Способ определения иммунологического статуса больных туберкулезом Советский патент 1987 года по МПК A61K38/21 

Изобретение относится к медицине, а именно к ш-вчунологии.

Цель изобретения - повьшение точности способа за счет того, что нейтрофилы инкубируют в присутствии интерферона.

Способ осуществляют следующим образом

К 4 МП гепаринизированной крови больного туберкулезом легких добавляют 10 мл 0,8% раствора NH С1 и перемешивают. Смесь оставляют на 10 мин при комнатной температуре. Этот процесс приводит к лизису эритроцитов. Затем смесь центрифугируют 5 мин при 800 об/мин, в результате на дно пробирки оседает взвесь лейкоцитов с небольшой примесью зритроцитов. Клеточную взвесь трижды отмывают от раствора 1Ш С1 средой Игла и ресус- пендируют. В камере Горяева подсчитывают количество выделенных нейтро- филов, из 4 мл крови получают 1-10 - 1-10 клеток. Добавляют среду Игла и доводят концентрацию нейтрофилов во взвеси до 1-10 в 1 мл. Берут 9 центрифужных пробирок и в каждую из них выливают по 1 мл среды Игла с клеточной взвесью. Предварительно подготавливают разведения интерферона, добавляя к нему определенное количество среды Игла так, чтобы получить / разведения интерферона 1:2, 1:4, 1;6, 1:8, 1;10, 1:12, 1:16, затем в каждую пробирку, содержащую по 1 мл среды Игла с клеточной взвесью, добавляют по 1 мл раствора интерферона в соответствующих разведениях таким образом, чтобы получить следующие конечные разведения интерферона в смеси с клеточной суспензией: 1:2, 1:4, 1 :8, 1:12, 1:16, 1:20, 1:24, 1:32. В последнюю 9-ю пробирку, которая служит контролем реакции, к 1 МП клеточной взвеси добавляют 1 мп среди Игла без интерферона. В каждую из 9 пробирок добавляют по 0,1 мл раствора полистероловых частиц ла- .текса диаметром 1,3 мк в концентра- хщи 10 частиц в 1 мл среды Игла. Клеточную взвесь с латексом и интерфероном перемешивают легким встряхиванием пробирок и инкубируют 30 мин при . Затем пробирки центрифугируют 5 мин при 800 об/мин. Из осадка делают мазки, которые фиксируют метанолом 7 мин и окрашивают по методу Романовского-Гимза;.Способность нейтрофилов поглощать частицы латекса

оценивают при помощи световой микроскопии окрашенных мазков под иммерсией (объектив X 90, окуляр х 7); частицы латекса имеют вид круглых

бесцветных опалесцирующих тел.

Фагоцитарную активность определяют на основании подсчета 100 клеток, при зтом учитывают следующие показатели: фагоцитарное число (далее ФЧ) процент фагоцитирующих нейтрофилов; фагоцитарный индекс (далее ФИ) - среднее число частиц латекса в одном профагоцитированном нейтрофиле. При увеличении ФЧ до 51-68% и ФИ до 4,46,7 по сравнению с исходным значением выявляют снижение иммунологического статуса.

Пример 1. Больной Н., 42 лет, поступил с диагнозом: фибрознокавернозный туберкулез верхней доли правого легкого в фазе распада,БК-. Больного беспокоит кашель с небольшим выделением слизистогнойной мокро5

ты, общая слабость. Объективно:

больной умеренного питания, нормального телосложения, кодные покрытия и видимые слизистые без особенностей. Тоны сердца ритмичные. Пульс 92 уд/мин, хорошего наполнения и 0 напряжения. В легких на фоне жесткого дыхания выслушиваются рассеянные сухие хрипы. Печень пальпируется у края реберной дуги. Живот мягкий, безболезненный, стул и диурез без 5 особенностей. На обзорной рентгенограмме органов грудной клетки видны деструктивные изменения верхней доли правого легкого. Общий анализ крови: Эр 4,8 г/л, Л 9,4 г/л, Э-1, 0 , С-74, Л-24, М-1. СОЭ 17 мм/ч.

Иммунологическое исследование крови выполнено согласно методике, предлагаемой в изобретении: вьщеление нейтрофилов из периферической крови 5 больного и доведение концентрации до 110 клеток в 1 МП среды Игла; осуществление реакции поглощения нейтро- филами частиц латекса до и после обработки клеток раствором интерферона 50 в разведении 1:4.

В результате осуществления реакций показатели фагоцитарной активности нейтрофилов до обработки клеток интерфероном составляли: ФЧ 38% 55 и ФИ 2,3. После обработки клеток раствором интерферона в разведении ,1:4, ФЧ составляет 51% и ФИ 4,4,

Пример 2. Больной 35 лет, поступил с диагнозом: инфильтративный туберкулез левого легкого в фазе распада, БК-. Больного беспокоит кашель с небольшим отделением мокроты, общая слабость Объективно: умеренного питания, нормального телосложения. Кожные покровы и видимые слизистые без особенностей. Тоны сердца ясные, чистые. Пульс 90 уд/мин. Анализы

Иммунологическое исследование крови выполнено согласно методике, предлагаемой в изобретении: выделение нейтрофилов из периферической крови больного и доведение их до концентрации I 10 клеток в 1 мл среды

крови.и мочи в пределах нормы. На

обзорной рентгенограмме органов груд- Игла; осуществление реакции поглоще- ной клетки фиброзно измененное правое легкое.

Иммунологические исследования выполнены согласно методике, предлагаемой в изобретении: выделение нёйтро- филов из периферической крови больния нейтрофилами частиц латекса до и после обработки клеток раствором интерферона в концентрации 1:16.

В результате осуществления реакции показатели фагоцитарной активности нейтрофилов до обработки клеток раствором интерферона в концент- рации 1:16 ФЧ 68% и. ФИ 6,7.

ного и доведение их концентрации до 1-10 клеток в 1 мл среды Игла; осуществление реакции поглощения нейтро- филами частиц латекса до и после об- 20 ф о р работки клеток раствором интерферона в разведении 1:8.

В результате осуществления реакции, показатели фагоцитарной активВ результате осуществления реакции показатели фагоцитарной активности нейтрофилов до обработки клеток раствором интерферона в концент рации 1:16 ФЧ 68% и. ФИ 6,7.

мула изобретени

Способ определения иммунологичес кого статуса больных туберкулезом путем вьщеления из .крови нейтрофилов

ности нейтрофилов до обработки кле- и инкубирования клеток под

ток интерфероном составили: ФЧ 40% и ФИ 3,0. После обработки клеток интерфероном ФЧ 60% и ФИ 5,1.

Пример 3. Больной И,, 40 лет, поступил с диагнозом: диссеми- нированный туберкулез обоих легких в фазе распада, БК+. Больного беспокоит кашель с большим отделением гнойной мокроты, общая слабость.

30

действием лекарственного вещества с последующей оценкой их функциональной активности, отличающий- с я тем, что, с целью повышения точ ности способа, инкубирование нейтрофилов осуществляют в присутствии интерферона в разведении 1:4-1:16 на. 110 клеток в мл и при увеличении

фагоцитарного числа до 51-68% и фа- Больной пониженного питания, нормаль-35 гоцитарного индекса до 4,4-6,7 по ного телосложения. Кожные покровы сравнению с исходным значением, вы- чистые, со стороны органов брюшной являют снижение иммунологического полости изменений нет. Анализы крови статуса.

Редактор А. Долинич

Составитель М. Позняк Техред ВТ. Кадар

Заказ 7837/6 Тираж 617 .

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

и мочи в пределах нормы. На обзорной рентгенограмме фиброзно измененные правое и левое легкое.

Иммунологическое исследование крови выполнено согласно методике, предлагаемой в изобретении: выделение нейтрофилов из периферической крови больного и доведение их до концентрации I 10 клеток в 1 мл среды

Игла; осуществление реакции поглоще-

ф о р

ния нейтрофилами частиц латекса до и после обработки клеток раствором интерферона в концентрации 1:16.

В результате осуществления реакции показатели фагоцитарной активности нейтрофилов до обработки клеток раствором интерферона в концент- рации 1:16 ФЧ 68% и. ФИ 6,7.

мула изобретения

ф о р

Способ определения иммунологического статуса больных туберкулезом путем вьщеления из .крови нейтрофилов

30

действием лекарственного вещества с последующей оценкой их функциональной активности, отличающий- с я тем, что, с целью повышения точности способа, инкубирование нейтрофилов осуществляют в присутствии интерферона в разведении 1:4-1:16 на. 110 клеток в мл и при увеличении

Корректор В. Бутяга Подписное

Изобретение относится к иммуно-г логии. С целью повышения точности способа к гепаринизированной крови больного туберкулезом легких добавляют 0,87%-ный раствор NH С1, центрифугируют, клеточную взвесь отмывают средой Игла и ресуспендируют. Концентрацию нейтрофилов во взвеси доводят средой Игла до в 1 мл. Инкубируют 30 мин при в присутствии интерферона в разведении 1:4- 1:16 и при кон1 нтрации 10 полисте- роловых частиц латекса. При увеличении фагоцитарного числа до 51-68% и фагоцитарного индекса до 4,4-6,7 по сравнению с исходным значением выявляют снижение иммунологического статуса. С 4ii. р