Способ получения производных аповинкаминола или их фармацевтически приемлемых солей Советский патент 1984 года по МПК C07D461/00 A61K31/4375 A61K31/475 A61P35/00 

.которую затем разделяют на отдельные продукты формулы Тв или Т с или при желании переводят в соли,

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что ацилирование проводят в среде хлорированного углеводорода.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что нитрование проводят при температуре около 0°С в присутствии ледяной уксусной кислоты.

1. Способ получения производных aпoвинкa шнoлa общей формулы 1 -«1 каминол подвергают ацилированию с помощью хлорангидрида 3,4,5-триметоксибензойной кислоты и полученное соединение формулы 1а

Изобретение относится к способу получения новых производных аповинкаминола общей формулы

Б

Цель изобретения - получение новых производных винкаминовых алкалоидов, обладающих иными, фармакологическими свойствами по сравнению с известными 5 структурными аналогами.

Цель достигается тем, что согласно способу, основанному на известном методе С1 3, а также на методе нитрования ароматических азотсодержащих

О соединений с помощью концентрированной азотной кислоты при в присутствии ледяной уксусной кислотыС2, аповинкаминол подвергают ацилированию с помощью хлорангидрида 3,4,5-три5 метоксибензойной кислоты и полученное соединение формулы

dHjO

dHsO

jg выделяют или переводят в соль, или нитруют с получением смеси соединений формул нол-3, 4, 5-триметоксибензоат раствор ют в метаноле, после чего с помощью солянокислого раствора метанола уст навливают рН 3-4. При добавлении ди этилового эфира образующийся гидрох РИД выпадает в осадок, который отфильтровывают, промывают и сушат. Т.пл. гидрохлорида 9-нитро-производного 144-150С, гидрохлсрида 11-нигропроизводного 141-144С. Было установлено, что описьшаемы в соответствии с настоящим изобрете нием соединения могут оказывать влияние на активность энзима фосфодиэстеразы и могут использоваться для лечения и профилактики кожных заболеваний, связанных с патологиче кой пролиферацией клеток. Так как некоторые из кожных заболеваний, связанных с патологической пролиферацией клеток (например, псориаз),, встречаются только у людей, то действие соединений по отношению к псориазису можно обнаружить только косвенным путем.: Установлено, что патологическая пролиферация клеток сопровождается снижением уровня аденозин-монофосфа та (с-АМФ). Известно, что с-А№) образуется в результате воздействия аденилциклазы и разлагается под дей ствием энзима фосфодиэстеразы. Таким образом, если соединение оказывает заметное тормозящее действие на функцию фосфодиэстеразы, то его, можно использовать для лечения псориаза или других связанных с патологической пролиферацией клеток заболеваний. Модельные опыты проводят с помощью фосфодиэстеразы, вьщеленной из тканей животных (мозга крыс и крупАповинкаминол З, 4, 5-триметоксибензоат гидрохлорид

49,2

64,5

47,2 ного рогатого скота, сердца крупного .рогатого скота. Энзим выделяют по методу I.Sehro-. der, H.V. Richenberg. Очистку выделенного энзима фосфодиэстеразы осуществляют по методу |1,С. Hardman, Е. W. Sutherland. Активность очищенного энзима определяют с помощью радиоизотопного метода по G.Poch в присутствии избытка третичного с-АШ) (10,1 ммоль с-АМФсубстрата, из которого ЗН-с-АМФ 2,59 К Bg) в инкубационной системе вначале без тормозящего средства, а затем в присутствии.9-нитро- или 11-нитро-аповинкаминол-З, 4, 5-триметоксибензоата в качестве тормозящего средства после инкубации в течение 20 мин. Из испытуемого соединения готовят 1-миллимолярный водный солянокислый основной раствор. С помощью этого основного раствора к инкубированному энзимному препарату добавляют различные количества испытуемого соединения с таким расчетом, чтобы концентрация его в инкубированном образце составляла 5x10 , 1x10, 5x1 СГ 1x10, 5х10, и 10 мол/л. Аналогйчным образом к энзимному препарату добавляют водный раствор папаверина (контрольное соединение). Активность контрольного препарата (раствора энзима без добавки тормозящего средства) принимают за 100%. Активность растворов, содержащих в качестве тормозящего средства апог винкаминол-З , 4, 5-триметоксибензоат, его 9-нитро- или 11-нитропроизводное или папаверин, выражают в процентах по отнощению к контрольному препарату. Результаты, полученные при использовании энзима, выделенного из мозга крыс, приведены в табл. 1. .Таблица 1

Соединение

(-)-11-Нитро-аповинкаминол3,4,5-триметокси-бензоат гидрохлорид 53,6

(-)-9-Нитро-аповинкаминол З, 4 J З-триметоксибензоат

Аналогичным образом определяют активность по отношению к энзиму, вьщеленному из сердца крупного рогатого скота.

На основании полученных результатов строят кривую зависимости активности энзима от логарифма концентраАповинкаминол-З, 4, 5-триметоксибензоатгидрохлорид.

(-)-11 -Нйтро-аповинкаминол-З, 4, 5-триметр ксибензоат .гидрохлорид

()9-Нитро-аповинкаминол-3, 4, 5-триметоксибензоат гидрохлорид

Папаверин гидрохлорид Из приведенных таблиц видно, что соединения полученные по предлагаемому способу в большей степени тормозят действие энзима, выделенного из сердца крупного рогатого скота ,и мозга крыс (в 35-50 и 4,5-9 раз со ответственно) , чем использовавшийся для сравнения папаверин.

8

Продолжение табл. 1

Влияние на активность энзима,% по отношению к контрольному препарату, при концентрации соединения, мол/л

5 X 10- I 1 X 1СГ I

5 X 10

44,4

37,3

ции ингибитора энзима, выраженной в микромолях, и на этой кривой находят концентрацию ингибитора, при которой активность энзима снижается на 50% (t5o)

Полученные результаты представлены в табл. 2.

Таблица 2

1,5

10

11

15

50

70 Первые клинические опыты проводили с помощью использующихся для наружного применения препаратов (мазей, кремов, растворов, настоек, паст, аэрозолей), содержапшх активное вещество. В опытах использовали кремы с содержанием аповинкаминол-3,4,5-триметоксибензоата или его (-)-99-нитро- или (-)-11-нитропроизводных %: 2, 1 0,5, 0,25 и 0,1, Испытания препаратов проводили на больных, страдающих псориазом. При этом отбирали пациентов, которы одновременно не получали никакого другого систематического лечения (например, иммуносупрессивного, цитостатического или лечения с помощь глюкокортикоидов). Отобранные больные подвергались исследованию по методу Плакэ: одну половину пораженного участка кожи обрабатывали кремом, содержащим активное вещес-Рво, а другую - ложным лекарством. Для сравнения другие пораженные участки кожи обрабатывали другими лекарствами, например кремом, содержащим в качестве активного вещества флуметазонпивала и салициловую кислоту. Начинали испы тания с кремов с максимальным содер

0,6 0,5

Соединение 1,8 формулы 1а

0,7 2,5 2,5 1,3

1в 2,2 1

1с 2,4 1,8 1,3 2,2 1,3 1,3

Таким образом,предлагаемый способ позволяет получать новые производные

0,4

1,3 0,75

1,2

1,5 0,5 О

1,6 1,2 0,81

винкаминовых алкалоидов,обладаняцие ценными фармакологическими свойствами. 9 жанием активного вещества, после чего обрабатывали других пациентов кремами с минимальным содержанием активного вещества. Курс лечения продолжался в течение двух недель. Крем накладывали ежедневно. Эффективность соединений оценивали по трем симптомам: воспалению, инфильтрации и десквамации (шелушению). Каждьй из симптомов оценивали в баллах. При этом О означает отсутствие симптома, 1 - умеренный симптом, 2 - сильный симптом, 3 - очень сильный симптом. Симптомы оценивали до начала лечения (А), после лечения в течение одной (б) и двух (С) недель. В табл. 3 приведены результаты испытаний средние баллы - общее число баллов, деленное на количество больных). Таблица 3