Способ получения производных цефалоспорина Советский патент 1986 года по МПК C07D501/46 A61K31/546 

Изобретение относится к способу олучения новых производных цефало- порина, которые .являются антибиотиами и могут найти применение в меицинской практике.

Цель изобретения - создание новых антибиотиков цефалоспоринового ряда, обладающих повышенной активностью и низкой токсичностью.

. ,. .. :

Пример 1. 7-(г)-2-метокси имино 2-(2-аминотиазол-А-ип)ацетами- до - 3 - (1 -метил-1 --пирр олидиний ) ме тип - -3-цефем-А-карбоксилат (Ь).

А. Бенэгидршювый эфир 3-хлор- ме ти л- 7-(г)-2-ме токсиимино -2- ( 2 - -тритиламинотиазол- -ил)ацетамидо - -3-цефем-4-карбоновой кисло Гы.

Бензгидриловый эфир 3-хлорметйл- -7-амино-3-цефем-4-карбоновоЙ кислоты (2,29 .г, ммояь) в (57 мл) обрабатывают бйс-(триметил- силил)ацетамидом (ВСА,4,09 нл, 16,6 ммоль) при крмйатной темпера- туре в течение 50 мин, получая про- зрачйый раствор. К раствору -Добав- ляют раствор хлорангидрида кислоты, полученный из (2)-2-метоксиимино-2- -(2-тритиламинотиазол-4-ил)уксусной кислоты (2,04 г, 4,60 ммоль), и PClj (1,15 г, 5,52 ммоль) в метилен- хлориде (20 мл), смесь.перемешивают при комнатной температуре 30 мин, выливают в холодную воду (200 мл) и экстрагируют этилацетатом (З ЮО мл), объединенные, экстракты промывают водным NaCl, сушат и упаривают. Оставшийся сироп (4 г) хро- матографируют на силикагелё (150 г) 6 колонке элюированием смесями 10:1 и 3:1 толуола и этилацетата после- ( довательно. Фракции, содержащие тре-- буемое соедииение, комбинируют и упаривают с получением 2,61 г (68%) соединения VI в виде аморфного порошка.ЯМР, S gDCl, , млн : 3,50 (2Н, с); 4,0- (ЗН, с); 4,33 (2Н, с); 4,96 (1Н, д); 5,87 (1Н, KB); 6,65 (1Н, с); 6,90 (1Н, с); 7,3 (25Н, м).

В. Бензгидриловый эфир 3-иодоме- тил-7-j(Z)-2-метоксиимино-2-(2-тритиламинотиазол-4-йл)ацетамидо -3- -цефем-4-карбоновой кислоты.

Смесь 3-хлормеТилового производ- иого по примеру 1А (1,50 г, 1,79 ммоль) и NaJ (1,34 г, 8,93 ммоль) в метил- этилкетоне (30 мл) перемёпшвают при комнатной температуре в течение 1ч.

После отгхэнки растворителя остаток растворяют в этилацетате (100 мл) и промывают водой, водным На.8.0. и водным NaCl, сушат и упаривают с

получением целевого соединения

(1,47 г, 89%) в виде аморфного порошка .

ЯМР. (JcDClj, 3, 55 (2Н, АВкв.); 4,00 (ЗН, с); 4,25 (2Н, с);

4,97 (1Н, д); 5,80 (1Н, кв), 6,65 (1Н, с); 6,90 (1Н, с); 7,3 (25Н, м). С. 7- (Е)-2-метоксиимино-2-(2-ами- нотиазол-4-.ил)ацетамидо -3-(1-ме- тил-1-пирролидиний)метил1-3-цефем- .

5 -4-карбоксилат (1а)..

Смесь с.оединения по примеру 1В (4,5 г, 4,93 ммоль) и Н-метилпирро- . лидина (0,65 мл, 6,20 ммоль) . (45 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 20 мин. К смеси добавляют эфир (300 мл) для выделения четвертичной соли заблокированного цефалоспорина, который соби, рают фильтрованием и обрабатывают 90%-ной трифторуксусной кислотой (ТФК) (40мл) при комнатной температуре в течение, 1 ч. З.атем смесь упаривают при пониженном давлении и температуре йиже 20°С. Остаток растирают с эфиром, получая соль ТФК соединения а (2,40 г), которую растворяют в метаноле (5 мл) и обрабатывают 1%-ным раствором натрий-2-этил- гексоата (НЭГ) в этилацетате (8 мл)

5 при комнатной температуре в течение 30 мин.. После добавления этилацетата (100 мп) образующийся осадок (1,94 г) собирают фильтрованием. Анализ с по- жидкостной хро{4атографии высокого давления (ЖХВД) показывает, что сырой продукт- имеет чистоту 7/J при соотношении между А -изомером и - изомером, равном 1:8. Очистку продукта с помощью ЖХВД повторяют триж ды (Лихросорб RP-18, 3-300 мм), . элюируют 5%-иым водным CHjOH или . 0,01 М аммоний -фосфатным буфером (рН 7,2), содержащим 5% CHjOH, с получением 35 мг (1,5%) целевого продукта в виде бесцветного порошка. Оцениваемая чистота (ЖХВД) 90%.Т.Ш1. (с разложением). . ИК-спектр(КВг) 1770; 1660; 1620, 55, УФ-спектр, „„« фосфатный буфер, рН 7) им (2): 235 (16200); 258 (15400).

ЯМР, D,0, 2,31 (4Н, м); 3,08 (ЗН, с); 3,63 (4Н, м); 4,09

0

(ЗН, с); 5,43 (1Н,я, а 4,8 Гц), 5,93 (1Н, д), 7,08 (1Н, с).

П р и .м е р 2. 7-(2)-2-метокси 1миио-2-(2-аминотиаэол-4-ил)ацетами (1-метил-1-пирролидиний)ме- тилЗ-З-цефем-4-карбрксилат (1а).

К перемешиваемому раствору 20,4 г (21,9 ммоль) соединения по примеру 1В в 150 мл сухого метиленхлорида добавляют 2,42 г (28,5 ммоль) 1-ме тилпирррлидина ,в виде одной порции гфн комнатной температуры. Смесь перемешивают 5 мин и выливают в 1000 м эфира при интенсивном перемешивании с oбpasoвaниe 4 осадка, который отфильтровывают, промывают эфиром (5 х X 30 нл) и сушат в вакууме с полу- ченЬем 19,3 г блокированного продукта в виде бледно-желтого порошка.

ИК- пектр, (КВг), 1м0«л , см : 3400; 1780 (с), 1740, 1675/ 1530.

ТСХ: раство{ итель - этанол/СНС1 (1:3), Rf 0,30, (Rf - 0,95 для соединения VII а).

Твердое веществб растворяют в 185 мл ТФК/воды (99:1), перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре, и концентрируйт до 30 мл при температуре ниже 10 с. Концентрат выливают в 1000 мл эфИра при . энергичном, перемешивании с образованием , который отфильтровывают промывают эфиром 5х 40 мл) и сушат в вакууме с получением 10,6 г бледно-желтого порошка. Порошок растворяют в 20 мл метанола и раствор фильтруют. К фильтрату добавляют 45 мл 0,8 И НЭГ IB этил- ацетате. Результирующую суспенэию выливают в 400 мЛ этилацетата и -- фильтруют с получением 8,08 г твердого вецества, которое является смесью целевого соединения и соответствующего л -изомера ( ) по данным ЖХВД-аналиэа (Лихросорб RP-18, 10-15% метанола в 0,01 М фосфатном буфере, рН 7). Второй опыт на 28,9 г (31,0 ммоль) соединения VII6 дает 16,0 г сырого продукта ( 1:8). Выделение целевого д -иэомера из скомбинированного сырого продукта (24,08 г) с использованием препаративной ЖХВД (Система 500, фирма Уотерс Ассошиейтс, ПропПАК 500/C j, 5-10Ц CHjOH) дает 769 мг соединения 1в.

Пример 3. 7-1(г)-2-метокси- имино-2-(2-аминатиаз6л-4-ил)ацетами2501734

Aoj-3-(1-метил-1-пирролидиний)ме- . тил З-З-цефем-4-карбоксилат (Та).

Проводят серию экспериментов для определения влияния количества раст- 5 йорителя и времени реакции на вькод соединения 1о, и отношения aV д в продукте реакции. Общая методика сводится к следующему.

К суспензии 3-иодометилового про- изводного по примеру 1В (45 мг, 0,048 ммоль) в указанном количестве указанного растворителя добавляют раствор N-метилпирролкдина (0,01 мл, 0,097 1ммоль) в эф лре (0,1 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение указанного периода. Реакционную смесь разбавляют эфиром (5 мл) и результируюпщй осадок собирают фильтрованием и смешив аю.т с 90%-ной ТФК. Смесь перемешивают в течение Г ч и упаривают до сухого остатка при пониженном давлении при температуре ниже , получая продукт. Отношение для продукта определяют с помощью ЖХВД (Лихро- icop6 , подвижная фаза 0,1 М аммоний-фосфатный буфер, рН 7,2 содержащий- 15% CHjOH, время удерживания мин, Д 5,56 мин). 30 Выход продукта и отношение изомег ров для каждого эксперимента приведены в табл. 1.

П р и м е р 4. 7-(г)-2-этокси5 имйно-2-(2-аминотиазол-4-ил)ацетами,- до1-3-(1-метил-1-пирролидиннй)ме- тилЗ-З-цефем-4-карбоксилат (j).

А. Бензгидриловый эфир 3-хлор- метил-7-(г)-2-зтоксиимино-2-(2-три® тиламинотиазол-4-ил)ацетамидо -3-це- фем-4-карбоновой кислоты.

К раствору (г)- 2-этоксиймино-2- -(2-тритш1аминотиазол-4-ил)уксусной кислоты (1,095 г, 2,4 ммйль) в ди хлорметане (20 мл) добавляют пяти- хлористый фосфор (500 Мг). После перемешивания в течение 1 ч при комнатной температуре смесь в виде од- .ной порции добавляют к охлаждаемому

на льду раствору бензгидрилового эфира 7-амино-З-хлорметил-З-цефем- -4-карб.оновой кислоты (1,083 г, 2,4 ммоль) и БСА (1 мл) в дихлорме- тане (20мл), После перемешивания

5 в течение получаса реакционную смесь .выливают в IOZ-ный водный NaHCOj (200 мл) и экстрагируют с помощью CHClj (100.МЛ). Экстракт промывают

512501

одои, осушаютиад MgSO и упаривают ри пониженном давлении.

Остаток хроматографируют в колоне, на силикагеле. Элюирование CHCl,

J

ает указанное соединение в видеj

морфного порошка, t,76 г (86%).

ЯМР, ( (CDClj), 1,40 (ЗН, . CH.CHj); 3,55 (2Н, АВка, 2-СН,); ,37 (2Н, с, -CHjO); 4,60 (2Н, кв, СН,СН,); 4,90 (1Н, g, 6-Н); 5,89 10 (1Н, g, 7-Н); 6,88 {1Н, с, Н тиазола; ,91 (1Н, с, СН бензгидрила).

В. Дифенилметиловый эфир 7-(Z)- 2-этоксиимино-2-(2-тритиламинотиа- . ол-4-ил)ацетамидо-З-иодометил-3- 15 -цефем-4-карбоновой кислоты.

Смесь соединения по примеру 4А (1,07 г, 1,25 ммоль) и NaJ (562 мг, 2,75 ммоль) в ацетоне (20 мл) перемешивают в течение 1ч, Смесь фильт- .20 руют, фильтрат выливают в воду и эк-. страгируют этилацетатом. Органический слой последовательно промывают 5%-ным водным , вОдой и насыщенным водным NaCl, осушают над . 25 MgS04 и упаривают с получением 1,04 г (89%), указанное соединение

ЯМР, CDCl,, 3,55 (2Н, кв, 2-СН); 4,27 (2Н, с, CHj-1); 5,02, (1Н, д, 6-Н); 5,87 (1Н, д, 7-Н);30

6,68 (1Н, с, Н тиазольного кольца), 6,93 (1Н, с. СИ бензгидрила).

С. 7-(Z)-2-этoкcииминQ-2-(2- Чaминoтиaэoл-4-ил)aцeтaмидoJ-3- (t- -мeтил- 1-пирролидиний)метил -3-це- 35 фем-4-карбоксилат (ife).

Смесь соединения по примеру 4В (333 мг, 0,33 ммоль) и N-метилпирро- лидина (60 мг, 0,7 ммоль в (5 мл) перемешивают в течение полу часа при комнатной температуре, а затем упаривают в вакууме. Остаток промьшают. эфиром и. растворяют в 90%-ной водной ТФК. После стояния в течение получаса при комнатной тем- пературе смесь концентрируют при пониженном давлении. К концентрату добавляют эфир для отделения чет- ; вертичного продукта, который собирают фильтрованием и растворяют в небольшом количестве метанола. Раствор хроматографируют в колонке НР-2 (40 мл). Элюирование 30%-ньм водным CHjOH с последующей лиофилизацией дает 0,062 г смеси изомеров и д 55 ( «5:1). Смесь очищают с помощью ЖХВД (Пихросорб RP-18, 8x300 мм, 15% метанола) и целевой А -изомер

г- ад

501

j

10 ;

. 15

- .20 . 25

, 30

35

;55 ю

ад

736

(IЬ) выделяют в виде бледно-желтого порошка 4,9 мг (2,7%).

УФ-спектр, чвкс (фосфорный буфер,. рН 7), нм (t) 235 (15000); 258 (14000).

ЯМР, JDjO, 1,43 (ЗН, т); 2,33 (4Н, м); 3,10 (ЗН, с); 3,64 (4Н, м); 4,3.6 (2Н, кв); 5,44 (1Н, д); 5,95 (1Н, д); 7,08 (1Н, с).

П р и м е р 5. 7-(Z)-2-(2-npo- поксиимино)-2-(2-аминотиазол-4-ш1) ацетамидо} -3-(1-метил-1-пирролиди- ний)метил-3-цефем-4-карбоксилат (IiJ.

А. Дифенилметиловый эфир 3-хлор- метил-7- (Z) (2-пропоксииминр) -2- -(2-тритиламинотиазол-4-ил)ацетами- до -3-цефем-4-карбоновой кислоты.

Смесь (Е)-2-(2-пропоксиимино)-2- -(2-триэтиламино-тиаз ол-4-ил)уксусной кислоты. (707 мг, 1,5 ммоль) и пятихлористого фосфора (344 мг, 1,65 ммоль) в дихлорметане (14 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч и выпивают в раствор бензинового эфира 7-амино- -З-хлорметил-З-цефем-4-карбоновой кислоты (677 мг, 1,5 ммоль) и БСА (1,1 мл, 4,5 ммоль) в дихлорметане (15 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение получаса, разбавляют этил- ацетатом (200 мл) и водой (3 X .X 100 мл), осушают над сульфатом натрия и упаривают с получением 1,4-г (100%) указанного соединения.

: ИК-спектр, (КВгГст : 3360; 3020, ЗОбО; 2960; 1785; 1725; 1680; 1520. .« : 1500; 1450; 1375; 1300;

125о; 1160; 1090; юбо; loio; 990;

840; 740; 700.

УФ-спектр, л EtOH, нм: 240 (24600); 260 С20700).

ЯМР, CDCl , 1,35 (6Н, д, I 6 Гц); 3,50 (2Н, с); 4,35 (2R; с); 4,58 (1Н, м, 1 « 6 Гц); 5,00 (1Н, I - 4,5 Гц); 5,91 (1Н, g-g-, I 4,5 и 9 Гц ; g для 1-4,5 Гц), 6,68 (1Н, с), 6,88 (1Н, с), 7,25 (25Н, с).

В. Дифeнилмeтилoв dt эфир 3-иоДо- мeтил-7-L(Z)-2-(2-пpoпoкcииминo)2- -(2- тритиламинотиазол-4-илацетами- до -3-цефем-4-карбоновой кислоты.

Смесь (Z)-2-(2-пpoпOкcииминo - -2-(2-триэтиламинотиазол-4-ип)уксусной кислоты (500 мг, 0,55 ммоль) . и иодида .натрия (248 мг, 1, мчоль) в ацетоне (10 мл) перемешивают при

комнатной температуре в течение 50 мин. После упаривания остаток растворяют в этилацетате (15 мл), последовательно промывают 10%-ным водным тиосульфатом натрия (10 мл), водой (10 мл) и водным NaCl (10 мл), осушают над сульфатом натрия и упаривают с получением 494 г (90%) указанного целевого соединения..

ИК-спектр, (КВг), мв«с , ст Ч 3360; 3040,- 3020; 2960-, 1785; 1720;

1080; 1боо; 1550; isoo; 1450; 1370; 1300; 123П; 1150; 1115; юао; 990; 90о; 840; 730; 700.

. УФ-спектр, ) EtOH, нм, (К): 240 (2А900); 260 (19400).

HMP,JCDC1, млн : 1,30 (6Н, д I 6 Гц), 3,37 и 3,70 (Ш каждый, . д, I 16 Гц); 4,22 (2Н, с), 4,55 ОН, м, 1-6 Гц); 4,95 (Ш, g, I - 4,5 Гц); 5,83 (1Н, g-g, ,5 9 Гц, g для D40)jL.6,66 (1Н, с), 6,87 (1Н. с); 7,25 (25 Н, с).

С. 7-(Z)-2-(2-nponoKCHHMHHo)- -2-(2-аминотиазол-4-ил)ацетамидо - -3- (1 -м,етил-1 -пирролидиний)метил - I-З-цефем-4-карбоксилат (Тс).

Смесь соединения по примеру 5В (545 мг, 0,55 ммоль) и |-метилпир- ролидица (70 мг, 0,82 ммоль) в ди- хлорметане (10 мл) перемешивают при комнатной темпе.ратуре в течение получаса и разбавляют эфиром (100мл). Результирующий остаток собирают фильтрованием. Раствор ос адка в 90%- ной ТФК (4,5 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение получаса и упаривают в вакууме. Остаток растирают с эфиром с- получением 317 мг сырого продуктаi кото- рыА хроматографируют в колонке НР-20 (50 мп), элюируют водой (500 мл) и 3.0% СН,ОН (500 мл). Элюат в 30%-ном концентрируют и лиофилизуют

Пример 6. 7 Г(Х)-2-аллило имино-2-(2-аминотиазол-4-ил)ацета (1-метил-1-пирролидииий)мет -З-цефем-4-карбоксилат (7с1).

А. Бекзгидриловьтй эфир 7-(Z)-аллилоксиимино-2-(2-трнтидаминот зол-4-ил)ацетамидо -3-хлорметил-З -цефем-4-карбоновой кислоты.

В суспензии бензилового эфира- 7 -амино-З-хлорметил-З-црфем-4-карбо

СН,,рН

с получением 109 мг смеси изомеров (

6/1), 100 мг которого очищеаат с помощью ЖХВД (Лихросорб RP-tS, 15% МеОН), получая 5 мг (3%) целевого соединения по пр имеру 1C.

УФ-спектр,„в1ке (РН 7, буфер),ни (f): 236 (15100), 252 (14600).

.О, 1,42 (6Н, д, 1-6 Гц); 2,33 (4Н, с); 3,10 (ЗН,с);

10

новой кислоты (1,35 г, 3, ммоль) в метиленхлоридё (20 мл) добавляют Б (1,1 мл, 4,5 ммоль) и смесь переме вают в-течение поЛучаса при комнат 15 температуре с образованием прозрач ного ра створа. Смесь (2)-2-аллиЛок имино-2-(2-тритиламинотиазол-4-ил) сусной кислоты (1,40 г, 3,0 ммоль) и пятихлористого фосфора (690 мг, 20 3,3 ммоль) в метиленхдориде (20 мл перемешивают в течение 15 мин при комнатной температуре и выливают в виде одной порции в раствор трйме- тилсилилированного соединения V. 25 Смесь перемешивают 20 мин при ком- натной температуре и разбавляют эти ацетатом (200 мл), промывают водным бикарбонатом натрия и водой, осушаю и отгоняют при пониженном давлении. 30 Маслоподобный остаток очищают-на си ликагеле методом хроматографии в ко лонке (Вако-гель, С-200, 30 г). Колонку злюйруют хлороформом и комбинируют фракции, содержащие целево продукт. Отгонка при пониженном дав лении дает целевой продукт в виде аморфного порошка, выход. 2,32. г (89%). Т. пл. 100-115 С (разложение ИК-спектр (КВг), JMCIKC, см :

40 3990; 1790; 1730; 1680; 1530; 138о;

1250; 1160; 1020.

ЯМР, CDCl, . 3,50 (2Н,

а-н); 4,32 (2н, с, 3-cHj.); 4,6-6,1

, (7Н, м, CHjCHrCH, 6,7-Н); 6;70 (1Н, 45 с, Н тиазола); 6,90 (1Н, с, ); 7,1-7,6 (Зон, м, протоны фенила).

Найдено, %: С 64, 13; 63,99; Н 4,6 4,64; N 7,50, 7,30; S 6,85, 6,85; С1 7,55, 7,46.

35

50 C4gH NjOf S,C1- 1/3 CHClj

. Рассчитано ,%:С 64,05; Н 4,45; N 7,73; S 7,03; С1 7,82.

В. Бензгидриловый эфир 7- f(Z)- -2-aллилoкcииминo-2-(тpитилaминoтиa3,65 (4Н, с); 3,83 и 4,23 (1Н, каж-55 зол)-4-ил)ацетамидо -3-иодометил-3- ,дый, д, Гц); 5,45 (1Н, д, I - -цефем-4-карбоновой кислоты. - 4,5 Гц)| 5,95 (1Н, д, ,5 Гц); Смесь соединения по примеру 6Л 7,05 (1Н, с). . (2,30 г, 2,65 ммоль) и йодйда натрия

12501738

Пример 6. 7 Г(Х)-2-аллилокси имино-2-(2-аминотиазол-4-ил)ацетами- (1-метил-1-пирролидииий)метил- -З-цефем-4-карбоксилат (7с1).

А. Бекзгидриловьтй эфир 7-(Z)2- -аллилоксиимино-2-(2-трнтидаминотиа- зол-4-ил)ацетамидо -3-хлорметил-З- . -цефем-4-карбоновой кислоты.

В суспензии бензилового эфира- 7- -амино-З-хлорметил-З-црфем-4-карбо10

новой кислоты (1,35 г, 3, ммоль) в метиленхлоридё (20 мл) добавляют БСА (1,1 мл, 4,5 ммоль) и смесь перемешивают в-течение поЛучаса при комнатной 15 температуре с образованием прозрачного ра створа. Смесь (2)-2-аллиЛокси- имино-2-(2-тритиламинотиазол-4-ил)ук- сусной кислоты (1,40 г, 3,0 ммоль) и пятихлористого фосфора (690 мг, 20 3,3 ммоль) в метиленхдориде (20 мл) перемешивают в течение 15 мин при комнатной температуре и выливают в виде одной порции в раствор трйме- тилсилилированного соединения V. 25 Смесь перемешивают 20 мин при ком- натной температуре и разбавляют этипг ацетатом (200 мл), промывают водным бикарбонатом натрия и водой, осушают и отгоняют при пониженном давлении. 30 Маслоподобный остаток очищают-на си- ликагеле методом хроматографии в колонке (Вако-гель, С-200, 30 г). Колонку злюйруют хлороформом и комбинируют фракции, содержащие целевой продукт. Отгонка при пониженном давлении дает целевой продукт в виде аморфного порошка, выход. 2,32. г (89%). Т. пл. 100-115 С (разложение). ИК-спектр (КВг), JMCIKC, см :

0 3990; 1790; 1730; 1680; 1530; 138о;

1250; 1160; 1020.

ЯМР, CDCl, . 3,50 (2Н,

а-н); 4,32 (2н, с, 3-cHj.); 4,6-6,1

(7Н, м, CHjCHrCH, 6,7-Н); 6;70 (1Н, 5 с, Н тиазола); 6,90 (1Н, с, ); 7,1-7,6 (Зон, м, протоны фенила).

Найдено, %: С 64, 13; 63,99; Н 4,61, 4,64; N 7,50, 7,30; S 6,85, 6,85; С1 7,55, 7,46.

35

0 C4gH NjOf S,C1- 1/3 CHClj

. Рассчитано ,%:С 64,05; Н 4,45; N 7,73; S 7,03; С1 7,82.

В. Бензгидриловый эфир 7- f(Z)- -2-aллилoкcииминo-2-(тpитилaминoтиaС2 г, 13,3 ммоль) в ацетоне (15 мл) еремешивают в течение 1 ч ьри ком- ajTHOH температуре, а затем упариают при пониженном давлении. PSICT- ор маслоподобного остатка в этилаце- J тате (200-мл) промывают тиосульфатом натрия и водой, упаривают при пониженном давлении с получением указанного соединения в виде аморфного порошка, который исполь.зуют на следующей стадии без дальнейшей.очистки. Выход 2,52. г (99%).

С. 7- Г(2)-2-аплиЛоксиимино 2-(2- -аминотиазод-А-ил)ацетамидо -3-(1 - -метил-1-пирропидиний)метилЗ -3-цефем- -4-карбоксш1ат (I).,

Смесь соединения по примеру 6В (478 мг, 0,5 ммоль) и Н-метилпирро- лидина (0,05 мл, 0,5 ммоль) в мети- ленхлориде (5 мл) перемешивают 20 мин при комнатной температуре и разбавляют эфиром (50 мл) для осаждения четвертичного продукта (выход 500-мг), Смесь четвертичного продукта и ТФК (2 мл) отстаивают при комнатной тем- пературе- в течение полутора часов и разбавляют эфиром для осаждения сырой соли ТФК продукта (выход 265мг), которую хроматографируют на колонке НР-20 (1,8x18 см). Колонку элюируют 0 водой и 30%-ным водным метанолом. Метанольный элюат упаривают при пониженном давлении и остаток- леофили- зуют с получением аморфного порошка (выход 124 мг), который содержит це- 35 левой.продукт (17%) и соответствующий а изрмер (83%). Смесь очищают с помощью ЖХВД (Лихросорб RP-18, 0,01 (рН 7); CHjOH « 85:15). Элюат подкисляют до рН 3 . 40 разбавленной НС1 и хроматографируют на колонке НР-20 (1,8 X 10 см).Колонку элюируют водой, а затем 30%-ным водным метанолом. Метанольный элюат упаривают при пониженном давлении и ; 4$ остаток лиофилизуют с получением.

целрвого указанного соединения (t(i) в виде аморфного порошка (выход 13мг, 5,1%). Т.пл. 155 С (разл.)

ЙК-спектр, (КВг) Moiite см :50

3600-2800; 1770; 1670; 1610, 1530; 1200;

УФ-спектр, (рН 7, буфер), нм (€): 235 (16600); 253 (15600)..-55

ЯМР;(УО,О, 2,1-2,5 (4Н, . с, Н пирролидина), 3,10 (ЗН, с, CHj); 3,4-3,8 (4Н, м, пирролидина); 5,95

UH.g,; 4Н, 2; Н); 7,10 (1Н, с, Н тиазола),

Пример 7. (2-амино- тиазол-4-ил)-(г)2-карбоксипроп-2- -оксиимино-ацетамидоJ-3-(1-метил- -1-пирролидиний)метил -3-цефем-4- -карбоксилат (1«).

А. Бензгидриловый эфир 3-хлор- метил.-7-1(г)-2-(2-трет-бутоксикарбо- нилпроп-2-оксиимино-2-(2-тритиламинотиаэол-4-ил)ацетамидо -3 цефем- -4-карбоксиловой кислоты.

Методика 1. Смесь (Z)- -2 (2-трет-бутоксикарбонилпроп--2- оксиимино)-2-2-тритиламинотиазол-4- -ил)уксусной кислоты (1,94 г, 3,6 ммоль), ДДК (742 мг, 3,6 avIoль) и Н-гидроксибензтриаэола (486 мг, 3,6 ммоль) в тетрагвдрофуране (Т.ГФ) перемешивают при комнатной температуре в течение 45 мин на протяжении которых отделяется дицикАогек силмочевина. Последнюю удаляют фильтрованием и фильтрат смешивают с бензгидрилоэЬ1м эфиром 7-амино-З- -хлорметил-З-цефем-4-карбоновой кислоты (1,5 г, 3,6 ммодь).. Смесь перемешивают на протяжении ночи при комнатной температуре, а затем упаривают в вакууме. Остаточное масло растворяют в .CHClj(20 мл), промывают насьш енным водным NaHCO и насьшцен- ным водным NaCl осушают над MgS04 и упаривают до сухого остатка. Остаток (3,9 г) растворяют в н-гексане CHClj (1:2) и пропускают через колонку с силикагелем (40 г), используя ту же систему ,растворителей, фракции, содержащие целевое соединение, упаривают в вакууме с полу- . чением 1,3 г-(39%) указанного сое- динения, плавящегося при температу- ре свыше (разл.).

/ N-

ИК-спектр, (КВг), м.в« , .см ; 3990,- 1790; 1715; 1690.

УФ-спектр, (EtOH), нм: 240 (Е, 280); 265 (вЦ ; 190).

ЯМР rfCDClj, 1,45 (ЗН,с); 1,63 Ё 1,66 (6Н, кажд. с); 3,49 (2Н, широкий с); 4,34 (2Н, с), 4,96 (1Н, д, I - 4,5 Гц), 5,90 (1Н, д-д, I - 4,5 и 7,5 Гц); 6,66 (1Н, с), 6,86 (1Й, с); 7,0-7,5 - (25Н, и); 8,23 (1Н, д, I 7,5 Гц).

Me то дика 2. Раствор беи- зилового эфира 7-амиио-3-хяорметил -3-цефем- -карбоновой кислоты ( г, 4,49 ммоль) в CHjCl

11

(А6,5 мл) рбрзб тнгаают в течение АО мин с получеяием прозрачного раствора. К раствору добавляют раствор хлораигидрида кислоты, который получают из соедиления Ша (2,56 г, А,49 ммоль) и peij (1,12 г, 5,38 ммоль) в метщшихлориде (26мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение получаса, выливают в холодную воду (100 мл) и экстрагируют этилацйтатом (3 х 50 мл). Скомбинированные экетракть промывают водным NaCl, осушают и упаривают. Остаточный сироп (3 г) хронатографи- руют в колонке с силикагеяем (100 г) элюированИен 10;1 смесью голуола и этилацетата. Фракции,содержащие целевое соединение, комбин нруют и упаривают с получением 2,84 г (65%) укаг зайного соединения,

В. Бенэгйдриловый эфир 7-(Z)- -2 (2 трет-бутоксикарбонилпроп-1-ок- сиимино)-2-(2-тритиламинотиазол-4- -ил)aцeтaмидoJ-3-иодометил-З-цефем- -4-карбоновой кислоты. .

Смесь соединения по примеру 7А (500 мг, 0,53 ммоль) и NaJ (240 мг, 1,6 ммоль) в ацетоне (3 мл) перемеривают 2ч при комнатной температу- ве а затем упаривают в ваку.уме. К . . бстатку добавляют GHjClji (20 ил) и оду (10 мл). Органический слой прозывают 10 об.%. раствором тиосульфата натрия (5 мл) и 1 одиым ЫаС1

1250173Г2

ляют эфиром (80 мл). Образующийся

осадок собирают фильтрованием и пр мыйают эфиром /с получением 420 мг . четвертичного продукта, который д

5 блокируют 90%-ной ТФК (4,2 мл) п комнатной температуре в те-чение 1 Затем реакгдионкую смесь упаривают сухого остатка. К остатку добавля эфир с получением сырой ТФК-соли

10 соединения .lo (245 мг, количествен ный выход), который представляет с бой смесь 1:4 изомеров л. Сыр продукт подвергают очистке методом ЖХВЙ -(Лихросорб RP-18 : 4 х 3.00 м

5 элюирование 0,01 М аммоний-фосфатн буфером (рН 7,0), содержапщм 10% ). Фракцию, содержащую целево , собирают и упаривают до н большого объема. Концентрат доводя

20 до рН около 2 добавлением 1М НС1

и пропускают через колонку ( X 15 см) для удаления неорганических солей. Колонку промьюают HjO

(1000 мл) и элюируют 30%-ным СН,|ОН 25 Элюат упаривают и лиофилизуют с по лучением 21 мг (10%) целевого продукта (1е) в виде бесцветного порош ка. Т. пл. 160 С (разл.). . ИК-спектр, (КВг) , с„(с 340 30 1775, 1610.

Уф-спектр рН 7, нм () (155500).

ЯМР,(У 0,0, млн

IMOKC фосфатный буфер, 237 (15700); 257

1,65 (6Н, с);

р мл), осушают над MgSO; и упаривают 2,3 С4Н, м); 3,09 (ЗН, с), 3,7 (4Н,

до сухого остатка с пояучейием 540 мг (50%) указанного соединения я виде аморфного порошка, плавящегося при (разл.).

40

м); 4,0 (2Н, м); 5,44 (1Н, д); I 4,8 Гц 5,94 (1Н, д), 7,15 (1Н,с

Соединения формулы I проявляют высокую антибактериальную активност в отношении грамположительных и грам отрицательньп бактерий, пригодны для лечения бактериальных инфекций живот НЬ1Х, а также человека, могут быть ис пользованы для приготовления препаративных форм, предназначенных для употребления парентерально, обычным путем с применением известных фармацевтических ,носителей и эксципиён- тов и могут быть представлены в виде единичных дозировочных форм или в виде множественно-дозировочньсх форм. Композиции могут быть представлены в виДе растворов,, суспензий или эмульсий в масляных или водных разбавителях ,и могут содержать обычные диспергирующие,- суспендирующие и ста- бнлизирующие вещества. Композиции М.огут быть представлены в виде сухо.см

,-1

3350;

(s; 270);

ИК-спектР (КВг) „ 1790, 1690.

УФ-спектр, V EtOH: 240 265 ( 190).

ЯМР, (JCDCl,, 1,44 (9Н, с); 1,65 ,(6Н, с), 3,54 (Ш, 4,28 С2Н,с); 4,98 (1Н, д, I 4,5 Гц); 5,85 (Ш, д-д, I - 4,5 и 7,5 Гц); 6,70 (1Н,с); 6,90 (1Н, с); 7,1-7,5 (25Н, м).

С. (2-аминотиаэол-4-гип)г(2)- -2-(2-карбоксипроп-2-оксиимино)ацет- амидо -3-( 1 -метйл-1-г1Нрролидкний) метил -3-цефем--4-карбоксияат (1е).

Смесь иодометильиого производного по примеру 7В 038 мг,0,51 ммоль) и .Ы-метилпирролидяна (0,079 мя, 0,076 ммоль) а , (10,8 нл) отстаивают при комнатной температуре в течение получаса, а затем разбав-.

250173Г2

ляют эфиром (80 мл). Образующийся

осадок собирают фильтрованием и про- мыйают эфиром /с получением 420 мг четвертичного продукта, который де-

5 блокируют 90%-ной ТФК (4,2 мл) при комнатной температуре в те-чение 1 ч. Затем реакгдионкую смесь упаривают до сухого остатка. К остатку добавляют эфир с получением сырой ТФК-соли

10 соединения .lo (245 мг, количествен- ный выход), который представляет собой смесь 1:4 изомеров л. Сырой продукт подвергают очистке методом ЖХВЙ -(Лихросорб RP-18 : 4 х 3.00 мм,

5 элюирование 0,01 М аммоний-фосфатным буфером (рН 7,0), содержапщм 10% ). Фракцию, содержащую целевой , собирают и упаривают до небольшого объема. Концентрат доводят

20 до рН около 2 добавлением 1М НС1

и пропускают через колонку (2х X 15 см) для удаления неорганических солей. Колонку промьюают HjO

(1000 мл) и элюируют 30%-ным СН,|ОН; 5 Элюат упаривают и лиофилизуют с получением 21 мг (10%) целевого продукта (1е) в виде бесцветного порошка. Т. пл. 160 С (разл.). . ИК-спектр, (КВг) , с„(с 3400j 0 1775, 1610.

Уф-спектр рН 7, нм () (155500).

ЯМР,(У 0,0, млн

IMOKC фосфатный буфер, 237 (15700); 257

1,65 (6Н, с);

2,3 С4Н, м); 3,09 (ЗН, с), 3,7 (4Н,

2,3 С4Н, м); 3,09 (ЗН, с), 3,7 (4Н,

м); 4,0 (2Н, м); 5,44 (1Н, д); I 4,8 Гц 5,94 (1Н, д), 7,15 (1Н,с).

Соединения формулы I проявляют высокую антибактериальную активность . в отношении грамположительных и грам- отрицательньп бактерий, пригодны для лечения бактериальных инфекций живот- НЬ1Х, а также человека, могут быть использованы для приготовления препаративных форм, предназначенных для употребления парентерально, обычным : путем с применением известных фарма . цевтических ,носителей и эксципиён- тов и могут быть представлены в виде единичных дозировочных форм или в виде множественно-дозировочньсх форм. -. Композиции могут быть представлены в виДе растворов,, суспензий или эмульсий в масляных или водных разбавителях ,и могут содержать обычные диспергирующие,- суспендирующие и ста- бнлизирующие вещества. Композиции М.огут быть представлены в виде сухо13

о порошка предназначенного для азбавления перед употреблением, на- пример, стерильной водой, не содержащей пирогенных,веществ. СЬедине- ния формулы 1 могут быть также приготовлены в виде свечей, использую- вщх обычные для этой цели основы, например масло какао или другие гли цеРИДЫ. При необходимости иредлагае. ые соединения.могут быть предписаны сочетании с другими антибиотиками, такими как ленициллины или другие цефалоспорйны.

В ел/чае 11риготовлення в виде единичных дозировочных фо рм КОМПОЗИ191И

предпочтительяб содеркат 50-1500 мг активного ингредиента форму1й|| Т.Дпя лечения взрослых дозировка предпочтительно составляет 500-5000 мг/сут в зависимости от частоты и способа приёма. В случае внутримышечного или внутривенного введения взрослому человеку полная доза в порчк обычно составляет 750-3000. мг/сут в виде раздельюк дозировок хотя для некр торых Ьоединений Moxet потребоваться более высохая суточная доза в случае

-

-coHH-r-rS i fi о гй ШгОбсн

л

осн.

цефотаксим; соединение дли сравнения

50173U

инфекций бактерЙ5ит рода Pseudo- mpnas.

Предпочтительньвт являются соединения формулы 1, в которых R - метил

5 или этил Наиболее предпочтительное соединение с R - метил. В ходе первичной оценки предлагаемых соединений шнимальиую ингибирупщую концентрацию ((ШК) для срединений и двух

10 соединений для сравнения (цефотаксим и ((ефтазщсим)- определяют методом двукратного разбабления агара с использованием агара Моллера-Хинтона для 32 штаммов испытуемых организмов, .

13 поделенных на ioecTb групп.

Геометрические средние значения МИК, определенные в этом эксйеримбн- тё, приведены в табл., 2 и 5. . 20 Уровень, содержания в KpoBii после внутримьш1ечно го введения мышам (20 мг/кг) приведен в табл. 3.

Реэистентность (НИК / в мкг/мл) К одному или нескольким ис1штуемым 2S соединениям среди 240 штаммов Ente- robacterlaceae в среде Нюллера-Хин- тона показана в табл. 4.

соон

I-CONH-v

livj LKaiy.V

-Ч-S

0

COC)®

i c- jr-CH3 : cooH

livj LKaiy

COC)®

цефтаэидим,соединение для сравнений

HzN

;-coNH

0«2

LcHrfO coo® снз

(1)

испытуемые соединения.

15

I Все испытуемые соединения более активны , чем цефотаксим в отнотении групп (Q-)-II и (G-)-III испытуемых органиа|мов, причем-наиболее предпочтительное соединение I а является явно более активным. Все испытуемые соединения более активны, чем цеф- тазидим в отношении групп (G+)-Ie и (G+)-1. испытуемых организмов,причем наиболее предпочтительное соединение jo явно активнее цефтазидима в отношении всех групп испытуемых организмов, за исключением (G-)-III, которые несколько более чувствительны к цефтазидиму.

Абсорбцию наиболее предпочтительнего соединения Jo и соединений для сравнения (цефотаксим и цефтазодим) рпределяли на мышах после однократной внутримышечной инъекции испыту- емого соединения (растворенного в 1М фосфатном буфере; рН 7) при дозировке 20 мг/кг. Пробы крови собирали из орбитальных синусов в обра - ботанные гепарином капиллярные труб ки и высевали на среду Моллера-Хин- тона с использованием Morganella Morganii А 9695 в качестве испытуемого организма. Уровни содержания в крови в различные промежутки време- ни величины подупериодов. (ti/) и площади под кривыми (ППК) представлены в табл. 3. .

Проводили также испытания для вы- явле ния организмов, резистентных к

5 о

5017316

предпочтительно соединению форму- лы Id, цефотаксиму и цефтазиднму, Значения МИК для этих трех соедине- . НИИ в .отношении 240 штаммов Entero- 5 bacteriaceae .определяли в среде Мгол- лера-Хинтона и значение MJfK, равное или превышающее 8 д.пя не менее одного из испытуемых сое71инеинй, произвольно принималось за свидетель- 10 ство резистентности организма. Из 240. штаммов 27 оказались резистентными не менее чем к одному из испыг туемьк соединений. Из табл. 4 следует, чтв 3 организма резистентны к 15 соединению 1я, 15 к цефтазидиму и 18 к цефотаксиму. Соединение 1е активнее цефотаксима в отнотении группы (G-)-II Испытуемых организмов и намного активнее цефотаксима в 20 отношении группы (G-)-III испытуемых организмов (PS. aeruginosa). Оно активнее цефтазидима в отношении всех групп грамположительных испытуемых организмов, исключая (G-)-III . (PS. aeruginosa), которые чувствительнее к цефтазиднму,

Испытуемое соединение по табл. 5,.

;-coNH-r-r Ф,

UWH-Tг Ч#Х

й-о (f l y %-VxJ ( СНЗ

соон

Таблица 1

Примечай и е. (СЯ-)-Тв

(С)-ТЬ (G-)-lo

(5 штаммов), чувствительйьй к пеяициллину; (5 штаммов), чувствительный к пенициллину; (2.штамма). К .1 Ш1гамм) и (2 ), чувст: вительные к цефаАотину;; . (С-)-1Ъ - (3 штамма) и (3 Штамма), реэистеногные к дафалотйну;

Соединение

1о, К-метил («) Цефотдксим (М Цефтазиднм (с)

П р и меча ни е. () - среднее значение для 2 испытаний;

(b)- одно испытание;

(c)- среднее значение для 3-х испытаний.

J9

Escherichia coli Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Enterobacter aerogenes Enterobacter aerogenes

Enterobacter сloacae

Enterobacter cloacae Enterobacter cloacae Enterobacter cloacae Citrobacter freundii

«

Citrobacter species Proteus vulgaris Morgdnella raorganii

Serratla marcescens Serratia marcescens Serratia marcescens Serratia marcescens Serratia marcescens

Общее число резистентных штаммов .

1250173

20 Таблица Л

27

15

18

n Рим e ч ан не. (G+)-Jlci - чувствительный к .пенициллину

(5 штаммов); . ()-Tb - чувствительный к пенициллину

(5 штаммов); , (С)г1 чувствительный к цефакотину

(2 штамма), К1 .(1 штамм) и V , 2 штамма); (G)-jl - резистентный к цефалотину

(3 штамма) и (3 штамма); (G-)-II - (1 штамм),. (2 штамма) и

(2 штамма); (O-)-lIl - (6 штаммов);

(о) среднее значение для 5 ..sKcnepHMeHtoB.

Составитель З.Латыпова. Peдaкtop А.Козориз Техред Н.Воикало-Корректор А.Зимокосов

Заказ 4341/60Тираж 379-.Подписное

ВНИИЛЙ 1 осударственного комитета СССР

по делам изобретений и О1гкрытий 113033, Москва, Ж-35, Раушская наб. д 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Уясгород, ул. Проектная 4