Способ определения адекватных физических нагрузок у спортсменов Советский патент 1986 года по МПК G01N33/80 

Изобретение относится к медицине и касается способов иммунодиагностики экстремальных состояний человека

Цель изобретения - повышение точности прогнозирования адекватных физических нагрузок у спортсменов.

Определяют число Т- и В-лимфоци- тов,, спонтанных (Кз) и комплементарных нейтрофилов N , s также число лимфоцитов- (Л„) и нейтрофилов (Wa) не вступающих в реакцию розеткообра- зования, и при значениях Т-РОК 1466- 118, В-РОК-455133, 2063t199 WC-POK 549±46, Ло146 28, и ,1223110 определяют адекватную нагрузку для спортсмена, а при снижении данных показателей относительно нормы - неадекватную нарузку.

Способ осу цествляется следующим .образом,

В пробирки с 75 ME гепарина забирают 3 мл крови из локтевой вены, затем добавляют i мл 3%-ного раствора желатина и вьщерживают.при комнатной температуре в течение 40-45 мин для осаждения эритроцитов. Надоса- дочную жидкость отсасывают в-силико- нированные пробирки, добавляют среду 199, содержимое пробирки перемешивают и центрифугируют при 750- 1000 об/мин в течение 5 мин. Осадок еще дважды отмывают средой 199, под- считьшают количество лейкоцитов в камере Горяева и доводят до концентрации 2X10 кл/мл.

Для выявления спонтанных розетко- образующих лимфоцитов (Т-РОК) и нефтрофилов (NJ-POK) 0,1 мл получен- .ной взвеси лейкоцитов смешивают с 0,1 мл 0,4%-ной взвеси эритроцитов барана, которые предварительно отмывают 3 раза физиологическим 1)аство- ром. Полученную смесь инкубируют 5 мин при 37 С в термостате, центрифугируют 5 мин при 750-1000 об/мин и выдерживают в холодильнике в течение 1 ч при . Затем в течение 20 мин фиксируют глутаральдегидом, который добавляют в конечной концентрации 0,6%. После этого смесь заливают дистиллированной водой, пипети- руют и центрифугируют 5; мин при 750- 1000 об/мин, Насадочную жидкость сливают, а осадок переносят на предметное стекло и делают мазок, который высушз Шают при комнатной температуре фиксируют 10 мин в метиловом спирте и окрашивают ,зином„

Для выявления комплементарных ро- зеткообразных лимфоцитов (В-РОК) и нейтрофилов (NJ-РОК) 0,1 мл взвеси лейкоцитов (2x10 кл/мл) смешивают с

0,1 мл 0,,5%-ной взвеси аллогенных эритроцитов, которые предварительно сенсибилизируют кроличьей антисьшо- роткой к эритроцитам человека в субагглютинирующем разведении и комплементом в разведении 1:10. Смесь инкубируют 5 мин при 37 С, центрифуги руют при 750-1000 об/мин в течение 5 мин и фиксируют глутаральдегидом 20 мин. Фиксацию и окраску мазков

проводат аналогично спонтанному ро- зеткообразованию.

Подсчет розеткообраз5тощих клеток проводят под имерсионной системой микроскопа при увеличении ОКхЮ,

ОБхбО. Просчитьтают 200 лимфоцитов и 200 нейтрофилов, вычисляют из них процент розеткообразующих и, исходя из общего количества лейкоцитов и формухш крови, производят пересчет

на абсолютные числа. Оставшиеся клетки, которые не принимают участия ни

в спонтанном, ни в комплементарном розеткообразований, считают нулевыми лимфоцитами (Л) и нулевыми нейт- рофилами (NO). ;

Пример. Спортсмен М. А. Г., 19 лет, студент, спортивный стаж превышает 3,5 года, кандидат в мастера спорта, противопоказаний к участию в соревнованиях не имеет. Обследование в процессе тренировок при аэробно-анаэробном энергообеспечении выявило резкое уменьшение числа нулевых лимфоцитов и нейтрофилов которое

для Ли составляет 53, а для N 72

5

в 1 мкл-крови. Участие в соревнованиях этого спортсмена привело к полному исчезновению как Л,,, так и N, все лимфоциты и нейтрофилы у него стали розеткообразующими. Количество Т-РОК составляет 910, В-РОК 38, 98, NC -РОК 51 . Сделан вьшод о срьше адаптационно-приспособительных механизмов имунной системы, что в дальнейшем подтвердилось, ибо продолжение тренировочных занятий вместо рекомендованного значительного снижения объема и интенсивности привело у этого спортсмена к исчезновению из кро- 5 ни В-л1ямфоцитов и резкому снижению числа Т-лимфоцитов, их число было всего 610 в 1 мкл крови, что в 2 раза ниже, чем у здорового человека

0

без физических нагрузок, Спортсмен временно отстранен от участия в соревнованиях, у него обострился кариес с кистогранулемой. Параллельно с лечением кариеса проведена иммуно- коррегирующая терапия.

Формула изобретения

Способ определения адекватных физических нагрузок у спортсменов путем иммзшологического исследования крови, отлич ающийся тем.

246009

что, с целью повышения точности способа, у пациента определяют число Т- и В-лимфоцитов, спонтанных и комплементарных нейтрофилов, а также 5 число лимфоцитов и нейтрофилов, не вступающих в реакцию розеткообразо- вания и при значении Т-РОК , В-РОК , КЙ-РОК , NC-POK 549М6, Ло , NO to определяют адекватную ьйгруэку для . спортсмена, а при снргкении данных показателей относительно нормы определяют неадекватную нагрузку.

Изобретение относится к медицине. Цель изобретения - повышение точности способа. Для выявления спонтанных розеткообразующих лимфоцитов (Т-РОК) и нейтрофилов () взвесь лейкоцитов смешивают с взве; с ью эритроцитов барана. Эту смесь инку- бируют,центрифугируют,выдерживают в холодильнике в течение I ч при+6 Си фиксируют глутаральдегидом. Смесь центрифугируют. Осадок переносят на стекло, делают мазок. Фиксируют его и окрашивают азур-эозином. Готовят мазки для выявления комплементарных розеткообразующих лимфоцитов (В-РОК) и нейтрофилов (N(.-POK). Подсчитывают количество розеткообразукяцих клеток. Оставшиеся клетки, которые не принимали участие в розеткообразовании, считали нулевыми лимфоцитами (Лд), и нулевыми нейтрофилами (N). При значениях Т-РОК 14661118, В-РОК 455 :33;-Ng-POK 2063tl99, Nc-POK 549t46; Л 146128; N,, 1123±100 определяют адекватную нагрузку для спортсмена, а при снижении показателей относительно нормы определяют неадекватную нагрузку. . с (Л 4а 05