Изобретение относится к способу попучеуия новых солей бензолсульфокислоты 1,1-диоксопеницилланош1окси 1етш1-6- 0 г ( 2-амино-2-фенилацетамид гганицилланата (сультамипиллина), об ладающих преимуществами при использ вании в антибактериальных составах; Известны 1,1-двуокись пенйцилланоБОЙ кислоты (сульбактам) и ее сложные эфиры, которые легко гидролизуются в живом организме и являют ся полезныгш в качестве антибактериальных агентов, а также для увели чения эффективности бета-лактамных антибиотиков, таких как ампициллин, действие которых направлено против многих бактерий, вырабатывающих бета-лактамазу ij . Известны сопряженные соединения 1,1-двуокиси пенициллановой кислоты с известными пенициллиновьпчи антибиотиками, которые соединяются при помощи метилендиоксигруппы. Эти сопряженные соединения имеют общую формулу А. в которой R представляет ацильную группу натурального или полуискусственного пенициллина 2 . Соединение, имеющее приведенную формулу, в которой представляет 1)-(2-амино-2-фенилацетил) является сультамициллином. Это соединение представляет связанное-при помощи метилендиоксигруцпы сопряженное соединение 1,1-двуокиси пенициллано вой кислоты и ампициллина. Свободное основание сультамициллина обладает плохими характеристиками обработки и не отвечающей требованиям устойчивостью. Единственной известной солью сультамициллина является хлористоводородная соль. Хотя она пригодна для получения определенных антибактериальных составов, она также характеризуется плохой устойчивостью в твердом состоянии, что находит отражение в труд-, ностях, связанных с ее обработкой, и является весьма растворимой в воде, в которой она подвергается гидролитическому разложению. Таким образом, она не подходит для водных дозированных составов, включая водные суспензии, которым отдается предпочтение в педиатрии. Обычно предпочтение отдается кристаллическим формам по сравнению с некристаллическими формами. Кристаллические вещества обладают большей устойчивостью, имеют лучший внешний вид и более просты в обращении по срав нению с их аморфными двойниками. В случае фармацевтического использования кристаллические соединения оказываются особенно предпочтительны.ми в отношении методов изготовления, придания формы и использования приемлемьгх дозированных форм, таких как растворы, суспензии, эликсиры, таб- летки, капсулы и различные другие (Ьаомаиевтические препараты. Известно, что при лечении детей предпочтительными дозированными формами являются растворы или жидкие суспензии. Детям трудно проглотить таблетки и капсулы, и количество лекарства, получаемое ребенком в этой форме, не поддается такому гибкому варьированию, как это часто требуется в отношении детских лекарств. В от-личие от этого при использовании жидких дозированных форм количество лекарства, даваемого пациенту, можно варьировать в широких пределах, изменяя объем дозы, имеющей известную концентрацию. Таким образом, сопряженный антибиотик сультамициллин подвергается частотному гидролизу на компоненты: ампициллин и сульбактам при хранении в водных средах, а его хлористоводородная соль обладает высокой раст-воримостью и нестабильностью. Цель изобретения - сознание новых кислотно-аддитивных солей сультамициллина, обладающих низкой растворимостью и высокой устойчивостью в водных суспензиях. Поставленная цепь достигается тем, что согласно способу получения аддитивной соли бензолсульфокислоты сультамициллина формулы 1 4 - XC(-; i50jlI-B2n20 CgHs-CH-COW соединение формулы В или его гидрогалогенида подвергают взаимодействию с бензолсульфокислотой формулы 4 - где X имеет указанные значения, в водной, органической или водноорга нической среде при комнатной температуре или гидрогалогенид соединения формулы В подвергают взаимодей ствию с щелочной солью бензолсульфокислоты формулы 4 - где X имеет указанные значения, в водной среде при комнатной темпера туре, В качестве гидрогалогенида соединения формулы В используют его гидро хлорид и подвергают его взаимодействию с натриевой солью бензолсульфокислоты формулы где X имеет указанные значения. В качестве органической среды мож но использовать этилацетат, метанол бутанол, ацетон, метилэтилкетон или тетрагидрофуран. . В качестве водноорганической ереды можно использовать смесь воды с вышеприведенными растворителями. Предлагаемые кристаллические дигидраты характеризуются высокими фармакокинетическими свойствами, почти оптимальной растворимостью в водных системах и улучшенной устойчивостью в насыпном виде и в суспензиях. В результате этого пред лагаемые кристаллические соли имеют ценные преимущества при изготовлеНИИ различных дозированных форм. S СН гусн; -N-J- CO -о О о снз -f рснз -N-k п со - о Кристаллические дигидратные соли обладают полезными свойствами, которые делают их особенно пригодными в качестве принимаемых через рот антибактериальных агентов. Для них характерно быстрое поглощение из желудочно-кишечного тракта. Во время или после поглощения в живом организме происходит эфирный гидролиз с высвобождением ампициллина и ингибитора бета-лактамазы, 1,1-двуокиси пенициллановой кислоты (сульбактама). Эти соли характеризуются относительно низкой, но вполне достаточной растворимостью в водньЬс системах, что ведет к улучшению устойчивости водных дозированных форм, предназначенных для приема через рот, которым отдается предпочтение в педиатрии. Установлено, что при введении лабораторным животным через рот предлагаемых кристаллических соединений и хлористоводородной соли оба эти вещества показали великолепные фармакокинетические свойства. В та.бл. 1 приведены формакокинети- ческие данные после введения крысам через рот 2D мг/кг соли сультимициллина. Данные табл. 1 показывают, что каждая из трех солей быстро поглощается и гидролизуется при. введении через рот.с достижением высоких уровней в сыворотке как ампициллина, так и ингибитора бета-лактамазы, сульбактама. Было установлено, что различия между тремя солями, представленными в табл. 1, являются статистически несущественными. Приведенные в табл. 1 данные быпи получены при использовании аутбридинговых крыс Sprague-Dawley. Эти соединения вводили через рот (по 5 крыс на |одно соединение) в виде водной сус-. пензии 0,5 мл, содержащей 20 мг/кг лекарственнрго препарата. Пробы крови брали через указанные периоды времени и подвергали их дифференциальному биоанализу с целью определения уровней ампициллина и сульбактама. В биоанализе ампициллина используется Sarcina lutea (АТССС 93ii1), который является чувствительным к ампициллину, . но нечувствительным к сульбактаму при концен рациях, достигающих 100 мкг/мл,-так как этот вид не содержит бета-лактамазы. Таким образом, этот организм не проявляет синергии в отношении сочетаний ампициллина и сульбактама. Стандартная кривая быпа получена в нормальной сыворотке при уровнях ампициллина, равных 4, 2,1, 0,5, 0,25 и 0,125 мкг/мл. Стерильные диски из фильтровальной бумаги загружали 25 ламбдаобъемами. Аналитические чашки готовили с использованием семенного агара (Дифко), Бьщержанную в течение ночи культу у Sarcina lutea разбавляли до отношения 1:100, и 1 МП этого раствора добавляли к 100 мл агара в пластмассовых чашках размером 12/12 дюймов. Культуры в этих чашках вьфащивали при 37 С в те чение 18 ч, после чего измеряли полученные зоны. Определение суд ьбактама основывается на нечувствительности Pasteurella histolytica (59В010) к высоким концентрациям ампициллина или сульбактама в отдельности. Однако поскол ку ее устойчивость опосредована бета-лактамазой,то эта культура синергически реагирует на сочетания ампициллина и сульбактама. Стандартная кривая бьта получена способом, анало гичным описанному для ампицртлина, Аналитические чашки готовились посредством добавления 1 мл вьщержанной в течение ночи культуры Pasteurella histolytica к 100 мл агара МюллераХинтона, к которому добавляли 50 мкг/м ампициллина и 5%-ный стерильный раст вор бычей крови, Культуры в этих чашках выращивали при 37 С в течение 18 ч, после чего измеряли полученные зоны. Растворимость, Было произведено сравнение растворимости этих солей в воде и в искусственном желудочном соке без пепсина (рН 1,2), Равновесная растворимость не определялась, поскольку эти соединения не являются совершенно устойчивыми в водных системах на протяжении длительных периодов времени, необходимых для достижения равновесия. Поэтому определялась кажущаяся растворимость посредством сильного перемешивания с растворителем в течение 30 мин, Ползгченную смесь за%ем фильтровали, и количество сое--динения в растворе определяли при помощи жидкостной хроматографии под высоким Давлением (HPLC) ,. Кажущаяся растворимость солей сультамициллина в воде и в искусственном желудочном соке (без пепсина, рН 1,2) приведена в табл, 2, Кристалличность, На-дифрактометре Сименса, оборудованном устройством для излучения меди и детектором сцинтилляционного счетчика,бьти получены порошковые рентгенограммы. Интенсивность пучка в виде функции угла 2 тета регистрировалась со скоростью сканирования, равной 2 /мин. Кристалличность дигидрата бензолсульфоната сультамициллина и дигидрата 4-хлорбензолсульфоната сультамициллина проверялась на основании множественности пиков на порошковых рентгенограммах для этих солей. Устойчивость, При хранении образцов этих трех солей при 50С в течение трех недель было установлено, что кристаллический бензолсульфонат/2Н2 О и А-хлорбензолсульфонат-2Н20 сохранили соответственно 97 и 100% своей силы. Хлористоводородная соль сохранила только 67% от своей первоначальной силы при тех же условиях, Жидкостная хроматография под высоким давлением (HPLC), В исследованиях растворимости и устойчивости представленные вьш1е образцы веществ анализировались с помощью жидкостной хроматографии под высоким давлением при использовании колонки с хромгабондом С-8 (торговая марка фирмы ES индастриз),внутренний диаметр 4,6 мм х 30 см. Подвижная фаза состояла из 30 вес,% ацетонитрила в фосфатном буфере с рН 3 (0,1 М раствор). Скорость потока равнялась 1,6 мп/мин. Определение производилось в ультрафиолетовом свете при 230 нм. 7 При использовании предлагаемой антибактериальной соли для лечения млекопитающих, в частности людей, это соединение может применяться в отдельности либо оно может смешиват ся с другими антибиотическими веществами и/или фармацевтически приемлемыми носителями или разбавителями Указанный носитель или разбавитель выбирается исходя из предполагаемого сцособ а введения. Например, в случае введения этого препарата чер рот предлагаемое антибактериальное соединение может использоваться в :форме таблеток, капсул, лепешек, порошков, сиропов, эликсиров, воднек растворов и суспензий ч т.д. в соответствии с обычной фармацевтическ практикой. Пропорциональное отношен активного ингредиента к носит ю ее тественно зависит от химической природы, растворимости и устойчивости активного ингредиента, а также от предполагаемой дозы. В случае таблеток, предназначенных для введения через рот, обычно используемые носители включают лактозу, лимоннокисльш натрий и соли фосфорной кислоты. Обычно в таблетках используются такие дизентеграторы как крахмал, и замасливатели, такие как стеарат магния, лаурилсульфат натрия и тальк. Для введения через рот в виде капсул полезными разбавителями являются лактоза и полиэти ленгликоли с высоким молекулярным весом, например полиэтид енгликоли имеющие молекулярный вес 2000-4000. Благодаря хорошей растворимости и устойчивости кристаллических ди- гидратных солей бензолсульфокислоты сультамициллина особо предпочтитель нь(м способом введения этого препара та при лечении детей является введение через рот в виде водной суспензии. Для получения таких суспензий кристаллическими дигидрат формулы (1) может соединяться с буферным растворами, эмульгирующими и суспен дирующими агентами. При желании в , препарат могут быть добавлены определенные подслащивающие и/или арома тизирующие агенты. Полученная суспензия может храниться в присутстви воды, особенно в холодильнике, в те чение значительных периодов времени Однако предпочтительным способом является хранение смеси в виде сухо 0 .8 го порошка до тех пор, пока он не понадобится, когда он и смешивается с соответствующим разбавителем, напри-. мер водой. Как указывалось ранее, предлагаемые антибактериальные соединения предназначены для использования при лечении людей и их суточные дозы не отличаются в значительной степени от других используемых в клинике пенйциллиновых антибиотиков. Соответствующая доза для данного человека определяется в конечном счете лечащим врачом и она изменяется в зависимости от возраста, веса и реакции каждого больного, а также от характера и серьезности симптомов болезни у пациента. Предпагаемые соединения обычно используются для введения через рот в дозах, составляющих 20100 мг на килограмм веса больного в день, и парентерально в дозах 10-100 мг на килограмм веса больнЪго в день, o6tji4Ho в виде нескольких разделенных доз. В некоторых случаях может оказаться необходимым использо-. вать дозы, выходящие за пределы этих диапазонов. Следующие примеры и способы получения служат только для дальнейшей иллюстрации. Инфракрасные спектры (3R) измерялись на дисках из бромистого калия (КВгдиски), а диагностические полосы поглощения указываются в Bp iHOBbK числах ( ) . Спектры ядер ного магнитного резонанса (NM5) измерялись при частоте 60 мГц для растворов в дейтерированном хлороформе (CDCB-j) или дейтерированном диметилсульфоксиде (DMSO-dg), а положения пиков указываются в частях на миллион вниз от тетраметилсилана. Ддя обозначения форм пиков используются слер,ук щие сокращения:S сингулентный, f дуплетный, i триплетный, а квартетный, П1 мультиплетный. Пример 1. Дигидратная соль бензолсульфокислоты 1,1-диоксопеницш1ланоилоксиметил-6- 1)-( 2-амино-2фенилацетамидоЛ -пеницилланата.. К 6,31 г (0,01 моаь) хлористоводородной соли 1,1-диоксопеницилланоилоксиметил-6- р-(2-амино-2-фенилацетамидо) пе.нициллата добавляли 40 мл воды, и полученную смесь перемешивали в течение примерно 15 мин. Нерастворимое вещество (примерно 0,75 г смолы) удаляли фильтрованием, и к фильтрату до91бавляли раствор 1,58 г (0,01 моль) бензолсульфокислоты в 10 мл воды. Полученную клейкую смесь перемешивали стеклянной палочкой до тех пор, пока соль не затвердевала и не распадалась на мелкие кусочки. Перемешивание продолжали в течение 1 ч (маг нитная мешалка), после чего тверДое вещество собирали фильтрованием и хорошо промывали водой. Промытое твердое вещество высушивали в атмосфере азота, в результате чего было получено 5,8 г (77%) бесцветного продукта, т,ш1, 138с (разл,). Спектр ядерного магнитного резонанса Н (DKBO-dfe) в частях на миллион (дельта) : 1,38 (5,6Н), 1,45 (5,6H)j3,0.3,9 (m,2H); 4,4 (S,1K); 4,5 (S, 1Н); 4,95-5,28 (m,2H)-, 5,3-5,66 (т,2П), 5,89 (5,2Н); 7,15-7,75 (m,10H), инфракрасный спектр: нуджол (торговая марка для сорта минерального масла, вьтускаемого фирмой ) широкая полоса при 1805-1770 см ,, Порошковая дифракция рентгеновских лучей: пики, градусы 2 , 3; 11,4 12,2; 13,4; 15,5; 16,2 16,9, 17,1; 18,3} 18,9; 19,8: 20,6-, 22,3, 22,7; 23,4; 25,4; 26,7; 27,3; 29,6; 30,5.. 31,7; 33,5; 34,4, 35,1; 36,1; 37,5; 38,6 и 44,7.Пример 2, Дигидратная соль 4-хлорбензолсульфокислоты 1,1-диоксо пеницилланоилоксиметил-6- В-(2-амино 2-фенилацетймидо)-пеницилланата, К раствору 15 г (25,25 ммоль) 1,1диоксопеницш1ланоилоксиметил-6- 1) (2-амино-2-фенилацетамидо) пеницилланата в 150 мл зтилацетата добавляли в течение 10 мин раствор 4,85 г (25,25 ммоль) 4-хлорбензолсульфокислоты в:25 мл зтилацетата и 6 мл воды. После завершения добавления в эту смесь вводили еще 50 мл этилацетата, после чего полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Бесцветные кристал лы собирали посредством фильтрова.ния, фильтровальную лепешку суспендировали в 200 мп простого этилового эфира и снова фильтровали. После высушивания на воздухе бьшо получено 13,7 г бесцветных кристаллов, 10 г кристаллов растворяли в 100 мл метанола при комнатной температуре. При температуре помутнения добавляли воду (примерно 200 мл), Полученный зa fyтнeнный раствор 0 10 мешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, причем на протяжении этого времени продукт кристаллизовался. После фильтрования и естественной сушки в течение ночи было получено 7,5 г продукта. Спектр ядерного магнитного резонанса Н (ОМ50-с1) в частях на миллион (дельта): 1,36 (S,6H)i 1,47 (5, 6Н); 3,34 (широкий 5Н); 3,74 ((3(3,1Н, Гц, 17 Гц), 4,40 (5,1Н), 4,51 (5,1Н); 5,08 (т,2Н) 5,48 (т,2Н , Dftgq 4 Гц при наложении ) ; 5,86 (5,2Н), 7,45 (rri,9H). Вычислено, %: С 45,22; Н 4,77, / 6,81J 5 11,68; eg 4,31 . 1 Мц(;;, 2Н20 Найдено, %: .С 45,04; Н 4,83;М 6,86; 5 11,74,- се 4,27. Вода (Карл Фишер) 4,98 (теоретический результат 4,37). Порошковая дифракция рентгеновских лучей: пики, градусы 2 тета: 8,9; 10,8; 11,3; 13,2-, 15,5; 16,0-, 17,1; 18,0; 19,3; 20,0; 22,4; 22,7; 23,З; 26,0; 27,9; 30,0; 30,5; 34,1; 34,5; 35,9j 37,3; 38,5 и 44,8. Пример 3. Смесь 6,31 г (0,01 моль) хлористоводородной соли 1, 1-диоксопеницилланоилоксиметил-6 Г -(2-амино-2-фенш1ацетамидо)-пеницилланата и 40 мп воды перемешивали в течение 20 мин и фильтровали, К фильтрату медленно добавляли раствор 1,80 г (0,01 моль) бензолсульфоната натрия в 10 мп воды. Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч, фильтровали, фитровальную лепешку промывали водой и высушивали в вакуумной печи при 45 С, в результате чего была получена кристаллическая дигидратная бензолсульфокислоты 1,1-диоксопени цилланоилоксиметал-б-)-(2-амино2-фенилацетамидо)3 пеницилланата. i Использование в вышерассмотренной процедуре 4-хлорбензолсульфоната калия вместо бензолсульфоната натрия позволяет получить соль 4-хлорбензолсульфокислоты 1,1-диоксопеницилланоилоксиметил-6- 13-(2-амино-2-фенилацетамидо) -пеницилланата, которая при рекристаллизации из смеси метанола и воды в соответствии со способом, предстваленным в примере 2, позволяет получить кристаллический дигидрат, Пример 4, Раствор 64,1 г (0,108 моль) 1,1-диоксопеницилланоилоксиметил-6- D -(2-амино-2-фенил ацетамидо) пеницилланата в 1400 мл эти .ацетата (кажущийся показатель рН7,6 доводили до рН 2,5 посредством добавления 325 МП раствора 18,0 г бензолсульфокислоты (90% технический сорт) в 400 мл этилацетата. Пол ченную бледно-желтую суспензию охлаждали до 5°С и гранулировали при этой температуре в течение 60 мин. Полученную суспензию промывали равным количеством воды, после чего сл разделяли, и слой этилацетата охлаж дали до . Полученную густую белую суспензию фильтровали, фильтровальную лепешку промывали гексаном (4x100 мп) и высушивали в вакууме при 35 С в течение ночи, в результа те чего быпо получено 42 г кристаллической соли бензолсульфокислоты, анализ которой показал наличие 4,67 воды (метод Карла Фишера), процентное содержание летучих веществ (бО высушивание в вакууме в течение 3 ч составило 5,00%. . Вычислено, %: С 47,20 Н 5,11; N 7,10; S 12,19. С, Н,0,,М(5,.2Н,0 Найдено, %: С 47,14, Н 5,21; М 7,12; 5 11,92. Пример 5. Суспензия, предназначенная для введения через рот. Готовили сухую смесь, содержащую следующие игредиенты, г: Кристаллическая дигидратная соль бензолсуль- фокислоты сультамициллина6,80 Сахароза20,00 Маннит10,00 Лимоннокислый натрий0,40 Порошок гидроокиси кремнекислого магния и кремнекислого алюминия (Вигум,S )5,00 Каолин 2,00 . Сахарин натрия2,00 Порршок искусственного ароматизатора0,10 Сухую смесь хранили в закрытых коробках до возникновения в ней необходимости, когда эту смесь разбавляли водой до объема, равного 100 мл. Эта суспензия характеризовалась эквивалентной концентрацией, равной 50 мг/мл сультамициллина. Получение препарата А, Хлористоводородная соль и свободное основание 1,1-диoкcoпeнилиллaнoилoкcимeтил-6- D-(2-aминo-2-фeнилaцeтaмидo)) -пеницилланата. К раствору 3,465 п (0,005 моль) 1,1-диоксопеницилланош1оксиметил6- Б -( -метил-2-метоксикарбонилвиниламино -2-фенш1ацетамидо) пеницилланата в 50 мл ацетона добавляли 5,5 МП 1,0 Н. раствора соляной кислоты и 5 мл воды, после чего эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Ацетон вьтаривали в условиях вакуума, водный остаток промывали простым этиловым эфиром, фильтровали и лиофилизировали для получения хлористоводородной соли указанного соединения. Альтернативно водный остаток, полученный в результате выпаривания ацетона, промывали этилацетатом и простым этиловым эфиром. К водному ,слою добавляли хлористый метипен, эту смесь охлаждали и порциями добавляли 460 мг бикарбоната натрия. Водную фазу отделяли, снова экстрагировали хлористым метиленом, соединенные органические слои высушивали (MrfSOx), и растворитель выпаривали в условиях вакуума, в результате чего было псшучено свободнре основание указанного соединения.
15
Таблица 2
1138030
1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АДДИТИВНОЙ СаПИ БЕНЗОЛСУЛЬФОИ1СЛОТЫ СУЛЬТАМИЦШ1ЛИНА формулы 4-ХСбН450зН8-гНгО где Х-атом водорода или хлора; В-соединение формулы S .СНз ГСНз со-о
Кристаллическая соль
