Способ приготовления питательной среды для культивирования продуцентов целлюлолитических ферментов Советский патент 1984 года по МПК C12N9/42 C12N1/22 

о:) Изобретение относится к. микробиологической промышленности, в час кости к производству ферментов,, и может быть использовано для получения целлюлолитических ферментов, Целлюлолитические ферменты, полу чаемые с помсяцью различных микроорганизмов, находят широкое применение в народном хозяйстве, в частности в животноводстве при приготовлении кормов, в пищевой прошлаленности для получения глюкозы, в г ролизной для получения этилового. спирта из целлюлозосодержащего сырь Известны способы приготовления питательных сред для культивировани продуцентов цеплюлрлитических ферме тов, предусматривающие обработку це люлозосодержащего сырья с последующим введением в обработанное сырье минеральных солей и доведением объе ма до-.заданного. Известен способ приготовления среды для культивирования продуцентов целлюлолитических ферментов, предусматривающий термообработку целлюлозосодержащего сырья - свекловичного жома при 121°С в течение 30 мни с последующей промывкой его и высушиванием 1П . Недостатком способа является использование оборудования, работающего под давлением, а также трудоемкость при промывке Обработанного жома и сушке., Кроме того, прикультивировании на указанной среде продуцентов целлюлолитических ферментов активность фер ме1нтов невысокая. Известен также способ, в котором целлюлозосодержащее сырье - багассу обрабатывают щелочью (4%-ной МаОН) при комнатной температуре в течение ночи с последующей промывкой, введением в обработанную багассу органического источника азота и минеральных солей и доведением объема водой до заданного L2 , Недостатком способа является его трудоемкость, а применение кислот и щелочей снижает срок эксплуатации используемого оборудования из-за коррозии. Наиболее близким по технической, сущности и достигаемому результату к предлагаемому является способ приготовления питательной среды для культивирования продуцентов целлюло литических ферментов, предусматриваюш ий внесение в воду целлюлозос.одержащего сырья, органического источника азота и минеральных солей при перемешивании с последующим доведением объема водой до заданного, согласно которому в качестве источника целлюлозосодержащего (сырья используют свекловичный зком в количеству 2,5-7 мас.%, а в качестве органических источников азота зернокартофельную барду в количестве 5-50 мас.% сЗ. Недостатком известного способа является низкая активность целлюлолитических ферментов (8 ед/мл% Цель изобретения - увеличение активности целлюлолитических ферментов. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу приготовления питательной среды для культивирования продуцентов целлюлолитических ферментов, предусматривающему внесение в воду целлюлозосодержащего сырья в виде свекловичного жсма, органических источников азота и минеральных солей с последующим доведением объема водой до заданного, перед внесением минеральных солей смесь целлюлозосодержащего,сырья и органического источника азота обрабатывают целлюлолитическими ферментами при 40-55 рН 4,3-5,5, гидромодуле 1,5-1:10, причем из целлюлолитичерких ферментов используют целловиридин ГЗх или целлоконингин Пх в количестве 0,2-т2,0 и 0,1-.1,0мас.% соответственно, а в качестве источников азота - пшеничные отруби и солодовые ростки в количестве по 0,1-0,5% от объема среды. Кроме того, смесь, содержащую целлюлозосодержащее сырье и органические источники азота, обрабатывают наряду с целлюлолитическими ферментами также пектолитическими; в качестве которых используют пектофоетидин ГЗх в количестве 0,01 0,1 мае.%. При этом в качестве целлюлозосодержащего сырья используют свекловичный жом и/или гузапаю соответственно в количествах 2,5-7 и 2,0-4.,0% от объема среды. . Целлюлозосодержащее сырье и органический источник .азота вносят в воду до получения гидромодуля 1,5-1:10, устанавливают рН 4,0 5,5, затем вносят целлюлолитические ферменты, устанавливают температуру 40-55 С и выдерживают полученную смесь при указанных параметрах в течение ч. В полученный гидролизат добавляют необходимые минеральные соли и воду до установления заданного объема. Готовую среду стерилизуют и охлаждают. Наряду с целлюлолитическими ферментами рекомендуется вводить и пектолитические. Из целлюлолитических ферментов можно использовать целлбвиридий ГЗх или целлоконингин Пх. Целловиридин ГЗх вносят в среду в количестве 0,2-2% а целлоконингин

1. СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРВда ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ПРОДУЦЕНТОВ ЦЕЛЛЮЛОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ, предусматривающий внесение в воду целлюлозосодержащего сырья в виде свекловичного жома, органических источников азота и минеральных солей при перемешивании с последующим доведением объема водой до заданного, о т л и ч а ющ и и с я тем, что, с целью увеличения активности целлюлолитических ферментов, перед внесенией минеральных солей смесь целлюлозосодержащего сырья и органического источника азота отрабатывают целлюлолитическими ферментами при 40-55, рН 4,3-5,5, гидромодуле 1,5-1:10, причем из целлюлолитических ферментов исполь:зуют целловиридин ГЗх или целлоко- :. нингин Пх в количестве 0,2-2,0 и 0,1 1,0 мае.% соответственно, а в качестве источников азота используют пше; ничные отруби и солодовые ростки в ко;личестве по 0,1-0,5% от объема среды, 2.Способ по п. 1, о т л и ч аю щ и и с я тем, что смесь, содержащую целлюлозосодержащее сырье и органические источники азота, об- , рабатывают наряду с целлюлот ртическими ферментами также пектолитичес(Л кими, в качестве которых используют пектофоетидин ГЗхв количестве 0,01 0,1 мае,%. . . 3.Способ по пп. 1 и 2, о т л ичающийся тем, что в качест- S ве целлюлозосодержащего сырья используют свекловичный жом и/или гузапаю соответственно в количествах 2,5-7,0 и 2,0-4,0% от объема среды.