Способ получения аминопроизводных 1,2-дигидро 3 @ -1,4-бенздиазепин-2-онов Советский патент 1984 года по МПК C12P1/04 C12P1/04 C12R1/19 

Т зобретение относится к микробиологической промышленности и касается получения биологически активных со единения,

Известен способ восстановления 1 ,2--ДИГИДРО-ЗН-1 ,4-бензлт;иаз8пинов водородом в присутствии катализаторов 11 J. ,

Известен также способ получения аминопроизводных 1,2-дигидро-ЗН-1,4бенздиазепин-2-онов путем восстановления соответствующего нитропроизводного с помощью редуцирующего агента с последующим выделением целевого продукта C2J.

Однако известные способы не обеспечивают высокого выхода и чистоты целевого продукта (28-30%).

Цель изобретения - повьшение вы-, хода и чистоты целевого продукта.

Поставленная цель достигается тем что согласно способу получения амннопроизводных 1 , 2-ДИГИДРО-ЗН-1 , 4бенздиазепин-2-онов путем восстановления соответствующего нитропроизводного с помощью редуцирующего агента с последующим выделением целевого прдукта, в качестве редуцирующего аген та используют Escherichia coli штамм ВКМВ 471, ВКМВ 835 или ВКМВ 870, културу микроорганизмов суспендируют в буферном растворе или питательной среде, доводят рН до 7,0-8,0, добавл ют нитропроизводное в количестве 0,33 мг/100 мл суспензии и полу-:ченную смесь инкубируют в течение 4-6 ч.

Пример 1. Культуру Escherichia coli штамм ВКМВ 471 вырапд1вают на питательном агаре в течение 18 ч при 37 С. Затем клетки смывают 0,8% хлористого натрия. Центрифугируют при 7000 об/мин в течение 15 мин. Дважды промывают тем же раствором соли, добавляют 0,3мг /100м буфера в спирте 7-амино-1,2-дигидро-ЗН-1,4-бенздиазепин-2-он.

Выход 61%.

УФ-саектр соединения характеризуется наличием полос поглощения с

240 и 360 нм ( моль Ч-м4,42,3,39).

Найдено, %: С 71,38 Н 4,98 N 16,48

Вычислено, %: 71,71 5,18 ,

Полученное микробиологи11еским способом вещество идентично продукту химического синтеза.

Пример 2. Процесс ведут аналогично примеру 1, но 7-нитро-1,2дигидро-ЗН-1,4-бенздиазепин-2-он добавляют в количестве 3 мг/100 мл буфера.

Выход продукта 56%. Выход аминопроизводных 1,2-дигидро-ЗН-1,4-бенздиазепин-2-онов составляет 55-65%.

Пример 3. Способ осуществляют аналогично примерам 1 и 2, но инкубацию 7-нитро-Т, 2-дигидро-ЗН-1 ,4бенздиазепин-2-она с клетками E.coli ВКМВ 471 проводят в течение 6 ч. Аналогично получают и другие аминопроизводные.

Пример 4. Способ осуществляют аналогично примеру 1 с использованием в качестве редуцирующего агента Е. coli штамм ВКМВ 835 и штамм 870.

Выходы соединений аналогичны приведенным выше.

Пример 5. Культуру Е. coli ВЮ1В 471 выращивают на питательном агаре в течение 18 ч при . Затем переносят в колбы на 100 мл с 25 мл жидкой среды следующего состава: г/100 мл ВОДЬ пептон 0,6; NajHPO 0,6; 0,3; NaCt 0,1, CaCt2 0,001, глюкоза 0,4 (рП 7,4) и выращивают при 200 об/мин 28 С в течение 14 ч. Затем содержимое колб центрифугируют при 7000 об/мин, промывают 0,8% NaCl и вновь центрифу гируют при тех же режимах. К полученным клеткам добавляют 0,3 мг/100 мл буфера или питательной среды в спирте 7-нитро-1,2-ДИГИДРО-ЗН-1,4-бензидиазепин-2-он и проводят инкубацию без встряхивания в течение 4 ч. Затем целевой продукт экстрагируют хлороформомз, Экстракт упаривают досуха при пониженном давлении. После очистки перекристаллизацией из спирта получают 7-амино-1,2-дигидро-ЗН1,4-бенздиазепин-2-он. Выход 73%.

В результате микробиологического способа получают 7-амино-1-2,-дигидро-ЗН-1,4-бенздиазепин-2-он; 5- маминофенил-1,2-дигидро-ЗП-1,4-бенздиазепин-2-он ; 5-fl -аминофенил-1, 2дигидро-ЗН-1,4-бенздиазепин-2-он; 7-метил-5-м-аминофенил-1,2-дигидро311028114

ЗН-1,4-6енздиазепин-2-гон; 7-метил- Использование микробиологического 5-П -аминофенил-1, 2-ДИГИДРО-ЗН-1,4- способа получения аминопроиэводных бензбенздиазепин-2-он и ряд других амино- диазепиг-2-онов позволяет повысить выпроизводных.ход целевого продукта и его чистот.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АМИНОПРОИЗВОДНЫХ 1,2-ДИГВДРО-ЗН-1,4-БЕНЗДИАЗЕПИН-2-ОНОВ путем восстановления соответствующего нитропроизводного с помощью редуцирующего агента с последующим вьвделен1 ем целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода и чистоты целевого продукта, в качестве редуцирующего агента используют Escherichia coli штамм ВКМВ 471, ВКМВ 835 или ВКМВ 870, культуру микроорганизмов суспендируют в буферном растворе или питательной среде, доводят рН до 7,0-8,0, добавляют нита S ропроизводное в количестве О,33 мг/100 мл суспензии и -полученную смесь инкубируют в течение 4-6 ч.