Способ интенсификации энергетического обмена Советский патент 1984 года по МПК A61K31/194 A61P37/04 

со

о

о

ел

СПОСОБ ИНТЕНСИФИКАЦИИ ЭНЕРГЕТИЧЕСКОГО ОБМЕНА, включающий введение животным биостимулятора энергетического обмена, отличающ и и с я тем, что, с целью повышс.ция концентрации адениннуклеотидов в ткани, в качестве биостимулятора в организм животного внутрибрюшинно вводят янтарнокислый аммоний в дозе 10-50 мг на 1 мг живой массы в сутки.

дав Изобретение относится к медикобиологическим исследованиям и предназначено для интенсификации энергообмена в печени старых млекопитающихся. Известен способ интенсификации энергетического обмена в мышечном экстракте, включающий введение дезок сиглюкозы и непрерывное измерение концентра1щи адениннуклеотидов. При этом в процессе реакции происходит снижение содержания адениннуклеотидов с последующим самопроизвольным его восстановлением Г1JНедостатком способа является то, что эксперимент проводится на экстракте, приготовленном из вьщеленного органа животного. Кроме того, токсич ность дезоксиглюкозы, приводит к повреждению тканевых клеток. Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ интенсификации энергетического обмена заключающийся в повьппении концентрации адениннуклеотидов в сердце моло дых животных с помощью рибозы. Спос включает в себя следуюоще операции; введение анестезированным животным изопротеренола для предварительного снижения тканевой концентрации адени нуклеотидов, внутривенное введение раствора рибозы (1,2 г на крысу мас сой 250 г), приводящее к повышению концентрации адениннуклеотидов до первоначального уровня, последующее выделение тканевого экстракта из ис следуемого органа и измерение концентрации адениннуклеотидов в экстракте ферментативным методом С2 3. Однако способ характеризуется недостаточно высокой достигаемостью уровня энергетического обмена, а также необходимостью анестезирования животного во время длительного введения рибозы (в течение 24 ч), травмирующего животное в течение эксперимента, и-очень большая дейст вующая доза рибозы, а также кратковременное ее действие (4ч). Более того, для предварительного снижения концентрации адениннуклеотидов в исследуемых органах используют органические соединения синтетического происхождения, не имеющие ся в организме. Целью изобретения является повьпи ние концентрации адениннуклеотидов ткани. 51 Постаиленная цель достигается тем, что согласно способу интенсификации энергетического обмена в качестве биостимулятора в организм животного внутрибрюшинно вводят яитарнокислый ам1 1оний в дозе 10-50 мг на 1 кг живой массы в сутки. В предлагаемых дозах янтарнокислый аммоний не оказывает влияние на физиологическое состояние и поведение животных в результате того, что основная часть вводимой дозы препарата выводится через почечные канальцы. На чертеже представлены концентрации адениннуклеотидов в печени крысы: а-Б печени молодой крысы; б - в печени старой крысы; в - в печени старой крысы через сутки после 6-дневного сеанса введения физиологического раствора; г - в печени старой крысы через сутки после 6-дневного сеанса введения янтарнокислого аммония. По оси ординат - концентрации адениннуклеотидов в наномоль на 1 г ткани. Вертикальная черта над каждым столбиком - среднеквадратичная ошибка среднего значения (для 14-26 животных в каждой группе). Как видно из фиг. 1, янтарнокислый аммоний увеличивает суммарное содержание адениннуклеотидов у старых крыс до уровня у молодых животных. Пример 1. Самцам крыс линии Вистар возрастом 2 года ежедневно в течение 6 дней вводили внутрибрюшинно раствор янтарнокислого аммония в дозе 10 мг на 1 кг живой массы, растворенного в 0,25 мл воды, на животное. Через 24 ч после последнего введения препарата животных забивали, быстро удаляли переднюю долю печени и сдавливали ручным прессом, предварительно охлажденным в жидком азоте. Залитую жидким азотом ткань измельчали в ступке до порошка, заливали 7 объемами охлажденной 8%-ной хлорной кислоты в 40%-ном этаноле и экстрагировали 15 мин при . Смесь центрифугировали 20 мин при 3000 и -10 для удаления осадка. Затемазкстракт нейтрализовали едким калием и измеряли концентрации индивидуальных адениннуклеотидов в экстракте ферментативным методом. Для оценки действия препарата сравнивали содержание адениннуклеотидов в печени инъецированных и интактных старых животных. В качестве контроля использовали физиологический раствор. В параллельной серии опытов животным внутрибрюшинно вводили 0,25 мл физраствора. Полученные данные представлены в таблице (опыт № 4). Вводимьм янтарнокислый аммоний увеличивает содержание адениннуклеотидов в печени 2-х летних крыс на 7% причем различие между контролем и опытом статистически недостоверно. Пример 2. Условия выполнения способа те же, что и в примере 1 но вводи1 ая доза янтарнокислого аммо ния 20 мг на 1 кг живой массы. Полученные данные представлены в таблице (опыт № 5). Как видно из таблицы, янтарнокислый аммоний увеличивает суммарное содержание адениннуклеотидов на 27%, т.е. до уровня у молодых животных. Таким образом, янтарнокислый аммоний действует как биости мулятор энергетического обмена. Пример 3. Условия выполнения способа те же, что и в примере 1 только вводимая доза янтарнокислого

Молодые, 3-4 мес Нет

Старые, 2 года

Старые, 2 года Внутрибрюшинно, 0,25 мл физраствор, 6 дней

Старые, 2 года Внутрибрюшинно, янтарнокислый аммоний, 6 дней

Старые, 2 года То же Старые, 2 года То же

26 16

14

10 мг на 1 кг 2

20 мг на 1 кг 2 50 мг на 1 кг 16 аммония 50 мг на 1 кг живой массы. .Данные представлены в таблице (ош.п № 6) и указывают на то, что ямтарнокислый аммонии увеличивает уровень адениннуклеотидов на 25%, приближая его к уровню молодых животных. Использование предлагаемого способа по сравнению с известными позволяет повысить интенсивность энергетического обмена в печени старых животных, приближая его к уровню молодых животных, путем повышения Уровня адениннуклеотидов; использовать в малых дозах нетоксичное и дешевое вещество - янтарнокислый аммоний природного происхождения, в то время как в известных способах используются дорогостоящие импортные препараты; вводить препарат неанестезироианным животным в течение 1-5 ч в отличие от прототипа, в котором введение осуществляют в течение 24 ч. Данные, характеризующие предлагаемый способ, сведены в таблицу.

1,88+0,14 0,96+0,06 0,30+0,03 3,14+0,22 1,46+0,03 0,62+0,02 0,29+0,02 2,37+0,04 1,61+0,03 0,60+0,02 0,20+0,01 2,40+0,02

1,63+0,20 0,65+0,19 0,25+0,10 2,53+0,20

1,85+0,30 0,82+0,15 0,31+0,15 2,98+0,07

5 6 1,74+0,08 0,86+0,03 0,31+0,01 2,91+0,12

Продолжение таблицы