ДИГИДРОХЛОРИД-2-МОРФОЛИНОЭТИЛТИО-4,5-ДИФЕНИЛИМИДАЗОЛА, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОГИПОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ И УСКОРЯЮЩИЙ ПРОЦЕССЫ ВОССТАНОВЛЕНИЯ ПОСЛЕ ФИЗИЧЕСКИХ НАГРУЗОК И ДЛИТЕЛЬНОГО СТРЕССА Советский патент 1996 года по МПК C07D413/12 A61K31/535 A61K31/415 

Изобретение относится к новому производному имидазола, а именно к дигидрохлориду 2-морфолиноэтилтио-4,5-дифенилимидазола формулы I

обладающему противогипоксической активностью и ускоряющему процессы восстановления после физических нагрузок и длительного стресса.

Предлагаемое новое соединение в ряду имидазола обладает противогипоксической активностью и ускоряет процессы восстановления после физических нагрузок и длительного стресса.

П р и м е р. К раствору 20 г (79,3 ммоль) 4,5-дифенил-2-меркаптоимидазола в 192 мл 1 н. водного едкого натра и 160 мл спирта постепенно при перемешивании приливают раствор 23,1 г (84 ммоль) гидробромида 2-морфолиноэтилбромида в 64 мл воды. Через 1 мин раствор мутнеет, через 3 мин продукт реакции выделяется в виде желтого масла, которое вскоре застывает с образованием белых кристаллов. Оставляют на ночь, фильтруют, осадок промывают водным спиртом 1:1 по объему (2х20 мл) и сушат при 110^oС или над фосфорным ангидридом при 20^oС. Выход основания 2-морфолиноэтилтио-4,5-дифенилимидазола 25 г (86,3%), белый кристаллический порошок.

К смеси 24,7 г (64,8 ммоль) основания и 82 мл эфира прибавляют при перемешивании 17,9 мл (196,4 ммоль) концентрированную HCl. Гидрохлорид выделяется в виде смолы. Растворитель удаляют декантацией, прибавляют 58 мл изопропилового спирта и перемешивают, при этом вещество кристаллизуется. Прибавляют 200 мл эфира, перемешивают, фильтруют осадок, промывают эфиром (2х50 мл) и сушат при 20^oС над фосфорным ангидридом. Вещество очищают перекристаллизацией из 520 мл смеси изопропилового спирта и 0,1 г соляной кислоты, при отношении 10: 1 по объему. После растворения фильтруют в горячем состоянии, фильтрат выдерживают в течение ночи при -17^oС, выпавший осадок отфильтровывают, промывают изопропиловым спиртом (2х25 мл), эфиром (2х25 мл) и сушат. Выход очищенного вещества 25,6 г. Из маточного раствора выделяют дополнительно 1 г вещества. Общий выход при перекристаллизации составляет 26,6 г (89% ) белые блестящие иглы, т.пл. 250-252^oС.

Условия тонкослойной хроматографии: адсорбент силуфол, растворитель для нанесения спирт, подвижный растворитель-хлороформ ацетон-концентрированный водный аммиак, 100:10:1, R_f 0,16, пятно с ярко синей флуоресценцией в УФ-свете.

УФ-спектр в воде, λ_макс, нм (lgR): 218 пл (4,255), 270 (4,275).

Спектр снят на приборе СФ-20.

Строение вещества подтверждается данными спектра ПМР, потенциометрическим титрованием щелочью и данными элементного анализа.

Спектр ПМР в Д₂О, 6,7% 60 Мгц, ч м.д. Аг-Г 2,66 (м. 10Н), СН₂O 5,92, 5,98 (м. 4Н), СН₂S CH₂N 6,42-6,56 (м. 8Н). Внутренний стандарт трет.бутиловый спирт.

Найдено Э 230% (потенциометрическое титрование щелочью в 70%-ном водном спирте). Вычислено Э 228%
Найдено, C 54,80, 54,91; H 5,88, 6,02; Cl 15,77, 15,48; N 9,22, 9,32; S 7,02, 7,01, 7,01.

C₂₁H₂₇Cl₂N₃O₂S.

Вычислено, C 55,26; H 5,96; Cl 15,54; N 9,21; S 7,02.

Оценку и изучение противогипоксической активности исследуемого соединения проводят на модели гипобарической гипоксической гипоксии. Опыты выполняют на мышах-самцах весом 18-20 г и белых крысах-самцах весом 180-220 г.

Гипоксическую гипоксию воспроизводят "подъемом" животных в барокамере на высоту 11,00 м (мыши) и 12,000 м (крысы). В первую минуту поднимают на 5000 м, затем скорость подъема составляет 1000 м/мин. Регистрируют процент выживших животных в опыте и контроле в течение 40 мин.

Исследуемый препарат вводят внутрибрюшинно в дозе 12,5, 25 и 50 мг/кг в виде 2% -ного водного раствора за 1 ч до подъема в барокамере. Контрольные животные получают физиологический раствор (см.табл.1).

В результате было установлено, что профилактическое введение предлагаемого соединения в дозе 12,5, 25 и 50 мг/кг дает значительное увеличение выживаемости мышей на высоте 11,000 м.

Вторую серию опытов выполняют на крысах. Предлагаемое соединение обладает выраженной антигипоксической активностью (см. табл.2).

Таким образом, при изучении антигипоксической активности предлагаемого соединения было установлено, что оно обладает значительной активностью при гипоксической гипоксии.

Изучение влияния препарата на восстановление работоспособности проводят по следующей схеме. Сначала интактные крысы выполняют работу до полного утомления, после чего половине из них, составляющей опытную группу, вводят препарат (20 мг на 1 кг веса, внутрибрюшинно). Контрольные животные получают физиологический раствор. Затем животные однократно выполняют повторную работу до полного утомления через 48 ч после исходного пробега. Во всех группах животных длительность повторного бега выражается в виде отношения к своему исходному показателю (%). Активность предлагаемого соединения сравнивают с активностью известного дигидробромида 2-(2-морфолиноэтилтио)бензимидазола (N 471).

Результаты опытов приведены в табл. 3.

Полученные данные свидетельствуют, что применение препарата в периоде после предельной физической нагрузки (через 1 час), существенно (в 3 раза) ускоряет процесс восстановления работоспособности, тестируемой через 24 часа после исходной работы, в чем превосходит аналог, препарат N 471, который увеличивает продолжительность бега на третбане в 2,1 раза.

Данные заявляемого соединения, и дигидробромида 2-(2-морфолиноэтилтио)-бензимидазола) (N 471) на процессы восстановления после длительного стресса приведены в табл.4.

В качестве модели длительного стресса используют методику лишения мышей сна, пищи и воды в медленно вращающемся барабане. Опыты выполняют на мышах-самцах (по 30 животных в группе). После суточного пребывания в барабане животным предоставляют суточный отдых, пищу и воду, после чего их снова помещают в барабан. В качестве модели физической нагрузки используют бег крыс (160-180 г) на третбане со скоростью 40 м/мин.

Указанная последовательность событий сохранялась до гибели большинства животных контрольной группы. Исследуемые препараты вводят в период восстановления два раза в сутки, подкожно, в дозе 10 мг/кг. Контрольные животные получали физический раствор. Результаты опытов приведены в табл.4. Установлено, что применение предлагаемого соединения в период восстановления в 2,7 раза увеличивает выживаемость животных в условиях длительного стресса, а препарат N 471 (известный) увеличивает выживаемость в этих условиях только в 2 раза.

Острую токсичность предлагаемого соединения определяют на мышах. Препарат вводят внутрибрюшинно. Статическую обработку полученных данных проводят по методу Веренса. Найдено, что ЛД₅₀ равно 526 мг/кг массы животного. Это указывает на относительно низкую токсичность изучаемого вещества и достаточную фармакологическую широту.

Дигидрохлорид 2-морфолиноэтилтио-4,5-дифенилимидазола формулы I

обладающий противогипоксической активностью и ускоряющий процессы восстановления после физических нагрузок и длительного стресса.4 табл.

Дигидрохлорид 2-морфолиноэтилтио-4,5-дифенилимидазола формулы

обладающий противогипоксической активностью и ускоряющий процессы восстановления после физических нагрузок и длительного стресса.