Способ приготовления реагента для выявления @ Рецепторов Советский патент 1987 года по МПК A61K39/00 

Изобретение относится к биологии и медицине, а именно к приготовлению реагентов для иммунологических .исследований.

Цель изобретения - повьшение стабильности реагента при сохранении его специфичности и высокой чувствительности выявления С,J, рецепторов.

Способ поясняется следующим примером. ,

Пример 1. Эритроциты фиксируют ацетальдегидом, для чего смешивают равные объемы 16-18% взвеси эритроцитов ,и 7,0-7,2% нейтрального раствора ацетальдегида, содержащих 0,85% хлорида натрия. Смесь выдерживают в течение 24. ч при 20°С. Затем эритроциты трижды отмывают забуферен- ным рН .7,0-7,2, 0,85%-ным раствором зслорида натрия или раствором Хенкса и суспендируют в таком же растворе до получения 50%-й взвеси. Смеюив.ают равные объемь .взвеси .фиксированных эритроцитов и гемолитической сыворотки в разведении, в три раза меньшем ее гемолитического титра. Смесь выдерживают в течение 18-22 мин при 37-39 С и к ней добавляют два объема неразведенного цельного комплемента;. морской свинки или мьшш. .Смесь выдерживают в течение 14-16 мин при 37- 39 С, после чего к ней добавляют два объема гемолитической сыворотки в прежнем разведении. По окончании экспозиции в течение 18-22 мин при 37- 39°С к смеси прибавляют два объема цельного комплемента. Полученную та- ким образом смесь вьщерживают 14Редактор Т.Янова Заказ 4358

Составитель М.. Васильев Техред М.Дидык

Корректор

Тираж 594 .Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

.Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4.

16 мин при 37-39 С. После этого в смесь вносят восемь объемов гемолитической сыворотки в разведении в 6 раз

меньшем ее гемолитического титра. Смесь снова выдерживают в течение 18-12 мин при 37-39 С, после чего в нее добавляют восемь объемов неразве- денното комплемента и экспонируют в

течение 14-16 мин при 37-39 С.

Все используемые разведения гемолитической сыворотки готовят на за- буференном рН 7,0-7,2, 0,85%-ном растворе хлорида натрия или на растворе Хенкса. Смеси при каждой экспозиции периодич ёски перемешивают. Сенсиби- лизированные эритр оциты трижды отмывают таким же (|м при центрифугировании (ЮОО об/мин в течение 14- 16 мин). Отмытый эритроцитный реагент суспендируют в та ком же растворе и по подсчете клеточной концентрации хранят при 3-5°С.

Таким образом, способ позволя.ет повысить стабильность реагента при длительном хранении (срок годности составляет 3 года что превьш1ает срок годности реагента, приготовленного

по известному способу - 10 дней,более чем в 100 раз) при сохранении специфичности и высокой чувствительнос- ти выявления С рецепторов: процент клеток, выявляемых при помощи реагента, приготовленного по данному способу, в день изготовления,, содержащих С33 рецепторы, составляет 10,,62 (по известному способу - 10,33±0,53), а через 3 года - 10,89tO,64.

Корректор С.Шекмар