Способ получения димера Винка или его фармацевтически приемлемых солей Советский патент 1985 года по МПК C07D519/04 

Изобретение относится к способу получения нового прои-зводного димера общей формулы -N M--a 7-cvi3 Х1- - ° ч 7 1пон СНз 0 C-NH-C2H4-C1 где R/ - гидроксигруппя или ацетил, или его фармацевтически при емлемых солей обладающих противоопухолевым действием. Цель изобретения - получение новых производных димера Винка, облад ющих большей пероральной активностью в сравнении с известньми димерами Винка подобной активности. Пример 1. Готовят раствор, содержащий 91,9 мг 4-дезацетил-В,ПБ-3-(2-гидроксиэтил)карбоксамида в 2 мл хлористого метилена и 6 мл чет реххлористого метилена. Избыток три фенилфосфина (69,6 кг) добавляют к реакционной системе и полученную смесь перемешивают при температуре окружающей среды (около 25°С). Через несколько часов на стенках колб отлагается осадок, поэтому добавляю 4 мл хлористого метилена с целью ег растворения. После перемешивания в течение 24 ч методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) устанавливают, что реакция в основном завершена. Добавляют 20 мл 1 н. водного раство ра соляной кислоты и полученную кис лотную смесь экстрагируют тремя пор циями по 20 мл хлористого метилена. Кислотный слой затем подщелачивают путем добавления 14 н. водного раствора гидроокиси аммония и полученный в результате щелочной слой четы режды экстрагируют порциями хлорист го метилена (по 20 мл) .Такие метилен хлоридные экстракты об7,единяют и су шат. Выпариванием растворителя полу 512 чают 81,0 мг 4-де яа1и--Т 1,п-В,ПВ-3-(2-хлорзтил) карбоксам1Ц1,а (выход 90%). Лцетилированием такого соединения с использованием избытка ангидрида кислоты в хлористом метилене и при перемешивании полученной в результате смеси в тече})ие 27 ч при температуре около получают ВЛБ-3-(2-хлорзтил)карбоксамид. Пример 2. Получение сульфата 3-(2-хлорэтил)карбоксамида винбласти а. 200 мг 1-(2-хлорэтил)карбоксамида винбластина растворяют в 20 мл этанола, pFI понижают до 4,0+0,2 путем прибавления по каттлям раствора серной кислоты в этаноле. Отбирают две капли аликвотной части, разбавляют капли до 1 мл водой и определяют рН по рН-метру. Зтаноловый раствор кислоты выпаривают досуха. Остаток, содержащий сульфат, перекристаллизуют из раст1К)ра этанола. Пример 3. Получение сульфата 4-дезапетил-3-(2-хлорэтил)карбокгамид винбластина. 200 мл 4-дезацетил-3-(2-хлорэтил) карбоксамида винбластина растворяют в 20 мл этанола. Свободное основание растворяют н минимальном количестве этанс1ла. рИ понижают до 4,0 + 0,2 путем добагитения по каплям 2%-ного раствора серной кислоты в этаноле. Отбирают две капли аликвотн.ой части, разбавляют капли до 1 мл водой и затем определяют рН по рН-метру. Этаноловьй раствор кислоты выпаривают досуха. Остаток, содержащий сульфат, перекристаллизуют из раствора этанола. Пример 4. 4-дезацетил-ВЛБ-3-(2-хлорэтил)карбоксамида. Смесь 100 Ml ВЛВ-3-( 2-хлорэтил) карбоксами;т,а, полученного по примеру 1 , 1 5 мл метанола и 30 мл 2 н. гидроокиси натрия нагреван1Т до температуры дефлегмации в течение 50 мин. Затем метанол удаляют под вакуумом и полученный в резу.льтате основной раствор экстрагируют четьфе раза метиленхлоридом. Органический слой отделяют и упаривают под. вакуумом. Полученный остаток сушат азеотропной перегонкой с толуолом и получают 4-дезацетил-ВЛБ-3-(2-хлорэтил)карбоксамид со следующими физическими характеристиками. Масс-спектр: 815 и 779. ИК-спектр (хлороформ): 3550, 347 3400, 1730, 1665, 1615 и 740 см . Я№(СВС,): 0,87i 0,82- 2,79; 3, 3,57; 3,63- 3,72; 3,75; 4,15; 5,75; 6,03; 6,55; 9,6 ч/млн. ,, ВЛБ-З -(2-хлорэтил)-3-спиро-5 -оксазолидин-2 , 4 -дион может быть гидролизован в 4-дезацетиламид по описанной методике. Сравнение активности винбластина и 4-дезацетрт-3-(2-хлорэтил)карбокс амида винбластина в различных опухо лях приведено в табл. 1. Физические свойства 3-(2-хлорэти карбоксамида винбластина. ИК-спектр (хлороформ, СНСТз): 3690, 3600, 1735, 1720, 1680, 1615 1500 см . рКа(66% ДМФ) 4,7; 7,4. ЯМР(360 МГц, CDClj )«4:0,83 0,92 1,33; 2,08, 2,80; 2,83; 3,64; 3,67- 3, 3,98; 5,32, 5,56- 5,86; 6,1, 7,14-; 7,5; 8,06; 10,08. с ямр Виндолиновая часть углерод м.д. СООМе 52,3 ArOCH.j 55,8 d отнесения могут быть обменены. Физические свойства 4-дезацетил- -3т(2-хлорэтил)-карбоксамида винбластина. Масс-спектр: 815 и 779. ИК-спектр (хлороформ): 3550, 3470, 3400, 1730, 1665, 1615 и 740 ЯМР(СПС,): 0,87;- 0,, 79, 3,41. 3,57; 3,63; 3,72; 3,75; 4,15, 4,75; 6,03; 6,55; 7-8,798; 9,6 м.д. ВЛБ-3-(2-хлорэтил)карбоксамид представляет собой антимитотическое соединение, которое оказывает ингибирующее действие на рост злокачественных клеток. Такую активность устанавливают в стандартных опытах по митотическому ингибированию, в которых используют клетчатки яичника хомячка. ВЛБ-З-(2-хлорэтил)карбоксамид имеет митотический индекс+(15-25%-ное ингибирование) при 2,0x10 мкг/мл (то же самое и у ВЛБ). Основания и их соли, полученные предлагаемым способом проявляют также активность против трансплантированных опухолей у мьппей. Для демонстрации такой активности используют методику, включающую применение лекарства внутрибрюшинным или оральным путем, при выбранных уровнях дозировки, против ГЛС (лимфосаркома Гарднера), В| меланомы, 755 аденокарциномы и грудной карцино;. мы. в табл. 2 представлены результаты испытаний указанной активности, при которьпс мьшь с трансплантированной опухолью подвергают воздействию предлагаемого соединения. Пр шеняют следующие дозировочные режимы: еже- дневно в течение 7-10 дней после инокуляции; каждый четвертый день (три дозы), считая с третьего дня после инокуляции.

5

При использовании новых соединений в качестве противоопухолевых агентов у млекопитающих можно использовать как парентеральный, так и оральный методы применения. Обычно лекарство смешивают с фармацевтически применимым носителем. При парентеральном применении лучше всего вводить лекарство внутривенно, хотя в случае мелких млекопитающих, например, мышей, может использоваться и внутрибрюшинно. Для внутривенного применения используют изотонический раствор, содержащий 1-10 мг/мл соли алкалоидного основания формулы I представленной выше. Лекарство применяют при дозировках 0,01-10 мг/кг предпочтительно 0,05-1 мг/кг живого веса млекопитающего, один раз или дважды в неделю, или каждые две недели в зависимости от активности и токсичности лекарства, 71ругой способ применения терапевтической дозы основьшается на площади поверхности тела при дозе 0,1-10 мг/м поверхности тела млекопитающего, причем лекарство применяют ежедневно в течение 7 или 17 дн. или трижды в неделю. Для орального применения подходящее количество фармацевтически применимой соли, образованной с нетоксичной кислотой, предпочтительно сульфата, смешивают с крахмалом или другим инертным фармацевтически применимым экспиентом и смесь помещают в желатиновые капсулы, каждая из которых содержит 7,5-50 мг активных ингредиентов. Аналогично, антинеопластично активная соль может быть сме008516

тана с крахмалом, связующим веществом и смазывающим веществом и полученную смесь таблетируют, причем каждая из таблеток содержит 7,55 50 мг соли. Такие таблетки можно по/усчитывать или применять раздельные дозировки. При внутривенном примеИении используют изотонические растворы, содержаш;ие 1-10 мг/мл нетоксичной соли и лекарство применяют в количестве 0,01-1 мг/кг, предпочтительно 0,1-1 мг/кг веса тела млекопитающего один или два раза в неделю или раз в каждые две недели.

)5 Оральная дозировка составляет 2-10 внутривенных дозировок, причем низшие уровни дозировки являются эффективными против большого числа опухолей .

Предлагаемые соединения отличаются по их противоопухолевому спектру действия от ВЛБ, лейрокристина и виндезина, причем противоопухолевьй спектр действия таких соединений отличается и друг от друга, т.е. одно лекарство может быть более эффективным против некоторых опухолей или классов опухолей и менее эффектиным против других. Однако при использовании 2-хлорэтилкарбоксамидов в клинических условиях онколог может применять одно из таких соединений «начале тем же способом и против тех же типов опухолей, что и виндезин, лейрокристин и ВЛБ. Различия в уровнях дозировок основываются на относительной онкологической мощности и токсичности.

Таблица 1

А - А-дезаиетил-ВЛБ-3(2-хлорэтил)-карбоксамидсульфат В - ВЛБ-3 -(2хлорэтил)-3-спиро-5-оксазолидин-2 ,4 -дионсульфат,| С - винкалейкобластин.

ГР - интраперитонально, РО - перорально,

Таблица 2

3-(2-хлор)карбокс3x3

С, И

2,5x3

2x3

1,5x3

755

1-1,5x3

0,75x3

0,5x3

7,5x3

5x3

3x3

2x10

CLS

1x10

В скаЯклх указано число неопределенно выживших особей.

Токсичный 92 1 58 149 1

Токсичный 76 1 26 I

Токсичный 95 i 81 I

Токсичный 83 1

. Способ получения димера Винка оОгцей ОН -СНг-СНз СНзО I СНз| 0-С-Ш-С2Щ-С1 где R - гидроксигруппа или ацетил, или его фармацевтически приемлемых солей, отличающийся тем, что винбластин-3-