Способ получения ( @ )-5-(2-бромвинил)уридина Советский патент 1986 года по МПК C07H19/16 A61K31/7072 

«ыА- СН-СНтрГ

где R имеет указанные значения, непосредственно или после отделения и растворения в спирте с 1-4 атомами углерода дезацилируют алкого- лятом щелочного металла с 1-4 атомами углерода.

Изобретение относится к химии ;нуклеозидов, а именно к способу полу- - . чения нового соединения Ё -З-СЗ- бромвинил)уридина форму лы .

снвг;

НО ОН

Целью изобретения является ра:зра- ботка способа получения рибонуклеози- да формулы 1,.обладающего антигерпес кой активностью и .более низкой токсичностью, чем структурный аналог- . -2 -дезоксинуклеозид ЁЗ-5-(2-бром- винил)урацила.

ПРИМ е р 1. 2, З , 5 -три- -0-бензош1- ЕЗ-5-(2-бромвинил)уридин (IVjR-бензоил).

56,0 г (0,095 моль) 2, 3

5

-три О-бензош1-5-этилуридина при слабом нагревании растворяют в 400 мд безводнаго дихлорметана. Нагревание прекращают В токе азота и при, УФ- облучении в течение 20-25 мин к раствору, прибавляют 34,15 г (11 мл) брома. После завершения прибавления брома отключают источник УФ-йзлучения и реакционную смесь 30-40.мин кипятят с обратным холодильником. Затем о т- гоняют растворитель и образовавшийся бромистый водород в вакууме. Оставшийся сироп бледно-желтого цвета разбавляют 20 мл безводного дихлорметана и снова вьтаривают. Затем остаток растворяют в 200 мл безводного ацетата, раствор при постоянном це

0

5

0

5

0

40

5

ремешиваний обрабатывают 15 мл при- бавля.емого lio каплям триэтиламина, отфильтровывают вьщелившийся гидро- /бромид триэтиламина и.фильтр промы.вают 2 X 20 мл этилацетата. Фильтрат объединяют с промывными водами и выпаривают Под разряжением. В качестве остатка от вьтаривания получают 63,0 г жесткой пены.. Выход 100%. Пос- ле затирания с этиловым спиртом получают, белые кристаллы, плавящиеся при 160-170 с. Продукт, если желательно, можно деацйлировать непосред-, ственно.

. 2, З , 5 -три-0-бензош1-5-этш1- уридин, используемый в качестве исходного , может быть получен следующим образом:.

а) 2,4-бис-(0-триметилсилил)-5-г -этилурацил. ..

К 40 г (0,285 моль) предварительно вы.сушенного под разряжением при 150 С этилурацнла приба вляют 80,мл ;(0,5 моль) 1,1,1,3,3,З-гексаметил- дийилазана.

Реакционную смесь кипятят с обрат- нь1м холодильником в течение 24 ч в отсутствии влаги. Полученный прозрачный раствор выпаривают при атмосферном давлении. В качестве о.статка от вьтарив ания получают, густой сироп, который подвергают перегонке под разряжением., Выход 78,95 г (97%). ТГкип. Т34 С (1733 Па).

в) 1- 0-ацетил-2,3,5-три-0-бензош1- -Д-рибоза .

60 г (0,4 моль) Д-рибрзы растворяют в 1280 мл абсолютного метанола. К раствору прибавляют 34 мЛ; 11,2%-ного метанольного раствора соляной кисло- ты. Реакционную смесь вьще рживают 24 ч при 20°С в условиях, исключающих попадание влаги. Затем смесь нейтрализуют 120 мл пиридина и вьтарива- ют в вакууме при 30- 40 С.

Остаток обрабатывают еще 120 мл пиридина и опять выпаривают. Полученный вязкий сироп слабо-желтого цвета 5 растворяют в смеси 304 мл пиридина

делившихся кристаллов отделяют декан- l тацией воду. Кристаллы перемешивают с 500 мл воды, жидкость снова декантируют, затем снова перемешивают с 200 мл 50-80% -ногб метанола и затем фильтруют. Неочищенный продукт -перей 320 мл хлороформа. Смесь при охлаж- кристаллизовывают из л метанола4 , дении льдом обрабатывают 233,8 мл Получают 128,5.г (60%) продукта, ко- свежеперегнанного беизоцлхлорида и за- торый плавится при 131 С. затем оставляют на ночь в хрлодильни-10 с) 2,3,5 -тригО бензоил-5-этйп . ке.На другой день смесь выливают на уридин

лёд и разлагают таким образом избы- 48,1 г (0,095 моль) 1-0-ацетйл- точный хлористый бензоил. Затем раз- -2,3,5-три-0-бензоил-д-рибО:зы раст- деляют фазы. Водную фазу экстрагируют воряют в 1690 мл дихлорметайа. Раст- 2x160 мл хлороформа, хлороформенные f вор при перемешивании обрабатывают .вытяжки объединяют., промывают 200 мл 33,7 г ( моль) 2,4-бис-(0-триМе- воды, высушивают над безводным суль- тилсили л)-5-этилурацила и 14 мл хлор- фатом натрия и въпгаривают при 30 - ТГого олова (IV) в 110 мл дихлорметана в вакууме. Прибавляют 100 мл то- Реакционную смесь перемешиваю.т 2-3 Ч луола и снова выпаривают После уда- 20 и затем выдерживают 24 ч при . ления следов растворителя получают Затем смесь встряхивают с 2300 мл на- масло красного цвета. Его растворяют сьпценного водного раствора бикарбона- смесью 96 мл ледяной уксусной кисло- та калия. Органический слой отделяют, ты ц 224 мл уксусного ангидрида, раст- высушивают и выпаривают под разряже- вор при интенсивном перемешивании и 25 нием. Бельм кристаллический остаток охлаждении льдом медленно (в течение перекристаллизовывают из 250 мл эта-

2-3 ч) обрабатывают 32 мл .95-97%-ной серной кислоты и затем на ночь оставляют в холодильнике. На следующий : день смесь выпивают на лед, и от вынола. Выход 53,5 г (95%). Т. пл. 155

156 С.

Продукты, полученные по примерам 2 5,представлены в табл,1. „

/ -.

Пример

I

Продукт

2,3,5 -тpи-0-aцeтил-fE -5-(2-бpoм- винил)ypидин

2 ,3 ,5 -тpи-0-(p xл6pбeнзoил)(2-бромвинил)-уридин

2,3,5 -tpи-0-oктaнpил- E -5-(2- -бpbмвинил) уридин

2,3,5 -три-0-(п-метилбензоил)-5- , (2-бромвинил)уридин

Исходные продукты для примеров 2- 5 получены путем, описанным в примере 1 . .

П р и мер 6. ЕЗ-5-(2-бромви- нил)уридин (1)

, К 65,5 г (0,11 иоль) 2 , 3, 5 - .-бензоил- ЕЗ-5-(2-бромвинил)ури- диналнеочищенный продукт примера 1) приб авляют 250 мп 0,5 н. метилата натрия и 250 Мл абсолютного метанола. Реакционную смесь перемешивают

нола. Выход 53,5 г (95%). Т. пл. 155

156 С.

Продукты, полученные по примерам 2 5,представлены в табл,1. „

. . . Т а б л и ц- а .1

/ -.

Показатели

Т.пл. 145,5°С

Т.пл. 187-188 с

Т.кии. 98-1. (133,3 Па )

Т.кип. 209 С

при - . Если- осадок вьщеляется, его отфильтровывают, рН прозрачного раствора устанавливают равным 5-6 При помощи ионообменной смолы Domex 50Н . затем смолу отделяют фильтрацией и .; .- промывают 2х100 мл метанола. Фильтрат и промывные воды объединяют и затем выпаривают под разряжением. Остаток .обрабатывают этанолом и бензолом. После, затирания остатка с эфиг ром получают 33 ч г -неочищенного яродукта который перекр1 сталлизовывают из воды и затем из этанола. Выход 28 г (71,7%). Т. пл/ 165-167 С.

П р и м е р 7. Подтверждение об- . разования 5-(1,2-дибромэтил).-2 ,3 , 5 -три О(п-хло1 бензоил)урйдина. как промежуточного продукта в процессе . : бронирования 2 ,3 ,/5 -три-0-( -хлор

бензрил)-5-этилурид.ина.

2,3 , 5 -тpи-0-()-xлopбeнзoил)- -5-этилур1ЙдИн бронируют как описано в примере 1, после окончания реакции растворитель упаривают, к оставшемуся сиропообразному .продукту прибавляют

{л -ь

безводный метиловй спирт, Реакционнуй смесь ввдерживают в течение 10-15 мин .йри комнатной температуре, метанол упаривают в вакууме при комнатной температуре. Ос таток хроматографируют на колонке, заполненной селикагелем 60 . (размер частиц 70-350 мкм,диаметр ко- лонки 2 см, высота загрузки 50 см, элюент -хлороформ}.

Полученный после упаривания-хлороформа остаток подвергали ЯМР-исследог ваниям. Спектр ЯМР снимают на спектрофотометре типа Varian X -100-VFT, частота 100, 1 Мгц, р-качестве растг ворителя используют дейтерохлороформ, в качестве внутреннего стандарта - тетраметилсилан.

Результаты ЯМР-спектрометрирова- ния приведены в табл. 2. ;

Т а б л и ц а 2

Полученные данные однозначно подтверждают, что в результате реакции с метанолом образуется 5-(1-метокси- -2-бром) ,3 ,5 -три-0-(п-хлор-55 бензоил)уридин. Данное соединение может ббразоваться лишь в том случае, «со.гда атом брома в положении этильноo

5

1го радикала 5-(1,2-дибромэтил)-2 ,3, 5 -три-0-(п-хлорбенз оил)урйдина, образовавшегося при бромировании, заме-; няется при обработке метанолом на , ; метоксильную группу.

Представленные данные однозначно доказывают, что при бромировании про- изводных З-зтилуридина в условиях примера 1 образуется промежуточный продукт - производное 5-(1,2-дибpoм- iэтил)ypидинa.,

Активируемую активность соединения формулы Т оценивают следующим образом; вначале определяют концентрацию вещества в жидкости культуры ткани, не вызывающую повреждение клеток, которое может быть замечено или измерено. Эту концентрацию обозначают СТ. Соединение является вырусоспецифичным, т.е. пригодно для лечения,в том случае, если оно в концентрации СТр или еще меньшей уже .т ормозит размножение вирусов в ткани. . .

Эффективность действия соединения общей формулы 1 против вирусов показана в табл.1 и 2.

Действие аналогов нуклёозида на . . размножение вирусов в культурах клеток при концентрациях приведено в табл.1.

Таблица 3

++++

О

Тормозящее действие соединения формулы 1 на размножение вирусов приведено в табл.2

. Т а б л и ц а 4

2,77 2,5 . 2,5 3,0

3,23i 3,33 3,25 3,0 .

, Продолжение табл.4

Для эксперимента с Herpes Simp Тех -25 Тур1 в Heha-культуре клеток для СЮ -5-(2-бромвинцл)-урйдина получено соотношение между лечебной и вредной дозой лекарства: 10 63, из величины, показывающей 50%-ное подавляю- зо щее действие по., отношению к . контролю.

Внутривенно

Внутрибрю- шинно

Исследование токсичности i.V. ограничено из-за

растворимости в .воде соединения. Водные суспензии соединения, приготовленные с полиоксиэтилен ;ррбитоЛ-монолеатом (Tween 80) : и карбоксиметилцеллюлбзой.

( 2-бромвинил) уридйн отличаНезначительная токсичность для ;. ткани (2-бромвиниЛ)-уридина также подтверждается опытами, проведенными на мышах определения острой токсичности (LD-).

Острая токсичность на мьпоах (растворитель :вода, содержащая20% димети -. формамидачерез 24ч приведена в табл.б«

Т а б л и ц а 6

0/5

4/5

ленные известным путем с (2-против заболеваний, вызываемых Нег-бромвинил)-уридином в качестве реэ 5imp6ex тип 1, не только . лобиологически активного вещества, ти- 5кально, но и стстематичеспа растворов для инъекций, мазей,.