Способ получения 3 @ ,4, @ 5 @ -триметоксиьензоата производных аповинкаминола или их солей Советский патент 1984 года по МПК C07D461/00 A61K31/4375 A61K31/475 A61P17/00 

посредством прибавления к нему 40%ного раствора гидроокиси натрия. . Затем р.аствор экстрагируют трижды ди хлорметаном, используя 120,110 и 100 мл последнего. Органическую фазу сушат, фильтруют и затем упаривают в вакууме. Маслообразный остаток (1,8 г) кристаллизуют из 10 tin метилового спирта. В результате получают 1,10 г (78,4%) продукта, т.пл. которого 178-180С. Элементный анализ. Рассчитано,%: G 61,86, Н 6,23, N 7,22. BrNj. О (мол.вес. 388, 33) . Cjo уц Найдено, %: С 61,92, Н 6,43, N 6,82%. ИК-спектр (КИг): Лтлу, 1630 см ( ) . Масс-спектЬ (т/е): 386/47, 388/48, 369/2, 371/3, 357/96, 359/9 339/8, 341/6, 316/100, 318/88,237/1 Примененный в качестве исходного вещества 10-бромаповинкамин получаю следукйцим образом. 4,60 г (10,6 ммоль)10-бромвинкам на и 92 МП ангидрида уксусной кисло ты нагревают в течение 20 ч при тем пературе кипения реакционной смеси с обратным холодильником. Окрашенну в темнокоричневый цвет ре.акционную смесь упаривают в вакууме, полученйое в виде остатка маслообразное ве щество смешивают со 150 мл воды и при охлаждении производят подщелачивание до рН 11 посредством прибав ления к смеси 40%-ного раствора гид ррокиси натрия. Смесь экстрагируют три раза дихлорметаном, используя п следовательно 80,70 и 60 мл послед-Него. Объединенные экстракты сушат «ад сернокислым магнием, фильтруют упаривают в вакууме. Полученный пос ле упаривания остаток кристаллизуют из 15 МП метилового й1ирта. В резул тате получают 3,60 г (81,7%) 10-бро маповинкамина, т.пл. которого 1&3165°С. Элементный анализ. Рассчитано, %: С 60,73, Н 5,58, N 6 ,75 . Сад Нгз BrNa.02 (мол.вес. 415,33). Найдено, %: С 60,74, Н 5,55, N 6,69. ИК-спектр (КВг): « так1718 см (), 1620 СМ- (). Масс-спектр (т/е): 417/35, 415/3 388/100, 386/99, 347/90. 345/95, ЗЗХ/З/329/9, 306/9, 187/6. Прямер, 4. Получение 10-бро маповинкаминол-3 ,4 ,5 -триметоксибензсйа. 0,50 г (1,29 ммоль) 10-бромапови каминола растворяют в 15 мл безводного пиридина и к приготовленному раствору прибавляют г (1,74 ммол 3,4,5-триметоксибензоилхлорида. Реакционную смесь вьадерживают в течение 24 ч при комнатной температуре и затем упаривают в вакууме. Остаток растирают с 5%-ньйм водным раствором кислого углекислого натрия (30 мл). Твердое вещество отфильтровывают, промывают 15 глп воды и затем кристаллизуют из - 5 :лл метилового спирта. В результате получают 0,55 г (73,5%) продукта, т.пл. которого 121-122 с. Элементный анализ. Рассчитано, %: С 91,96, Н 5,72, N 4,82. Сзо ij BnNjOe (мол.вес 381,49). Найдено, %: С 62,07, Н 5,81, N 4,90. ИК-спектр (КВг) : шсхч 1705 (), 1640 см (). Масс-спектр (т/е): 580/39, 582/38, 551/100. 553/98. 510/86. 512/79. 370/19, 372/14, 340/33, 342/25, 342/25, 300/23, 302/19, 281/26, 212/23, 207/20. Пример 5. Получение гидротартрат 10-бромаповинкаминол-З ,4 5-триметоксибензоата. Продукт, полученный в соответствии с примером 4, растворяют в диэтиловом эфире. К приготовленному раствору прибавляют насыщенный раствор 0-ви«ной кислоты в диэтиловом эфире до.полного осаждения. Полученную соль отфильтровывают и сушат. Т.пл. соли 118-120с. -Мол.вес 371,58. ИК-спектр (КВг): тллч 1710 см (). Пример 6. Получение (-)- -бромаповинкаминола. Из 0,40 г (0,88 ммоль) гидрохлорида (+)-11-бромаповинкаминав двухфазной системе, состоящей из 5 мл дихлорметана и 5%-ного водного раствора углекислого натрия, получают свободное основание. Органическую фазу отделяют, сушат над сернокислым магнием, фильтруют и упаривают в вакууме . Остаток растворяют в 5 мл безводного тетрагидрофурана. К приготовленному раствору при комнатной температуре и постоянном перемешивании прибавляют суспензию, приготовленную из 0,10 г литийалюминийгидрида и 10 мл безводного тетрагидрофурана. Реакционную смесь дополнительно перемешивают в течение двух часов, после чего производят разрушение избыточного количества восстановителя посредством прибавления 2,5 мл этилового эфира уксусной кислоты. Неорганический осадок отфильтровывают и фильтрат упаривают в вакууме досуха. Остаток растворяют в 15 мл 2,5%-ного раствора серной кислоты, раствор подщелачивают до рН 8 посред ством прибавления концентрированного раствора аммиака, после чего проиэв дят экстрагирование трижды дихлорме таном, используя каждый раз по 5 мл последнего. Объединенные .органические растворы сушат над сернокислым магнием, фильтруют и производят уда ление растворителя с помощью отгонки. Полученный продукт без дополнительной очистки применяют для осуществления дальнейшего взаимодейстВыход 0,26 г (76 ,5%). Масс-спектр (m/e,)s 386 (М, СгоНгэМзОВг, 100), 385/53, 371/89, 357/80,330/31, 329/26, 328/25, 327/16, 316/23, 300/16, 286/27, 271/12, 249/10. . . MB -120,3, ,2° (,07 дихлорметан). Исходный материал, примененный в этом примере, получают следующим сгЮсобом. 1,00 г (2,21 ммоль (гидрохлорида (+)-11-бром-14-оксо-15-оксиимино-Е-гомоэбурнана (получен известным способом) в смеси, состоящей из 37,2 MJI безводного метилового спирт и 13,5 мл концентрированной серной кислоты, нагревают в течение 8 ч на бане с температурой 125°С. Затем реакционную смесь выли.вают в 20 мл воды со льдом, раствор подщелачиваю до рН 8 посредством прибавления концентрированного раствора амгииака и три раза производят экстрагирование дихлорметаном, используя каждый раз по 8 мл последнего. Объединенны органические растворы сушат над сер нокислым магнием, фильтруют и упари вают в вакууме. Остаток (0,88 г) растворяют в 3 мл ацетона, раствор подкисляют до рН 4 посредством прибавления к нему раствора хлористого водорода в ацетоне, после чего раст вор упаривают в вакууме. Остаток по ле упаривания кристаллизуют из 3 мп ацетона. В результате получают 0,6 г (60%) ридррхлорида ()-11-бромапови камина, который затем перекристаллизовывают-из ацетона, т.пл. , ИК-спектр (КВг); 1730 (сложноэфирны СО), 1638 (), 1610 см (аромати ческая) . Масс-спектр (га/е, 414 (, С и Нгъ NI Og Вг, 41), 385 (ЮО), 356(9,2), 34 2 tl3, 329CIO) , 306 (l3/ , 26SC13)V 204(8,6), 191(9,8). tct-Ъ +37,e d.,2 (,35, дихлорметан). Пример 7. Полу чтение гидрохлорид (-)/11-бромаповинкаминол-З, 4,5-триметоксибензоата. 0,15 г (0,39 ммоль.) (-)-11-бромаповинкаминола растворяют в 2 мл безводного пиридина и приготоваенный раствор смешивают с 0,10 г(0,43 ММОЛЬ) свежеперегнанного 3,4, 5-триметоксибензоилхлорида. Реакционную смесь выдерживают в течение дня при комнатной температуре. Затем к смеси прибавляют 0,2 мл воды и производят перемешивание в течение 30 мин, от смеси отгоняют растворитель и полученный остаток распределяют между 5 мл дихпорметана и 3 мл 5%-ного раствора соды. Органическую фазу отделяют, сушат над сернокислым магнием и после фильтрования упаривают в вакууме досуха. Полученный остаток (0,22 г) растворяют в 1 мл ацетона, значение рН раствора доводят до 4 посредством прибавления раствора хлористого водорода в метиловом спирте и образовавшееся кристаллическое вещество отфильтровывают, в результате получают 0,15 г (62,6%) указанного продукта. Т.пл. 157-159 С (из ацетона). ИК-спектр (КВг): 1712 (сложноэфирный -СО), 1645 (), 1585 см (ароматическая). Масс-спектр (т/е,о): 580 (М, Сзо Нз2 NjOsBr, 45) , 565(0,8), 551(100), 510(78), 369(14), 339(35), 299(17), 256(14), 255(13), 212(19). Удельное вращение основания, выделенного из гидрохлорида: CsfHi, -53,5, Ccf.,5. (,78, дихлорметан). Предлагаемые соединения, соответствующие изобретению, тормозят активность фермента фосфодиэстеразы и могут быть применены, в первую очередь, для лечения кожных заболеваний, связанных с патологическим размножением клеток, или для предохранения от повторного возникновения этих заболеваний. Заболевания, связанные с патологическим разрастанием эпидермиса, являются сравнительно частными и затрагивают всего несколько процентов населения. Среди этих заболеваний существуют как доброкачественные, так и злокачественные, причем в качестве примера могут быть указаны psoriasis atopias dermatitis, первичный контактный дерматит, аллергический контактный дерматит, базои спиноклеточное раковое новообразование, лишай в виде рыбьей кожи, предшествующий стадии злокачественного перерождения кератоз, кератоз, индуцированный светом, воспаление волосяного фолликула и себорейный дерматит. Некоторые виды заболеваний имеют место-только у людей, другие у людей и животных. Так как часть заболеваний, связанных с патологическим размножени-ем клеток, например, псориаз, не бывает у животных, протйвопсориазная активность соединений с помощью проведенных на животных опытов может быть подтверждена лишь косвенно. Фоурхис и др.ЛгсЬ.Derm. 104, 359-365/1971) установил, что патологическое размножение клеток сопровож дается понижением уровня у ц-АМФ (.циклического аденозинмонофосфата) . Известно, что ц-АМФ образуется под действием аденилциклазы и разрушается благодаря фосфодиэстеразе. Фоурхису с успехом удалось оказать влияние на псориазный процесс с помощью средств, которые стимулируют действи аденилциклазы (например, норепинэфрин) или тормозят работу фосфодиэстеразы (например, папаверин). При проведении модельных опытов исходили из того, что установка Фоур хиса верна также в обратном направле нии, когда для соединения доказано, что оно тормозит функцию фосфодиэстеразы, то благодаря этому косвенным образом достоверно может быть конетатировано, что соединение пригодно для лечения прориаза или других заболеваний, связанных с патологическим размножением клеток. Позже это предположение также было подтверждено: соединения, которые in vitro проявляют активность, проявляющуюся в тор можении функции фосфодиэстеразы, также (Сказались пригодными для лечения псориаза при проведении клинических испытаний. - Модельные опыты осуществляли с применением фосфодиэстеразы, вьщеленной из ткани тела животного. Выделение фермента производили (из головного мозга крыс, головного мозга крупного рогатого скота и сердца крупного рогатого скота) методом Х.В.Рихенберга. Выделенный фермент очищали способом И.В.Хердмана и Е.В.Сутерлянда, а активность очищенн &го фермента определяли с помощью радиоизотопного метода Г.Реха. Для этой цели применя ли избыток tritiiertem ц-АМФ (10,1 моль ц-АМФ в качестве субстрата, 3-Нцц-АМФ 2,59 К В), и активност фермента определяли после инкубирова ния в течение 20 -мин как без тормозящего вещества, так и в присутствии соединения, подвергаемого исследованию. Из соединения при применении водного раствора соляной кислоты или диметилсульфоксида приготавливали 1-миллимолярный основной раствор, после чего этот раствор смешивали с инкудированным ферментным препаратом который брали в таком количестве, чтобы в инкубированных пробах концентрации соединения соответствовали , I-IO , 1-10 , , 10 моль/л. Аналогичным способом осуществляли парсшлельный опыт с при менением папаверина в качестве лонного вещества. Активность фермента, инкубированного без тормозящего вещества, принимали за 100%, а активности растворов, содержащих соединения общей формулы I или папаверин, выражали в процентах к KOHTpohbHOMy раствору. Результаты измерений, проведенных в случае фер мента, выделенного из сердца крупного рогатого скота, приведены в таблиИз таблицы видно, что тормозящее активность фермента действие всех трех исследованных соединений значительно лучше, чем действие известного параверина. Первые клинические опыты были проведены с различными препаратами, пригодными .для наружного применения (мази, крем, растворы, тинктура, пасты, аэрозоль). Примененный в опыте крем содержал в различных случаях 2%, 1%, 0,5%, 0,25% или 0,1% соеди нения общей формулы I. Исследуемых субъектов выбирали из числа больных, страдающих псориазом. При выборе исследуемых субъектов основным положением являлось то, что использованные .в опыте больные одновременно не получали системного immunosupressive, cytostatische или glucochordikolde) лечения для основного заболевания. Выбранных больных исследовали в группах по 5 субъектов с применением так называемого Plague метода. Симметрично расположенные участки измененной кожи в каждом случае обрабатывали с одной из сторон содержащим биологически активное вещество кремом, а с другой - индифферентным лекарством плацебо. На остальной соответствующей поверхнос±и кожи больных производили прежнее наружное лечение кремом, примененным в качестве эталонного средства и широко применяемым для лечения псориаза, причем этот крем содержал в качестве биологически активного вещества флюметазон-пивалат и салициловую кислоту. Исследование начинали при применении крема с большим содержа нием биологически активного вещества и продолжали с более низкими концентрациями. Кремом, содержащим наименьшую еще активную дозу, обрабатывали другого больного. Крем на большую поверхность кожи наносили два-три раза в сутки, причем лечение проводили до исчезновения или затухания недуга (в большинстве случаев 16 нед). Активность оценивали посредством наблюдения за тремя симптомами: воспаление, инфильтрация, шелушение. Интенсивность отдельных симптомов оценивали числами 1-3 и рассчитывали

общее значение, служащее мерой ослабления симптомов. Результаты оценивали методом математической статистики.

Исследования однозначно показали, что препараты, содержащие соединения общей формулы I, с успехом могут быть применены для лечения псориаза.

Вредное побочное действие не наблюдалось ни в одном случае.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет получать новые производные винкаминовых алкалоидов, обладснощих ценными фармакологическими свойствами.

1. Способ получения 3. ,4,5-триметоксибензоата производных аповинкаминога общей формулы i. с-о-онг -/ 8 ciis где - метоксигруппа или атом брома; СО R - атом водорода или R - атом водорода; R - атом брома, или их солей, отличающийся тем, что соединение общей формулы YVifH ЛЛ/.|.н 1 НО--СЙ2 CzH5 где R и К имеют указанные значения, подвергают взаимодействию с рёакционноспособным производным 3,4,5-триметоксибензойной кислоты и полученный целевой продукт выделяют в свободном виде или в виде солей. 2. Способ ПОП.1, отличающ и и с я тем, что в качестве реакционноспсхзобного производного 3,4,5триметоксибензойной кислоты используют 3,4,5-триметоксибензоилхлорид.

59,1 40,3 23,3

67j8 61,8

31,9 21,8 21,8

91,3 82,7 43,7