2,3-ДИФЕНИЛТИАЗОЛО (3',2',2,3)(1,2,4)ТРИАЗИНО (6,5-В) ИНДОЛ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТЬЮ Советский патент 1996 года по МПК C07D513/14 A61K31/53 

Настоящее изобретение относится к новому производному тиазоло(3',2', 2,3)(1,2,4)триазино(6,5-b)индола, обладающему противовоспалительной активностью, и которое может найти применение в медицине.

Известен 2,3-дифенилтиазоло(3',2',2,3)(1,2,4)триазино(5,6-b)индол

обладающий противовоспалительной активностью [2]
Известно использование индометацина (1-n-хлорбензоил-n-метокси-3-индолилуксусной кислоты) в качестве противовоспалительного средства [2]
Цель изобретения расширение ассортимента средств воздействия на живой организм.

Поставленная цель достигается 2,3-дифенилтиазоло(3',2', 2,3)(1,2,4)триазино(6,5-b) индолом

обладающим противовоспалительной активностью.

Способ получения соединения по изобретению аналогичен известному [1] и включает конденсацию 2,3-дигидро-1,2,4-триазино(6,5-b)индолтиона-3 с бромистым дезилом и последующую циклизацию 3-бензоилфенилметилтио-1,2,4-триазино(6,5-b)индола полифосфоpной кислотой при 155^oC.

Нижеследующие примеры иллюстрируют синтез целевого соединения и его противовоспалительную активность.

П р и м е р. Смешивают 2,02 г 2,3-дигидро-1,2,4-триазино(6,5-b)индолтиона-3, 3,1 г бромистого дезила и 50 мл безводного спирта и при перемешивании кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч. После остывания нейтрализуют концентрированным водным аммиаком( примерно 0,8 мл). При этом окраска осадка изменяется от оранжевого до зеленовато-желтого, а окраска раствора от бордовой до коричневой, фильтруют осадок, промывают спиртом (2х5 мл), эфиром (2х15 мл) и сушат под вакуумом над фосфорным ангидридом при 80^oC. Выход 3-бензоилфениметилтио-1,2,4-триазино(6,5-b)индола 3 г (76% от теор.). Т. пл. 227^oC.

После переосаждения из диметилформамида водой мелкие зеленовато-желтые кристаллы, т. пл. 229,5^oC. Выход при переосаждении 90%
К 3 мл 87% фосфорной кислоты при интенсивном перемешивании и охлаждении во льду без доступа влаги постепенно прибавляют 4 г фосфорного ангидрида и нагревают до 100^oC в течение 20 мин, прибавляют 0,9 г тонкоизмельченного 3-бензоилфенилметилтио-1,2,4-триазино(6,5-b)индола, нагревают до 155^oC и перемешивают при этой температуре в течение 5 ч. Полученную вязкую жидкость медленно приливают к 1 кг смеси воды со льдом. При этом образуется оранжевый кристаллический осадок. Добавляют порошкообазный карбонат калия до рН 8 (около 10 г), окраска осадка переходит в темно-зеленую. Фильтруют, осадок многократно промывают водой и сушат под вакуумом над фосфорный ангидридом при 80^oC. Выход продукта реакции 0,81 г (90% от теор.), т. пл. 251-253^oC. После перекристаллизации из диметилформамида (около 13 мл на 1 г) темно-зеленые кристаллы, т. пл. 267^oC. Выход при перекристаллизации 75%
Не растворяется в воде, трудно растворяется в ацетоне, спирте и ацетонитриле, на холоду растворяется в диметисульфоксиде, при нагревании в бутиловом спирте, ацетонитриле и пиридине. Вещество устойчиво при хранении, негигроскопично.

Вещество однородно по данным тонкослойной хроматографии.

Условия тонкослойной хроматографии.

Адсорбент окись алюминия II степени активности, растворитель для нанесения ацетон, подвижный растворитель хлороформ-спирт, 20:1,R_f0,54. Вещество как в видимом, так и в УФ-свете не содержит примесей, в том числе исходных веществ. Строение соединения подтверждается данными элементного анализа, а также ИК- и УФ-спектров.

Найдено, C 72,76, 72,61; Н 3,94, 3,9, N 15,11, 15,03; S 8,12, 8,36.

C₂₃H₁₄N₄S.

Вычислено, С 72,00; Н 3,73; N 14,80; S 8,47.

УФ-спектр: λ_макс. нм. (lg ε), 264 (4,55), 318 (4,12), 394 (3,38)
Спектр измерен для 3,64•10^-5М. раствора в спирте, содержащем 0,16% диметилсульфоксида по объему, на приборе СФ-8. Спектр резко отличается от спектра исходного вещества и сходен со спектром 3-метилтио-1,2,4-триазино(6,5-b)индола, что согласуется с алкилированием по атому серы. Положение полос в спектре характерно для производных 1,2,4-триазино(6,5-b)индола с ароматическим строением триазинового ядра.

Острая токсичность.

Определение острой токсичности проводилось на белых мышах массой 18-20 г при внутрибрюшинном введении препарата в виде 1% раствора в диметилсульфоксиде. В данных условиях опыта DL₅₀ для соединения по изобретению составляет 116,7 мг/кг + 9,6, для известного производного триазино (6,5-b)индола 200 мг/кг ± 21,6.

Внутрибрюшинное введение соединения по изобретению и вышеуказанного известного соединения в дозах 5 и 10 мг/кг в течение шести дней не показало каких-либо видимых токсических реакций со стороны желудочно-кишечного тракта, а также общего состояния животных. Изъязвление слизистой желудка и кишечника отмечено не было.

У животных, получавших индометацин, наблюдались диспепсические расстройства и изъязвления слизистой желудочно-кишечного тракта. Животные, которым вводился индометацин в дозе 20 мг/кг, погибли за 3-4 сутки.

Противовоспалительная активность.

Противовоспалительная активность изучалась на белых крысах обоего пола массой 180-200 г на модели асептического воспаления по методу ватной гранулемы и модели отека легких, вызванного п/к введением адреналина гидрохлорида.

Данные, полученные при введении соединения по изобретению, сравнивались с данными контрольной группы животных и с результатами экспериментов при введении известного производного триазина (5,6-b)индола и индометацина.

При изучении влияния соединения по изобретению на экссудативные и пролиферативные компоненты асептического воспаления по методу ватной гранулемы вещество вводили в дозе 5 и 10 мг/кг в виде раствора в диметилсульфоксиде (ДМСО) с лечебной и лечебно-профилактической целью.

В первой серии экспериментов испытуемое вещество вводили в течение трех дней после операции, во второй три дня до операции и три дня после операции. В конце опыта животных забивали, гранулемы взвешивали в свежеотсепарированном виде и в высушенном до постоянного веса.

Изучение активности препарата проводилось в сравнении с известным производным триазино(5,6-b)индола в дозе 5,10 и 20 мг/кг в ДМСО индометацином в дозе 1 и 20 мг/кг, который растворяли в 2,5% растворе натрия карбоната и вводили внутрибрюшинно.

Результаты экспериментов показали, что соединение по изобретению и известное производное триазино(5,6-b)индола в дозах 5 и 10 мг/кг значительно снижают образование жидкости и разрастание грануляционной ткани.

Соединение по изобретению, введенное с лечебной целью в дозе 5 мг/кг, снижает образование жидкости во влажной гранулеме в 1,8 раза, а в дозах 10 мг/кг в 2,8 раза в сравнении с животными контрольной группы, которым вводился диметилсульфоксид. Наиболее активной оказалась доза, равная 10 мг/кг, препарат в этой дозе, вводимый с лечебной целью, снижает образование жидкости во влажной гранулеме в 2,5 раза в сравнении с индометацином.

При введении известного производного триазино(5,6-b)индола с лечебной целью в дозе 5 мг/кг снижается образование жидкости во влажной гранулеме в 2,2 раза, в дозе 20 мг/кг в 2,3 раза, а в дозе 10 мг/кг в 2,5 раза в сравнении с животными контрольной группы, которым вводился диметилсульфоксид.

Наиболее активной для него является доза, равная 10 мг/кг. В дозе 10 мг/кг при применении с лечебной целью он снижает образование жидкости в воспаленном участке в 2,4 раза в сравнении с индометацином.

Соединение по изобретению обладает активным действием и на пролиферативные компоненты в обеих дозах. В дозе 5 мг/кг оно снижает образование грануляционной ткани в 1,9 раза, а в дозе 10 мг/кг в 3,1 раза в сравнении с животными контрольной группы. Известное производное триазино(5,6-b)индола в этих же дозах снижает соответственно в 2,2 и 2,3 раза. По сравнению с индометацином активность соединения по изобретению в дозе 10 мг/кг на фазу пролиферации в 2,8 раза выше, известного производного триазино(5,6-b)индола в 2,9 раза.

При введении препарата с лечебно-профилактической целью три дня до операции и три дня после операции, ежедневно, однократно, на экссудативную и пролиферативную форму воспаления наиболее выраженным действием, как и при введении с лечебной целью, обладает доза для соединения по изобретению и известного производного триазино(5,6-b)индола, равная 10 мг/кг. Введенные с лечебно-профилактической целью в дозе 10 мг/кг они снижают образование жидкости во влажной гранулеме в 3 раза в сравнении с животными контрольной группы и в 2,8 раза в сравнении с группой животных, которым вводился индометацин.

Соединение по изобретению обладает выраженным действием и на пролиферативные компоненты, в дозе 10 мг/кг оно увеличило привес ватного шарика лишь на 0,0076 + 0,0002, что в 3,5 раза меньше чем в контрольном опыте у группы животных, которым вводился диметилсульфоксид, и в 3 раза меньше в сравнении с индометацином. Известное триазино(5,6-b)индола в этой же дозе обладает такой же активностью. При дозе 5 мг/кг скопление экссудата во влажной гранулеме в 2,1 раза меньше, чем в контрольном опыте и в 1,9 в сравнении с индометацином, а образование грануляционной ткани соответственно снизилось в 2,1 раза с контролем и 1,9 в сравнении с индометацином.

Определить же действие индометацина с лечебно-профилактической целью в дозе 20 мг/кг не удалось, так как животные погибали на 3-4 сутки, наступал перитонит, вызванный утончением или перфорацией тонкой кишки.

Изучение соединения на модели адреналинового отека легких показало, что соединение по изобретению в дозе 10 мг/кг обладает выpаженным противовоспалительным действием.

Отек легких вызывался п/к введением 0,05% раствора адреналина гидрохлорида в дозе 5 мг/кг. О развитии воспалительного процесса делали заключение по величине коэффициента отека легких, который представляет собой отношение массы легких в граммах к 100 г массы животного.

Соединение в дозах 5-10 и 20 мг/кг вводилось однократно с профилактической целью за час до введения раствора адреналина гидрохлорида в виде 0,25% раствора на диметилсульфоксиде внутрибpюшинно. Во всех трех дозах оно активнее индометацина. Индометацин проявляет свое незначительное действие на модели адреналинового отека легких только в дозе 20 мг/кг, легочный коэффициент равен 1,21±0,03.

Наиболее активной дозой соединения на данной модели воспаления является доза, равная 10 мг/кг, при введении которой легочный коэффициент равен 0,93±0,01.

Исходный легочный коэффициент равен 0,80±0,01.

При введении известного производного триазино(5,6-b)индола в дозах 5, 10, 20 и 50 мг/кг оно оказывается активнее индометацина. Наиболее активной для него является доза 5 мг/кг, при введении которой легочный коэффициент равен исходному 0,80±0,01, в дозе 1 мг/кг равен 0,83±0,01, в дозе 10 мг/кг равен 0,88 ±0,01, в дозе 20 мг/кг 0,92±0,01, в дозе 50 мг/кг 0,95±0,01.

Таким образом, соединение по изобретению обладает более высокой противовоспалительной активностью и является менее токсичным, чем индометацин, и по противовоспалительной активности практически не уступает известному производному триазино(5,6-b)индола.

2,3-Дифенилтиозоло(3', 2', 2, 3)(1, 2, 4)триазино(6,5-в)индол

обладающий противовоспалительной активностью.

2,3-Дифенилтиазоло(3', 2', 2, 3)(1, 2, 4)триазино(6,5-в)индол

обладающий противовоспалительной активностью.