5-Йод-1-карбокси-2-фениллаурат,меченный радиоизотопами йода,в качестве радиоактивного средства определения ферментативной активности эстеразы в организме и промежуточный продукт для его получения Советский патент 1987 года по МПК A61K51/04 C07B59/00 C07C69/17 A61K101/02 A61K123/00 

Изобретение относится к органической химии, конкретно к новым химическим соединениям - 5-иод-1-карбокси- -2-фениллаурату, меченному радиоизотопами иода, формулы I

соон

(CH2lioCH (П

и промежуточному продукту для его получения 5-иод-1-карбокси-2-фенилла- ypsTy формулы II

,соон

0 мое соединение может найти применение в исследованиях на человеке, так как оно содержит радиоизотопы иода, разрешенные к использованию в практической медицине.

5 Пример 1. 5-иод-1-карбокси-2 -фениллаурат.

К раствору 15,8 г (0,06 моль) 5- -иодсалициловой кислоты в 100 мл сухого бензола и 10 мл свежеперегнанно OCOlCH lioCH (Ш

Меченое соединение может найти применение как средство определения ферментативной активности эстеразы в организме, что дает возможность исследовать нарушения способности поджелу- 20 го пиридина прибавляют при комнатной

Дочной железы секретировать эстеразу. Цель изобретения - выявление соединений, обладающих повьппенной точностью при определении ферментативной активности эстеразы в организме, а также выявление соединений, позволяющих получить соединение формулы I л.

с высоким выходом.

Получение промежуточного продукта 5-иод-1-карбокси-2-фениллаурата формулы II проводят по известной реакции ацилирования фенолов хлорангид- ридами кислот, взаимодействием 5-иод- сали циловой кислоты с лауроилхлоридом в бензольном растворе в присутствии пиридина с последующим нагреванием реакционной смеси при 50-60 С в течение 4ч, подкислением и вьщелением 5-иод-1-карбокси-2-фениллаурата.

25

30

температуре раствор 22 г (О,1 моль) лауроилхлорида в 30 мл бензола, затем нагревают реакционную смесь при перемешивании 50-60°С в течение 3 ч. После охлаждения выливают в ледяную воду (250 мл), подкисляют уксусной кислотой (50 мл) и все трижды экстрагируют эфиром. Эфир испаряют и продукт перекристаллизовывают из гексана Выход 17,6 г (66% от теор.) С, . Найдено,%: С 51,03, Н 6,10, J 28,36. Вычислено,%: С 51,12, Н 6,05, J 28,48

Пример 2. 5-иод-1-карбокси- -2-фениллаурат, меченный радиоизото- па}4И иода.

В колбу объектом 10 мл помещают 50м 5-иод-1-карбокси-2-фениллаурата, 3 мл этилового спирта и 2 мг свежепригоМеченный радиоизотопами иода целе- 40 товленной однохлористой меди. Колбу

вой продукт получают реакцией изотопного обмена радиоиодида натрия с 5-иод-1-карбокси-2-фениллауратом в этиловом спирте, в присутствии одновалентной меди.

Поскольку эстераза вырабатывается поджелудочной железой, 5-иод-1-карб- окси-2-фениллаурат, меченный радио- изотопами иода, может, быть использован для исследования внешнесекре- торной функции поджелудочной железы как в физиологических, так и патологических условиях.

Применение 5-иод-1-карбокси-2-фе- ниллаурата, меченного радиоизотопами иода, значительно упрощает методику и уменьшает время исследования, а также позволяет проводить прижизненные динамические исследования с

помощью наружной регистрации гамма- излучения радиоизотопов иода стандартной аппаратурой, применяемой в медицине и биологии. Методика исследования заключается в сравнительном измерении радиоактивности в моче и в эталоне и может быть выполнена с помощью простейшего радиометрического прибора. Кроме того, предлагаемое соединение может найти применение в исследованиях на человеке, так как оно содержит радиоизотопы иода, разрешенные к использованию в практической медицине.

Пример 1. 5-иод-1-карбокси-2 -фениллаурат.

К раствору 15,8 г (0,06 моль) 5- -иодсалициловой кислоты в 100 мл сухого бензола и 10 мл свежеперегнанного пиридина прибавляют при комнатной

температуре раствор 22 г (О,1 моль) лауроилхлорида в 30 мл бензола, затем нагревают реакционную смесь при перемешивании 50-60°С в течение 3 ч. После охлаждения выливают в ледяную воду (250 мл), подкисляют уксусной кислотой (50 мл) и все трижды экстрагируют эфиром. Эфир испаряют и проукт перекристаллизовывают из гексана. Выход 17,6 г (66% от теор.) С, . Найдено,%: С 51,03, Н 6,10, J 28,36. Вычислено,%: С 51,12, Н 6,05, J 28,48.

Пример 2. 5-иод-1-карбокси- -2-фениллаурат, меченный радиоизото- па}4И иода.

В колбу объектом 10 мл помещают 50м 5-иод-1-карбокси-2-фениллаурата, 3 мл этилового спирта и 2 мг свежепригоустанавливают в тяжелый защитный шкаф, прибавляют 0,2 мл раствора иодида натрия-иод-125 (или -иод-131) без носителя общей активностью 50 мКи, снаб

ают обратным холодильником и нагревают на водяной бане 4 ч при 90°С, оставляют на ночь. На следующий день фильтруют, спирт упаривают, осадок обрабатывают 5 мл горячего гексана,

отфильтровывают, гексан упаривают, выпавший целевой продукт растворяют в подсолнечном масле до требуемой радиоактивной концентрации.

Идентификацию меченного радиоизо-

топами, иода целевого продукта и определение его радиохимической чистоты проводили методом бумажной хроматографии в системе бутанол: 20%-ный аммиак : вода 45:1:5,

313

Пример 3. С целью уменьше- ния выделения эстеразы из поджелудочной железы в кишечник у крыс опера- тивньт путем перевязывают протоки поджелудочной железы. Контролем слу- жат интактные (нормальные) крысы.Крысам обеих групп внутрижелудочно вводят 5-иод-1-карбокси-2-фенил-2-ла- урат, меченный иодом-131, в 0,2 мл растительного масла и в дозе 10 мкКи по радиоактивности, животных забивают через 1-24 ч, отбирают пробы мочи и органов и радиометрируют их сравнительно с эталоном, содержащим рав

ное введенному количество радиоактив- }5 логией поджелудочной железы предланости.

Экспериментально вызванная недостаточность поджелудочной железы обусловливает понижение накопления метки в моче в период 1-6 ч вследствие 20 уменьшения поступления эстеразы в кишечник и расщепления меченого соединения. Об этом же говорит увеличение вьщеления метки с калом при данной экспериментальной патологии - 6,60t. 25

0,30% при операции против 2,,20% в контроле за 24 ч.

При изучении острой токсичности 5-иод-1-карбокси-2-фениллаурата установлено, что при внутрижелудочном ЗО введении мышам максимально возможная доза (400 иг/кг) не вызывает признаков токсичности и гибели животных. Эта доза в 10000 раз превышает потенциальную клиническую дозу..,,

Определение активности эстеразы с помощью перорально вводимого ди- лаурата флуоресцеина требует специальной биохимической обработки мочи, подчас трудно выполнимой, для 40 измерения флуоресценции - сложной аппаратуры, анализ занимает несколько часов. Преимущества предлагаемого меченого соединения перед прототипом состоят в том, что оно не требует

45

гаемого соединения разница тролем и опытом составляет

Таким образом, предлага динение в диагностическом эффективнее известного сое

Формула изобре

1.5-иод-1-карбокси-2-ф меченный радиоизотопами и мулы 1

,соои

(

в качестве радиоактивного определения ферментативной сти эстеразы в организме.

2.5-иод-1-карбокси-2-ф формулы II

хСООН -@ЬОСО(

в качестве промежуточного для получения 5-иод-1-карб ниллаурата, меченного ради иода.

Т а б л и

Условия получения, радиохимический выход и радиохимическая чистота 5-иод-1-карбокси-2-фениллаурата, меченного радиоизотопами иода

131

30 50

90 80

7

этих

4

условий, время анализа - несколко минут. Простота, доступность и ТОЧНОСТЬ при применении этого соединения и отсутствие противопоказаний делают возможным массовые скрининго- вые исследования, что и составляет его основное преимущество.

Различия в накоплении в моче ди- лаурата флуоресцеина между здоровыми людьми и больными с выраженной патологией поджелудочной железы не превышают фактора 1,25-1,5. Через 3 ч после введения крысам с аналогичной по степени выраженности пато

гаемого соединения разница между контролем и опытом составляет 1,75 раза.

Таким образом, предлагаемое соединение в диагностическом отношении эффективнее известного соединения.

Формула изобретения

1.5-иод-1-карбокси-2-фениллаурат, меченный радиоизотопами иода, формулы 1

,соои

( (1)

в качестве радиоактивного средства определения ферментативной активности эстеразы в организме.

2.5-иод-1-карбокси-2-фениллаурат формулы II

хСООН -@ЬОСО( (Ш

в качестве промежуточного продукта для получения 5-иод-1-карбокси-2-фе- ниллаурата, меченного радиоизотопами иода.

Т а б л и

ц а 1

85 89

97 98

513035976

Таблица 2

Динамика радиоактивности в моче и щитовидной железе после введения 5-иод-1-карбокси-2-фениллаурата, меченного иЬдом-131. Средние величины из 8 крыс на. точку.

Редактор В. Ковтун

Составитель А. Евстигнеев

Техред Л.Олейник Корректор А.Ильин

Заказ 1277/28Тираж 372Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий . . 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Изобретение касается арилпроиз- водных лауриновой кислоты, в частности 5-иод-1-карбокси-2-фениллаурата меченного радиоизотопами йода (I), который может быть использован в качестве радиоактивного средства определения ферментативной активности эстеразы в организме, и 5-йод-1-карб- окси-2-фениллаурата (II), являющегося промежуточным продуктом для получения I. Для выявления соединений, обеспечивающих точность определения ферментативной активности эстеразы, а также для выявления соединений, позволяющих получить I с высоким выходом, получены новые I и II. Синтез II осуществляют взаимодействием 5- -йодсалициловой кислоты с лауроил- хлоридом при 50-60 с в среде бензола в.присутствии пиридина. I получают радиоизотопным обменом радиойодида натрия с II. Получают I с радиохимической чистотой 97-98%, что дает возможность проводить с повышенной точностью оценку активности .эстеразы (различия в накоплении в моче между здоровыми людьми и больными с выраженной патологией поджелудочной железы при использовании I составляют 1,75 раз против 1,25-1,5 раза с использованием дилаурата флуоресцеина). 2 с.п. ф-лы, 2 табл. оо о со ел со