Диагностическое средство для определения лейкоцитов в моче Советский патент 1985 года по МПК G01N33/48 

-C-D

остаток

«..о

С - г

уппа -S-, -С-0 -C-S-.

-С-, -S- или -С СН-С-;

D - черта валентности или C,-Cj-алкилен;

Е - фенил, 1-нафтш1, 2-нафтил, 2-фурил, 8-хинолил, 2-тиенил, 3-пиридил, циклогексил или Н-пиперидил;

,R,Rj и Rg могут быть одинаковыми или различными и обозначать водород, прямой или разветвленный С С2-алкил, С(-Сз-алкокси, нитро, галоген, ди-С,-Сз-алкиламино, ацетиламино, гидроксил, бензилокси, ГИДРОКСИ-С -СЗалкокси -С|-Сз-алкокси, метокси-С -С -алкокси-С(-Сз-алкокси, гидрокси-С,-С J-.алкшт.

галоген-С -Сз-алкил, циано,. карбоксил, С,-Сj-алкоксикарбонил, бензилоксикарбонил, карбамоил, дис-С,-С,-алкилкарбамоил,карбоксил-С,-С -алкил,карбоксил-С,-С -алкокси, карбоксил-С -С -алкиламино или фенил,

следующем соотношении компоненмас.%:

0,2-9,0

Хромоген Буферный раствор Остальное

2.Диагностическое средство по п.1, отличающееся тем, что оно дополнительно содержит сма.чиватель в количестве 8,9-28,4 мас.%

3.Диагностическое средство по П.1, отличающееся тем, что оно дополнительно содержит окислитель в количестве 1,9-9,0 мас.%.

4. Диагностическое средство по п. 1, отличающееся тем, что оно дополнительно содержит галеновую добавку в количестве 78,5 мае. %,

1. ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ, В МОЧЕ, содержащее хромоген и буферный раствор, отличающееся тем, что, с целью повышения его специфичности, в качестве хромогена оно содержит индоксильный или тиондоксильный эфир общей формулы 0-А-В где R,jRj,Rj,R - водород, галоген, алкил с 1-3 атомами углерода, низший алкоксил, арил, аралоксил, гидроксил, карбоксил карбоксиалкоксил, аралоксикарбонилалкосил, аралкил, аралкоксикарбонил, ,нитро- и низшая ациламиногруппа, два соседних замесг тителя означают замещенный галогеном бензоаннелированный остаток; X атом серы или иминогруппа, замещенная остатком низшего алкила, аршта и ацила; А остаток гликокола, аланина, валина, лейцина, глицерина, изолейцина, фенилаланина, тирозина или 0-ацетилтиразина, остаток аланил-аланина или оссо остаток аланил-аланил-аланина; та связанная с атомом азота указанных в А аминокислот груп па C -Cg-алкоксикарбонила, С,-С -алкилсульфонила 96 4 формила, ацетила или дифениламино карбонила группы О -CO-CH -CH -COOH, или -С-О-С Н/гО-СНз

1

Изобретение относится к клинической биохимии, а именно к диагностическому средству для определения , лейкоцитов в моче.

Цель изобретения - повышение специфичности средства для определения лейкоцитов в моче.

П р и м ер. Фильтрованную бумагу последовательно пропитьшают следующими растворами и затем высушивают при 60°С.

Раствор 1.

Динатрийтетраборат-декагидрат, г1,91

Дистиллированная вода,мл 30 В растворе устанавливают рН 8,0 с помощью 0,1 и.соляной кислоты и дистиллированной водой доводят общий объем до 100,0 мл. Раствор 2.

(Бензилоксикарбонил)-Ь-аланилокси -индол, мг 33,8

Ацетон, мл До .общего ; объема 100,0 .

Получают бесцветную тест-бумагу, которая при погружении в содержащую лейкоциты мочу в зависимости от концентрации лейкоцитов окрашивается в цвета от светло-бирюзового до синего. Можно обнаружить 5 000 лейкоцитов в 1 мкл мочи за 2 мин; 1000 лейкоцитов в 1 мкл мочи за 6 мин; 500 лейкоцитов в 1 мкл мочи за 10.мин; 200 лейкоцитов в 1 мкл мочи за 15 мин.

Чувствительность теста составля.ет 200 лейкоцитов На 1 мкл. Оценку можно также осуществлять с помощью ремиссионной фотометрии при 620 нм

Тест-бумагу с подобными свойствами (чувствительности 200-2000 лейкоцитов на 1 мкл) получают, если вместо (бензилоксикарбонш1)-Ь-аланилокси -индола используют следующие субстраты, причем также можно наб.шодать окраску от светлобирюзового до синего обычно бесцветнон тест-бумаги и при погружении содержащую лейкоциты мочу: (бензшюксикарбонил)-Ь-ал нилокси -4-метил-индол; (бензилоксикарбонил)-Ъ-ал нилокси -5-метил-индол; (бензилоксикарбонил)-L-ал нилокси -6-метил-индол; (бензилоксикарбонил)-Ь-ал нилокси -7-метил-индол; 3-tN-(бензилоксикарбонил)-L-ал нилокси -4,7-диметил-индол; (бензилоксикарбонил)-L-ал нилокси -4-хлор-индол; (бензилоксикарбонил)-L-ал нилокси -5-бром-индол; (бензилоксикарбонил )-Ь-ал нилокси -6-хлор-индол. Окрашивание от бесцветного до пурного: « (толуол-4-сульфонил)-Ь -аланилокси -4-хлор-5-бром-индол;(толуол-4-сульфонил)-Ь-аланилокси |-4,5,7-трихлор-индол; (толуол-4 -сульфонил)-,- аланилокси -4-хлор-5-бром-7-ме индол ; (толуЬл-4-сульфонил)-Ь-аланилокси -5-окси-индол;(бензилоксикарбонил)-Ь-ал нилокси -5-метокси-индол; (толуол-4-сульфонил)-L-аланилоксиЗ-5-бензилокси-индол;(толуол-4 -сульфонил)-L-аланилокси1-4-карбокси-индол;- г . (толуол-4 -сульфонил)-L-aлaнилoкcиЗ-4-бeнзилoкcи-кapбoниндол; (толуол-4-сульфонил)-L-аланиЛокси -5-карбокси-метоксиj-индол;3-Гн-( толуол-4 -сульфонил)-Ь-аланипокси -З-бензилоксикарбони-мет :5й и ВД°- (толуол-4-сульфонил)-L-аланилоксиТ-б-нитро-индол;(толуол-4-сульфонил)-L-аланилокси -6-ацетиламино-индол(толуол-4-сульфонил)-L-аланилоксиЗ-бензол(§/-индол, Окрашивание от бесцветного до леного: 1-метил-3-LN-(бензилоксикарбо -Ь-аланилокси1-индол; 1-бeнзил-3- N-(тoлyoл-4 -суль НИЛ)-L-аланилокси -индол; 1-фенил-З- N-(толуол-4 -сульф нил ) -L-аланилокси -индол. 44 Окрашивание от бесцветного до сине-зеленого: 1-ацетил-З- N-(,толуол-4 - сульфонил )-Ь-аланилокси1-индол. Окрашивание от бесцветного до красного: 1-бензоил-3- Н-(толуол-4 -сульфонил )-Ь-аланилокси|-индол. Окрашивание от бесцветного до фиолетового:(бензилоксикарбонил)-глицилоксиП-индол;(толуол-4 -сульфонил)-глицилокси -индол;3-(N-(толуол-2 -сульфонил)-Ь-аланилокси -индол:, (тoлyoл-3 -сульфонил)-L-аланилокси -индол; (толуол-4 -сульфонил)-Ь-аланилокси -индол;3- N-(толуол-4 -сульфонил)-0-аланилоксиТ-индол;3- К-(бензилоксикарбоннл)-0,L-аланилокси -индол;(бeнзилoкcикapбoнил)-L-вaлилокси -индол;(толуол-4-сульфонил)-L-валилокси -индол; (бензилоксикарбонил)-L-лeйцилокси -индол;(бензилоксикарбонил)-L-изолейцилокси -индол;3- N-(бензилоксикарбонил)-L-фенилаланилоксиЗ-индол;(толуол-4-сульфонил)-L-фeш лаланилокси -индол;.(aцeтшI-L-тиpoзилoкcи)-индол; 3-(N-бeнзoил-L-тиpoзилoкcи)-индол; ( бензилоксикарбонил )-L-тиpoзилокси -индол;(толуол-4-сульфоНИЛ)-L- тирозилокси -индол;(толуол-4 -сульфонил)-0-ацетил-L-тиpoзнпoкcи -индол;(бeнз шoкcикapбoниa)-L-aлaнил-L-aлaнилoкcи -индoл;(толуол-4 -сульфонил)-D-аланил-L-aлaнилoкcи -индoл;(бензилоксикарбонил)-L-аланил-L-aлaнил-aлaнил-L-oкcи -индол;3- ы-Столуол-4-сульфонил)-п-аланшI-D-aлaнил-L-aлaншl-oкcи -индол; 3-(N-фopмил-L-aлaнилoкcи)-индол; 3-(N-aцeтил-L-aлaнилoкcи)-индол; 3-(N-cyкцинил-L-aлaнилoкcи)-индол;3-(Ы-бензоил-В,L-аланилокси)-индол;

3-(Ы-фталоил-Ь-аланилокси)-индол (этоксикарбонил)-Ь-аланилокси -индол;

3-Гк-(трет-бутилоксикарбонил)-Ь1-аланилоксиJ-индол;

(3 ,6 -диоксана-н-гептилоксикарбонил) -Ь-аланилокси -индол;

(циклогексилоксикарбонил)-Ь-аланилокси1-индол;

3- N-(фенилоксикарбонил)-L-аланиокси -индол;

(4 -метил-бензилоксикарбонил)-L-aлaнилoкcиJ-индол;

3-fN-(4 -метокси-бензилоксикарбо НИЛ J-L-аланилокси j-индол;

3-Гы-(4 -нитро-бензилоксикарбоL.-.

НИЛ)-L-aлaнилoкcиJ-индол;

3-TN-FN-(пиперидине)-оксикарбонил -Ь-аланилокси -индол;

3-Гн- фурил-(2)-метоксикарбонил-1-аланилокси -индол;

З-Гы-Гтиенил-(2 )-метоксикарбонил -Ьгаланилокси -ИНДол;

З-Гы-(бензилтиокарбонил)-Ь-аланилокси -индол;

3-Гм-(метансульфонил)-Ь-аланилокси1-индол;

3- ы-(бензилсульфонил)-Ъ-аланш1оксн -индол;

3- к-(бензолсульфонил)-Ь-аланилокоиТ-индол;

(4-бpoм-бeнзoлcyльфcнШI)-L-aлaнилoкcи -индoл;

(4 -нитро-бензолсульфонил)-L-аланилокси -индол;

. J

(4 -диметиламино-бензолсульфонил)-Ь-аланилокси -индол;

(4 -ацетиламино-бензолсульфонил)-Ь-аланилокси}-индол;

3- N-(4 -н-бутил-бензолсульфонил-Ь-аланилокси -индол;

(4-трет-бутил-бензолсульфонил)-Ь-аланилокси -индол;

(4 -н-октил-бензолсульфонил)-Ь-аланилоксиЗ-индол;

(4 -окси-безолсульфонил)-Ь-аланилокси -индол;

(4-метокси-бензолсульфонил)-Ь-аланилокси -индол;

(4 -бензилокси-бензолсульфонил)-Ь-аланилоксиJ-индол;

3-Гы- 4-(2 -окси-этокси)-бензолсульфонил -Ь-аланилокси(-индол;

3-Гн- 4 -(З -окси-5 -окси-н-пентилокси)-бензолсульфонил -L-аланилокси J-индол ;

4 -(3 , д -iкcи-н-reптшIокси)-бензолсульфоншГ1-Ь-аланилоксиТ-индол,

З-Ш- 4 -(2 -окси-этил)-бензолсульфонил -Ь-аланилоксиJ-индол;

-(2 -| 4 -нитpo-бeнзилoкcиT-этил)-бeнзoлcyльфoнил -L-aлaнилoкcи J -индол;

-ft -(2-хлор-этил)-бензолсульфонил -Ь-аланилокси -индол;

(4-адетил-бензолсульфонил)-L-аланилокси -индол;

(4 -циано-бензолсульфонил)-Ь-аланилокси -индол;

(4-карбокси-бензолсульфони-L-аланилокси -индол;

(4 -метоксикарбонил-бензолсульфонил)-Ь-аланш10кси1-индол;

(4-бензилоксикарбонил-бензолсульфонил)-Ь-аланил-окси1-индол;

(4 -карбамоил-бензолсульфонил)-L-аланилоксиJ-индол;

3-|м-(4 -(диметш1карбамоил)-бунзолсульфоншП -Ь-аланилоксиТ -индол;

(4 -карбоксиметил-бензолсульфонил)-L-аланилоксиТ-индол;

3- N- (4 -карбоксиметокси-бензолсульфонил)-Ь-аланилокси -индол;

(4 -карбоксикетиламино-бензолсульфонил)-Ь-аланилокси -индол;

- (бензштоксикарбонил-метил амино)-бензол сульфонил -L-аланилокси -индол;

3- N-(4 -фтор-бензолсульфонил)-Ь-аланилокси -индол;

(4-фторсульфонил-бензолсульфонил)-L-аланилокси -индол;

3-rN-(4 -сульфамоил-бензолсульL.

фонил)-L-aлaнилoкcиJ-индол;

3- М-метш1-К-(толуол-4 -сульфонил )-Ь-аланш1ОксиЗ -индол;

3- Ы-ацетил-Ы-(толуол-4 -сульфонил ) -L- аланилокси -индол;

(2 ,4 ,б -триметил-бензолсульфонил)- -аланилоксиЗ-индол;

(бифенил-4-сульфонил)-Ь-аланилокси -индол;

(нафталин-2 -сульфонил)-L-аланилокси -индол;

(4 -ацетиламино-нафталин-L-сульфонил)-L-аланилокси -индол;

(5 -диметиламино-нафталин-1 -сульфонил)-Ь-аланш1окси -индол

(xинoлин-8-сульфонил)-L-аланилокси -индол;

(пиридин-3-сульфонил)-L-аланилокси -индол;(2-нитро-бензолсульфонил)-Ь-аланилокси индол. Окрашивание от желтого до зеле-, ного:с (l -метил-2-бензоил-винил)-L-апанилоксиЗ-индол; . (5 ,5-диметил-3-оксо-циклогексен-1 -ил)-аланилокси -индол; (дифенилкарбамоил)-Ь-аланил-10 оксиЗ-индол; (4 -нитробензил)-фосфорил -Ь-аланилоксЦ-индол;3-{N- flH-(4 -бромбензил)-фосфорил -Ь-аланилокси}-индол;3-р1-(толуол-4-сульфонил)-Ь-аланилокси -5-бензш1-индол; (толуол-4-сульфонил)-Ь-аланилокси -5-фенил-индол;(толуол-4 -сульфонил)-Ь-аланилокси -5-метокси-индол.