Питательная среда для выращивания @ @ @ -28-продуцента лизоцима Советский патент 1983 года по МПК C12P1/04 

О)

о да

со

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в Частности к получению лизоцима.

Известна питательная среда для выращивания продуцента лизоцима Escherichia coli, содержащая бактопептон, минеральные соли, глюко.ЗУ и казаминовые кислоты С13.

Известна также питательная среда для выращивания Bacillus subtili g-28-продуцента лизоцима,содержащая источник азота, источник углерода, сернокислый аммоний и водуСЗД.

Однако известные среды не обеспечивают высокой лиэоцимной активности.

Цель изобретения - повышение лизоцимной активности.

Поставленная цель достигается тем, что в питательной среде для выращивания Bacillus subtilis g-28-пр дуцента лизоцима, содержащей источник азота, источник углерода, сернокислый аммоний- и воду, в качестве источника азота она содержит гидролизат дрожжей, и качестве источника углерода - осахаренный крахмал при следующем количественном соотношении компонентов, г/л воды:

Гидролизат дрожжей 60-80

Осахаренный крахмал 20-40

Сернокислый аммоний 10-12

Среду готовят следующим образом.

Пример 1. Крахмал осахаривают при помощи бактериальной 6 -амлазы до образования эритродекстринов. После этого доволя рН до 4,7-5,0 с помощью ортофосфорной

кислоты, поднимают температуру до 6 Ос и добавляют глюкоамилазу из расчета 4-5 ед. активности на 1 г крахмала. Осахаривание проводят в течение 6ч. Получают 0,9 г глюкозы из 1 г сухих веществ суспензии крахмала.

Другие компоненты питательной среды растворяют в воде, объединяют с осахаренным крахмалом, общий объем доводят водой до 1000 мл.Устанавливают рН 6,8г7,2 с помощью NaOH. Среду разливают по 100 мл в колбы емкостью 750 мл и стеризизуют 20 мин при 120°С.

Пример 2. Для выращивания продуцента используют питательную среду при следующем соотношении компонентов (opt), г/л воды: Гидролизат дрожжей 60 Осахаренный крахмал 20 Сернокислый .аммоний 1C Стерильную цитательную среду засевают культурой Bacillus subtilis g-28, выращенной на ломтиках карто5 феля. Культивирование проводят на качалках (90 качаний/мин) . Лизоцимная активность 181ед/мл куль туральной жидкости.

Сравнительные данные по-лизоцимной активности приведены в таблице (в биолафитах).

Использование питательной среды позволяет повысить лизоцимную ак тивность на 13% и удешевить среду (годовой экономический эффект составляет 100-120. тыс.руб).

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ BACILLUS SUBTIL IS g-28 ПРОДУЦЕНТА ЛИЗОЦИМА, содержащая источник азота, источник углерода, сернокислый аммоний и воду; о тличающаяся тем, что, с целью повышения лизоцимной активности, в качестве источника азота она содержит гидролизат дрожжей, в качестве источника углерода осахаренный крахмал при следующем количественном соотношении компонентов, г/л воды: Гидролизат дрожжей 60-80 , Осахаренный крахмал 20-40 Сернокислый аммоний 10-12 g