Способ индикации нехолерогенных вибрионов Эль-Тор Советский патент 1985 года по МПК C12Q1/04 

Изобретение относится к медицинс кой микробиологии, а именно к ускоренным методам обнаружения нехолерогенных вибрионов Эль-Тор. Известен способ индикации нёхолерогенных вибрионов Эль-Тор путем вырапшвания исследуемой культуры на щелочном агаре ll . Однако- известный способ длителен и сложен в осуществлении. Целью изобретения является ускорение/и, упрощение способа. Цель достигается тем, что соглас но способу индикации нехолерогенных вибрионов Эль-Тор путем выращивания исследуемой культуры на щелочном агаре, культуру со щелочного агара пересевают в среду Гисса с 0,8-1,2% маннита, посев инкубируют и индикаций проводят по изменению цвета среды в течение 2-4 ч с момента пос ва . Способ осуществляют следующим образом. Среду предварительно проверяют на пригодность для постановки данно го теста с помощью заведомо нехолерогенного и холерогенного штаммов. Среда может быть использована для обнаружения нехолерогенных штаммов если контрольный нехолерогенный Штамм изменяет ее цвет в течение 2-3 ч, а холерргенный - в течение 6 и более часов. Посевы помещают в термостат при 37°С и ежечасно контролируют измен ние цвета среды. Если при очередном просмотре наблюдается очень слабое изменение цвета среды, то следующе наблюдение проводят через 30 мин. Для контроля в пробирку со средой засевают нехолерогенньгй штамм, вре мя изменения которым цвета среды известно. Кроме того, вместе с пос вами ставят пробирку с незасеянной средой - контроль среды, ее цвет при стоянии в термостате при не должен меняться. Пример 1. На щелочной агар (рН 7,6) засевают 42 холерогенных и 31 нехолерогенный штаммы вибрионов Эль-Тор. Спустя 18 ч в,ибрионы пересевают бактериологической петлей в пробирки со средой Гисса с 0,8% маннита и ставят в термостат при З7с, Изменение цвета среды, свидетельствующее о расщеплении маннита, регистрируют ежечасно, а в некоторых случаях и через 30 мин. В таблице представлены сроки расщепления маннита холерогенными и нехолерогенными вибрионами- в средах с различной концентрацией его. Пример 2. 42 холерогенных и 31 нехолерогенный штаммы вибрионов Эль-Тор засевают на щелочной агар (рН 7,6). Через 18 ч вибрионы пересевают бактериологической петлей в пробирки со средой Гисса с 1% маннита. Методика учета результатов аналогична примеру 1. Пример 3. 42 холерогенных и 31 нехолерогенный штаммы вибрионов Эль-Тор засевают на щелочной агар (рН 7,6). Через 18 ч вибрионы пересевают бактериологической петлей в пробирки со средой Гисса с 1,2% маннита. Методика учета результатов по примеру 1. Представленные в таблице данные свидетельствуют о том, что нехолерогенные вибрионы расщепляют маннит в течение 2-4 ч, а холерогенные вибрионы в такие сроки маннит не расщепляют. На основании проведенных экспериментов штаммы вибрионов Эль-Тор, расщепляющие маннит с образованием кислых продуктов и изменяющие вследствие этого цвет среды в течение 2-4 ч, следует считать нехолерогеннь1ми. Вибрионы Эль-Тор, расщепляющие маннит и изменяющие цвет среды в более поздние сроки, целесообразно изучать путем заражения кроликов-сосунков. Предлагаемый ускоренный способ обнаружения авирулентных вибрионов Эль-Тор прост, экономичен и может быть использован для экспрессной оценки эпидемической значимости вибрионов Эль-Тор. Его применение будет способствовать сокращению числа штаммов, нуждающихся в изучении более длительным, трудоемким и дорогостоящим способом на кроликах-сосунках.

о165

0,8

8 8 8 1,0

165

165 1,2

ен0,8

ОО

О О О 1.0

ОО 1.2

ОО

ОО

О О О

о о о

О О О

О О О

ОО

ОО

4 4 4

51

5

7 20

51

5 5 7 20

51 7 20

СПОСОБ ИНДИКАЦИИ НЕХОЛЕРОГЕННЫХ ВИБРИОНОВ Эль-Тор путем выращивания исследуемой культуры на щелочном агаре, . о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью ускорения и упрощений способа, культуру со щелочного агара пересевают в среду Рисса с 0,8-1,2% маннита, посев инкубируют и индикацию проводят по изменению цвета среды в течение 2-4 ч с момента посева. (Л С