Способ определения лизоцима в лейкоцитах Советский патент 1986 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической медицине .

Целью изобретения является повышение точности способа за счет окраски фермента раствором анионного красителя амидочерного 10Б.

Способ осуществляется следующим образом.

Свежеприготовленный, .высушенный на воздухе мазок крови фиксируют спиртово-формалиновым раствором (9:) В течение в течение 30 с, расчерчивают продольно на две части, затем на 1/2 мазка, располагающегося горизонтально,наносят 0,01%-ный раствор гистамина, на другую часть- 0,2 М фосфатный буфер рН 7,2, инкубируют во влажной камере при комнатной температуре 30 мин, всполаскивают, высушивают, опускают на 60 мин в раствор анионного красителя амидочерного 10Б в конечной концентрации 0,05-0,15% в том же буфере. Ядра докрашив ают 0,1 %-ным раствором а зурй ft в течение 30 с, по разнице полуколичественного учета гранул на двух частях мазка рассчитьшают активность интралейкоцитарного Л1К

Предлагаемый способ дает возможность диагностировать первичные и вторичные дефициты интралейкоцитарного ЛЦ - параметра, который в отличие от сывороточного показателя более достаточно отражает состояние естественной защиты организма, характер течения вспомогательного заболевания, его возможные исходы, целесообразность дополнительной биологической стимуляции,

В таблице приведен сравнительный анализ положительного эффекта от применения амидочерного 1 ОБ и известного красителя. Из таблицы видно, что при использований прочного зеле-. ного нет возможности получения достоверных данных с их .полуколичественной оценкой.

Ф о

р мула изобретения

Способ определения лизоцима в лейкоцитах путем приготовления мазков крови с послед5гющей окраской их кислым цитохимическим красителем, о т- личающийся .тем, что, с целью повьшгения точности способа, в качестве красителя используют амидо-. черный 10Б в конечной концентрации

0,05-0,15%,

Изобретение позволяет повысить точность определения лизоцима (ЛЦ) в лейкоцитах путем приготовления мазков крови, нанесения на одну половину мазка 0,01% раствора гистамииа, на другую,- 0,2 М фосфатный буфер рН 7,2, инкубирования во влажной камере при комнатной температуре, всполас . кива1шя, высушивания и окрашивания фермента раствором анионного красителя амидочерный 10Б в конечной концентрации 0,05-0,15% в том же буфере. Ядро докрашивают 0,1% водным раствором азураЛ в течение 30 с и по разнице полуколичественного учета гранул на двух частях мазка рассчи- тьшают активность интралейкоцитар- ного ЛЦ. Табл.1.