ГИДРОХЛОРИД 3-(2-ПИПЕРИДИНОЭТИЛТИО)-1,2,4-ТРИАЗИНО [6,5-B] ИНДОЛА, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТЬЮ Советский патент 1996 года по МПК C07D487/04 A61K31/53 

Настоящее изобретение относится к новому производному 1,2,4-триазино [6,5-b] индола, обладающему противовоспалительной активностью и которое может найти применение в медицине.

Известны производные 1,2,4-триазино [5,6-b] индола общей формулы

где R, R' алкил, диалкиламиноалкил, обладающие противовирусной активностью [1]
Известен гидрохлорид 3-(2-диэтиламиноэтил)-1,2,4-триазино [5,6-b] индола, повышающий устойчивость организма к гипоксии [2]
Известно применение индометацина (1-n-хлорбензоил-n-метокси-3-индолилуксусной кислоты) в качестве противовоспалительного средства [3]
Цель изобретения расширение арсенала средств воздействия на живой организм.

Поставленная цель достигается гидрохлоридом 3-(2-пиперидиноэтилтио)-1,2,4-триазино [6,5-b] индола

обладающим противовоспалительной активностью.

Способ получения соединения по изобретению аналогичен известному [1] и включает взаимодействие 2,3-дигидро-1,2,4-триазино [6,5-b] индолтиона с гидрохлоридом 2-пиперидиноэтилбромида в присутствии избытка щелочи с последующим переводом полученного основания в гидрохлорид действием хлористого водорода.

Нижеследующие примеры иллюстрируют синтез соединения по изобретению и его противовоспалительную активность.

Пример. Смешивают растворы 3 г (14,85 ммоль) 2,3-дигидро-1,2,4-триазино [6,5-b] индолтиона-3 в 450 мл 1 н. едкого натра в 3,2 г (17,38 ммоль) гидрохлорида 2-пиперидиноэтилхлорида в 10 мл и оставляют на 2 суток.

Из раствора выделяется смола малинового цвета. Раствор отделяют от смолы декантацией и экстрагируют хлороформом (100 мл), водный слой отделяют, растворяют в нем 120 г хлорида натрия и вновь экстрагируют хлороформом (100 мл). Хлороформные вытяжки объединяют, растворяют в них смолу и сушат над сульфатом натрия. Раствор фильтруют и насыщают безводным хлористым водородом. При этом на стенках колбы образуется красное смолообразное вещество. При растирании с 6 мл метилового спирта продукт реакции превращается в оранжевый кристаллический порошок. Вещество отфильтровывают, промывают хлороформом (2 х 5 мл) и эфиром (10 мл) и сушат в вакууме над фосфорным ангидридом. Получают 3,52 г (75,7%) гидрохлорида 3-(2-пиперидиноэтилтио)-1,2,4-триазино [6,5-b] индола, после перекристаллизации из смеси изопропилового спирта с водой 8:1 (31,8 мл/г) бледно-желтые кристаллы, т. пл. 243^o. Выход при перекристаллизации 78% Легко растворяется в воде, в безводном спирте умеренно растворяется на холоде, легко при нагpевании, в изопропиловом спирте трудно растворяется и при нагревании. Вещество устойчиво при хранении, негигроскопично.

Вещество однородно по данным тонкослойной хроматографии. Для его очистки достаточна 2-х кратная перекристаллизация.

Условия тонкослойной хроматографии. Адсорбент окись алюминия, растворитель для нанесения метиловый спирт, подвижный растворитель - бензол-спирт, 10: 1, Rf 0,41. Адсорбент силуфол, растворитель для нанесения - метиловый спирт, подвижный растворитель бензол-ацетон-эфир 18% водный аммиак, 15,3:6: 1:0,3, нижний отфильтрованный слой, Rf 0,32. Вещество как в видимом, так и в УФ-сфете не содержит примесей, в том числе исходных веществ.

Строение вещества подтверждается данными элементного анализа, а также УФ-спектром и данными потенциометрического титрования щелочью в водном растворе.

Найдено, Cl 10,46; 10,34; N 19,87; 19,65; S 8,76; 8,84; М 346. C₁₆H₂₀ClN₅S.

Вычислено, Сl 10,14; N 20,02; S 9,16; М 350.

УФ-спектр в воде, λ_макс., нм (lgE):215(4,252), 265(4,440) 300(3,750), 334(3,956), 412(3,173). Спектр снят на приборе СФ-20. Он сходен со спектром 3-метилтио-1,2,4-триазино [6,5-b] индола, положение полос поглощения характерно для производных 1,2,4-триазино [6,5-b] индола с ароматическим строением триазинового ядра.

Острая токсичность
Определение острой токсичности проводилось на белых мышах массой 18-20 г при внутрибрюшинном введении препарата в виде 1% водного раствора. В данных условиях опыта LD₅₀ для препарата составляет 156 мг/кг±7,7.

Внутрибрюшинное введение препарата в дозе 5 и 15 мг/кг в течение шести дней не показало каких-либо видимых токсических реакций со стороны желудочно-кишечного тракта, а также общего состояния животных. Изъязвления слизистой желудка и кишечника отмечено не было. Напротив того, у животных, получавших индометацин, наблюдались диспептические расстройства и изъязвления слизистой желудочно-кишечного тракта. Животные, которым вводился индометацин в дозе 20 мг/кг, погибли на 3-4 сутки.

Противовоспалительная активность
Противовоспалительное действие препарата изучалось на белых крысах массой 180-200 г и проводилось на моделях термического ожога, асептического воспаления по методу "ватной гранулемы" и "адреналинового" отека легких.

На модели термического ожога о развитии воспаления судили по увеличению объема конечности крыс после погружения ее на одну минуту в воду, нагретую до 51^oС. Объем измеряли онкометрически через 0,5; 1, 2, 4 и 24 ч. Объем конечности до ожога принимали за 100% Препарат вводили внутрибрюшинно за 1 ч до ожога в дозе 15 мг/кг. В контрольную группу входили животные, которым вводился физиологический раствор. Для сравнения активности препарата был поставлен эксперимент на животных, которым вводился индометацин в дозе 20 мг/кг. Следует отметить, что в этой дозе индометацин уже проявляет токсическое действие двигательная активность была значительно угнетена.

В ходе экспериментальной работы установлено, что исследуемый препарат в дозе 15 мг/кг в виде 1% водного раствора проявляет выраженное противовоспалительное действие. На протяжении 24 ч воспаление развивалось очень медленно. В данной дозе препарат проявляет выраженное действие уже через 0,5 ч и сохраняет его в течение всего срока наблюдения. Через 0,5 ч препарат снижает прирост объема конечности в 3 раза в сравнении с животными контрольной группы и 1,8 раза в сравнении с индометацином. Через 1 ч прирост объема конечности крыс у контрольной группы был в 3,5 раза больше, чем у животных, которым вводился препарат, через 2 ч в 2,2 раза, через 4 ч 2,5 раза, через 24 ч 2,5 раза исследуемый препарат активнее индометацина. Препарат в дозе 15 мг/кг обладает более выраженным противовоспалительным действием, чем индометацин в дозе 20 мг/кг. При этом препарат не оказывает видимого токсического действия в противовес индометацину.

При изучении влияния препарата на экссудативные и пролиферативные компоненты асептического воспаления по методу "ватная гранулема" препарат вводился в дозах 5 и 15 мг/кг в виде 1% водного раствора в течение 3-х дней после операции. В конце опыта животных забивали, гранулемы взвешивали в свежеотсепарированном и в высушенном до постоянной массы состоянии. Изучение активности препарата проводилось в сравнении с контрольной группой животных, куда входили животные, получавшие физиологический раствор, и группа животных, которым вводился индометацин в дозе 1 и 20 мг/кг. Результаты экспериментов показали, что препарат в дозе 5 и 15 мг/кг значительно снижает образование жидкости во влажной гранулеме и разрастание соединительной ткани, причем наиболее активной является доза 15 мг/кг. При введении препарата в дозе 5 и 15 мг/кг в течение шести дней не отмечено видимого токсического действия, в том числе действия на желудочно-кишечный тракт.

Отек легких вызывался подкожным введением 0,05% раствора адреналина гидрохлорида в дозе 5 мг/кг. О развитии воспалительного процесса делали заключение по величине "коэффициента отека легких", который представляет собой отношение массы легких в граммах к 100 г массы животных. Препарат вводился однократно с профилактической целью за 1 ч до введения адреналина гидрохлорида, в виде 0,5% водного раствора внутрибрюшинно. Препарат в дозе 50 мг/кг увеличивает легочный коэффициент лишь на 13,8% в сравнении с исходным, а индометацин на 66,3% в той же дозе.

Соединение по изобретению обладает выраженным противовоспалительным действием, не уступающим и даже превосходящим по активности широко применяемый индометацин, и может найти применение в медицине.

Гидрохлорид 3-(2-пиперидиноэтилтио)-1,2,4-триазино[6,5-b]индола

обладающий противовоспалительной активностью.

Гидрохлорид 3-(2-пиперидиноэтилтио)-1,2,4-триазино[6,5-b]индола

обладающий противовоспалительной активностью.