Способ определения мочевины в биологических жидкостях Советский патент 1985 года по МПК G01N33/48 

I

Изобретение относится к биохимии точнее к области измерения содержания биологически важных соединений в биологических жидкостях.

Цель изобретения - повьшение чувствительности и ускорения способа.

П р и м е р. В измерительную ячейку вносят 2,0 мл базового буферного раствора и помещают ферментный злектрод и электрод сравнения, приготовленные следующим образом. 20 мг уреазы и 30 мг бьгаьего сывороточного альбумина растворяется в 0,3 мл 0,01 М фосфатного буфера, рН 7,2, содержаи1его 1,0 М КС Р. Этот буфер также является базовым буфером, в котором проводятся все измерения. В раствор вводится 0,015 мл 25%-ного глутарового альдегида. Полученная смесь вьшивается на цел242

лофан и хранится в холодильнике при в течение. 5 ч, после чего разрезается на кусочки 2 2 ом, надевается на сурьмяный электрод диаметром 2 мм и завязьтается леской. Мембрана для электрода сравнения готовится аналогичньм способом, только вместо фермента уреазы вводится соответствующее количество

альбумина. Оба электрода подключают к рН-метру рН 673М, к которому через дифференцирующее устройство подключают самописец и регистрируют величину максимальной скорости развития сигнала.

Так, максимальная скорость изменения потенциала в измеряемой ячейке составляет 23 и 103 усл.единиц, что соответствует 0,88 и 3,8 мМ мочевины в образце соответственно.

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОЧЕВИНЫ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ путем Измерения потенциала в пробе с помощью электрода сравнения и катионселективного электрода, содержащего иммобилизованную уреазу, отличающийся тем, что, с целью повьшения чувствительности и ускорения способа, в качестве электрода сравнения используют сурьмяный электрод, сотержащий в приэлектродном Слое альбуминовый гель, в качестве катион-селективного электрода используют сурьмяный электрод, содержащий иммобилизованную на альбуминовом геле уреазу, а определение мочевины § ведут по скорости изменения потенциала . W