Питательная среда для идентификации энтеробактерии Советский патент 1987 года по МПК C12Q1/04 

11

Изобретение отг-юсится к Me;n.i-nui U .- кой микробиолог ин И касается .т,иффс,- рйнциальной лнат-ногтикя 1олкте- рий.

Цель изобретения - :;Gni,iiiieii ir чун- сгвительности cpcAti,

Среду готовят ()(иим обгкт-юм, Взвешивают все компоненты ;:pc;u i, затем приготавливают рабочий раствор Дня этого нее ингредиенты nepeMeiiiUBa ют при подогревании на водяной бане до полного растворения. После эт(1го устанавливают рН 6,7 раствора. Установление рН средь 6,3 - 6,8 проит- водят при помощи 10%-ного растиора НС1 и 10%-ног-о раствора NaOH под контролем иономера униперсальногс ЗВ-74, Среду разливают ех tempore в пробирки по 3 мл в каждую. Затем в пробирку вносят ч 1стую культуру исследуемого микроорганизма, после чего осуществляют инкубацию посевон при 37 t 1°С. Учет результатов производят через 18-24 ч. Фиолетовый цвет расценивают как положительны:й, желтс коричневый отрицательный,

Пример 1 , Готовят среду следующего состава, г/л:

Лимонно-кислый натрий5,0

ГлюкозаС, 6

Калий фосфорнокислый одно замещенный0,8 Пептон1 „О Цистеик 0,02 Фосфорно-кислый аммоний О,, 5 Крезоловьш

красный0,08

Бромтимоловый

синий j, 08

Натрий хлористый sO Вода дистиллированнаяДо 1 г;

Испытание работы среды проводили с; помощью контрольного штамма E,col М-17, Для исключения лоямопо/тажитель ных результатов в контроле испольлуют S.flexneri8516„ Цвет среды в пробирке с контрольным штаммом F:.coll М-17 изменяется из желто-коричневс)го It фиолетовый, в случае с S.flexiieri 8516 - оставался жеш о-к оричневьм , .е, без изменения.

IVi iOHHO-KHC ТЬ Й

ia piiu

Глюкоза

лллий фосфорно-. исльп одноза1-: и м-ИЫЙ

ь

ИистеинО i:-;

Фосфорно-кислый

1ММОНИЙ0. 7

(ре эоловый

расныйО JI

Яромтимоловый

:инийО . 1

Чатрий хлористый7 . О

Зода дистиллизс вамнаяДо л.

: езультать испытаний: практически олн; аковые с примером ; , Положитель- и--к: результаты г; посевом разведения до i50 млн фиксировались в срок 18 - 2 i Среда по прототипу срабатывала гри посеве менее млрд/мл лишь при издержке до 2- су т.

П р и м е р 3 Содержание среды, г/л;

/;ИМОННО-кислый

латрий5,5

лкжоза0.65 ла1;ий фосфорчо- хяслый одноза iCOieHHbm0,9

Пептон1,1

Дистеин0.03

ФС)С фОрНО-КИСЛЫЙ

,гг-:монийО 5 6

Аре золовый

красный0,09

;i ром тимоловых

синий0,09

.зультать: испытаний практически одинаковы с пр)имерами 1 ,, 2 , Чувстви- тельност}) среды по отр{О :аению к лрото- гип;/ была в 4 раза вьгше„ так как среда по прототипу работала только с рач1 едением. не менее 1 млрд/мл, а ;:ред;1агаемая среда - не менее Z50 мли/мл.

Данные ю чувствительности среды :г:1Я1(епенъ1 в таблице.

Пределы чувствительности среды в сравнении с прототипом

Знак (+) в таблнце означает завершение положительной реакции в срок до 24 ч, выражающийся в изменении среды в случае с цитратом натрия с глюкозой в фиолетовый цвет, а в случае цитрата Кристенсена - малиновый.

Знак (-) означает отрицательный результат, при котором первоначальны цвет среды остается без изменения - желто-коричневый.

Предлагаемую среду можно готовить в сухом виде. Для этого рецептуру среды разводят в десятикратно меньшем объеме воды и микродозируют до 0,02 мл в ячейки полимерного планшета, высушивают, стерилизуют ультра- фиолетом и герметизируют. В этом случае для стабилизации среды добавляют поливиниловый спирт на этапе растворения в количестве 0,8 - 1 г/л. В таком виде среда долго хранится, удоб- на в употреблении, что дает возможность применять ее в полевых условиях.

Формула изобретения

Питательная среда для идентификации энтеробактерий, содержащая ли- монно-кислый натрий, глюкозу, калий

фосфорно-кислый однозамещенный, источник азота, источник серы, индикатор, хлористый натрий и воду дистиллированную, отличающаяся тем, что, с целью повышения чувствительности среды, она дополнительно содержит фосфорно-кислый аммоний, в качестве источника азота она содержит пептон, в качестве источника серы - цистеин, в качестве индикатора - крезоловый красный и бромтимо- ловый синий при следующем количественном соотношении, г/л: Лимонно-кислый

натрий5,0 - 6,0

Глюкоза0,6 - 0,7

Калий фосфорнокислый однозамещенный0,8 - 1,0 Пептон1,0 - 1,2 Цистеин 0,02 - 0,04 Фосфорно-кислый 0,5 - 0,7

аммонии Крезоловый красный Бромтимоловый синий Хлористый натрий

Вода дистиллированная

0,08 - 0,1 0,08 - 0,1 5,0 - 7,0 Остальное

Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к питательной среде для идентификации энтеробактер. Пель изобретения - повышение чурк твительности среды.Среду готовят следующим образом: взвешивают нее компоненты среды, г/л - лимонно-кислый натрий 5,0-6,0; глюкозу 0,6-0,7; кали1 1 фос4)орно-кислый однозамеп1енный 0,8-1,0; пептон 1,0 - 1,2; цистеин 0,02-0,04; фосфорно-кис- лый аммоний 0,5 - 0,7; крезоловый красный 0,08-0,1; бромтимоловый синий 0,08-0,1, хлористьм натрий 5,0 - 7,0; растворяют в дистиллироватпшй воде (до 1 л) и подо1-ревают на водяной бане при перемешивании до полного растворения, устанавливают рН 6,3 - 6,8 и перед употреблением разливают в пробирки но 3 мл. Цвет среды желто-коричневый при росте эн- теробактерий 1- зменяется на фиолетовый. Среду можно готовить в сухом виде в полистироловых план летках, для стабилизации добавляют 0,8-1,0 г/л поливинилового спирта. Среда чувствительна при работе с разведением не менее 250 млн. кл./мл. 1 табл. ю (У) со со 4;:: О со