Способ определения Na-соли 3-ацето-4-окси-6-метил-пиранона-2 в защитных покрытиях сыров Советский патент 1988 года по МПК G01N33/04 

со 01

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способу количественного определения Na-соли 3-ацето-4-окси-6-ме- тил-пиранона-2 (Na-соль дегидрацетовой кислоты или Na-соль ДГК) в верхних слоях сыра, созревшего в защитных покрытиях, содержащих в качестве консерванта Na-соль дегидрацетовой кислоты. Данные по количественному содержанию консерванта в верхних слоях сыра необходимы для санитарно-гигиенической оценки защитных покрытий и для рещения вопроса о возможности использования Na-соли дегидрацетовой кислоты в составе латексных покрытий для сыров.

Цель изобретения - повышение точности определения.

Способ осуществляют путем экстракции Na-соли дегидрацетовой кислоты из образца сыра подкисленным метанолом (рН 2-3) с последующим фильтрованием, концентрированием фильтрата путем отдувки метанола током азота и хроматографированием полученной эмульсии методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Хроматографирование проводят на обращенной октадецилфункциональной фазе (Cis) с подвижной фазой метанол-ацетатный буфер(рН 3,6) состава 80:20 и УФ детектированием (Ханалит. 310 нм.). В кзчестве подкисляющих агентов используют соляную, серную или уксусную кислоту.

Полученная после отдувки метанола эмульсия содержит, кроме определяемого объекта, другие компоненты сыра, которые элюируются раньше дегидрацетовой кислоты и не мещают ее определению. Время выхода на хроматограмме дегидрацетовой кислоты 4,6 мин.

Содержание Na-соли дегидрацетовой кислоты в сыре рассчитывают по формуле,%:

.3- 100

m- 1000

где а - массовая доля Na-соли ДГК, найденная по калибровочному графику, мг/см ;

m-масса навески сыра, г;

3 - объем анализируемой эмульсии, см .

Относительная ощибка определения составляет 4,5-12,5%.

Стандартные растворы готовят разведением метанольных растворов Na-соли ДГК подкисленными метанольными экстрактами из сыра, не содержащего анализируемой соли. Содержание Na-соли ДГК (мг/см) на хроматограмме определяют по высоте хроматографического пика (мм).

Пример 1. Навеску измельченного сыра массой 10,0000 г, не содержащего консерванта, смешивают с 0,5 см метанольного раствора, который содержит 0,1 мг Na-соли ДГК (0,033 мг/см эмульсии, 0,00099% от навески сыра). Полученную смесь обрабатывают двумя порциями (поЗОсм) подкисленного соляной кислотой метанола (рН 2-3) при встряхивании на магнитной мещалке в течение 60 мин. Экстракт фильтруют в градуированную пробирку и отдувают метанол током азота до объема 2,5-3,0 см. Доводят объем эмульсии в пробирке точно до 3 см метанолом. Эмульсию хроматографируют при следующих условиях работы прибора.

Колонка 30X0.4 см заполнена октадецилфункциональной фазой Cis; подвижная фаза 80% метанола -|- 20% ацетатного буферного раствора с рН 3,6; скорость подачи элюэнта 1 см /мин; детектор ультрафиолетовый А.аналит. 310 нм; чувствительность детектора 0,2; рабочее давление 70-90 атм; величина пробы, вводимой в хроматограф, 10 мкл.

m 10,0000 г; а 0,030 мг/см L 0,0009%; степень извлечения 90%; относительная ошибка определения 9,1%.

Пример 2. Навеску измельченного сыра массой 10,3620 г, не содержащего консерванта, смешивают с 1,00 см метанольного раствора, который содержит 0,2 мг Na-соли

ДГК (0,066 мг/смЬмульсии, 0,00191% от навески сыра). Навеску обрабатывают подкисленным серной кислотой метанолом до рН 2-3, метанольный экстракт концентрируют и хроматографируют в условиях примера 1.

m 19,3620 г; а 0,0630 мг/см L 0,00182%; степень извлечения 95,5%; относительная ошибка определения 4,55%. Пример 3. Навеску измельченного сыра массой 10,1500 г, не содержащего консерванта, смещивают с 2 см метанольного раствора, содержащего 0,4 мг Na-соли ДГК (0,132 мг/см эмульсии, 0,0039% от навески сыра), экстракцию, концентрирование и хро- матографирование проводят в условиях примера 1 с тем отличием, что в качестве подкисляющего агента используют уксусную кислоту.

m 10,1500 г; а 0,1400мг/см L 0,00414%; степень извлечения 106%; относительная ощибка определения 6%.

Пример 4. Навеску измельченного сыра массой 10,0000 г, не содержащего консерванта, смещивают с 0,25 см метанольного раствора, содержащего 0,05 мг Na-cGли ДГК (0,016 мг/см эмульсии, 0,00045% от навески сыра) экстракцию, концентрирование и хроматографирование эмульсии проводят в условиях примера 1.

01 10,0000 г; а 0,0140 мг/см ; L 0,00042%; степень извлечения 93,3%; относительная ошибка определения 12,5%. Пример 5. Навеску верхнего слоя сыра

массой 10,0000 г, созревшего в покрытии, содержащем 3% Na-соли дегидрацетовой кислоты, измельчают, экстрагируют двумя порциями подкисленного соляной кислотой

(рН 2-3) метанола, концентрируют фильтрат и хроматографируют полученную эмульсию в условиях примера 1.

Содержание Na-соли ДГК в процентах рассчитывают по известной формуле.

m 10,0000 г; а 0,0310 мг/см L 0,00094%.

В условиях примера 5 проведено 8 определений Na-соли дегидрацетовой кислоты в верхних слоях сыра.

Статистически обработанные результаты анализа при п 8 и р : 0,95 имеют следующий вид: L 0,00094%; S 0,000078%;L± 0,00094±0.00018; W 8,3,%.

Предлагаемый способ позволяет определять микрограммовые количества Na-соли дегидрацетовой кислоты, мигрирующей из покрытия в верхние слои сыра. Степень извлечения 90-106%, определяемый минимум 5 мг/кг сыра.

Использование подкисленного метанола в качестве экстрагента Na-соли ДГК из сыра и элюэнта при хроматографическом разде0

5

0

лении, а также приготовление анализируемого раствора в виде метанольной эмульсии позволяет значительно облегчить процесс извлечения Na-соли дегидрацетовой кислоты из сыра.

Способ рекомендован для санитарно-гигиенической оценки сыров, содержащих в защитных покрытиях в качестве консерванта Na-соль дегидрацетовой кислоты.

Формула изобретения

Способ определения Na-соли З-ацето-4- окси-6-метил-пиранона-2 в защитных покрытиях сыров, предусматривающий экстракцию ее из образца сыра и хроматографию экстракта, отличающийся тем, что, с целью повыщения точности определения, экстракцию проводят подкисленным метанолом при рН 2,0-3,0 с последующим фильтрованием экстракта, полученный фильтрат концентрируют путем отдувки метанола до получения однородной эмульсии.

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способу количественного определения Na-соли З-ацето-4окси-6-.метил-пиранона-2 (Na-соль дегидра- цетовой кислоты или Na-соль ДГК) в верхних слоях сыра, созревшего в заш.итных покрытиях, содержащих в качестве консерванта Na-соль дегидрацетовой кислоты. Цель изобретения - повышение точности определения. Способ определения микрограммовых количеств Na-соли 3-ацето-4-окси-6-метил-пира- нона-2 в сыре заключается в том, что образец измельченного сыра массой 10 г дважды обрабатывают подкисленным метанолом (рН 2-3), встряхивают в течение 60 мин на магнитной мешалке, отделяют от осадка и отдувают метанол током азота до объема 3 см . Аликвоту полученной эмульсии