Способ получения производных пролина или их фармацевтически приемлемых солей Советский патент 1986 года по МПК C07D207/12 

Изобретение относится к получению новых производных пролива общей формулы / RrA-S-CH CHCO-K COOIi где R - ацильная группа, связанная с oL-аминогруппой аминокисло ты и выбранная из группы, содержащей циклопропанкарбонильную, циклегексанкарбоняльную или адамаитанкар бонильную группы; А - остаток глицина, саркоэина или ot-D-аминоки слоты и име ет сА-карбонильную группуг которая образует тиольнзпо сложноэфирную связь с атомом серы; или их фармацевтически пpиeмлe шx солей, обладающих гип9тензивн лм дей ствием. Целью изобретения является разработка на основе изйестного метода, способа получения новых соединений, обладающих ценными фармакологическими свойствами. Пример I. Получение К-замещенных аминокислот. а)D-Дланин 4,5 г растворяют в 230 Чп водного 1н.раствора карбонат натрия при перемешивании. К этому раствору по каплям добавляют 100 мл тетрагидрофурана, содержащего 9,0 г циклогексанкарбокилхлорида при 5 , при этой температуре смесь пе ремешивают в течение 30 мин, затем перемешивают при комнатной туре в течение ,5 ч. После этого к реакционной смеси добавляют 2н.,рас вор НС1 для доведения значения рН смеси между I и 2. Реакционнуи} смес экстрагируют этилацетатом, органиче кий слой промывают насыщенным раствором NaCl и высушивают над сульфатом магния. Фильтрат выпаривают в вакууме, получая неочищенный продук При перекристаллиза1{ии его из смеси этилацётат/н-гексан получают 4,65 г К-циклогексанкарбонил-О-аланин. +26,6°. б)Сложный эфир адамантанкарбоновой кислоты и Н-оксисук1динамида (3,0 г) растворяют в 30 мл течграгид офурана. К этому раствору добавлкт 5 мл воды, содержащей 0,89 г Dланина и 1,1 г триэтиламина, и смесь перемешивают в течение ночи ри 5°С. После удаления тетрагидроурана к остатку добавляют воду и атем добавляют 2н. раствор НС для ого, чтобы довести значение рН смеи между 1 и 2. Затем смесь обрабаьшают так же, как в примере 1а, поучают 0,38 г Н-адамантанкарбонил-Вланина. a3j, + П,6(С 1,0, МеОН). Соединения, приведенные ниже, приотовлены одним из методов, описаных в примере 1а и 6. N-Замещенные аминокислоты Метод Ы-Адама:нтанкарбонилглицин б Ы-Циклогексанкарбонил-ифенилаланин.а Н-Циклогексанкарбонил-ОлейцинаК-Циклогексанкарбонил-ВтриптофанаН-Циклогексанкарбонил-ОфенклглицинаН-Циклогексанкарбонил-ОметиончнаН-Циклогексанкарбонил-ВглутаминаЫ-Циклопропанкарбонил-ВаланинаN-ЦиклогексанкарбонилглицинаК-циклогексанкарбонил-. саркозЙ На N-ЦиклопропанкарбонилглицинаПример 2. Ы-(3-(Н-Циклогексанкарбонил-В-аланш1тио)-2-В-метилпропаноклl-L-пролин. Растворяют в 80 мл сухого тетрагидрофурана 5,98 г К-циклогексанкар,бонил-В-аланина. К раствору добавляют 5,84 г карбонилдинмидазола при -18С при перемешивании и охлаждении смеси льдом. При этой температуре смесь перемешивают в течение 1 ч и затем к смеси добавляют 6,29 г N-(3меркапто-2-В-метилпропаноил)-Ъ-пролкна с последующим перемешиванием при -leC в течение 30 мин, затем при комнатной температуре в течение 1 ч. После завершения реакции смесь выпаривают в вакууме, удаляя растворитель. К остатку добавлйют 50 мл воды и к смеси добавляют 2н. соляную кислоту, чтобы установить значение рН между 1 и 2. Смесь экстрагируют этилацетатом, и этилацетатный слой промывают насьпценным раствором NaCl, высушивают над сульфатом магния и вы паривают в вакууме. К остатку добавляют 120 мл ацетонитрила и затем добавляют 6 нп дициклогексиламина (ДЦГА). Смесь перемешивают 1 ч при комнатной температуре. После выдерживания в течение ночи осадок отфильтровывают и высушивают на воздухе , получая неочищенную соль ДЦГА (12,35 г). Неочищенную соль суспендирую j в 300 мл ацетонитрила, и суспензию кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин. После охлаждения осадок собирают путем отстаивания и высушивают на воздухе, получая 12,20 г белой соли ДЦГА. Соль ДЦГА (12,2 г) суспендируют в 90 мл этилацетата, к суспензии добавляют 60 мл 0,5 н.водного раствора бисульфата калия, смесь встряхивают. Органический слой промывают дистиллированной водой, высушивают над сульфатом магния и выпаривают в вакууме, получая резиноподобное вещество (8,64 г). Методами ЯМР и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещество идентично предлагаемому соединению. Пример 3. N-ГЗ-(N-Циклoгeксанкарбонилглицилтио)-2-0-метилпропаноил -Ь-пролин. Растворяют в 10 МП сухого тетрагидрофурана 1,02 г N-циклогексанкарбонилглицина. К раствору добавляют 20 мл сухого тетрагидрофурана, содержащего 1,07 г карбонилдиимидазола при и перемешивании с охлаждением смеси льдом. Смесь перемешивают при этой температуре в течение I ч и затем добавляют 6 мл сухого тетра гидрофурана, содержащего 1,09 г N-(3 меркапто-2-Ь-метилпропаноил)-Ъ-проли на с последующим перемешиванием при |-20°С в течение 30 мин, затем при {комнатной температуре в течение I ч. «После заверщения реакции смесь выпаривают в вакууме для того, 1тобы уда лить растворитель. Остаток подвергают хроматографической очистке на колонке с силикагелем (2x35 см), используя в качестве элюента смесь метанола и хлороформа (от 1:100 до 3:100). Фракции, содержащие, конечный продукт, объединяют и выпаривают в вакууме, получая резиноподобное вещество (1,16 г). Методами ЯМР-анализа и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещество идентично предлагаемому соединению. П р и м е р А. (N-Циклoпp.oпaнкapбoнил-D-aпaнилтиo)-2-D-мeтилпpoпaнoил -L-пpoлин . Растворяют в 14 мл сухого тетрагидрофурана 635 мг Ы-циклопропанкар бонил-П-аланина и 0,70 мл триэтиламина. К этому раствору добавляют 0,48 мл этилхлорформиата при при перемешивании и охлаждении смеси льдом. Смесь перемешивают при этой температуре в течение I5 мин и после этого добавляют ,09 г N-(3меркапто-2-В-метилпропаноил)-L-npoлина и 10 МП сухого тетрагидрофурана, содержащего 0,70 мп триэткламина с последующим перемешиванием при в течение 15 мин, затем при 5°С в течение ночи. После завершения реакции, смесь выпаривают в вакууме при 30-35 с дпя того, чтобы удалить растворитель. К остатку добавляют 10 мл воды, и к смеси добавляют 2н соляную кислоту дпя доведения значения рН между 1 и 2. Смесь экстрагируют хлороформом, и хлороформовый слой промывают насыщенным раствором NaCI, высушивают над сульфатом магния и выпаривают в вакууме. Остаток подвергают хроматографической очистке .на колонке с силикагелем (2 х X 35 см), используя в качестве элюента смесь метанола и хлороформа (от 1:100 до 3:100). Фракции, содержащие конечный продукт, объединяют и вьтаривают в вакууме, получая 395 мг резиноподобного вещества. Методами ЯМР-анализа и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещество идентично предпагаемому соединению . П р и м е р 5. (N- tKnoreKанкарбонил-М-метилглицилтио)-2-D етилпропаноилЗ-Ь-пролин. Повторяют методику примера 4 с ем исключением, что N-циклогексанарбонилглицин заменяют на N-циклоексанкарбонил-Ы-метилглицин (1,09 г) , арбонилдиимидазоп (1,09 г) и N-(3еркапто-2-0-метштрспаноил)-Ь-проин (1,09 г). Получают 0,76 г резиноодобного вещества. Методами ЯМР-анаиза и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещестБО идентично предлагаемому соединению. П р и м е р 6. (N-Циклoпpoпaнкapбoнилглицилтиo)-2-D-мeтилпpoпaнoил -Ъ-пролин. Повторяют методику примера 4 с тем исключением, что N-циклогексанкарбонилглицин заменяют на N-циклопропанкарбонилглицин (0,96 г), карбонилдиимидазол (1,09 г) и Н-(3-мер капто-2-Б-метилпропаноил)-Ь-пролин (1,09 г). Получают 0,4 г резиноподобного вещества. Методами ЯМЕ-анализа и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещества идентично предлагаемому соединению. Пример. (Н-Адамантанкарбонилглицилтио)-2-0-метилпропаноил -Ъ-пролин. Повторяют методику примера 4 с тем исключением, что N-циклогексанкарбонилглицин заменяют иа Н адаман танкарбонилглицин (1,42 г), карбонилдиимидазол (1,09 г) и Н(3-меркапто-2-0-метилпропанонл)-1.-пролин (1,09 г). Получают 1,7 г резмноподо ного вещества. Методаьш ЯМР-анализа и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещество идентично предлагаемому соединению. Примере. N-tЗ(N-Циклoгeкcaнкapбoнил-D-фeннлaлaнилтиd)-2 Dмeтилпpoпaнoил }-Ь-пролин. Повторяют методику примера 4 с тем исключением, что Н-циклогексанкарбонилглицин заменяют на N-циклогексанкарбонил-В-фенилаланин (1,54 г карбонилдиимидазрл (1,09 i) и N-3меркапто-2-В-метилпропансил)-Ъ-пролин (1,09 г). Получают 0,97 г резиноподобного вещества. Методами ЯМРанализа и тонкослойной хроматографи установлено, что это вещество идентично предлагаемому соединени1ю. П р и м е р 9. (N-циклoгeкcaнкapбoнил-D-лeйцилтиo)-2-D мeтилпpoпaнoил -Ь-пролин . Повторяют методику примера 4 с тем исключением, ч то N-циклогексанкар нилглицин заменяют на N-циклогексан карбонил-ГЬ-лейцин ( ,2Q г) , карбонилдиимидазол (0,97 г) и М-(3-мерка то-2-В-метилпропаноил)-Ь-пролин (0,98 г). Получают 1,17 г резиноподобного вещества. Методами ЯМР-ана

ЛИЗа и тонкослойной хроматографин установлено, что это вещество идентично предлагаемому соединению.

и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещество аналогично предлагаемому соединению. Пример 10„ (N-Циклoгeкcaнкapбoнил-D-тpиптoфилтиo)-2-D-мeтилпpoпaнoил -Ь-пролин . Повторяют методику примера 4 с тем исключением, что N-циклогексанкарбоннлглицин заменяют на N-циклогексанкарбонил-В-триптофан (1,75 г), карбонилДикмидазол (1,09 г) и N-(3меркапто-2-П-метилпропаноил)-Ь-пролин (1,09 г). Получают 0,8 г резиноподобного вещества. Методами ЯМР-анализа и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещество аналогично предлагаемому соединению. П р и м е р 11. (N-Циклoгeкcaнкapбoнил-D-фeнилглицилтиo)-2-D-мeтилпpoпaнoил l-L-пролин. Повторяют методику примера 4 с тем исключением, что N-циклогексанкарбонилглицин заменяют на Ы- диклогексанкарбонил-П-фенилглицин (1,30 г) , карбонилдиимидазол (0,97 г) и N-(3меркацто-2-Б-метилпропаноил)-L-npoлин (0,98 г). Получают 0,35 г резиноподобного вещества. Методами ЯМР-анализа и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещество аналогично предлагаемому соединению. Пример 12. (Ы-Циклогексанкарбонил-В-метионилтио)-2-В-метилпропаноилj-L-лролин. Повторяют методику примера 4 с тем исключением, что Кгциклогексанкарбонилглицин заменяют на Nциклогексанкарбонил- метионин (1,30 г), карбонилдиимидазол (1,09 г) и N- (3-меркапто-2-В-метш1пропанош1) L-пролин (1,09 г). Получают 0,59 г резиноподобного вещества. Методами ЯМР-анализа и тонкослойной хроматографии установлено, что это вещество аналогично предлагаемому соединению. Пример 13. (Н-Циклогексанкарбони.п-В-глутаминилтио)-2-В-метилпропаноил -Ь-пролин. Повторяют методику примера 4 с тем исключением, что N-циклогексанкарбонилглицин заменяют на Н циклогексанкарбонилглутамин (0,5 i;), карбонилдиимидазол (0,4 г) и К-(3-меркапто-2-В-метилпропанош1)-L-пролин (0,41 г). Получают 0,3 г резиноподобного вещества, методами ЯМР-анализа П р и м е р 1. (Н-адаман-. танкарбоиш1 0-аланилтио)-2-В-метилпропаноил -1,-пролин, Повторяют методику примера 4с тем исключением, что Ы7циклогексанкарбонилглицин заменяют на N-адаман танкарбонил-П-аланин (1,2 г), карбо нилдиимидазол (0,97 г) и Н-(3-меркапто-2-В-метилпропаноил)-Ь-пролин (0,98 г). Получают 1,02 г резиноподобкого вещества. Методами ЯМР-анализа и тонкослойной хроматографии установлено,что это вещество анало гично предлагаемому соединению. Пример 15 (пример, использующий К,К-тионилимидазол). Тионилхлорид (5,79 г) добавляют к сухому дихлорметану (80.мл) и охлаждают до -15°С при перемешивании. К раствору добавляют N-триметидсилил имидазол (15 г), и раствор перемешивают при -13°С в течение 1 ч, а за тем добавляют N-циклогексанкарбонилD-аЛанин (8,8 г) и перемешивание про изводят при той же температуре в течение 30 мин.. После добавления к сме . си 3-меркапто-2-В-матилпропаноил-Ьпролина (9,5 г) и перемешивания ее в течение i ч величину рН смеси дово дят до 1 с помощью 3 н.НСГ, органический слой отделяют и промывают дважды насыщеннымводным раствором NaCl,,сушат над сульфатом магния и упариваютпри пониженном давлении для удаления дихлорметана. Остаток подвергают хроматографии на колонке с силикагелем (колонка размером 2,5х х50 см), и фракции, содержащие целевое соединение, собирают, объединяют и упаривают при пониженном давлении давая 12,5 г (циклогексанкарбонил-р-аланилтио)-2-В-метилпропанойл -Ь-пролина в виде бесцветного твердого вещества типа жженого сахара. П р и м ё р 16 (пример, использую щий пивалоилхлорид вкачестве смешан ного ангидрида кислоты). К раствору N-циклопропанкарбонилD-аланина (635 мг) и триэтиламина (0,70 мл) в сухом диоксане (14 мл) добавляют пивалоилхлорид (0,35 мл), и раствор охлаждают до -15°С при перемешивании. Перемешивание продолжают в течение 15 мин; к смеси добавляют раствор Н-(3-меркапто-2-В-метил пропаноил)-Ь-пролина (1,09 г) и триэтиламина (0,70 мл) в сухом диоксане (10 мл) н перемешивают при -15 С в течение 20 мин, а затем при 5°С в течение ночи. Рракциоиную смесь упаривают при понготенном давлении, к остатку добавляют воду. После дойедения рН до 4 с помощью 3 н.НС I производят экстракцию хлороформом. Хлороформный слой промывают двяжды насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат над сульфатом магния и упаривают при пониженном давлении для удаления растворителя. Остаток подвергают хроматографии на колонке с силикагелем с использованием колонки размером 2,5x50 см, и фракции, содержащие продукт, собирают н упаривают при пониженном давлении, давая 320 мг (циклoпpoпaнкapбoнил-D-aлaнилтиo) -2-В-метнлпропаноил j L-пролина в виде камедеообразного вещества. Пример 17. Из (К-цикло гексанкарбонил-П-аланилтио)2-В-метилпропаноилJ-L-пролина образуются различные соли: а)Кальциевая соль. Растворяют в 40 кл метанола образец (3,98 г) соединения, приготовленного в примере 3. К этому раствору добавляют 0,84 г гидрата ацетата кальция, смесь кипятят с обратным холодильником в течение ч. Нерастворимое вещество отфильтровывают, фильтрат выпаривают в вакууме. К остатку добавляют хлороформ, смесь отфильтровывают и -выпаривают в вакууме. К остатку добавляют диэтиловый эфир и смесь фильтруют и высушивают на воздухе, получая кальциевую соль соединения примера 3 (3,40 г) Гal -47,2° (С 1,0, МеОН). б)Магниевая соль. Повторяют методику а, используя ,09 г соединения, приготовленного примере 3 или 5, и 0,722 г тетраидрата ацетата магния. Получают ,42 г магниевой соли соединения из -46,6° (С«1,0, МеОН) римера 31а5 в), Лизиновая соль. , Растворяют в 22 МП метанола 1,19 г оединения, приготовленного в примее 3, К этому раствору добавляют ,416 г лизина, смесь перемешивают ч при комнатной температуре н вы- аривают в вакууме. К остатку добавяют хлороформ, смесь фильтруют и выаривают в вакууме. К остатку добавляют диметиловый эфир, продукт фильт руют с отсасыванием, получая лизиновую соль соединения примера 3 (1 ,,54 г) . -.23,Г(С 1,0, МеОН). г)Натриевая соль. Растворяют в 25 мл метанола, обра зец (2,27 г) соединения, приготовлен ного в примере 3. К этому раствору добавляют 0,514 г ацетата натрия, смесь перемешивают при комнатной тем пературе в .течение 30 мин, и выпаривают в вакууме. К остатку добавляют 200 мл смеси метанола и хлороформа (3:100 по объему), образовавш пося смесь фильтруют и выпаривают в вакууме. Остаток растворяют в метаноле, раствор фильтруют и выпаривают в вагкууме. К остатку добавляют этилацетат, продукт отфильтровывают с отсасыванием, получая натриевую соль сое динения примера 3 (1,85 г).а| -26,7(,0 МеОН). д)Соль дициклогексиламина. Растворяют в 120 мл ацетонитрила 13,1 г образца соединения из примера 3. К этому раствору при деремешивании добавляют 6 мл дициклогексиламина. Смесь дополнительно перемешивают в течение 30 мин, затем оставляют на ночь. Остаток отфильтровывают с отсасыванием и высушивают на воздухе. Образовавшиеся неочищенные кристаллы суспендируют в 300 мл ацетонитрила, суспензию кипятят с обрат ным холодильником в течение 30 мин. Суспензию охлаждают, кристаллы отфильтровывают при отсасывании и высушивают на воздухе, получая дицикло гексйламинную соль соединения примера 3 (12,2 г). 1аГ - 24,5(С « 1,0, МеОН). Полученные производные пролина и их фармацевтически приемлемые соли предохраняют образование ангиотензина II из ангиотензина I путем ингиби рования активности фермента, превращающего ангиотензин. Поэтому они полезны для снижения повышенного давления, вызванного ангиотензином II, и в качестве агентов для лечения сер дечной недостаточности. Была измерена активность некоторых из полученных соединений в отношении ингибироваиия фермента, превращающего ангиотензин. 1. Метод. Фермент, превращающий ангиотензин был экстрагирован из легких кроляка. В пробирку помещают 0,6 мл буферного раствора (рН 8,3) 0,1 1Ш борная кислота - карбонат натрия, 0,02 мл О,111-молярного раствора буфера борная кислота - карбонат натрия (рН 8,3), содержащего 25 ммоль/л бензоилглицилгистидиллейцина субстрат и 0,1 мл О,111-молярного раствора буфера борная кислота - карбонат натрия (рН 8,3), содержащего от 10 до 10 моль/л испытуемых соедииений (13 конечных продуктов указаны в табл.1) и предварительно культивируют при 37°С в течение 5-10 мин. Затем добавляют в каждую пробирку 0,1 мл раствора фермента (порошок в ацетоне), и каждую смесь культивируют 30 мин при . Бензоилглицин, получакнЦий ся с помощью фермента, экстрагируют этилацататом в присутствии хлористоводородной кислоты и определяют его количество по УФ-пошлощению при 228 им. Определяют активность фермента в присутствии испытуемых соединений относительно активности в отсутствие испытуемых соедииений, принятой за 00. Концентрацию каждого испытуемого соединения при которой относительная активность фермента составляет 50%, называют активностью каждого испытуемого соединения в отиошении ингибирования активности фермента и ее обозначают величиной Ij . 2 Результаты да,иы в табл.1. Т а б л и ц а I 1,6x10 4,8x10 1,3x50 4,0x10 1,8x10 2,4x10 1,0x10 1,5x10 1,7x10 Примечание. Соединение 1: N- 3-(Н-циклогексанкарбонил-Вапанилтио)-2-0-метиппропаноил -Ь-про лин; 2: N-(3-(N-циклoпpoпaнкapбoнил1)-алайнлтио)-2-В-метилпропаноил1-Ьпролин; 3: (М-циклогексанкарбонилглицилтио)-2-П-метилпропаноил -Lпролин; 4; (Н-циклогексанкарбонил-Н-метилглицилтио)-2-П-метилпропа ноил1-1.-пролин; 5: (Н-цикло.пропанкарбонилглицилти.о)-2-В-метилпропаноил -Ь-пролин; 6: N-t3-(N-aflaMaHтанкарбонилглицилтио)-2-Ю-метилпропаноилу-Ь-пролян; 7: К-{3-(К-циклогексанкар6онил-В-фенш1аланилтио)-20-метилпропаноил -Ь-пролин; 8: N-13(И-циклогексанкарбонил-В-яейцилтио)2-0-метилпропаноил -Ь-пролии; 9: (Ы-циклогексанкарбонил-В-триптофиптио) -f 2-р-метилпропаноил l-L-пролин 10; (N-циклогексанкар бонил-В-фе нилглицилтио)-2-В-метилпроианоил -Lпролин} 11: (К-циклогексанкарбо нип-В-метионилтио)-2-В-метилпропанош13-Ь-пролин5 12; Н-13-(Н-циклогек. санкарбонил-В-глутаминилтио)-2-D-Meтилпропанош1 -Ь-пролин} 13: (Nадамантанкарбонил-В-аданилтио) -2-Вметилпропаноил -Ь-пролин. Для проведения сравнительного ана лиза были взяты.следующие соединения предлагаемое - А) N- 3- (N-imiojoreKсанкарбоню1-В-аланилтио)-2-В-метилпропаноилl-L-пролин; известные - В) N-СЗ-(Ы-ацетил-Ь-пролилтио)-2-В-метил пропаноил -Ь-пролин; С) (N-aueтШ1-Ь-фенилаланиптио)-пропаноил1-Ьпролин; В) Ы-СЗ-(Н-трет.бутилоксикарбонилглицилтио)-2-В-метилпропаноил L-пролин; Е) (N-бeнзoил-L-фeнилаланилтио)-2-В-метнппропаноил}-Ь-пролин; F) М-Гз-(К-циклопентанкарбонил1.-эланилт 1о)-2-В-метилпропанош1 l-Lпролин , Методика испытаний. I) Ферментативньй гидролиз витро. 1 МП 5%-ного гомогената печенн крысы в 0,1 М кгзлийфосфатного буфера (рН 7) смешали с 1 m 10 М раствора испытьшаемого соединения в том же самом фосфатном буфере, после чего смесь инкубировали при 37°С в те-чение заданного промежутка времени, указанного в табл.2. К 100 мкл такой смеси добавили 6 капель I и.соляной кислоты и 5 мл этилацетата. После мег ханического перемешивания в течение 10 мин смеси подвергли центрифугированию, а полученный этилацетатный слой отделили и выпарили. Остаток растворили в мл воды и к водному раствору добавили 6,5 мкл 0,4 М фос« фатного буфера (рН 6,85) и 5 мкл 5 10 М (Н-п-(2-бензимидазолил)-фенилмалеимид (БИФМ), а затем смесь оставили стоять в течение АО мин при 0°С. Подсчет уменьшения количества производили путем возбуждения пробы при 310 нм и измерения излуче;ния при 365 нм (предел измерения: более 0,1 мкг 3-меркапто-2-В-метилпpoпaиoил-L-пpoлинa). 2) Иигибирование сосудосужающей реакции на ангиотензин I. Испытываемое соединение вводили в организм через рот в дозировках 0,4 мкмоль/кг веса животного (крысы)j подвергнутого анестезии, а спустя эаданный промежуток времени после введения в организм подопытным живoтны Внутривенно вводили ангиотензин 1 в дозировке 300 мг/кг, после чего наблюдали ингибирование сосудосуживающей реакции на ангиотензин I. В качестве испытываемых соединеий использовали соединения А, В и , которые были теми ясе, что и в koе осуществления методики испытаия 1), Результаты испытаний приведены s а0л.2. Как проиллюстрировано результатаи испытаний, приведенных в табл.2 се известные соединения проявляют олее высокло чувствительность тиолфирной связи к ферментативно «у ин витро) гидролизу, чем предлааемые соединения. Известные соединения за исключеием соединения В, подвергались ферментативному гидролизу при уровне деструкции свьше 50% после инкубиро вания в течение 60 мин с образовани ем соответствующего количества свободных меркаптогрупп. С другой стороны, хотя соединение В проявляет значительную стойкость к фермента82тинному гидролизу тиолэфирной группы, оно способно ингибировать сосудосуживающую реакцию на ангистезин I на уровне только Приблизительно 50% от того уровня, который достигается с использованием предпагаемых соединений . Таблица 2

I. Способ получения пролииа общей формулы . . Rl-A-S-CH2CHCO-14Q соон где R, - ацильная группа, связанная с Ы -аминогруппой аминокислоты, и выбранная из группы, содержащей циклопропаикарбонильнуго, цшслогексанкарбонильнул или адамантанкарбонилькую группы; А - остаток глицина, саркозина или d- D-аминокислоты и имеет карбонильную группу, которая образу-. ет тиольную сложноэфирную связь с атомом серы; или их фармацевтически приемлемых солей, отличающий, ся тем, что соединение общей формулы Й - А - ОН, где А - остаток глицина, саркозина, или защищенной или незащищенной оСD-аминокислоты; R, имеет указанные значения, в виде смешанного ангидрида кислоты или К ацилимидазолильного производного, подвергают взаимодействию с N-

п - число циклов испытаний.