Способ получения производных глюкозамина Советский патент 1983 года по МПК C07H15/00 A61K31/7008 

Изобретение относится к способа получения новых производных глюкоэамина,обладающих ценными фармакологическими свойствами, в частности сильно выраженным повышающим ил1мунитет действием. Известен способ получения соеди нений, расширяющих арсенал средств воздействия на живой организм, путем синтеза последних, ос юванного на известной реакции расщепления глюкофуранозНого цикла под воздействием кислых реагентов 1, Цель изобретения - получение но вых производных глюкозамина. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получени производных глюкозамина общей формулы ... KO )- лоЛ-г / 3iH-CO-Bi Ло-СН Кч 4 I t I 50-1ГН-Ш-СО-Ш1-СН (JH212 « 5 .Р) (L) (D) или фенил; .-апкил где R водород или С.-С2-алкй:Т; водород, С -С -алкил или оксиметил; R. - карбоксил, метоксикарбони карбамоил, Н-(С -С -алкил)-карбамоил, N-бензилили н-карбамоилметилкарба моил; RJ - карбоксил, метоксикарбони карбамоил или N-метилкарб моил, при условии, что алкил R содержит .более 1 атома углерода, если R2 метил или водород, а . и Rj - кар оксил, соединение общей формулы ji Кч El I Г Г (JO-ISH-CH-CO-lSfH-CH- {(5Н2)2-В5 №) (L) (pj где Ки-Кг- имеют указанные значения R - С -С -алкилиден или -циклоалкилиден. обрабатывают кислым ионообменнико или трифторуксусной кислотой в те чение 10-25 ч при комнатной темпе ратуре в 13оде, тетрагидрофуране и/или хлористом метилене. целевой продукт выделяют извес ными- приемами. В качестве ионообменника приме няют такие, которые содержат .груп пы сульфоновой кислоты, например Amberlite IR-120 (стироловая смола с сильно кислыми сульфогруппами) или Dowex 50 (полистиролсульфоновые кислоты). Применяемые при способе исходные вещества можно получать, например, введением ацетамидопептидостатка R2 в соответствующий оксазолин со свободной оксигруппой в цоложении 3 сахарного остатка в одной или нескольких ступенях. Соединения изобретения обладают ценными фармакологическими свойствами, в частности явно выраженным повышающим иммунитет действием. 1. Усиление клеточного иммунитета в живом организме: повыЩение сверхчувствительности типа поздней реакции против овальбумина у морских свинок. Морских свинок (по Pittoright) в первый день начала опытов иммуf изиpyют при помощи 10. мг овальбумина в полном вспомогательном аген те Фрейнда (Freund) путем впрыскивани5т: казкдому животному по 0,1 мл смеси, состоящей из антигена и вспомогательного агента, в обе задние лапы. 4 недели спустя вызывают реакцию кожи путем подкожного впрыскивания 100 мкг овальбумина в 0,1. Ш буферного физиологического раствора и на основании вычисленного через 24 ч по эритремным пятнам и увеличению накожной припухлости реакционного объема определяют количественно. Наблюдаемое через 24 ч (реакция позднего типа) специфическое относительно антигена увеличение, реакционного объема является, мерой распространения клеточного и.ммунитета. Овальбумин слишком слабый иммуноген для применения его как та.кЪвого или в водномасляной эмульсии с неполным вспомогательным агентом (10 ч. раствора овальбумина в 0,9% ИаС1, смешанные с 8,5 ч. байола Т и 1,5 ч. аралцеля А ) для индуцирования реакции позднего типа. Для эффективной иммунизации его нуж:но добавлять в комплектном вспомогательном агенте к микобактериям (5 мг умерщвленных и лиофилизированных М butyricum на 10 МП байола F/аралцеля А). Для доказательства повышаквдего иммунитет действия испытуемых веществ их можно примешивать к антигенно-масляной смеси вместо микобактерий в: дозах 10-100 мкг. Глюкозаминовые пептиды способны подражать действию микобактерий и количественно их превосходить. Значение ED зо-Ю (мкг/животное) в указанном примере составляет по 10, например, в следукадих соединенияХ: 2-бензоилами.но-3-0-{1) -1(D -1-карбамоил-З-карбоксипро ил)-l-кapбaмoилэтилJ-кapбaмoилтил -2-дезокси-1) -глюкоза, 2-беноиламино-3-0-{С1- -1-( D-1-карбамол-3-карбоксипропил)-1-карбамоилэтил -карбамоилметил -2-дезоксиD-глюкоза и 2-ацетамидо-3-0- ь-1(D-1-карбамоил-З-карбоксипропил)карбамоилэтил -карбамоилметил2-дезокси-В-глюкоза.

Значительного усиления поздней еакционной способности против вальбумина можно также добиться тем, что указанное соединение не включают в антигенно-масляную смесь, а вводят подкожно в дозах 10-100 мкг каждому животному в течение нескольких дней после иммунизации (например, в1, 2, 3, 4, 5ибдн.) в растворе поваренной соли.

Это показывает, что указанные соединения значительно повышают клеточный иммунитет как в смеси с антигеном (вспомогательный эффект в узком смысле) , так и при их применении независимоот времени и места впрыскивания антигена (системное повышение иммунитета) .

2. Усиление гуморального иммунитета в живом организме: повышение выработки антител против альбумина сыворотки крови крупного рогатого скота (БСА) у мыши.

Мышей типа NMRI иммунизируют путем впрыскивания им внутрибркшинно 10 мкг свободного от осадка БСА в первый день опыта. Через 9, 15 и 29 дн. берут пробу сыворотки и исследуют ее для установления содержания анти-БСА-антител путем пассивной гемаглютинации. В применяемых дозах растворимый ЕСА субиммунногенный для животных-реципиентов, т.е. он не может вызывать возникновение антител или вызывает возникновение их в незнасительном количестве. Дополнительная обработка мышей определенным, повышающим иммунитет, веществом перед или после введения антигена приводит к повышению титров антитела в сыворотке. Эффект обработки выражается суммой разностей титров logj,, полученной в течение трех дней кровотечения.

Соединения изобретения имеют свой ство при внутрибрюшинном или подкожном применении 100-300 мг/кг на животное в течени.е пяти дней после иммунизации БСА значительно повышать вырабатывание антител против БСА.

Стимулирующее иммунизацию действие названных соединений в противоположность другим бактериальным иммунолептикам (например, LPS из Е. eoli) независимо от антигенов: инъекции новых соединений пов1лшают

анти-БСА-титр при применении их только на иммунизированных БСА мышах. Подкожное введение указанных соединений так же эффективно, как и внутрибрюшинное, т.е. наблюдаемое

действие усиления иьшунности систем-. ное и не зависит от того, как будет введено стимулирующее средство таким же путем, как и антиген, или в смеси с антигеном, как. при приме0 нении известных вспомогательных агентов.

Таким образом, указанные соединения могут специфически повьпиать (Гукюральный иммунитет , они улучша5 ют иммунологическую реакцию на

раздражение, их усиливающее иммунное действие основывается на системной активизации иммунного аппарата. 3. Усиление гуморального иммуниQ тета в пробирке: эффект замены

Т-клеток при реакции антител клеток « нuинoй селезенки на эритроциты овцы (СЕ) .

Для индукции реакции антител во

5 многих случаях необходимы лимфоциты (Т-клетки), происходящие из тимуса. Эти клетки находятся во взаимодействии с предшественниками образующих антитела лимфоцитами 8 -клетки) и помогают им реагировать на стимулирование так называемыми Т-зависимыми антигенами с проиферацией , диференциацией и синтезом антител. Суспензии клеток сеезенки мышей с врожденной атимией

(типа nu/nu) не содержат функциональных Т-клеток и не могут, например, в пробирке в присутствии СЕ образовывать анти-СЕ-антитела. Указанные соединения могут функционально

заменить Т-клетки и сделать воз- можным ответ антител против СЕ. Добавка этих веществ к описанным культурам клеток селезенки в присутствии СЕ приводит в течение

4 дн. к значительному повышению

количества клеток, образующих антитела. Из результатов опытов следует, что указанные соединения повышают образование гуморальных антител в пробирке и компенсируют дефект Т-клеточной системы.

4. Селективная митогенность для В-клеток: вызывакадее пролиферацию действие в В-лимфоцитной культуре.

в течение трех дней инкубиру1рт суспензию с большим содержанием В-лимфоцитов (клетки лимфатических узлов мыщей с врожденной атимией типа nu/nu), а также почти чистых незрелых и зрелых Т-лимфоцитов (клетки тимуса или устойчивые к кортизону, т.е. через 48 ч после впрыскивания кортизона, персистирующие клетки тимуса мышей типаBalb/c) в присутствии испытуемых

веществ. Мерой пролиферационной активности служит включение Н -тимидина в лимфоциты в течение последних 18 ч культурального период

Соединения по изобретению мито генны для В-лимфоцитоБ (т.е. для предшественников образующих антитела клеток), но не для Т-лимфоцитов. Они могут возбуждать пролиферацию лимфоцитов, которые участвуют в гуморальной иммунной реакции.

5. Совместимость.

Несмотря на то, что указанные соединения оказывают усиливающее действие на морских свинок, например, уже после, единичной дозы в 0,05 мг/кг подкожно, на мьлшей после пятикратного введения по 10 мг/кг подкожно, не наблюдается токсичности после пятикратного введения по 300 мг/кг внутрибрюшино. мы1иам. Поэтому указанные вещества обладают широким терапевтическим спектром.

Соединение изобретения имеют свойство, с одной стороны, в смеси с антигеном повышать его иммуногенность, с другой стороны, при системном применении повышать иммунологическую реакционную способность подлелсаидего лечению организма. При этом указанные ве щества в состоянии вызывать клеточный и гуморальный иммунитет и активизировать ответственные за образование антител лимфоциты.

Новые соединения могут таким образом быть использованы в качестве вспомогательных агентов в смеси с вакцинами для того, чтобы улучшить действие прививки и противоинфекционную запщту на основе гуморальных антител и/или клеточн.го иммунитета против бактерий, вирусов и паразитов.

Кроме того, предлагаемые соединения в смеси с самыми различными антигенами пригодны в качестве вспомогательных агентов.при экспериментальном и промышленном получе НИИ антисывороток для терапии и диагностики и при индуцировании иммунологический активированных популяций лимфоцитов для переноса . клеток.

Соединения можно также без одно временного добавления антигена использовать для содействия уже начавшейся, однако еще незаметной, иммунной реакции у живого организма. Следовательно, соединения особенно пригодны для стимулирования заищты организма, например, при хронических .Д1ли острых инфекциях или при селективных (специфических относительно антигенов) иммунологических дефектов, которые наступают в старости или в течение тяжелых первичных заболеваний, и в особенности после лечения ионирующими лучами или подавляющими иммунитет гормонами. Таким образом, указанные вещества можно применять также, предпочтительно в комбинации с антиинфекционными антибиотиками, химико-терапевтическими средствами идругимиметодами лечения, для противодействия иммунологическим повреждениям.

П р .и м е р 1. Перемешивают 2 г 2-фенил 4,(D-l5 -карбамоил-3-карбоксипропил)-1-карбамоилэтил -карбамоилJ-5,6-0-изопропилиден-в-глюкофурано)-дельта-2-оксазолин в воде с 10 мл-Dowex-50-,H при комнатной температу0 ре в течение 15 ч. После фильтро.вания и сублимационной сушки получают бесцветный порошок с точкой разложения 140°С. Полученная 2-бензоиламино-3-0-{D-1- L-l-(D-1-кар5 бамоил-3-карбоксипропил)-1-карбамоилэтил -карбамоилэтил j-2-дезокси- f, /i-D-глюкоза содержит соответственно условиям вьасушивания разные количества кристаллизационной воды. Выход 51%, 0,86 г.

Получение исходного сырья. 3,77 г 2-фенил-4,5-|;з-О-(D-1-карбоксиэтил)-5,6-0-изопропилиден-В-глюкофурано -д -оксазолил и 60 мл ацетонитрила и 15 мл диметил5 формамида перемешивают с 1,4 мл триэтютамина и 2,55 г N-этил-5-фенил-и зоксазолий-3 сульфоната в течение 1,5 ч .при0°С, причем почти все превращается в раствор. Затем

0 прибавляют 3,44 г .гидрохлорида сложного 1-амид- (р-бензилового эфира Ь-аланил-В-глутаминовой кислоты и еще 1,4 мл триэтиламина и продолжают перемешивать в течение 24 ч

5 при комнатной температуре. Выпаривают в масляном вакууме до сиропа и хроматографируют на силикагеле смесью хлороформа и ацетона (8:2). Получают 6,5 г (97%) бесцветного 0 густого сиропа.

2-фенил-4,5-- 3-3-О- l-L-(D-l-карб-амоил-3-бензилоксикарбонилпропил )-кapбaмoилэтил -l-кapбaмoилэтил-5 ,6-изопропилиден-0-глюкофура5:но -Л -оксазолина, который при

растворении с- эфиром кристаллизуется.Т.пл,96-99°С, , ( +13° (в хлороформе) , .

Кристаллический 2-фенил-4,5-{30 -в-0- 1-Ь-(В-1,-карбамоил-3-бензилоксикарбонилпропил)-карбамоилэтилJ-1-карбамоилэтил-5,6-изопропилиден-О-глюкофурано -л -оксазолин гидрирую.т 5%-ным палладием на угле в ,диоксане при комнатной температуре и нормальном давлении и после выпаривания в вакууме получают 5,4 г (94%) 2-фенил-4,5- 3-В-0- 1-1,-(В-1-к арб амоил-3-к арбоксипропил)-карбамоилэтилЗ-1-карбамоилэтил-5.6-изопропилиден-В-глюкофураноJ-д -оксазолин в виде сиропа. Вычислено: С 51,40, Н 6,26, N 9, 99 С24 з4 4-01-) 0,35 НзО (560,86) Найдено: С 51,13; Н 6,38, N 9,89. , Пример 2. Исходный матери ал: 100 г 2-фенил-4,5-(5,6-0-изопропилиден-В-глюкофурано)- Д -оксазолина растворяют в отсутствии влажности и двуокиси углерода в 1л ацетонитрила и прибавляют ijpH интенсивном перемешивании по 15,.2 г 55%-ной дисперсии NaH - минерального ы.асла и перемешивают еще в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем прибавляют по каплям при 42 мл сложного этилового эфира хлоруксусной кисло ты и через 1,5 ч еще 42 мл. Через. 1,5 ч прибавляют еще 11,4 г NaH-ди персии, перемешивают полчаса и при бавляют по каплям при 0°С еще 42 м хлоруксусного эфира. Затем через 2ч подогревают до комнатной темпе ратуры и выпаривают в вакууме, а затем в масляном вакууме до состоя ния сиропа, который растворяют эфи ром, экстрагируют три раза встряхиванием с водой, эфирную фазу высушивают сульфатом натрия и после выпаривания получают 155 г коричне вого масла. Это масло растворяют в 150 мл метанола и затем прибавляют раствор из 30 г гидроокиси ка лия в 150 мл воды, экстрагируют дв раза эфиром и промывают эфирную фазу один раз водой. Водные фазы в вакууме освобождают от эфира и доводят до рН 4 на рН-метре посред ством 1 Н. соляной кислоты. ; Выпавший кристаллический 2-фенил -4,5-.3-0-(карбоксиметил )-5,6-0-из пpoпилидeн-r)-глюкoфypaнo - л -оксазолин отсасывают, промывают водой и высушивают. Получают 107 г (93% от теоретического) с т. пл. 186-. ,(ot)|) -9° (CHCIj, с 0,9) и Cot)2° (CHCIji с 3). 3,63 г 2-фенил-4,5-(3-0-карбокс метил-5,б-О-изопропилиден-В-глюкофурано)- л -оксазолина, 3,43 г гид |рохлорида сложного 1-амид- у-бензи лового эфира ь-аланил-П-глутаминовой кислоты, 1,21 г м-оксисукцини-, мида, 2,16 г дициклогексилкарбодиим да и 1,45 мл триэтиламина растворяют в 40 мл диметилформамида и перемешивают в течение 24 ч при комнатной температуре. Выпаривают в масляном вакууме, растворяют дихлорэт ном и водой, отсасывают от выпавшей дипиклогексилмочевины и экстрагируют путем встряхивания органическую фазу два раза водой и водную фазу два раза дихлорэтаном. После высушивания и выпаривания органической фазы получают густой сироп, который хроматеграфируют на силикагеле в смеси с хлороформом - этанолом (9:1). Полученный 2-фенил-4,5- 3-0-Cl-L-(D-карбамонл-З-бензилоксикарбонилпропил)-кapбaмoилэтил -кapбaмoидмeтил-5 ,6-0-изопропилиден-В-глюкофурано -.Д -оксазолин, который при растирании с эфиром кристаллизуется, плавится при 167168 С, (сС)|° -5°(хлороформ). 4,5 г 2-фенил- 4,5-{3-0- 1-L-(1-D-карбамоил-3-бензилоксикарбонилпропил)-карбамоилэтил -карбамоилметил- 5 ,6-0-изопропилиден-D-глюкофурано - д2-оксазолина гидрируют в дирксане 5%-ным палладием на угле, отфильтровывают от катализатора и затем eine экстрагируют этанолом. Соединенные фильтраты выпаривают и перекристаллизовывают из изопропилового спирта. Полученный 2-фенил-4,5- (-l-D-карбамоил-3-карбоксипропил)-кapбaмoилэтилJ-кapбaмoилмeтил-5,6-0-изoпpoпилиден-В-глюкофурано - й -оксазолин плавится при 200-207°С. Получение целевого продукта. 2.85 г полученного 2-фенил-4,5-{З-О- 1-Б-(-l-D-карбамоил-З-карбоксипропил)-карбамоилэтил -карбамоилметил-5,6-0-изопрпилиден-в-глюкофураноI- 4 -оксазолина перемешивают в смеси из 30 мл воды и 15 мл тетрагидрофурана с 5 мл Dowex-50-Н 15 ч при комнатной температуре, фильтруют через твердый фильтр и выпаривают в вакууме досуха. При растирании с эфиром получают бесцветный порошок 2-бензоил-амино-З-О- f| L-l-(D-1-карбамоил-З-карбоксипропил)-1-карбамоилэтил -карбамоилметил -2-деокси- с,р-D-глюкозы с т. пл. 175-177°С (в виде гидрата). Выход 55%, 1,51 г. Вычислено: С 51,11, Н 5,97, N 10,37, С2зН (540,53) Найдено: С 50,95, Н 6,04, N 10,23 Пример 3. 4,4г 2-4 енил-4,5-{З-О-С1-Ь-(1-П-3-дикарбоксипропил)-карбамоилэтил -карбамоилметил-5,6-0-изопропилиден-В-глюкофураоксазолина перемешивают в течение 20 ч при 40 С с 11 мл ионообменника Dowex-50 х 4 в смеси из 45 мл тетрагидрофурана и 20 мл воды. После фильтрования и очистки углем. (Darco G-60) раствор подвергают сублимационной сушке, при этом получают бесцветную аморфную 2-бен амидо-2-дезокси-3-0-С1-Ь-{l-D-3-ди карбоксипропил)-карбамоилэтилJ-кар бамоилметил-С-глюкопиранозу с опти ческим вращением (о.)° +25° (Н™О, с 0,997). Выход 37%, 1,56 г. Получение исходного сырья, б,33 2-фенил-4,5-(3-0-карбоксиметил-5,б-0-изопропилиден-С глюкофурано Л -оксазолина, 5,75 г 2-этокси-М-карбэтокси-1,2-дигидрохинолина (EEDGl) и 9,3 мл триэтиламина прибавляют к раствору трифторацетата сложного дибензилового эфира Ь-ала нил-в-глутаминовой кислоты (полученного из 8,3 г сложного дибензолового эфира N-Tper -бутилоксикарб нил-Ь-аланил-Вгглутаминовой кислоты с 5,1 мл трифторуксусной кислоты и 2,6 мл дихлорэтана посредством четырехчасового гидролиза при 40с в 70 мл дихлорэтана. Смесь выдерживают 15 ч при 40°С, разбавляют хлорофордам, экстрагируют посредством встряхивания два раза водой и водные фазы один раз хлоро формом. После высушивания сульфатом нат&ия и выпаривания хлороформ ный раствор содержит 19,9 г масла, которое очищают на 400 г силикагеля/ Мерк посредством элюирования эфиром, затем хлороформом - ацетоном 17:3. При этом получают чистый 2-фенил-4,5-{з-0- 1-Ь-(1-В-3-дибен зилоксикарбонилпропил)-карбамоилэтил -карбамоилметил-5,б-0-изопропилйден-П-глюкофурано}- «з -оксазолин с т. кип. ИЗ-Иб- С и U}1° -47 ° (CHCI с 1,54). 7 г 2-фенил-4,5-{3-0- 1-Ь-й-0-3-дибензилоксикарбонилпропил)-кабамоилэтил -карбамоилметил-5,б-О-изопропилиден-Ю-глюкофураноJ- Л -оксазолина гидрируют 1,8 г 5% Pd/C в смеси из 80 мл тетрагидрофурана и 20 мл. воды до прекращения реакции, отсасывают от катализатора, выпаривают в вакууме и растирают остаток с эфиром. При этом получают 4,9 г 2-фенил-4,5-{З-О- l-L- (1-Б-3-;Сй1карбоксипропил)-карбамоилэтилJ-карбамоилметил-5,6-0-изопропилиден-0-глюкофура.но J- й -оксазолина в виде бесцветного порошка. Вычислено; С 48,13, Н 6,08; N 7,32. .NaO,,- 1,8 НрО (.5-73-, 9) Найдено: С 48,59;-Н 6,07; N 7,52, Пример 4. Гидролизуют 2 г 2-фенил-4,(1-С-карбамоил-3-трет -бутоксикарбонилпропил)-карбамоил-2-оксиэтилJ-карбамоилметил-5,6-0-изопропилиден-О-глюкофурано - д2-оксазолина в течение 20 ч при комнатной температуре со смесью из 15 мл хЛористого метилена и 5 мл трифторуксусной кислоты. Упаривают в масляном вакууме, остаток затирают э эфиром и получают 2-бензамидо-2-дезокси-3-0-Cl-L-(l-D-карбамоил-3-карбоксипропил)-карбамоил-2-оксиэтил З-карбамоилметил-В-глюкопиранозу в виде бежевого порошка, т. пл. 100-115°С,(о)|, +23°(Н20, , с 0,886), которая кристаллизуется с помощью 2 моль воды и 1 моль трифторуксусной кислоты. Rf 0,28; CHCgj : СНjOH 1:1 (тонкослойный силикагель. Мерк). Выход 60%, 1,16 г. Прлучение исходного сырья. Аналогично описанному в примере 3 конденсируют 5,7 г 2-фенил-4,5-(3-0-. -карбоксиметил-5,б-0-изопропилиден-D-глюкофурано)- д2 оксазолина с 4,9 г гидрохлорида о -амид-j--трет-бутилового эфира L-серил-D-глютаминовой кислоты при прибавлении 2,3 мл триэтиламина и 5,2 г 2-этокси-К-карбэтокси-1,2-дигидрохинолина в 45 мл дихлорэтана. После 18 ч при 40°С образуется кристаллизат. Прибавляют дополнительно 50 мл дихлорэтана, охлаждают в ледяной базе фильтруют и кристаллы промывают холодным диэлорэтаном. Аналитически чистые бесцветные кристаллы 2-фенил-4,5-{3-0- 1-Ь-(1-В-карбамоил-3-трет -бутилоксикарбонилпропил)-карбамоил-2-оксиэтил -карбамоил-метил-5,6-0-изопропилиден-В-глюкофурано}- л2-оксазолина имеют т. пл. 187-188°С (ot)20 +7° (СН,ОН, с 1,125). Вычислено: С 42,60, Н 5,27; N 7,99. Ъ ЗД°12 2 f О б HjO - О , 9 5 7 CF 3 СООН Найдено: С 42,87; Н 5,32; N 8,20 Пример 5. 6,4 г 2-фенил-4,5- (l-D- r -пропилкарбамоил-3-трет-бутоксикарбонилпропил)-карбамоилэтил -карбамоилметил-5,б-О-изопропилиден-Б-глюкофурано}- 4 -оксазолина гидрируют 1,8 г S%-Horo Pd/C в 80 мл тетрагидрофурана и 20 мл воды до прекращения процесса, отфильтровывают от катализатора и концентрируют. Rf 0,58. СНСЕз : CHjOH 3:1 (тонкослойный силикагель. Мерк), Выход 5,8 г. Затем полученную кислоту промывают с 10 мл ионообменника Dowex-50 X 4, 50 мл тетрагидрофурана и 25 мл воды 15 ч при комнатной температуре и 12 ч при 40°С. После фильтрования, очистки углем (Darсо-С-бО), вторичного фильтрования и сублимационной сушки получают бесцветную, аморфную 2-бензамидо-2.-дезо кси-3-0- 1-Ь-( 1-D-N- п -пропилкарбамоил-3-карбоксипропил)-карбамоилэтил -кapбaмoилмeтил-D-глюкoпиpaнoзy , т.пл. б5-140°С и ioL) +28° (вода, с 1,03), Rf 0,48 CHCEj : CHjOH 1:1 (тонкослойный силикагель, Мерк), Выход 65% 4,15 г. .

Исходное соединение. Аналогично описанному в примере 3 конденсируют 5,25 г 2-фенил-4 ,.5-( 3-0-карбосиметил-5 f6-0-изопропилиден-В-глюкофурано)- Д -оксазолина и трифторуксуснокислотную соль ot- п-прпиламид-у-бензилово го эфира L-ала нил-О-глютаминовой кислоты, ; -полученного из 6,2 г oL - п-пропил-амид-f-бензилового эфира N-трет -бутилоксикарбонил-ь-аланил-В-глютаминовой кислоты и 4,2 мл трифторуксусной кислоты в 2,5 мл дихлорэтана , 6 ч при 40°С -в 60 мл дихлорэтана с прибавлением 7,75 мл триэтиламин и 4,8 г 2-этркси-И-карбэтокси-1,2-дигидрохинолина. После 20 ч при 40°С прибавляют 50 мл хлороформа, встряхивают два раз-а с водой и воду два раза с хлороформом. После высушивания и концентрирования хлороформной фазы получают 15 г -масла, которое очищают 200 г сидикагеля по Мерку путем вымывания простым эфиром, затем хлороформом ацетоном 7:3. Получают б,4 г бесцветного аморфного 2-фенил-4,5- . -{З-О- l-L-(l-D-лропил-карбамоил-3-трет-бутоксикарбонилпропил)-кapбaмoилэтил J-карбамоилметил-5,6-0-изопропилиден-В-глюкофурано - д2-оксазолина, Rf 0,35 СНСЕ ацетон 7:3 (тонкослойный силикагель , Мерк).

Вычислено: С 51,08; Н 6,799,16; HjO 4,72

N

2б звЧО-11 1 2° (11И8)

Н 7,00, Найдено: С 51,15;

4,77.

Н 9,49,

«20

Пример 6. 8,3г 2-фенил-4,5-{3-0- 1-метил-1-(l-D-карбамоил-3-трет -бутилоксикарбонилпропил)-карбамоилэтил -5,6-0-изопропилиден-О-глюкофурано }- л -оксазолина оставляют стоять 15 ч при комнатной температуре в смеси из 20 мл трифторуксусной кислоты, 60 мл хлористого метилена и 2 мл воды. Затем упаривают в вакууме и остаток растворяют простым эфиром. Полученный розовый порошок растворяют в 200 мл воды и очищают 0,5 угля (Da rco-G-60 ) , После фильтрования и упаривания получают бесцветную аморфную 2-бензамидо-2-дезокси-3-0-С1-метил-1-(D-1-карбамоил-З-карбоксипропил)-карбамоилэтилJ-карбамоилметил-в-глюкопиранозу, т. пл. 110-120°С, t)i) +31° (HjO, с 0,88), Rf 0,52 ацетон:этанол

х:1 (тонкослойный силикагель. Мерк), которая кристаллизуется с 0,6 моль трифторуксусной кислоты и 1,7 моль воды. Выход 52%, 4,15 г.

Получение исходного сырья. 7,3 г 2-фенил-4,5-(З-О-карбоксиметил-5,6-О-изопропилиден-в-глюкофурано)-л -оксазолина, 6,5 гидрохлорида d. -амид- j-Т.рет -бутилового эфира

oi -амино-изобутироил-В-глюта новой

0 кислоты и 2,9 г сложного изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты растворяют в 25 мл диметилформамида и 50 мл дихлорэтана. К этому прибавляют по каплям при температуре от-15 до -10°С в течение 30 мин раст5вор 6,1 мл триэтиламина в 20 мл дихлорэтана. Затем нагревают до комнатной температуры и перемешивают еще 15 ч при комнатной температуре. Прибавляют 50 МП дихлорэтана, встря0хивают с водой, два раза с 0,5 н. NaOH и три раза с водой, водные фазы .- два раза дихлорэтаном, органическую фазу высушивают и после упаривания получают 16,6 г масла.

5 Его очищают на силикагёле/ Мерку, путем вы№1вания CHCe.j : С.НдОН 19:1, Получают 9,7 г бесцветного аморфного 2-фенил-4,5- 3-0- 1-метил-1-(l-D-карбамоил-З-трет-бутилокси0карбонилпропил)-карбамоилэтил 3-5,6-О-изопропилиден-В-глюкофурано -й -оксазолина. Оптическое вращение (о(,)5) +6°(СНС1,, с 1,027),

т. пл. 75-В9°С.

5

,35, СНС1 :С Н (тонкослойный силикагедь. Мерк),

Вычислено: С 46,31; Н 5,86; N 8,57; HjO 4,69

0,6 СРзСООН 1,7

0

VD-DjjD: J

Найдено: С 46,59; Н 6,00:N 8,74, 4,53.

Аналогичным образом получают следующие соединения.

4,1 г (85,7%) (B-l-кap5бaмoил-3-кapбoкcипpoпил )-карбамоил-. этил -карбамоилметил -2-аце.тамидо-2-деокси-В-глюкоза, (ot)2o -10°+ 1° (вода, с 0,930).

Вычислено: С 43,08; Н 6,59;

0 N 11,16 ; Н20 4,67

.O -1,30 (501,87)

Найдено; С 42,85, Н 6,61; N 11,26; НоО 4,67,

3,85 г (75,7%-:) 2-бензамидо-25-дезокси-3-0- L-i-(В-1,3-трет-N-метилкарбамоилпропил)-карбамоилэтил -карбамоилметил-в-глюкопираноза, т. пл. 125-132°С,( +24°(Н,О, с 0,93).

0

Вычислено: С 50,55: Н 6,89; N 11,91; HjO 5,51

IS 50 (600)

Найдено: С 50,18; Н 6,81; N 11,65; НгО 5,73

5

2,43 г (50,4%) 2-бензамидо-2-деокси-3-0- Ь-1-{D-1,3-трет -метоксикарбонилгфопил)-карбамоилметилЗ-карбамоилметил-В-глюкопираноза в виде гидрата, т. пл. 80-90°C.,(ot;i° +25 (СНзОП, с 1,017).

4,16 г (81%) 2-бензамидо-2-дезокси 3-0-Сь-1-(D-l-N-карбамоилметил-карбамоил-3-карбоксипропил)-кapбaмoилэтилЗ-кapбaмoилмeтил-D-глюкoпиpaнoзa, т. пл, 163-170С.

Вычислено: С 49,02; Н 6,34; N 10,99;Н20 3,99

С2(,Н,.,И50„1Н1 HjO (637,01)

Найдено: С 49,85; Н 6,48; Ы 10,64; ЕуО 3,99

4,16 г (93%) 2-бенз.амидо-2-дезокси-3-0- ь-1-(D-1-карбамоил-З-карбоксипропил) -карбамоилпропил -карб амоилметИл-D-глюкопир аноз а, т. пл. 114-155°С.

Вычислено: С 50,95; Н 6,31) N 9,90; Ы20 1,98 С24 зА01Г°б 2 (565,71)

Найдено: С 50,69; Н 6,47, N 9,76; 1,98 .

4,28 г (.85%) 2-бензамидо-3-дезокси-3-0- ь-1-( D-1-карбамоил-З-карбоксипропил)-кapбaмoйл-2-мeтилпpoпил J - 1- карб амоилметил- D- глюкопираноза,((/)2° +32°(с 0,78, вода).

Вычислено: С 49,72; Н 6,70; N 9,28, HjO 5,86

CorHj N Oi-t 15б %° (603,.9)

Найдено: С 49,82; Н 6,67} Ы 9,09;К20 5,86.

3,91 г (82%) 2-ацетамидо-З-О-(D-1-карбамоил-З-карбоксипропил)-карбамоилметил-карбамоилметил -2-деокси-D-глюкоза, (oL) 2° +27 (с 0,944, вода).

Вычислено: С 43,97; Н 6,08 N 12,06

0,(464,43)

Найдено: С 43,72; Н 5,88; N 12,20;

3,57 г (81%.) 2-ацетамидо-З-О-{ ъ-1- ( D-1, 3-дикарбамоилпропил )-кapбaмoилэтил -карбамолметил}-2-деокси-D-глюкоза, (Ы) 1° +7°+ 1° (вода, с 0,514).

Вычислено: С 43,26; Н 6,78; N 14,01; НзО 4,46

C.gHj.N 50,6-1.24 Н20 (499,81)

найдено: С 43,22; Н 6,72; N 14,11; НзО 4,46.

4,54 г (95%; 2-ацетамидо-З- (в-1-карбамош1-3-карбоксипропил) -кapбaмoилмeтилJ-кapбaмoилпpoпил J-2-деокси-1)-глюкоза,-{с(./|| +46 + 1 (вода, с 0,630) .. .

Вычислено: С 46,34 Н 6,55; N 11,38

CigHN О,, (492,48)

Найдено: С 46,07; Н 6,44 ; N. .

4,17 г (87%) сложного димети-лового эфира 2-ацетамидо-3--0- (D-1,3-дикарбоксипропил)-кapбaмoилэтил -карбамоилметил J-2- деокси-D-глюкоза, (в6да, с 0,0814).

Вычислено: С 45,66/ Н 6,75; 5 N 7,99/ HjO 3,54

С2оНз з0 2-.103 ЕуО (526,05). Найдено: С 45,90; Н 6,70 N 8,00; Н,0 3,60

4,4 г (92%) 3-0-{ L-l-(D-l-Kap10 бамоил-1-3-карбоксипропил)-карбамоилэтил }-карбамоилметил -2-деокси-2-п-ропионамидо-В-глюкоза, (d) +8° (вода, с 1,146).

Вычислено: С 42,90; Н 6-,93 5 N 10,53 Н20 7,42

,19 НлО (531,93) .Найдено: С 42,66/ Н 7,01; Г1 10,54; НрО 7,42

4,29 г С89% ) 3-0-{ L-l-(D-l-KapQ бамоил-3-карбоксипропил)-карбамоилэтил -карбамоилметил}-2-каприноиламидо-2-деокси-Б-глюкоз а, (al-) +11° (вода, с 1,052) .

Вычислено: С 52,87, Н 7,85/ 5 N 9 ,4 9

С2е,Н4ьН40,,(590,67) Найдено: С .52,60; Н 7,73; И-9,21,

4,55-г (95,2%) 2-ацетамидо-2-деQ окси-3-0-UL-l-(D-l,3-тpeт-мeтилкap50милпpoпил)-кapбaмoилэтил -кapбaмoилмeтил J-D-глюкоза, (dL +31° ,(вода, с 0,41).-

Вычислено: С 44,67/ Н 7,261 N 13,02

С2оНз5К.;0 о -179 2° (537,77) Найдено: С ; Г 7,40, N 13,31.. -- .

4,02 г (84%) 2-ацетамидо-З-О- (L-1-(D-1-карбамоил-З-карбоксипропил)0 -карбамоил-2-оксиэтил -карбамоилме- Тил }-2-деокси-П-глюкоза,(()20 +10° (вода, с 1,653}.

Вычислено: С 43,72/ Н 6,12

5 N 11,33

., (494,45) Найдено: С 43,51; Н 6,03; N 11,11

4,41 г (92%) 2-ацетамидо-З-ОП (D-1-карбамоил-З-карбоксипропил)-карбамоилбутилJ-карбамоилметил -2-деокси-1)-глюкоз а, (ot-) +12° (вода, с 7,22).-

Найдено: С 45,11; Н 7,03; N 10,29; Н„0 4,38 С2оНзХо11-129 (529,75)

Вьачислено: С 45,35; Н 6,99 N 10,58} ЦуО 4,38

4,34 г (69,5%) (D-l-кapбaмoил-3-кapбoкcипpoпил )-кар0 бамоилэтилJ-карбамоилметил -2-деокси- 2-стеароил-амидо-П- глюкоз а, (оС )° +24( диметилформамид, с

0,663).

Вычислено: С 58,10; Н 8,89,

5 Г 7,97; Cj., (702,89), Найдено: С 57,92: Н 8,95; N 7,81. 4,55 г (95%) 2-ацетамидо-З-О (В-1-кар6амоил-3-карбоксип пил)-карбамоил-2-метилпропил -кар моилметил }-2-деокси-в-глюкоэа, (оС)|° Ш Свода, с 1,096). Вычислено С 45,53; Н 6,98I N 10,62 Н20 3,99 С.2о зЧМ40-,1 1,17 HjO (527 Найдено: С 45,80; Н 6,81, N 10,65; НгО 3,99. 4,41 г (92%) 2-ацетамидо-З-О-Сь-1-(D-1-карбамоил-З-карбоксипр пил)-карбамоил-3 -метилбутил/- кар бамоилметил-2-деокси-D-глюкоза, U|20 (вода, с 1,060). Вычислено: С 46,66; Н 7,16 N 10,36; 3,71 Сл Hj.N.O-.- 1,11 НрО (540,53) Найдено: С 46,45-, Н 7,04 j N 10,06; ЕуО 3,71 . 4,21 г (88%) 2-ацетамидо-З-О-{Сь-1-(D-карбамоил-З-карбоксипро пил )-карбамоилпропил -карбамоилметил -2-деокси-В-гл1окоза,(о( 4-11° ;вода, с 1,019). Вычислено: С 44,27; Н 6,79 N 10,87 Н,0 4,46 C.,H,,.- 1,28 (515,54) Найдено: С 44,32; Н 6,73; N 10,78; HjO 4,46. 4,13 г (86%) 2-ацетамидо-З-О- Ь-1-( D-l-карбамоил-метилкарбамоил-3-карбоксипропил)-карбамоилэтил J-кapбaмoилмeтилV2-дeoкcи-D-глюкоз а, белый порошок,(оГ)IP (вода, с 0,706). Вычислено: С 43,24j Н 6,43, N 12,61;Н20 3,61 , - 1,11 (555,50) Найдено: СГ43,10, Н 6 , 305N 12.,90; 3,61. 4,46 г (93%) 2-триметилацетамидо2-деэокси-3,0--{Сь-1- (D-1-карбамоил3-карбоксипропил)-1-карбамоилэтил карбамоилметил 1- ti , ft -D-глюкоэа, (d)20 -7°(с 0,6, метанол).

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДДЫ С ГЛ10КОЗАМИНА общей формулы СНзОН i-о (О V-OH Ho)|-f / ira-co-Ei Бг-сн С о -IJH- CJi- CO-liH- Си- (СНз 12 5 (В) (О)(L) где R, - Cy-Cj-алкил или фенил; RZ - водород или С -С -алкил; R - водород, С -Сд-алкил или оксиметил; R. карбоксил, метоксикарбонил, карбамоил, N-(C -C2-алкил)-карбамоил, К-бензил- или N-карбамоилметилкарбамоил; R- карбоксил, метоксикарбонил, карбамоил или Н-метилкарбамоил, при условии, что алкил R содержит более 1 атома углерода, если Rj метил или водород, а R и Rg карб оксил, отличающийся тем, что соединение общей формулы 0-1 /О i СО G у «(I-Rl Бг-ш в, СО-Ш1-СЫ-СО-1 Н-СН-(СН2) (D) (Ь) (D) где имеют указанные значения; 05 R - С -С -алкилиден или О 00 СJ-C,-циклоалкнлиден, обрабатывают кислым ионообменником или трифторуксусной кислотой в течение 10-25 ч при комнатной температуре в воде, тетрагидрофуране и/или хлористом метилене.