Способ идентификации @ @ Советский патент 1985 года по МПК C12Q1/04 C12R1/01 

;о

00 1 Изобретение относится к медицинекой микробиологии и касается идентификации lersinia pseudotuberculosis. Цель изобретения - упрощение и повьппение точности способа. Пример 1, Клетки I.pseudotuberculosis штамм 43/III и f.entero colitica штамм 10702 засевают петлей на секторы двух чашек с сердечно-мозговым агаром, содержащим, г/мп: сердечно-мозговая основа 30, глюкоза 0,5, агар-агар 10, дистиллированная вода остальное, рН 7,1. Одну чашку инкубируют при 37°С, другую при 18 С. Через 18 ч культивирования ставят реакцию гемагглюти нации. На дно чашки Петри для предотвращения растекания восковым карандашом наносят несколько взаимопересекающихся штрихов. Пипеткой вн сят 1-2 капли 3%-ной взвеси эритроцитов барана, содержащей 0,5% О-маннозы. В капле эритроцитов осторожно растирают петлю исследуемой культуры. Чашку осторожно покачивают. Положительный результат - наличие маннозорезистентного температзфно-зависимого гемагглютинина - характеризуется появлением через 30-60 с хлопьев склеенных эритроцитов. При отрицательном результате взвесь остается гомогенной. Клетки I.pseudotuberculosis обра зуют маннозорезистентный гемагглютинин только после выращивания при 37 Клетки I.enterocolitica подобного склеивания эритроцитов не вызьгоают. П р и м е р 2. Клетки I.pseudotuberculosis 43/Hl и I.enterocolitica 10702 штрихом засевают на сектора двух чашек с сердечно-мозговым 70 агаром, содержащим, г/л: сердечномозговая основа 35, глюкоза 1, агарагар 15, дистиллированная вода остальное, рН 7,2. Одну чашку инкубируют при 22 С, другую при 37°С. Реакцию агглютинации эритроцитов барана ставят в присутствии 1%1)-маннозы. Далее опыт проводят как в пршмере 1. Пример 3. Клетки I.pseudotuberculosis 43/III и I.enterocolitica 10702 штрихом засевают на сектора двух чашек с сердечно-мозговым агаром, состава, г/л: сердечно-моз- говая основа 40, глюкоза 1,5, агарагар 20, дистиллированная вода остальное, рН 7,3. Одну чашку инкубируют при 26°С, другую при . Реакцию агглютинации эритроцитов барана ставят в присутствии 1,5%1 -маннозы. Далее опыт проводят как в примере 1. При исследовании набора 66 штаммов псевдотуберкулезного микроба 1-VI серотипов и 76 штаммов возбудителя кишечного иерсиниоза различного происхождения и давности вьщеления обнаружено, что все исследованные клетки I.pseudotuberculosis образуют температурно-зависимый маннозорез.истентный гемагглютинин (вызывают склеивание эритроцитов после культивирования только при 37 С, но не при 18-26 С), 76 штаммов возбудителя кишечного иерсиниоза не образовывают гемагглютинина ни при одной из тем ператур культивирования. По сравнению с известным предлагаемый способ не требует использования тест-культуры и антибиотиков, присутствие последних в среде приводит к получению ложноположительных результатов.

СПЬСОВ ВДЕНТИФИКАЦИИ IERSINIA PSEUDOTUBERCULOSIS путем посева исследуемой культуры на питательную среду с последующим инкубированием при и учетом вьфосших колоний, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа и повышения его точности, исследуемую культуру параллельно инкубируют при 18-26 С, при этом оба посева осуществляют на питательную среду, содержащую, г/л: Сердечно-мозговая 30-40 основа 0,5-1,5 Глюкоза 10-20 Агар-агар Дистиллированная Остальное вода при рН /,1-7,3, затем с выросшими Q € культурами проводят реакцию агглютинации эритроцитов барана в присут Л ствии 0,5-1,5% D-маннозы и идентифициру т lersinia pseudotuberculosis при наличии роста при 37 С и агглютинации эритроцитов.