Средство для определения лейкоцитов в моче Советский патент 1989 года по МПК G01N33/68 

I 7I 8

Изобретение относится к биохимии. Цель изобретения - повьшение чувствительности средства. Фильтровальную бумагу пропитьшают средством, содержащим водный буфер из буры и соляной кислоты, основной реактив и дополнительный. Затем фильтровальную бумагу погружают в ьючу, содержащую 200 лейкоцитов/мкл. Чувстви- тельность средства тем выше, чем интенсивнее окраска. 7 табл.

оси,

о- „

/ н o(yN- н

ОСИ,

н

н

Н

Алания н Толуолсульфонил .

осн.

BF.

115

ОСИ,

н

BF4

129

Таблица2

L-Ala

Тсс

201

Пример 1. Фильтровальную бумагу пропитьгаают средством, содержащим 99-99,9 мол.% водного буфера из буры и соляной кислоты, 0,05 мол.% имеющего рН, указанного в табл.4 реактива и 0,05 мол.%, указанного в

Т а б л н ц а 3

табл.4 дополнительного реактива, с последующей сущкой при 60 С.

Приготовленную таким образом

фильтровальную бумагу погружают на 3 мин в содержащую 200 лейкоцитов/мкл мочу, после чего визуально определи11

146666312

ют получаемую окраску. Чувствитель- сивнее соответствующая окраска. Ре- ность средства тем выше, чем интен- зультаты приведены в табл..

Активные вещества средства

Дополнительныйреактив

19 19

19

19

XIII

XIII

XIII

XIII

XXVII

XXVII

XXVII

XXVIII

XXIX

XVI

XVII

XVIII

19

Предлагаемое средство

Ярковыраженная красно-коричневая красно-коричневая

серо-голубая

.красная

светло-красная

фиолетовая

лиловая

красно-фиолетовая

фиолетовая

серо-голубая

лиловая

лиловая

светло-красная

светло-красная

красно-.фиолетовая

красно-фиолетовая

Согласно прототипу

Красновата я

Красноватая

Слабо красно-коричневая

Серо-голубоватая

Известное средство Синеватая

Сравнение данных по окраске, приведенных в табл.4, свидетельствует о том, что предлагаемое средство проявляет более высокую чувствительность, чем известные.

со

Пример 2. 1 мл.средства, держащего 98 мол.% водного фосфатного буфера с рН 7,0, 1 мол.% указанного в табл.5 реактива и 1 мол.% -указанного в табл,5 дополнительного реактива, смешивают с 1 мл мочи, со- держащей 100 лейкоцитов/мкл. Через 3 мин после смешивания фотометром определяют экстинкцию при 600 нм. Результаты опытов приведены в табл.5

Т а

б л и ц а 4

Окраска по истечении 3 мин

ТаблицаЗ

45

50

gg

средства

2,4

2,1

131466663

Продолжение табл.5

14

Продолжение табл.5

Предлагаемое средство

. еравнение данных табл.б свидетельствует о том, что при высоком содержании активных веществ известные средства уступают по чувствительности предлагаемому составу

П р и м е р 4. Процесс ведут аналогично примеру 2, за исключением того, что используют средство, содержащее 1 мол.% реактива,1,1 мол.% дополнительного реактива 1 или I и 98 мол.% следующего водного буфера:

а)натриево-боратньй/соляная кислота с рН 8;

б)натриево-боратный/борная кислота с рН 8;

в)натриево-боратный с рН 6;

г)калиево-фосфатный с рН 6;

д)калиево-фосфатный с рН 8;

е)калиево-фосфатный с рН 10;

Т а

б л и ц а 6

з) трис-буфер с рН 8. Результаты опытов приведены в

.бл.7.т а б л и ц а 7

Формула изобретения

Средство для определения лейкоцитов в моче, содержащее реактив на основе диазониевой соли производных бензола и буферное вещество, отличающееся тем, что, с целью повышения чувствительности средства, оно содержит в качестве диазониевой соли соединение общей формулы Т

X

где R,

BJ, RS

-водород, хлор, бром.

С,-Су-алкил, Су-алкокси, группа метилмеркапто, N-морфолино, К- Тио- морфолино, N-пиppШIидинo, в случае необ содимости замещенная метилом группа N-пиперазино, группа N-пи- перддино;

R - водород, С -С -апкил, метокси, бром;

R- водород, фтор, хлор, бром

гидроксил, С,-С -алкил, С -Су-алкок- сил, группа метиламино, С,-С5--Диал- киламино, в случае необходимости замещенная метилом или метокси фениль- ная .группа, группа фенокси, N-морфолино, N-тиоморфолино, группа N- пирролидино, в случае необходимости замещенная метилом группа N-пиперазино, N-пиперидино, метилмеркапто;

R.

- водород, метил, метокси.

бром;

Rg - водород, С)-С5--алкил, С -Ср-алкокси, метилмеркапто, бром и хлор;

X - тетрафторборат, перхло- рат и тетрахлорцинкат, ИВ качестве дополнительного реакти- на содержит соединение общей формулы II

66663

где R

1

10

15

jo 25

- водород, хлор, бром, мет- 6

ОКОЙ, пентил;

R - водород, бром, кил, метокси, HjiTpo, ацетиламино, аннелированное бензольное кольцо;

Rg - водород, бром, метил, этокси, бензил, аннелированное бензольное кольцо;

R - водород, бром, метил,

фенил;

А - аланил, L-апанил-апанил, L-апанил-аланил-аланил, глицил, валил , L-лейцил ,, фенилаланил;

В - бензоил, толуолсульфонил, ацетил, бензилоксикарбонил, ацетими- до-бензолсульфонил и метокситозил, или содержит соединение общей форму О-А -В 11

теля К

где - водород, С -С -алкил, С.-Сдалкокси, метиламиноi диметиламино;

R,, - водород, этил, метил, метокси, диметиламино, диэтиламино;

R, - водород, метил, C -Cs-anK- окси, С -С -алкиламино, дипропилами- но;

водород, метил, этил, метокси, а таже два соседних замести10

R

ti

R

г.

и R,,- аннелированное бензольное кольцо;

А - аланил, L-аланил-аланил, Ь-аланил-аланил-апанил, валил, фе- нилаланил, лейцил, глицил;

в - толуолсульфонил, ацил, бензоил, бензилоксикарбонил, ацет- амидо-бензолсульфонил, бензоилкарбо- нил и метокситозил,

при следующих соотношениях компонен- .тов, мол,%:

Соединение общей формулы Г0,05-25

Соединение общей формулы II или соединение общей формулы III0,05-25 Буферное вещество с рН 6-10 Остальное