Способ определения хлорофиллида в растениях с повышенным содержанием органических кислот Советский патент 1986 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к биохимии растительных пигментов, в частности к способам определения хлорофиллида (бесфитольной формы хлорофилла) в растениях с разным типом метаболизма и в том числе в растениях, содержащи большие количества органических кислот (например, в листьях хвойных, щавеля и др.), и может быть использовано при исследовании эффективности работы системы биосинтеза хлорофилла как одного из важнейших звеньев проблемы управляемого фотосинтеза.

Цель изобретения - повьппение точности способа.

Для этого растительный материал гомогенизируют с песком и мелом в среде хлороформа, сливая его окрасившиеся и добавляя свежие порции до полного обесцвечивания материала. Полученный экстракт хроматографируют в смеси хлороформ - гексан (8:2). Предлагаемая смесь позволяет быстро и надежно отделить фитолизированные пигменты от бесфитольных, поскольку Rf первых из них в этом случае ра- эен 1, а Rf вторых 0,3. Хлорофиллид элюируют с хроматограммы ацетоном и спектрофотометрируют для расчета концентрации.

Пример. Берут 2 г растительного материала, растирают в ступке с песком и мелом под хлороформом, который по мере окрашивания декантируют, повторяя процедуру до полного обес-

Ель

Хлорофиллид отсутствует

Сосна

цвечивания растительного материала. Полученный экстракт наносят полосой на хроматографическую бумагу марки средняя и хроматографируют в смеси хлороформ - гексан (8:2).

Использование такой смеси позволяет быстро и надежно отделить фито лизированные пигменты от бесфитоль- ных, поскольку Rf первых из них в этом случае равен 1, а Rf вторых 0,3, Хлорофиллид элюируют с хрома,тог- paMMiji и спектрофотометрируют для расчета концентрации. Сравнительное содержание хлорофиллида (в процентах к хлорофиллу) при разных способах Обработки растительного материала приведено в таблице.

Формула изобретения

Способ определения хлорофиллида в растениях с повышенным содержанием органических кислот, включающий гомогенизацию материала в органическом растворителе, экстракцию пигментов органическим растворителем, выделение У10рофиллида и его спектрофото- метрическое определение, отличающийся тем, что, с целью повьшгения точности способа, в качестве органического растворителя при экстракции используют хлороформ, а выделение осуществляют смесью хлороформа и гексана при их соотношении 8:2.

,0021

0,0265

0,0251

0,0238

0,0229

0,0247+0,0028

0,0291

0,0281

0,0273

312263124

. Продолжение таблицы

Рйстение Фиксация паромЭкстракция хлороформом

Экстракция ацето- 1

номбыстрая после инкубации 2 ч

. ,в хлороформе

0,02250,0267

0,0240+0,00200,0279+0,0019

Гераклеум 0,03310,03060,0329

0,03220,02970,0319

0,03150,02900,0311

0,03070,02850,0305

0,0319+0,00180,0295+0,00170,0317+0,0018

Рожь0,03800,03120,0311

0,03780,03030,0305

0,03730,02960,0301

0,3620,02900,0299

0,0375+0,00140,0296+0,00090,0305+0,0009

Ячмень 0,04220,0384

0,04110,0381

0,04020,0379

0,03940,0378

0,0408+0,00210,0378+0,0009

- ---- - -- 1- - ..«. - -- ----- - - ---- -i - -i----.---.-.--.-...-.. «,-,,...-.--.««. «в «.

Составитель И.Тареева Редактор А.Шишкина Техред-Л. Олейник . Корректор М.Демчик

Заказ 2123/41Тираж 778 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб.,д.4/5

. Производственно-полиграфическое предприятие,г.Ужгород,ул.Проектная,4

Изобретение относится к способам определения бесфитольной формы хлорофилла в растениях с разным ти- пом метаболизма и позволяет повысить точность определения. Растительньш материал гомогенизируют с песком и мелом в среде хлороформа, сливая его и добавляя свежие порции до полного обесцвечивания материала. Экстракт хроматографи руют в смеси хлороформ- гексан (8:2). Фитолизированные пигменты имеют Rf, равный 1, а бесфиль- ные - Rf, равный 0,3. Хлорофиллид элюируют с хроматограммы ацетоном и спектрофотометрируют для расчета концентрации. 1 табл. (Л