Изобосгение относится к новому биоло- гичег- и гзктивному соединению, а именно к бзнзо иазол ил амиду 4-нитро-М-(4-этокси- фенил)антраниловой кислоты, проявляющему противовирусную активност,, которое ; ожет найти применение в медицине.
Цель изобретения - выявление новых свойств в ряду производных N-фенилантра- ниловой кислоты.
Пример. Бензотиазолиламид 4-нит- po-N-{4-этoкcифeнил)aнтpaнилoDoй кислоты (соединение 1).
2 г (0,0074 моль) 4-нитро-М-(4-этоксифе- нил)антраниловой кислоты. 6 мл тионилхло- рида, 25 мл бензола нагревают на водяной бане в течение 30 мин, отгоняют под вакуу- водоструйного насоса избыток тионил- хлорида. диоксид серы и хлористый зодород.
Получэнный хлорангидрид растворяют в 2б мл сухого диоксана и прибавляют 1 г (0,0074 мопь) 2-аминобензотиазола, растворенного в 15 мл сухого диоксана. Нагревают на водяной бане в течение 5 мин. По охлаждении продукт выливают в воду. Образуется маслообразное вещество, которое после отделения РОДЫ растворяют в ацетоне, и целе- Hoti продукт, ocaждзe . Ый .эфиром, кристп. 1Л113уют из водного этанола.
йыхсд: 1.51 г (47%). Т.пл. 182-184 С. М-434 v,,
Вы ;и( лано. %: С 60,82; N :.89: .S 7,38. Нййдено, %: С 60,04, N 1Я,,02; S 7,14.
C 2Hl8N 30.1
.52 (этилацстата-хлороформ 4:1).
КЬ-0,74 (пропанол: - хлороформ 1:1);
1К-спектр, см : 3260 (NH); 1640 (); -j95if;02)): 1480(NH); 1350 (N02).
Испытания соединения 1 на противови- руснунз активность.
Определение токсичности соединения 1 проводят в культурах фибробластов эмбри- скз человека (ФЭЧ) и Нер-2, для чего к пи- тагельной среде 199 добавляют различные количествз соединении 1, начиная с 5000 мкг, мл и на 1 мл среды. Наблюдения за культурой клето; «едут на протяжении четырех суто ;. с ежедневным просмотром. За максимальную переносимую дозу (МПД) .лытуемого соединения 1 принимают ко- 1мчестдо, не вызывающее дегенерации клеток. Рабочая доза (РД) 1/2 МПД. МПД соединении 1 50 мгг/мл.
Определение противовирусной актив- к РНК-содержащим вирусам Коксаки Л13 (Floies). Коксаки В4 (Pawers), ECHO 11 (Upsala). везикулярного стоматита (Indiana) проводят в культурах клеток ФЭЧ и Нер-2 в условиях одноциклового опыта (Tonew etal Ас1л virolohica 1982. 26.3. 130-136). При
смене среды в культуре клеток к 0.8 мл среды 1S9 добавляют РД исследуемого соединения 1 в обьеме 0,1 мл и 100 ТЦДзо/О, мл соответствующего тест-вируса. Каждый
опыт сопровождается контролем тест-вируса, взятого в той же дозе. Все пробирки с культурой клеток инкубируют при 37°С в течение одного цикла репродукции каждого тест-вируса. Затем после промораживания
при (-) 10°С проводят титрование проб общепринятым методом. Снижение титра вируса под влиянием соединения 1 на 2,0 Ig и более по сравнению с контролем оценивали как проявление антивирусной активности
испытуемого соединения. Исследование противогриппозной активности проводят в развивающихся куриных эмбрионах с использованием вируса гриппа А Виктория (35/72/H3N2).
Определение противовирусной активности к ДНК-содержащему вирусу простого герпеса 1 типа (штамм Л-2) проводят методом, аналогичным вышеописанному.
Для определения величины химиотерапевтического индекса (ХТИ) по отношению к вирусам, в эксперименте с которыми отмечается а 1тивирусное действие.
Тест-вирус в дозе 100 ТЦД50/1,о мл вносят в культуру клеток и инкубируют 1 ч при
37°С. Непосредственно после адсорбции вирус сливается, клетки отмываются средой 199, а S пробирки вносят среду поддержки, содержащую различные концентрации исследуемого препарата. Наблюдение ведут на
протяжении 72 ч с ежедневным просмотром. Отсутствие цитопатического действия вируса в опыте, при срабатывании его вкон- Tpn. ie, позволяет считать препарат в данной концентрации активным.
в результате установлено, что соединение 1 имеет МПД в культуре ФЭЧ и Нер-2 50 мкг/мл. Е рабочей дозе, равной 25 мкг/мл, задерживается репродукция вируса везикулярного стоматита на 2,0 Ig. Взятый в каче
стве эталонного препарата широкого
противовирусного спектра - рибамидил (МПД 550 мкг/мл, РД 25 мкг/мл) не влияет не репродукцию вируса везикулярного стоматита. Минимальная доза соеди0 нения тормозящая репродукцию вируса везикулярного стоматита 3,0 мкг/мл. Таким образом, ХТИ соединение 1 16.
Соединение 1 не влияет на репродукцию других тест-вирусов. Таким образом,
5 впервые установлена противовирусная активность соединения 1 в отношении вируса везикулярного стоматита. Обладая токсичностью, равной таковой у эталг)ьного препа- рата-рибамидила, соединение 1 обладает высокой эффективностью и типчительным
химиотерапевтическмм индексом. Учитывая отсутствие химиопрепаратов, эффективных в отношении рабдовирусов (куда входит, в частности, вирус бешенства), соединение 1 может быть использовано в экспериментальной терапии рабдовирусных инфекций.
Формула изобретения Q
Бензотиазолиламид 4-нитро- N -(4-эток- сифенил)антраниловой кислоты формулы
(56)Рубцов М.В.. Байчикоь А.Г. Синтетическое химико-фармацевтические препараты. М.: Медицина, 1971, с.328.
Жданов В.М. , Гайдамович И.С, Общая и частная вирусология. 1982. т.1. с.352.
проявляющий ность.
противовирусную актив
Изобретение касается бензотиазолип-заме- щенных соединений, в частности бензотиазопипа.-a.:-a.w-----.- ..L мида 4 -нитpo-N-(4-этoкcифcнил)aнтpaнl1ПOЗoй кислоты (БАК), который проявляет протисовирусчую активность, и может быть использовано в медицине Для выявления новой SKTMBHOCTW среди соединений указанного класса получен новый Б - К Синтез его ведут из 4-нитpo-N-(4-этoкcифeilил)aнтpг чилoвoй кислоты и тионилхлорида при чагренании с последующей обработкой 2-аминобг нзотиезолом Выход 74%. т.па 182-184°С. Испытания БАК показывают, что он тормозит репрсд хцию R .ipyca ccii ,- кулярного стоматита, имеет лу-:ший, чем рибач идил, химиотерапевтический индекс i-i может ouri:, не- лользован в терапии р.лбдовирусмых инфекций
Редактор Т.Шагова
Составитель З.Латыпова Техред М.Моргентал
Заказ 3466
ТиражПодписное
НПО Поиск Роспатента 113035. Москва. Ж-35. Раушская наб.. 4/5
Производственно-издательский комбинат Т1атент. г. Ужгород, ул.Гагарина. 101
Корректор М.Максимишинец
