Способ идентификации пневмококка и зеленящего стрептококка Советский патент 1986 года по МПК C12N1/00 

I 1

Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии.

Целью изобретения является ускорение способа.

Способ осуществляется следуюпщм образом.

Исследуемый клинический материал (мокрота, заднеглоточная слизь, экссудат) засевают на чашку с ш-гта- тельным агаром, содержащем 5% крови человека или животных, водный раствор генцианвиолета 1:500000 и дополнительно полимиксин М сульфат 50-100 ед/мл. Генцианвиолет и полимиксин М в указанных концентрациях полностью ингибируют рост посторонней микрофлоры и обеспечивают рост микроорганизмов рода Стрептококкус. Посевы инкубируют в течение 20-24 ч при 37°С, Выросшие колонии, подозрительные на пневмококк, отсевают на агар с 5% крови барана и одновременно подсевают стафилококк, образующий неполный гемолиз бараньих эритроцитов. После 20-24 ч инкубации при учитывают характер гемолиза вок руг, стафилококка, в секторе роста пневмококка происходит усиление гемолиза в отличие от других oi-гемолитических стрептококков, не изменяющих характер гемолиза.

Пример. Для посева исследуемого клинического материала готовл -; среду, содержащую кровь человека ;;-тл; животных, Генцианвиолет и полимиксин М сульфат. Для этого к 94 мл стерильного расплавленного и остужен ного до питательного агара добавляют 5 мл дефибринированной крови человека или животных, 0,2 мл 0,1%- ного водного раствора генцианвиолета и 1 мл раствора полимиксин М сульфата (одну таблетку, содержащую 500000 ед. антибиотика, растворяют в 100 мл стерильной дистиллированной воды). Среду разливают в чашки и на .них производят посев клинического маРедактор Т.Кугрьщ1ева

Составитель Е.Ярных

Техред И.Попович Корректор И Эрдейи

Заказ 1668/24. Тираж 490 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 1130350 Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г.Ужгород, ул.Проектная, 4

226742

териала. После 24 ч инкубации при 37°С посевы просматривают и отсевают подозрительные на пневмококк колонии - мелкие, плоские, полупрозрач5 ные, окруженные небольшой зоной позеленения, возникшей вследствие превращения гемоглобина в метгемоглобин. Колонии отсевают секторами на чашку с питательным агаром, содержащим 5%

10 крови барана, и одновременно в центре чашки подсевают бляшкой стафилококк. .Для этого подбирают штамм стафилококка, способный образовывать зону неполного гемолиза бараньих

15 эритроцитов радиусом не менее 2 мм. На одну чашку производят посев до восьми исследуемых культур. Через 24 ч инкубации при определяют характер гемолиза вокруг бляшки ста20 филококка. Усиление гемолиза свидетельствует о росте пневмококка. При отсутствии феномена усиления гемолиза посевы вьздрржчвают сутки при ком- -натной температуре,, так как некото25 рые штаммы пневмококка дают этот

феномен через 48 ч. Культуру, з секторе роста которой отмечалось усиление гемолиза, микроскопируют, испытывают на чувствительность к желчи

30 в реакции агглютинации со специфической сывороткой.

При проведении исследований 546 эталонных и свежевыделенных штаммов t-гемолитических (зеленящих) стрептококков установлено, что феномен усиления гемолиза бараньих эритроцитов вызывают 91,7% штаммов пневмококков. Другие зеленящие стрептококки не изменяют характер гемолиза вокруг стафилококка.

Использование изобретения облегчает вьщеление пневмококка из клинического материала, содержащего сопутствующую микрофлору, и сокращает продолжительность анализа до трех суток.