Способ получения производных бета-лактама Советский патент 1992 года по МПК C07D499/86 C07D501/02 A61K31/43 A61K31/545 

Изобретение относится к способу получения новых производных бета-лак- тама формулы

R

Н О

4н-с I ТйЦд

СОА

где R - хлор или метоксигруппа;

А - С -С4 алкил, фенил или 4трет.бутилфенил; X - группа формулы:

Y

сн

1

СИ} или Иг

XS

ел о

4 GO

о

00

где R2 - метил, бромметил, ацетокси метил, метоксиметил, (1-метил- 1 ,2,3,4-тетразол-5-ил)

тиометил или (2-метил-5 оксо 6-гидрокси-2,5-Дигидро- 1,2,А-триазин-3 ил)тиометил, которые обладают свойством ингибировать эластазу человеческих лейкоцитов и могут найти применение в медицине. Известны производные бета-лактама, обладающие свойством ингибировать ft-лактамазу или эластазу.

Цель изобретения - получение новых производных бета-лактама, обладающих свойством ингибировать эластазу человеческих лейкоцитов с повышенной стабильностью.

Цель достигается тем, что согласно многостадийному способу получения производных бета-лактама формулы (I), заключающемуся в том, что соединение формулы

а

со

где RJ - имеет указанные для X значения ПРИ УСЛОВИИ, ЧТО RЈ

метил,

обрабатывают галоидирующим агентом в органическом растворителе, образующееся соединение формулы

(W)

где К

и А

А

X имеют указанные знач

- галоген, обрабатывают соединением формулы

AMgHal, (IV) где А имеет указанные значения; Hal - галоген, в присутствии Cul А1С1 в органическом растворител при температуре от -78 до - 50°С окисляют образующееся соединение щей формулы

-г

л

н о

i

/мл

СОА

н

где R ., А и X

Ч

надкислотой туре от

0°С

имеют указанные значения ,

или ее солью при темпера- до комнатной и в случае необходимости целевой продукт в котором R - метил обрабатывают N-бром- сукцинимидом в присутствии &i, (у -азо- бис-изобутиронитрила в органическом растворителе при температуре кипения с обратным холодильником и в случае необходимости образующийся целевой

ых х

я), е

е

ю)

я;

и )

15

20

25

30

35

40

45

50

55

продукт, в котором,

R2бромметил,

обрабатывают уксусной кислотой или ее солью, метанолом или основанием и 5 меркапто-1-метил-1,2,3,4-тетразс&пом, или 3 меркапто-2-метил-5- оксо-6-бензгидролокси-2,5-Дигидро- 1 ,2 ,-триазином и, при необходимости, удаляют бензгидрильную группу три- фторуксусной кислотой в присутствии анизола с получением целевого продукта, где К -ацетоксиметил, меток- симетил (1-метил-1,2,3,4-тетразол- )тиометил или (2-метил-5 оксо 6-гидрокси-2,5-ДИгидро-1,2,-триа- )тиометил.

Пример 1. (7схО-Хлор-4-этил- карбонил-3-метил-3 Цзфем-1,1-диоксид (соединение 33).

Раствор () -хлор-3-метил-З-це- фем-А-карбоновой кислоты (515 мг) в 30 мл сухого бензола перемешивают при 7 С в течение 5 мин в присутствии осалил хлорида (0,38 мл).

После удаления летучих под вакуумом получают сырой (700-хлор- -хлор- карбонил-3-метил-З-цефем.

ИК (КВг)маКс: 1780 шир., 1750 см .

Этот материал смешивают с сухим эфиром и обрабатывают под атмосферой азота при -70°С трихлоридом алюминия (195 мгУ и 2М эфирным раствором бромида этилмагния (1,5 мл). Через 5 мин реакционную смесь выливают в ледяную воду и последовательно промыли водным раствором NaHCO и крепким раствором соли. Органический слой сушат NaЈS04 и концентрируют под вакуумом, в результате чего получают (7оО хлор-4-этилкарбонил-3 метилце- фем а виде смеси Д5 и Д2 изомеров (210 мг).

Указанную смесь растворяют в смеси 0,05 и рН 7 фосфатного буфера и этилацетата 1:2, общий объем 9 мл и обрабатывают при 0 - 5°С м-хлор- надбензойной кислотой (385 мг)

1

5

После перемешивания при комнатно температуре в течение 1 ч реакционн смесь выливают в ледяную воду и последовательно промывают водным раствором метабисульфита натрия, водным раствором кислого карбоната натрия и крепким раствором соли. После осушивания с помощью , удален растворителя и хроматографии на сил кагеле остатка получают чистое целевое соединение (90 мг) в виде сиропа.

ИК (СНС13)акс 1780, 1690

И р и м е р 2. 4-трет-Ьутилкарбо нил- (7об) -метокси-3-метил-З-цефем-1, диоксид (соединение 49).

Раствор (7&)-метокси-З-метил-3- цефем-4-карбоновой кислоты (1,68 г) в сухом бензоле (100 мл) оЬрабатыва ют при 7°С сухим ДМФ (несколько капель) и оксалил хлоридом (1,26 мл). После перемешивания в течение 45 ми удаления летучих материалов под вакуумом получили сырой 4-хлоркар- бонил- (7об) -метокси-3-метил-3-цефем„

Этот материал смешивают с сухим ТГФ (50 мл) и обрабатывают при -70 С под атмосферой азота трихло- ридом алюминия (195 мг) и 1,43 М эфирным раствором хлоридом трет- бутилмагния (5,13 мл). После перемешивания в течение 13 мин при -30°С реакционную смесь выливают в ледяную воду, последовательно промывают водным раствором NaHCOj и крепким раствором соли и выпаривают досуха, в результате чего получают сырой 4-трет-бутилкарбонил- (7об) -ме- токси-3-метил-цефем.

Часть (.300 мг/ этого материала растворяют в зтилацетате (70 мл) и обрабатывают при комнатной температуре м-хлорнадбензойной кислотой (570 мг). Через 1,5 ч реакционную смесь последовательно промывают водным раствором NaHSO, водным раствором NaH60- и крепким раствором соли. После осушивания с помощью Na2S04, удаления растворителя и хроматографии на силикагеле остатка получают чистое целевое соединение (114 мг) в

iO

виде белого порошка, Т.пл„ 128 С. ИК (CHClj))MQKC : 1783, 1685 ЯМР (200 МГц, CDC13)Ј: 1,2Ь (9Н, S9), 1,70 (3H.S), 3,31, 3,93 (2Н, каждый d,I Г/ Гц), 3,56 (3H,S), 4,66 и 5,16 (каждый 1Н, d 1 ,b Гц) млн.долей. МС (FD) 301 м/z (М).

10

20

П р и м е р 3. 3 Бромметил-4-трет- бутилкарбонил-(7 )-метокси-3-цефем- 1,1-диоксид (соединение 50).

Раствор 4-трет-бутилкарбонил- (7cd) -метокси-3-метил-З-цефем-1,1 - диоксида (пример 2,130 мг), N-бром- сукцинимида (NBS, 100 мг) иоЈ,с1 - азо-бис-изобутиронитрила (AIBN, 5мг) в четыреххлористом углероде (20 мл) и дихлорметане (15 мл) кипятят в течение 2 ч. После удаления растворителя и хроматографии на силикагеле получают указанное соединение (ПО 15 мг) в виде белого порошка.

ИК (CHCU)}

31v ма кс

1790, 1690 см

.... х . . / , N.-И

ЯМР (200 МГц, ОС13)Ј: 1,31(9Н, S), 3,56 (3H,S), 3,53 (1H, d, 1 14,6 Гц), 3,79 и 3,91 (2H,каждый d, I 11 ,4 Гц), 4,28 (1H,dd,T ,6 и 1,4 Гц), 4,76 (iH.dd.l 1,9 и 1,4 Гц), 5,20 (1Н, d,I 1,9 Гц) МС (FD) 379 м/ (М+).

П р и м е р 4. 3-Ацетоксиметил- 5 4-трет-бутилкарбонил-(70$ -метокси- З-цефем-1,1-диоксид (соединение 5Т). Раствор З-бромметил-4-трет-бутил- карбонил- (7 хО-метокси-3 цефем-1,1 - , диоксида (пример 3,93 мг; в сухом 0 ацетонитриле (5 мл) перемешивают при

комнатной температуре в течение 1 ч -в присутствии уксусной кислоты (0,15 мл) и ацетата серебра (lt8 мг).

Реакционную смесь смешивают с 5 EtOAc и последовательно промывают водным раствором ЫаНСОэ и насыщенным раствором соли. После осушивания с помощью . и удаления растворителя с последующей хроматографией на силикагеле получают указанное в названии соединение (45 мг) в виде белого порошка, Т.пл. 134°С.

Ик (КВг)Змакс: 1780, 1732, 1687 см 1 .

ЯМР (200 МГц, гасЦ)У: 1,28 (9Н S), 2,08 (3H,S), 3,37 (3H.S), 3,83 (IH.d.I 18,5 Гц), 4,00 (iH.dd.I 18,5 и 1,5 Гц), 4,43 (2Н, ABq,, расщепление внутренних линий 1,9 Гц), 4,73 dH.dd.I 1,9 и 1,5 Гц) -3,20 (1H,dd,I 1,9 Гц) млн.долей. МС(ГД) 339 м/ (Mf) П р и м е р 5. 4-трет-Вутилкарбо- нил-()-хлор-3 нетил-З-цефем-1 ,1- с диоксид (соединение 1).

Раствор (7об)-хлор-4-хлоркатлонил- Зметил-3-цефема (пример|., 2,32 г): в сухом ТГФ (80 мл) последовательно обрабатывают иодидом меди (I)

0

5

0

71

(2,076 г) и 2М эфирным раствором ретбутилмагний хлорида (4,59 мл) ри -70°С под атмосферой азота.

Реакционную смесь оставляют при -50°С, затем выливают в ледяную воду. ерез 10 мин перемешивания, экстракции этилацетатом, промывания органического слоя водным раствором aHCOg, высушивания с помощью и удаления растворителя получают сырой 4-трет-Ьутилкарбонил (7о4)-хлор- 3-метилцефем.

Этот материал пропускают через короткую колонку с силикагелем, а затем обрабатывают м-хлорнадбензой- ной кислотой (2,5 г) в этилацетате при 105С в течение ночи. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом, после овательно промывают водным раствором NaH03, водным раствором NaHCO, водным раствором NaCl, осушивают (), концентрируют под вакуумом и очищают хроматографически на колон

ке с силикагелем, в результате чего получают указанное соединение (550 мг) в виде белого порошка, Т.пл. 218°С.4

ИК (КВг Ямакс: 1773, 168 см .

ЯМР (200 МГц, CDClj) Ј: 1,6 (9H.S), 1,72 (ЗН, ), 3,60 (1H,d, ,1 Гц), 3,96 (1H,dd,I 18,1 и 1,3 Гц), 4,76 (1H,dd,,3 и 1,7 Гц) 5,32 (1H,d,,7 Гц) млн.долей.

П р и м е р 60 З-Бромметил-4- трет-бутилкарбонил- (7oi) -хлор-3 цефем-1,1-диоксид (соединение 2).

Раствор 4-трет-бутилкарбонил- (7с/)-хлорЗ-метил-3-цефем -1 ,1 -диоксида (пример 5, 150 мг) в четырех- хлористом углероде (40 мл) кипятят в течение 4 ч в присутствии NBS (114 мг) и AIBN (2 мг).

После удаления растворителя и хроматографии получают указанное соединение (112 мг, плюс 40 мг исходного материала) в виде белого порошка. Т.пл. 155 С.

ИК (kBr)OWQlcc : Г/95, 1Ь90 см .

мс (FD) звз м/z (м+).

ЯМР (200 МГц, CDCH) : 1,31 (9H,S), 3,65 (1H,d,,1 Гц), 3,85 (2H,Abg,,4 Гц), Д.32 (lH,dd,l 11,4 и 1,3 Гц), 4,88 (iH.dd,,8 и 1,3 Гц), 5,37 (1H,d,,5 Гц/млн, долей.

-1

504308

Пример/. (ЬвЈ)-Ьром-3-этил- карбонилпенам-1,1-диоксид (соединение 146) .

, Раствор 6,6-дибромпенициллиновой кислоты (7,18 г) в дихлорметане обрабатывают при -20°С 2-пиридил- дисульфидом (4,41 г) и трифенилфос- фином (5,24 г). Реакционную смесь

JQ нагревают до комнатной температуры, растворитель удаляют под вакуумом и остаток (состоящий из сырого сложного эфира 2-пиридила исходного материала) используют для взаимодействия

i5 при 75°С с 2М эфирным раствором бромида этилмагния (15,5 мл) в ТГФ (110 мл). Через 35 мин реакцию обрабатывают с помощью насыщенного водного раствора и экстрагируют

20 смесью 1:2 этилацетат/изопропиловый эфир. Органические экстракты дважды Промывают водой, осушают и концентрируют. После хроматографии на силикагеле получают (6о/)-бром-325 этилкарбонилпенам (1,3 г) в виде белого порошка, Т.пл. 8э - 69°С. ИК (СНС13)Зма)4С : 1780, 1710 см ЯМР (90 МГц, CDCl): 1,10 (ЗН, t,,5 Гц), 1,37 и 1,70 (каждый

30 ЗН, S), 2,62 и 2,67 (2Н, каждый q,I 7,5 Гц), 4,40 (1H,S), 4,85 и 5,41 (каждый lM,d, Гц) млн. долей.

Этот материал (100 мг) в дихлорметане (5 мл) перемешивают в течение

35 5 ч при 25 С в присутствии м-хлор- надбензойной кислоты (293 мг).

Реакционную смесь последовательно промывают водным раствором NaHS03 и

водным раствором NaHCCb. После уда- 40 чи ления растворителя под вакуумом и

флэш-хроматографии получают указанное соединение в виде желтоватого продукта (80 мг). Т.пл. 117 - Н8 С.

ИК (KBr)}Mqkc : 1793, 1712 смм. . 4Э ЯМР (90 МГц, 1,10 (ЗН,с, I 7,5 Гц), 1,38 и 1,62 (каждый 3H,S), 2,70 (2H,q,,5 Гц), 4,20 (1H.S), 4,70 и 5,2Т (каждый 1H,d,I 1,7 Гц) млн.долей.

50 П р и м е р 8. (бсб)-Хлор-З-этил- карбонилпенам-1,1-диоксид (соединение 116/.

Раствор (6iX.)-хлорпенам-3-карбок 55 силата натрия (543 мг) в сухом ТГФ используют для осуществления реакции при 5°С в течение 1 ч с оксалил хлоридом (0,18 мл) в присутствии

9

ДМФ (1 капля). Реакционную смесь выпаривают досуха , обрабатывают сухи ТГФ (10 мл), охлаждают под атмосферой азота до -78°С и обрабатывают иодидом меди (I) (402 мг) и 2М эфирным раствором бромида этилмагния (1,06 мл).

После перемешивания в течение 15 мин реакционную смесь выливают в ледяную воду и экстрагируют эфиром. Экстракты промывают водным растворо NaHCO, осушают и выпаривают. После хроматографии на силикагеле получаю (6оЈ) -хлор-3-этилкарбонилпенам (50 мг) в виде сиропа. .

ИК (СНС1 ,НМакс : 1778Г 17°5 см

ЯМР (200 МГц, CDC1,)Ј: 1,05 (ЗН, t,,1 Гц),1,41 и 1,62 (каждый ЗН, S), 2,58 и 2,62 (2Н, каждый q,I 7,1 Гц), 4,36 (1H.S), 4,77 и 5,29 (каждый 1,d,,3 Гц) млн.долей.

Полученный материал (20 f) растворяют в этилацетате (1 мл)4и осуществляют взаимодействие с м-хлорна бензойной кислотой (81 мг) в течени 6 ч при комнатной температуре. После промывания 1М водным раствором NaHS03, насыщенным водным раствором НаНСОз и соленым раствором последующего удаления растворителя и хроматографии на силикагеле получают указанное соединение в виде пенистого материала (17 мг).

ИК (СНС1Я)Э

„1

1fcUb, 1715 см

ЯМР (200 МГц, CDC1)Ј: 1,08 (ЗН, t,,1 Гц), 1,39 и 1,Ь2 (каждый 3H,S), 2,66 и 2,71 (2Н, каждый q, 1 7,1 Гц), 4,19 (1H.S), 4,Ь5 и 5,19 (каждый 1H,d,,7 Гц) млн. долей.

П р и м е р 9. 4-Этилкарбонил-7йЈ метокси-3-метил-3 цефем-1,1-диоксид (соединение 147).

Раствор 7фЈ-метокси-3-метил-3 цефем-4-карбонилхлорида (0,7 г), полученного по примеру 2, в сухом перегнанном этиловом эфире (20 мл) обрабатывают при -70°С под атмосферой азота иодидом меди (I) (0,54

Через 10 мин перемешивания в реакционную смесь добавляют 2М эфирный раствор бромида этилмагния (2 мл). Реакционную смесь оставляют стоять до повышения температуры до -50°С, а затем выливают в ледяную воду. После экстракции этилацетатом промывания водным раствором NaHC03

10

и удаления растворителей остается остаток, который очищают методом флэш-хроматографии (siU2, EtOAc/ /гексан), а затем обрабатывают м- хлорнадЬензойной кислотой (1,5 г) в холодном /О L/ этилацетате. Реакционную смесь перемешивают при 10 - 15 С в течение 1 ч, затем последо10

15

-25

20

40

,

)„50

вательно промывают водным раствором NaHCOj, водными растворами NaHCOjи , Nad. После осушивания и удаления растворителя и последующей флэш-хроматографии получают указанное в названии соединение (150 мг) в виде бледно-желтого масла.

ИК (СНС13)ма)с6 : 1780, 1685 см .

ЯМР (200 МГц, СОС1Ъ)Ј: 1,13 (jH.c, ,1 Гц), 1,96 (3H,S), 2,66 и 2,90 (2Н, каждыйач, и 7,1 Гц), 3,59 (3H,S), 3,60 OH,d,I 17,6 Гц), 3,85 (1Н,dc,,6 и 1,2 Гц), 4,65 (lH,d,d,,4 и 1,2 Гц), 5,14 (lH,d I, 1,4 Гц) млн.долей.

П р и м е р 10. 4-Трет-бутилкар- бонил-7 -хлор-3-(1 -метил-1 ,2,3,4- тетразол-5-ил)тиометил 3 цефем-1,1- диоксид (соединение 150).

Раствор 3-Ьроммётил-4-трет-6утия- 30 карбонил-7о6-хлор-3 цефем-1,1-диоксида (65 мг), полученного по примеру 6, в сухом ацетонирпиле (5 мл) обрабатывают триэтиламином (0,025 мл) и 5-меркапто-1-метил-1,2,3,4-тетразо- 35 лом (26 мг). Имеет место немедленная реакция (ТСХ контроль). Растворитель удаляют под вакуумом и остаток очищают методом флэш-хроматографии, в результате чего получают указанное в названии соединение в виде белого порошка (35 мг). Т.пл. 162 - 164°С.

ИК (КВг)Рд,ом : 1790, 1690 .

ЯМР (200 МГц, CDC13)Ј: 1,26 (9Н, S), 3,76 и 4,08 (2Н, каждый d,I 45 14,3 Гц), 3,93 (3H,S), 4,01 (1H,d, ,9 Гц), 4,26 (1H,dd,,9 и 0,9 Гц), 4,85 (1Н,dd,,7 и 0,9 Гц), 5,33 (1Н,d,,7 Гц) мл. ндолей.

П р и м -е р 11. 4-Трет-бутилкар- бонил- (7&б)метокси-3- О-метил-1,2, 3,4-тетразол-5 ил) тиОметил-3-цефем- 1,1-диоксид (соединение 151).

Раствор З-бромметил-4-трет-бутил- 55 карбонил-(7&0 -метокси-3 цефем-1,1- диоксида (52 мг), полученный по примеру 3, в диметилформамиде (1 мл) обрабатывают 1 метил-1,2,3,4-тетоз-л

золил-5-меркаптидом натрия (ЗЬ мг). Через 10 мин реакционную смесь разбавляют этилацетатом и промывают крепким раствором соли. После удаления растворителя и флэш-хроматографии получают указанное соединение (30 мг) в виде белого порошка. Т.пл. 60 - 62°С.

ИК (KBr)3woll:e : 1790, 1690 см

ЯМР (200 МГц, CDC13)Ј: 1,2 (JH, S), 3,78 и 4,05 (2Н, каждый d,I 14,2 Гц) Х,56 (3H,S), 3,92 (iH.d, 1 17,8 Гц), 4,20 (1Н,d,,8 Гц), 4,75 (1H,br,s), 5,17 (1H,d,I 1,7 Гц) млн„ долей о

П р и м е р 12. 4-Трет-бутилкар- бонил- (7оЈ) -метокси-3- (2-метил-5 оксо-6-окси-2,5 Дигидро-1,2,4-тpиa- зин-3-ил)тиoмeтил-3 Цeфeм-1 ,1-диоксид (соединение 153).

Раствор З-бромметил-4-трет-бутилкарбонил-(7оЈ) метокси-З-цефем-1,1- диоксида (230 мг), полученного по примеру 3, в сухом ацетонитриле (50 мл) обрабатывают триэтиламином (0,1 мл) и 3 меркапто-2-метил-5 оксо-6-бензгидрилокси-2,5-Дигидро 1,2,4-триазином (2,75 мг). Через 20 мин растворитель удаляют и защищенное соединение очищают на хро- матографической колонке с силикаге- лем„ Его растворяют в дихлорметане (2 мл), а затем( добавляют анизол (U,025 мл) и трифторуксусную кислот (1 мл). Через 15 мин ТФА полностью удаляют под вакуумом и остаток обрабатывают дихлорметаном (1 млК После добавления изопропилового простого эфира получают указанное соединение (175 мг) в виде белого порошка. Т.пл. 148 - 150°С„

ИК (KBr)}MQKO : 1790, 1690, 1640 (широкая )

ЯМР (200 МГц, CDClj) 1,28 (9Н, S), 3,63 и 4,19 (2Н, каждый d,I 14,1 Гц), 3,56 (ЗН), 3,74 (ЗН), 3,83 (1H,d,,8 Гц ), 4,09 OH.d, I, 17,8 Гц), 4,76 (1Н,Ьг,5), 4,17 (1H,d,I Г/ Гц) млн,долей.

П р и м е р 13 4-Трет-бутилкар- бонил-(7) -хлор-З-метоксиметил-3 цефем-1,1-диоксид (соединение 6).

Исходя из 1,1-двуокиси 3-бром- метил-4- (трет-бутилкарбонил)- (7oi) - хлор 3 цефема, полученной в примере 6 и осуществляя нагревание в мета- нольном растворе, получают целевой

продукт в виде белого порошка, ИК (KBr))MQ)c : 1788, 1690 .

ЯМР (200 МГц, CDC33)Ј: |,2б (9Н, с.), 3,28 (ЗН,с.), 3,75 (2H,cJ, 3,81 (1Н,д.,,2 Гц), 4,04 (1Н,

ДД.,Т 1 и 18,2 Гц), 4,82 (1Н,м„), 5,35 (1Н.Де,,8 Гц).

Пример 14. 4-(4-Трет бутилфе0 нил)карбонил-(7 )-метокси-3-метил-3 цефем-1,1-диоксид (соединение 169). Следуя процедуре, описанной в примере 2, и, используя 4-трет-бу- тилфенил-магнийхлорид в качестве

5 реагента Гриньяра, получают целевое соединение в виде белого порошка.

ИК (КВгЛ : 1780, 1675, 1608 .

ЯМР (200 МГц, CDC13): 1,34 (9Н,

0 с.), 1,66 (ЗН,с.), 3,53 (ЗН,с.), 3,58 (1Н,д., Гц), 3,99 (1Н, дм., 1 18 Гц), 4,80 (1Н,м), 5,19 ОН, д.,1 1,7 Гц), 7,50 и 8,86 (4Н, два д.,1 8,6 Гц)„

5 П р и м е р 15. 7-Метокси-3 0- метил-1,2,3,4-тетразол-5-ил)тиолме- тил-4-фенилкарбонил-3 Цефем-1,1-диоксид.

0 Следуя процедуре, описанной в примерах 2,3 и 11, и, используя фе- нилмагнийхлорид в качестве реактива Гриньяра, получают целевой продукт в виде белого порошка.

5 ИК (КВг)Омакс : 1798, 1665 . ЯМР (200 МГц, CDC13)Ј: 3,49 (ЗН, с.,) 3,80 (1Н,До),4 Гц), 3,85 (ЗН, с.), 3,97 ОН,Дв, ,1 Гц), 4,09 (1Н,д.,4 Гц), 4,38 (1Н,

0 дд.,,3 и 18,1 Гц), 4,88 (1Н,м.), 5,17 ОН,д.,,7 Гц), 7,4 - 7,9 (5Н,м).

Потенциальные возможности лечеб5 ного действия ингибитора протеазы при лечении заболеваний; связанных с разрушением соединительных тканей, в последнее время привлекают все более широкое внимание. Значительное

0 число работ посвящено изучению ингибиторов эластазы человеческих лейкоцитов (HLE), которая является основным деструктивным агентом при эмфиземе легких и, вероятно, участвует

5 в процессах, протекающих при ревматоидных артритах

Оказалось, что низкомолекулярные, ингибиторы обладают целым рядом пре

имуществ по сравнению с природными высокомолекулярными инг ибиторпми протеазы растительного или животного происхождения: их можно получить в достаточных количествах, им можно придать рациональную или оптимальную структуру, они не обладают антигенным действием и их можно применять орально или в аэрозолях. Многие из установленных низкомолекулярных ингибиторов эластазы содержат реак- ционноспособные функциональные группы (хлорметилкетоны, изоцианаты), они могут взаимодействовать с функ- циональными группами протеинов и поэтому могут быть довольно токсичными„ В этом отношении потенциальный интерес представляют соединения р-лак- тама, потому что будучи реакционно- способными по отношению к протеазе серина, они не токсичны при очень высоких концентрациях,

Предлагаемые соединения способа отличаются высоким ингибирукадим действием по отношению к HLE. При испытании in vitro они обладают преимуществами по сравнению с известными ингибиторами на основе й-лактамов. Кроме того, они обладают неожиданно хорошей химической стабильностью при физиологических значениях рН, что дает дополнительные преимущества при испытаниях в условиях in vivo. Таким образом, напри- мер, соединение Ь1 (пример k) превосходит при сравнении соответствующий сложный цефалоспорановый эфир (эталон) по улучшенной химической стабильности (с 1/2), более высокой скорости образования комплекса HLE (), более низкой скорости диссоциации (KQЈ|) и лучшей эффективности (меньшая константа кажущейся диссоциации комплекса HLE-ингиби- тор в стационарном состоянии, К ;53)

Химическую стабильность при 37 С, 0,05 М фосфатного буфера рН 7,k (5% ДИСО в качестве солюбилизирующе- го средства) определяют по временной зависимости расхода исходного материала (кинетика псевдобыстрого порядка, 10 мМ исходная конц.) методом ГПЖХ (стационарная фаза Wliacman Parcisphere 5C18, 110x,7 мм зн.д., подвижная фаза А, рН 2,5 0,1 М фосфатный буфер, подвижная фаза В, фаза A/MeCN, УФ-детектирование при fl 2b нМ)

Кинетические параметры HI,Г, ( biochem. l,oс. 702738) определяют при 37°С, 0,027 М рН 7,Ь фосфатный оу- фер, U ДМСО, U MeCN, NnCl (I 0,25), по выделению 7 амино-А-метил- кумарина (флуоресцентное детектирование) из N-метоксисукцинилаланил- пролил-валил-7-амидо- -метилкумарина в качестве субстрата в соответствии со следующими уравнениями

5

0 5 0

0 5 0 5

0

+

К К ., + oil

(Yz:%)5 i, j

KQn СО

HsJ/Kb, 1±Ш/К1а.

W -i +

где г , l , s - концентрации

продукта, ингибитора и субстрата ;

V - скорость в стационарном состоянии;

V - скорость в нулевой момент времени;V0 - скорость при

DJ - 0;

К - константа Михаэлиса для пары энзим-субстрат (независимо определенная в тех же экспериментальных условиях)

Благодаря своей высокой ингиби- рующей активности по отношению к эластазе и ничтожной токсичности предлагаемые соединения могут быть использовачы для лечения воспалительных и дегенеративных заболеваний, вызванных протеолитическими энзимами у млекопитающих, включая человека. Соединения данного изобретения могут быть использованы для получения препаратов, применяемых для предотвращения или прекращения распространения заболеваний, вызванных протеолитическим распадом- легких и соединительных тканей, для снижения воспаления и жара и снятия болей. Такими заболеваниями эмфизема, синдром острого респираторного заболевания, воспаление Ьронхов, ревматоидный эртрит, остеоартрит, инфекционный артрит, ревматическая

лихорадка, спиндилез, подагра, волчанка, псориаз.

Формула изобретения

Способ получения производных ое- та-лактама общей формулы

R1 А

X хлор или метокседгруппа; Cf-Сгалкил, фенил или 4- трет. бутилфенил; группа формулы

Y

CHj

СН3 или R2

где R2 - метил, бромметил, ацеток- симетил, метоксиметил (1- метил-1,2,3,4-тетразол- )тиометил или (2-метил- 5-оксо-6-гидрокси-2,5-дигид ро-1,2,4-триазин-3 ил)тио- метил,

отличающийся тем, что

соединение общей формулы

RI ,

i (

Н-ч-f оИуХ

С02Н

где Ц имеет указанные значения; X - имеет приведенные для X значения при условии, что R.2 - метил,

обрабатывают галоидирующим агентом в органическом растворителе, образующееся соединение общей формулы

где R,

и X имеют указанные значения;

Aq - галоген, обрабатывают соединением формулы

AMgHal где А имеет указанные значения;

Hal - галоген,

в присутствии Cul или А1С19 в органическом растворителе при температуре от -78 до -ЬО°С, окисляют образующееся соединение общей формулы

где R , А и X

имеют указанные значения,

надкислотои или ее солью при темпера- о,

туре от О С до комнатной и в случае необходимости целевой продукт, в котором Rg - метил, обрабатывают N- бромсукцинимидом в присутствии od ,oi

азо-бис-изобутиронитрила в органическом растворителе при температуре кипения с обратным холодильником и в случае необходимости образующийся целевой продукт, в котором

R - бромметил, обрабатывают уксусной кислотой или ее солью, метанолом или основанием и 5-меркапто-1-метил- 1,2,3 тетразолом, или 3 меркапто- 2-метил-5-оксо-6-бензгидрилокси2,5 Дигидро-1,2,4-триазином и, если необходимо, удаляют бензгидрильную группу с помощью трифторуксусной кислоты в присутствии анизола с получением целевого продукта, в котором R2 -ацетоксиметил, метоксиметил (1-метил-1,2,3,4-тетразол-5 ил)тиометил или (2-метил-5 оксо- 6-гидрокси-2,5-Дигидро-1,2,4-триа- )-тиометил.

w

Соединение

ад V V-rS

оЛ-Ну ОСОСНз Q- X-mpem СцН9

Соединение 51 (хсвязь)19,3

Эталон () 3,2

1750 3018

Химическая Кинетические стаЬиль- параметры ингиби- ность (а) рования HLE (в) с 1/2, ч () (КГ3 S) К™ К0Ј

2,6 3,5

11

18, k