Способ определения декаметоксина Советский патент 1983 года по МПК G01N21/78 

3

СПОССЖ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДЕКАМЕТСЖСИНА, вклкпаюший обработ ку аналнзнруемого вешества химическим реагентом в присутствии алифатического спирта, о ичаюшийся тем, что, с целью повышения чувствич-гельности и избирательности способа., анализируемое вещество обрабатывают расгворок з, аихлор 2, 4, 5, 7тетраиоафлуоресоеина в присутствии этанола при рН 2,5-4,0 с послеауюшим фотометрированием полученного раствора.

ю

о ;D Изобретение относится к аналагической химий органических соединений в можег быть использовано цля качесгвен кого и количественного опреаеления декаме токсина. Декаме токсин {1, 1О-ч1екаме тилен- бис М-аиме тил-(карбментоксиме твл ) аммони дихлорид)- производное четве{ тичных аммониевых оснований, является сильнодейсгвующим лекарственным ве-. ществом, обладающим антибактериальной и фунгицидной активностью. Известен способ определения декаметоксина, заключакндийся в том, что к 1 мл 1%-«ого раствора препарата прибавляют 2 капли 5%няого раствора феррицианида калия, при этом образуется творожистый ocaaojf желто-зеленого цвета, нерастворимый в растворах гидро окиси натрия, аммиаке и разведенной уксусной кислоте. Чувствительность -, 1О мг/мл 1 . Ранако согласно этому способу реак ция не избирательна, ее дают и другие близкие по строению лекарственные вещества, производные четвертичных аммониевых оснований. Наиболее близким к изобретению по гохнической сущности и достигаемому результату является способ определения декаметоксина путем обработки рА твора анализируемого вещества в метилово спирте растворами азотной кислоты, нитрата серебра, железо-аммониевых квасцов с последующим титрованием полученного раствора роданидом аммония f2 Недостатком способа является его невысокая чувствительность, йе лоаволя щая анализировать 0,01-0,05%-ные растворы декаметоксина, приготовленны на изотоническом растворе (О.9%нном хлориде натрий). Метод не является избирательным. Аналогично определяют и другие соли (хлористые) четвертичных аммониевых оснований. Целью изобретения является повьщ1е- ние чувствительности и избирательности определения декаметоксина. Поставленная цель достигается тем, что согласно спосоеу определения декаметоксина, анализируемое вещество, обрабатывают раствором 3, 6 - дихлор2, 4, 5, 7-тетра-иодфлуоресцеина в при сутствии этанола при рН 2,5-4,0 с последующим фогометрированием полученно го раствора. В этих условиях декаме токсин с реагентом образует окращенное в краснофиолетовый цвет соединение (Х ,макс 520-530 нм). Раствор реагента (без декаметоксина) имеет оранжевую окрао ку (X макс 505-51О мн). Определение декаметоксина на спектрофотометре целесообразно провопить при нм, так как в этой области спектра разность оптических плотностей ассоциата и реагента наибольшая, а поглощение реагента незначительное. Устойчивость растворов ассоциата декаметоксина с з, б-дихлорр 2, 4, 5, 7-тетра-иодфлуоресцеином (бенгальским розовым А) повыщается при добавлении в раствор 10-20% этанола. Оптическая плотность водно-этанольных растворов постоянна в течение не менее 1 ч. Соотнощение ДКМгБРА в окращенном ассоциате равно 1:1 (ДКМ декаме токсину БРА - бенгальский розовый А). За предел обнаружения принимается минимальная концентрация декаме- : токсина, вызывающая сдвиг оптической плотности на 0,О2 по отнощению к оптической плотности контрольного- опыта. Способ позволяет определять микро- граммовые количества декаметоксина (чувствительность - О,3 мкг/мл). Прямолинейная зависимость оптической плотности растворов наблюдается в области 0,,4 мкг/мл. Метод является избирательным, так как определение возможно в присутствии других близких по строению лекарственных веществ, производных четвертичных аммониевых основаНИИ (прозерин, дитилин, бензамон, бензогексоний, метацин). Определение декаметоксина с бенгальским роЬовым А воз vfoKHou изотонических растворах, так как хлорид натрия (0,9%) не мещает определению. В таблице приведены результаты анализа раствора цекаметоксина (ДКМ) с бенгальским розовым А предлагаемым способом и статистическая обработка полученных данных. Метрологическая характеристика указывает на хорощую воспроизводимость результатов анализа. Относительная погреш-, ность находится в пределах точности фотометрического метода. Пример. 12,5 мг фармакопейного препарата декаметоксин растворяют в дистиллированной воде, раствор переносят в мерную колбу емкостью 25 мл и объем колбы доводятводой до метки (раствор содержит 500 мкг декаметоксина в 1 мл1 К 0,2 мл полученного раствора прибавляют 0,5 мл«10 молярного водного/раствора бенгальского ро аовогб А, 2,5 мл этанола, 5 мл цн ратного буферного раствора (рн 3,0) в водой повоаят объем раствора do 25 мл. В присутствии аекамегоксина раствор приоб ретает красно йолетовую 6 краску (качв ственная реакция на ае|саметоксин, так как ее не пают близкие по строенто лекарственные вещества, провэвоаные четверТЕчньЪс аммониевьрс оснований нрозерин, бензамон, бензогекбоний, мета дин, дитилив). Раствор кон1 рольного , опыта имеет оранжевую QitiiacKy. , Для количественного определения в мерную долбу емкостью 25 мл берут

аликвотн}- часть анализируемого рестврра, содержащего 7,5-85,0 мкг дела2O,3j 20,020,1 О,15

20,3} 19,7

40,2; 40,2f39,9 6,17

39,8Г39,5

60,5 60,0,-6О,5 0,21

61,О; 60,5

метоксина. Затем прибавлоот у1сазашшв , количества реагента, этанола, нитратного буферного раствора и водой довод5гг объем; , колбы до метки. Оптическую плотность растворов на спектрофотометре (например СФ-1в при 535 нм) илв на фотоэлектрокопориметре, например ФЭК-56 (светофильтр № б) в кюветах с см относительно раствора сравнения не содержащего деквметоксина. Количество декаметокснна в растворе-определяют по градуировочному графику. Растворы градуировочного графика готовят анешогично с содержанием декаметоксина от 7,5 до 85,О мкг в 25 мл раствора. В этой о&ласти конаензфацвй декаметоксина растворы подчшшются основному свётопоглощения.

О,48

2,39

1,35

0,54

О,67 1,11