6,) по частям добавляют 4,6 г (0,017 моль) 7 АЦК (7-аминоцефалоспорановой кислоты) и смесь нагревают k ч при . После охлаждения при вйпавшую в осадок 7-амино-3-(8-аминокарбонил-6-тетразо лор,5 Ь пиридазинил)-тиометил -3 -Цефем- -карбоновую кислоту собирают фильтрацией. Твердое вещество суспендируют в 150 мл смеси ацетона и воды (1:2}, перемешивают в течение 30 мин и фильтруют снова. Собранный осадок промывают ацетоном и высушивают в вакууме при . Получают целевой продукт (80), т.пл. 228-230 С (разя.) Найдено,: С 37,93; Н 2,93; N 27,13; S 15,5 Ч% В0452. Вычислено,: С .38,22; Н 2,9б; N 27,3; 5,15,70 ИК-спектр (нудхюл): / С 0. беталактам, 1780 . УФ-спектр (М NaHCO): Лмакс и 332. Пример 3. 3-(8-Карбокси-6-тетразрло О,5 ЬЗпиридазинил)-тиометил -7- 2-(2-амино-4-тиазолил)-2.-метоксииминоацетамидоЗ -3-цефем-4-карбоновая кислота (син-изомер). Перемешиваемый раствор безводного хлористого метилена, содержащий 2-(2-тритиламинс- тиазолил)-2-метоксиими ноуксусную кислоту(син-изомер)(11,35 6412 25,6 ммоль) и триэтиламин (3,61 мл, 25,6 ммоль ) охлаждают при и по частям добавляют 5,6 г (27 ммоль) пятихлористого фосфора. После перемешивания в течение 15 мин при 0°С и 1 ч при комнатной температуре смесь выпаривают при пониженном давлении, растворяют в безводном бензоле, снова выпаривают для удаления следов оксихлорида фосфора. Эту обработку пойторяют дважды (2-50 мл). Остаток суспендируют в 50 мл безводного ацетона, затем удаляют фильтрацией хлористоводородный триэтиламин. Ацетоновый раствор 2-(2-тритиламино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацётилхлорида, полученный таким образом, прикапывают в тщательно перемешиваемый и охлаждаемый льдом раствор 7-амино и охлаждаемый льдом раствор/-амине (8-карбокси-6-тетразолор ,5-Ь пиридазинил;-тиометилЗ-3-цефеи-чкарбоновой кислоты (10 г, 23,2 ммоль) и 15 г бикарбоната натрия в смеси воДЬ1 и ацетона (500:250 мл). Смесь перемешивают 30 мин при 0-5 С и затем в течение 90 мин. при комнатной температуре, отфильтровывают нерастворившееся вещество и удаляют ацетон выпариванием в вакууме. Доводят значение рН водной фазы до 2,0 с помощью соляной кислоты и экстрагируют этилацетатом (3 раза по +00 мл), промывают водным хлористым натрием, высушивают сульфатом натрия и выпаривают досуха. Остаток перемешивают с диэтиловым эфиром 20 мин, отфильтровывают белое твердое вещество, промывают эфиром и высушивают. Получают 3-1(В-карбокси-6-тетразоло 1,5-Ь пиридазинил)-тиометил -7- 2-(2-тритиламино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетамидо -3-цефеМ-k-карбоновую кислоту, которую по каплям добавляют к горячему (55 с) леремешиваемому раствору муравьиной кислоты ( мл). Перемешивание и нагревание при той же температуре осуществляют в течение 30 мин и затем твердое вещество отфильтровывают из охлажденной смеси. Фильтрат выпаривают досуха в вакууме, оставляя осадок. После полного удаления воды и муравьиной кислоты с последующим растиранием с водой получают твердое вещество. Неочищенный продукт кристаллизуют из этанола, получая 9,1 г (60) целевого продукта, который разлагается при . Найдено,: С 38,10; Н 2,91; N 23, S 15, 07 S, Вычислено,%: С 38,50; Н 2,72; N 23,63; S 16,23 тех в СНСЙз : МеОН : НСООН : H,j,0 : 75 : 20 ; 20, Rf 0,25. ИК-спектр (КВг): 3500-2300 см связанная - СООН; 17б5 С О бета-лактам; 1710 см - СО кислота 1650 см втор.амид.; I620j-1580 см- (С N оксим, -V (С - М) + (Г(Ы - Н) ; 1540 CM-lV(C - N) + (f(N - Н) амид ЯМР-спектр, 100 МГц (ЬМСО - d) млн. доли: 3,68 (1Н, д., 2-CHi}, 3,86 (1Н, д., 2-СН2), 3,92 (ЗН, с; ;.М-ОСНз),.4,Зб (1Н, д., 3-CH,), 69 (Illr Д., 3-CHi-S), 5,21 (1Н, д., 6-Н), 5,85 (1Н, д,д., 7-Н), 6,83 (1Н, с., 5-Н в кольце тиазола 7,30 (2Н, шир. с., -NHj. в кольце тиазола), 8,02 (1Н, синг., 7Н, в кольце пиридазина), 9,28 (1И, д., -CONH). 7-Амуно-З-С(8-карбокси-6-тетразо ,5 Ь пиридазинил)-тиометил -3цефен-4-карбоновую кислоту, используемую в качестве исходного веществ получают следующим обдазом. 3 Гидразино-А-карбокси-6-хлорпиридазин. Смесь 20 г (0,103 моль) 3,6-Дихлор-4-карбоксипиридазина и 22 мл 98 -ного гидразингидрата в 200 мл 50 -ного этанола кипятят с обратным холодильником при перемешивании в т чение 1 ч. После охлаждения при собирают твердый осадок, промывают 20 мл безводного этанола. Твердое в щество суспендируют в 100 мл воды, смесь доводят до значения рН 1-2 с помощью 23%-ной соляной кислоты; по ле охлаждения при твердое вещес во фильтруют, высушивают в вакууме при , получая М8,29 г (93,) указанного выше соединения,т.пл. 1 2014. Найдено,: С 31, Н 2,6k; , N 29,32; С 18,53 СдгНуСем.о. Вычислено,%: С 31, Н 2,67; N 29,71; се 18,80 ЯМР-спектр (DHCO - d): 7,8 (1Н с., 5-Н в кольце пиридазина), 9,2 (Н, шир., с., -СООН, -NHNHj.). 6-Хлор-8-карбокситетразоло 1 ,5пиридиазин. 4It К охлаждаемой льдом суспензии З-гидразино- -карбокси-Ь-хлорпиридазина (1,88 г. 10 ммоль) в уксусной кислоте по каплям добавляют раствор нитрита натрия (0,70 г) в воде (5 мл), перемешивают 1ч при 5 1(Г С, выделившийся осадок отфильтровывают и промывают безводным этанолом. Твердое вещество суспендируют в 2 н. соляной кислоте, смесь перемешивают 30 мин, твердое вещество отфильтровывают, промывают холодной водой и высушивают в вакууме при , получая 1,73 г (87) указанного выше соединения, т,пл. . Найдено,%: С 29,95; Н 0,98; N 35,15; се 17,58 Вычислено,: С 30,09; Н 1,00; N 35,09; C8 17,76 ИК-спектр (нуджол): С О1730 СМ- ЯМР-спектр (DMCO - d): 8,33 (1Н, с., 7-Н в кольце пиридазина). 6-Меркапто-8-карбокситетразоло Р ,5 Ь пиридазин. К перемешиваемому раствору NaSH (10 г, 0,135 моль) в 150 мл воды добавляют 10 г (0,05 моль) 6-хлор-87карбоксйтетразолоЕ1, пиридазина и смесь интенсивно перемешивают 2 ч. После охлаждения при реакционную смесь подкисляют соляной кислотой. После охлаждения при в течение 1 ч отделяют твердое вещество, промывают ие-большим количеством холодной воды, получая 9 г (91,5%) указанного выше соединения, т.пл. 210С (разл.). Элементный анализ Найдено,: С 30,Й1; Н 1,52; N 35,61; S 16,19 С5Нз%025 Вычислено,%: С 30,5; Н 1,53; N 35,52; S 16,26 ИК-спектр (КВг): (S-H), 1725 (-С 0). УФ-спектр (фосфатный буфер при рН 7,): woKC 25.8..; ЕД„ 9б2. 7-Амино- р8-карбокси-6-тетразоло D 5-ЬЗпиридазинил)-тиометил -3-цефем-+-карбоновая кислота. К горячему раствору (4.) 6-меркапто-8-карбокситетразоло 1,5-Ь пиридазина (8,2 г, 41,5 ммоль) и 11,69 г бикарбоната натрия в 2б5 мл фосфатного буфера (рН 6,4) по частям добавляют 18,5 г 7-АЦК (68 ммоль) . и смесь нагревают, перемешивая, при в течение 5 ч. После охлаждения при отфильтровывают нерастворен ное вещество и раствор подкисляют соляной кислотой до рН 4,4. Остаток отфильтровывают, промывают смесью ацетона и воды (3:1) и затем ацетоном, получая натриевую соль ука занного выше соединения (75). т.пл. выше 270 С (разл.). . Найдено,: С 35,80; Н 2,66; N 22,43; S 14,66; Na 5,10 Вычислено,%: С 36,19; Н 2,33; N 22,72; S 14,86; Na 5,32 ИК-спектр (нуджол): С О, бета лактам, 1770 УФ-спектр (Г МаНСО) Чем 432. Натриевую соль суспендируют в воде и подкисляют соляной кисло той. Получают твердое вещество, которое отфильтровывают, промывают водой, т.пл. (разл.). Найдено,: С 38,45; Н 2,90; N 23,55; S 15,вычислено,: С 38,13; Н 2,70; N 23,94; S 15,76. Используют этот же способ, получают 3 С(8-амино-6-тетразоло D,5-b3 пиридазинил) тиометилЗ-7 2-(2-амино -4-тиазолил)-2-карбоксиметоксииминоацетамидоЗ-3 цефем-4-карбоновую кислоту (син-изомер). Найдено,: С 37,21; Н 3,02 N 24,98; S 15,64 - 9 7 11 Вычислено,: С 37,56; Н 2,82; N 25,36; S 15,83 ИК-спектр (КВг) (см).: 1770 (бета-лактам). ЯМР-спектр 100 МГЦ, (OMSO-dx) (сГмлн.д.): 3,76 (2Н, dd, .); 4,39 (2Н, dd, ); 4,64 (2Н, S, -0-СН4.СООН); 5,21 (IH, d, 6-Н) ; 5,84 (1Н, dd, 7-Н); 6,40 (IH, S, 7-Н на пиридазиновом кольце); 6,8l (1Н, S, 5-Н на тиазольном кольце); 6,90-7,50 (2Н, широк. S, -NHij на тиазоле) ; 7,96 (2Н, широк. S, -NH,j на пиридази новом кольце); 9,55 (1Н, d, -CONH-). Пример 4. 3-С(8-Амино-6-тетразолор , 5-bj пиридазинил)-тиометил -7-12-(2-амино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетамидо -3-цефем-4-карбоновая кислота (син-изомер). N,N Дициклогексилкарбодиимид (0,9 г, 4J38 ммоль) добавляют к охлажденному до 0-5°С раствору 2-(2-тритиламино-4-тиазолил)-2-метоксииминоуксусной кислоты (3,675 г, 8,28 ммоль) в 13 мл безводного хлористого метилена. После перемешивания в течение 40 мин .при и 30 мин при комнатной температуре полученную суспензию разбавляют безводным хлористым метиленом. Выделенное твердое вещество дициклогексилмочевину (0,98 г, количественный выход) отфильтровывают и промывают свежим хлористым метиленом. Объединенные растворы в хлористом метилене выпаризают досуха и получают симметричный ангидрид исходной кислоты, который немедленно растворяют в безводном ацетоне (30 мл). Полученный раствор при перемешивании прикапывают к охлажденному на ледяной бане раствору 7-амино-З-Е(8-амино-6-тетразоло D,5-b)пиридазинил)-тиометилЗ-3-цефем-4-карбоновой кислоты (1,65 г, 4,3б ммоль), тризтиламина (1,22 мл, 8,72 ммоль) и МаНСО з (0,347 г, 4,14 ммоль) в водном ацетоне (1: :1,120 мл). После перемешивания в течение 1 ч при 0-5 С удаляют баню со льдом и после выдерживания дополнительно в течение 2 ч смесь растворяют в этилацетате (500 мл) и встряхивают с 1н. соляной кислотой (too мл). Нерастворяющееся вещество (небольшое количество непрореагироваашего 7 аминс цефема) отфильтровывают, органический слой промывают водным раствором хлористого натрия. Высушивают над сульфатом натрия, отфильтровывают и выпаривают; Большая часть исходной 2-(2-тритиламино-4-тиазолил)-2-метоксииминоуксусной кислоты, содержащейся в неочищенной реакционной смеси, осаждается из диоксанового pactBopa (30 мл) при медленном добавлении дициклогексиламина (1,4 мл). Спустя 20 мин при 12С эту циклогексиламиновую соль отфильтровывают, раствор разбавляют этилацетатом (200 мл), подкисляют 1 Н. соляной кислотой, и водный слой выбрасывают. Органическую фазу промывают водным раствором хлористого натрия, высушивают над сульфатом натрия, концентрируют до небольшого объема, затем добавляют к диэтиловому эфиру, получая при этом 3,1 г

3- (8-аминсг b-тетразоло l ,5-Ь пиридазинил)тиометил -7 С2 {2-тритиламино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетамидо -3 цефем-4-карбоновой кислоты (синизомер). Это вещество обрабатывают 501-ной муравьиной кислотой, как описано в примере 1, в результате получают целевой продукт, который, как было показано методами ТСХ, ИКи ЯМР-спектроскопии идентичен продукту, полученному в примере.1.

Используя этот же метод, получают 3-(З-амино-б-тетразолоЕт ,5-Ь пиридазинил)-тиометилЗ-7-12(2-амино-4-тиазолил)-2-карбоксиметоксииминоацетамидо -3-цефем-4-карбоновую кислоту (син-изомер); (элементный анаЛИЗ приведен в примере 3).

Пример 5. 3 1(8-Карбокси-6-тетразоло , 5-ЬЗ пиридазинил)-тиометил -7-1 2- (2-амино- -тиазолил)-2-. -метоксииминоацетамидоЗ-З-цефем- -карбоновая кислота (син-изомер-) .

N,N-Дициклoгeкcилкapбoдиимид (0,9 г,о ,38 ммоль) добавляют к охлаждеиному до 0-5°С раствору 2-(2-тритиламино- -тиазблил)-2-метоксииминоуксусной кислоты ( г, 8,28 ммоль) в безводном хлористом метилене (,13 мл). После перемешивания в течение 40 мин при и 30 мин при комнатной температуре полученную суспензию разбавляют безводным хлористым метиленом. Выделившееся твердое вещество, а именно дициклогексил мочевину (о,98 г, количественный выход) , отфильтровывают и промывают чистым хлористым метиленом. Объединенные растворы хлористого метилена выпаривают досуха и получают симметричный ангидрид исходной кислоты, который немедленно растворяют в безводном ацетоне (30 мл). Полученный раствор прикапывают при перемешивании к охлажденному на ледяной бане раствору 7 амино-3- и(8-карбокси-6-тетразло р ,5 Ь пиридазинил)-тиометил -3-цефем- -карбоновой кислоты (1,78 г, k,3( ммоль), 1j22 мл триэтиламина ( 8,72 ммоль) и бикарбоната натрия (0, г, ,14 ммоль) в водном ацетоне (1:1, 120 мл). После перемешивания в течение 1 ч при 0-5°С баню со

льдом убирают и спустя 2 ч смесь растворяют в этилацетате (500 мл) и встряхивают с водным 1 н. раствот ром HCf (100 мл). Нерастворившееся вещество (небольшое количество непрореагировавшего 7-аминоцефема) отфильтровывают, органический слой промывают водным раствором хлористого натрия, высушивают над сульфатом натрия, отфильтровывают и выпаривают. Большая часть исходной 2-(2-тритиламино- -тиазолил)-2-метоксииминоуксусной кислоты, содержащейся в неочищенной реакционной смеси, осаждается из диоксанового раствора (30 мл) при медленном добавлении дициклогексиламина (1,4 мл). Спустя 12 мин при соль дициклогексиламина отфильтровывают, раствор разбавляют 200 мл этилацетата, подкисляют 1 н. соляной кислотой и водный слой выбрась(вают. Органическую фазу промывают водным раствором хлористого натрия,.высушивают над сульфатом натрия, концентpиpyюt до малого объема, затем добавляют к диэтиловому эфиру, получая в результате 3,3 г 3 08-карбокси-6-тетразоло ,5-Ь пиридазинил)тиометилЗ-7 2-(2-тритиламино- -тиазолил)-2-мeтoкcииминoaцeтaмидoJ-3-цефем-4-карбоновой кислоты (синизомер) . Это вещество обрабатывают муравьиной кислотой, как описано в примере 3, в результате получают целевой продукт, который идентичен продукту, полученному в примере 3, согласно данным ТСХ, ИК- и ЯМР-спектроскопии,

Пример 6. 3-Е(8-Амино-тетразоло j,5 Ь пиридазинил)-тиометил -7 2- (2-амино-4-тиазолил)-2-оксииминоацетамидоЗ-З-цефем-4-карбоноваякислота (син-изомер).

К раствору 2-(2-тритиламино- -тиазолил)-2-тритилоксииминоуксусной кислоты (2,25 г, 3,35 ммоль) и триэтиламина (0,7 мл, 3,35 ммоль) в безводном хлористом метилене, охлажденному до -5 С, в один прием добавляют 0,б97 г (3,35 ммоль) пятихлористого форфора. После перемешивания при в течение 20 мин и 1 ч при комнатной температуре реакционную смесь выпаривают при пониженном давлении без внешнего обогрева до тех пор, пока весь РОСЕ, не израсходуется. Остаток растворяют в безводном ацетоне (50 мл) и отфильтровывают хлористоводородный триэтиламин. Полученный ацетоновый раствор 2-(2-тритиламино-4-тиазолил)-2-тритилоксииминоацетилхлорида прикапывают к раствору, содержащему 0,76 г (2 ммоль 7 амино-3- 1(8-амиио-6-тетразоло l ,5ЪЗпиридазинил)-тиометил -3-цефем-4-карбоновой кислоты, 0,5б2 мл (k моль) триэтиламмна и 0,281 г ( ммоль) бикарбоната натрия в 35 мл воды и 25 мл ацетона, охлажде ному до . После добавления раствора суспен зию перемешивают при в течение 30 мин и при - 90 мин. Реакцио ную смесь выливают в этилацетат (350 мл) при тщательном перемешивании; добавляют 50 мл воды и потом добавляют такое количество 2 н. соляной кислоты, чтобы довести значение рН водной фазы до 2,0. Отделяю органическую фазу, промь вают водным раствором хлористого натрия, высушивают сульфатом натрия и выпаривают досуха. Полученную пену растирают в порошок с диэтиловым эфиром, получая 1,98 г неочищенного продукта, содержащего значительное количество исходной кислоты. Большая часть этой примеси удаляется при растворении неочищенного материала в диоксане (10 мл) и прикапывании полученного раст.вора в 70 мл диэтилового эфира. После перемешивания в течение 10 мин отделяют фильтрацией белый осадок, получая в результате 1,02 г 3-(8-амино-6-тетразолор ,5-ЬЗпиридазинил тиометилЗ-7 Е2 (2-тритиламино- -тиазолил)-2-тритилоксииМиноацетамиДоЗ 3 цефем-4-карбоновой кислоты (син-изомер). Полученное выше соединение (1 г) добавляют при перемешивании к водной муравьиной кислоте (40 мл), выдерживают при (масляная баня). Через 35 мин смесь охлаждают до и фильтруют с отсасыванием; твердое вещество промывают свежей порцией (20 мл) 50%-ной муравьиной кислоты и затем диctиллйpoвaннoй водой и выбрасывают. Подкисленные раст воры объединяют и выпаривают при пониж нном давлении. Остаток растворяют в этаноле и снова выпаривают, растворяют в этаноле, выпаривают до малого объема (5 мл) и фильтруют. Полученный порошок растворяют в 2%-ном водном растворе бикарбоната натрия (20 мл) и добавляют древесный уголь. Профильтрованный раствор подкисляют до рН 2 соляной кислотой (2 н.) и перемешивают 5 мин. Осадок собирают фильт6рацией, тщательно промывают водой, затем небольшим количеством этанола и высушивают при в течение 16 ч,, получая 0,25 г 3(9 °6 тетразоло{ 1,5-ЪЗ иридаэинил)-ти6мётилД-7{2-(2-амино-4-тиазолил)-2-оксииминоацетамидоД-З-цефем- -карбоновой кислоты (син-изомер) в виде белого порошка, разлагающегося без плавления приблизительно при 205 С. Найдено,%: С Зб,81; Н 2,88; N 27,73; S 16,92 ,fN, Н 2,75; Вычислено,/и: С 37,15; N 28,03; S 17,20 ЗАОО (-NH), ИК-спектр (КВг), см 3000 (-ОН), 1760 (::: С О, бета-лактам), ЯМР-спектр, 100 МГц (DMCO - dg). млн.д.: 3,61 (1Н, д., Z-CHj); 3,89 (1Н, д., 2-СНа), J 17 Гц; 4,16 (1Н, д., 3-CH2S), 4,60 (1Н, д., 3-CH.S) Э 13 Гц; 5,21 (1Н, д. 8-Н 7 5,86 (1Н, АД. 7Н), 6,42 (1И, С., 7-Н в кольце пиридазина), 6,76 (1Н, с., 5Н в кольце тиазола), 7,20 (2Н, шир. с., -NHi в кольце тиазола); 8,02 (.2Н, шир., с., -NH2 в кольце пиридазина); 9,5б (1Н, д., -CONH-), 11,66 (1Н, шир. с., N-OH). Пример 7.К суспензии 3 -(8-амино-6-тетразоло||1,5-ЬЗ-пиридазинил)-тиометилЗ-7 Г2(2-амино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетамидоД-З-цефем-4-карбоновой кислоты (синизомер, 5.63 г) в 80 мл воды добавляют стехиометрическое количество бикарбоната натрия, при этом достигается полное растворение соединения. Этот раствор затем лиофйлизуют для получения натриевой соли 3-(8-амино-6-тетразоло 1,5-Ь}пиридазинил)-тиометилЗ-2-| 2-(2-амино-4-тиазолил)-2-метоксииминоацетамидо -3-цефем-4-карбоновой кислоты (син-изомер), т.пл. выше (разл.). Найдено,: Na 3,80 Вычислено,%: Na 3,90 ИК-спектр (КВг), 17бО (бета-лактам). .. . i . Пример 8. К суспензии 3.L(8 -карбокси-6-тетразоло р ,5-bJ-пиридазинил)-тирметилЗ 7 2- (2-амино-4-тиазояил)-2-метоксииминоацетамидо 3-цефем-4-карбоновой кислоты (син-изомер. 5,92 г) в 80 мл воды добавляют два эквивалента бикарбоната натрия для полного растворения соединения. Этот