Способ получения 7- @ 2- (2-аминотиазол-4-ил)- @ Z @ -2-(2-карбоксипроп-2-оксиимино)ацетамидо @ -3- @ (1-метил-1-пирролидиний)метил @ -3-цефем-4-карбоксилата Советский патент 1987 года по МПК C07D501/46 

Изобретение относится к химии гетероциклических соединений, в частности к способам получения нового (2-аминотиазол-4-ил)(2-карбо ксипроп-2-оксиимино)ацетамидо J--3- (i - метил-1-пирролидиний)метилj-3-цефем- А-карбоксилата формулы

S (I) J- C-CONY -p-f @.

H2 NAs/ ) CQO

HjC-fcH

соон

плавящегося при 160°С (разл.), проявляющего высокую антибактериальную активность, который может найти примене ние в медицине.

Целью изобретения является создание на основе известных методов способа получения новьк соединений, обладающих фармакологическими свойст- вами.

Синтез 1.

Вензгидриловый эфир 7-анино-З-хлор- метил-З-цефем-4-карбоновой кислоты.

К суспензии РС1. (8,3 г,40 ммоль)

в СН С1. (100 мл) добавляют пиридин (3,2 г, 40 ммоль) и смесь перемешивают в течение 20 минут при 20 С.Ксме- си добавляют бензгидриловый эфир 3- гидроксиметил-7-фенилацетамидо-З-де- фем-4-карбоновой кислоты (5, г, 10 ммоль) при перемешивании при -40 С в виде одной порции. Смесь перемешивают при -10°С в течение 15 мин и оставляют стоять 7 ч при - -15 С. К охлажденному раствору f-20.C) добав-;- ляют пропан- 1,3-диол (10 мл) и смесь оставляют стоять 16 ч при -20 С, а затем перемешивают 20 мин при комнатной температуре. Результирующий раст- вор промывают ледяной водой (2 х 20 мл) и насыщенным водным NaCl (0 мл), осзппают над MgSO и концентрируют в вакууме. Резиноподобный остаток (12 г) растворяют в смеси CHClj и н-гексана (2:1) и подвергают хроматографирова- нию с использованием колонки с силика- гелем (200 г) и того же растворителя в качестве элюента. Содержащие целевое соединение фракции упаривают в вакууме и остаток растирают с н-гек- саном,получая целевой продукт; (2, г,, 51%), температура плавления ПО С (с разложением).

0

15

0

25

30

gg 40 g 50 55

ИК-спектрА} КВг, см- : 3400, 2800, 1785, 1725.

УФ-спектр ,,,. (EtoH) 265 нм (EV см 160).

ЯМР d (ДМСО-а(,+СВС1з),млн- : .а,6 (2Н, с); 4,43 (2Н, с) ; 5,09(1Н, д ,5 Гц); 5,24 (Ш, д, ,5 Гц), 6,87 (Н,с); 7,3 (10,м).

П р.и м е р 1. (2-Аминоти- азол-4-ил)- г7-2-(2-карбоксипроп-2- оксиимино)-ацетамидо -3- (1-метил-1- пирролидиний)метил -З-цефем-4-кар- .боксилат.

А. Бензгидриловый эфир 3-хлорме- тил-7- Z -2-(2-трет-бутоксикарбонил- проп-2-оксиимино)-2-(2-тритш1амино-. тиазол- 4-ил)ацетамидо -3-цефем-4-кар- боновой кислоты.

Методика 1.

Смесь (2-трет-бутоксикарбо- нилпроп-2-оксиимино)-2-(2-тритилами- нотиазол-4-ил) уксусной кислоты (1,94 г, 3,6 ммоль) дициклокарбоди- имида (ДЦК)(742, мг, 3,6 ммоль) и N-гидроксибензтриазола (486, мг, 3,6 ммоль) в тетрагидрофуране (ТГФ) перемешивают при комнатной температуре в течение 45 мин, на протяжении которых отделяется дициклогексилмоче- нина. Дициклогексилмочевину удаляют фильтрованием и фильтрат смешивают с бензгидриловым эфиром 7-амино-З-хлор- метил-З-цефем-4-карбоновой кислоты (1,5 г 3,6 ммоль). Смесь перемешивают на протяжении ночи при комнатной температуре, а затем упаривают в ваку- уме. Остаточное масло растворяют в CHClj (20 мл), промывают насьщенным водным NaHCOj и насыщенным водным NaCl, осушают над MgSO ,и упаривают до сухого остатка. Остаток (3,9 г) растворяют в н-гексане: СНС1 (1:2) и пропускают через колонку с силика- гелем (40 г), используя ту же систему растворителей. Фракции, содержащие целевое соединение, упаривают в с получением 1,3 г (39%) продукта плавящегося при температуре свыше (разл.).

Ж-спектр (КВг), см : 3990, 1790, 1715, 1690.

УФ-спектр Лмйкс. (EtoH), нм: 240 ( 280), 265 (EV ° 190).

ЯМ с/-(CDC1 j) , млн- : ,45(9Н,с), 1,63 Е 1,66 (6Н, кажд. с), 3,49 (2Н, широкий с), 4,34 (2Н, с), 4,96 (1Н, д ,5 HZ), 5,90 (1Н,д-д ,5 и 7,5), 6,66 (Ш, с), 6,86 (Ш, с).

,3 13261954

7,0-7,5 (25Н, м), 8,23 (IH, д J ЯМР о () ,млн- : 1,44 (9Н, с),

7,5 Н).1,65 (6Н, с), 3,54 (1Н, 4,28 (2Н,с),

Методика 2.4,98 (1Н, д ,5 Н), 5,85 (Н, д-д,

Раствор бензгидрилового эфира ,5 и 7,5Н), 6,70 (1Н,с), 6,90 (1Н,

амино-З-хлорметил-З-цефем-4-карбоно-с), 7,1-7,5 (25Н, м),

вой кислоты (1,86 г, 4,49 ммоль) вС. (2-аминотказол-4-ил- 7. (46,5 мл) обрабатьшают БСА2-(2-карбоксипроп-2-оксинмино)ацета(3,33 МП, 13,5 ммоль) при комнатноймидо -3-L(1 метил-I-пиppoлидиний)мe- тeмпepaтype в течение 50 мин с полу- д тил-З-цефем-4-карбокс-илат.

чением прозрачного раствора. К раст-Смесь бензгидрилового эфира 7- Z вору добавляют раствор хлорангидрида2-(2-трет-бутоксикарбонил-1-оксиимикислоты, который получают из ,но)-2-(2-тритиламинотиазол-4-ил)ацет(2-трет-бутоксикарбонилпроп-2-окси-амидо -3-йодометил-3-цефем-4-карбонЬ-- имино)-2-(2-тритиламинотиазол-4-ил) g вой 1$ислоты (538 мг, 0,51 ммоль) и

уксусной кислоты (2,56 г, 4,49 ммоль)N-метилпирролидина (0,079 мл,

и PClj (1,12 г, 5,38 ммоль) в мети-0,076 ммоль) в (10,8 мл) оставленхлориде (26 мл) . Смесь перемешива-ляют стоять при комнатной температуют при комнатной температуре в тече-ре в течение получаса, а затем раз- ние получаса выливают в холодную во- jg бавляют эфиром (80 мл). Образующий.ду (100 мл) и экстрагируют этилацета-ся осадок собирают фильтрованием и том (3x50 мл). Скомбинированные экс-промывают эфиром с получением 420 мг тракты промьгоают водньи NaCl осушаютчетвертичного продукта, который об- и упаривают. Остаточный сироп (5 г)рабатьшают 90%-ной трифторуксусной хроматографирук1т в колонке с силикаге-25 кислотой (ТФК)(4,2 мл) при комнатной лем (100 г) элюированием 10:1 -температуре в течение I ч. Затем ре- смесью толуола и этилацетата. Фрак-акционную смесь упаривают до сухого ции, содержащие целевое соединение,остатка. К остатку добавляют эфир с объединяют и упаривают с получениемполучением сырой ТФК-соли соединения

.2,84 г (65%) бензгидрилового эфира зо - количественный выход),

3-бутоксикарбонилпроп-2-оксиимино-2-который представляет собой смесь 1:4

(2-тритиламинотиазол-4-ил) ацетамидо-изомеров л и /1. Сырой продукт подЗ-цефем-4-карбоновой кислоты.вергают очистке методом ЖХВТ (ЛихВ. Бензгидриловый эфир 7- Z -2-росорб RP-I8, 4 х 300 мм, элюирова(2-трет-бутоксикарбонилпроп-1-окси-вне 0,01М аммоний-фосфатным буфером

имино)-2-(2-тритиламинотиазол-4-ил)(рН 7,0), содержащим 10% ).

ацетамидо -3-иодометил-3-цефем-4-кар-1Фракцию, содержащую целевой продукт,

боновой кислоты. , Г .... Чсобирают и упаривают до небольшого

Смесь бензгидрилового эфира ,объема. Концентрат доводят до рН око- 2-(2-трет-бутоксикарбонш1Проп-1-окси- д ло 2 добавлением 1 М НС1 и пропуска- имина)-2-(2-трйтнламинотиазол-4-ил)ют через колонку НР-20 (2x15 см) ацетамидо}-3-хлорметш1-3-цефем-4-для удаления неорганических солей. карбоновой кислоты (500 мг,0,53ммоль)Колонку промывают (1000 мл) и ri Nal (240,мг, 1,6 моль) в ацетоне .элюируют 30% . Элюант упаривают (3 мл) перемешивак1Т 2 ч при комнат- .и лиофилизуют с получением 21 мг ной температуре, а затем упаривают в(10%) целевого продукта в виде бес- вакууме. К остатку добавляют СН2 С1 цветного порошка. Т.пл. 160°С (разл.). (20 мл) и воду (10 мл). ОрганическийИК-спектр л)диДКВг), см : 3400, слой промывают 10% (об.) раствором1775, 1610.

тиосульфата натрия (5 мл) и водным УФ-спектрДм«кс фосфатньм буфер рН

NaCl (5 мл), осушают над MgSO и упа-7 ни((1 237 (15700), 257 (155500).

ривают до сухого остатка с получени-ЯМР с () ,млн : 1,65 (6Н, с),

ем 540 мг (90%) продутста в виде аморф-2,3 (4Н, м), 3,09 (ЗН, с), 3,6(4Н,м),

ного порошка, ртавящегося при ,0 (2Н, м), 5,44 (Ш, д, ,8H),

(разл.). .

ИК-спектры л)а(КВг), см : 3350,Фармацевтически допустимые соли

1790, 1690. соединений формулы (I) включают соли

УФ-спектр Дмаке (EtoH): 240 (Ё омнеорганических оснований, например

270), 265 (Е 190). соли щелочных MeTajtnoB (в час тности.

I

513261

оли натрия и калия) и соли щелочноземельных металлов (в частности, сои кальция), соли аммония, соли органических оснований (например, с исользованием триэтиламм1а, прокаина, с енетилбензиламина, дибекзилэтиленди- амина и других органических основа- НИИ, которые используются в производстве пенициллина и цефалосцоринов), со ли присоединения кислоты (напри- 10 ер соли с хлористоводородной, бро- истоводородной, муравьиной, азотной, серной,, метансульфоновой, фосфорной уксусной или трифторуксусной кислотой) и других кислот, которьй исполь- 15 зуются в- производстве пенициллинов и цефалоспоринов. Физиологически гид- ролизуемые сложные эфиры включают сложные ацилоксиалкиловые эфиры, например (низше)алканоил)низше)алкило- 20 вые эфиры, такие как ацетоксиметило- вый, ацетоксиэтиловьй, пивалоилокси- метиловый и т.п. Соли оснований и сложные эфиры могут быть образованы |С любыми карбоксильными группами сое- динений формулы (I).

Соединения формулы (1) проявляют высокую антибактериальную активность rf отношении грамм-положительных и гр амм-отрицательных бактерий и при- годны для лечения бактериальных инфек- животных, а также человека. Соединения формулы (I) могут быть использованы дпя приготовления препаративных форм, предназначенных для упот- 35 ребления паэнтерально, обычным путем с применением известных фармацевтических носителей и экс}диен тов, и могут быть представлены в виде единич- ньт дозировочных форм или в виде мно- жественно-дозировочных форм. зиции могут быть представлены в вид е растворов, суспенэий или эмульсий в масляных или водных разбавителях и могут содержать обычные диспергир по- щие, суспендирующие и стабилизирующие вещества. Композиции могут быть также представлены в втзде сухого порошка, предназначенного дпя разбавления перед употреблением, например, 0 стерильной водой, не содержащей пиро- генных веществ. Соединения формулы (I) могут быть также приготовлены в виде свечей, испбльзующих обычные для этой цели основы, например масло, 55 какао или другие глицериды. При необходимости соединения согласно изобретению могут быть предписаны в со95-6

четании с другими антибиотиками, та- кими как пенициллины или другие цефа лоспорины,

В случае приготовления в виде единичных дозировочньк форм, композиции предпочтительно-содержит 50 - 1500 мг активного ингредиента формулы (I). Для лечения взрослых людей дозировка предпочтительно составляет 500-5000 мг в сут, в зависимости от частоты и способа -приема. В случае внутримьппечного или внутривенного введения взрослому человеку полная доза в норме обычно составляет от 750 до 3000 мг в сут в -виде раздельных дозировок, хотя дпя некоторых соединений может потребоваться более высокая суточная доза в случае инфекций бактериями рода Psendomonas.

В ходе первичной оценки соединений согласно изобретению минимальную ингибирующую концентрацию (МИК) дпя соединений и двух соединений для сранения (цефотаксим и цефтазидим) оп- . ределяют методом двукратного разбавления агара с использованием агара №оллера-Хинтона для 32 штаммов испытуемых организмов, поделенных на шесть групп. Геометрические средние значения МИК, определенные в этом эксперименте, приведены в таблице.

Ue-fpomaxtUM§

N-rr-C-CONH-r-f

ОСНаСООН

цефтазиЗим

-;j-C C014H-i- ( Jji ,-г.0

W-rH,

II

N

N

О

coo

Н С-С-СНт,

СООН

Проводят также испытания, для выявления организмов, резистентных к .соединению формулы (I), цефотаксиму и цефтазидиму. Значения МИК для этих трех соединений в отношении 240 штаммов Euterobacteriapeae определяют в среде Мюллера-Хинтона, и значение МЖ, равное или превьшающее 8 дли не менее одного из испытуемых соединений, произвольно принимается за свидетельство резистентности организма. Из 240 штаммов 27 оказались резистентными не менее, чем к одному из испытуемых соединений. Соединение

(I) активнее цефотакснма в отношении группы (G ) Г испытуемых организмов и намного активнее цефотаксима в отношении группы (G-) - (III) цспытуе- мых организмов (Ps.aeruginosa), Оно активнее цефтазидима в отношении всех групп грамм-положительных испытуемых организмов, исключая (G-) - (III) (PS. aeruginosa), которые нес- колько чувствительнее к цефтазидиму.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет получить соединение (I), обладающее ценными фармакологическими свойствами.

Ф о р мул а

из обретения

Способ получения (2-аминоти- .азол-4-ил)(2-карбоксипроп-2оксиимино)ацетамидо -3- (I-метил- - пирролидиний)метил}-3-цефем-4-карбоксилата, плавящегося при (разл,):

N-rr-C-CCfNH

N- C-CCfNH-T-r -l @

M s 0coo ci

H C-f-CH

соон

о

сн

о тличающийся тем, что, смесь бензгидрилового эфира 7-амино- З-хлорметил-З-цефем-4-карбоноврй кисг

(G-«-)-Ia 1(5 штаммов):

(G+) -1Ъ (5) (G-)-Ia (5) (G-)-Ib (6) (G-)-II (5) (G-)-III (6) (G+)-Ia

(G+)-Ib

14

33

0,066

0,79

1,2

4,0

1,0 2,2 0,015 0,35

4.1 22

5,1

12

0,070

1,7

2,6

1,8

Чувствительный к пенициллину S.aureus (5 штаммов)

Чувствительный к пенициллину S.aureus (5 штаммов)

д

5

0

5

0

195«

лоты, (2-трет-бутоксикарбонил- проп-2-оксиимино)-2-(2-тритиламино тиазол-4-ил) уксусной кислоты, дицик- логекгнлкарбодиимида и N-гидрокси- бензтриазола подвергают взаимодействию в органическом растворителе с получением бензгидршювого эфира 3- хлорметил-7- г -2-(2-трет-бутокси- карбонилпроп-2-оксиимино)-2-(2-три- тиламиНотиазол-4-ил)ацетамидо -3-це- фем-4-карбоновой кислоты (соединение II) или смесь бензгидрилового эфира 7-амино-3-хлорметил-3-цефем-4-карбо- новок кислоты и бис(триметилсилил) ацетамида подвергают взаимодействию с хлорангидридом (2-трет-бу- токсикарбонш1проп-2-оксиимино)-2-(2- тритиламинотиазол-4-ил) уксусной кислоты с получением соединения (II), после чего соединение (II) подвергают взаимодействию с йодистым натрием с получением.бензгидрилового эфира (2-трет-бутоксикарбонил- проп-2-оксиимино)-2-(2-тритиламино- тиазол-4-ил)ацетамидо-3-йодметил-3- цефем-4-карбоновой кисло ты (с оедине- ние III), и далее соединение (III) подвергают взаимодействию .с N-метил- пирролидином в органическом растворителе с последующим снятием защитных групп кислотным гидролизом и выделением целевого продукта, плавящегося при (разл.).

5,1

12

0,070

1,7

2,6

1,8

(G-)-Ia (G-)-Ib

Чувствительный к цефалотину E.coli (2 штамма) К-1,pneumonias (i штамм) и Pr.mirabilis (2 штамма).

Резистентный цефалотин E.coli (3 штамма) и К1.pneumoniae (3 штамма)

(G-)-II , (G-I)-IIl . - среднее значение 5 экспериментов.

Pr.morganii (I штамм) Ent.cloacae (2 штамма) и Ser.macescens (2 штамма)

Ps.aeruginosa (6 штаммов)

Изобретение касается гетероциклических соединений, в частности 7- 2-(2-аминотиазол-4-ил)- гЗ-2-(2-кар- боксипроп-2-оксиимино)аи,етамидо -3|( 1-метил-1-пирролидиний)метил -3-це- фем-4-карбоксилата (ЦК), проявляющего антибактериальную активность, который может быть использован в меди- 1цше. Цель - создание более активных веществ указанного класса. Получение ЦК ведут из а) смеси бензгидрилового эфира 7-амино-3-хлорметил-3-цефем-4- карбоновой кислоты, (2-трет-бутоксикарбонилпроп-2-оксиимино)-2:-(2- тритиламинотиазол-4-ил) уксусной кислоты, дициклогексилкарбодиимида и N- гидроксибензтриазола в среде органического растворителя с образованием бензгидрштового эфира З-хлорметил-7-