Способ приготовления препаратов политенных хромосом слюнных желез Советский патент 1987 года по МПК G01N33/48 A61B10/00 

Изобретение относится к медицине в частности к цитогенетическим методам анализа политенных хромосом.

Целью изобретения является улучшение качества препаратов за счет окрашивания гетерохроматиновых зон : хромосом.

Пример 1. Слюнные железы живой личинки IV возраста вида Chi- ronomus plumosus вычленяют в капле гемолимфы личинки, фиксируют 3 мин в спирт-уксусной смеси (3:1) и помещают на середину 1/3 части предметного стекла в каплю 40%-ной молочной кислоты. Препаровальной иглой под микроскопом отделяют клетки с хромосомами от секрета железы, который удаляют со стекла. Клетки накрывают другим предметным стеклом и осторожно надавливают большим пальцем через слой фильтровальной бумаги в месте соприкосновения двух стекол. Далее препарат выдерживают при +4 С в течение 3 сут, после чего предметные стекла разъединяют, осторожно растягивая их скользящим движением в противоположные стороны. Полученные препараты проводят через три смены 96- градусного этилового спирта, высушивают на воздухе и используют для дифференциальной окраски.

П р и м е р 2. Слюнные железы живой личинки вида Cryptochironomus pbreptans вычленяют в капле гемолимфы личинки, фиксируют 3 мин в спирт- уксусной смеси (3:1) и помещают на середину 1/3 части предметного стекла в каплю 40%-ной молочной кислоты. Под микроскопом отделяют клетки с хромосомами от секрета железы, накры вают предметным стеклом и вьщержи

Редактор Н.Слободяник Заказ 2652/46 .

Составитель М.Позняк

Техред А.Кравчук Корректор С.Шекмар

Тираж 776Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г.Ужгород, ул. Проектная, 4

O

0

вают при +2 С в течение 5 сут, после чего предметные стекла разъединяют. Полученные препараты проводят через три смены 96-градусного этилового спирта, высушивают на воздухе и используют для дифференциальной окраски. Хромосомы этого вида длинные с многочисленными инверсиями, поэтому для получе ния качественного препарата их выдерживают с молочной кислотой при н течение 5 сут. На таких препаратах при дифференциальной окраске по С-методу четко окрашивается центромерньй район, который не выявляется морфологически при обычной ацетоорсеиновой окраске политенных хромосом данного вида.

Качество препарата обеспечиваемся продолжительным сроком выдерживания хромосомных препаратов с молочной кислотой, что позволяет добиться максимального расправления хромосом и освобождения от цитоплазмы.

Формула изобретения

Способ приготовления препаратов политенных хромосом слюнных желез путем инкубации клеток в растворе молочной кислоты на стекле, их раздавливании и выдерживании в том же растворе при 2-4 С с последующим их окрашиванием, отличающийся тем, что, с целью улучшения качества препаратов за счет окрашивания гетерохроматиновых зон хромосом, инкубацию проводят в 40%-ном растворе моочной кислоты и выдерживают в ней до 3-5 сут, а перед окрашиванием препараты промьгоают в трех сменах 96- градусного спирта.

Для улучшения качества препара- путем окрашивания гетерохроматиновых зон хромосом слюнные железы живой личинки фиксируют в спирт-уксусной смеси (3:1) и на предметном стекле помещают в 40%-ный раствор молочной кислоты. Препарат раздавливают и вьздерживают при 2-4 с в течение 3- 5 сут. Перед окрашиванием препарат промьтают в трех сменах 96-градусного спирта. 00 ю о а ( 4