Способ хроматографического разделения и анализа полярных липидов в тонком слое адсорбента Советский патент 1988 года по МПК G01N30/90 

00

со со

9д

а

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к тонкослойному хроматографическому разделению и анализу липидов.

Целью изобретения является повышение селективности и эффективности разделения при высокой относительной влажности воздуха.

На чертеже показана схема устрой- ства для осуществления предлагаемого способа.

Хроматографическая камера 1 представляет собой стеклянный цилиндр высотой 180 мм, внутренним диаметром 60 мм и толщиной стенки 2 мм. Крьш- ка 2 камеры состоит из двух притертых к верхнему обрезу камеры и друг к другу отрезков стекла, все притертые поверхности смазаны глицерином при предотвращения доступа в камеру влаги из окружающего воздуха. В крышке имеется отверстие, в котором ук- i реплена тефлоновая трубка 3 для внесения в камеру активирующего раство- рителя и подвижной фазы, трубка закрывается пробкой 4. Другое отверстие в крышке, закрываемое пробкой 5, предназначено для выхода газа из

камеры при внесении в нее жидкостей.

С дном камеры соприкасается нижний обрез хроматографической пластинки 6, содержащей закрепленный на гибкой фольге слой силикагеля размером ; 150-54 мм. Стартовые точки 7 пластин 1ки содержат разделяемую смесь вещест ;К пластинке с помощью зажимов при- ;креплена полоса фильтровальной бума- |ги 8, верхняя часть которой выходит через щель в крышке за пределы камеры.

Перед разделением в камеру через трубку 3 вносят 3 мл чистого и сухого диэтилового эфира на время внесения эфира пробку 5 извлекают из отверстия. При прохождении эфира по поверхности адсорбента 6 и фильтровальной бумаги 8 происходит активирование слоя адсорбента за счет непрерывного растворения эфиром содержащейся в адсорбенте воды и постоян- ного выноса ее из камеры. Сразу же после испарения эфира со дна камеры и с поверхности пластинки в камеру через трубку 3 вносят 20 мл подвижной фазы - смеси хлороформа, ме- танола и.,в одного раствора аммиака (ot 0,965) в соотношении 30:7:1 по объему, что приводит к началу разде

5 0 5

0

5 0

0 5

ления смеси веществ (полярных липи- , дов семян сои), которые в процессе активации тонкого слоя не элюирова- лись эфиром со стартовой точки вследствие его малой полярности. Через 2 ч после внесения подвижной фазы пластинку извлекают и окрашивают по стандартной методике.

В результате разделения смеси полярных липидов получены хромато- граммы N-ацилфосфатидилэтаноламина, фосфатидилэтаноламина, фосфатидилхо- лина, фосфатидилинозита.

В контрольных вариантах разделение проводили без предварительного активирования адсорбента эфиром. Разделение проводили при 40%-ной или 70%-ной относительной влажности воздуха в лаборатории, применяя подвижную фазу.

Видно, что при высокой влажности воздуха и без предварительного активирования слоя адсорбента эфиром разделение компонентов между собой практически не происходит. После про- ведения активирования по предложенному способу селективность разделения компонентов не отличается от достигаемой при низкой относительной влажности воздуха.

Способ может быть пригоден для разделения смесей не только липидов, но и любых других органических соединений, содержащих полярные функциональные группы.

Формула изобретения

1. Способ хроматографического раз-, деления и анализа полярных липидов в тонком слое адсорбента, включающий активирование адсорбента, нанесение пробы анализируемой смеси на слой адсорбента, разделение в потоке прдвижной фазы с постоянным удалением ее из верхней зоны тонкого слоя, отличающийся тем, что, с целью повьш1ения селективности и эффективности разделения при высокой относительной влажности воздуха, слой адсорбента активируют после нанесения на него пробы разделяемой смеси путем пропускания через него малополярного растворителя, не растворяющего липиды.

2,. Способ по п. 1, отличающий с я./ тем, что в качестве малополярного растворителя используют серкыА эфир.

Ф

8

D

Изобретение относится к аналитической -химии и к тонкослойному хро- матографическому разделению и анализу полярных ЛИПИДОВ. Целью изобретения является повышение селективности и эффективности разделения при высокой (более 50%) относительной влажности воздуха. Для этого слой адсорбента с нанесенной на него пробой разделяемой смеси активируют путем пропускания через него малополярного растворителя. Этот растворитель не растворяют и не смещают со стартовой точки компоненты анализируемой смеси. 1 з.п. ф-лы, 1 ил. ш (Л

.

.