Способ получения производных димера Винка или их солей Советский патент 1983 года по МПК C07D519/04 A61K31/475 A61P35/00 

Изобретение относится к способу получения новых производных димера Винка общей формулы - - Cflg-tHj t- 0-(Нз (iHa-o i--8U- olit il « О где R - ОН или фцетоксигруппа, обла обладающих противоопухолевой активностью. Известны 3-ка{)боксамидные производные винкалейкобластина (ВЛВ) которые получают путем взаимодействия соответствующего азида с производным амина в присутствии метиленхлорида или этиленхлорида при комнатной температуре t « : Цель изобретения - получение новы производных диме{за Винка, обладающих противоопухолевйр активностью. Поставленная цель достигается согласно способу; получения димера Винка общей формулы J,, заключающемуся в том, что виркалейкобластинили 4-дезацетилифинкалейкобластин кар боксазид)подвергают взаимодействию Ь 2-хлорэтиламинЬм и полученный цёле вой продукт выделяют в свободном вид или в виде солей и при желании соеди нение формулы I, где Л - ацетоксигруппа, дезацетилируют с получением соединения форму|лы I ,, где R - оксигруппа, или при желании соединение формулы I, где R - оксигруппа, ацети лируют с получением соединения форму лы I , где R - ацетоксигруппа, с noi следующим выделением целевых соедине ний в свободном виде или в виде соле Пример 1. Раствор 531 мг 4-дезаце ил ВД1Б-3-карбоксазидаполучают известным методом и растворяют в 5 мл ТГФ. К эт|ому раствору добавляют избыток 2-зслорэтиламина гидрохл рида и 7 МП три тиламина. Добавляют 5-10 МП хло|)ист4го метилена с целью растворения азида. Реакционную смесь перемешивают в течение 72 ч при окружающей температуре в темноте. Ана ЛИЗ аликвоты-ме- одом тонкослойной хроматографии н обнаруживает пятна исходного вещества. Добавляют 200 мл воды и водную cijiecb экстрагируют четыре раза 200 мл порциями хлористо .го метилеНа. Ме-гиленхлоридные экстра ты объединяют и дважды промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Метиленхлоридный раствор сушат, а хлористый метилен удаляют в вакууме. Полученный таким образом остаток содержит 4-дезацетил-ВЛБ-3-(2-хлорзтил) карбоксамид весом 4,5 8,1 мг ыход 90%) и обладает следую1аими характеристиками ; Масс-спектр: пики при 815 и 779J ИК-спектр (хлороформ): пики при 3550, , 3400, 1730, 1665 и 1516 и 740 .см ; ЯМР (СДС1э) с 0,87, 0,92, 2,79, 3,41, 3,57, 3,63, 3,72, 3,75, 4,15, 5,75, 6,03, 6,55, 7-8, 798, 9,6 ч/млн. Полученное соединение ацетилируют с использованием избытка ангидрида кислоты в хлористо м метилене и при перемешивании пол енной в результате смеси в течение 27 ч при температуре окружающей среды (около-25С) ВЛБ-3- (2-хлор-этил) карбоксамид. ВЛБ-3-(2-хлорэтил)карбоксамид представляет собой антимитотическое соединение, которое оказывает ингибирующее действие на рост злокачественных клеток. Такую активность устанавливали в стандартных опытах по митотическому ингибированию, в которых использовали клетки яичника хомячка. ВЛБ С-3 N-(2-хлорэтил)карбоксамид имел митотический индекс + (15-25% ингибирование) при 2,0 х 10 мкг/мл (то же самое и у ВЛВ). Основания производных димера Винка и их соли, полученные предлагаемым способом, проявляют также активность против трансплантированных опухолей у кышей. Для демонстрации такой активности используют методику, включакмт1ую применение лекарства внутрибркяиинным или орсшьным путем (при выб- ранных уровнях дозировки) против ГЛС (лимфосаркома Гарднера), В меланомы, 755 аденокарциномы и CjH грудной карциономы. , . . В таблице представлены результаты испытаний активности, при которых мыааъ с трансплантированной опухолью подвергали воздействию предлагаемым соединением. Дозировочный режим: ежедневно в течение 7-10 дней после инокуляции и каждый четвертый день (три дозы), считая с третьего дня преле инокуляции. При использовании новых соединений в качестве противоопухолевых агентов у млекопитающих можно исполь зовать как парентеральный, так и оральный методал введения. Обычно ле 1карство смеишвают с фармацевтически применимым носителем. При парентеральном введении лучше всего вводить лекарство внутривенно, хотя для мелких

мпекопитаю11их например, мышей, може использоваться и внутрибрюшинный мар:шрут. Для внутривенного введения используют изотонический раствор, содержащий 1-10 мг/мл соли алкалоидного основания. Лекарство применяют при дозировках 0,01-10 мг/кг, предпочтительно 0,05-1 мг/кг живого веса млекопитающего, один раз или дважды в неделю, или каждые две недели в зависимости от активности и токсичности лекарства.

В другом случае терапевтическую дозу определяют с учетом площади поверхности тела - в интервале О,110 мг/м. поверхности тела млекопитающего, причем лекарство применяют ежедневно в течение 7 или 17 дней или трижды в неделю. Для орального применения необходимое количество фармацевтически применимой соли, образованной с нетоксичной кислотой, предпочтительно сульфата, смешивают с крахмалом или другим инертным фармацевтически применимым экспиентом и смесь помещают в желатиновые капсулы, каждая из которых содержит 7,5-50 мг активных ингредиентов. Аналогично антииеопЛастично активная соль может быть смешана с крахмалом, связующим веществом и смазывающим веществом и полученную смесь таблетируют, причем каждая из таблеток содержит 7,5-50 мг соли. Такие таблетки можно подсчитать или применять раздельные дозировки. При внутривенном применении используют изотонические растворы, содержащие 1-10 мг/мл нетоксичной соли, лекарство применяют в количестве 0,01-1 мг/кг, предпочтительно О,1-1 мг/кг веса тела млекопитающего, один или два раза в неделю или один раз каждые две недели. Оральная дозировка составляет 2-10 внутривенных дозировок, причем низ11те уровни дозировки являются эффективными против большого числа опухолей.

Предлагаемые соединения отличаются по их противоопухолевому спектру действия от ВЛБ, лейрокристина и виндезина, причем противоопухолевый спектр действия таких соединений отличается и друг от друга, т.е. одно лекарство может быть более эффективным против некоторьрс опухолей или ioiaccoB опухолей и менее эффективным против других.

Однако при использовании 2-(хлорэтил)карбоксамидов в клинических условиях онколог может применять одно из таких соединений вначале тем же способом и против тех же типов опухолей , что и виндезин, лейрокристин и ВЛБ. Различия дозироаок основываются на относительной онкологической мощности и токсичности. г

йдсокая степень оральной активности ВЛБ-3-(2-хлорэтил)карбоксамиДа и его 4-дезацетилпроизводного делает

0 их особенно желательными онкологическими агентами для использования на людях и подходящими для клинических испытаний.

Парентеральное применение.

5 Препарат для парентерального применения на основе 4-дезацетил-ВЛВ-3(2-хлорэтил)карбоксамид сульфата готовят с использованием стерильных методик. Маннит в количестве 500 мг растворяют в 100 мл стерильной дис0тиллированной не содержащей пирогена воды. В таком растворе маннита растворяют 50 мг 4-дезацетил ВЛБ-3-(2хлорэтил)-карбоксамид сульфата. Раствор 4-дезацетнл-ВЛВ-3-(2-хлорэтил) карбоксг1мида разливают в 5 мл широкогорлые ампулы, по 2 мл в ампуле, и закрывают пробками, частично погруженными в ампулы. Содержимое ампул охлаждают до и затем помещают

0 в вакуумную печь, в которой раствор лиофилизируют. После высушивания содержимого ампулы пробки заталкивают в ампулу и сверху запрессовывгиот алк шниевый колпачок для поддержки

5 пробки. Ампулу хранят при температуре для обеспечения стабильности.

Для приготовления раствора для антинеопластИчного использования, в

Q ампулу добавляют бактериостатическую воду для инъекции или бактериостатический раствор хлористого натрия для инъекции в количестве 2 мл. Наполненную ампулу подвергают мягкому встряхиванию и полученный раствор

5

готов для применения.

При приготовлении парентеральных растворов используют 1-20 весовое количество маннита по отношению к 4-дезацетил-ВЛБ-3-(2-хлорэтил)карбоксамид сульфату. Сульфат ВЛБ-3-(2хлорэтил)карбоксамида также подходит для парентерального применения как и другие фармацевтически применимые соли присоединения кислоты ВЛБ и 4дезацетил-ВЛБ-3- {2-хлорэтил) карбокса-т мида.

Способ получения производных димера Винка общей формулы - H2-UHs (1) . %-0 СП С-«а- « или их солей, где ft - ОН или ацетоксигруппа, от л и ч а ю щ и.и с я тем, что вйнкалейко 5ластин- или 4-деэацетилвинкалейкобластинкарбрксазид подвергают взаимодействию с 2-хлорэтиламином и полученньА делевой продукт выделяют в свободном виде или в виде солей и. при желании соединение форму to лы 1, где R - ацетоксигруппа, дезацетилируют с получением соединения формугал 1, где R - оксигруппа, или при желании соедииение формулы , где ft - оксигруппа, ацетипируют с получением соединений формулы I, где ft ацетоксигруппа, с последующим выделением целевых соединений в свободном виде или в виде солей.